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miR-376c-5p靶向PIK3CA对前体脂肪细胞脂肪沉积的影响
1
作者 宋湘怡 曹行 +1 位作者 刘武军 蒋琳 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期4914-4924,共11页
旨在通过探究miR-376c-5p与PIK3CA的靶向关系,揭示miR-376c-5p对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响,探索与脂肪分化相关的miR-376c-5p在脂肪生长分化过程中的作用及可能的调控机制。本课题组前期挑选了相同饲养条件下健康的6只3岁巴什拜羊(... 旨在通过探究miR-376c-5p与PIK3CA的靶向关系,揭示miR-376c-5p对3T3-L1前体脂肪细胞分化的影响,探索与脂肪分化相关的miR-376c-5p在脂肪生长分化过程中的作用及可能的调控机制。本课题组前期挑选了相同饲养条件下健康的6只3岁巴什拜羊(大尾型)和6只野生盘羊×巴什拜羊F2代绵羊(小尾型)收集其尾部脂肪组织,通过对尾部脂肪的测序数据分析结果,筛选出差异表达的miR-376c-5p。并构建miR-376c-5p mimic过表达载体进行转染,通过qPCR检测PIK3CA、成脂分化标志基因的表达情况;结合油红O染色和bodipy染色检测成脂能力。分析miR-376c-5p在不同物种中的保守性,利用生物信息学软件预测miR-376c-5p的靶基因PIK3CA及其之间的结合位点和双荧光素酶报告试验验证miR-376c-5p与PIK3CA之间的靶向关系。与mimic NC组相比,过表达miR-376c-5p后,qPCR结果显示分化成脂标志基因(PPARγ、ADIPOQ、ACACA、FASN)的mRNA表达水平均极显著下调(P<0.001),油红O和Bodipy结果均显示,过表达miR-376c-5p后,脂滴生成减少,说明过表达miR-376c-5p抑制了3T3-L1前体脂肪细胞的成脂分化。通过预测发现miR-376c-5p与PIK3CA 3′UTR区存在结合位点,双荧光素酶报告基因分析显示,过表达miR-376c-5p显著抑制了含有PIK3CA 3′UTR片段载体的荧光活性(P<0.05);过表达miR376c-5p也会显著抑制候选靶基因PIK3CA mRNA的表达量(P<0.05)。以上结果说明miR-376c-5p可能通过靶向PIK3CA抑制脂肪生成,研究结果为miRNA在分子水平上的研究提供了一定的理论依据。 展开更多
关键词 miR-376c-5p pIK3CA 脂肪沉积
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Linc00152靶向miR-376c-3p对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响 被引量：6
2
作者 刘晓娟 王静 +2 位作者 张娟 高月月 王虹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期67-74,共8页
目的:探讨长链非编码RNA Linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立Linc00152... 目的:探讨长链非编码RNA Linc00152对宫颈癌细胞活力、凋亡和放射敏感性的影响及作用机制。方法:RT-qPCR检测宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞以及正常宫颈细胞Ect1/E6E7中Linc00152与微小RNA-376c-3p(miR-376c-3p)的表达水平。建立Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达的宫颈癌HeLa细胞系,MTT法、流式细胞术、集落形成实验和Western blot分别检测Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达对宫颈癌HeLa细胞的活力、凋亡、放射敏感性及相关蛋白表达的影响。双萤光素酶报告基因实验验证Linc00152与miR-376c-3p的调控关系。结果:与Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌HeLa细胞和SiHa细胞中的Linc00152表达上调,miR-376c-3p表达下调(P<0.05)。Linc00152低表达或miR-376c-3p过表达均可抑制HeLa细胞的活力,并诱导其凋亡,增强其放射敏感性,抑制cyclin D和Bcl-2蛋白表达,促进P21和Bax蛋白表达(P<0.05)。Linc00152在HeLa细胞中负向调控miR-376c-3p的表达,抑制miR-376c-3p表达可逆转Linc00152低表达对HeLa细胞活力、凋亡和放射敏感性的作用。结论:宫颈癌细胞中Linc00152高表达;Linc00152通过靶向调控miR-376c-3p影响HeLa细胞的生长、凋亡和放射敏感性,是宫颈癌潜在的诊治靶点。 展开更多
关键词 宫颈癌 Linc00152 微小RNA-376c-3p 细胞活力 细胞凋亡 放射敏感性
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miRNA-376c-3p调控CASP-7表达抑制人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞生长和迁移 被引量：5
3
作者 张林 李瑾 +1 位作者 张小敏 肖军 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2017年第2期231-236,共6页
