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MicroRNA-34a通过调控Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病进展的机制探讨
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作者 刘虹 张玥玥 +4 位作者 王一琳 王彩丽 王晓敏 毛敏 李燕 《天津医药》 2025年第8期785-790,共6页
目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p in... 目的探讨微小RNA(miRNA)-34a通过Wnt途径影响慢性淋巴细胞白血病(CLL)疾病进展的作用机制。方法选用人慢性B细胞白血病细胞MEC-1。实验一分组:p53激动剂组和Control组;实验二分组:Control组、miR-34a-5p mimic组及对照组、miR-34a-5p inhibitor组及对照组、miR-34a-5p inhibitor+Wnt抑制剂XAV-939组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测各组细胞中miR-34a-5p表达水平;CCK8检测细胞增殖能力;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;双萤光素酶报告实验检测p53与miR-34a-5p及miR-34a-5p与Wnt1的靶向关系;Western blot检测Wnt/β-catenin通路相关蛋白β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达。结果在MEC-1细胞中:①p53激动剂组中miR-34a表达升高,增殖受抑制(P<0.05);双萤光素酶报告实验证实miR-34a-5p与p53之间呈现负调控相关性。②miR-34a-5p mimic组miR-34a-5p表达升高,增殖受抑制,迁移能力降低,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达下调(P<0.05);miR-34a-5p inhibitor组miR-34a-5p表达降低,增殖升高,迁移能力增强,β-catenin、Cyclin D1蛋白表达上调(P<0.05)。③miR-34a-5p和Wnt1呈现负调控相关性。④与miR-34a-5p inhibitor组相比,XAV-939组的miR-34a-5p表达升高,迁移细胞数减少,β-catenin和Cyclin D1蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论miR-34a在CLL中扮演着抑癌基因的角色,过表达miR-34a可抑制Wnt/β-catenin信号通路,降低细胞的增殖活性和迁移能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 白血病 B细胞 WNT信号通路 肿瘤抑制蛋白质P53 细胞增殖 microrna-34a
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定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞增殖的机制研究
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作者 陈兰 颜晓静 +6 位作者 廉源沛 朱力 周世康 王地均 蔡佳丽 尹春燕 曹吉 《广州中医药大学学报》 2025年第7期1750-1756,共7页
【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低... 【目的】通过观察microRNA-30d-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢颗粒细胞(GCs)的影响,探讨定坤丹治疗PCOS的作用机制。【方法】以脱氢表雄酮(DHEA)建立PCOS大鼠模型,体外培养正常大鼠GCs与PCOS大鼠GCs。将GCs分为空白组,模型组及定坤丹低、高剂量组,分组处理后,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测GCs的存活率,细胞流式术分析GCs凋亡率,实时聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测GCs中转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad3及microRNA-30d-5p的表达,Western Blot法检测GCs中TGF-β1、Smad2及Smad3的蛋白表达。【结果】与空白组比较,模型组GCs存活率显著下降,GCs凋亡率,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因及蛋白表达水平显著升高,microRNA-30d-5p的表达水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,定坤丹低、高剂量组GCs存活率上升,GCs凋亡率显著下降,TGF-β1、Smad2及Smad3的基因与蛋白表达水平显著下降,microRNA-30d-5p的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】定坤丹通过microRNA-30d-5p靶向调节Smad2促进GCs增殖,可能起到治疗PCOS排卵障碍的作用。 展开更多
关键词 定坤丹 多囊卵巢综合征 转化生长因子β1 SMAD2 microrna-30d-5p 卵巢颗粒细胞 大鼠
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MicroRNA-320аas a novel biomarker at preclinical stage of necrotizing enterocolitis in term neonates with congenital heart defects
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作者 Ekaterina K Zaikova Aleksandra V Kaplina +4 位作者 Natalia A Petrova Tatiana M Pervunina Alexey S Golovkin Anna A Kostareva Olga V Kalinina 《World Journal of Clinical Pediatrics》 2025年第3期257-271,共15页
BACKGROUND Necrotizing enterocolitis(NEC)remains a prominent gastrointestinal emergency among infants,particularly term infants with congenital heart defects(CHD)being at high risk.The molecular processes that contrib... BACKGROUND Necrotizing enterocolitis(NEC)remains a prominent gastrointestinal emergency among infants,particularly term infants with congenital heart defects(CHD)being at high risk.The molecular processes that contribute to NEC have yet to be completely understood.The high mortality rates necessitate an