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MicroRNA-34a通过调控Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病进展的机制探讨
1
作者 刘虹 张玥玥 +4 位作者 王一琳 王彩丽 王晓敏 毛敏 李燕 《天津医药》 2025年第8期785-790,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p in... 目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p inhibitor组及对照组、miR-34a-5p inhibitor+Wnt抑制剂XAV-939组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞中miR-34a-5p表达水平;CCK8检测细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;双萤光素酶报告实验检测p53与miR-34a-5p及miR-34a-5p与Wnt1的靶向关系;Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果在MEC-1细胞中:①p53激动剂组中miR-34a表达升高,增殖受抑制(P<0.05);双萤光素酶报告实验证实miR-34a-5p与p53之间呈现负调控相关性。②miR-34a-5p mimic组miR-34a-5p表达升高,增殖受抑制,迁移能力降低,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达下调(P<0.05);miR-34a-5p inhibitor组miR-34a-5p表达降低,增殖升高,迁移能力增强,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达上调(P<0.05)。③miR-34a-5p和Wnt1呈现负调控相关性。④与miR-34a-5p inhibitor组相比,XAV-939组的miR-34a-5p表达升高,迁移细胞数减少,β-catenin和Cyclin D1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论miR-34a在CLL中扮演着抑癌基因的角色,过表达miR-34a可抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低细胞的增殖活性和迁移能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 B细胞 WNT信号通路 肿瘤抑制蛋白质P53 细胞增殖 microrna-34a
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电针调控microRNA-34a对缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞分化的影响 被引量：9
2
作者 柳维林 郑薏 +4 位作者 金婷婷 张宇豪 施丹 陈立典 陶静 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2019年第2期162-171,共10页
目的探讨电针曲池和足三里是否是通过调控microRNA-34a (miR-34a)促进缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区神经干细胞分化为星形胶质细胞。方法将108只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组再分为3 d、7 d、14 d 3个时间... 目的探讨电针曲池和足三里是否是通过调控microRNA-34a (miR-34a)促进缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区神经干细胞分化为星形胶质细胞。方法将108只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组再分为3 d、7 d、14 d 3个时间点,每个时间点12只。另取16只大鼠随机分为电针^+二甲基亚砜(DMSO)组(n=8)和电针^+miR-34a抑制剂组(n=8)。构建大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)致局灶性脑缺血模型。电针组造模后第2天进行电针患侧肢体曲池(LI11)、足三里(ST36),疏密波1/20 Hz,以肢体轻轻抖动为度,每次30 min,每天1次,共14 d。同时,造模后第2天至第14天各组大鼠腹腔注射5-溴代-2'-脱氧尿苷(BrdU),每天2次,每次注射间隔8h;DMSO溶解液、miR-34a抑制剂在造模前进行侧脑室注射;免疫荧光染色检测BrdU、巢蛋白(Nestin)与神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共定位情况;逆转录实时定量聚合酶链反应检测缺血周边区miR-34a相对表达量。结果电针组各时间点Longa神经行为学评分低于模型组(t> 2.084, P <0.05)。模型组患侧肢体的爪印面积(右前爪、右后爪)、最大压强(右前爪、右后爪)与同时间假手术组比较均下降(P <0.05),模型组随着时间延长右后爪印面积增加(P <0.05)。电针组患侧肢体的爪印面积(右前爪、右后爪)与同时间模型组比较增加(P <0.05)。电针干预3 d和7 d后,电针组患侧最大压强(右前爪、右后爪)与模型组比较无显著性差异(P>0.05);14 d后电针组大于模型组(P <0.05)。电针干预3 d至7 d,电针组右后爪印面积与右前最大压强逐渐增加,一定程度上呈时间依赖性(P <0.05)。模型组和电针组缺血周围区均表达Nestin^+/GFAP^+细胞和BrdU^+/GFAP^+细胞,且电针组3 d、7 d和14 d后Nestin^+/GFAP^+、BrdU^+/GFAP^+双阳性共标的细胞较模型组表达均增加(t> 3.292, P <0.05),且在7 d达到峰值。脑缺血7 d后模型组缺血周边区miR-34a的表达较假手术组明显增加(P <0.01);而电针组和^+DMSO组miR-34a表达进一步升高(P <0.05);电针^+miR-34a抑制组miR-34a表达和BrdU^+/GFAP^+细胞数较电针组均减少(P <0.05)。结论电针曲池和足三里可以促进缺血再灌注损伤大鼠缺血周边区神经干细胞分化为星形胶质细胞,可能是通过调控miR-34a的表达。 展开更多
