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利拉鲁肽通过调节microRNA-375对胰岛细胞凋亡的影响 被引量:14
1
作者 杨庆宇 郜娜 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1627-1634,共8页
目的:观察利拉鲁肽通过微小RNA-375(microRNA-375,miR-375)对db/db小鼠胰岛细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制,为临床应用提供药效学依据。方法:20只8周龄雄性db/m小鼠为正常对照组,皮下注射等量的生理盐水。40只8周龄雄性db/db小鼠随... 目的:观察利拉鲁肽通过微小RNA-375(microRNA-375,miR-375)对db/db小鼠胰岛细胞凋亡的影响,探讨其可能作用机制,为临床应用提供药效学依据。方法:20只8周龄雄性db/m小鼠为正常对照组,皮下注射等量的生理盐水。40只8周龄雄性db/db小鼠随机分为2组,每组20只:糖尿病对照组的db/db小鼠皮下注射等量生理盐水;利拉鲁肽组的db/db小鼠皮下注射利拉鲁肽300μg·kg^(-1)·d^(-1)。给药8周后,检测各组小鼠体重(BW)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量,并进行腹腔注射葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(ITT);苏木精-伊红(HE)染色检测胰岛组织病理学变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测胰岛凋亡情况;Western blot法检测胰岛凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白水平;实时荧光定量PCR检测胰岛miR-375的表达水平。小鼠胰岛β细胞系MIN-6分为对照组(等量溶媒孵育)、miRNA-375 mimic组和miRNA-375 mimic+利拉鲁肽组,MTT实验检测细胞活力,Western blot法检测各组细胞caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白水平。结果:整体实验中,与对照组相比,利拉鲁肽组BW、FBG、FINS、TC、TG及LDL-C含量明显降低(P<0.05);胰岛数量较模型组增多,体积较大,细胞结构明显改善;胰岛细胞凋亡减少;利拉鲁肽组的Bcl-2表达明显增高,caspase-3和Bax的表达显著下降(P<0.05);胰岛组织miR-375的水平显著降低(P<0.01)。细胞实验中,经miRNA-375 mimic处理24 h后,MIN-6细胞活力显著降低,Bcl-2表达减少,而caspase-3和Bax的蛋白水平显著增加(P<0.05),给予利拉鲁肽组治疗后,MIN-6细胞活力明显上升,Bcl-2表达明显增高,caspase-3和Bax的蛋白水平显著下降(P<0.05)。结论:利拉鲁肽可以抑制糖尿病胰岛β细胞的凋亡,其机制可能与调控胰岛组织中miR-375的表达有关。 展开更多
关键词 利拉鲁肽 microrna-375 胰岛细胞 细胞凋亡
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肝细胞癌中microRNA-375调控的基因网络分析 被引量:3
2
作者 黄波 肖影群 +5 位作者 罗达亚 章萍 杨仙荷 钟青梅 王武 姚迪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期363-370,共8页
目的:探讨肝细胞癌中miR-375的表达及其调控的相关靶基因和信号通路。方法:采用原位杂交检测miR-375在人肝癌组织芯片的表达情况;人全基因组表达谱芯片检测4株肝癌细胞株;MAS生物信息学软件筛选miR-375调控靶基因及相关信号通路。结果:... 目的:探讨肝细胞癌中miR-375的表达及其调控的相关靶基因和信号通路。方法:采用原位杂交检测miR-375在人肝癌组织芯片的表达情况;人全基因组表达谱芯片检测4株肝癌细胞株;MAS生物信息学软件筛选miR-375调控靶基因及相关信号通路。结果:原位杂交结果显示miR-375在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05);人全基因组表达谱芯片结果分析显示4株转染miR-375的肝癌细胞的共上调基因有20个,共下调基因有17个;MAS生物信息学软件分析显示4株转染miR-375的肝癌细胞共有的上调信号通路有54条,下调信号通路有48条。结论:miR-375与肝细胞癌有密切的关系。对miR-375调控的肝细胞癌相关靶基因与信号通路进行多元化筛选,为后续全面深入的研究肝细胞癌发生发展的机制提供了便利。 展开更多
关键词 肝细胞癌 microrna-375 原位杂交 基因芯片
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上皮性卵巢癌组织中microRNA-375、ERBB2的表达及与临床病理特征和预后的关系 被引量:2
3
作者 刘阳 熊苗 赵立东 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第15期6-11,共6页
目的探究上皮性卵巢癌(EOC)组织中microRNA-375(miR-375)、erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年10月—2017年10月上海交通大学附属第六人民医院收治的134例EOC患者的基本资料。采用实时荧... 目的探究上皮性卵巢癌(EOC)组织中microRNA-375(miR-375)、erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)的表达及与临床病理特征和预后的关系。方法选取2015年10月—2017年10月上海交通大学附属第六人民医院收治的134例EOC患者的基本资料。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-375和ERBB2在EOC组织及其癌旁正常组织中的表达,并分析两者的相关性及其与临床病理特征和预后的关系。结果EOC组织中miR-375 mRNA相对表达量较癌旁组织低(P<0.05),而ERBB2 mRNA相对表达量较癌旁组织高(P<0.05)。EOC组织中miR-375 mRNA和ERBB2 mRNA相对表达量在淋巴结转移和FIGO分期方面差异有统计学意义(P<0.05)。EOC组织中miR-375的表达与ERBB2的表达呈负相关(P<0.05)。miR-375低表达组的3年总生存率较高表达组低(P<0.05)。ERBB2高表达组的3年总生存率较低表达组低(P<0.05)。Cox回归分析显示,高级别的FIGO分期、有淋巴结转移、miR-375低表达以及ERBB2高表达是影响EOC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论EOC组织中miR-375呈低表达而ERBB2呈高表达,两者呈负相关,且均与FIGO分期及淋巴结转移有关,对评估病情进展及其预后生存率具有重要的临床价值。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 microrna-375 erb-b2受体酪氨酸激酶2 预后