active search for noninvasive biomarkers that can aid in the preclinical diagnosis and prognosis of NEC.MicroRNAs(miRs),which are involved in many biological processes in both health and disease,have been discovered to play an important role in regulating inflammation and immune responses via various signaling pathways.AIM To determine the plasma levels of miR-155,miR-221,miR-223,miR-320a,miR-451a as potential NEC biomarkers in term newborns with CHD.METHODS This prospective cohort study included twenty-tree term newborns with CHD who underwent cardiac surgery on the median day of life(DOL)=7.Nine of them developed NEC(Bell’s stage IIA and IIIA)within 1 week of cardiac surgery(NEC newborns).Blood samples were collected before(median DOL=5)and following(median DOL=13)cardiac surgery.Levels of plasma miR-155-5p,miR-221-3p,miR-223-3p,miR-320a-3p,and miR-451a were determined using real-time polymerase chain reaction.The functional analysis was executed using the DIANA-miRPath v4.0.RESULTS Preoperatively,NEC newborns had significantly lower plasma levels of miR-155(2.70-fold,P=0.020),miR-223(2.42-fold,P=0.030),and miR-320a(3.62-fold,P=0.006)than newborns without NEC.Postoperatively,miR-451a levels differed significantly between the newborn groups,showing a 4.70-fold decrease(P=0.014)in expression when clinical NEC symptoms appeared.According to receiver operating characteristic analysis,miR-320a was found to be the most effective predictive biomarker for NEC[area under the curve(AUC)=0.835,63%sensitivity,100%specificity],while miR-451a was identified as a NEC biomarker(AUC=0.835,85.7%sensitivity,76.9%specificity).Preoperatively,miR-155-5p,miR-223-3p,and miR-320a-3p were differentially expressed and targeted the forkhead box O and Hippo pathways(P<0.01).CONCLUSION Our study demonstrates,for the first time,that plasma miR-320a-3p levels can be used as a preclinical biomarker for NEC in term newborns with CHD. 展开更多
关键词 microrna-320a Term newborns Necrotizing enterocolitis Congenital heart defects Plasma biomarker Quantitative real-time polymerase chain reaction
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化瘀杀胚汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠的疗效及对TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响 被引量:1
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作者 陈兰 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第9期2360-2366,共7页
【目的】探讨化瘀杀胚汤(由丹参、赤芍、桃仁、蜈蚣、紫草、天花粉、三七等中药组成)联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠疗效及对患者TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响。【方法】将104例异位妊娠患者随机分为观察组和对照组... 【目的】探讨化瘀杀胚汤(由丹参、赤芍、桃仁、蜈蚣、紫草、天花粉、三七等中药组成)联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠疗效及对患者TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p表达量的影响。【方法】将104例异位妊娠患者随机分为观察组和对照组,每组各52例。对照组给予甲氨蝶呤联合米非司酮治疗,观察组在对照组的基础上加用化瘀杀胚汤治疗,连续用药3 d并随访观察1个月。比较2组患者保守治疗成功率、血β人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平恢复正常时间以及异位妊娠包块吸收时间、治疗后输卵管完全通畅率与不通畅率,观察2组保守治疗成功患者治疗前后血清TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量的变化情况。【结果】(1)观察组的保守治疗成功率为94.23%(49/52),明显高于对照组的71.15%(37/52),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组比较,观察组的血β-HCG恢复正常时间及包块吸收时间均明显缩短,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)观察组治疗后的输卵管完全通畅率为55.77%(29/52),明显高于对照组的21.15%(11/52);不通畅率为19.23%(10/52),明显低于对照组的59.62%(31/52),差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。(4)与治疗前比较,2组保守治疗成功患者治疗结束1个月后的TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量均明显降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,观察组治疗结束1个月后的TGF-β/Smad2/3蛋白水平和microRNA-30d-5p相对表达量均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。(5)2组患者的不良反应均以胃肠道不适为主,观察组的不良反应发生率为25.00%(13/52),明显低于对照组的46.15%(24/52),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】化瘀杀胚汤联合甲氨蝶呤治疗异位妊娠,可有效提高药物保守治疗的成功率,有助于包块的吸收以及输卵管通畅,能有效降低患者的TGF-β/Smad2/3蛋白水平及microRNA-30d-5p的相对表达量,且药物安全性较高。 展开更多
