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Relationship Between Serum microRNA-372-3p and Glucose Transporter 4 Levels and Insulin Resistance in Gestational Diabetes Mellitus 被引量:1
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作者 Jinjin Qin Chenyuan Cao +3 位作者 Yakun Zhao Jing Wang Hongli Wu Bei Wang 《Proceedings of Anticancer Research》 2023年第2期12-17,共6页
Objective:To observe the changes in insulin resistance in patients with gestational diabetes mellitus(GDM)based on the detection of serum microRNA-372-3p and glucose transporter protein 4(GLUT4)levels.Methods:We condu... Objective:To observe the changes in insulin resistance in patients with gestational diabetes mellitus(GDM)based on the detection of serum microRNA-372-3p and glucose transporter protein 4(GLUT4)levels.Methods:We conducted a retrospective cohort study of 42 patients who were diagnosed with GDM and hospitalized in our hospital during the period from January 2017 to December 2021 and another 42 patients who had normal pregnancy during the same period by collecting their clinical data.We analyzed their serum microRNA expression profiles and miR-372-3p levels to study the relationship between GDM and insulin resistance.Results:The relative expression of miR-372-3p in the serum of patients in the GDM group was significantly higher than that of patients in the control group,but the GLUT 4 level of the GDM group was significantly lower than that of the control group(P<0.05).Compared with the control group,the GDM group had significantly higher levels of fasting blood glucose(FBG),fasting insulin(FINS),2-hour postprandial blood glucose(2h-BG),total cholesterol(TC),triglyceride(TG),and homeostatic model assessment for insulin resistance(HOMA-IR)index but significantly lower homeostasis model assessment ofβ-cell function(HOMA-β)index(P<0.05).The relative expression of miR-372-3p in serum was independently and positively correlated with HOMA-IR,while the level of GLUT4 was independently and negatively correlated with HOMA-IR(P<0.05).Conclusion:Glycosylated hemoglobin test in the early stages of pregnancy(12–13 weeks of gestation)is important to ensure the health of pregnant women and fetuses.The screening and intervention for elevated glucose in pregnant women act as a guideline for the treatment of GDM.Patients with insulin resistance and related complications such as hyperinsulinemia and hypoglycemia should be given priority. 展开更多
关键词 Gestational diabetes mellitus microrna-372-3p Glucose transporter Insulin resistance
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MicroRNA-132-3p靶向Nrf2加重脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的机制研究 被引量:1
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作者 马寒玉 赵宇浩 +3 位作者 张铭 李真 王飞 陈书艳 《中国现代医学杂志》 2025年第6期24-31,共8页
目的探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制。方法用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤。采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力。转染miR-13... 目的探讨microRNA-132-3p(miR-132-3p)靶向Nrf2加重脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的机制。方法用LPS刺激HUVECs建立体外脓毒症细胞模型,引起内皮细胞损伤。采用CCK-8法测定细胞活力,EdU法检测细胞增殖能力。转染miR-132-3p模拟物/抑制剂后,检测细胞迁移能力、乳酸脱氢酶(LDH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。通过荧光素酶报告基因验证miR-132-3p与其靶基因的结合。结果对照组细胞活力、细胞阳性比高于LPS组(P<0.05)。LPS组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较对照组升高(P<0.05),SOD水平较对照组降低(P<0.05)。LPS组miR-132-3p mRNA相对表达量较对照组升高(P<0.05),Nrf2 mRNA相对表达量较对照组降低(P<0.05)。