关键词 缺血再灌注损伤 电针 microrna-34a 神经干细胞 分化 大鼠
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MicroRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义 被引量：4
3
作者 于泳 李霄 +8 位作者 周亮 窦科峰 李小磊 阮柏 张卓超 戴斌 汪建林 杨西胜 王德盛 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第14期1943-1952,共10页
目的:观察microRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织的表达,探讨其与HCC发生、发展、临床病理特征的关系及可能的临床意义.方法:在132例HCC组织及癌旁组织、49例正常肝脏组织中应用实时荧光定量PCR法检测mic... 目的:观察microRNA-34a、Notch1在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织的表达,探讨其与HCC发生、发展、临床病理特征的关系及可能的临床意义.方法:在132例HCC组织及癌旁组织、49例正常肝脏组织中应用实时荧光定量PCR法检测microRNA-34a的表达和免疫组织化学染色检测Notch 1表达.结果:HCC组织中microRNA-34a表达水平明显低于癌旁组织(2.57±0.71,P=0.003)及正常肝组织(8.65±0.21,P<0.001),在转移性癌组织中microRNA-34a表达水平明显低于非转移性癌组织(1.34±0.13,P=0.014),差异均有统计学意义.Notch1的免疫组织化学染色结果:HCC组织中Notch1表达水平明显高于癌旁组织(3.12±0.67,P=0.001)及正常肝组织(4.65±0.14,P<0.001),转移性癌组织高于非转移性癌组织(2.14±0.37,P=0.008),差异有统计学意义.MicroRNA-34a与Notch1在HCC及癌旁组织中均成负相关,相关系数分别为(r=-0.259,P=0.003)、(r=-0.274,P=0.002),两者在HCC组织中的表达与患者年龄、性别、肝功能、肿瘤部位、是否合并肝硬变、是否伴随肝炎病毒感染及甲胎蛋白(α-fetoprotein,αFP或AFP)含量无相关性(P>0.05),而与肿瘤恶性程度、肿瘤个数、肿瘤体积、淋巴结转移、浸润深度、TNM分期密切相关(P<0.05).Kaplan-Meier分析显示:microRNA-34a低表达、Notch1高表达组患者术后3年生存率(11.3%),明显低于microRNA-34a高表达、Notch1低表达组(34.7%),差异具有统计学意义(χ2=38.163,P=0.011).结论:MicroRNA-34a在HCC组织中较癌旁和正常肝脏组织明显减低,其通过逆向调节靶蛋白Notch1参与肿瘤肿瘤恶性行为;检测microRNA-34a及Notch1在HCC组织中的表达情况,对HCC的临床诊断、治疗及预后判断有潜在的重要意义. 展开更多
关键词 肝脏肿瘤 肝细胞肝癌 癌旁组织 microrna-34a NOTCH1 生存分析 免疫组织化学
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MicroRNA-34a抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的研究 被引量：4
4
作者 王教 陈林华 +1 位作者 周仲楼 陈晓燕 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2011年第5期498-502,共5页
该文采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法将microRNA-34a转染入体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5。应用BrdU法、细胞平板克隆形成实验检测转染microRNA-34a后对细胞增殖的影响,发现M23和SP6.5细胞增殖明显被抑制(P<0.0... 该文采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的方法将microRNA-34a转染入体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5。应用BrdU法、细胞平板克隆形成实验检测转染microRNA-34a后对细胞增殖的影响,发现M23和SP6.5细胞增殖明显被抑制(P<0.01);并利用流式细胞技术检测转染microRNA-34a后细胞周期的变化,发现细胞停滞于G_1期;同时检测转染microRNA-34a后细胞caspase-3/7酶的活性,发现无明显改变。另外,Real-time PCR检测表明阿霉素处理后M23、SP6.5细胞中microRNA-34a的表达量上调(P<0.01)。用阿霉素处理转染microRNA-34a的M23、SP6.5细胞,检测caspase-3/7酶活性的改变,发现caspase-3/7酶活性显著增加(P<0.01)。本研究表明microRNA-34a通过抑制细胞周期来抑制体外培养的人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,能够增加细胞对阿霉素的敏感性,但不直接诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 microrna-34a 葡萄膜黑色素瘤 增殖 细胞周期 阿霉素
