miRNA-519d对卵巢癌的生长抑制作用及其对XIAP表达的影响 被引量：2

1

作者 杨婷 张卫霞 《实用癌症杂志》 2017年第10期1596-1599,共4页

目的探讨MicroRNA-519d(miRNA-519d)对卵巢癌细胞生长抑制的作用及其对XIAP表达的影响。方法对人卵巢癌细胞系OVCAR3瞬时转染miR-519d mimic(实验组)和NC(阴性对照组),不进行任何转染为空白对照组,转染48 h后进行MTT实验、流式细胞实验... 目的探讨MicroRNA-519d(miRNA-519d)对卵巢癌细胞生长抑制的作用及其对XIAP表达的影响。方法对人卵巢癌细胞系OVCAR3瞬时转染miR-519d mimic(实验组)和NC(阴性对照组),不进行任何转染为空白对照组,转染48 h后进行MTT实验、流式细胞实验、Transwell侵袭实验,观察卵巢癌细胞生长抑制状况,WB实验测定XIAP的表达变化。结果定量Real-time PCR检测显示:miR-519d的表达水平均较对阴性对照组与空白对照组有明显的增高(P<0.05)。MTT检测显示:上调OVCAR3细胞内miR-519d水平后,细胞增殖抑制率为(29.81±8.24)%,而阴性照组与空白对照组分别为(2.49±0.28)%和(1.98±0.34)%,对比差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测显示实验组OVCAR3细胞凋亡率为(8.33±1.39)%,而阴性对照组与空白对照组分别为(2.13±2.11)%和(1.89±1.08)%,对比差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell侵袭实验显示:转染miR-519dmimics后实验组、阴性对照组、空白对照组的三组的细胞转移能力对比无明显差异(P>0.05)。Western实验结果显示:处理后实验组的XIAP蛋白相对表达量为(0.98±0.34),阴性对照组为(7.54±1.22),空白对照组为(7.67±1.32),对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论增强miR-519d的表达能对卵巢癌细胞的增殖起抑制作用,并促进其凋亡,而对卵巢癌细胞的转移没有影响,能抑制XIAP的表达,表明miR-519d在卵巢癌的生长中起到一定的抑制作用。 展开更多

关键词 microrna-519d 卵巢癌 细胞增殖 细胞侵袭 XIAP

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lncRNA TTN-AS1通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭 被引量：3

2

作者 刘华 张素兰 +5 位作者 梁天嵩 王娟 赵静宜 郑颖娟 张相娴 杨道科 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1789-1795,共7页

目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金... 目的:观察肺腺癌组织中长链非编码RNA(lncRNA)TTN反义RNA 1(TTN-AS1)的表达情况,以及沉默TTN-AS1表达对肺腺癌A549细胞活力和侵袭的影响。方法:RT-qPCR法检测32例肺腺癌和癌旁正常组织中TTN-AS1、微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)和基质金属蛋白酶2(MMP2)的mRNA表达水平。将未转染的A549细胞设为空白组,转染si-NC的为si-NC对照组,转染沉默TTN-AS1表达的siRNA为si-lncRNA组(n=5),采用CCK8和Transwell方法检测沉默TTN-AS1表达对A549细胞活力和侵袭的影响。使用双萤光素酶报告基因实验、RNA免疫沉淀实验、RT-qPCR和Western blot测定TTN-AS1对miR-519d-3p和miR-519d-3p对MMP2的靶向调控作用。结果:32例肺腺癌组织中TTN-AS1的表达水平显著高于对应癌旁正常组织(P<0.05)。沉默A549细胞中TTN-AS1的表达可抑制细胞的活力和侵袭。TTN-AS1可通过海绵吸附的方式负调控miR-519d-3p的表达;MMP2是miR-519d-3p的靶基因,受其负调控。过表达MMP2可部分逆转沉默TTN-AS1和过表达miR-519d-3p对A549细胞侵袭的抑制作用。结论:肺腺癌组织中lncRNA TTN-AS1呈现高表达情况,它可能通过miR-519d-3p/MMP2调控肺腺癌A549细胞的活力和侵袭能力。 展开更多

关键词 肺腺癌 长链非编码RNA TTN反义RNA 1 微小RNA-519d-3p 细胞活力 细胞侵袭

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过表达microRNA-7对人肺癌95D细胞凋亡的影响 被引量：3

3

作者 陈超 廖珍媛 +3 位作者 李颖 李永菊 罗军敏 徐林 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期108-112,共5页