LPS组Nrf2蛋白相对表达量较对照组降低(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组细胞活力比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞活力较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞活力较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组迁移细胞数比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组迁移细胞数较LPS组减少(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组迁移细胞数较LPS组增多(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组细胞划痕愈合率比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组细胞划痕愈合率较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组细胞划痕愈合率较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA和SOD水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);LPS+miR-132-3p模拟物组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较LPS组升高(P<0.05),SOD水平较LPS组降低(P<0.05);LPS+miR-132-3p抑制剂组LDH、TNF-α、IL-6、IL-1β、ROS、MDA水平均较LPS组降低(P<0.05),SOD水平较LPS组升高(P<0.05)。对照组与阴性对照组Nrf2-WT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05),miR-132-3p模拟物抑制Nrf2-WT的荧光素酶活性(P<0.05),miR-132-3p抑制剂增强Nrf2-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。各组Nrf2-MUT的荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2 mRNA相对表达量较LPS组升高(P<0.05)。LPS组与LPS+阴性对照组Nrf2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05),LPS+miR-132-3p模拟物组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组降低(P<0.05),LPS+miR-132-3p抑制剂组Nrf2蛋白相对表达量较LPS组升高(P<0.05)。结论miR-132-3p通过下调Nrf2的表达加重了LPS诱导的内皮细胞损伤,miR-132-3p可能是治疗脓毒症的潜在的新靶点。 展开更多
关键词 脓毒症 microrna-132-3p 内皮细胞 脂多糖 核因子红细胞2相关因子2
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MicroRNA-486-3p调控小鼠巨噬细胞差异表达基因筛选及鉴定
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作者 刘鸿雁 吴双双 +6 位作者 陈书婕 岑玉威 马一瑄 岳佳颖 魏书宇 王北艳 马金柱 《黑龙江八一农垦大学学报》 2025年第5期90-96,共7页
为分析MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞抵抗金黄色葡萄球菌感染过程中的调控作用,使用金黄色葡萄球菌感染MicroRNA-486-3p基因敲除型和野生型小鼠原代腹腔巨噬细胞24 h后,通过mRNA-Seq方法分析mRNA表达水平,筛选MicroRNA-486-3p调控巨噬... 为分析MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞抵抗金黄色葡萄球菌感染过程中的调控作用,使用金黄色葡萄球菌感染MicroRNA-486-3p基因敲除型和野生型小鼠原代腹腔巨噬细胞24 h后,通过mRNA-Seq方法分析mRNA表达水平,筛选MicroRNA-486-3p调控巨噬细胞的差异表达基因,利用RT-qPCR对遴选的差异基因加以验证。测序结果分析显示,差异表达基因共有744个,其中385个上调差异基因,359个下调差异基因,GO分析表明差异基因参与细胞代谢、增殖和免疫反应等生物作用,KEGG富集分析显示差异基因主要与PI3K-Akt、MAPK、NF-κB等信号通路活化相关,RT-qPCR验证结果显示遴选的差异基因与m RNA-Seq分析的下调趋势相符。上述结果表明,MicroRNA-486-3p在小鼠巨噬细胞感染金黄色葡萄球菌过程中具有调控作用,为今后深入研究MicroRNA-486-3p调控巨噬细胞免疫功能机制提供了重要参考。 展开更多
关键词 microrna-486-3p MRNA-SEQ 巨噬细胞 差异表达基因 金黄色葡萄球菌
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LINC01106通过miR-372-3p/SMYD2轴对肝癌细胞迁移、侵袭和增殖的影响
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作者 胡忠卓 刘红英 《河北医药》 2025年第5期721-727,共7页
目的探讨长链非编码RNA 01106(LINC01106)调节微小RNA-372-3p(miR-372-3p)/组蛋白甲基转移酶2(SMYD2)轴对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝癌组织和细胞(Huh-7、HepG2、SMMC-7721)中LINC01106、miR-... 目的探讨长链非编码RNA 01106(LINC01106)调节微小RNA-372-3p(miR-372-3p)/组蛋白甲基转移酶2(SMYD2)轴对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝癌组织和细胞(Huh-7、HepG2、SMMC-7721)中LINC01106、miR-372-3p、SMYD2的表达水平;将肝癌SMMC-7721细胞分为control组、si-LINC01106组、si-NC组、si-LINC01106+miR-372-3p inhibitor组、si-LINC01106+inhibitor-NC组;检测5组SMMC-7721细胞中LINC01106、miR-372-3p、SMYD2的表达水平;MTT法与Edu染色检测SMMC-7721细胞增殖;划痕实验检测SMMC-7721细胞迁移;Transwell小室检测SMMC-7721细胞侵袭;WB方法检测PCNA、MMP-2、MMP-9、SMYD2蛋白表达;双萤光素酶报告基因实验证实LINC01106或SMYD2与miR-372-3p的关系。结果LINC01106和SMYD2在肝癌组织和细胞系中显著上调,miR-372-3p在肝癌组织和细胞系中显著下调(P<0.05)。与control组、si-NC组比较,si-LINC01106组SMMC-7721细胞LINC01106 mRNA、SMYD2 mRNA、OD490、Edu阳性细胞率、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数、PCNA蛋白、MMP-9蛋白、MMP-2蛋白、SMYD2蛋白表达下降,miR-372-3p表达增高(P<0.05);与si-LINC01106+inhibitor-NC组、si-LINC01106组比较,si-LINC01106+miR-372-3p inhibitor组SMMC-7721细胞SMYD2 mRNA、OD490、Edu阳性细胞率、细胞划痕愈合率、细胞侵袭数、PCNA蛋白、MMP-9蛋白、MMP-2蛋白、SMYD2蛋白表达增高,miR-372-3p表达下降(P<0.05)。LINC01106靶向负调控miR-372-3p表达,SMYD2被miR-372-3p靶向下调。结论LINC01106敲低可能通过靶向miR-372-3p/SMYD2轴抑制SMMC-7721细胞迁移、侵袭和增殖。 展开更多
关键词 长链非编码RNA01106 微小RNA-372-3p 组蛋白甲基转移酶2 肝癌 增殖 迁移 侵袭