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卡铂联合MicroRNA-34a抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖和肿瘤生长的作用研究 被引量：4
5
作者 胡辅华 刘丽林 +1 位作者 季建 于金国 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第6期528-531,共4页
目的探讨卡铂联合MicroR NA-34a对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的增殖抑制作用和对裸鼠异位瘤的生长抑制作用。方法将HXO-RB44细胞分成卡铂干预组、MicroR NA-34a干预组、联合干预组和生理盐水对照组。MTT检测卡铂联合MicroR NA-34a干预... 目的探讨卡铂联合MicroR NA-34a对视网膜母细胞瘤HXO-RB44细胞的增殖抑制作用和对裸鼠异位瘤的生长抑制作用。方法将HXO-RB44细胞分成卡铂干预组、MicroR NA-34a干预组、联合干预组和生理盐水对照组。MTT检测卡铂联合MicroR NA-34a干预对HXO-RB44细胞的毒性。流式细胞技术检测卡铂联合MicroR NA-34a干预诱导HXO-RB44细胞凋亡和对细胞周期的影响。构建裸鼠视网膜母细胞瘤异位肿瘤模型,检测卡铂联合MicroR NA-34a干预对裸鼠肿瘤的生长抑制能力。结果给药48 h后,HXO-RB44细胞的存活率:分别为卡铂干预组(58.5±4.4)%、MicroR NA-34a干预组(64.3±3.1)%、联合干预组(27.8±2.2)%,差异有统计学意义(P<0.01);HXO-RB44细胞的凋亡率:分别为卡铂干预组(13.5±1.4)%、MicroR NA-34a干预组(8.2±1.1)%、联合干预组(31.5±2.2)%,差异有统计学意义(P<0.01);联合干预组较生理盐水对照组S期细胞增加,G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞减少(均为P<0.01);荷瘤裸鼠治疗实验结果显示卡铂干预组、MicroR NA-34a干预组和联合干预组的肿瘤生长抑制率分别为44.6%±1.3%、36.5%±1.3%和75.3%±1.5%,与生理盐水对照组差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论卡铂联合MicroR NA-34a能够有效抑制HXO-RB44细胞的增殖和肿瘤的生长。 展开更多
关键词 卡铂 microrna-34a 视网膜母细胞瘤
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MicroRNA-34a对小鼠气道平滑肌细胞增殖和ORMDL3表达的影响 被引量：3
6
作者 赵龙 王宁 +1 位作者 石晓岚 刘翠翠 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第8期6-12,共7页
目的探讨支气管哮喘小鼠模型中micro RNA-34a(mi R-34a)对气道平滑肌细胞(ASMC)增殖与血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响。方法以卵清蛋白(OVA)诱导复制的小鼠哮喘模型和培养的ASMC为研究对象,筛选与ORMDL3密切相关的mi RNA;利用m... 目的探讨支气管哮喘小鼠模型中micro RNA-34a(mi R-34a)对气道平滑肌细胞(ASMC)增殖与血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响。方法以卵清蛋白(OVA)诱导复制的小鼠哮喘模型和培养的ASMC为研究对象,筛选与ORMDL3密切相关的mi RNA;利用mi R-34a-mimic使mi R-34a过表达;用苏木精-伊红染色和MTT法探究其对ASMC增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测ORMDL3的表达变化。结果 OVA诱导下小鼠气道组织中mi R-34a被抑制(P<0.05)。mi R-34a-mimic可减少哮喘小鼠ASMC异常增殖(P<0.05);mi R-34a-mimic抑制ASMC在490nm下的光密度值和相对细胞活性(P<0.05);mi R-34a-mimic下调哮喘小鼠气道组织中ORMDL3的表达,并抑制体外培养ASMC中ORMDL3的表达(P<0.05)。结论 mi R-34a可抑制ASMC的增殖和ORMDL3基因表达,为今后哮喘发病机制的研究提供新的思路。 展开更多
关键词 microrna-34a 气道平滑肌细胞 血清类黏蛋白1样蛋白3
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microRNA-34a靶向ZEB1抑制三阴性乳腺癌细胞血管生成拟态 被引量：1
7
作者 康乐 陶雅军 +2 位作者 张媛媛 陈英杰 方明 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期424-428,共5页
目的探讨microRNA-34a(miR-34a)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231血管生成拟态的影响和分子机制。方法以脂质体为载体,将miR-34a模拟物转染入MDA-MB-231细胞,采用实时定量PCR检测miR-34a在MDA-MB-231细胞中的过表达情况;采用双荧光素酶报... 目的探讨microRNA-34a(miR-34a)对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231血管生成拟态的影响和分子机制。方法以脂质体为载体,将miR-34a模拟物转染入MDA-MB-231细胞,采用实时定量PCR检测miR-34a在MDA-MB-231细胞中的过表达情况;采用双荧光素酶报告基因分析系统检测miR-34a和靶基因ZEB1的靶向结合作用;采用成管实验和Western blotting方法检测过表达miR-34a和敲低ZEB1对MDA-MB-231细胞血管生成拟态形成能力的影响。采用Western blotting方法检测敲低ZEB1对上皮-间质转化标志性分子E-cadherin、Vimentin的影响。结果miR-34a模拟物转染MDA-MB-231细胞后,miR-34a的表达明显上调(P<0.05)。过表达miR-34a显著抑制MDA-MB-231细胞的成管能力和血管生成拟态关键因子的表达。miR-34a靶向调控ZEB1。敲低ZEB1显著抑制MDA-MB-231细胞的成管能力和上皮-间质转化过程。结论miR-34a通过靶向抑制ZEB1抑制三阴性乳腺癌细胞血管生成拟态。 展开更多
