LncRNA SLC16A1-AS1调节miR-367-3p/KLF5轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

1

作者 陈晨 林萍 +2 位作者 李亚茹 丁翠青 李琳 《中国性科学》 2025年第3期80-85,共6页

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)SLC16A1-AS1调节微小RNA-367-3p(miR-367-3p)/Krüppel样因子5(KLF5)轴对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 选取2022年1月至2023年1月在衡水市人民医院进行手术治疗的43... 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)SLC16A1-AS1调节微小RNA-367-3p(miR-367-3p)/Krüppel样因子5(KLF5)轴对子宫内膜癌(EC)细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法 选取2022年1月至2023年1月在衡水市人民医院进行手术治疗的43例EC患者作为研究对象,术中取其EC组织和癌旁组织。检测SLC16A1-AS1、miR-367-3p、KLF5在EC组织和细胞系HEC-1A、HEC-1B、AN3CA中的表达水平。将体外培养的AN3CA细胞随机分为对照组、si-NC组、si-SLC16A1-AS1组、si-SLC16A1-AS1+inhibitor NC组、si-SLC16A1-AS1+miR-367-3p inhibitor组。检测各组细胞增殖、凋亡情况;检测细胞中KLF5、凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]、EMT标志蛋白[波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)]表达;检测SLC16A1-AS1与miR-367-3p、miR-367-3p与KLF5之间的靶向关系。结果 与癌旁组织和正常人子宫内膜上皮细胞系CP-H085比较,EC组织及EC细胞中SLC16A1-AS1和KLF5 mRNA表达水平升高,miR-367-3p表达水平降低(P<0.05)。与对照组和si-NC组比较,si-SLC16A1-AS1组细胞增殖活力、增殖率、SLC16A1-AS1和KLF5 mRNA表达、KLF5、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低,细胞凋亡率、miR-367-3p、Bax、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05);与si-SLC16A1-AS1+inhibitor NC组比较,si-SLC16A1-AS1+miR-367-3p inhibitor组细胞增殖活力、增殖率、KLF5 mRNA表达、KLF5、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达升高,细胞凋亡率、miR-367-3p、Bax、E-cadherin蛋白表达降低(P<0.05);miR-367-3p和SLC16A1-AS1、KLF5均存在靶向调控关系。结论 LncRNA SLC16A1-AS1在EC组织及细胞中表达升高,抑制LncRNA SLC16A1-AS1表达可通过调节miR-367-3p/KLF5轴抑制EC细胞增殖和EMT,促进其凋亡。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 长链非编码RNA SLC16A1-AS1 微小RNA-367-3p/Krüppel样因子5轴 增殖 凋亡 上皮间质转化

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lncRNA MEG8通过调控miR-367-3p/PTEN介导慢性阻塞性肺疾病发展的分子机制研究 被引量：1

2

作者 王熠 成诚 +1 位作者 黄飞 童国强 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第13期1595-1601,共7页

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)MEG8通过调控miR-367-3p/磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)介导慢性阻塞性肺疾病(COPD)发展的分子机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测16HBE细胞和COPD组织lncRNA MEG8表达水平;在香烟烟... 目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)MEG8通过调控miR-367-3p/磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)介导慢性阻塞性肺疾病(COPD)发展的分子机制。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测16HBE细胞和COPD组织lncRNA MEG8表达水平;在香烟烟雾提取物(CSE)刺激后的16HBE细胞中过表达lncRNA MEG8及加入miR-367-3p inhibitor后同时敲减lncRNA MEG8或PTEN,采用MTT法、流式细胞术、酶联免疫吸附试验和免疫印迹法检测细胞凋亡、细胞增殖和炎症因子水平的变化;利用双荧光素酶报告系统对lncRNA MEG8、miR-367-3p、PTEN的靶向关系进行验证。结果 MEG8在CSE刺激的16HBE细胞和COPD临床组织样本中表达降低(P<0.05)。相比于CSE组,过表达MEG8后CSE刺激的16HBE细胞凋亡和炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平降低(P<0.05),促凋亡蛋白Bax、Caspase3和Cleaved-caspase3表达水平降低(P<0.05),凋亡抑制因子Bcl-2表达水平升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验验证了MEG8可靶向抑制miR-367-3p(P<0.05),同时miR-367-3p可靶向抑制PTEN的表达(P<0.05),进而抑制CSE刺激的16HBE细胞的凋亡和炎症反应(P<0.05)。在CSE刺激下,相较于Control组,加入miR-367-3p inhibitor可显著上调16HBE细胞中PTEN的蛋白表达水平(P<0.05),增强细胞增殖活性(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),显著下调促凋亡蛋白Bax、Caspase 3和Cleaved-caspase3的表达水平(P<0.05),上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平(P<0.05),抑制炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平(P<0.05),随后敲降MEG8或PTEN可恢复PTEN的蛋白表达水平(P<0.05),抑制细胞增殖活性(P<0.05),逆转miR-367-3p inhibitor导致的细胞凋亡(P<0.05)以及对凋亡相关蛋白的调控作用(P<0.05),增强炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平(P<0.05)。结论 MEG8通过调控miR-367-3p/PTEN轴抑制CSE刺激的16HBE细胞的凋亡和炎症反应,并可能为临床COPD的治疗提供新的治疗策略。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病 lncRNA MEG8 miR-367-3p 磷酸酶张力蛋白同源物基因 细胞凋亡 炎症因子

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LINC01128在子宫内膜癌组织中的表达及其调节miR-367-3p/KLF5轴对细胞恶性进展的影响 被引量：2