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Loss-of-function mutations of microRNA-142-3p promote ASH1L expression to induce immune evasion and hepatocellular carcinoma progression
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作者 Xing-Hui Yu Yan Xie +8 位作者 Jian Yu Kun-Ning Zhang Zhou-Bo Guo Di Wang Zhao-Xian Li Wei-Qi Zhang Yu-Ying Tan Li Zhang Wen-Tao Jiang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2025年第1期126-145,共20页
BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has been a pervasive malignancy throughout the world with elevated mortality.Efficient therapeutic targets are beneficial to treat and predict the disease.Currently,the exact mo... BACKGROUND Hepatocellular carcinoma(HCC)has been a pervasive malignancy throughout the world with elevated mortality.Efficient therapeutic targets are beneficial to treat and predict the disease.Currently,the exact molecular mechanisms leading to the progression of HCC are still unclear.Research has shown that the microRNA-142-3p level decreases in HCC,whereas bioinformatics analysis of the cancer genome atlas database shows the ASH1L expression increased among liver tumor tissues.In this paper,we will explore the effects and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L affect the prognosis of HCC patients and HCC cell bioactivity,and the association between them.AIM To investigate the effects and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L on the HCC cell bioactivity and prognosis of HCC patients.METHODS In this study,we grouped HCC patients according to their immunohistochemistry results of ASH1L with pathological tissues,and retrospectively analyzed the prognosis of HCC patients.Furthermore,explored the roles and mechanisms of microRNA-142-3p and ASH1L by cellular and animal experiments,which involved the following experimental methods:Immunohistochemical staining,western blot,quantitative real-time-polymerase chain reaction,flow cytometric analysis,tumor xenografts in nude mice,etc.The statistical methods involved in this study contained t-test,one-way analysis of variance,theχ^(2)test,the Kaplan-Meier approach and the log-rank test.RESULTS In this study,we found that HCC patients with high expression of ASH1L possess a more recurrence rate as well as a decreased overall survival rate.ASH1L promotes the tumorigenicity of HCC and microRNA-142-3p exhibits reduced expression in HCC tissues and interacts with ASH1L through targeting the ASH1L 3′untranslated region.Furthermore,microRNA-142-3p promotes apoptosis and inhibits proliferation,invasion,and migration of HCC cell lines in vitro via ASH1L.For the exploration mechanism,we found ASH1L may promote an immunosuppressive microenvironment in HCC and ASH1L affects the expression of the cell junction protein zonula occludens-1,which is potentially relevant to the immune system.CONCLUSION Loss function of microRNA-142-3p induces cancer progression and immune evasion through upregulation of ASH1L in HCC.Both microRNA-142-3p and ASH1L can feature as new biomarker for HCC in the future. 展开更多
关键词 Hepatocellular carcinoma microrna-142-3p ASH1L Immune evasion Tumor immune microenvironment Apoptosis
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子痫前期患者血清miR-372-3p、miR-222-3p水平对不良妊娠结局的预测价值
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作者 王敏 周静 +2 位作者 马芮 刘星 杨雯静 《成都医学院学报》 2025年第3期428-432,共5页