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血清microRNA-375在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义 被引量:4
4
作者 万梦智 曾清华 +3 位作者 许飞 万训 杨建 涂友梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期1597-1600,共4页
目的:探讨micro RNA-375(mi R-375)在非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)患者血清中的表达水平及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分... 目的:探讨micro RNA-375(mi R-375)在非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)患者血清中的表达水平及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果:NSCLC组血清mi R-375表达水平显著低于对照组,并且其表达与临床分期和淋巴结转移有关(P〈0.05)。血清mi R-375在ROC曲线下面积(area under the ROC curve,AUC)为0.905(95%CI:0.860~0.950)。当血清mi R-375临界值取0.995时,对NSCLC诊断的灵敏度为92.0%,特异度为78.0%。结论:血清mi R-375可能作为一种新型NSCLC诊断的分子标志物和潜在的基因靶向治疗靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺 MICRO RNA-375 实时荧光定量PCR
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microRNA-375、AEG-1在食管癌组织中的表达及相关性研究 被引量:3
5
作者 张雪梅 宋文琦 +1 位作者 卓越 朱艳丽 《微量元素与健康研究》 CAS 2019年第1期6-7,10,共3页
目的:研究microRNA-375、AEG-1在食管癌组织中的表达及其相关性。方法:收集2016年1月~2017年5月经胃镜检查并经病理诊断的食管癌患者70例,采用定量聚合酶链反应检测食管癌组及其癌旁组织中miR-375及AGE-1的表达,初步探讨miRNA在食管癌... 目的:研究microRNA-375、AEG-1在食管癌组织中的表达及其相关性。方法:收集2016年1月~2017年5月经胃镜检查并经病理诊断的食管癌患者70例,采用定量聚合酶链反应检测食管癌组及其癌旁组织中miR-375及AGE-1的表达,初步探讨miRNA在食管癌中发生及发展过程中的作用及二者相关性。结果:miR-375在食管癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P <0. 05),食管癌组织中AEG-1 mRNA表达较癌旁组织升高(P <0. 05),食管癌组织中miR-375与AEG-1mRNA呈负相关(r=-0. 369,P=0. 045,P <0. 05)。结论:与癌旁组织相比,组织中miR-375表达降低。miR-375在食管癌的发生、发展中可能起重要作用,其机制可能与miR-375调控AEG-1有关。 展开更多
关键词 microrna-375 AEG-1 食管癌 定量聚合酶链反应(qRT-PCR)
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microRNA-375在肝细胞癌中的研究热点及发展趋势——基于文献计量与可视化分析
6
作者 杜俊泽 李怡君 张维璐 《临床医学进展》 2023年第10期15992-16001,共10页
目的:运用文献计量方法分析microRNA-375在肝细胞癌中的研究现状、热点及发展趋势,为该领域未来研究提供数据参考。方法:基于Web of Science核心合集中2013~2022年有关microRNA-375在肝细胞癌中的相关研究数据,利用可视化分析软件CiteSp... 目的:运用文献计量方法分析microRNA-375在肝细胞癌中的研究现状、热点及发展趋势,为该领域未来研究提供数据参考。方法:基于Web of Science核心合集中2013~2022年有关microRNA-375在肝细胞癌中的相关研究数据,利用可视化分析软件CiteSpace和VOSviewer对文献年度发表量、国家、研究机构、来源期刊、活跃作者及关键词进行文献计量和可视化分析。结果:截至2023年9月15日,共有46,808篇microRNA-375与肝细胞癌的相关研究发表。文献发表量呈逐年上升趋势,中国是最高产的国家,其次是美国和日本,法国中心性最高。Oncotarget发文量最高,Hepatology被引用频次最高。高发文量机构主要集中在中国,Sun Yat-sen University发文量最多,University of California System中心性位列第一。此外,“open label”、“tumor microenvironment”、“phase iii”、“immune checkpoint inhibitors”、“immune infiltration”、“microenvironment”等是该领域的研究热点。结论:本研究通过文献计量分析方法对microRNA-375与肝细胞癌进行了全面概述,为关注该领域的科研人员提供线索。 展开更多
关键词 肝细胞癌 microrna-375 文献计量 可视化分析
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慢病毒载体MicroRNA-375过表达调控EMT通路抑制结直肠癌细胞侵袭和迁移 被引量:4
7
作者 蔺杰 祝志鹏 +2 位作者 马红梅 马贵亮 齐宏 《中国现代普通外科进展》 CAS 2021年第3期174-179,共6页