3

作者 付倩倩 邵凤霞 黄晓艳 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第9期1653-1662,共10页

该文旨在探究LINC01128在子宫内膜癌(EC)组织中的表达情况及其调节miR-367-3p/Krüppel样因子5(KLF5)轴对细胞恶性进展的影响。qRT-PCR检测LINC01128、miR-367-3p和KLF5 mRNA在EC组织、EC细胞系HEC-1A、人子宫内膜上皮细胞CP-H058... 该文旨在探究LINC01128在子宫内膜癌(EC)组织中的表达情况及其调节miR-367-3p/Krüppel样因子5(KLF5)轴对细胞恶性进展的影响。qRT-PCR检测LINC01128、miR-367-3p和KLF5 mRNA在EC组织、EC细胞系HEC-1A、人子宫内膜上皮细胞CP-H058中的表达水平。将体外培养的HEC-1A细胞随机分为:NC组(正常培养)、si-LINC01128组、si-NC组、miR-367-3p mimic组及miR-NC组。si-NC组、si-LINC01128组、miR-367-3p mimic组、miR-NC组分别转染si-NC、si-LINC01128、miR-367-3pmimic、miR-NC。CCK-8法、TUNEL染色分别检测HEC-1A细胞增殖、凋亡情况;Transwell、划痕实验分别检测HEC-1A细胞侵袭、迁移情况;双荧光素酶报告基因实验验证LINC01128与miR-367-3p、miR-367-3p与KLF5的靶向关系;Western blot检测细胞中KLF5表达情况。与癌旁组织相比,EC组织中LINC01128和KLF5 mRNA表达水平升高,miR-367-3p表达水平降低;与CP-H058细胞相比,EC细胞HEC-1A中LINC01128和KLF5 mRNA表达水平升高,miR-367-3p表达水平降低(P<0.05)。NC组与si-NC组LINC01128、miR-367-3p、KLF5mRNA表达水平以及HEC-1A细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况无显著差异(P>0.05)。与si-NC组相比,siLINC01128组LINC01128、KLF5 mRNA表达水平以及D450值、迁移率、侵袭数、Bcl-2表达水平均降低,miR-367-3p表达水平、凋亡率及Bax表达水平均升高(P<0.05)。NC组与miR-NC组LINC01128、miR-367-3p、KLF5mRNA表达水平以及HEC-1A细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭情况无显著差异(P>0.05)。与miR-NC组对比,miR-367-3p mimic组LINC01128表达水平无显著差异(P>0.05),KLF5mRNA表达水平、D450值、迁移率、侵袭数及Bcl-2表达水平均降低,miR-367-3p表达水平、凋亡率及Bax表达水平均升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-367-3p和LINC01128、KLF5均存在靶向调控关系。LINC01128在EC组织和细胞中呈高表达,干扰LINC01128可通过调节miR-367-3p/KLF5轴抑制EC恶性进展。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 LINC01128 miR-367-3p Krüppel样因子5 恶性进展

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lncRNA SNAI3-AS1调节miR-367-3p/SOX4轴对前列腺癌细胞恶性生物学行为的影响

4

作者 王小虎 李亚灵 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第10期914-922,共9页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNAI3-AS1调节微RNA(miR)-367-3p/高迁移率族盒蛋白4(SOX4)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法实时PCR检测人PCa细胞系DU145、LNCap、PC-3、正常前列腺上皮细胞系RWPE-1以及PC组织、癌旁组织... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)SNAI3-AS1调节微RNA(miR)-367-3p/高迁移率族盒蛋白4(SOX4)轴对前列腺癌(PC)细胞恶性生物学行为的影响。方法实时PCR检测人PCa细胞系DU145、LNCap、PC-3、正常前列腺上皮细胞系RWPE-1以及PC组织、癌旁组织中SNAI3-AS1、miR-367-3p、SOX4 mRNA表达。选取对数生长期的LNCap,设置空白组、阴性对照(vector)组、SNAI3-AS1过表达(vector SNAI3-AS1)组、小干扰RNA(siRNA)阴性对照(si-NC)组、si-SNAI3-AS1组、si-SNAI3-AS1+抑制剂阴性对照(NC inhibitor)组和si-SNAI3-AS1+miR-367-3p inhibitor组。用克隆形成实验、Transwell实验、Hoechst33258染色分别检测细胞克隆形成能力、迁移、侵袭及凋亡;实时PCR检测LNCap中SNAI3-AS1、miR-367-3p、SOX4 mRNA表达;Western blotting检测LNCap中SOX4蛋白表达;报告基因实验验证miR-367-3p与SNAI3-AS1、SOX4的靶向关系。结果SNAI3-AS1、SOX4 mRNA表达在DU145、LNCap、PC-3及PC组织中显著增加,miR-367-3p表达显著降低(P<0.05)。与空白组、vector组相比,vector SNAI3-AS1组SNAI3-AS1、SOX4 mRNA及蛋白表达、克隆数、侵袭与迁移显著增加,miR-367-3p表达、凋亡显著降低(P<0.05);与空白组、si-NC组相比,si-SNAI3-AS1组SNAI3-AS1、SOX4 mRNA及蛋白表达、克隆数、侵袭与迁移显著降低,miR-367-3p表达、凋亡显著增加(P<0.05);与si-SNAI3-AS1+NC inhibitor组相比,si-SNAI3-AS1+miR-367-3p inhibitor组SOX4 mRNA及蛋白表达、克隆数、侵袭与迁移显著增加,miR-367-3p表达、凋亡显著降低(P<0.05),SNAI3-AS1表达无统计学差异(P>0.05)。miR-367-3p与SNAI3-AS1、SOX4存在靶向关系。结论lncRNA SNAI3-AS1通过上调miR-367-3p/SOX4轴抑制PC细胞恶性生物学行为的发展。 展开更多

