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microRNA-199a/b-3p对乳腺癌细胞运动能力的影响 被引量:6
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作者 王子航 李春实 +2 位作者 康劲松 米旭光 刘磊 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1242-1244,共3页
目的:探讨microRNA-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力的机制。方法:在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌迁移侵袭的影响... 目的:探讨microRNA-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力的机制。方法:在乳腺癌MDA-MB-231细胞中,转入miR-199a/b-3p mimcs,免疫印迹法检测PAK4的表达量变化;迁移和侵袭实验检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌迁移侵袭的影响;细胞膜皱起检测,超表达miR-199a/b-3p和干扰PAK4表达对乳腺癌细胞细胞膜皱起的影响。结果:在MDA-MB-231细胞中,超表达miR-199a/b-3p或干涉内源PAK4蛋白表达,均能下调细胞的迁移率、侵袭率和平均细胞膜皱起面积。结论:miR-199a/b-3p抑制乳腺癌细胞运动能力部分是通过抑制PAK4表达实现的,且miR-199a/b-3p具有抗乳腺癌迁移药物开发的潜质。 展开更多
关键词 乳腺癌 microrna-199a/b-3p 迁移侵袭 细胞膜皱起 PAK4
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MicroRNA-199a-5p和HIF-1α在慢性阻塞性肺疾病上皮细胞中的表达及相关性 被引量:6
2
作者 李新 努尔阿米娜·铁力瓦尔迪 +1 位作者 穆清爽 古力鲜·马合木提 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第7期821-825,共5页
目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者经肺泡灌洗获得上皮细胞中MicroRNA-199a-5p和缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达水平,探讨其与疾病分期和严重程度的相关性及两者间的表达关系,为疾病的发生机制提供参考。方法选择2018年5月至2019年5月... 目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者经肺泡灌洗获得上皮细胞中MicroRNA-199a-5p和缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达水平,探讨其与疾病分期和严重程度的相关性及两者间的表达关系,为疾病的发生机制提供参考。方法选择2018年5月至2019年5月入该院诊断COPD患者共120例,其中稳定期80例,急性发作期40例,根据肺功能检测分为轻度30例,中度60例,重度30例;经肺泡灌洗获得上皮细胞,并鉴定细胞形态,然后采用实时荧光定量PCR法检测细胞MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达水平,分析不同疾病分期和严重程度患者间MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达的差异性,以及两者间的相关性。结果急性期患者上皮细胞MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达水平显著高于稳定期,重度患者高于中度,中度患者高于轻度,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析发现,MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达水平呈显著正相关(r=0.856,P=0.003)。结论COPD患者上皮细胞MicroRNA-199a-5p和HIF-1α表达上调与疾病分期和严重程度密切相关,两者可能发挥协同作用关系。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 肺泡灌洗 上皮细胞 microrna-199a-5p 缺氧诱导因子
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脂多糖诱发小鼠急性肺损伤microRNA-199a表达及其对基因表达的调控 被引量:4
3
作者 才志刚 张绍明 +3 位作者 张珩 周宜勇 吴海波 徐小平 《华南国防医学杂志》 CAS 2011年第4期305-309,共5页