目的探讨血清微小RNA-372-3p(miR-372-3p)、微小RNA-222-3p(miR-222-3p)水平预测子痫前期(PE)患者不良妊娠结局的价值。方法选取2021年2月至2024年2月于西北妇女儿童医院就诊的110例PE患者为PE组,依据其病情分为轻度PE组41例和重度PE组6... 目的探讨血清微小RNA-372-3p(miR-372-3p)、微小RNA-222-3p(miR-222-3p)水平预测子痫前期(PE)患者不良妊娠结局的价值。方法选取2021年2月至2024年2月于西北妇女儿童医院就诊的110例PE患者为PE组,依据其病情分为轻度PE组41例和重度PE组69例;选取同期于该院产检的108例正常孕妇为对照组,记录各组妊娠结局及相关临床资料。采用qRT-PCR法检测血清miR-372-3p、miR-222-3p水平;采用Logistic回归分析筛选影响因素;绘制ROC曲线分析指标预测妊娠结局的价值。结果PE组血清miR-372-3p、miR-222-3p水平高于对照组(P<0.05)。重度PE组血清miR-372-3p、miR-222-3p水平高于轻度PE组(P<0.05)。结局不良组24 h尿蛋白、收缩压、舒张压及血清miR-372-3p、miR-222-3p水平高于结局良好组(P<0.05)。miR-372-3p、miR-222-3p为PE患者不良妊娠结局的独立危险因素,二者联合预测PE患者不良妊娠结局的AUC高于miR-372-3p、miR-222-3p单独预测(Z=2.804、2.186,P<0.05)。结论PE患者血清miR-372-3p、miR-222-3p水平异常升高,与疾病进展和不良妊娠结局相关,二者联合后可有效预测PE患者不良妊娠结局。 展开更多
关键词 子痫前期 不良妊娠结局 微小RNA-372-3p 微小RNA-222-3p
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针刺调节miR-372-3p/TXNIP轴对缺血性脑卒中小鼠神经功能的影响研究
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作者 邱莹 黄翔 +1 位作者 吴迪 钱敏超 《中国中医急症》 2025年第9期1456-1461,共6页
目的研究针刺调节miR-372-3p/硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)轴对缺血性脑卒中小鼠神经功能的影响。方法将采用线栓法制备的缺血性脑卒中小鼠分为模型组、针刺组、针刺+miR-372-3p拮抗剂阴性对照组(针刺+NC组)、针刺+miR-372-3p拮抗剂组(针... 目的研究针刺调节miR-372-3p/硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)轴对缺血性脑卒中小鼠神经功能的影响。方法将采用线栓法制备的缺血性脑卒中小鼠分为模型组、针刺组、针刺+miR-372-3p拮抗剂阴性对照组(针刺+NC组)、针刺+miR-372-3p拮抗剂组(针刺+miR-372-3p组),并以只分离颈动脉、不插线和结扎的小鼠为假手术组。Y迷宫实验和跳台实验检测小鼠学习记忆能力;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测小鼠脑梗死面积;HE染色检测小鼠海马神经元形态;酶联免疫吸附分析(ELISA)检测小鼠脑组织中炎性因子的表达;定量反转录PCR(qRT-PCR)检测小鼠脑组织中miR-372-3p、TXNIP mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blotting)检测小鼠脑组织TXNIP蛋白表达;采用小鼠海马神经元细胞进行双萤光素酶实验检测miR-372-3p、TXNIP的靶向关系。结果与假手术组比较,模型组小鼠学习记忆能力变差,脑梗死面积增大,海马神经元发生显著病理损伤,脑组织中TXNIP mRNA、TXNIP蛋白、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达升高,而脑组织中miR-372-3p表达降低(P<0.05);与模型组比较,针刺组小鼠学习记忆能力增强,脑梗死面积减小,海马神经元病理损伤减轻,脑组织中TXNIP m RNA、TXNIP蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6表达降低,而脑组织中miR-372-3p表达升高(P<0.05);与针刺组或针刺+NC组比较,针刺+miR-372-3p组小鼠学习记忆能力变差,脑梗死面积增大,海马神经元发生显著病理损伤,脑组织中TXNIP mRNA、TXNIP蛋白、TNF-α、IL-1β、IL-6表达升高,而脑组织中miR-372-3p表达降低(P<0.05)。双萤光素酶报告显示miR-372-3p靶向负调控TXNIP的表达。结论针刺可能通过上调miR-372-3p靶向下调TXNIP的表达,进而减弱缺血性脑卒中小鼠的神经炎症反应,改善神经功能。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 针刺 miR-372-3p/硫氧还蛋白互作蛋白轴 神经炎症 小鼠
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miR-372-3p在膀胱癌组织中的表达及其对膀胱癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响 被引量:12
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作者 张伟 郭永连 +3 位作者 李国灏 舒博 陈琳 余家俊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期45-50,共6页
目的:检测miR-372-3p在膀胱癌组织和转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞中的表达,研究miR-372-3p对膀胱癌5637和T24细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:采集2016年3月至2017年1月武汉中心医院收治的6例膀胱癌患者癌及癌旁组织(距离肿瘤边缘... 目的:检测miR-372-3p在膀胱癌组织和转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞中的表达,研究miR-372-3p对膀胱癌5637和T24细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:采集2016年3月至2017年1月武汉中心医院收治的6例膀胱癌患者癌及癌旁组织(距离肿瘤边缘>5 cm),q PCR检测膀胱癌及癌旁组织miR-372-3p表达。采用脂质体转染法将miR-372-3p mimics或者miRNC转入膀胱癌5637和T24细胞。用q PCR和Western blotting检测转染miR-372-3p mimics和miR-NC膀胱癌细胞miR-372-3p和ATAD2 m RNA和蛋白E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期分布,MTT法和集落形成实验检测细胞增殖和集落形成能力,划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:膀胱癌组织miR-372-3p m RNA的表达显著低于癌旁组织(0.65±0.56 vs 1.76±0.34,P<0.01)。和转染miR-NC膀胱癌细胞相比,转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞的miR-372-3p m RNA表达显著增加,ATAD2 m RNA和蛋白的表达显著降低,E-cadherin蛋白表达上调,N-cadherin蛋白表达下调,细胞周期明显阻滞,细胞集落形成和增殖能力显著降低,细胞迁移数和侵袭数减少。结论:miR-372-3p的低表达可能与膀胱癌的发生发展有关,其通过靶向调控ATAD2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能成为膀胱癌生物治疗的新靶标。 展开更多
关键词 miR-372-3p 膀胱癌 5637细胞 T24细胞 增殖 迁移 侵袭
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miR-372-3p低表达对胰岛素抵抗细胞糖代谢的影响及机制 被引量:5
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作者 李伟 胡可胜 邓小凤 《山东医药》 CAS 2018年第37期23-25,共3页