目的:通过慢病毒载体构建microRNA-375过表达的结直肠癌细胞HCT116,研究microRNA-375通过调控EMT通路抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭、迁移的作用。方法:通过慢病毒载体转染构建并培养出HCT116细胞的microRNA-375过表达实验组(过表达组)... 目的:通过慢病毒载体构建microRNA-375过表达的结直肠癌细胞HCT116,研究microRNA-375通过调控EMT通路抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭、迁移的作用。方法:通过慢病毒载体转染构建并培养出HCT116细胞的microRNA-375过表达实验组(过表达组)、设立空载体对照组(空载体组)、空白对照组(空白组)。实时逆转录PCR检测3组细胞中microRNA-375的表达情况。Trans-well小室模型检测3组细胞的侵袭能力。划痕实验检测3组细胞的迁移能力。Western blot蛋白质印迹法检测3组细胞EMT通路中蛋白质的相对含量。结果:慢病毒载体转染成功,构建并培养出microRNA-375过表达实验组和空载体对照组的HCT116细胞。过表达组细胞的microRNA-375相对表达量较空载体组和空白组明显升高(P<0.05);空载体组和空白组细胞的microRNA-375相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。过表达组细胞的侵袭、迁移能力较空载体组和空白组减弱(P<0.05);空载体组和空白组细胞的侵袭、迁移能力差异无统计学意义(P>0.05)。过表达组细胞的EMT过程较空载体组和空白组受抑制(P<0.05);空载体组和空白组细胞的EMT过程差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MicroRNA-375作为抑癌因子,可通过抑制EMT通路,发挥抑制结直肠癌细胞在人体中侵袭和迁移的作用。 展开更多
关键词 微小RNA-375 上皮-间充质转化 结直肠癌 侵袭 迁移
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microRNA-375在肝纤维化中的作用及其调控信号通路的研究 被引量:3
8
作者 陈征 刘晓峰 麻树霖 《国际消化病杂志》 CAS 2016年第6期355-359,共5页
目的通过提高肝星状细胞(HSC)中微小核糖核酸(microRNA-375,miR-375)的表达水平,探讨miR-375在肝纤维化进程中的作用及其靶向信号通路。方法通过瞬时转染将miR-375mimic或者miR-375 mimic negative control(NC)转染到大鼠肝星状细胞(HSC... 目的通过提高肝星状细胞(HSC)中微小核糖核酸(microRNA-375,miR-375)的表达水平,探讨miR-375在肝纤维化进程中的作用及其靶向信号通路。方法通过瞬时转染将miR-375mimic或者miR-375 mimic negative control(NC)转染到大鼠肝星状细胞(HSC-T6),将细胞分为mimic组、NC组和空白对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹实验(Western blot)检测细胞中蛋白激酶B(Akt)基因、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)基因表达水平的变化。分别用细胞流式技术、细胞计数实验(CCK-8)试剂盒和细胞迁移实验检测过表达的miR-375对HSC-T6的细胞周期、增殖和迁移能力的影响。结果与其他两组相比,mimic组细胞中Akt、PDK1含量明显下降(P<0.05),细胞停滞在G0/G1期的比例升高(P<0.05)、增殖受到抑制(P<0.05),细胞迁移的差异无统计学意义(P>0.05)。结论miR-375可抑制HSC的增殖,负性调控肝纤维化进程。 展开更多
关键词 miRNA-375 肝纤维化 转染 信号通路
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MicroRNA-375表达对大肠癌细胞生物学特性的影响 被引量:7
9
作者 陈贝贝 吕慧芳 +2 位作者 别良玉 黄晋熙 陈小兵 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第22期3558-3563,共6页
目的:研究构建miRNA-375慢病毒表达载体并转染结直肠癌细胞,探讨其对结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:采用qRT-PCR法检测结直肠癌细胞株中miRNA-375表达水平。构建FUA-ZMCSEF1-EGFP-miR-375/inhibitor慢病毒表达载体,建立稳定过表达... 目的:研究构建miRNA-375慢病毒表达载体并转染结直肠癌细胞,探讨其对结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:采用qRT-PCR法检测结直肠癌细胞株中miRNA-375表达水平。构建FUA-ZMCSEF1-EGFP-miR-375/inhibitor慢病毒表达载体,建立稳定过表达miRNA-375及其抑制剂的HCT-116亚细胞系,体外观察细胞生长速度并绘制生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡率,划痕实验检测miRNA-375对HCT-116细胞迁移能力的影响,Western blot法检测miRNA-375对细胞内ERK磷酸化水平的影响。结果:结直肠癌细胞株中miRNA-375低表达不但能促进细胞生长、抑制细胞凋亡,而且能促进细胞内ERK磷酸化水平、增加细胞迁移力和侵袭力。结论:结直肠癌miRNA-375发挥抑癌基因的作用,为miRNA-375在结直肠癌基因诊断及治疗中的应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 大肠癌 miRNA-375 慢病毒
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MicroRNA-375低水平表达与乙肝肝细胞癌预后相关性分析
10
作者 周青青 潘陈为 《中国药物滥用防治杂志》 2025年第1期46-50,共5页