目的观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱发的小鼠急性肺损伤中,microRNA-199a(mi R-199a)的表达变化及其对基因的表达调控。方法通过小鼠气道向其肺内注入LPS,构建小鼠急性肺损伤模型,采用Northern blot分析mi R-199a的表达水平;构建... 目的观察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱发的小鼠急性肺损伤中,microRNA-199a(mi R-199a)的表达变化及其对基因的表达调控。方法通过小鼠气道向其肺内注入LPS,构建小鼠急性肺损伤模型,采用Northern blot分析mi R-199a的表达水平;构建mi R-199a的过表达腺病毒,将其转染肺上皮A549细胞,使其过表达;mRNA基因表达芯片分析mi R-199a过表达对基因表达的调控作用。结果 mi R-199a在急性肺损伤病理过程中表达明显降低;mi R-199a主要调控代谢及细胞周期相关基因的表达。结论 mi R-199a在LPS诱发的急性肺损伤病理过程中表达降低,mi R-199a过表达能够促进肺上皮A549细胞中代谢相关基因及细胞周期相关基因的表达。 展开更多
关键词 脂多糖 急性肺损伤 MICRORNA microrna-199a
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microRNA-199a/b-3p表达与肝细胞癌临床预后的相关性 被引量:5
4
作者 刘磊 李首庆 +1 位作者 米旭光 方艳秋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期806-808,共3页
目的:检测肝癌组织中micro RNA-199a/b-3p的表达变化,探讨mi R-199a/b-3p表达与肝细胞癌临床预后的相关性。方法:通过荧光定量检测法检测肿瘤组织与相应癌旁组织中mi R-199a/b-3p的表达变化,分析其与临床病例参数的相关性。结果:肝细胞... 目的:检测肝癌组织中micro RNA-199a/b-3p的表达变化,探讨mi R-199a/b-3p表达与肝细胞癌临床预后的相关性。方法:通过荧光定量检测法检测肿瘤组织与相应癌旁组织中mi R-199a/b-3p的表达变化,分析其与临床病例参数的相关性。结果:肝细胞癌患者肿瘤组织中mi R-199a/b-3p表达水平较癌旁组织均显著下调(P<0.05);发生转移患者的肝癌组织中mi R-199a/b-3p表达低于未转移患者;mi R-199a/b-3p高表达肝细胞癌患者的无瘤生存时间优于低表达患者(P<0.05)。结论:mi R-199a/b-3p低表达可能与肝细胞癌转移及预后不良相关。 展开更多
关键词 肝细胞癌 microrna-199a/b-3p 无瘤生存期
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MicroRNA-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响 被引量:2
5
作者 朱楠 张积森 +2 位作者 荆珏华 钱军 仇汪宝 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-163,共5页
目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆... 目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-199a-3p的表达量,Western blot法检测各组细胞中髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切情况,利用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,并对实验结果进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中,miR-199a-3p的表达量明显升高,MCL-1蛋白的表达降低,PARP蛋白的剪切水平增加,细胞的凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 凋亡 microrna-199a-3p 转染
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MicroRNA-199a/b-3p抑制三阴乳腺癌细胞增殖机制研究 被引量:2
6
作者 王子航 王志成 +3 位作者 张嘉星 范运达 康劲松 米旭光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期480-482,共3页
目的:探讨microRNA-199a/b-3p(miR199)抑制三阴乳腺癌细胞增殖存活的作用机制。方法:在三阴乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231转染miR199,荧光定量检测miR199表达量;MTT法检测转染miR199对三阴乳腺癌细胞存活率的影响;细胞周期分析检测,转染m... 目的:探讨microRNA-199a/b-3p(miR199)抑制三阴乳腺癌细胞增殖存活的作用机制。方法:在三阴乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231转染miR199,荧光定量检测miR199表达量;MTT法检测转染miR199对三阴乳腺癌细胞存活率的影响;细胞周期分析检测,转染miR199对在乳腺癌细胞细胞周期的影响。结果:超表达miR199后,三阴乳腺癌细胞BT549、MDA-MB-231的增殖率分别下降(41.02±2.34)%和(28.42±6.70)%,细胞周期均被阻滞在G1期。结论:miR-199a/b-3p抑制三阴乳腺癌增殖,具有抗三阴乳腺癌增殖药物开发的潜质。 展开更多