目的探讨降低miR-372-3p表达对胰岛素抵抗细胞糖代谢的影响及机制。方法将人类肝癌细胞系Hep G2用高糖培养法建立胰岛素抵抗细胞模型,RT-PCR法检测胰岛素抵抗细胞(胰岛素抵抗组)及非胰岛素抵抗细胞(正常对照组) miR-372-3p表达,并用Mir... 目的探讨降低miR-372-3p表达对胰岛素抵抗细胞糖代谢的影响及机制。方法将人类肝癌细胞系Hep G2用高糖培养法建立胰岛素抵抗细胞模型,RT-PCR法检测胰岛素抵抗细胞(胰岛素抵抗组)及非胰岛素抵抗细胞(正常对照组) miR-372-3p表达,并用Mireap分析miR-372-3p的靶基因。将胰岛素抵抗细胞随机分为hsamiR-372-3p反义寡核苷酸(ASO)组、阴性对照(NC) ASO组,分别转染hsa-miR-372-3p ASO、NC ASO。用Western blotting法检测细胞内磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达。将胰岛素抵抗细胞随机分为阴性对照组、miR-372-3p ASO抑制组和二甲双胍处理组,用葡萄糖过氧化物酶法测定细胞葡萄糖消耗水平。结果胰岛素抵抗组miR-372-3p相对表达量高于对照组(P <0. 05)。Mireap分析显示miR-372-3p的靶基因有PI3K调节亚单位β、GLUT4、PKA和MAPK等。miR-372-3p ASO抑制组PI3K、GLUT4蛋白相对表达量均较NC ASO组高(P均<0. 05)。miR-372-3p ASO抑制组体外细胞葡萄糖消耗较NC ASO组高(P <0. 05),较二甲双胍处理组低,但差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论降低miR-372-3p表达可促进胰岛素抵抗细胞糖代谢,其机制可能与miR-372-3p抑制PI3K、GLUT4表达有关。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 微小RNA-372-3p 磷脂酰肌醇3激酶 葡萄糖转运蛋白4
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三阴性乳腺癌组织长链非编码RNA-P21、microRNA-17-3p的表达及其临床意义 被引量:13
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作者 刘凡 施文瑜 +1 位作者 刘益飞 王国华 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期16-22,共7页
目的探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21(LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达,分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手... 目的探讨三阴性乳腺癌组织中长链非编码RNA-P21(LncRNA-P21)、microRNA-17-3p(miR-17-3p)的表达,分析其与三阴性乳腺癌患者的临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年1月—2017年5月南通大学附属医院收治的106例三阴性乳腺癌患者经手术切除的癌组织和癌旁组织(距离癌组织至少5 cm)标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中LncRNA-P21和miR-17-3p的表达;收集患者的临床病理特征资料,分析LncRNA-P21、miR-17-3p表达与临床病理特征的关系;术后随访5年,采用Kaplan-Meier法绘制不同LncRNA-P21、miR-17-3p表达三阴性乳腺癌患者的生存曲线;Cox回归分析影响三阴性乳腺癌患者预后的因素。结果癌组织LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05);癌组织miR-17-3p mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21 mRNA相对表达量低于临床Ⅰ、Ⅱ期,无腋窝淋巴结转移和Ki-67<30%(P<0.05);临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移、Ki-67≥30%三阴乳腺癌组织中miR-17-3p mRNA相对表达量高于临床Ⅰ、Ⅱ期,无腋窝淋巴结转移和Ki-67阴性表达(P<0.05)。不同年龄、肿瘤直径、分化程度、绝经状态的三阴性乳腺癌患者LncRNA-P21、miR-17-3p mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。三阴性乳腺癌组织中LncRNA-P21表达与miR-17-3p表达呈负相关(r=-0.570,P<0.05)。LncRNA-P21低表达组5年无病生存期(DFS)和总生存期(OS)生存率低于LncRNA-P21高表达组(P<0.05),miR-17-3p高表达组5年DFS、OS生存率低于miR-17-3p低表达组(P<0.05)。单因素Cox回归分析结果显示,分化程度、TNM分期、腋窝淋巴结转移、LncRNA-P21、miR-17-3p是三阴性乳腺癌患者预后的影响因素(P<0.05);多因素Cox风险比例回归分析结果显示,腋窝淋巴结转移、miR-17-3p是三阴性乳腺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05),LncRNA-P21是保护因素(P<0.05)。结论三阴性乳腺癌组织LncRNA-P21表达下调,miR-17-3p表达上调,且与乳腺癌Ki-67≥30%、临床Ⅲ期、腋窝淋巴结转移及预后不良有关。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 长链非编码RNA-p21 microrna-17-3p 病理 预后
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microRNA-219-2-3p在胃癌中的表达及其作用机制初探 被引量:5
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作者 金锦莲 吴发明 +2 位作者 周海燕 谢晓晶 王新宇 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期1729-1731,共3页
目的探讨microRNA-219-2-3p(miR-219-2-3p)与胃癌的相关性及机制。方法运用实时聚合酶链反应(real timeRT PCR)检测82份配对的胃癌组织和周围正常组织样本中的miR-219-2-3p的表达水平。在胃癌细胞株MGC803中过表达miR-219-2-3p后,测定... 目的探讨microRNA-219-2-3p(miR-219-2-3p)与胃癌的相关性及机制。方法运用实时聚合酶链反应(real timeRT PCR)检测82份配对的胃癌组织和周围正常组织样本中的miR-219-2-3p的表达水平。在胃癌细胞株MGC803中过表达miR-219-2-3p后,测定细胞增殖活性,并在细胞株和胃癌组织标本中采用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定与肿瘤增殖相关的蛋白ERK1/2表达水平。结果 miR-219-2-3p在晚期胃癌组织中的表达量下降,差异有统计学意义(P<0.05)。在胃癌细胞株MGC803中过表达miR-219-2-3p后细胞增殖受显著抑制(P<0.05)。过表达miR-219-2-3p后,MGC803细胞中的ERK磷酸化水平显著下降,总ERK表达量不变。在组织标本中,胃癌组织的ERK磷酸化(p-ERK)水平明显高于周围癌旁组织。结论 miR-219-2-3p可能通过参与调控ERK1/2信号通路而在胃癌发生和发展中起抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-219-2-3p 细胞分裂