关键词 化瘀杀胚汤 甲氨蝶呤 异位妊娠 TGF-Β SMAD2 Smad3 microrna-30d-5p
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MicroRNA-3162-3p在儿童原发性免疫性血小板减少症不同临床分期中的表达及其意义 被引量:4
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作者 胡晓燕 贺锐 +3 位作者 米乐园 尹姣姣 金斐斐 朱生东 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第1期208-213,共6页
目的:探讨microRNA-3162-3p在儿童原发性免疫性血小板减少症(ITP)不同临床分期中的表达及其意义。方法:纳入96例ITP患儿,按照病程的不同将其分为新诊断组(病程<3个月,40例)、持续性组(病程3-12个月,30例)、慢性组(病程>12个月,26... 目的:探讨microRNA-3162-3p在儿童原发性免疫性血小板减少症(ITP)不同临床分期中的表达及其意义。方法:纳入96例ITP患儿,按照病程的不同将其分为新诊断组(病程<3个月,40例)、持续性组(病程3-12个月,30例)、慢性组(病程>12个月,26例),同期选择80例健康儿童作为对照组。分离并培养ITP患儿与健康儿童的外周血单个核细胞(PBMNC),采用实时荧光定量PCR法检测外周血PBMNC中microRNA-3162-3p的表达情况,ELISA法检测受试者外周血PBMNC中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的含量。Spearman相关性分析microRNA-3162-3p与血小板计数、IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的相关性。结果:与对照组相比,ITP患儿的外周血PBMNC中microRNA-3162-3p、IL-10的表达及血小板计数显著下降(P<0.05),IL-17、IL-23、TGF-β显著升高(P<0.05);随着病程的延长,microRNA-3162-3p、IL-10在PBMNC中的表达及血小板计数均显著下降(P<0.05),IL-17、IL-23、TGF-β的表达显著升高(P<0.05)。MicroRNA-3162-3p在ITP患儿PBMNC中的表达与血小板数、IL-10呈正相关(r=0.716、0.667),与IL-17、IL-23、TGF-β呈负相关(r=-0.540、-0.641、-0.560)。结论:MicroRNA-3162-3p在ITP患儿PBMNC中的表达明显降低,参与调控Th17/Treg的失衡,可作为ITP潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 microrna-3162-3p 原发性免疫性血小板减少症 外周血单个核细胞 Th17/Treg失衡
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MicroRNA-363-5p靶向血小板反应蛋白-3调控心肌细胞肥大的作用机制研究
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作者 马玉坤 单正宜 +2 位作者 刘荟婷 昝树槐 赵鹏 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第12期24-32,共9页
目的 探讨microRNA-363-5p(miR-363-5p)靶向血小板反应蛋白-3(THBS3)对心肌肥大的调节作用。方法 体外人心肌细胞(AC16)经血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理复制心肌肥大体外模型,随后鬼笔环肽染色观察细胞骨架,Western blotting检测心肌肥大体... 目的 探讨microRNA-363-5p(miR-363-5p)靶向血小板反应蛋白-3(THBS3)对心肌肥大的调节作用。方法 体外人心肌细胞(AC16)经血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理复制心肌肥大体外模型,随后鬼笔环肽染色观察细胞骨架,Western blotting检测心肌肥大体外模型中胚胎期基因的蛋白表达,以确认模型复制的有效性。实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌肥大体外模型中miR-363-5p表达。Western blotting检测肥大心肌细胞中转染miR-363-5p mimics和miR-363-5p inhibitor后,肥大相关表型的变化。双荧光素酶报告基因实验验证miR-363-5p与THBS3的3’-UTR结合作用。设计挽救实验,同时过表达THBS3与miR-363-5p,以评估THBS3是否介导miR-363-5p对心肌肥大的调控。结果 AngⅡ组细胞面积较对照组大(P <0.05),心房钠尿肽(ANP)、B型钠尿肽(BNP)、肌球蛋白β重链(β-MHC)及miR-363-5p较对照组高(P <0.05)。miR-363-5p mimics组miR-363-5p相对表达量较mimics-NC组高(P <0.05),miR-363-5p inhibitor组相对表达量较inhibitor-NC组低(P <0.05);miR-363-5p mimics组ANP、BNP、β-MHC相对表达量较mimics-NC组低(P <0.05),miR-363-5p inhibitor组相对表达量较inhibitor-NC组高(P <0.05)。miR-363-5p mimics组细胞面积较mimics-NC组小(P <0.05),miR-363-5p inhibitor组较inhibitor-NC组大(P <0.05)。miR-363-5p mimics+THBS3-WT组THBS3-WT荧光素酶活性较mimics-NC+THBS3-WT组低。mimics-NC+THBS3-MUT组与miR-363-5p mimics+THBS3-MUT组THBS3-MUT荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。miR-363-5p mimics组THBS3 mRNA和蛋白相对表达量较mimics-NC组低(P <0.05)。THBS3-OE组THBS3 mRNA和蛋白相对表达量较对照组、OE-NC组高(P <0.05)。THBS3-OE+miR-363-5p mimics组细胞面积较OE-NC+miR-363-5p mimics组大(P <0.05)。THBS3-OE+miR-363-5p mimics组ANP、BNP及β-MHC相对表达量较OE-NC+miR-363-5p mimics组高(P <0.05)。结论 过表达miR-363-5p可抑制AngⅡ对AC16细胞的促肥大作用,其机制与减少THBS3表达有关。 展开更多
关键词 心肌细胞肥大 microrna-363-5p 血小板反应蛋白-3