关键词 microrna-34a ZEB1 三阴性乳腺癌 血管生成拟态
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microRNA-21和microRNA-34a在新疆维吾尔族寻常型银屑病患者皮肤组织中的表达及意义 被引量：2
8
作者 王慧琴 黄睿 +1 位作者 陈春丽 吴卫东 《中华实用诊断与治疗杂志》 2016年第12期1222-1224,共3页
目的探讨维吾尔族寻常型银屑病患者microRNA(miR)-21与miR-34a的表达及意义。方法新疆维吾尔族寻常型银屑病患者10例为银屑病组,健康维吾尔族人群10例为正常组,采用实时荧光定量PCR法分别检测miR-21和miR-34a在银屑病组皮损组织、皮损... 目的探讨维吾尔族寻常型银屑病患者microRNA(miR)-21与miR-34a的表达及意义。方法新疆维吾尔族寻常型银屑病患者10例为银屑病组,健康维吾尔族人群10例为正常组,采用实时荧光定量PCR法分别检测miR-21和miR-34a在银屑病组皮损组织、皮损旁组织及正常组中表达水平。结果miR-21在银屑病组皮损组织表达(0.134±0.106)、皮损旁组织(0.116±0.094)表达水平均高于正常组(0.044±0.024),差异有统计学意义(P<0.05),皮损组织和皮损旁组织miR-21表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);银屑病组皮损组织miR-34a的表达水平(0.178±0.193)高于正常组(0.030±0.029)(P<0.05),皮损旁组织miR-34a表达水平(0.069±0.065)与皮损组织、正常组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-21和miR-34a高表达在新疆维吾尔族寻常型银屑病发病中起重要作用。 展开更多
关键词 银屑病 维吾尔族 microrna-21 microrna-34a
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MicroRNA-34a通过多向调控促癌基因抑制肾癌细胞生长 被引量：1
9
作者 张长存 周立斌 +2 位作者 莫仁 刘勇超 凡杰 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第18期3445-3447,3460,共4页
目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)在肾癌细胞中的生物学作用及调控机制。方法:应用miR-34amimics在体外转染769P,786-O和Caki-1细胞;运用qRT-PCR检测miR-34a在三个细胞株的相对表达情况,以及转染后癌基因mRNA的表达情况;观察miR-34a对细... 目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)在肾癌细胞中的生物学作用及调控机制。方法:应用miR-34amimics在体外转染769P,786-O和Caki-1细胞;运用qRT-PCR检测miR-34a在三个细胞株的相对表达情况,以及转染后癌基因mRNA的表达情况;观察miR-34a对细胞生长的影响。结果:769P,786-O和Caki-1细胞中miR-34a在786-O中表达最低,769P次之,Caki-1表达最高;利用miR-34a mimics升高769P,786-O和Caki-1细胞miR-34a,发现三个细胞株多个癌基因mRNA表达不同程度的降低(P<0.05)及生长和集聚能力的降低。结论:miR-34a可能通过调控多个癌基因表达在肾癌中起抑癌作用。miR-34a mimics可抑制肾癌细胞的生长,因此miR-34a有可能作为肾癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 microrna-34a 癌基因 肾癌 肾癌细胞 细胞生长
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MicroRNA-34用于肿瘤治疗的基础研究 被引量：1
10
作者 李征 向开敏 +1 位作者 彭淑平 李桂源 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2014年第1期67-73,共7页
MicroRNA-34(miR-34)调节多条信号通路上的靶基因发挥阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,抑制肿瘤干细胞、抑制转移以及化疗增敏的作用,从而抑制肿瘤的生长与转移。越来越多的证据表明,miR-34有可能成为肿瘤治疗的新靶点。本文综述了miR-34家... MicroRNA-34(miR-34)调节多条信号通路上的靶基因发挥阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,抑制肿瘤干细胞、抑制转移以及化疗增敏的作用,从而抑制肿瘤的生长与转移。越来越多的证据表明,miR-34有可能成为肿瘤治疗的新靶点。本文综述了miR-34家族的生物学功能及其分子机制,以及在动物肿瘤模型中开展miR-34相关基因治疗的前期研究,揭示了miR-34用于肿瘤临床治疗的可能性。 展开更多
关键词 microrna-34 肿瘤 基因治疗
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载microRNA-34a脂质体靶向治疗肺癌干细胞靶的研究 被引量：11
11
作者 赵欣 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期68-71,共4页