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MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系 被引量:5
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作者 张伟 蔡振花 +5 位作者 周瑞轻 刘小慧 江麒麟 刘红波 董永杰 冯运章 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期17-22,共6页
目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量,同时分析两者与胃癌患者临床病理特征的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析miR-122-5p、miR-133a-3p的表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量低于健康体检者(P<0.05);有淋巴结转移、分化程度低、浸润至浆膜层的患者血清miR-122-5p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度、浸润至黏膜下各层的患者(P<0.05);有淋巴结转移、低分化程度、浸润至浆膜层、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的患者血清miR-133a-3p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度,浸润至黏膜下各层,TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-122-5p低表达胃癌患者5年生存率低于miR-122-5p高表达胃癌患者(P<0.05);miR-133a-3p低表达胃癌患者的5年生存率低于miR-133a-3p高表达胃癌患者(P<0.05)。结论胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量呈低表达,并且两者与胃癌的恶性程度和患者不良预后密切相关,血清miR-122-5p、miR-133a-3p可能成为胃癌患者预后预测的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-122-5p microrna-133a-3p 临床病理特征 预后
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MicroRNA-144-3p对肝癌细胞增殖、侵袭转移的影响及其机制 被引量:10
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作者 赵立涵 刘立 +2 位作者 蒋波 甄根深 李娜 《临床和实验医学杂志》 2018年第14期1493-1496,共4页
目的探讨microRNA-144-3p(miR144-3p)对Hep G2细胞侵袭、凋亡的影响及机制。方法选取对数生长期的Hep G2细胞,加入不同浓度的miR144-3p(1μM、10μM、20μM)进行处理,同时设置对照组(加入miRNA无关序列)。培养48 h后检测细胞增殖、侵袭... 目的探讨microRNA-144-3p(miR144-3p)对Hep G2细胞侵袭、凋亡的影响及机制。方法选取对数生长期的Hep G2细胞,加入不同浓度的miR144-3p(1μM、10μM、20μM)进行处理,同时设置对照组(加入miRNA无关序列)。培养48 h后检测细胞增殖、侵袭、凋亡情况,并进行肝癌衍生生长因子(HDGF)的表达检测。结果 miR144-3p处理48 h后,miR144-3p能够呈剂量依赖性地抑制细胞增殖,能够呈剂量依赖性地增加细胞凋亡指数,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。miR144-3p在1~20μM浓度范围能显著抑制Hep G2细胞的穿透能力,呈剂量依赖关系(P<0.05)。miR144-3p能够呈剂量依赖性抑制HDGF的mRNA与蛋白表达水平,其表达水平显著低于对照组(P<0.05)。结论 miR144-3p能抑制肝癌Hep G2细胞的增殖、侵袭与转移,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制HDGF基因与蛋白表达有关。 展开更多
关键词 肝癌 microrna-144-3p HEpG2细胞 侵袭转移 肝癌衍生生长因子
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难治性癫痫患者神经调节蛋白1、microRNA-221-3p表达与认知功能的关系 被引量:7
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作者 庄婵芝 潘志雄 +4 位作者 何素丽 陈翔 谢泽娟 陈嘉迪 何文贞 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第22期50-54,共5页
目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本... 目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本院70例健康体检者纳入对照组。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估难治性癫痫患者的认知功能受损程度,并根据MoCA总分将难治性癫痫患者分为CD组40例和非CD组24例。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-221-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清NRG1水平,并采用Pearson相关性分析探讨miR-221-3p、NRG1水平与MoCA总分的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨难治性癫痫患者发生CD的影响因素。结果难治性癫痫组血清miR-221-3p、NRG1水平高于对照组、药物控制良好组,差异有统计学意义(P<0.05);CD组血清miR-221-3p、NRG1水平高于非CD组,MoCA总分、空间与执行能力评分、语言评分、延迟记忆评分、计算力与定向评分低于非CD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,难治性癫痫CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平均与MoCA总分呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NRG1、miR-221-3p均为难治性癫痫患者发生CD的影响因素(P<0.05)。结论难治性癫痫合并CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平较高,且miR-221-3p、NRG1均与难治性癫痫患者CD进程密切相关。 展开更多
关键词 难治性癫痫 神经调节蛋白1 microrna-221-3p 认知功能 相关性
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幽门螺杆菌感染性胃癌组织microRNA-17、microRNA-490-3p的表达及其与临床病理特征和预后的关系 被引量:9
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作者 李丽萍 贾筠 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期23-29,共7页