目的探讨过表达micro RNA-7对人肺癌95D细胞体内外凋亡的作用。方法将mi R-7真核表达载体(命名为p-mi R-7)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用TUNEL法观察95D细胞凋亡的变化;免疫荧光技术检测各组细胞磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白的表达;... 目的探讨过表达micro RNA-7对人肺癌95D细胞体内外凋亡的作用。方法将mi R-7真核表达载体(命名为p-mi R-7)体外瞬时转染人肺癌95D细胞,利用TUNEL法观察95D细胞凋亡的变化;免疫荧光技术检测各组细胞磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白的表达;建立人肺癌裸鼠模型,肿瘤局部注射p-mi R-7后利用TUNEL法检测肿瘤局部细胞凋亡变化,同时,免疫组织化学法检测凋亡相关的磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白的表达变化。结果体外转染p-mi R-7后可导致人肺癌细胞的凋亡(P<0.05)。同时,细胞中磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白水平显著增加(P<0.05);肿瘤局部注射p-mi R-7后,肿瘤局部mi R-7表达水平及细胞凋亡也明显增强(P<0.05),磷酸化Caspase3和Caspase9蛋白水平也显著增加。结论过表达mi R-7可以导致肿瘤细胞凋亡,这与凋亡相关蛋白Caspase3和Caspase9磷酸化水平增加有关。 展开更多

关键词 microrna-7 肺癌 细胞凋亡 95d细胞

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1,25-(OH)_2D_3抑制人卵巢癌细胞SKOV-3增殖与调控microRNA-22的表达有关 被引量：2

4

作者 高四海 张鹤美 +3 位作者 贺金奖 张增利 童建 李冰燕 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期35-39,共5页

目的通过观察1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖和microRNA-22和microRNA-21表达的影响,探讨microRNAs在1,25-(OH)2D3抗肿瘤增殖中的作用。方法以不同浓度1,25-(OH)2D3(10-9、10-8、10-7mol/L)处理SKOV-3细胞,CCK-8法检测细胞增殖率,real ti... 目的通过观察1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖和microRNA-22和microRNA-21表达的影响,探讨microRNAs在1,25-(OH)2D3抗肿瘤增殖中的作用。方法以不同浓度1,25-(OH)2D3(10-9、10-8、10-7mol/L)处理SKOV-3细胞,CCK-8法检测细胞增殖率,real time RT-PCR分析microRNA-22和microRNA-21的表达,流式细胞仪分析细胞周期,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 1,25-(OH)2D3对SKOV-3细胞增殖有明显的抑制作用,并且存在着时间剂量依赖关系(P<0.01)。1,25-(OH)2D3可以降低microRNA-22的表达水平(P<0.05),但是不影响microRNA-21的表达。细胞周期分析显示,1,25-(OH)2D3可以诱导SKOV-3细胞阻滞于G0/G1,浓度越高阻滞越明显(P<0.05)。1,25-(OH)2D3促进SKOV-3细胞核内DNA断裂点增加,细胞凋亡增加(P<0.05)。结论在SKOV-3细胞中,1,25-(OH)2D3可能是通过抑制microRNA-22,促进细胞凋亡,调节细胞周期,抑制细胞增殖,从而到达抑制肿瘤的作用。[营养学报,2014,36(1):35-39] 展开更多

关键词 1 25-(OH)2d3 SKOV-3细胞 microrna-22 microrna-21

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上调miR-519d对喉鳞癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3

5

作者 沈纳 白广平 +2 位作者 高天乐 黄新生 李俊 《中国临床医学》 2015年第5期582-585,共4页

目的：研究miR-519d对喉鳞癌细胞增殖及凋亡的调控作用。方法：采用RT-PCR、Western印迹等技术检测人喉癌上皮细胞株Hep-2及人支气管上皮细胞（human bronchial epithelium cell,HBE）中信号转导和转录激活子3（signal transducer and a... 目的：研究miR-519d对喉鳞癌细胞增殖及凋亡的调控作用。方法：采用RT-PCR、Western印迹等技术检测人喉癌上皮细胞株Hep-2及人支气管上皮细胞（human bronchial epithelium cell,HBE）中信号转导和转录激活子3（signal transducer and activator of transcription 3,STAT3）以及miR-519d的表达情况;通过质粒转染上调Hep-2细胞株中miR-519d的表达后,采用细胞增殖及凋亡检测技术观察转染细胞与对照细胞的增殖及凋亡情况。结果：STAT3 mRNA在Hep-2中的表达明显高于其在HBE细胞中的表达（P〈0.05）,而miR-519d在Hep-2中的表达明显低于其在HBE中的表达（P〈0.05）。STAT3在转染miR-519d后的Hep-2细胞中的表达明显下降（P〈0.05）。转染后继续培养0~7 d,转染后Hep-2细胞的增殖率明显低于未转染细胞（P〈0.05）。转染后继续培养24 h,转染miR-519d的细胞凋亡率为（2.80±0.15）%,对照细胞的凋亡率为（0.92±0.09）%（P=0.000 4）。转染后继续培养72 h,转染miR-519d的细胞凋亡率为（23.06±3.52）%,对照细胞的凋亡率为（23.26±2.56）%（P=0.965 5）。结论：STAT3在Hep-2细胞中高表达,而相关的miR-519d呈低表达,通过上调miR-519d可以抑制STAT3的表达从而抑制肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡。 展开更多

关键词 喉鳞癌 miRNA-519d STAT3 增殖 凋亡

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淫羊藿苷上调miR-519d表达抑制人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量：7