目的制备载microRNA—34 a脂质体(miLPs-34 a),研究其肺癌干细胞靶向性以及对肺癌干细胞的生长抑制能力。方法采用薄膜分散法制备载microRNA—34 a脂质体,考察脂质体的粒径,电位以及包封率;考察载microRNA-34 a脂质体的血清稳定性。通... 目的制备载microRNA—34 a脂质体(miLPs-34 a),研究其肺癌干细胞靶向性以及对肺癌干细胞的生长抑制能力。方法采用薄膜分散法制备载microRNA—34 a脂质体,考察脂质体的粒径,电位以及包封率;考察载microRNA-34 a脂质体的血清稳定性。通过细胞摄取实验考察肺癌干细胞对miLPs—34 a的摄取效率。MTT实验考察microRNA—34 a对肺癌干细胞的细胞毒性,构建肺癌干细胞肿瘤球模型,考察脂质体对肿瘤球的生长抑制能力。构建肺癌裸鼠异位模型,考察脂质体对肿瘤生长抑制效果。结果 miLPs—34 a的粒径在136.55±11.4 nm,电位为21.45±4.55mV,microPNA—34 a的包封率为94.6%。miLPs-34 a在24 h内,50%的血清中具有良好的血清稳定性。细胞摄取实验结果显示,A 549肺癌干细胞对miLPs-34 a的摄取效率是microRNA—34 a的3.1倍(P<0.01);MTT实验表明miLPs-34 a对肺癌干细胞的毒性显著强于mlcroRNA-34 a(P<0.01);肿瘤球抑制实验结果表明miLPs—34 a对肿瘤球的生长抑制能力显著强于microRNA-34 a,差异具有统计学意义(P<0.01),miLPs-34 a具有良好的抗肺癌作用。荷瘤裸鼠肿瘤生长抑制实验结果表明miLPs—34 a对裸鼠肿瘤生长的抑制能力显著强于microRNA—34 a,二者差异具有统计学意义(P<0.05)。结论载microRNA^34 a脂质体具有良好的肺癌干细胞靶向性和抗肺癌干细胞生长作用,是一种潜在高效的肺癌干细胞靶向给药系统。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 microrna-34a 脂质体 肺癌
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microRNA-34a对人脑胶质瘤细胞生物学特性的影响 被引量：1
12
作者 段军伟 唐晓平 +3 位作者 张涛 赵龙 彭华 段劼 《海南医学》 CAS 2017年第23期3826-3829,共4页
目的研究micro RNA-34a对人脑胶质瘤细胞生物学特性的影响。方法选取南充市川北医学院附属医院2015年3月至2016年3月收治的100例胶质瘤患者为研究对象,采集胶质瘤组织样本,选取同期在我院接受减压术治疗的40例脑外伤患者为对照,术中采... 目的研究micro RNA-34a对人脑胶质瘤细胞生物学特性的影响。方法选取南充市川北医学院附属医院2015年3月至2016年3月收治的100例胶质瘤患者为研究对象,采集胶质瘤组织样本,选取同期在我院接受减压术治疗的40例脑外伤患者为对照,术中采集正常脑组织样本。采用实时荧光定量PCR检测micro RNA-34a在胶质瘤组织与正常脑组织样本中表达水平。将转染后人脑胶质瘤细胞系U87分为空白对照组、无义序列转染组及micro RNA-34a转染组,检测micro RNA-34a对人脑胶质瘤细胞系U87增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响。结果胶质瘤组织micro RNA-34a相对表达量为(0.53±0.48),显著低于正常脑组织的(1.38±0.25),差异有统计学意义(P<0.05)。不同恶化程度胶质瘤组织micro RNA-34a相对表达量差异有统计学意义(P<0.05)。micro RNA-34a转染组转染后48 h细胞生长抑制率、转染后细胞凋亡率显著高于空白对照组与无义序列转染组,划痕24 h后细胞迁移数、细胞12 h穿膜数显著低于空白对照组与无义序列转染组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 micro RNA-34a具有抑制胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭,促进肿瘤细胞凋亡等作用。 展开更多
关键词 胶质瘤 microrna-34a 细胞生物学 增殖 凋亡
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microRNA-34a在结肠癌组织中的表达及临床意义 被引量：1
13
作者 卢书明 张竹青 +4 位作者 徐梦杳 宋波 刘丽娜 李岩 李春艳 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第22期3548-3553,共6页
目的:探讨micro RNA-34a(mi R-34a)在结肠癌组织及细胞株中的表达及临床意义.方法:采用实时定量PCR检测30例结肠癌组织及其癌旁正常结肠黏膜组织、结肠癌细胞株(HT29、SW620、Lovo)中mi R-34a的表达水平,分析mi R-34a表达与结肠癌临床... 目的:探讨micro RNA-34a(mi R-34a)在结肠癌组织及细胞株中的表达及临床意义.方法:采用实时定量PCR检测30例结肠癌组织及其癌旁正常结肠黏膜组织、结肠癌细胞株(HT29、SW620、Lovo)中mi R-34a的表达水平,分析mi R-34a表达与结肠癌临床病理参数之间的关系.结果:mi R-34a在结肠癌组织中的表达水平(0.681±0.327)较癌旁正常结肠黏膜组织(1.313±0.546)显著降低(P<0.01);mi R-34a在结肠癌细胞株Lovo中的表达(0.275±0.035)明显低于其在结肠癌细胞株HT29、SW620中的表达(0.757±0.044、0.614±0.046),差异有统计学意义(均P<0.01);mi R-34a的表达与结肠癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均显著相关(均P<0.05).而mi R-34a的表达与性别、年龄、肿瘤大小无关(均P>0.05).结论:mi R-34a在结肠癌组织中低表达,可能参与结肠癌的发生发展. 展开更多