目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染性胃癌组织microRNA-17(miR-17)、microRNA-490-3p(miR-490-3p)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2012年1月—2014年6月东莞市人民医院收治的146例Hp阳性及阴性胃癌患者的癌组织及癌旁组织。... 目的探讨幽门螺杆菌(Hp)感染性胃癌组织microRNA-17(miR-17)、microRNA-490-3p(miR-490-3p)的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法选取2012年1月—2014年6月东莞市人民医院收治的146例Hp阳性及阴性胃癌患者的癌组织及癌旁组织。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测癌组织及癌旁组织中miR-17、miR-490-3p的表达。分析Hp阳性胃癌患者癌组织miR-17、miR-490-3p表达与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线评估miR-17、miR-490-3p表达与Hp阳性胃癌患者术后5年生存率的关系;Cox回归模型分析影响Hp阳性胃癌患者预后的危险因素。结果Hp阳性及阴性胃癌患者的癌组织中miR-17 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05),miR-490-3p mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05)。经Pearson相关分析,miR-17和miR-490-3p在不同胃癌组织中的表达无相关性(P>0.05)。不同肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期的Hp阳性胃癌患者癌组织miR-17 mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同肿瘤直径、淋巴结转移及远处转移的Hp阳性胃癌患者癌组织miR-490-3p mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,miR-17高表达Hp阳性胃癌组、miR-490-3p低表达Hp阳性胃癌组术后5年生存率均分别低于miR-17低表达Hp阳性胃癌组、miR-490-3p高表达Hp阳性胃癌组(P<0.05)。有远处转移、较高的TNM分期、miR-17高表达、miR-490-3p低表达是影响Hp阳性胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论Hp阳性胃癌组织miR-17表达增加、miR-490-3p表达降低,与患者较差临床病理参数和不良预后有关,监测癌组织miR-17、miR-490-3p表达可能有利于患者的预后判断。 展开更多
关键词 胃癌 幽门螺杆菌 microrna-17 microrna-490-3p 预后 临床病理特征
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MicroRNA-338-3p通过下调SMO表达抑制结直肠癌细胞的侵袭与迁移 被引量:2
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作者 区文弢 孙凯 +2 位作者 吴承堂 雷尚通 张晓槟 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期25-30,共6页
目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实... 目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达状况,运用半定量RT-PCR及Westernblot分析Smoothened(SMO)mRNA及蛋白表达状况,Transwell侵袭、迁移实验检测转染前后细胞体外侵袭迁移能力;在经anti-SMO-siRNA预先处理的SW480细胞中转染miR-338-3p-inhibitor,检测转染细胞中SMO蛋白的表达变化以及侵袭能力的改变。结果通过生物信息学网站预测SMO可能是miR-338-3p的作用靶基因;SW620细胞中miR-338-3p表达水平较SW480细胞减低,而SMO蛋白增高。转染pre-miR-338-3p至SW620细胞,miR-338-3p表达上调,SMO蛋白表达降低,且肿瘤细胞的侵袭及迁移能力下降;而转染miR-338-3p-inhibitor至SW480细胞后,miR-338-3p表达下降,SMO蛋白表达上升,肿瘤细胞侵袭、迁移能力增强,且此种增强效应可被an-ti-SMO-siRNA所部分逆转,说明miR-338-3p确实是通过抑制SMO而发挥抗癌作用。结论 MiR-338-3p通过下调SMO表达而抑制结直肠癌细胞侵袭与迁移。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-338-3p SMO SHH信号通路 侵袭 迁移
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健脾清热活血方介导microRNA-222-3p调控TGF-β1、CDKN1B/p27表达防治结肠癌的离体研究 被引量:8
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作者 张涛 张馨月 +2 位作者 卢鑫 黄晓燕 林逸婷 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1863-1867,共5页
目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉... 目的通过检测健脾清热活血方基于microRNA-222-3p调控TGF-β通路对结肠癌HCT-116细胞迁移的变化以及TGF-β1、CDKN1B/p27的表达,探讨该方防治结肠癌的效用及可能机制。方法参照血清药理学方法,制备大鼠含药血清。应用RNAi技术构建稳定沉默miR-222结肠癌HCT-116细胞系。离体实验随机分为空白对照组(HCT-116)、阴性对照组(NC)、阳性对照组(miR-222-3p沉默)、治疗组(miR-222-3p沉默+低/中/高剂量中药)。Transwell法检测细胞迁移能力,应用现代分子生物学技术检测TGF-β1、CDKN1B/p27表达。结果成功构建TUD-hsa-miR-222-3p Inhibitor慢病毒载体并获得miR-222稳定沉默的结肠癌HCT-116细胞系,与正常组及NC组对比,miR-222沉默后HCT-116细胞迁移能力明显下降,有显著差异(P<0.05);在治疗组中HCT-116细胞迁移数目较sh-miR222-3p组减少更为显著(P<0.05)。对于TGF-β1/CDKN1B/p27mRNA表达,与阳性对照组比较,治疗组CDKN1B/p27mRNA表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。WB结果显示,与阳性对照组相比,治疗组TGF-β1/CDKN1B/p27蛋白表达均下调,有统计学意义(P<0.05)。结论健脾清热活血方可能通过抑制miRNA-222-3p减少TGF-β1、CDKN1B/p27表达,降低细胞迁移能力,诱导结肠癌细胞凋亡,达到防治结肠癌的效用。 展开更多
关键词 健脾清热活血方 microrna-222-3p RNA干扰 转化生长因子-Β1 结肠癌
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microRNA-22-3p低表达上调幼年哮喘气道重塑大鼠的NK1R表达 被引量:2
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作者 宋建刚 高永伟 +3 位作者 刘庆 贾鲲鹏 庞随军 李元霞 《西部医学》 2021年第1期4-9,共6页