关键词 三阴乳腺癌 microrna-199a/b-3p 增殖
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MicroRNA-199a-5p在胃癌组织中的表达及其意义 被引量:2
7
作者 李燕彬 胡宝光 +3 位作者 李玉明 田晓坤 张明凯 葛蓬勃 《滨州医学院学报》 2017年第1期4-6,32,共4页
目的探讨MicroRNA-199a-5p在胃癌的发生、发展、转移中的作用。方法应用实时聚合酶链式反应(Real-Time RT-PCR)技术检测MicroRNA-199a-5p在胃癌组织及正常胃粘膜组织中的表达量,并分析其表达量与胃癌临床特征的关系。结果 MicroRNA-199a... 目的探讨MicroRNA-199a-5p在胃癌的发生、发展、转移中的作用。方法应用实时聚合酶链式反应(Real-Time RT-PCR)技术检测MicroRNA-199a-5p在胃癌组织及正常胃粘膜组织中的表达量,并分析其表达量与胃癌临床特征的关系。结果 MicroRNA-199a-5p在肿瘤组织中的表达量(1.15±0.18)要明显低于正常胃粘膜组织(2.84±3.14)(P<0.05),而且其表达量与肿瘤的大小、分期、分化程度、有无淋巴结转移具有相关性。结论 MicroRNA-199a-5p的低表达在胃癌的发生、发展及侵袭和转移具有重要的作用。 展开更多
关键词 胃癌 microrna-199a-5p 上皮细胞间质化 TNM分期
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早期肝细胞癌患者循环microRNA-199a/b-3p的检测及临床意义 被引量:3
8
作者 米旭光 刘磊 +1 位作者 李首庆 方艳秋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期683-685,689,共4页
目的:检测早期肝细胞癌患者血清中microRNA-199a/b-3p的表达变化,探讨在肝细胞癌诊断中的价值。方法:收集肝细胞癌患者血清标本30例、肝硬化患者血清标本30例、健康人血清标本30例。提取血清总RNA逆转录,应用荧光定量检测法检测血清中mi... 目的:检测早期肝细胞癌患者血清中microRNA-199a/b-3p的表达变化,探讨在肝细胞癌诊断中的价值。方法:收集肝细胞癌患者血清标本30例、肝硬化患者血清标本30例、健康人血清标本30例。提取血清总RNA逆转录,应用荧光定量检测法检测血清中miRNA-199a/b-3p的表达变化,并与AFP进行比较。结果:肝细胞癌、肝硬化患者血清miRNA-199a/b-3p水平均显著低于健康对照组(P<0.05);miRNA-199a/b-3p诊断肝硬化和早期肝细胞癌的准确度及阳性率均优于AFP。结论:血清miRNA-199a/b-3p表达变化对早期肝细胞癌和肝硬化的具有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 肝细胞癌 microrna-199a/b-3p 血清 AFP
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MicroRNA-199a-3p在肾癌中的表达及作用 被引量:8
9
作者 陶良俊 秦超 +7 位作者 曹强 钱健 蔡宏宙 朱建 李普 邵鹏飞 孟小鑫 殷长军 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2012年第4期229-232,241,共5页
目的检测microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-1... 目的检测microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-199a-3p后,通过CCK-8、克隆形成、Transwell以及细胞周期检测来探究其在肾癌细胞中的作用。结果 miR-199a-3p在肾癌细胞中明显低表达,在78%(14/18)的肾癌组织中亦明显低表达;上调miR-199a-3p可显著抑制肾癌细胞的增殖、存活和侵袭并能诱导细胞周期G1期阻滞。结论我们的研究显示在肾癌中miR-199a-3p明显低表达并参与肾癌的发生、发展,这表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断和治疗靶点的潜能。 展开更多
关键词 microrna-199a-3p 抑癌基因 肾细胞癌
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MicroRNA-122-5p与MicroRNA-199a-5p在EMS患者血清的表达及临床意义 被引量:7
10