6

作者 李经纬 王诗卓 赵福杰 《解剖科学进展》 CAS 2015年第5期471-474,478,共5页

目的淫羊藿苷(Icariin)对人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其可能的机制。方法针对SKOV3细胞,给予Icariin不同浓度处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞增殖的变化;应用realtime PCR方法检测Icariin处理不同时间后mi R-519d在S... 目的淫羊藿苷(Icariin)对人SKOV3卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其可能的机制。方法针对SKOV3细胞,给予Icariin不同浓度处理不同时间后,采用CCK-8检测细胞增殖的变化;应用realtime PCR方法检测Icariin处理不同时间后mi R-519d在SKOV3细胞中的表达变化;利用Lipofect AMINE 2000将antimi R-519d以及其阴性对照质粒载体转染至SKOV3细胞,再给予Icariin,分别应用CCK-8法和Transwell小室法检测SKOV3细胞的增殖、迁移及侵袭能力变化。结果 Icarin显著抑制了SKOV3细胞的增殖,并且呈时间和剂量依赖;随时间变化,Icarin显著上调了mi R-519d在SKOV3细胞的表达水平;转染anti-mi R-519d后,Icarin的作用被阻断,SKOV3细胞的增殖,以及迁移、侵袭能力基本恢复。结论 mi R-519d参与了Icariin抑制SKOV3细胞的增殖,迁移和侵袭的调控过程。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 miR-519d 增殖 迁移 侵袭 SKOV3卵巢癌细胞

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麦冬皂苷D通过调控miR-519d-3p/EIF4E表达对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的实验研究 被引量：5

7

作者 申鹏 汪正飞 《世界华人消化杂志》 CAS 2019年第24期1473-1482,共10页

背景麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OPD)是中药麦冬提取物中重要的单体成分且具有抗癌作用,但是否具有抗肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)作用还未知.本研究假设OPD能够通过上调miR-519d-3p表达进而下调真核细胞翻译起始因子4E(eukar... 背景麦冬皂苷D(ophiopogonin D,OPD)是中药麦冬提取物中重要的单体成分且具有抗癌作用,但是否具有抗肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)作用还未知.本研究假设OPD能够通过上调miR-519d-3p表达进而下调真核细胞翻译起始因子4E(eukaryotic translation initiation factor 4E,EIF4E)表达发挥抗HCC作用.目的探讨OPD对HCC细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制.方法培养HCC细胞HepG2和MHCC97,不同浓度(2.5μmol/L、5μmol/L、10μmol/L)的OPD作用48 h后,四甲基噻唑蓝染色法(methylthiazoletrazolium,MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞中miR-519d-3p和EIF4E mRNA表达,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、p21、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9和EIF4E蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-519d-3p和EIF4E之间关系.转染miR-519d-3p mimics、si-EIF4E构建miR-519d-3p过表达或EIF4E表达抑制的HepG2和MHCC97细胞,RT-qPCR检测细胞中miR-519d-3p表达或Western blot检测EIF4E蛋白表达验证转染效率.MTT、Transwell、Western blot分别检测过表达miR-519d-3p或抑制EIF4E表达对HepG2和MHCC97细胞增殖、迁移和侵袭,及CyclinD1、p21、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响.结果与对照组比,OPD组HepG2细胞抑制率显著升高(P<0.05),迁移和侵袭数显著降低(P<0.05),HepG2细胞中CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白表达显著降低(P<0.05),p21蛋白表达显著升高(P<0.05),miR-519d-3p表达显著升高(P<0.05),EIF4E mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),且呈浓度依赖性.miR-519d-3p在HepG2细胞中靶向负调控EIF4E表达.miR-519d-3p过表达或抑制EIF4E表达均可抑制HepG2细胞增殖、迁移和侵袭.抑制miR-519d-3p表达部分逆转了OPD对HepG2细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.结论OPD可能通过调控miR-519d-3p/EIF4E表达抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭. 展开更多

关键词 肝癌 麦冬皂苷d miR-519d-3p EIF4E 细胞增殖 迁移 侵袭

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miR-519d在非小细胞肺癌脑转移中的作用及机制 被引量：2