目的:研究miR-375的表达及其与HCC预后的相关性。方法:选取2018年3月至2023年12月于平阳县人民医院进行手术治疗的HCC患者共38例,并获得癌组织标本。使用q RT-PCR检测癌组织中的miR-375表达,并根据中值截断值进行分组。随后研究miR-375... 目的:研究miR-375的表达及其与HCC预后的相关性。方法:选取2018年3月至2023年12月于平阳县人民医院进行手术治疗的HCC患者共38例,并获得癌组织标本。使用q RT-PCR检测癌组织中的miR-375表达,并根据中值截断值进行分组。随后研究miR-375表达与临床病理参数和预后之间的关联。结果:检测38例HCC患者的miR-375的表达水平,结果显示miR-375表达与临床病理参数如性别、年龄、术前血清AFP水平、组织学分级、HBV-DNA拷贝数、腹水、肿瘤大小、肿瘤结节数和入侵大血管之间未观察到显著相关性。然而,miR-375表达在CLIP评分中存在显著差异(P<0.05)。与miR-375高表达的患者相比,miR-375低表达的患者中观察到无病生存期(DFS)较差的趋势(P=0.307)。多变量分析表明,低miR-375表达是进展的独立预后因子(P=0.032,风险比3.273)。亚组分析显示,在组织学分化差、血清水平较高(≥400 ng/ml)和晚期肿瘤分期(CLIP评分1~3)的患者中,miR-375的低表达与不良DFS显著相关(P<0.05)。结论:miR-375具有预测HCC患者DFS的潜力,其表达水平与患者的DFS显著相关,可能成为评估HCC疾病进展的潜在预后生物标志物。 展开更多
关键词 miR-375 侵袭 肝细胞癌 预后
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MicroRNA-34a通过调控Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病进展的机制探讨
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作者 刘虹 张玥玥 +4 位作者 王一琳 王彩丽 王晓敏 毛敏 李燕 《天津医药》 2025年第8期785-790,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p in... 目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p inhibitor组及对照组、miR-34a-5p inhibitor+Wnt抑制剂XAV-939组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞中miR-34a-5p表达水平;CCK8检测细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;双萤光素酶报告实验检测p53与miR-34a-5p及miR-34a-5p与Wnt1的靶向关系;Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果在MEC-1细胞中:①p53激动剂组中miR-34a表达升高,增殖受抑制(P<0.05);双萤光素酶报告实验证实miR-34a-5p与p53之间呈现负调控相关性。②miR-34a-5p mimic组miR-34a-5p表达升高,增殖受抑制,迁移能力降低,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达下调(P<0.05);miR-34a-5p inhibitor组miR-34a-5p表达降低,增殖升高,迁移能力增强,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达上调(P<0.05)。③miR-34a-5p和Wnt1呈现负调控相关性。④与miR-34a-5p inhibitor组相比,XAV-939组的miR-34a-5p表达升高,迁移细胞数减少,β-catenin和Cyclin D1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论miR-34a在CLL中扮演着抑癌基因的角色,过表达miR-34a可抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低细胞的增殖活性和迁移能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 B细胞 WNT信号通路 肿瘤抑制蛋白质P53 细胞增殖 microrna-34a
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miR-375-3p 靶向 Fam 229a 调控猪前体脂肪细胞分化 被引量:1
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作者 杨宇婷 陈国梁 +7 位作者 常巧宁 鲍武 刘靖超 姬梦婷 荣晓音 郭晓红 杨阳 李步高 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1120-1133,共14页
旨在探究miR-375-3p对猪脂肪细胞生成的调控作用及靶向Fam 229a的作用机制。本研究选取了饲养在相同条件下的10头30日龄的健康无病的公猪为研究对象,通过实时荧光定量PCR技术(qPCR)检测miR-375-3p在心脏、肝脏、脾脏等组织的表达分布及... 旨在探究miR-375-3p对猪脂肪细胞生成的调控作用及靶向Fam 229a的作用机制。本研究选取了饲养在相同条件下的10头30日龄的健康无病的公猪为研究对象,通过实时荧光定量PCR技术(qPCR)检测miR-375-3p在心脏、肝脏、脾脏等组织的表达分布及在脂肪细胞成脂诱导分化不同时期的表达水平;利用miRNA mimic和miRNA inhibitor过表达和干扰miR-375-3p,qPCR检测miR-375-3p对成脂关键基因CEBPα、PPARγ、FABP 4表达的影响,油红O染色和统计分析检测成脂能力;通过生物信息学分析和双荧光素酶报告试验预测并鉴定miR-375-3p的下游靶标Fam 229a,并对Fam 229a进行功能验证;最后利用PSIPRED软件、Phyre2.0软件和STRING网站预测Fam 229a下游功能及qPCR检测Fam 229a对早期成脂关键基因CEBPα、CEBPβ、ZFP 423和ZFP 521表达的影响;上述试验方法均设立3个生物学重复。结果表明,miR-375-3p在猪各组织中广泛表达,在肺脏和肾周脂肪中相对表达量较高;时序表达谱显示,在猪原代前体脂肪细胞的分化过程中miR-375-3p的表达量呈先下降后上升趋势;过表达miR-375-3p后,猪原代前体脂肪细胞的脂滴明显增多,脂肪细胞分化标志基因CEBPα、PPARγ和FABP 4的mRNA水平极显著上升(P<0.01),干扰miR-375-3p后,结果相反。为了探究miR-375-3p的作用机制,通过qRT-RCR、结合位点预测以及双荧光素酶试验发现了miR-375-3p与Fam 229a之间存在结合作用,过表达miR-375-3p能显著抑制Fam 229a的表达(P<0.05),干扰后则表示相反结果。组织表达谱显示Fam 229a在肝脏和肾周脂肪中相对表达量较高;时序表达谱显示,在猪原代前体脂肪细胞的分化过程中,Fam 229a的表达量呈先上升后下降再上升趋势;过表达Fam 229a后,脂滴明显减少,脂肪细胞分化标志基因CEBPα、PPARγ的mRNA水平显著降低(P<0.05),干扰Fam 229a后,结果相反;通过qRT-RCR技术和生物信息学预测了Fam 229a调控成脂分化的下游机制。本研究结果表明,miR-375-3p能够促进猪原代前体脂肪细胞的成脂分化,其靶基因Fam 229a抑制成脂分化,揭示了miR-375-3p靶向Fam 229a调控成脂分化的机制,丰富了miRNA的分子调控网络。 展开更多