关键词 lncRNA SNAI3-AS1 miR-367-3p/SOX4轴 前列腺癌细胞 恶性生物学行为

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hsa-miR-21-5p/ZNF367分子轴通过PI3K/Akt通路影响胃癌细胞的增殖和迁移 被引量：11

5

作者 赵志东 郇金亮 +1 位作者 汤文俊 秦贤举 《中国医药生物技术》 2020年第3期269-276,共8页

目的探讨ZNF367通过PI3K/Akt通路抑制胃癌(GC)细胞的增殖和迁移,并初步探讨其作用分子机制。方法收集2015年8月–2018年10月上海市第八人民医院普外科手术切除的GC组织(非坏死部分)和相邻癌旁组织(距肿瘤组织>3 cm)标本46例,同时选... 目的探讨ZNF367通过PI3K/Akt通路抑制胃癌(GC)细胞的增殖和迁移,并初步探讨其作用分子机制。方法收集2015年8月–2018年10月上海市第八人民医院普外科手术切除的GC组织(非坏死部分)和相邻癌旁组织(距肿瘤组织>3 cm)标本46例,同时选取正常人胃黏膜上皮细胞GES1及GC细胞系MGC-803和MKN-45。采用qRT-PCR、Western blot实验检测ZNF367和hsa-miR-21-5p(mi R-21-5p)在组织和细胞系中的表达情况,进行Kaplan-Meier生存分析得出总生存期;利用脂质体LipofectamineTM 2000转染寡核苷酸片段mi RNA-NC、miR-21-5pmimic和miR-21-5pinhibitor至MGC-803细胞,通过CCK8法和划痕实验检测细胞的增殖和迁移能力;采用双荧光素酶报告载体系统验证ZNF367和miR-21-5p的作用靶点,采用qRT-PCR、 Westernblot实验检测miR-21-5pmimic和miR-21-5pinhibitor转染MGC-803细胞中ZNF367、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin以及PI3K/Akt通路中p-PI3K和p-Akt的表达情况。结果 ZNF367在胃癌组织和胃癌细胞系中的表达水平分别显著低于癌旁组织和GES-1细胞(P<0.01),且在MGC-803细胞中表达水平最低,而miR-21-5p的表达正相反;在MGC-803细胞中,OE-ZNF367和miR-21-5p inhibitor转染组的细胞增殖和迁移能力显著低于对照组,而si RNA-ZNF367和miR-21-5pmimic转染组的细胞增殖和迁移能力显著高于对照组;生物信息学和荧光素酶活性实验结果表明ZNF367与miR-21-5p具有直接靶向关系;qRT-PCR、Western blot实验结果表明在miR-21-5p inhibitor转染组中,E-cadherin的表达是显著提高的(P <0.01),而N-cadherin、Vimentin、p-PI3K和p-Akt的表达是显著下降的(P<0.01);在miR-21-5pmimic转染组中,结果相反(P <0.01)。结论 hsa-miR-21-5p/ZNF367分子轴通过调控PI3K/Akt通路抑制EMT过程,从而影响胃癌细胞MGC-803的增殖和迁移。 展开更多

关键词 胃癌 ZNF367 miR-21-5p pI3K/AKT 增殖 迁移

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葛根素通过circ-TLK1/miR-367-3p/TLR4抑制SK-N-SH细胞氧糖剥夺损伤 被引量：7

6

作者 齐献忠 邢英瀛 +1 位作者 张小林 贾燕燕 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期3286-3295,共10页

目的探讨葛根素对缺血性脑卒中(ischemicstroke,IS)神经细胞损伤的保护作用及机制。方法建立氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH损伤模型,以葛根素进行干预,采用q RT-PCR法检测细胞circ-丝氨酸/... 目的探讨葛根素对缺血性脑卒中(ischemicstroke,IS)神经细胞损伤的保护作用及机制。方法建立氧糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)诱导的人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH损伤模型,以葛根素进行干预,采用q RT-PCR法检测细胞circ-丝氨酸/苏氨酸蛋白扰动样激酶1(tousled-like kinase1,TLK1)和miR-367-3p mRNA表达情况;采用MTT法检测细胞存活率;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况;采用ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;采用Western blotting检测细胞Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白表达情况。采用生物信息学在线软件预测miR-367-3p与circ-TLK1、TLR4之间的靶向关系;采用双荧光素酶标记实验和RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA binding protein immunoprecipitation,RIP)实验验证靶向结合关系。结果与模型组比较,葛根素能够明显提高OGD诱导的SK-N-SH细胞存活率(P<0.05、0.01、0.001),显著降低细胞凋亡率(P<0.01、0.001),显著降低IL-6和TNF-α水平(P<0.01、0.001)。模型组circ-TLK1 mRNA表达水平显著升高(P<0.001),葛根素抑制circ-TLK1 mRNA表达水平(P<0.001),过表达circ-TLK1能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护作用(P<0.01、0.001)。circ-TLK1能够靶向负调控miR-367-3p表达,模型组miR-367-3p mRNA表达水平显著降低(P<0.001),葛根素显著上调miR-367-3p m RNA表达水平,抑制miR-367-3p能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护作用(P<0.05、0.001)。miR-367-3p能够靶向负调控TLR4蛋白表达,模型组TLR4蛋白表达水平显著升高(P<0.001),葛根素显著下调TLR4蛋白表达水平(P<0.001),过表达TLR4能够逆转葛根素对OGD诱导的SK-N-SH细胞损伤保护作用(P<0.05、0.001)。circ-TLK1能够通过结合miR-367-3p调控TLR4表达。结论葛根素能够通过作用于circ-TLK1/miR-367-3p/TLR4对IS神经细胞损伤起到保护作用。 展开更多