目的:探讨miRNA-376c-3p(miR-376c-3p)对人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞迁移、增殖和凋亡的影响及其可能的调控机制。方法:qRT-PCR法检测13例胃间质瘤患者肿瘤和癌旁对照组织中miR-376c-3p表达;将miR-376c-3p类似物(mimic)、抑制物(inhibit... 目的:探讨miRNA-376c-3p(miR-376c-3p)对人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞迁移、增殖和凋亡的影响及其可能的调控机制。方法:qRT-PCR法检测13例胃间质瘤患者肿瘤和癌旁对照组织中miR-376c-3p表达;将miR-376c-3p类似物(mimic)、抑制物(inhibitor)和各自阴性对照分别转染GIST-T1细胞,另设空白对照组;qRT-PCR检测转染细胞miR-376c-3p表达;然后用CCK8检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移能力;通过Western Blot及qRT-PCR法检测miR-376c-3p对CASP-7(Caspase-7)表达量的影响。结果:在胃间质瘤患者癌组织中,miR-376c-3p表达水平显著降低,为癌旁对照组织的58.7%(P<0.01);qRT-PCR显示:转染miR-376c-3p mimic后,GIST-T1细胞miR-376c-3p表达明显上调(P<0.01),而转染miR-376c-3p inhibitor后表达受抑制(P<0.01);miR-376c-3p mimic转染组细胞增殖活性、迁移能力明显抑制(P<0.01),凋亡率增强(P<0.05);另外miR-376c-3p过表达后CASP-7mRNA和蛋白水平出现上调,相反地,miR-376c-3p抑制却导致CASP-7mRNA和蛋白水平下调(P<0.05)。结论:在人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞中miR-376c-3p可以间接调控CASP-7的表达,抑制细胞增殖、迁移能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-376c-3p 胃肠道间质瘤 CASpASE-7 增殖 凋亡 迁移
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miR-376c-3p通过靶向谷氨酸受体相互作用蛋白1影响乳腺癌细胞的增殖和迁移 被引量：7
4
作者 王超 高雨婷 +5 位作者 刘子瑶 李涛 王晶哲 刘璐 谢岩 孙晓春 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2021年第5期380-385,共6页
目的:探讨miR-376c-3p在乳腺癌中的表达水平、生物学功能及分子调控机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测乳腺上皮MCF-10A细胞及乳腺癌细胞中miR-376c-3p表达水平;然后,用miR-376c-3p mimic转染乳腺癌MCF-7与MDA-MB-231细胞,用平板克隆... 目的:探讨miR-376c-3p在乳腺癌中的表达水平、生物学功能及分子调控机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测乳腺上皮MCF-10A细胞及乳腺癌细胞中miR-376c-3p表达水平;然后,用miR-376c-3p mimic转染乳腺癌MCF-7与MDA-MB-231细胞,用平板克隆实验、划痕实验以及Transwell实验分别检测其增殖与迁移能力。利用Starbase数据库预测miR-376c-3p的下游靶基因,并通过蛋白质印迹实验进行验证。结果:与人乳腺上皮MCF-10A细胞相比,乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中miR-376c-3p表达水平显著降低(P<0.01);平板克隆实验显示,过表达miR-376c-3p可以显著抑制乳腺癌细胞增殖(P均<0.05);Transwell实验和划痕实验表明,miR-376c-3p表达上调可抑制乳腺癌细胞迁移能力;通过生物信息学预测分析,结果显示miR-376c-3p可以与谷氨酸受体相互作用蛋白1(glutamate receptor interacting protein 1,GRIP1)结合,且蛋白质印迹实验证实过表达miR-376c-3p可以抑制乳腺癌细胞GRIP1表达,同时波形蛋白表达水平明显下调,E-钙黏蛋白表达明显上调。结论:在乳腺癌细胞中,miR-376c-3p表达下调;在体外,过表达miR-376c-3p可显著抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,可能通过靶向GRIP1调节乳腺癌细胞上皮间质转化进程。 展开更多
关键词 miR-376c-3p 谷氨酸受体相互作用蛋白1 乳腺癌 上皮间质转化 细胞增殖与迁移
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结肠癌患者血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达及其与预后的关系 被引量：1
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作者 王晓燕 肖超 +2 位作者 肖佑 潘燎 肖戈 《疑难病杂志》 CAS 2021年第11期1090-1094,共5页
目的研究结肠癌患者血清微小RNA(miR)-221-3p、miR-376c-3p的表达及意义。方法选取2016年5月—2018年5月湖南中医药大学第二附属医院肛肠科诊治结肠癌患者104例作为结肠癌组,以非肿瘤结肠病患者56例作为良性疾病组,门诊健康体检者50例... 目的研究结肠癌患者血清微小RNA(miR)-221-3p、miR-376c-3p的表达及意义。方法选取2016年5月—2018年5月湖南中医药大学第二附属医院肛肠科诊治结肠癌患者104例作为结肠癌组,以非肿瘤结肠病患者56例作为良性疾病组,门诊健康体检者50例为健康对照组。应用荧光定量PCR法检测3组血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达。Pearson相关分析结肠癌患者血清miR-221-3p与miR-376c-3p表达的相关性,分析血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达与临床病理参数的关系及其对结肠癌患者3年总体生存率的影响。结果血清miR-221-3p、miR-376c-3p水平比较,结肠癌组>良性疾病组>健康对照组,差异均有统计学意义(F/P=407.412/0.000、333.341/0.000)。血清miR-221-3p与miR-376c-3p的表达呈正相关(r=0.567,P=0.000)。