作者 袁琳 张建洁 +3 位作者 陈雪 郑艳 姚燕 李平 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第7期48-52,共5页
目的探讨micro RNA-122-5p(mi R-122-5p)与micro RNA-199a-5p(mi R-199a-5p)在子宫内膜异位症(EMS)患者血清的表达及临床意义。方法前瞻性设计,随机选取2016年1月—2017年12月华北石油管理局总医院诊治的EMS患者90例(EMS组)及同期不孕... 目的探讨micro RNA-122-5p(mi R-122-5p)与micro RNA-199a-5p(mi R-199a-5p)在子宫内膜异位症(EMS)患者血清的表达及临床意义。方法前瞻性设计,随机选取2016年1月—2017年12月华北石油管理局总医院诊治的EMS患者90例(EMS组)及同期不孕症检查的患者70例(对照组)为研究对象。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组人群血清的mi R-122-5p和mi R-199a-5p的表达及白细胞介素-6(IL-6)的表达,并分析其与临床特征的相关性。构建受试者操作特征(ROC)曲线。结果 EMS组患者的血清及腹腔液中IL-6、miR-122-5p、miR-199a-5p的表达与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05),EMS组均增高。miR-122-5p的表达与IL-6水平(r=0.578,P <0.05)、miR-199a-5p表达(r=0.721,P <0.05)呈正相关。miR-199a-5p的表达与IL-6水平(r=0.562,P<0.05)呈正相关。miR-122-5p和miR-199a-5p检测EMS的敏感性分别为94.7%和92.1%,特异性分别为90.5%和88.6%。结论血清miR-122-5p和miR-199a-5p在EMS患者中的表达增加,miR-122-5p与miR-199a-5p有成为诊断子宫内膜异位症的生物标志物的潜力。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 miR-122-5p/microRNAs miR-199a-5p/microRNAs
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Propofol inhibits the adhesion of hepatocellular carcinoma cells by upregulating microRNA-199a and downregulating MMP-9 expression 被引量:14
11
作者 Jian Zhang Dan Zhang +2 位作者 Guo-Qing Wu Zhi-Ying Feng Sheng-Mei Zhu 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2013年第3期305-309,共5页
BACKGROUND: Propofol is one of the extensively and commonly used intravenous anesthetics and has the ability to influence the proliferation, motility, and invasiveness of many cancer cells. In this study, the effects ... BACKGROUND: Propofol is one of the extensively and commonly used intravenous anesthetics and has the ability to influence the proliferation, motility, and invasiveness of many cancer cells. In this study, the effects of propofol on hepatocellular carcinoma cells invasion ability were examined. METHODS: We assessed the invasion ability of HepG2 cells in vitro by determining enzyme activity and protein expression of MMP-9 using gelatin zymography assay and Western blot. The real-time PCR was used to evaluate the effect of propofol on microRNA-199a (miR-199a) expression, and miR-199a-2 precursor to evaluate whether over-expression of miR-199a can affect MMP-9 expression. Finally, the effect of miR-199a on propofol-induced anti-tumor activity using anti-miR-199a was