关键词 结肠癌 microrna-34a 转移
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MicroRNA-34a间接促进成骨细胞分化并抑制炎症因子缓解绝经后骨质疏松 被引量：1
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作者 褚晓杰 吕文涛 +4 位作者 包忠蕾 朴椿洁 张欣媛 贾佳 张玉玺 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第2期133-143,共11页
目的探讨microRNA-34a(miR-34a)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)发生发展中的作用及机制。方法应用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色及F-肌动蛋白的罗丹明鬼笔环肽染色检测miR-... 目的探讨microRNA-34a(miR-34a)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)发生发展中的作用及机制。方法应用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)染色及F-肌动蛋白的罗丹明鬼笔环肽染色检测miR-34a对破骨细胞分化的影响;应用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及ALP活力测定、茜素红染色等方法观察过表达/抑制miR-34a的破骨细胞的条件培养基(conditional medium,CM)对成骨细胞分化的影响;应用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blot),分析miR-34a对破骨细胞分化相关指标[TRAP和活化T细胞核因子c1(nuclear factor-activated T cells type c1,NFATc1)]、成骨细胞分化相关指标[runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、转录因子Osterix(Osx)和ALP]以及炎症因子[白细胞介素(interleukin,IL)-1α、IL-1β和IL-6]表达的影响;应用微计算机断层扫描技术(Micro-CT)观察miR-34a对去卵巢小鼠股骨远端骨量及骨微结构的影响。结果miR-34a抑制了核因子κB受体活化因子配体(receptor Activator for Nuclear Factor-κB Ligand,RANKL)诱导的破骨细胞分化。破骨细胞过表达miR-34a后,其CM能够促进成骨细胞分化;而抑制miR-34a的破骨细胞,其CM抑制了成骨细胞分化。进一步研究发现,miR-34a使破骨细胞产生骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP2)增加,从而促进成骨细胞分化。此外,TNF-α刺激RAW264.7细胞后,IL-1α、IL-1β和IL-6等炎症因子水平升高,而miR-34a使这些炎症因子水平降低。结论miR-34a通过促破骨细胞产生BMP2间接促进成骨细胞的分化,并抑制炎症因子的产生,从而缓解骨质疏松。 展开更多
关键词 破骨细胞 microrna-34a 绝经后骨质疏松症 成骨细胞
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MicroRNA-34a通过下调Notch1的表达促进心肌细胞凋亡 被引量：1
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作者 潘嘉林 林丛 +2 位作者 周莉莉 黄明远 陈晔 《温州医科大学学报》 CAS 2021年第5期394-398,403,共6页
目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)对心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,分别转染miR-34a mimics、miR-34a inhibitor、随机合成的miR-NC片段、Notch1的siRNA、随机合成的siRNA-NC片段,将实验分为6组:normal组、... 目的:探讨microRNA-34a(miR-34a)对心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9C2,分别转染miR-34a mimics、miR-34a inhibitor、随机合成的miR-NC片段、Notch1的siRNA、随机合成的siRNA-NC片段,将实验分为6组:normal组、miR-34a组、miR-inhibitor组、miR-NC组、miRinhibitor+si RNA-Notch1组和miR-inhibitor+si RNA-NC组。RT-q PCR检测各组miR-34a的表达量,Western bolt技术检测各组中caspase-3和Notch1的表达量,流式细胞技术检测各组细胞的凋亡率。双荧光素酶报告实验鉴定Notch1为miR-34a的靶基因。结果:双荧光素酶报告实验证实miR-34a和Notch1间存在靶向关系。与mi R-NC组比较,miR-34a组的miR-34a和caspase-3的表达量明显增多,Notch1的表达量明显减少,细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-inhibitor组的miR-34a和caspase-3的表达量明显减少,Notch1的表达量明显增多,细胞凋亡率明显减低(P<0.01)。与miR-inhibitor+si RNA-NC组比较,miRinhibitor+si RNA-Notch1组的Notch1的表达量明显降少,caspase-3的表达量明显减少,细胞凋亡率明显减低(P<0.01)。结论:miR-34a促进心肌细胞凋亡,其作用机制与靶向负调控Notch1有关。 展开更多
关键词 microrna-34a 心肌细胞 NOTCH1 细胞凋亡