关键词 葛根素 circ-TLK1 miR-367-3p TLR4 缺血性脑卒中 氧糖剥夺

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miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达及对细胞功能的影响 被引量：4

7

作者 杜宁 王培礼 +2 位作者 王猛 任宏 刘大鹏 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第15期2623-2627,共5页

目的:研究miR-367-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中促进肿瘤生长的作用机制。方法:收集非小细胞肺癌患者的临床标本,检测miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达。利用qRT-PCR、MTT和流式细胞术分别评估miR-367-3... 目的:研究miR-367-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中促进肿瘤生长的作用机制。方法:收集非小细胞肺癌患者的临床标本,检测miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达。利用qRT-PCR、MTT和流式细胞术分别评估miR-367-3p的表达改变对肿瘤细胞增殖和周期的影响。Western blot检测miR-367-3p表达改变对FBXW7的影响。双荧光素酶实验验证miR-367-3p与FBXW7之间的直接关系。结果:miR-367-3p在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于对应癌旁组织。miR-367-3p作为促癌的miRNA,在非小细胞肺癌细胞中促进肿瘤细胞增殖和细胞周期进程。miR-367-3p对NSCLC细胞生物学功能的影响部分依赖靶向抑制FBXW7。结论:miR-367-3p通过靶向抑制FBXW7的表达促进NSCLC细胞增殖和周期。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 miR-367-3p FBXW7 肿瘤生长

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miR-367-3p靶向ZEB2抑制NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭生物学功能研究 被引量：3

8

作者 苏延军 张华 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期782-788,共7页

背景与目的微小RNA在肺癌的发生发展及生物学表型中发挥重要作用。探讨miR-367-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的表达及其对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选取我院收治并手术治疗的NSCLC患者22例(... 背景与目的微小RNA在肺癌的发生发展及生物学表型中发挥重要作用。探讨miR-367-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的表达及其对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选取我院收治并手术治疗的NSCLC患者22例(其中腺癌13例,鳞癌9例),术中留取患者癌组织、癌旁组织及外周血5 mL,同时选取健康查体患者22例,留取外周血5 mL。采用Real-time PCR法检测NSCLC患者癌组织、癌旁组织、外周血及健康查体者外周血中miR-367-3p的相对表达水平。培养肺癌细胞株(A549)与正常支气管上皮细胞(bronchial epithelium transformed with Ad12-SV402B,BEAS-2B)并检测细胞株中miR-367-3p表达水平。转染外源性miR-367-3p后采用MTT和Transwell实验观察转染前后A549细胞增殖和侵袭能力变化。采用生物信息分析miR-367-3p下游靶基因,采用Real-time PCR和Western blot检测转染外源性miR-367-3p前后锌指e-box-binding同源盒2(Zinc finger E-box binding homeobox 2,ZEB2)表达水平。结果22例NSCLC患者,癌组织中miR-367-3p相对表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),同时健康查体者血清中miR-367-3p水平显著高于NSCLC患者(P<0.05);分别以组织和血清中miR-367-3p的相对表达水平为参考,诊断NSCLC受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线下面积分别为0.95(95%CI:0.89-1.00)和0.85(95%CI:0.74-0.97);肺癌细胞株A549转染外源性miR-367-3p后,细胞增殖、迁移能力显著降低(P<0.05);生物信息预测miR-367-3p下游靶基因为ZEB2,上调miR-367-3p表达后,ZEB2基因表达水平降低(P<0.05)。癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据分析ZEB2表达水平与NSCLC患者预后关系显示,ZEB2高表达组NSCLC患者总生存(overall survival,OS)和无疾病进展生存(disease free survival,DFS)与低表达组NSCLC差异无统计学意义(P>0.05),但高表达组显示出了OS及DFS降低的趋势。结论miR-367-3p在NSCLC患者中表达下调,并通过靶向ZEB2基因参与NSCLC的增殖和侵袭生物学过程。 展开更多

关键词 肺肿瘤 miR-367-3p 侵袭 转移

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miR-367-3p靶向SMURF1抑制BCG介导的巨噬细胞凋亡和自噬 被引量：3

9

作者 姬文兰 王启源 +2 位作者 虞秀锋 胡萍 王亚梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期2195-2199,共5页