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MicroRNA-363-5p靶向血小板反应蛋白调控心脏成纤维细胞增殖及纤维化相关蛋白的表达
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作者 昝树槐 马玉坤 +2 位作者 单正宜 刘荟婷 赵鹏 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2024年第2期6027-6033,共7页
目的探究microRNA-363-5p(miR-363-5p)是否通过调控血小板反应蛋白3(THBS3)参与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的人类心脏成纤维细胞(HCF)增殖及纤维化相关蛋白的表达。方法培养HCF,分为对照组(正常HCF),AngⅡ组(1×10-6mol/L AngⅡ处理),... 目的探究microRNA-363-5p(miR-363-5p)是否通过调控血小板反应蛋白3(THBS3)参与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)处理的人类心脏成纤维细胞(HCF)增殖及纤维化相关蛋白的表达。方法培养HCF,分为对照组(正常HCF),AngⅡ组(1×10-6mol/L AngⅡ处理),mimic-NC组(转染模拟物)、miR-363-5p mimic组(转染miR-363-5p模拟物)、inhibitor-NC组(转染抑制剂阴性对照)、miR-363-5p inhibitor组(转染miR-363-5p抑制剂);pcDNA+mimic-NC组(共转染空载体pcDNA+模拟物)、pcDNA+miR-363-5p mimic组(共转染空载体pcDNA+miR-363-5p模拟物)、pcDNA-THBS3+miR-363-5p mimic组(共转染空载体pcDNA-THBS3+miR-363-5p模拟物)。细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖活性;蛋白质印迹法检测细胞THBS3蛋白及纤维化相关蛋白;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞miR-363-5p和THBS3 mRNA;双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性。结果与对照组相比,AngⅡ组细胞增殖活性(P<0.05)、α平滑肌肌动蛋白(P<0.001)、Ⅰ型胶原蛋白(P<0.001)、Ⅲ型胶原蛋白(P<0.001)均升高。与mimic-NC组相比,miR-363-5p mimic组细胞增殖活性(P<0.01)、α平滑肌肌动蛋白(P<0.001)、Ⅰ型胶原蛋白(P<0.001)、Ⅲ型胶原蛋白(P<0.001)均降低,且抑制miR-363-5p具有相反作用。双荧光素酶报告实验显示,miR-363-5p靶向负调控THBS3。与pcDNA+mimic-NC组相比,pcDNA+miR-363-5p mimic组细胞增殖活性、α平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白均降低(P均<0.01)。与pcDNA+miR-363-5p mimic组相比,pcDNA-THBS3+miR-363-5p mimic组细胞增殖活性(P<0.05)、α平滑肌肌动蛋白(P<0.01)、Ⅰ型胶原蛋白(P<0.001)、Ⅲ型胶原蛋白(P<0.001)均升高。挽救实验结果显示过表达THBS3减弱miR-363-5p抑制AngⅡ处理导致的细胞增殖及纤维化相关蛋白表达。结论miR-363-5p靶向THBS3抑制HCF增殖及纤维化相关蛋白表达。 展开更多
关键词 心脏成纤维细胞 microrna-363-5p 血小板反应蛋白3 血管紧张素Ⅱ 增殖 纤维化
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玉泉丸调控microRNA-320对糖尿病小鼠糖代谢机制研究
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作者 徐文淑 杨志 杨小虎 《亚太传统医药》 2024年第12期36-40,共5页
目的:探讨玉泉丸调控microRNA-320对糖尿病小鼠糖代谢的影响并阐明其作用机制。方法:生化分析仪检测各组小鼠血糖、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐和尿素;RT-PCR检测microRNA-320、PI3K、Akt以及GLUT-1基因表达水平;Western Blot检测PI3K、... 目的:探讨玉泉丸调控microRNA-320对糖尿病小鼠糖代谢的影响并阐明其作用机制。方法:生化分析仪检测各组小鼠血糖、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐和尿素;RT-PCR检测microRNA-320、PI3K、Akt以及GLUT-1基因表达水平;Western Blot检测PI3K、Akt以及GLUT-1蛋白表达水平。结果:玉泉丸给药4周后,高剂量给药组可显著性降低糖尿病模型小鼠血糖、甘油三酯、总胆固醇、血肌酐和尿素水平;玉泉丸高剂量给药组可显著降低糖尿病模型小鼠肾脏指数;RT-PCR结果显示,玉泉丸可显著性下调microRNA-320基因表达,上调PI3K、Akt以及GLUT-1基因表达;Western Blot结果显示,玉泉丸可显著性上调PI3K、Akt以及GLUT-1蛋白表达。结论:玉泉丸可有效改善糖尿病模型小鼠糖代谢水平,其作用机制可能至少与下调肾脏组织中microRNA-320过表达、上调PI3K/Akt信号通路介导的GLUT-1过表达有关。 展开更多
关键词 玉泉丸 糖尿病 microrna-320 PI3K GLUT-1
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Long Non-coding RNA PCED1B Antisense RNA 1 Promotes Cell Proliferation and Invasion in Hepatocellular Carcinoma by Regulating the MicroRNA-34a/CD44 Axis
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作者 Jian-gang BI Qi LI +3 位作者 Yu-sheng GUO Li-ping LIU Shi-yun BAO Ping XU 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2024年第3期503-511,共9页
Objective This study aimed to examine the role of long non-coding RNA PCED1B antisense RNA 1(PCED1B-AS1)in the development of hepatocellular carcinoma(HCC).Methods A total of 62 pairs of HCC tissues and adjacent non-t... Objective This study aimed to examine the role of long non-coding RNA PCED1B antisense RNA 1(PCED1B-AS1)in the development of hepatocellular carcinoma(HCC).Methods A total of 62 pairs of HCC tissues and adjacent non-tumor tissues were obtained from 62 HCC patients.The interactions of PCED1B-AS1 and microRNA-34a(miR-34a)were