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MicroRNA-34a-5p在肝纤维化中的表达及作用 被引量：2
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作者 朱海东 胡东坡 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2019年第5期859-865,共7页
目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化... 目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和MicroRNA-34a-5p水平。将肝纤维化模型大鼠根据随机数字表法分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组;将TGF-β1活化的HSC-T6细胞分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组。采用RT-PCR和蛋白质印迹法测定3组大鼠肝组织和肝星状细胞中α-SMA、I型胶原蛋白(collagenI)、沉默调节蛋白1(SIRT1)、分泌型糖蛋白-3α(Wnt-3α)、分泌型糖蛋白-5α(Wnt-5α)和β-波链蛋白(β-catenin)的水平。结果:与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-SMA水平升高(P<0.05),MicroRNA-34a-5p水平降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性转染对照组比较,MicroRNA-34a-5p转染组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平升高(P<0.05),而α-SMA、collagenI、SIRT1、Wnt-3α、Wnt-5α和β-catenin的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),空白对照组和阴性转染对照组间大鼠肝组织和活化肝星状细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平降低,可能通过靶向SIRT1而抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而发挥抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 microrna-34a-5p Ⅰ型胶原蛋白 沉默调节蛋白1 分泌型糖蛋白-3α 分泌型糖蛋白-5α β-波链蛋白 大鼠
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MicroRNA-34a通过上调Cdc42和Rac1促进人晶状体上皮细胞衰老和凋亡 被引量：1
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作者 兰文 陈志钧 周璐 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期768-772,共5页
目的:观察MicroRNA-34a对人晶状体上皮细胞系SRA01/04衰老和凋亡的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测年龄相关性白内障(ARC)晶状体和透明晶状体上皮细胞中MicroRNA-34a表达水平,采用脂质体转染试剂盒将MicroRNA-34a mimics(过表达组)、M... 目的:观察MicroRNA-34a对人晶状体上皮细胞系SRA01/04衰老和凋亡的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测年龄相关性白内障(ARC)晶状体和透明晶状体上皮细胞中MicroRNA-34a表达水平,采用脂质体转染试剂盒将MicroRNA-34a mimics(过表达组)、MicroRNA-34a inhibitors(抑制组)和空脂质体(对照组)转染至SRA01/04细胞,qRT-PCR检测MicroRNA-34a的表达量;采用β-半乳糖苷酸(SA-β-gal)染色检测转染后细胞的衰老情况。Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞仪检测MicroRNA-34a对人晶状体细胞系SRA01/04细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹检测Cdc42、Rac1蛋白的表达。结果:透明晶状体前囊膜组织中MicroRNA-34a的表达量显著低于ARC晶状体前囊膜组织(P<0.05);MicroRNA-34a过表达组、对照组、MicroRNA-34a抑制组SA-β-gal阳性率分别为(87.56±2.34)%、(12.22±2.74)%、(3.45±0.45)%。MicroRNA-34a过表达组明显高于对照组,而MicroRNA-34a抑制组SA-β-gal阳性率明显低于对照组(P<0.05);MicroRNA-34a抑制组、对照组和MicroRNA-34a过表达组的细胞凋亡率分别为(5.87±1.22)%、(12.26±2.14)%、(29.45±3.12)%,MicroRNA-34a抑制组细胞凋亡率明显低于对照组,而MicroRNA-34a过表达组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);MicroRNA-34a过表达组中Cdc42和Rac1的表达明显高于对照组(P<0.05),MicroRNA-34a抑制组中Cdc42和Rac1的表达明显低于对照组(P<0.05)。结论:MicroRNA-34a可能通过上调Cdc42和Rac1促进人晶状体上皮细胞衰老和凋亡。 展开更多
关键词 microrna-34a 人晶状体上皮细胞 CDC42 RAC1 衰老 凋亡
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MicroRNA-34a在神经系统疾病中的研究进展 被引量：6