关键词 脂肪细胞分化 miR-375-3p Fam 229a
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定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖的机制研究
13
作者 陈兰 颜晓静 +6 位作者 廉源沛 朱力 周世康 王地均 蔡佳丽 尹春燕 曹吉 《广州中医药大学学报》 2025年第7期1750-1756,共7页
【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低... 【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低、高剂量组,分组处理后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测GCs的存活率,细胞流式术分析GCs凋亡率,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测GCs中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3及microRNA-30d-5p的表达,Western Blot法检测GCs中TGF-β1、Smad2及Smad3的蛋白表达。【结果】与空白组比较,模型组GCs存活率显著下降,GCs凋亡率,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因及蛋白表达水平显著升高,microRNA-30d-5p的表达水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,定坤丹低、高剂量组GCs存活率上升,GCs凋亡率显著下降,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因与蛋白表达水平显著下降,microRNA-30d-5p的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进GCs增殖,可能起到治疗PCOS排卵障碍的作用。 展开更多
关键词 定坤丹 多囊卵巢综合征 转化生长因子β1 SMAD2 microrna-30d-5p 卵巢颗粒细胞 大鼠
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苍术素调节PI3K/Akt/mTOR信号通路对恶性黑素瘤A375细胞的影响
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作者 吴燕茹 王简 +5 位作者 黄勇 陈正莲 陈小丽 王芙蓉 段亚菊 汤舒玲 《中国美容医学》 2025年第11期43-47,共5页
目的:探讨苍术素对恶性黑素瘤(Malignant melanoma,MM)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:体外培养A375细胞并分为对照组,苍术素低剂量组(苍术素-L组)、中剂量组(苍术素-M组)、高剂量组(苍术素-H组)(5、10、20μmol/L)及苍... 目的:探讨苍术素对恶性黑素瘤(Malignant melanoma,MM)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:体外培养A375细胞并分为对照组,苍术素低剂量组(苍术素-L组)、中剂量组(苍术素-M组)、高剂量组(苍术素-H组)(5、10、20μmol/L)及苍术素-H组+740 Y-P[磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)激活剂]组(20μmol/L苍术素+20μmol/L 740 Y-P)。分别以MTT法、细胞划痕实验、Transwell实验、流式细胞术、蛋白免疫印迹(Western blot)法筛选苍术素浓度、检测细胞迁移、侵袭、细胞凋亡、磷酸化(p-)PI3K、PI3K、p-蛋白激酶(Akt)、Akt、p-雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、mTOR蛋白表达。结果:苍术素5、10、20μmol/L剂量处理A375细胞显著降低细胞的增殖能力;苍术素-M组、H组较对照组细胞凋亡率升高、细胞迁移和侵袭能力及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平降低(P<0.05);苍术素-H+740 Y-P组较苍术素-H组细胞生长状态良好,凋亡率降低,细胞增殖、迁移和侵袭能力及p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:苍术素可通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,抑制MM细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 苍术素 黑素瘤 A375细胞 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶/雷帕霉素靶蛋白信号通路
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系统性免疫炎症指数与microRNA-145对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值
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作者 王君 代玺 《中国现代医学杂志》 2025年第22期1-7,共7页