detected by dual luciferase activity assay and RNA pull-down assay.The RNA expression levels of PCED1B-AS1,miR-34a and CD44 were detected by RT-qPCR,and the protein expression level of CD44 was determined by Western blotting.The cell proliferation was detected by cell proliferation assay,and the cell invasion and migration by transwell invasion assay.The HCC tumor growth after PCED1B-AS1 was downregulated was determined by in vivo animal study.Results PCED1B-AS1 was highly expressed in HCC tissues,which was associated with poor survival of HCC patients.Furthermore,PCED1B-AS1 interacted with miR-34a in HCC cells,but they did not regulate the expression of each other.Additionally,PCED1B-AS1 increased the expression level of CD44,which was targeted by miR-34a.The cell proliferation and invasion assay revealed that miR-34a inhibited the proliferation and invasion of HCC in vitro,while CD44 exhibited the opposite effects.Furthermore,PCED1B-AS1 suppressed the role of miR-34a.Moreover,the knockdown of PCED1B-AS1 repressed the HCC tumor growth in nude mice in vivo.Conclusion PCED1B-AS1 may play an oncogenic role by regulating the miR-34a/CD44 axis in HCC. 展开更多
关键词 long non-coding RNA PCED1B antisense RNA 1(PCED1B-AS1) hepatocellular carcinoma microrna-34a(miR-34a) CD44 proliferation INVASION
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MicroRNA-30c靶向作用FANCF对乳腺癌细胞药物敏感性的调控效果
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作者 方悦 《中文科技期刊数据库(文摘版)医药卫生》 2024年第3期073-076,共4页
探究MicroRNA-30c靶向作用FANCF对乳腺癌细胞药物敏感性的调控。方法 利用脂质体技术将miR-30基因转染到乳腺癌细胞系MCF-7/ADR耐药细胞中。利用 Luciferase报告基因技术明确miR-30家族与FANCF mRNA-3UTR之间的相互关系和作用位点。在... 探究MicroRNA-30c靶向作用FANCF对乳腺癌细胞药物敏感性的调控。方法 利用脂质体技术将miR-30基因转染到乳腺癌细胞系MCF-7/ADR耐药细胞中。利用 Luciferase报告基因技术明确miR-30家族与FANCF mRNA-3UTR之间的相互关系和作用位点。在此基础上以miR-30家族为研究对象,应用Realtime-PCR技术对miR-30c表达水平差异进行数据分析,进一步研究miR-30家族对 FANCFmRNA的调控作用。用MTS法、AnexinV-PI双染法和 PI单染法测定细胞的增殖调亡和细胞周期。免疫印迹法检测DNA损伤修复途径中FANCF、FANCD2表达。结果 相比于MCF-7细胞,MCF-7/ADR细胞中miR-30c基础表达显著降低(P<0.05)。miR-30c在MCF-7/ADR耐药株中可能通过上调miR-30c而增强其对阿霉素、顺铂的敏感性。结论 MicroRNA-30c靶向作用沉默FANCF后可增加乳腺癌细胞对阿霉素及顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 microrna-30c FANCF 乳腺癌细胞
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MicroRNA-338-3p通过下调SMO表达抑制结直肠癌细胞的侵袭与迁移 被引量:2
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作者 区文弢 孙凯 +2 位作者 吴承堂 雷尚通 张晓槟 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期25-30,共6页
目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实... 目的探讨microRNA-338-3p(miR-338-3p)对结直肠癌细胞侵袭与迁移能力的影响及其调控机制。方法脂质体分别转染miR-338-3p前体(pre-miR-338-3p)和miR-338-3p特异性抑制剂(miR-338-3p-inhibitor)至人结直肠癌SW620及SW480细胞系中,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测细胞中miR-338-3p表达状况,运用半定量RT-PCR及Westernblot分析Smoothened(SMO)mRNA及蛋白表达状况,Transwell侵袭、迁移实验检测转染前后细胞体外侵袭迁移能力;在经anti-SMO-siRNA预先处理的SW480细胞中转染miR-338-3p-inhibitor,检测转染细胞中SMO蛋白的表达变化以及侵袭能力的改变。结果通过生物信息学网站预测SMO可能是miR-338-3p的作用靶基因;SW620细胞中miR-338-3p表达水平较SW480细胞减低,而SMO蛋白增高。转染pre-miR-338-3p至SW620细胞,miR-338-3p表达上调,SMO蛋白表达降低,且肿瘤细胞的侵袭及迁移能力下降;而转染miR-338-3p-inhibitor至SW480细胞后,miR-338-3p表达下降,SMO蛋白表达上升,肿瘤细胞侵袭、迁移能力增强,且此种增强效应可被an-ti-SMO-siRNA所部分逆转,说明miR-338-3p确实是通过抑制SMO而发挥抗癌作用。结论 MiR-338-3p通过下调SMO表达而抑制结直肠癌细胞侵袭与迁移。 展开更多
关键词 结直肠癌 microrna-338-3p SMO SHH信号通路 侵袭 迁移
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携带microRNA-383重组慢病毒的包装及其上调PBMCs中Foxp3mRNA的表达 被引量:4
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作者 周峰 张庆 +3 位作者 张海清 刘晓梅 史震 郑葵阳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期845-849,共5页