目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照... 目的探讨幼年哮喘气道重塑大鼠的microRNA-22-3p(miR-22-3p)表达水平和神经激肽受体1(NK1R)表达水平的相关性。方法将48只Wistar大鼠分为对照组、模型组、模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组。对照组注射生理盐水并吸入空气;模型组应用卵白蛋白(OVA)雾化吸入法建立哮喘大鼠模型;模型+mimic组、模型+mimic-NC组、模型+inhibitor组、模型+inhibitor-NC组,在大鼠每次激发前1 h内分别尾静脉注射1 mL的mimic、mimic-NC、inhibitor、inhibitor-NC。H&E染色法观察小鼠气道重塑变化,RT-qPCR检测miR-22-3p的水平变化。荧光素酶基因报告检测方法在大鼠气道平滑肌细胞RASMCs中验证miR-22-3p靶向NK1R。使用Western blot和免疫组织化学法检测NK1R的表达水平。结果与对照组比较,模型组发生明显的气道重塑现象,且气道组织中miR-22-3p水平降低(P<0.05)。在RASMCs细胞中,NK1R的3′UTR和miR-22-3p的直接结合,导致荧光素酶活性强度降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组的NK1R的mRNA和蛋白的表达水平明显上调(P<0.01)。与模型+mimic-NC组比较,模型+mimic组miR-22-3p的水平上调,而NK1R的表达下调(均P<0.05)。与模型+inhibitor-NC组比较,模型+inhibitor组miR-22-3p的水平下调,而NK1R水平上调(均P<0.05)。结论哮喘诱发大鼠气道NK1R的表达增加,miR-22-3p直接靶向调节抑制哮喘大鼠气道重塑中NK1R的表达水平,下调miR-22-3p解除对NK1R的抑制从而上调NK1R水平。 展开更多
关键词 microrna-22-3p 幼年大鼠 哮喘 神经激肽受体1 气道平滑肌重塑
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长链非编码RNA SBF2-AS1通过miR-372-3p/CDK6轴调控肝癌细胞侵袭及增殖 被引量:1
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作者 宋巍 徐蓉 +5 位作者 李玉鹏 李智德 王锦国 马超 孟塬 陈雄 《肿瘤防治研究》 CAS 2023年第7期666-674,共9页
目的探讨长链非编码RNA SET结合因子2反义RNA1(lnc RNA SBF2-AS1)调控mi R-372-3p/细胞分裂蛋白激酶6(CDK6)轴对肝癌细胞侵袭及增殖的影响。方法以Bel7402和SK-hep1细胞为研究对象,上调或下调SBF2-AS1、miR-372-3p及CDK6表达水平,实时... 目的探讨长链非编码RNA SET结合因子2反义RNA1(lnc RNA SBF2-AS1)调控mi R-372-3p/细胞分裂蛋白激酶6(CDK6)轴对肝癌细胞侵袭及增殖的影响。方法以Bel7402和SK-hep1细胞为研究对象,上调或下调SBF2-AS1、miR-372-3p及CDK6表达水平,实时荧光定量PCR及Western blot检测细胞中miR-372-3p及CDK6表达水平。双荧光素酶报告基因实验分别验证SBF2-AS1和miR-372-3p、miR-372-3p和CDK6靶向关系。CCK-8、集落形成实验、Transwell、细胞周期实验及流式细胞术分析细胞增殖、集落形成、迁移/侵袭能力、细胞周期活动及凋亡。结果SBF2-AS1在肝癌细胞中高表达(P<0.05)。敲降SBF2-AS1后,Bel7402和SK-hep1细胞侵袭、增殖能力降低(P<0.05)。敲降miR-372-3p后,Bel7402细胞侵袭、增殖能力升高,同时敲降SBF2-AS1后,可反转上述效应(P<0.05)。miR-372-3p靶向CDK6并抑制后者的表达,过表达SFB2-AS1,可反转上述效应(P<0.05)。过表达CDK6,可以逆转过表达miR-372-3p对Bel7402细胞侵袭及增殖的抑制。结论lncRNA SBF2-AS1通过miR-372-3p正向调控CDK6的表达,改变肝癌细胞的周期活动,影响肝癌细胞的增殖、侵袭能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA SET结合因子2反义RNA1 miR-372-3p 细胞分裂蛋白激酶6 肝癌
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LncRNA MALAT-1靶向microRNA-370-3p调节Akt通路对肺癌细胞生物学行为影响的机制研究 被引量:1
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作者 李亮 李建忠 +2 位作者 张丹杰 马跃峰 李少民 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期38-47,共10页
目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT... 目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT-1(转染si-MALAT-1)或过表达miR-370-3p(转染miR-370-3p mimic),抑制LncRNA MALAT-1和干扰miR-370-3p(同时转染si-MALAT-1和antimiR-370-3p),观察A549细胞的生物学行为和Akt通路蛋白的表达。qRT-PCR检测LncRNA MALAT-1、miR-370-3p mRNA的表达;MMT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;Western blotting检测Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白相对表达量。构建MALAT-1野生型(MALAT-1WT_1uc)与突变型(MALAT-1MUT_1uc)荧光素酶报告基因质粒并分别与miR-370-3p、miR-NC转染至A549细胞,观察荧光结合强度并检测miR-370-3p的表达。结果 抑制LncRNA MALAT-1或过表达miR-370-3p能抑制A549细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡,减少A549细胞活性(P <0.05),并下调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。与单纯抑制LncRNA MALAT-1比较,抑制LncRNA MALAT-1并干扰miR-370-3p能促进A549细胞迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,增加A549细胞活性(P <0.05),并上调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。TargetScan靶基因预测发现LncRNA MALAT-1与miR-370-3p存在结合位点,荧光素酶报告基因实验验证发现,与MALAT-1WT_1uc+Control组和MALAT-1WT_1uc+miR NC组比较,MALAT-1WT_1uc+miR-370-3p组相对荧光强度下降(P <0.05),MALAT-1MUT_1uc+miR-370-3p荧光强度无变化(P>0.05),进一步qRT-PCR结果发现,与Control组比较,si-MALAT-1组的miR-370-3p mRNA相对表达量升高(P <0.05),与si-MALAT-1组比较,si-MALAT-1+anti-miR-370-3p组的miR-370-3pmRNA相对表达量降低(P <0.05)。结论LncRNA MALAT-1可以靶向负调控miR-370-3p。抑制LncRNA MALAT-1可以上调miR-370-3p的表达,抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,促进A549细胞的凋亡,并下调Akt通路蛋白的磷酸化。 展开更多
关键词 肺癌 microrna-370-3p 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1 荧光素酶报告基因实验 AKT
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