目的探讨系统性免疫炎症指数(SII)联合microRNA-145(miR-145)对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值。方法选取2020年1月—2023年1月在陕西省人民医院接受肺癌根治术患者(244例),根据患者是否发生肺部感染分为感染组(43例)和非感染组(... 目的探讨系统性免疫炎症指数(SII)联合microRNA-145(miR-145)对肺癌根治术患者发生肺部感染的预测价值。方法选取2020年1月—2023年1月在陕西省人民医院接受肺癌根治术患者(244例),根据患者是否发生肺部感染分为感染组(43例)和非感染组(201例)。收集患者的临床资料,比较两组患者术前的炎症因子水平[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)]、营养指标(白蛋白、血红蛋白)、SII,并通过实时荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-145表达。采用多因素逐步Logistic回归模型分析肺癌根治术患者发生肺部感染的风险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估SII、miR-145对肺部感染的预测效能。结果感染组患者糖尿病患病率、吸烟率、年龄、手术时间、白细胞计数、炎症因子和SII水平均高于非感染组(P<0.05),白蛋白和miR-145相对表达量均低于非感染组(P<0.05);多因素逐步Logistic回归分析结果显示,年龄大[OR=1.520(95%CI:1.137,2.031)]、手术时间长[OR=9.803(95%CI:1.865,51.528)]、吸烟史[OR=118.515(95%CI:1.781,7884.700)]、糖尿病史[OR=133.243(95%CI:2.960,5997.049)]、白蛋白低[OR=0.525(95%CI:0.329,0.836)]、SII水平高[OR=1.007(95%CI:1.002,1.011)]和miR-145相对表达量低[OR=0.011(95%CI:0.000,0.675)]均是肺癌根治术患者发生肺部感染的危险因素(P<0.05);ROC曲线结果显示,SII联合miR-145预测肺癌根治术患者发生肺部感染的曲线下面积为0.956(95%CI:0.927,0.985),敏感性为81.4%(95%CI:0.666,0.916),特异性为96.0%(95%CI:0.923,0.983)。结论SII越高、miR-145相对表达量越低的患者发生肺部感染的风险增加,可为患者病情评估提供指导。 展开更多
关键词 肺癌根治术 肺部感染 系统性免疫炎症指数 microrna-145
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骨髓间充质干细胞来源外泌体通过microRNA-210发挥对小鼠心肌梗死的保护作用 被引量:1
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作者 申怡博 李聪叶 +2 位作者 郑南波 吴冠吉 郝媛媛 《空军军医大学学报》 2025年第2期181-186,191,共7页
目的探究骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(exos)生物活性物质microRNA-210在小鼠心肌梗死(MI)后发挥的作用,评估其在MI中的潜在临床价值。方法提取BMSCs-exos并通过电镜及Western blotting进行鉴定及分析。所有小鼠随机分为4组:Sha... 目的探究骨髓间充质干细胞(BMSCs)来源的外泌体(exos)生物活性物质microRNA-210在小鼠心肌梗死(MI)后发挥的作用,评估其在MI中的潜在临床价值。方法提取BMSCs-exos并通过电镜及Western blotting进行鉴定及分析。所有小鼠随机分为4组:Sham组(只开胸不结扎)、MI组(开胸并结扎左前降支)、MI+BMSCs-exos组(结扎左前降支后注射BMSCs-exos)、MI+BMSCs-exos+microRNA-210 inhibitor组(结扎左前降支后注射转染microRNA-210抑制剂的BMSCs-exos)。左前降支冠状动脉结扎法构建小鼠MI模型后立即在梗死心肌周围行心肌内点注射exos或转染microRNA-210 inhibitor的exos。提取各组心肌组织microRNA-210并通过PCR检测其表达。超声心动图检测心脏功能。伊文思蓝染色心脏后测量MI面积。TUNEL检测心肌细胞凋亡情况。Western blotting检测心肌细胞凋亡相关蛋白的表达。结果与Sham组比较,MI组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)明显降低,MI面积明显增多,心肌细胞凋亡水平明显增高,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显增高(P<0.05)。与MI组比较,MI+BMSCs-exos组LVEF、LVFS明显升高,MI面积明显减少,心肌细胞凋亡水平明显降低,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显增高,Bax表达明显降低(P<0.05)。与MI+BMSCs-exos组比较,MI+BMSCs-exos+microRNA-210 inhibitor组LVEF、LVFS明显降低,MI面积明显增多,心肌细胞凋亡水平明显增高,凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显增高(P<0.05)。结论BMSCs来源的exos通过microRNA-210减轻细胞的凋亡,从而提高MI后小鼠的心功能,减少小鼠的MI面积,对小鼠MI起到了一定的保护作用。 展开更多
关键词 外泌体 microrna-210 心肌梗死 细胞凋亡
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结直肠癌患者血清microRNA-497的表达及其诊断与预后价值
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作者 华梅 翟晓璐 +2 位作者 唐翀 陈颖 印滇 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第22期3579-3584,共6页
目的研究血清microRNA-497(miR-497)在结直肠癌(CRC)患者的表达特征,分析其与临床病理参数、诊断价值及患者预后的相关性。方法对医院2020年3月至2022年3月期间收治的122例CRC患者(CRC组)进行资料整理,筛选出100例健康体检人群作为对照... 目的研究血清microRNA-497(miR-497)在结直肠癌(CRC)患者的表达特征,分析其与临床病理参数、诊断价值及患者预后的相关性。方法对医院2020年3月至2022年3月期间收治的122例CRC患者(CRC组)进行资料整理,筛选出100例健康体检人群作为对照组。所有受试者在术前采集血清样本,利用实时定量PCR技术检测血清中miR-497的表达水平,并同步测定CEA与CA199水平。进一步分析miR-497表达与临床病理变量之间的关系,通过受试者工作特征(ROC)曲线评估其诊断能力,并采用Kaplan-Meier生存分析与Cox回归模型探讨其对患者预后的影响。结果CRC组血清miR-497表达水平显著低于健康对照组(P<0.001)。miR-497表达与TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.001),而与肿瘤位置、性别、年龄等无显著相关性。