8

作者 苏莹 马丽丽 +1 位作者 柳江 韩忠诚 《局解手术学杂志》 2024年第11期974-979,共6页

目的探究miR-519d在非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移(BM)中的作用及其机制。方法采用RT-PCR检测miR-519d在伴有BM的NSCLC患者和无BM的患者癌旁正常肺组织、NSCLC肺组织、NSCLC脑组织,人NSCLC细胞系(SK-MES-1、NCI-H226、NCIH1299和NCL-H820)... 目的探究miR-519d在非小细胞肺癌(NSCLC)脑转移(BM)中的作用及其机制。方法采用RT-PCR检测miR-519d在伴有BM的NSCLC患者和无BM的患者癌旁正常肺组织、NSCLC肺组织、NSCLC脑组织,人NSCLC细胞系(SK-MES-1、NCI-H226、NCIH1299和NCL-H820)、正常人支气管上皮细胞(HBECs)、人脑微血管内皮细胞(HBMECs)及正常人星形胶质细胞(NHA)中的表达。将过表达miR-519d慢病毒(OE-miR-519d-LV)或空载体慢病毒(NC-LV)转染至NSCLC细胞系NCI-H1299中,作为OE-miR-519d-LV组和NC-LV组;联合转染OE-miR-519d-LV与pcDNA3.1-HER3的细胞作为OE-miR-519d-LV+pcDNA3.1-HER3组。将OE-miR-519d-LV组和NC-LV组细胞经心脏注射至裸鼠体内,以构建伴BM的NSCLC动物模型,并按注射细胞的不同将小鼠分为Ctrl组与miR-519d组。使用生物发光成像系统观察NCI-H1299细胞在小鼠大脑中的转移情况。CCK-8法检测OE-miR-519d-LV组和NC-LV组中NCI-H1299细胞的增殖情况。采用HBMECs和NHA包被的Transwell小室,以建立体外血脑屏障(BBB)细胞模型,并检测OE-miR-519d-LV组和NC-LV组NCI-H1299细胞跨内皮细胞的迁移能力。Western blot检测各组细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。生物信息学技术分析miR-519d与HER3的潜在结合位点,双荧光素酶基因报告实验验证两者的靶向调控关系。结果与癌旁正常肺组织相比,miR-519d在NSCLC肺组织和NSCLC脑组织中的表达降低(P<0.05);与NSCLC肺组织相比,NSCLC脑组织中miR-519d表达降低(P<0.05)。与HBECs相比,miR-519d在NSCLC细胞系中的表达降低(P<0.05),且miR-519d在NCI-H1299、NCI-H226和NCL-H820细胞中的表达水平低于SK-MES-1细胞(P<0.05)。与Ctrl组裸鼠相比,miR-519d组裸鼠的BM发生率更低,生存时间更长,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC-LV组细胞相比,OE-miR-519d-LV组NCI-H1299细胞增殖活力、跨内皮细胞迁移能力及MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表达降低(P<0.05),而E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。miR-519d可靶向调控HER3蛋白表达。与OE-miR-519d-LV组相比,OE-miR-519d-LV+pcDNA3.1-HRE3组细胞的迁移能力升高(P<0.05),MMP-2、MMP-9、N-cadherin和Vimentin蛋白表升高(P<0.05),而E-cadherin表达降低(P<0.05)。结论miR-519d在伴有BM的NSCLC中表达水平降低,上调其表达可通过靶向调控HER3来抑制肿瘤的BM。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 miR-519d 人表皮生长因子受体3 脑转移

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HOTAIR通过靶向抑制miR-519d促进人卵巢癌SKOV3细胞增殖 被引量：3

9

作者 李经纬 王诗卓 赵福杰 《解剖科学进展》 2015年第6期609-613,共5页

目的研究HOTAIR对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响以及可能机制。方法使用Lipofectamine TM2000试剂将HOTAIR过表达慢病毒载体以及HOTAIR沉默慢病毒载体分别稳定转染SKOV3卵巢癌细胞后,应用Realtime PCR验证其转染效率;应用CCK-8法检测HOT... 目的研究HOTAIR对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响以及可能机制。方法使用Lipofectamine TM2000试剂将HOTAIR过表达慢病毒载体以及HOTAIR沉默慢病毒载体分别稳定转染SKOV3卵巢癌细胞后,应用Realtime PCR验证其转染效率;应用CCK-8法检测HOTAIR对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响;应用Real-time PCR检测人SKOV3卵巢癌细胞中miR-519dm RNA表达变化。应用双荧光素酶报告基因验证HOTAIR和miR-519d存在靶向结合并明确其结合位点。结果和对照组相比,HOTAIR过表达显著促进了人卵巢癌SKOV3细胞的增殖,极大降低了miR-519d在SKOV3细胞中的m RNA水平;HOTAIR和miR-519d存在靶向结合,并明确了其结合位点;miR-519d过表达显著抑制了人卵巢癌SKOV3细胞增殖能力;miR-519d过表达有效阻断了HOTAIR促进SKOV3细胞增殖的作用。结论 HOTAIR能够通过靶向抑制miR-519d,提高人卵巢癌SKOV3细胞的增殖能力。 展开更多

关键词 HOTAIR miR-519d 增殖 人卵巢癌SKOV3细胞

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miR-519d/Twist1轴介导BrMC抑制SMMC-7721源性肝癌干样细胞体外致癌能力

10

作者 罗祎敏 曹晓诚 +4 位作者 李翔 崔迎红 许畅 陈阿 曹建国 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1005-1012,共8页