目的:本研究旨在探讨miR-367-3p对BCG介导的细胞凋亡和自噬途径的调控的影响及其可能的作用机制。方法:采用卡介苗菌株BCG感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,RT-PCR检测miR-367-3p与SMURF1mRNA的表达;Westernblot检测SMURF1、凋亡相关蛋白及自... 目的:本研究旨在探讨miR-367-3p对BCG介导的细胞凋亡和自噬途径的调控的影响及其可能的作用机制。方法:采用卡介苗菌株BCG感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,RT-PCR检测miR-367-3p与SMURF1mRNA的表达;Westernblot检测SMURF1、凋亡相关蛋白及自噬相关蛋白表达水平;菌落形成单位(CFU)计数检测BCG生存率;运用ELISA技术检测巨噬细胞凋亡率;双荧光素酶报告系统、RT-PCR及Westernblot法验证miR-367-3p与SMURF1之间的靶向调控关系。结果:BCG感染诱导巨噬细胞RAW246.7中miR-367-3p高表达,并呈时间依赖性。此外,下调miR-367-3p明显降低BCG感染的巨噬细胞的存活率,并促进巨噬细胞凋亡,同时下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达且上调促凋亡蛋白Bax的表达水平。另外,抑制miR-367-3p表达明显增加巨噬细胞中LC3-Ⅱ表达水平,同时降低p62的表达量,从而加强细胞的自噬水平。生物信息学分析显示SMURF1是miR-367-3p的靶基因。双荧光素酶报告系统、RT-PCR及Westernblot结果证实miR-367-3p可靶向作用于SMURF1-3′-UTR并负调控其表达。结论:下调miR-367-3p通过靶向调控SMURF1可促进巨噬细胞凋亡和自噬进程,进而介导了BCG的免疫逃逸从而抑制胞内BCG的生存,提示miR-367-3p有望成为结核感染的诊断标志物和治疗性疫苗的靶标,可为结核病的基因诊断和治疗提供参考。 展开更多

关键词 miR-367-3p 自噬 凋亡 SMURF1

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lncRNA PURPL通过调控miR-367-3p/MTA3轴抑制肾癌细胞的增殖和侵袭 被引量：2

10

作者 杨凌博 孙建涛 +2 位作者 鲁帅奇 武新超 李小辉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期191-196,共6页

目的观察lncRNA PURPL在肾癌组织中的表达,探讨PURPL/miR-367-3p/MTA3分子轴对肾癌细胞增殖和侵袭的影响及可能的机制。方法采用qRT-PCR检测PURPL在肾癌组织和不同肾癌细胞系中的表达。选择PURPL表达最低的肾癌细胞系,分别感染阴性对照... 目的观察lncRNA PURPL在肾癌组织中的表达,探讨PURPL/miR-367-3p/MTA3分子轴对肾癌细胞增殖和侵袭的影响及可能的机制。方法采用qRT-PCR检测PURPL在肾癌组织和不同肾癌细胞系中的表达。选择PURPL表达最低的肾癌细胞系,分别感染阴性对照慢病毒(对照组)和PURPL慢病毒(PURPL组),采用MTT法和Transwell实验分别检测肾癌细胞活力和侵袭的变化。应用生物信息学技术和双荧光素酶报告基因实验验证PURPL和miR-367-3p的相关性。运用qRT-PCR和Western blot法分别检测PURPL/miR-367-3p/MTA3分子轴表达。结果PURPL在肾癌组织表达明显低于癌旁组织[(0.40±0.14)vs(1.61±0.21),P<0.01]。PURPL在肾癌细胞中的表达明显低于正常肾小管上皮细胞(P<0.05),PURPL表达最低的是OS-RC-2细胞(P<0.01)。与对照组相比,过表达PURPL可显著抑制OS-RC-2细胞增殖(P<0.05)和侵袭(P<0.01)。荧光素酶报告基因证实PURPL竞争性吸附miR-367-3p(P<0.01)。与对照组相比,过表达PURPL显著下调miR-367-3p的表达(P<0.01),上调MTA3的表达(P<0.01)。结论PURPL在肾癌组织及细胞系表达下调,PURPL通过miR-367-3p/MTA3分子轴抑制肾癌OS-RC-2细胞增殖和侵袭,其可能是肾癌治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 肾肿瘤 pURpL miR-367-3p 细胞增殖 细胞侵袭

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lncRNA PITPNA-AS1靶向miR-367-3p调控多发性骨髓瘤细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制 被引量：3

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作者 饶琦 王丹丹 +2 位作者 罗婷 赵佳莉 赵寅 《西部医学》 2022年第6期791-796,802,共7页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PITPNA反义RNA 1(PITPNA-AS1)靶向miR-367-3p调控多发性骨髓瘤细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。方法定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)测定多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226、MM1.S、OPM-2中lncRNA PITPNA-AS1和... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)PITPNA反义RNA 1(PITPNA-AS1)靶向miR-367-3p调控多发性骨髓瘤细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。方法定量实时聚合酶链反应(qRT-PCR)测定多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226、MM1.S、OPM-2中lncRNA PITPNA-AS1和miR-367-3p表达。在RPMI-8226细胞中转染si-NC(si-NC组)、si-lncRNA PITPNA-AS1(si-lncRNA PITPNA-AS1组)、miR-NC(miR-NC组)、miR-367-3p mimics(miR-367-3p组),或同时转染anti-miR-NC与si-lncRNA PITPNA-AS1(anti-miR-NC+si-lncRNA PITPNA-AS1组)、anti-miR-367-3p与si-lncRNA PITPNA-AS1(anti-miR-367-3p+si-lncRNA PITPNA-AS1组),并将未转染的细胞设为对照组(NC组)。采用Western Blot、细胞计数试剂盒8(CCK-8)、细胞克隆形成实验和Transwell实验分别测定RPMI-8226细胞的基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达、细胞活力、克隆形成和迁移、侵袭。双荧光素酶活性检测实验分析lncRNA PITPNA-AS1和miR-367-3p的靶向关系。结果与成骨细胞MC3T3-E1比较,多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226、MM1.S、OPM-2中lncRNA PITPNA-AS1表达量均增加,miR-367-3p的表达量均减少(P<0.05)。干扰lncRNA PITPNA-AS1或miR-367-3p高表达显著降低RPMI-8226细胞的MMP2蛋白、MMP9蛋白的表达量,并降低细胞活力、克隆形式数、迁移和侵袭数量(均P<0.05)。lncRNA PITPNA-AS1靶向调控miR-367-3p的表达。anti-miR-367-3p可以逆转干扰lncRNA PITPNA-AS1对多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226增殖、迁移和侵袭的影响。结论干扰lncRNA PITPNA-AS1通过靶向调控miR-367-3p,从而抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 长链非编码lncRNA pITpNA反义RNA1 miR-367-3p 增殖 迁移 侵袭