ROC曲线分析显示miR-497在CRC诊断中的AUC为0.845,优于CEA(0.748)和CA199(0.702),DeLong检验表明miR-497与CEA、CA199的AUC差异均有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,miR-497高表达组患者的3年DFS率显著优于低表达组(84.06%vs.64.58%)。高表达组中位DFS未达到,而低表达组中位DFS为36个月,组间差异有统计学意义(P=0.015)。Cox回归分析显示,miR-497低表达(HR=1.923,95%CI:1.184~3.125)、TNM分期(HR=2.511,95%CI:1.421~4.437)及淋巴结转移(HR=1.753,95%CI:1.151~2.664)是影响CRC患者DFS的独立危险因素。结论血清miR-497在CRC患者中呈低表达状态,且与肿瘤进展及不良预后密切相关,具有较高的诊断价值和预后评估潜力,可望作为CRC的辅助诊断和预后判断的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 microrna-497 结直肠癌 肿瘤标志物 诊断效能 预后
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携载microRNA-140外泌体/海藻酸钠/胶原水凝胶修复关节软骨损伤
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作者 陈明伟 余雯莉 +5 位作者 夏苏杭 陈宾 陈文忠 李锋侦 周宇 司文腾 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第16期3326-3334,共9页
背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microR... 背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microRNA-140参与骨关节炎的相关机制。方法:利用慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞使其过表达microRNA-140,随后分离提取外泌体,得到过表达microRNA-140的外泌体。制备负载外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:正常对照组不进行任何处理,骨关节炎组、未转染外泌体组、转染外泌体组均通过膝关节腔内注射碘乙酸钠的方式建立骨关节炎模型,造模2周后,骨关节炎组膝关节腔内注射PBS,未转染外泌体组、转染外泌体组膝关节腔内分别注射负载未过表达microRNA-140与过表达microRNA-140外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。造模后第6周,检测大鼠机械刺激缩足反应阈值、滑膜液炎症因子浓度、软骨相关基因表达、膝关节软骨组织的组织学变化与焦亡相关蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组比较,骨关节炎组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均减少(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平增加(P<0.05),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)mRNA表达增加(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达均增加(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1免疫荧光强度增强(P<0.05),软骨组织损伤严重。②与骨关节炎组比较,两外泌体组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均增加(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平减少(P<0.05),基质金属蛋白酶13 mRNA表达减少(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18的蛋白表达均减少(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1的免疫荧光强度减弱(P<0.05),软骨组织损伤减轻(P<0.05),并且转染外泌体组的作用更强。③结果表明,microRNA-140可通过抑制炎症、维持软骨稳态、抑制软骨焦亡来减轻骨关节炎大鼠的疼痛反应,降低软骨损伤,发挥骨关节炎治疗作用。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨损伤 外泌体 microrna-140 海藻酸钠/胶原水凝胶 焦亡
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微小RNA-375-3p靶向调节组织金属蛋白酶抑制因子3对狼疮肾炎肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响
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作者 孟大川 张恩胜 +2 位作者 黄磊 陈慧慧 吕银 《临床肾脏病杂志》 2025年第10期878-887,共10页
目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-375-3p对狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用20只雄性墨菲罗斯大鼠品系(murphy roths large,MRL)/Fas淋巴增生突变基... 目的探讨微小RNA(microRNA,miR)-375-3p对狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMC)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用20只雄性墨菲罗斯大鼠品系(murphy roths large,MRL)/Fas淋巴增生突变基因小鼠(LN组)及10只雄性MRL/杰克逊实验室MRL品系亚系小鼠[对照(control,Cont)组]进行研究。试剂盒检测LN组和Cont组小鼠24 h尿液总蛋白、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血肌酐(serum creatinine,Scr)含量;HE染色和天狼星红染色观察肾组织形态;逆转录实时定量聚合酶链式反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肾组织miR-375-3p、组织金属蛋白酶抑制因子3(tissue inhibitors of metalloproteinases-3,TIMP3)mRNA表达情况。