目的探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)是否通过上调miR-519d,下调Twist1表达,进而抑制SMMC-7721源性肝癌干样细胞(liver cancer stem cell-like cells,LCSLCs)体外致癌能力。方法用球培养法从SMMC-7721细胞系得... 目的探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(8-bromo-7-methoxychrysin,BrMC)是否通过上调miR-519d,下调Twist1表达,进而抑制SMMC-7721源性肝癌干样细胞(liver cancer stem cell-like cells,LCSLCs)体外致癌能力。方法用球培养法从SMMC-7721细胞系得到第2代球细胞,命名为LCSLCs。不同浓度BrMC(1.0、3.0、10.0μmol·L^(-1))处理LCSLCs,实时定量PCR检测miR-519d表达水平;球形成和琼脂集落形成实验评价体外致癌能力;荧光素酶报告基因实验和Western blot分析Twist1转录活性和蛋白表达;miR-519d模拟物或Twist1基因转导探讨BrMC作用的分子机制。结果与SMMC-7721细胞比较,LCSLCs的miR-519d低表达,而Twist1蛋白高表达。BrMC(1.0、3.0、10.0μmol·L^(-1))浓度依赖性降低LCSLCs球形成和琼脂集落形成率;并上调miR-519d表达、下调Twist1蛋白表达。荧光素酶报告基因实验证实,miR-519d可以直接靶向Twist1 mRNA 3'非翻译区,并调节蛋白表达。miR-519d模拟物增强BrMC(3.0μmol·L^(-1))的作用,然而,Twist1基因转导有效逆转BrMC(3.0μmol·L^(-1))的效应。结论 BrMC通过调节miR-519d/Twist1信号轴,抑制SMMC-7721源性LCSLCs体外致癌能力。 展开更多

关键词 肝细胞癌 肿瘤干细胞 8-溴-7-甲氧基白杨素 治疗作用 miR-519d TWIST1

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miR-519d-3p靶向TROAP调节Wnt/β-Catenin信号通路对非小细胞肺癌增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响 被引量：3

11

作者 邱琦 吴展陵 +2 位作者 邓科兰 厉银平 刘桂霞 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第10期1571-1578,共8页

目的:探究微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)是否靶向肌钙蛋白相关蛋白(TROAP)调节Wnt/β-Catenin信号通路影响非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。方法:RT-qPCR评估miR-519d-3p和TROAP mRNA表达;双荧光素酶分析miR-519d-3p与T... 目的:探究微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)是否靶向肌钙蛋白相关蛋白(TROAP)调节Wnt/β-Catenin信号通路影响非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭。方法:RT-qPCR评估miR-519d-3p和TROAP mRNA表达;双荧光素酶分析miR-519d-3p与TROAP之间的靶向关系;Western blotting检测TROAP、β-Catenin、Axin2、C-myc的蛋白表达;集落形成实验、流式细胞术和Transwell法检测A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭;BABL/c裸鼠建立移植瘤模型,检测miR-519d-3p对体内肿瘤生长的影响。结果:miR-519d-3p与TROAP存在靶向关系(P<0.05);在体外,miR-519d-3p过表达可抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭,并促进细胞凋亡。此外,miR-519d-3p过表达可下调TROAP表达并降低β-Catenin、Axin2、C-myc蛋白水平(P<0.05);TROAP过表达对A549细胞的作用与之相反(P<0.05)。同时,过表达TROAP可部分逆转miR-519d-3p过表达对A549细胞恶性行为的影响(P<0.05)。在体内,miR-519d-3p过表达可减小肿瘤体积和肿瘤重量,且显著下调Ki67和N-cadherin表达(P<0.05)。结论:miR-519d-3p靶向TROAP抑制Wnt/β-Catenin信号通路,抑制NSCLC恶性生物学行为。 展开更多

关键词 微小RNA-519d-3p 肌钙蛋白相关蛋白 非小细胞肺癌 WNT/Β-CATENIN信号通路

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镧系配合物固载亚甲基蓝为信号标签及3D DNA步行器构建传感器用于microRNA-141检测 被引量：4

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作者 文燕 邹晓川 +1 位作者 王存 钟玲 《分析试验室》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第7期826-833,共8页

MicroRNA-141作为重要的肿瘤标志物,其灵敏检测对癌症的早期诊断和预后评估具有重要意义。基于镧系配合物固载亚甲基蓝为信号标签及三维(3D)DNA步行器信号放大策略,建立了一种microRNA-141生物传感器。首先合成稻草状镧系配合物(Ce-COP... MicroRNA-141作为重要的肿瘤标志物,其灵敏检测对癌症的早期诊断和预后评估具有重要意义。基于镧系配合物固载亚甲基蓝为信号标签及三维(3D)DNA步行器信号放大策略,建立了一种microRNA-141生物传感器。首先合成稻草状镧系配合物(Ce-COP)。该Ce-COP具有大的比表面积,可以固载大量的纳米金(AuNPs)和亚甲基蓝(MB)信号分子。其次设计3D DNA步行器,通过机器的高效运转,可将痕量目标microRNA-141转化为大量二级目标物,显著放大传感器的信号。随着目标物浓度增加,传感器电化学信号逐渐增大,microRNA-141在100 amol/L~100 nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为33 amol/L。该传感器表现出好的稳定性和选择性,健康人血清样品中microRNA-141的加标回收实验结果符合要求。该方法为各种癌症标志物的高灵敏检测提供了一定的参考和借鉴。 展开更多