assessed. RESULTS: Propofol significantly elevated the expression of miR-199a and inhibited the invasiveness of HepG2 cells. Propofol also efficiently decreased enzyme activity and protein expression of MMP-9. Moreover, the over-expression of miR-199a decreased MMP-9 protein level. Interestingly, the neutralization of miR-199a by anti-miR-199a antibody reversed the effect of propofol on alleviation of tumor invasiveness and inhibition of MMP-9 activity in HepG2 cells. CONCLUSION: Propofol decreases hepatocellular carcinoma cell invasiveness, which is partly due to the down-regulation of MMP-9 expression by miR-199a. 展开更多
关键词 PROPOFOL INVASION MMP-9 HepG2 cells microrna-199a hepatocellular carcinoma
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外周血microRNA-199a水平与特发性肺动脉高压预后的相关性 被引量:1
12
作者 宋玮 齐咏 陈卓昌 《心血管病学进展》 CAS 2021年第8期763-766,共4页
目的探讨外周血微小核糖核酸-199a(miRNA-199a)与特发性肺动脉高压(IPAH)预后的相关性。方法选取2015年11月—2017年11月河南省人民医院收治的IPAH患者42例(IPAH组),另选取同期性别、年龄匹配的健康人40例(对照组)作为研究对象,采用逆... 目的探讨外周血微小核糖核酸-199a(miRNA-199a)与特发性肺动脉高压(IPAH)预后的相关性。方法选取2015年11月—2017年11月河南省人民医院收治的IPAH患者42例(IPAH组),另选取同期性别、年龄匹配的健康人40例(对照组)作为研究对象,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组外周血miRNA-199a表达水平;采用Pearson相关分析法对IPAH组miRNA-199a与心导管检查指标(肺动脉平均压、肺血管阻力和肺血管阻力指数)进行相关性分析;应用ROC曲线评价血浆miRNA-199a表达水平对IPAH患者预后的预测价值。结果IPAH组外周血miRNA-199a水平显著低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义;Pearson相关分析结果显示miRNA-199a表达水平与肺动脉平均压、肺血管阻力和肺血管阻力指数均呈显著负相关(r=-0.509,P<0.05;r=-0.637,P<0.05;r=-0.591,P<0.05);ROC曲线分析结果显示,外周血miRNA-199a预测IPAH患者预后不良的最佳截断值为1.36,预测的AUC为0.834(95%CI 0.734~0.908),与AUC=0.5比较,差异有统计学意义(Z=6.430,P<0.001)。结论IPAH患者外周血miRNA-199a表达水平明显下调,其对IPAH患者预后具有较好的预测价值。 展开更多
关键词 特发性肺动脉高压 微小核糖核酸-199a 肺动脉血管阻力 预后
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microRNA-26a和microRNA-199a在胃癌患者血清中的表达检测及其临床意义 被引量:1
13
作者 周轶冰 《中国现代医生》 2018年第23期22-24,共3页
目的探讨胃癌患者血清中micrRNA-26a和micrRNA-199a表达检测及其临床意义。方法收集佳木斯市中心医院2015年1月~2017年12月期间确诊且行根治术的胃癌患者20例作为实验组,健康人群20例作为对照组,使用qRT-PCR方法对实验组和对照组血清中... 目的探讨胃癌患者血清中micrRNA-26a和micrRNA-199a表达检测及其临床意义。方法收集佳木斯市中心医院2015年1月~2017年12月期间确诊且行根治术的胃癌患者20例作为实验组,健康人群20例作为对照组,使用qRT-PCR方法对实验组和对照组血清中micrRNA-26a和micrRNA-199a的表达水平进行定量检测,分析检测结果的临床意义。结果 micrRNA-26a在实验组术前血清样本中的表达水平(1.76±0.54)明显低于对照组(5.33±1.12)(t=4.55,P=0.002),也明显低于术后血清样本中的表达水平(3.89±0.87)(t=5.11,P=0.001);micrRNA-199a在实验组术前血清样本中的表达水平(29.54±3.12)明显高于对照组(6.07±1.34)(t=6.19,P=0.001),也明显高于术后血清样本中的表达水平(15.87±2.64)(t=5.76,P=0.001)。结论 micrRNA-26a和micrRNA-199a有可能成为胃癌早期诊断的血清标记物。 展开更多