目的包装携带microRNA-383(miR-383)的重组慢病毒,并观察其对正常人外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中Foxp3 mRNA转录的影响。方法将4个串联的miRNA-383前体序列亚克隆入慢病毒转移载体pHAGE-CMV-MCS-IZsGre... 目的包装携带microRNA-383(miR-383)的重组慢病毒,并观察其对正常人外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中Foxp3 mRNA转录的影响。方法将4个串联的miRNA-383前体序列亚克隆入慢病毒转移载体pHAGE-CMV-MCS-IZsGreen,构建重组载体,命名为pHAGE-miR-383。将pHAGE-383、包装质粒psPAX2与包膜质粒pMD2.G共转染入HEK 293T细胞进行重组慢病毒包装。进而分别采用定量PCR和RT-PCR检测慢病毒miR-383和Mock感染48 h后细胞中的miR-383的表达和转录因子Foxp3 mRNA的转录水平。结果定量PCR证实携带miR-383的重组慢病毒包装成功,滴度为1×107 TU/ml。以MOI为5的慢病毒感染HEK 293T细胞后miR-383表达明显增多。RT-PCR结果显示,miR-383能够上调PBMCs中Foxp3 mRNA的表达。结论成功包装出含有miR-383前体序列的重组慢病毒,而且慢病毒miR-383能够上调PBMCs中Foxp3 mRNA的转录水平,为进一步研究其对调节性T细胞的调控作用奠定基础。 展开更多
关键词 慢病毒 microrna-383 PBMCS Foxp3mRNA
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MicroRNA-34a对小鼠气道平滑肌细胞增殖和ORMDL3表达的影响 被引量:3
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作者 赵龙 王宁 +1 位作者 石晓岚 刘翠翠 《中国现代医学杂志》 CAS 2018年第8期6-12,共7页
目的探讨支气管哮喘小鼠模型中micro RNA-34a(mi R-34a)对气道平滑肌细胞(ASMC)增殖与血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响。方法以卵清蛋白(OVA)诱导复制的小鼠哮喘模型和培养的ASMC为研究对象,筛选与ORMDL3密切相关的mi RNA;利用m... 目的探讨支气管哮喘小鼠模型中micro RNA-34a(mi R-34a)对气道平滑肌细胞(ASMC)增殖与血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)表达的影响。方法以卵清蛋白(OVA)诱导复制的小鼠哮喘模型和培养的ASMC为研究对象,筛选与ORMDL3密切相关的mi RNA;利用mi R-34a-mimic使mi R-34a过表达;用苏木精-伊红染色和MTT法探究其对ASMC增殖的影响;实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot检测ORMDL3的表达变化。结果 OVA诱导下小鼠气道组织中mi R-34a被抑制(P<0.05)。mi R-34a-mimic可减少哮喘小鼠ASMC异常增殖(P<0.05);mi R-34a-mimic抑制ASMC在490nm下的光密度值和相对细胞活性(P<0.05);mi R-34a-mimic下调哮喘小鼠气道组织中ORMDL3的表达,并抑制体外培养ASMC中ORMDL3的表达(P<0.05)。结论 mi R-34a可抑制ASMC的增殖和ORMDL3基因表达,为今后哮喘发病机制的研究提供新的思路。 展开更多
关键词 microrna-34a 气道平滑肌细胞 血清类黏蛋白1样蛋白3
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LncRNA MALAT-1靶向microRNA-370-3p调节Akt通路对肺癌细胞生物学行为影响的机制研究 被引量:1
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作者 李亮 李建忠 +2 位作者 张丹杰 马跃峰 李少民 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期38-47,共10页
目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT... 目的 探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1(LncRNA MALAT-1)是否能靶向调节microRNA-370-3p(miR-370-3p)的表达,以及对Akt通路和肺癌细胞生物学行为的影响。方法 选用非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞体外培养,分别抑制LncRNA MALAT-1(转染si-MALAT-1)或过表达miR-370-3p(转染miR-370-3p mimic),抑制LncRNA MALAT-1和干扰miR-370-3p(同时转染si-MALAT-1和antimiR-370-3p),观察A549细胞的生物学行为和Akt通路蛋白的表达。qRT-PCR检测LncRNA MALAT-1、miR-370-3p mRNA的表达;MMT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞迁移与侵袭;Western blotting检测Akt、p-Akt、PI3K、p-PI3K蛋白相对表达量。构建MALAT-1野生型(MALAT-1WT_1uc)与突变型(MALAT-1MUT_1uc)荧光素酶报告基因质粒并分别与miR-370-3p、miR-NC转染至A549细胞,观察荧光结合强度并检测miR-370-3p的表达。结果 抑制LncRNA MALAT-1或过表达miR-370-3p能抑制A549细胞迁移、侵袭,促进细胞凋亡,减少A549细胞活性(P <0.05),并下调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。与单纯抑制LncRNA MALAT-1比较,抑制LncRNA MALAT-1并干扰miR-370-3p能促进A549细胞迁移、侵袭,抑制细胞凋亡,增加A549细胞活性(P <0.05),并上调p-Akt和p-PI3K蛋白的表达(P <0.05)。TargetScan靶基因预测发现LncRNA MALAT-1与miR-370-3p存在结合位点,荧光素酶报告基因实验验证发现,与MALAT-1WT_1uc+Control组和MALAT-1WT_1uc+miR NC组比较,MALAT-1WT_1uc+miR-370-3p组相对荧光强度下降(P <0.05),MALAT-1MUT_1uc+miR-370-3p荧光强度无变化(P>0.05),进一步qRT-PCR结果发现,与Control组比较,si-MALAT-1组的miR-370-3p mRNA相对表达量升高(P <0.05),与si-MALAT-1组比较,si-MALAT-1+anti-miR-370-3p组的miR-370-3pmRNA相对表达量降低(P <0.05)。结论LncRNA MALAT-1可以靶向负调控miR-370-3p。抑制LncRNA MALAT-1可以上调miR-370-3p的表达,抑制A549细胞的增殖、迁移及侵袭,促进A549细胞的凋亡,并下调Akt通路蛋白的磷酸化。 展开更多
关键词 肺癌 microrna-370-3p 长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子-1 荧光素酶报告基因实验 AKT
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microRNA-335对人非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及增殖能力的影响 被引量:10