关键词 镧系配合物 亚甲基蓝 3d dNA步行器 microrna-141 生物传感器

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microRNA-30d/Runx2影响大鼠牙周辅助加速成骨正畸治疗模型成骨活性的研究 被引量：3

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作者 郝鑫 张媛媛 +2 位作者 陈菊芳 刘明瑾 田玉楼 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期965-969,共5页

目的检测大鼠牙周辅助加速成骨正畸治疗(PAOO)模型牙槽骨组织中microRNA-30d/Runx2等成骨相关因子的表达情况,探讨其在加速牙齿移动过程中的作用和机制。方法将21只大鼠随机分为传统牙齿移动组(TM组,n=9)、PAOO牙齿移动组(PAOO+TM组,n=9... 目的检测大鼠牙周辅助加速成骨正畸治疗(PAOO)模型牙槽骨组织中microRNA-30d/Runx2等成骨相关因子的表达情况,探讨其在加速牙齿移动过程中的作用和机制。方法将21只大鼠随机分为传统牙齿移动组(TM组,n=9)、PAOO牙齿移动组(PAOO+TM组,n=9)、空白对照组(n=3)。TM组和PAOO+TM组将NiTi拉簧固定于上颌中切牙和第一磨牙之间,对第一磨牙施加向近中移动的50 g正畸力值;空白对照组大鼠未安装正畸加力装置。加力3、7、14 d,后提取上颌第一磨牙周围牙槽骨组织RNA,通过实时定量荧光PCR检测Runx2及microRNA-30d。结果 TM组和PAOO+TM组Runx2表达升高,且在各检测时间点表达水平不一致。结论 PAOO通过增高microRNA-30d/Runx2表达水平,降低成骨合成代谢速率,加快正畸牙齿移动速度。 展开更多

关键词 牙周辅助加速成骨正畸治疗 RUNX2 microrna-30d

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miR-519d在结肠癌细胞系中的表达及对其增殖、凋亡和侵袭的影响 被引量：1

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作者 杜天明 严群 +1 位作者 王向阳 王辉 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期612-617,共6页

目的观察miR-519d在结肠癌细胞系中的表达,及对结肠癌细胞系增殖、凋亡及侵袭的影响,并探索其机制。方法通过实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测人正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460和结肠癌细胞系HCT116、SW620、LOVO、HT29中miR-519d的表... 目的观察miR-519d在结肠癌细胞系中的表达,及对结肠癌细胞系增殖、凋亡及侵袭的影响,并探索其机制。方法通过实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测人正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460和结肠癌细胞系HCT116、SW620、LOVO、HT29中miR-519d的表达差异。将结肠癌细胞系SW620分为3组,即miR-519d过表达组(miR-519d组)、阴性对照组(miR-NC组)及空白对照组(Blank组),采用Lipofetamine^(TM) 3000分别转染miR-519d mimics及阴性对照序列(Scramble),Blank组仅给予空白对照。采用MTT法测定细胞增殖能力,采用PI/AnnexinⅤ-FITC双染和流式细胞术测定细胞凋亡能力,采用Transwell法测定细胞侵袭能力。蛋白印迹法测定信号转导及转录激活因子3(STAT3)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的表达变化。结果结肠癌细胞系HCT116、SW620、LOVO和HT29的miR-519d相对表达量均低于正常结肠黏膜上皮细胞系NCM460(均P<0.05)。转染24 h后,miR-519d组miR-519d相对表达量高于miR-NC组(t=43.060,P<0.01),Blank组与miR-NC组差异无统计学意义。MTT实验显示,细胞铺板72 h及96 h时miR-519d组细胞增殖能力明显低于miR-NC组(均P<0.05),Blank组与miR-NC组差异无统计学意义。miR-519d组细胞凋亡率高于miR-NC组[(23.65±1.23)%vs.(4.96±0.63)%,P=0.002],miR-NC组与Blank组细胞凋亡率差异无统计学意义。miR-519d组侵袭细胞数少于miR-NC组[(55±8)vs.(137±14),P=0.003],Blank组与miR-NC组侵袭细胞数差异无统计学意义。miR-519d组XIAP蛋白相对表达量低于miR-NC组[(0.32±0.04)vs.(1.0±0.05),P<0.01],Blank组与miR-NC组XIAP蛋白表达量差异无统计学意义。miR-519d组STAT3蛋白相对表达量低于miR-NC组[(0.44±0.04)vs.(1.05±0.07),P<0.01],Blank组与miR-NC组STAT3蛋白表达量差异无统计学意义。结论miR-519d过表达可抑制结肠癌细胞增殖及侵袭,并促进其凋亡,其作用机制可能与STAT 3和XIAP蛋白表达下调有关。 展开更多

关键词 miR-519d 结肠癌 增殖 凋亡 STAT3 X连锁凋亡抑制蛋白

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1,25（OH）2D3干预糖尿病肾病模型大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1的变化 被引量：12