关键词 胃癌 血清样本 microrna-26a microrna-199a
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参附注射液调控大鼠心肌肥大模型microRNA-199a-5p的表达机制 被引量:3
14
作者 毛竹君 熊耀康 +1 位作者 宋洁 袁文俊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期3999-4002,共4页
目的:研究参附注射液对大鼠心肌肥大模型micro RNA-199a-5p的调控机制。方法:60只健康SD大鼠分成3组,模型组和参附注射液组行腹主动脉缩窄术建立心肌肥大模型,假手术组腹主动脉不作缩窄。参附注射液组腹腔注射参附注射液6.0m L·kg^... 目的:研究参附注射液对大鼠心肌肥大模型micro RNA-199a-5p的调控机制。方法:60只健康SD大鼠分成3组,模型组和参附注射液组行腹主动脉缩窄术建立心肌肥大模型,假手术组腹主动脉不作缩窄。参附注射液组腹腔注射参附注射液6.0m L·kg^(-1)·d^(-1);模型组和假手术组均腹腔注射0.9%氯化钠溶液6.0m L·kg^(-1)·d^(-1),连续12周。采用Realtime RT-PCR方法检测大鼠心肌micro RNA-199a-5p的表达。利用生物信息学方法分析micro RNA-199a-5p的候选靶基因,并用Western blot方法检测靶基因HSP70的蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌micro RNA-199a-5p上调(P<0.05);参附注射液组大鼠心肌micro RNA-199a-5p表达量较模型组下调(P<0.05);参附注射液组HSP70蛋白表达较假手术组和模型组显著增加(P<0.01)。结论:micro RNA-199a-5p在心肌肥大中可能发挥重要作用,参附注射液可能通过抑制micro RNA-199a-5p的上调,增加HSP70的蛋白表达水平,抑制心肌肥大大鼠心室重构,从而改善大鼠心功能。 展开更多
关键词 参附注射液 心肌肥大 MICRO RNA-199a-5p 热休克蛋白70
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过表达MicroRNA-199a促进TNFα诱导的脂肪细胞凋亡 被引量:1
15
作者 齐仁立 王琪 +3 位作者 吴永江 王敬 黄金秀 杨飞云 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期180-185,共6页
旨为探明micro RNA-199a(mi R-199a)对脂肪细胞凋亡的影响及核转录因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)在其中的作用。培养3T3-L1脂肪细胞,使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)诱导细胞凋亡。在此基础上分别使用NF-κB阻... 旨为探明micro RNA-199a(mi R-199a)对脂肪细胞凋亡的影响及核转录因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)在其中的作用。培养3T3-L1脂肪细胞,使用肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)诱导细胞凋亡。在此基础上分别使用NF-κB阻断剂PDTC和mi R-199a mimic处理细胞,判断过表达mi R-199a对TNFα诱导的脂肪细胞凋亡的影响及NF-κB在其中的作用。使用流式细胞仪分析细胞凋亡率,试剂盒检测Caspase3/7酶活,双荧光素酶报告系统检测NF-κB活性,q RT-PCR检测mi R-199a的表达水平,Western blotting检测NF-κB相关蛋白变化。结果显示,TNFα可以诱导分化的脂肪细胞凋亡并同时激活NF-κB,激活的NF-κB在TNFα诱导的脂肪细胞凋亡中发挥负调控作用。在脂肪细胞过表达mi R-199a明显抑制NF-κB的激活进而显著促进TNFα诱导的凋亡。mi R-199a通过调控NF-κB活性参与TNFα诱导的脂肪细胞凋亡。 展开更多
关键词 MI R-199a 脂肪细胞 凋亡 TNFA NF-ΚB
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MicroRNA-199a通过缺氧诱导因子1α抑制胃癌细胞上皮间充质转化 被引量:2
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作者 郑桁 张伟 王康 《重庆医学》 CAS 北大核心 2016年第35期4914-4916,4921,共4页