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miR-367-3p调控细胞周期素D2重组蛋白表达对肺癌细胞增殖、迁移的影响 被引量：2

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作者 曹磊 张成立 侯颖 《临床外科杂志》 2022年第12期1123-1127,共5页

目的探讨miR-367-3p调控细胞周期素D2重组蛋白(CCND2)表达对肺癌细胞增殖、迁移的影响。方法选取人肺癌细胞Calu、MSTO-211H、NCI-H2347、NCI-H1437、NCI-H1944、NCI-H647、人正常肺细胞HLF-a,qRT-PCR法测定细胞中miR-367-3p表达水平;将... 目的探讨miR-367-3p调控细胞周期素D2重组蛋白(CCND2)表达对肺癌细胞增殖、迁移的影响。方法选取人肺癌细胞Calu、MSTO-211H、NCI-H2347、NCI-H1437、NCI-H1944、NCI-H647、人正常肺细胞HLF-a,qRT-PCR法测定细胞中miR-367-3p表达水平;将Calu细胞分为对照组、miR-367-3p NC组、miR-367-3p mimic组、miR-367-3p mimic+pc-CCND2组;CCK-8法测定Calu细胞活力;流式细胞仪测定细胞凋亡能力;Transwell实验测定细胞侵袭能力;划痕实验测定Calu细胞迁移能力;WB法测定Calu细胞CCND2及凋亡、侵袭相关蛋白表达;荧光素酶实验测定miR-367-3p与CCND2的靶向关系。结果miR-367-3p在人肺癌细胞中呈现低表达;与对照组比较,miR-367-3p mimic组Calu细胞活力、侵袭、迁移能力、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低,凋亡能力、Caspase-3、Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);CCND2过表达可逆转miR-367-3p过表达对Calu细胞活力、侵袭、迁移能力的抑制作用。荧光素酶实验结果显示,miR-367-3p与CCND2存在靶向调节关系。结论miR-367-3p可抑制人肺癌细胞Calu的增殖及迁移能力,可能是通过抑制CCND2实现的。 展开更多

关键词 miR-367-3p 细胞周期素D2重组蛋白 肺癌 增殖 迁移

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LINC01342靶向miR-367-3p调控OX-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡及细胞炎症反应的实验研究

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作者 严磊 李杰 +6 位作者 张雪阳 李萌 张华杰 周锐 母正军 田玲琳 周宇航 《解剖学研究》 CAS 2023年第3期199-204,218,共7页

目的 探究LINC01342靶向miR-367-3p调控氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡及细胞炎症反应的实验研究。方法 用MTT法检测OX-LDL细胞A值;采用100μg/mL OX-LDL处理HUVEC细胞,将细胞分为NC组(正常培养细胞)、OX-LDL组(OX-... 目的 探究LINC01342靶向miR-367-3p调控氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)诱导的血管内皮细胞凋亡及细胞炎症反应的实验研究。方法 用MTT法检测OX-LDL细胞A值;采用100μg/mL OX-LDL处理HUVEC细胞,将细胞分为NC组(正常培养细胞)、OX-LDL组(OX-LDL处理细胞)、si-NC+OX-LDL组(转染si-NC,用OX-LDL处理细胞)、si-LINC01342+OX-LDL组(转染si-LINC01342,用OX-LDL处理细胞)、miR-NC+OX-LDL组(转染miR-NC,用OX-LDL处理细胞)、miR-367-3p+OX-LDL组(转染miR-367-3p,用OX-LDL处理细胞)、si-LINC01342+anti-miR-NC+OX-LDL组(共转染si-LINC01342和anti-miR-NC,用OX-LDL处理细胞)、si-LINC01342+anti-miR-367-3p+OX-LDL组(共转染si-LINC01342和anti-miR-367-3p,用OX-LDL处理细胞),qRT-PCR检测LINC01342和miR-367-3p含量;Western blot法和流式细胞术分别检测细胞凋亡和凋亡蛋白Cleaved-caspase-3;ELISA检测IL-1β、IL-6、TNF-α含量;双荧光素酶报告实验检测LINC01342和miR-367-3p关系。结果 与NC组比较,OX-LDL组LINC01342表达水平、Cleaved-caspase-3蛋白表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高,miR-367-3p表达水平显著降低。下调LINC01342或过表达miR-367-3p可下调OX-LDL诱导的HUVEC细胞Cleaved-caspase-3蛋白表达、凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α含量。LINC01342靶向负调控miR-367-3p的表达,抑制miR-367-3p可以逆转下调LINC01342对OX-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡和炎症反应的影响。结论 LINC01342靶向负调控miR-367-3p抑制OX-LDL诱导的血管内皮细胞凋亡、炎症反应。 展开更多

关键词 血管内皮细胞 凋亡 炎症反应 LINC01342 miR-367-3p 氧化型低密度脂蛋白

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miRNA-486-3p和BIK在结直肠癌中表达及与临床病理特征的关系 被引量：5

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作者 冯莉 刘妍 +3 位作者 荆丽 韩晶 张雪 刘义冰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第5期972-974,共3页