分离小鼠GMC,将Cont组小鼠的GMC记为C组,并将LN组小鼠的GMC依据随机数字表法分为5组:LN组(未转染)、miR-375-3p-阴性对照(negative control,NC)组(转染miR-375-3p-NC)、miR-375-3p-抑制剂(inhibitor)组(转染miR-375-3p-inhibitor)、miR-375-3p-inhibitor+TIMP3-NC组(共转染miR-375-3p-inhibitor和TIMP3-NC)、miR-375-3p-inhibitor+小干扰RNA(small interfering RNA,si)-TIMP3组(共转染miR-375-3pinhibitor和si-TIMP3)。RT-qPCR检测GMC中miR-375-3p、TIMP3 mRNA表达;细胞计数试剂盒8测定GMC增殖;碘化丙啶(propidium iodide,PI)单染法检测GMC周期;膜联蛋白V异硫氰酸荧光素/PI双染检测GMC凋亡;双荧光素酶验证miR-375-3p、TIMP3靶向关系。结果动物实验:Cont组小鼠肾组织结构完整清晰,LN组可见部分GMC增生、基底膜增厚、肾小管局部萎缩、肾间质胶原纤维沉积等现象。LN组较Cont组TIMP3 mRNA表达量(0.43±0.03比0.99±0.09)显著降低(P<0.05),尿蛋白含量[(2.01±0.03)g/L比(0.32±0.03)g/L]、BUN[(0.0089±0.0008)g/L比(0.0025±0.0003)g/L]、Scr[(0.4265±0.0456)g/L比(0.1056±0.0111)g/L]、CVF[(8.87±0.95)%比(0.74±0.23)%]、miR-375-3p表达量(1.67±0.16比1.00±0.10)显著升高(P<0.05)。细胞实验:与C组相比,miR-375-3p-NC组miR-375-3p表达量(1.98±0.06比1.01±0.11)、24 h、48 h、72 h细胞活力(0.40±0.04比0.19±0.02、0.59±0.03比0.35±0.03、0.80±0.08比0.51±0.06)、S期[(55.59±6.43)%比(40.35±4.93)%]和G2/M期细胞比例[(19.80±0.78)%比(15.51±0.66)%]均显著升高(P<0.05),TIMP3 mRNA表达量(0.21±0.03比0.99±0.10)、G1/G0期细胞比例[(25.40±3.24)%比(45.19±5.72)%]、凋亡率[(13.56±1.36)%比(21.65±2.11)%]显著下降(P<0.05)。与miR-375-3p-NC组相比,miR-375-3p-inhibitor组、miR-375-3p-inhibitor+TIMP3-NC组miR-375-3p表达量(1.05±0.09、1.03±0.10比1.98±0.06)、24 h、48 h、72 h细胞活力(0.22±0.03、0.21±0.02比0.40±0.04,0.38±0.04、0.39±0.03比0.59±0.03,0.52±0.06、0.53±0.04比0.80±0.08)、S期[(40.38±4.84)%、(41.39±4.73)%比(55.59±6.43)%]和G2/M期细胞比例[(15.51±0.66)%、(14.93±0.44)%比(19.80±0.78)%]显著降低(P<0.05),TIMP3 mRNA表达量(0.78±0.04、0.73±0.08比0.21±0.03)、G1/G0期细胞比例[(44.22±5.63)%、(43.21±5.82)%比(25.40±3.24)%]、凋亡率[(19.89±1.75)%、(20.03±2.44)%比(13.56±1.36)%]显著升高(P<0.05)。与miR-375-3p-inhibitor组相比,miR-375-3p-inhibitor+si-TIMP3组24 h、48 h、72 h细胞活力(0.38±0.03比0.21±0.02、0.56±0.05比0.39±0.03、0.78±0.07比0.53±0.04)、S期[(51.56±5.75)%比(41.39±4.73)%]和G2/M期细胞比例[(19.80±0.78)%比(14.93±0.44)%]均显著升高(P<0.05),TIMP3 mRNA表达量(0.34±0.05比0.73±0.08)、G1/G0期细胞比例[(30.38±3.03)%比(43.21±5.82)%]、凋亡率[(14.34±1.49)%比(20.03±2.44)%]显著下降(P<0.05)。结论miR-375-3p在LN小鼠肾组织中高表达,敲低miR-375-3p可通过上调TIMP3表达,抑制GMC增殖,促进GMC凋亡,提示miR-375-3p可能在LN中发挥致病因子作用。 展开更多
关键词 微小RNA-375-3p 组织金属蛋白酶抑制因子3 狼疮肾炎 肾小球系膜细胞 增殖
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栉孔扇贝miR-375_1的靶基因鉴定及在精子发生中的表达特征分析
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作者 张瑞琦 陈越 +3 位作者 李茜茜 黄晓婷 张志峰 秦贞奎 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第9期48-57,146,共11页
为探究微小RNA(microRNA,miRNA)在贝类配子发生过程中的调控作用,本研究以栉孔扇贝(Chlamys farreri)为研究对象,针对在幼贝性别分化阶段具有显著雌雄差异的微小RNA miR-375_1开展研究,分析了其在成熟性腺发育周期中的表达特征,预测并... 为探究微小RNA(microRNA,miRNA)在贝类配子发生过程中的调控作用,本研究以栉孔扇贝(Chlamys farreri)为研究对象,针对在幼贝性别分化阶段具有显著雌雄差异的微小RNA miR-375_1开展研究,分析了其在成熟性腺发育周期中的表达特征,预测并验证了其靶向调控的关键基因,揭示了关键基因的表达模式。RT-qPCR定量结果显示,miR-375_1在栉孔扇贝性腺发育周期中具有显著的雌雄表达差异及动态变化;软件预测及双荧光素酶报告基因实验验证确定,miR-375_1能够调控包括bmi1、cfap45、dmrt1和tssk4-1等与精子发生过程密切相关的潜在靶基因,且与bmi1基因的作用更显著;原位杂交结果表明,bmi1基因信号定位于精细胞和精子。研究结果表明,miR-375_1可能在栉孔扇贝精子发生中发挥重要作用,并可通过调控bmi1、cfap45、dmrt1和tssk4-1等基因参与精子成熟过程的调控。 展开更多
关键词 栉孔扇贝 微小RNA miR-375_1 bmi1基因 精子发生 原位杂交
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