目的探讨微小RNA-199a(miR-199a)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达对缺氧状态下胃癌细胞上皮间充质转化(EMT)的影响及可能的机制。方法低氧处理胃癌细胞24h,通过转染si-HIF-1α和miR-199amimic,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检... 目的探讨微小RNA-199a(miR-199a)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达对缺氧状态下胃癌细胞上皮间充质转化(EMT)的影响及可能的机制。方法低氧处理胃癌细胞24h,通过转染si-HIF-1α和miR-199amimic,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测miR-199a的表达水平,蛋白质印迹法(Western blotting)检测HIF-1α及相关EMT蛋白的变化,镜下观察胃癌细胞形态。结果低氧处理后,能下调miR-199amRNA表达,上调HIF-1α和间叶细胞标志蛋白表达,下调E-钙黏素(E-cadherin)蛋白表达。转染miR-199amimic后能抑制HIF-1α的蛋白表达,转染si-HIF-1α和miR-199amimic后能部分逆转低氧的作用,抑制EMT过程的发展。结论 miR-199a可能通过降低HIF-1α的表达抑制缺氧状态下胃癌细胞的EMT过程的发生。 展开更多
关键词 微小RNA-199a 缺氧诱导因子-1Α 缺氧 上皮间充质转化
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SH-SY5Y神经细胞氧化损伤时microRNA-199a和Sirt1表达变化 被引量:4
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作者 万静枝 袁丁 +4 位作者 邓丽丽 张长城 刘朝奇 周志勇 王婷 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期72-76,共5页
目的:观察神经细胞氧化损伤时microRNA-199a(miRNA-199a)和Sirt1表达的变化,探讨miRNA-199a对Sirt1的调控作用。方法:不同浓度双氧水(600μmol/L,1 200μmol/L)刺激体外培养的SH-SY5Y细胞12h造成损伤。MTT检测细胞活力,DCFA-DA探针检测... 目的:观察神经细胞氧化损伤时microRNA-199a(miRNA-199a)和Sirt1表达的变化,探讨miRNA-199a对Sirt1的调控作用。方法:不同浓度双氧水(600μmol/L,1 200μmol/L)刺激体外培养的SH-SY5Y细胞12h造成损伤。MTT检测细胞活力,DCFA-DA探针检测细胞内活性氧水平,Hochest染色分析细胞凋亡,RT-PCR检测miRNA-199a的表达,细胞免疫荧光和Western blot检测Sirt1蛋白水平。结果:600μmol/L和1 200μmol/L双氧水刺激SH-SY5Y后细胞活力显著下降,分别降低27.0%和53.6%;ROS荧光强度细胞凋亡显著上升且具有浓度依赖性;miRNA-199a的表达明显上升,分别上升23.0%和51.0%;Sirt1蛋白表达量下降具有浓度依赖性。结论:双氧水刺激SH-SY5Y神经细胞时miRNA-199a表达升高,Sirt1的表达降低。Sirt1水平降低与miRNA-199a通过调控Sirt1表达参与氧化损伤有关[1]。 展开更多
关键词 双氧水 miRNA-199a SIRT1 SH-SY5Y神经细胞 氧化损伤
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microRNA-199a:子宫内膜异位症中的关键因子 被引量:3
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作者 苟凤钗 杨红 +2 位作者 钱麟 章晓乐 齐聪 《河北医药》 CAS 2019年第12期1888-1893,共6页
子宫内膜异位症是一种常见的雌激素依赖性疾病,其特征在于子宫外的子宫内膜组织的生长。微小RNA最近已被确定为调节靶基因表达的调节因子,并被认为参与子宫内膜异位症的发展。miR-199a在子宫内膜异位症患者子宫内膜中的表达水平较低,与... 子宫内膜异位症是一种常见的雌激素依赖性疾病,其特征在于子宫外的子宫内膜组织的生长。微小RNA最近已被确定为调节靶基因表达的调节因子,并被认为参与子宫内膜异位症的发展。miR-199a在子宫内膜异位症患者子宫内膜中的表达水平较低,与正常女性子宫内膜相比,卵巢子宫内膜瘤的表达水平甚至更低。MiR-199a在子宫内膜间质细胞(ESC)中靶向并抑制IkappaB激酶β(IKKb),随着IKKb的减少,miR-199a抑制了ESC中的核因子-κB(NF-κB)途径激活和白细胞介素-8(IL-8)的产生。miR-199a通过血管内皮生长因子A(VEGF-A)途径抑制部分缺氧条件下胚胎干细胞的血管生成潜能。所有这些发现表明,在子宫内膜异位症中下调的miR-199a部分通过IKK/NF-κB途径,VEGF-A途径抑制和降低的IL-8表达减弱了体外胚胎干细胞的粘附侵袭和血管生成能力。因此,miR-199a可能在子宫内膜异位症的发病机制中发挥关键作用,并可能成为该疾病的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 miR-199a 核因子-ΚB 白细胞介素-8 血管内皮生长因子A