18
作者 黄春兰 汤永红 《国际神经病学神经外科学杂志》 2014年第3期293-296,共4页
microRNA是一类具有调控功能的非编码RNA;microRNA-34a(miR-34a)是其中的一种,已经证实其在脑组织中广泛表达。最新研究表明,miR-34a通过调控相应蛋白的表达,调节脑组织中细胞的增殖、分化和凋亡,从而广泛地参与到神经系统各类疾病如神... microRNA是一类具有调控功能的非编码RNA;microRNA-34a(miR-34a)是其中的一种,已经证实其在脑组织中广泛表达。最新研究表明,miR-34a通过调控相应蛋白的表达,调节脑组织中细胞的增殖、分化和凋亡,从而广泛地参与到神经系统各类疾病如神经系统肿瘤、神经损伤、神经变性疾病等的发生、发展及修复过程,发挥其独特的调控作用。本文就miR-34a在神经系统各类疾病的病理生理过程中的作用及相关机制做一简要综述。 展开更多
关键词 microrna-34 a 神经系统肿瘤 神经损伤 神经变性疾病
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RGD修饰共载紫杉醇与microRNA-34a脂质体靶向抑制A549肺癌细胞的初步研究 被引量：3
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作者 赵欣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1183-1186,共4页
目的制备整合素受体修饰共载紫杉醇(paclitaxel,PTX)和microRNA-34a脂质体(RGDmiLPs-34a/PTX),研究与A549肺癌细胞的亲和力以及对肺癌细胞的靶向抑制效果。方法采用薄膜分散法制备RGDmiLPs-34a/PTX。考察脂质体的粒径、电位以及包封率;... 目的制备整合素受体修饰共载紫杉醇(paclitaxel,PTX)和microRNA-34a脂质体(RGDmiLPs-34a/PTX),研究与A549肺癌细胞的亲和力以及对肺癌细胞的靶向抑制效果。方法采用薄膜分散法制备RGDmiLPs-34a/PTX。考察脂质体的粒径、电位以及包封率;通过定量细胞摄取实验以及定性的共聚焦实验考察A549细胞对普通脂质体(LP)和RGD修饰脂质体(RGDLP)的摄取效率。MTT实验考察不同脂质体对A549细胞的细胞毒性;构建肺癌细胞肿瘤球模型,考察不同脂质体对肿瘤球的穿透能力以及不同载药脂质体对肿瘤球的生长抑制能力。结果 RGDmiLPs-34a/PTX的粒径为(125.0±11.8)nm,电位为(21.00±4.85)mV,PTX与microRNA-34a的包封率分别为81.5%和94.6%。细胞摄取实验结果显示,A549细胞对RGDLP的摄取效率是LP的2.6倍,二者差异具有统计学意义(P<0.01);定性的细胞摄取实验和肿瘤球穿透实验结果显示RGDLP组的荧光强度明显强于LP组,与定量的实验结果相一致。MTT实验表明RGDmiLPs-34a/PTX对A549肺癌细胞的毒性显著强于miLPs-34a/PTX、RGDmiLPs-34a和RGDLP-PTX;肿瘤球抑制实验结果显示,miLPs-34a/PTX、RGDmiLPs-34a、RGDLP-PTX和RGDmiLPs-34a/PTX分别使肿瘤球体积减小到原体积的81%、77%、64%和37%。与miLPs-34a/PTX、RGDmiLPs-34a、RGDLP-PTX相比,RGDmiLPs-34a/PTX对肿瘤球抑制率差异有统计学意义(P<0.01)。结论整合素受体RGD修饰共载紫杉醇和microRNA-34a脂质体具有良好的肺癌细胞靶向性和肺癌细胞抑制作用,是一种潜在高效的肺癌靶向给药系统。 展开更多
关键词 整合素受体 microrna-34a 紫杉醇 脂质体 肺癌
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广泛性焦虑障碍患者治疗前后血浆MicroRNA-34c表达水平研究 被引量：1
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作者 吴正言 李洁 《临床和实验医学杂志》 2016年第4期327-330,共4页
目的研究广泛性焦虑障碍(GAD)患者治疗前后血浆MicroRNA-34c(MiR-34c)表达水平及其与临床特征的相关性,为揭示血浆MiR-34c表达在GAD中的作用提供依据,探索GAD诊断和预后可能的新标志物。方法将42例GAD患者设为研究组,40例健康志愿者设... 目的研究广泛性焦虑障碍(GAD)患者治疗前后血浆MicroRNA-34c(MiR-34c)表达水平及其与临床特征的相关性,为揭示血浆MiR-34c表达在GAD中的作用提供依据,探索GAD诊断和预后可能的新标志物。方法将42例GAD患者设为研究组,40例健康志愿者设为对照组。统计研究组一般人口学资料、首次发病年龄、总病程、本次病程等临床资料及对照组的一般人口学资料。研究组常规应用帕罗西汀片有效治疗量治疗12周,于治疗前后采用汉密尔顿焦虑量表(HAMA)进行疗效评估。以实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测研究组的MiR-34c的表达水平并与对照组比较。结果研究组汉密顿焦虑量表评分治疗后较治疗前有显著下降(t=43.82,P<0.01),血浆MiR-34c表达水平较治疗前显著升高(t=21.55,P<0.01),治疗前后MiR-34c表达水平均显著低于对照组(t=15.39、4.37,P<0.01)。研究组治疗前后血浆MiR-34c的表达水平与HAMA总分和总病程呈显著负相关(R=-0.52,-0.49,-0.42,-0.44,P<0.01),而与年龄、首次发病年龄、本次病程均无相关性。结论血浆MiR-34c可能参与广泛性焦虑障碍的发病机制,焦虑程度越严重,总病程越长,血浆MiR-34c的表达水平越低,而且其表达水平受帕罗西汀药物影响。因此血浆MiR-34c有潜力成为广泛性焦虑障碍的状态标记物,并为其潜在的治疗靶点提供了依据。 展开更多
关键词 广泛性焦虑障碍 microrna-34c 实时荧光定量PCR试验
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