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作者 刘玥彤 王琴 +2 位作者 杨烨 朱筠 阿布力克木·吐尔地 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第2期248-253,共6页

背景:1,25(OH)2D3在糖尿病肾病的发展过程中发挥着重要调节作用。目的:探索1,25(OH)2D3对糖尿病肾病大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1表达的影响作用。方法:实验方案经新疆医科大学动物实验中心动物实验伦理委员会批准。将2... 背景:1,25(OH)2D3在糖尿病肾病的发展过程中发挥着重要调节作用。目的:探索1,25(OH)2D3对糖尿病肾病大鼠肾脏组织MicroRNA-130b及转化生长因子β1表达的影响作用。方法:实验方案经新疆医科大学动物实验中心动物实验伦理委员会批准。将25只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组、糖尿病肾病+花生油组,后2组分别给予骨化三醇(即1,25(OH)2D3,活性维生素D3)0.03μg/(kg?d)治疗、花生油对照处理。37 d后采集标本,以实时聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western blot及免疫组织化学方法检测大鼠肾脏组织转化生长因子β1的表达;RT-PCR检测MicroRNA-130b的表达;采用苏木精-伊红及Masson染色对大鼠肾脏形态结构及纤维化程度进行分析。结果与结论:①RT-PCR结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组及糖尿病肾病+花生油组MicroRNA-130b的表达明显低于正常对照组(P<0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组明显高于糖尿病肾病+花生油组(P<0.01);②RT-PCR、Western blot、免疫组织化学及病理结果显示,糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组及糖尿病肾病+花生油组转化生长因子β1 mRNA和蛋白的表达、大鼠肾脏组织结构紊乱及纤维化程度明显高于正常对照组(P<0.01),糖尿病肾病+1,25(OH)2D3组明显低于糖尿病肾病+花生油组(P<0.01);③结果说明,糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b表达水平下降,转化生长因子β1 mRNA及蛋白表达水平升高,肾脏组织结构紊乱及纤维化程度严重;1,25(OH)2D3可上调糖尿病肾病大鼠肾脏MicroRNA-130b的表达水平,同时还可下调糖尿病肾病大鼠肾脏转化生长因子β1的表达水平,改善肾脏组织结构紊乱及纤维化程度。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 SPF级Sd大鼠 链脲佐菌素 肾脏纤维化 1 25(OH)2d3 microrna-130b 转化生长因子Β1

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LncRNA BLACAT1通过抑制miR-519d促进宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭 被引量：3

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作者 郭改艳 舒丽莎 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第21期4784-4788,共5页

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)BLACAT1通过调控miR-519d对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法收集宫颈癌组织及癌旁组织样本和宫颈癌细胞系,采用RT-PCR检测宫颈癌组织和细胞中LncRNA BLACAT1的表达水平。在HeLa细胞中转染NC shRNA... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)BLACAT1通过调控miR-519d对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法收集宫颈癌组织及癌旁组织样本和宫颈癌细胞系,采用RT-PCR检测宫颈癌组织和细胞中LncRNA BLACAT1的表达水平。在HeLa细胞中转染NC shRNA、BLACAT1 shRNA敲降其表达,RT-PCR检测转染效率及miR-519d表达,CCK-8检测转染24、48、72 h的细胞活力变化。Transwell检测细胞迁移与侵袭能力。Western印迹检测E-钙黏蛋白(cadherin)、N-cadherin和波形蛋白(Vimentin)蛋白水平。采用双荧光素酶报告基因检测LncRNA BLACAT1与miR-519d靶向调控关系。结果LncRNA BLACAT1在宫颈癌组织及细胞中显著高表达(P<0.05)。敲降LncRNA BLACAT1显著抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。敲降LncRNA BLACAT1显著抑制增加E-cadherin蛋白表达,显著降低N-cadherin和vimentin蛋白表达(P<0.05)。RT-PCR和双荧光素酶报告基因证实LncRNA BLACAT1与miR-519d之间靶向负调控关系。结论LncRNA BLACAT1通过抑制miR-519d促进宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭和上皮间质转化,为临床宫颈癌早期诊断和治疗提供潜在的分子靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌 LncRNA BLACAT1 增殖 迁移 侵袭 miR-519d

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MiR-519d靶向调控OCT4抑制膀胱癌细胞系5637增殖 被引量：1

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作者 戴劲 肖巍 +2 位作者 袁晓奕 陈志强 叶章群 《临床泌尿外科杂志》 2014年第2期163-166,共4页