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microRNA-199a-3p靶向CDK7对膀胱肿瘤细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 邵长山 徐深秋 +1 位作者 余淦 肖俊 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2018年第5期301-305,共5页
目的探讨microRNA-199a-3p对膀胱肿瘤细胞增殖的影响及其作用机制。方法应用逆转录实时定量PCR检测膀胱肿瘤新鲜组织中miR-199a-3p及CDK7的表达水平,并对二者的表达进行相关分析。逆转录实时定量PCR验证转染体系的有效性;增殖实验明确mi... 目的探讨microRNA-199a-3p对膀胱肿瘤细胞增殖的影响及其作用机制。方法应用逆转录实时定量PCR检测膀胱肿瘤新鲜组织中miR-199a-3p及CDK7的表达水平,并对二者的表达进行相关分析。逆转录实时定量PCR验证转染体系的有效性;增殖实验明确miR-199a-3p对膀胱肿瘤细胞的影响;荧光素酶报告系统证实miR-199a-3p对CDK7 3′UTR的靶向作用;免疫印迹实验验证miR-199a-3p对CDK7蛋白水平的影响;最后行功能回复实验。结果膀胱肿瘤新鲜组织中miR-199a-3p的表达较正常对照明显降低,CDK7的表达则明显增加,两者呈负相关关系;miR-199a-3p类似物和抑制剂转染成功后能明显上调或下调miR-199a-3p的表达;miR-199a-3p可以明显抑制膀胱肿瘤细胞的增殖,而miR-199a-3p抑制剂可以促进其增殖;荧光素酶报告系统证实miR-199a-3p与CDK7的3′UTR靶向结合,同时miR-199a-3p可以明显抑制膀胱肿瘤细胞CDK7的表达;CDK7可以回复或者部分回复miR-199a-3p对膀胱肿瘤细胞的增殖抑制作用。结论microRNA-199a-3p可通过靶标基因CDK7实现其对膀胱肿瘤细胞的增殖抑制作用。 展开更多
关键词 MiR-199a-3p CDK7 膀胱肿瘤 增殖 靶向
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CT增强在结肠癌分期中的应用及联合血清CEA、CA199、CA724及microRNA-21对良恶性病变的诊断价值 被引量:12
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作者 陈志林 徐秋贞 +4 位作者 陈文龙 邵海磊 童天夫 杜阳 王皓 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第20期3923-3928,共6页
目的:探讨CT增强在结肠癌分期中的应用及联合血清CEA、CA199、CA724及microRNA-21对良恶性病变的诊断价值。方法:将我院2018年3月至2022年3月确诊的85例结肠癌患者纳入观察组,选取同期85例结肠良性肿瘤患者纳入对照组。以病理结果为金标... 目的:探讨CT增强在结肠癌分期中的应用及联合血清CEA、CA199、CA724及microRNA-21对良恶性病变的诊断价值。方法:将我院2018年3月至2022年3月确诊的85例结肠癌患者纳入观察组,选取同期85例结肠良性肿瘤患者纳入对照组。以病理结果为金标准,分析CT增强分期对结肠癌患者T、N、M分期的诊断价值,并比较两组的血清CEA、CA199、CA724、microRNA-21水平,同时评估CT增强及血清CEA、CA199、CA724、microRNA-21单独及联合诊断结肠癌良恶性病变价值。结果:CT增强T分期准确率为88.2%,一致性较高(Kappa值=0.812);CT增强N分期准确率为63.5%,一致性一般(Kappa值=0.449);CT增强M分期准确率为90.6%,一致性较高(Kappa值=0.739)。观察组血清CEA、CA199、CA724、microRNA-21水平均高于对照组(P<0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示:CT增强及血清CEA、CA199、CA724、microRNA-21单独及联合诊断结肠癌良恶性病变的ROC曲线下的面积(AUC)(0.95CI)分别为0.783、0.722(0.497-0.944)、0.694(0.475-0.916)、0.704(0.434-0.977)、0.687(0.393-0.967)、0.917(0.829-0.982)。CT增强及联合血清CEA、CA199、CA724、microRNA-21检查恶性结肠癌患者75例,诊断灵敏度88.2%,特异性90.6%,准确性89.4%。结论:CT增强可以应用于结肠癌分期,并且CT增强结合血清CEA、CA199、CA724及microRNA-21可以有效、准确地判断结肠癌的良恶性病变情况,对提高结肠癌的诊断具有重要临床意义。 展开更多
关键词 CT增强 CEA CA199 CA724 microrna-21 结肠癌 分期 良恶性病变
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