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作者 王鹤 刘志利 +1 位作者 德伟 王朝霞 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期795-799,共5页
目的:研究microRNA-335(miR-335)在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞迁移、侵袭能力与增殖能力的影响。方法:采用荧光实时定量PCR检测miR-335在12对非小细胞肺癌与癌旁正常组织中的表达差异,以及miR-335在非小细胞肺癌SPCA-1细胞与肺正... 目的:研究microRNA-335(miR-335)在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞迁移、侵袭能力与增殖能力的影响。方法:采用荧光实时定量PCR检测miR-335在12对非小细胞肺癌与癌旁正常组织中的表达差异,以及miR-335在非小细胞肺癌SPCA-1细胞与肺正常上皮细胞16HBE中的表达差异;应用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335下调SPCA-1细胞中miR-335的表达,并通过荧光实时定量PCR验证;划痕实验检测miR-335对SPCA-1细胞迁移能力的影响;Transwell侵袭实验检测miR-335对SPCA-1细胞侵袭能力的影响;MTT实验及克隆形成实验检测miR-335对SPCA-1细胞增殖能力的影响。结果:与癌旁正常组织比较,miR-335在非小细胞肺癌组织中显著高表达(P<0.05);与16HBE细胞比较,miR-335在SPCA-1细胞中显著高表达(P<0.05);利用Lipofectamine 2000瞬时转染anti-miR-335入SPCA-1细胞24 h时miR-335表达明显减弱(P<0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞迁移和侵袭能力有显著的抑制作用,抑制率分别为(42.8±2.7)%(P<0.01)及(73.25±4.4)%(P<0.01);抑制miR-335表达对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响。结论:miR-335在非小细胞肺癌中呈高表达,miR-335低表达能显著抑制SPCA-1细胞的迁移和侵袭能力,但对SPCA-1细胞的增殖能力无明显影响。 展开更多
关键词 microrna-335 非小细胞肺癌 迁移 侵袭 增殖
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原发性肺癌患者外周血中microRNA-31的表达及意义 被引量:6
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作者 赵静 陈光辉 +1 位作者 刘德军 李慧 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第5期684-686,共3页
目的:探讨microRNA-31( miRNA-31)在原发性肺癌患者外周血中的表达情况及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测100例原发性肺癌患者和100例正常人外周血miRNA-31表达水平。绘制ROC曲线,评价外周血miRNA-31表达水平对原发... 目的:探讨microRNA-31( miRNA-31)在原发性肺癌患者外周血中的表达情况及其临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR技术检测100例原发性肺癌患者和100例正常人外周血miRNA-31表达水平。绘制ROC曲线,评价外周血miRNA-31表达水平对原发性肺癌的诊断价值。以肺癌患者外周血miRNA-31表达水平的平均值为界值,将100例肺癌患者分为外周血miRNA-31低表达组和高表达组,采用Kaplan-Meier法对两组绘制生存曲线,评价外周血miRNA-31表达水平对原发性肺癌预后判断的价值。结果:肺癌患者外周血miRNA-31表达水平为(1.93±0.88),与正常人的(0.67±0.31)比较,明显升高(t=13.505,P<0.001)。根据外周血miRNA-31表达水平绘制ROC曲线,曲线下面积为0.775(95%CI=0.681~0.868),临界值取1.126时,用外周血miRNA-31表达水平诊断原发性肺癌的灵敏度和特异度分别为0.778和0.736。肺癌患者中外周血miRNA-31低表达44例,高表达56例,高表达和低表达患者的生存曲线差异有统计学意义(χ^2=5.710, P=0.017),低表达组中位生存期为37.32个月,长于高表达组的27.11个月。结论:miRNA-31可作为原发性肺癌诊断和预后判断的分子标志物。 展开更多
关键词 microrna-31 原发性肺癌 诊断 预后
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MicroRNA-31在肝癌中的表达和作用 被引量:4
17
作者 李中文 吴涛 +1 位作者 付应霄 吴守伟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第10期1098-1101,共4页
目的:探讨MicroRNA-31在肝癌中的作用功能。方法:利用realtime PCR检测不同来源的肝细胞和临床来源肝组织样本中MicroRNA-31表达,MTT检测MicroRNA-31对肝癌细胞生长活性的影响。结果:发现MicroRNA-31在肝癌细胞显著低于正常来源的肝细胞... 目的:探讨MicroRNA-31在肝癌中的作用功能。方法:利用realtime PCR检测不同来源的肝细胞和临床来源肝组织样本中MicroRNA-31表达,MTT检测MicroRNA-31对肝癌细胞生长活性的影响。结果:发现MicroRNA-31在肝癌细胞显著低于正常来源的肝细胞,对不同的临床来源肝组织样本检测发现在肝癌组织的MicroRNA-31表达量显著低于正常对照和癌旁组织,MTT分析发现MicroRNA-31可抑制肝癌细胞的生长。结论:本研究提示MicroRNA-31在肝癌中具有肿瘤抑制作用,在临床进展中可能扮演着重要的作用。 展开更多
关键词 microrna-31 肝癌 表达 生长
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microRNA-328与心房颤动患者心房重构的相关性 被引量:6
18
作者 刘兆奕 吴桂平 +2 位作者 林瑶瑶 赵红丽 张晓丹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期28-32,共5页
目的通过研究心房颤动(简称房颤)患者microRNA-328(miRNA-328)的表达水平及左心房内径(LAD)的变化,探讨miRNA-328与房颤患者心房重构的相关性。方法选取房颤患者120例,分为阵发性房颤(40例)、持续性房颤(48例)、永久性房颤(32例)3个亚组... 目的通过研究心房颤动(简称房颤)患者microRNA-328(miRNA-328)的表达水平及左心房内径(LAD)的变化,探讨miRNA-328与房颤患者心房重构的相关性。方法选取房颤患者120例,分为阵发性房颤(40例)、持续性房颤(48例)、永久性房颤(32例)3个亚组;对房颤患者进行心功能分级,其中Ⅰ级13例,Ⅱ级40例,Ⅲ级36例,Ⅳ级31例。选择同期正常体检者40例作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测血清中miRNA-328的表达水平,通过心脏彩色多普勒超声检查测量LAD。结果与对照组相比,房颤组血清miRNA-328表达水平显著升高(P<0.05)。房颤亚组中,随着房颤持续时间的延长,miRNA-328水平逐渐升高;永久性房颤亚组miRNA-328最高,与阵发性房颤亚组、持续性房颤亚组比较有统计学差异(P<0.05);但阵发性房颤亚组与持续性房颤亚组比较,miRNA-328表达水平无统计学差异(P>0.05)。房颤组中,血清miRNA-328表达水平与LAD呈正相关(r=0.264,P<0.05),偏相关分析校正后,二者仍呈正相关(r=0.368,P<0.05)。受试者操作特征曲线分析显示,血清miRNA-328的曲线下面积为0.782,95%置信区间为0.689~0.875(P<0.01)。随着心功能分级的增加,房颤患者血清miRNA-328的表达水平升高,不同心功能分级间miRNA-328表达水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-328可能参与房颤患者的心房重构过程。 展开更多