目的研究miRNA-486-3p在结直肠癌组织中和血清中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法应用荧光实时定量PCR检测83例结直肠癌患者癌组织及癌旁组织miRNA-486-3p的表达及结直肠癌患者与非结直肠癌患者血清中miRNA-486-3p的表达,分析不... 目的研究miRNA-486-3p在结直肠癌组织中和血清中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法应用荧光实时定量PCR检测83例结直肠癌患者癌组织及癌旁组织miRNA-486-3p的表达及结直肠癌患者与非结直肠癌患者血清中miRNA-486-3p的表达,分析不同病理特征的患者miRNA-486-3p的表达。结果miRNA-486-3p在癌组织中表达量明显高于癌旁组织(P<0.01)。BCL2相互作用杀伤因子(BIK)在癌组织中表达量明显低于癌旁组织(P<0.01)。miRNA-486-3P和BIK的表达量与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移密切相关(均P<0.01)。患者血清中miRNA-486-3p的含量随肿瘤分期增大而明显升高。结论miRNA-486-3p和BIK可能参与结直肠癌的发生、发展,与结直肠癌的分化也有关。 展开更多

关键词 micro-486-3p BIK 结直肠癌

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miR-367-3p靶向RGS17对HL-60细胞增殖和侵袭及凋亡的作用机制 被引量：1

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作者 王兆建 冶秀兰 张玉 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2021年第18期1384-1391,共8页

目的探讨微小RNA367-3p(miR-367-3p)对白血病细胞HL-60增殖、侵袭和凋亡的作用及相关机制。方法采用Lipofectamine^(TM)3000将miR-367-3p mimic、mimic NC、miR-367-3p+pcDNA3.1、miR-367-3p+pcDNA3.1-G蛋白信号传导的调节蛋白(RGS)17... 目的探讨微小RNA367-3p(miR-367-3p)对白血病细胞HL-60增殖、侵袭和凋亡的作用及相关机制。方法采用Lipofectamine^(TM)3000将miR-367-3p mimic、mimic NC、miR-367-3p+pcDNA3.1、miR-367-3p+pcDNA3.1-G蛋白信号传导的调节蛋白(RGS)17分别转染HL-60细胞,作为miR-367-3p过表达组、NC组、miR-367-3p+pcDNA3.1组和miR-367-3p+pcDNA3.1-RGS17组,对照组不作任何处理。qRT-PCR实验检测人正常单核细胞SC和HL-60中miR-367-3p的表达水平以及RGS17mRNA的表达水平,MTT实验检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡以及细胞周期,Transwell检测各组细胞侵袭能力,双荧光素酶实验验证miR-367-3p和RGS17靶向关系,蛋白质印迹法检测各组细胞RGS17、Cleaved-Caspase-3、Survivin、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶(p-AKT)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白表达水平。结果人正常单核SC细胞中miR-367-3p表达量为1.01±0.04,RGS17mRNA表达量为0.36±0.02;HL-60细胞中miR-367-3p表达量为0.36±0.06,RGS17mRNA表达量为0.96±0.04;与SC细胞比,HL-60细胞中miR-367-3p表达量下降(t=15.337,P<0.001),RGS17mRNA表达量升高(t=25.456,P<0.001)。与对照组和NC组比较,miR-367-3p过表达组24、48和72h细胞光密度值下降,F值分别为375.874、284.645和77.849,均P<0.001。对照组、NC组、miR-367-3p过表达组细胞凋亡率分别为(4.38±0.56)%、(4.21±0.86)%和(12.57±1.07)%,Cleaved-Caspase-3蛋白表达量分别为0.30±0.03、0.33±0.03和1.61±0.08,Survivin蛋白表达量分别为0.96±0.07、0.94±0.06和0.14±0.02;3组间凋亡率及蛋白表达量差异有统计学意义,F值分别为93.475、671.080和232.506,均P<0.001。上述各组细胞G_(1)期比例分别为(52.56±2.01)%、(50.02±1.45)%和(82.56±1.45)%,G_(2)期比例分别为(17.68±1.64)%、(19.14±2.28)%和(7.46±1.03)%,S期比例分别为(29.76±3.53)%、(30.84±2.55)%和(9.98±2.47)%;组间G_(1)、G_(2)和S期比例差异有统计学意义,F值分别为357.990、40.703和49.578,均P<0.001。各组细胞穿膜数目分别为59.33±7.51、65.33±7.51和25.33±4.04,组间细胞穿膜数目差异有统计学意义,F=32.465,P=0.001。与对照组和NC组比,miR-367-3p过表达组细胞侵袭能力下降,细胞凋亡率升高,细胞在G_(1)期的比例升高,G_(2)和S期的比例下降,Cleaved-Caspase-3蛋白表达水平升高,Survivin、p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白表达水平下降,均P<0.05。双荧光素酶实验结果显示,miR-367-3p靶向RGS17。蛋白质印迹结果显示,与对照和NC组比较,miR-367-3p过表达组RGS17蛋白表达水平下降。与miR-367-3p+pcDNA3.1组比较,过表达RGS17可逆转miR-367-3p对HL-60细胞增殖、侵袭的抑制和促进细胞凋亡的作用。结论miR-367-3p靶向RGS17抑制HL-60细胞增殖和侵袭并促凋亡,其可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路实现。 展开更多

关键词 miR-367-3p RGS17 HL-60细胞 增殖 侵袭 凋亡

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circBIRC6靶向miR-367-3p对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响 被引量：4