结肠癌Duke分期C~D期、肿瘤低分化及有淋巴结转移患者血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达均分别高于Duke分期A~B期、肿瘤高中分化及无淋巴结转移患者(miR-221-3p:t/P=6.535/0.000、7.789/0.000、8.124/0.000;miR-376c-3p:t/P=5.872/0.000、8.849/0.000、12.577/0.000)。血清miR-221-3p、miR-376c-3p高表达的结肠癌患者3年总体生存率低于低表达者(χ^(2)/P=7.134/0.000、5.736/0.002)。miR-221-3p高表达、miR-376c-3p高表达是结肠癌患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=11.352(3.313~31.882)、12.860(3.921~42.279)]。结论结肠癌患者血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达上调,其表达与肿瘤分期、分化程度、有无淋巴结转移有关,是新的结肠癌预后判断的分子标志物。 展开更多
关键词 结肠癌 微小RNA-221-3p 微小RNA-376c-3p 预后
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抑制miRNA-376c-3p对肾透明细胞癌生长的影响 被引量：1
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作者 镡云辉 赵蓉 +2 位作者 刘志明 卓奥 刘唐兴 《河北医药》 CAS 2024年第8期1132-1137,共6页
目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分... 目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分为对照组、miR-376c-3p inhibitor组(转染miR-376c-3p inhibitor)、miR-376c-3p mimics组(转染miR-376c-3p mimics)、阴性对照组(转染miR-376c-3p阴性对照),分组转染后以RT-PCR检测4组细胞miRNA-376c-3p表达;以Ki67免疫荧光染色、集落生成实验检测4组786-O细胞增殖;以TUNEL染色检测4组786-O细胞凋亡;以免疫荧光染色检测4组786-O细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达并比较其Bax/Bcl-2。于右腋窝皮下接种上述4组786-O细胞建立其裸鼠移植瘤模型,3周后测定其肿瘤体积与质量;以Ki67免疫荧光染色、TUNEL染色分别检测4组裸鼠肿瘤细胞增殖与凋亡。结果与HKC细胞比较,ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN中miR-376c-3p表达降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-376c-3p inhibitor组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比升高(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比降低(P<0.05);miR-376c-3p mimics组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比降低(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比升高(P<0.05);阴性对照组各指标无明显变化(P>0.05)。结论抑制miRNA-376c-3p可削弱ccRCC细胞增殖及集落生成活性,促进其凋亡,并在裸鼠体内抑制其移植瘤生长。 展开更多
关键词 miRNA-376c-3p 肾透明细胞癌 肾细胞 肿瘤细胞 生长
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慢病毒介导MicroRNA-376b-3p对垂体腺瘤细胞增殖和凋亡的影响及机制探究 被引量：1
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作者 孙凯颉 褚冬 +2 位作者 王敏磊 仇诚 李英斌 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第22期4225-4228,4217,共5页
目的:探究慢病毒介导MicroRNA-376b-3p对垂体腺瘤增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法:以体外培养的人垂体腺瘤细胞系为研究对象,分别设立为MicroRNA-376b-3p mimics组(对照组)和慢病毒lenti-sh MicroRNA-376b-3p组(药物组),采用MTT... 目的:探究慢病毒介导MicroRNA-376b-3p对垂体腺瘤增殖和凋亡的影响及其可能的机制。方法:以体外培养的人垂体腺瘤细胞系为研究对象,分别设立为MicroRNA-376b-3p mimics组(对照组)和慢病毒lenti-sh MicroRNA-376b-3p组(药物组),采用MTT法检测MicroRNA-376b-3p对垂体腺瘤细胞增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI双染法检测MicroRNA-376b-3p对垂体腺瘤细胞凋亡率的影响,Western blot法检测MicroRNA-376b-3p对高迁移率蛋白A2(HMGA2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响。结果:(1)慢病毒介导MicroRNA-376b-3p能够显著抑制垂体腺瘤细胞的增殖(P<0.05);(2)在MicroRNA-376b-3p干预后12 h、24 h以及48 h,垂体腺细胞的凋亡率均明显升高(P<0.05);(3)经MicroRNA-376b-3p转染后,Bax蛋白表达升高,Bcl-2、Caspase-3、Survivin以及HMGA2蛋白表达降低(P<0.05)。结论:慢病毒介导MicroRNA-376b-3p能够明显抑制垂体腺瘤细胞增殖,诱导其凋亡,分析其作用机制可能与下调HMGA2和Survivin表达及上调Bax蛋白表达有关。 展开更多
关键词 microrna-376b-3p 靶向 HMGA2 垂体腺瘤 生长
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