目的:探讨miR-519d对膀胱癌细胞系5637增殖的影响及分子机制。方法:通过转染miRNA mimics在膀胱癌细胞系5637中过表达miR-519d,分别利用MTS及细胞集落形成试验,检测膀胱癌细胞系5637增殖能力的改变。通过双荧光素酶报道实验和Western B... 目的:探讨miR-519d对膀胱癌细胞系5637增殖的影响及分子机制。方法:通过转染miRNA mimics在膀胱癌细胞系5637中过表达miR-519d,分别利用MTS及细胞集落形成试验,检测膀胱癌细胞系5637增殖能力的改变。通过双荧光素酶报道实验和Western Blot方法验证miR-519d对OCT4的靶向调控。利用OCT4特异性干扰RNA证实miR-519d通过靶向调控OCT4抑制膀胱癌细胞系5673增殖。结果:在膀胱癌细胞系过表达miR-519d后,细胞活性、增殖能力明显下降;双荧光素酶报道实验结果表明,相对于各对照组,共转染OCT4 3'UTR载体与miR-519d组荧光素酶相对活性明显降低(P<0.05)。过表达miR-519d后5637细胞中OCT4蛋白表达下调。利用siRNA特异性下调OCT4表达后,5637细胞活性及增殖能力同样受到抑制。结论:miR-519d能靶向结合OCT4 3'UTR序列,通过下调OCT4的表达抑制膀胱癌细胞系5637的增殖。 展开更多

关键词 miR-519d OCT4 膀胱癌 增殖

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microRNA519D与基质金属蛋白酶2在36例子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义 被引量：2

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作者 张炜悦 李亚光 +3 位作者 刘恩令 王伟杰 魏靖文 荆楠 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2020年第1期54-59,共6页

目的探讨microRNA519D(miR-519d)及基质金属蛋白酶2(MMP2)在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达。方法采用实时定量PCR、免疫组化及Western blotting技术检测于2018年11月至2019年5月行剖宫产的16例子痫前期孕妇(PE组)、20例子痫前期重... 目的探讨microRNA519D(miR-519d)及基质金属蛋白酶2(MMP2)在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达。方法采用实时定量PCR、免疫组化及Western blotting技术检测于2018年11月至2019年5月行剖宫产的16例子痫前期孕妇(PE组)、20例子痫前期重度孕妇(PE重度组)和35例正常孕妇(对照组)胎盘组织中miR-519d与MMP2的表达。结果对照组、PE组及PE重度组胎盘组织中miR-519d的表达量分别为0.992±0.092、1.550±0.119、2.698±0.278,3组中miR-519d表达差异有统计学意义(F=638.245,P<0.001);经过两两比较,各组间miR-519d表达差异有统计学意义(PE组vs对照组,T=18.226,P<0.001;PE重度组vs对照组,T=26.588,P<0.001;PE组vs PE重度组,T=16.636,P<0.001)。对照组、PE组及PE重度组胎盘组织中MMP2蛋白的表达量分别为0.844±0.047、0.458±0.039、0.273±0.012,3组中MMP2表达差异有统计学意义(F=1552.203,P<0.001);经过两两比较,各组间MMP2表达差异均有统计学意义(PE组vs对照组,T=28.823,P<0.001;PE重度组vs对照组,T=68.189,P<0.001;PE组vs PE重度组,T=18.442,P<0.001)。分析显示MMP2和miR-519d表达呈负相关(r=-0.907,P<0.001)。结论miR-519d在PE患者胎盘组织中表达升高,MMP2在PE患者胎盘组织中表达降低,且随病情程度加重,下降更明显,两者可能共同参与PE的发病过程。 展开更多

关键词 子痫前期 胎盘 基质金属蛋白酶2 microRNA519d

原文传递

miR-519d-3p通过调控Toll样受体4/核因子-κB信号通路对前列腺癌细胞的影响机制研究 被引量：1

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作者 程耿 张朝阳 +2 位作者 万莉 杨军 周舰 《中国性科学》 2023年第1期39-43,共5页

目的 探讨通过微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对前列腺癌细胞的机制研究。方法 于2021年6月购买前列腺癌细胞株PC3,培养至对数时期,随机分为对照组、下调miR-519d-3p组、上调miR-519d-3... 目的 探讨通过微小RNA-519d-3p(miR-519d-3p)调控Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路对前列腺癌细胞的机制研究。方法 于2021年6月购买前列腺癌细胞株PC3,培养至对数时期,随机分为对照组、下调miR-519d-3p组、上调miR-519d-3p组。采用聚合酶链反应检测miR-519d-3p表达情况,对比干预24h、48h、72h细胞增殖、细胞迁移、侵袭率;检测细胞TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达状况。结果 与对照组相比,下调miR-519d-3p组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移数、miR-519d-3p表达量、B淋巴细胞瘤-2基因/Bcl-2相关X基因(Bcl-2/Bax)、TLR4/β-actin、NF-κB/β-actin蛋白表达量上升,细胞凋亡率下降(P<0.05);与下调miR-519d-3p组相比,上调miR-519d-3p组细胞增殖率、细胞侵袭数、迁移数、miR-519d-3p表达量、Bcl-2/Bax、TLR4/β-actin、NF-κB/β-actin蛋白表达量降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论 上调miR-519d-3p可抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,其作用机制可能与TLR4/NF-κB信号通路相关。 展开更多

关键词 微小RNA-519d-3p TLR4/NF-κB信号通路 前列腺癌 细胞凋亡 细胞侵袭

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