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作者 张靖 白惠娟 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1062-1068,共7页

目的探讨circBIRC6对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其分子机制。方法体外培养卵巢癌细胞株SKOV3、卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,采用脂质体介导法将si-NC、si-circBIRC6、si-circBIRC6+anti-miR-NC、si-circBIRC6+anti-miR-367-3p转染... 目的探讨circBIRC6对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响及其分子机制。方法体外培养卵巢癌细胞株SKOV3、卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,采用脂质体介导法将si-NC、si-circBIRC6、si-circBIRC6+anti-miR-NC、si-circBIRC6+anti-miR-367-3p转染至SKOV3和SKOV3/DDP细胞,分别记作DDP+si-NC组、DDP+si-circBIRC6组、DDP+si-circBIRC6+anti-miR-NC组和DDP+si-circBIRC6+anti-miR-367-3p组,各组细胞中分别加入2μg/ml的顺铂处理24 h。采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖抑制率,计算顺铂半数抑制浓度(IC50)值,实时荧光定量聚合酶链反应检测circBIRC6、miR-367-3p的基因表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,双荧光素酶报告实验验证circBIRC6、miR-367-3p的靶向关系,Western blot法检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、Bcl-2、p21、Bax蛋白的表达水平。结果SKOV3细胞中circBIRC6的表达水平为1.00±0.05,低于SKOV3/DDP细胞(3.04±0.24,P<0.001);SKOV3细胞中miR-367-3p的表达水平为1.00±0.08,高于SKOV3/DDP细胞(0.54±0.05,P<0.001)。SKOV3细胞、SKOV3/DDP细胞增殖抑制率分别为(22.47±2.04)%和(8.84±0.71)%,IC50值分别为6.65±0.94和28.18±4.91,差异均有统计学意义(均P<0.05)。DDP+si-NC组SKOV3细胞增殖抑制率和细胞凋亡率[(22.19±2.19)%和(10.98±1.12)%]低于DDP+si-circBIRC6组[(74.18±5.36)%和(32.91±3.19)%,均P<0.05];DDP+si-NC组SKOV3/DDP细胞增殖抑制率和细胞凋亡率[(8.71±0.87)%和(7.39±0.63)%]低于DDP+si-circBIRC6组[(40.85±4.07)%和(25.31±2.53)%,均P<0.05]。DDP+si-circBIRC6组SKOV3、SKOV3/DDP细胞中Cyclin D1和Bcl-2蛋白表达水平低于DDP+si-NC组,p21和Bax蛋白表达水平高于DDP+si-NC组(均P<0.05)。双荧光素酶报告实验显示,miR-367-3p为circBIRC6的靶基因,抑制miR-367-3p的表达可降低抑制circBIRC6的表达对卵巢癌细胞增殖、凋亡及顺铂耐药性的作用。结论抑制circBIRC6的表达可能通过上调miR-367-3p的表达而抑制卵巢癌顺铂耐药细胞增殖及诱导细胞凋亡,从而降低细胞对顺铂的耐药性。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 circBIRC6 miR-367-3p 顺铂 耐药性 增殖 凋亡

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LncRNA NORAD对高糖诱导的人肾小管上皮细胞炎症因子和纤维化因子表达的影响及机制研究

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作者 卢迪 黎瑶 +1 位作者 李婷 邱平 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第9期1711-1716,共6页

目的:探讨LncRNA NORAD对高糖诱导的人肾小管上皮细胞中炎性和纤维化因子表达的影响及分子机制。方法:将人肾小管上皮细胞HK-2分为空白对照(NC)组、渗透压对照(OSM)组、高糖处理(HG)组、si-NC+HG组、si-LncRNA NORAD+HG组、miR-NC+HG组... 目的:探讨LncRNA NORAD对高糖诱导的人肾小管上皮细胞中炎性和纤维化因子表达的影响及分子机制。方法:将人肾小管上皮细胞HK-2分为空白对照(NC)组、渗透压对照(OSM)组、高糖处理(HG)组、si-NC+HG组、si-LncRNA NORAD+HG组、miR-NC+HG组、miR-367-3p+HG组、anti-miR-NC+si-LncRNA NORAD+HG组、anti-miR-367-3p+si-LncRNA NORAD+HG组。实时荧光定量PCR(q PCR)检测LncRNA NORAD和miR-367-3p的表达水平;蛋白质印迹(Western blotting)法检测α-SMA、Fn、COL1a1、COL3a1蛋白表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGF-β1、IL-1β水平;双荧光素酶报告实验检测LncRNA NORAD和miR-367-3p的靶向关系。结果:高糖诱导的人肾小管上皮细胞中LncRNA NORAD表达水平升高,miR-367-3p表达水平降低(P<0.05);α-SMA、Fn、COL1a1、COL3a1蛋白的表达水平升高,TGF-β1、IL-1β水平升高(P<0.05)。低表达LncRNA NORAD或过表达miR-367-3p,高糖诱导的人肾小管上皮细胞中α-SMA、Fn、COL1a1、COL3a1蛋白的表达水平降低,TGF-β1、IL-1β水平降低(P<0.05)。LncRNA NORAD靶向调控miR-367-3p;低表达miR-367-3p可以逆转LncRNA NORAD低表达对高糖诱导的肾小管上皮细胞炎性和纤维化因子表达的抑制作用。结论:抑制LncRNA NORAD表达可能通过靶向上调miR-367-3p抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞中炎性和纤维化因子表达。 展开更多

关键词 LncRNA NORAD miR-367-3p 肾小管上皮细胞 炎症因子 纤维化

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