关键词 microrna-328 心房颤动 心房重构
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血清microRNA-186-5p、microRNA-328-5p表达和乳腺癌患者临床病理特征与新辅助化疗效果的关系 被引量:14
19
作者 莫丹 陈喜裕 +1 位作者 何婕 李新宁 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期9-15,共7页
目的探讨血清microRNA-186-5p(miR-186-5p)、microRNA-328-5p(miR-328-5p)表达和乳腺癌患者临床病理特征与新辅助化疗效果的关系。方法选取2019年2月—2022年2月广西壮族自治区妇幼保健院收治的乳腺癌患者105例作为乳腺癌组,另随机选取... 目的探讨血清microRNA-186-5p(miR-186-5p)、microRNA-328-5p(miR-328-5p)表达和乳腺癌患者临床病理特征与新辅助化疗效果的关系。方法选取2019年2月—2022年2月广西壮族自治区妇幼保健院收治的乳腺癌患者105例作为乳腺癌组,另随机选取该院与乳腺癌患者年龄相匹配的57例健康体检女性作为对照组。乳腺癌患者均接受新辅助化疗,根据化疗反应分为耐药组(30例)和敏感组(75例)。qRT-PCR检测血清miR-186-5p、miR-328-5p表达,比较不同临床病理特征乳腺癌患者血清miR-186-5p、miR-328-5p表达的差异,比较耐药组和敏感组血清miR-186-5p、miR-328-5p表达的差异。多因素Logistic逐步回归分析影响乳腺癌患者新辅助化疗效果的因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-186-5p、miR-328-5p预测乳腺癌患者对新辅助化疗效果的价值。结果乳腺癌组血清miR-186-5p、miR-328-5p mRNA相对表达量低于对照组(P<0.05)。T_(3)、T_(4)期、N_(1~3)期、HER2阳性乳腺癌患者血清miR-186-5p、miR-328-5p mRNA相对表达量低于T_(2)期、N_(0)期、HER2阴性乳腺癌患者(P<0.05)。耐药组血清miR-186-5p、miR-328-5p mRNA相对表达量低于敏感组(P<0.05),T_(3)、T_(4)期、N_(1~3)期占比高于敏感组(P<0.05)。N分期[OR=3.497(95%CI:1.737,7.041)]、miR-186-5p[OR=1.680(95%CI:1.169,2.415)]、miR-328-5p[OR=1.519(95%CI:1.134,2.034)]是影响乳腺癌患者新辅助化疗耐药的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-186-5p、miR-328-5p及两者联合预测乳腺癌患者新辅助化疗效果的敏感性分别为76.67%(95%CI:0.553,0.856)、70.00%(95%CI:0.510,0.808)、90.00%(95%CI:0.768,0.977),特异性分别为74.67%(95%CI:0.528,0.831)、76.00%(95%CI:0.544,0.840)、90.67%(95%CI:0.776,0.984)。结论乳腺癌患者血清miR-186-5p、miR-328-5p表达下调,可能与乳腺癌患者临床病理特征及化疗耐药有关,均可作为新辅助化疗疗效评估的标志物。 展开更多
关键词 乳腺癌 临床特征 新辅助化疗 microrna-186-5p microrna-328-5p
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MicroRNA-30a、microRNA-181a在原发免疫性血小板减少症中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 谭琳 谢瑜 +1 位作者 杨坚 黄颖 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第24期63-68,共6页
目的检测原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血单个核细胞(PBMC)microRNA-30a(miR-30a)、microRNA-181a(miR-181a)的表达,并分析其临床意义。方法选取2020年1月—2020年12月昆明医科大学第一附属医院收治的ITP患者48例作为ITP组,另取... 目的检测原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血单个核细胞(PBMC)microRNA-30a(miR-30a)、microRNA-181a(miR-181a)的表达,并分析其临床意义。方法选取2020年1月—2020年12月昆明医科大学第一附属医院收治的ITP患者48例作为ITP组,另取同期该院40例化疗后骨髓抑制血小板减少患者作为对照组,体检健康者45例作为健康组。检测3组血小板计数(PLT)、平均血小板体积(MPV),采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中miR-30a、miR-181a的表达,分析miR-30a、miR-181a与血小板参数的相关性,以及对ITP的诊断价值。结果ITP组miR-30a、miR-181a相对表达量高于对照组和健康组(P<0.05);ITP组PLT、MPV低于对照组和健康组(P<0.05)。miR-30a与PLT、MPV呈负相关(r=-0.278和-0.247,P<0.05),与出血分级呈正相关(r=0.221,P<0.05);miR-181a与PLT、MPV呈负相关(r=-0.224和-0.301,P<0.05),与出血分级呈正相关(r=0.236,P<0.05)。miR-30a[O^R=1.876(95%CI:1.230,6.336)]和miR-181a[O^R=2.665(95%CI:1.365,8.558)]升高是发生ITP的独立危险因素(P<0.05)。以miR-30a、miR-181a及其回归系数建立临床模型的多元回归方程Logistic(P)=-4.115+1.305×MPV-1.258×miR-30a-1.664×miR-181a。该临床模型诊断ITP的标准误为0.055,AUC为0.889(95%CI:0.662,0.956),敏感性为75.25%(95%CI:1.123,2.084)、特异性为88.24%(95%CI:1.672,2.583)。结论miR-30a、miR-181a与ITP发生相关,通过miR-30a、miR-181a建立个体化临床模型可准确判断ITP的发生,且具有较高的临床实用价值。 展开更多
关键词 原发免疫性血小板减少症 microrna-30a microrna-181a 临床模型 预测
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