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Ki-67 MIB1克隆膜表达交叉反应的验证
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作者 刘莹 王朝姗 +3 位作者 陈孔龄 陶钰 张勤 吴鸿雁 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期261-266,共6页
目的测试Ki-67 MIB1克隆在甲状腺透明变梁状肿瘤(hyalinizing trabecular tumor,HTT)的免疫组织化学膜表达定位的最适染色条件,确认MIB1膜表达的客观方法学对照和可重复的染色标准。方法纳入扁桃体、阑尾、肾脏、肝脏、肺、胰腺、皮肤... 目的测试Ki-67 MIB1克隆在甲状腺透明变梁状肿瘤(hyalinizing trabecular tumor,HTT)的免疫组织化学膜表达定位的最适染色条件,确认MIB1膜表达的客观方法学对照和可重复的染色标准。方法纳入扁桃体、阑尾、肾脏、肝脏、肺、胰腺、皮肤、胎盘、前列腺、卵巢和羊膜各33例,对MIB1鼠抗人单克隆抗体行Envision两步法实验条件摸索。然后采用HTT和非HTT各16例以及17例硬化性肺细胞瘤(PSH)来观察各平台(Omnis、BenchMark Ultra、BondMAX)与手工检测对比MIB1的实际表达情况。结果正常肺组织呈现弱的细胞膜表达,HTT为肿瘤细胞膜中等至强表达,而PSH为肿瘤细胞膜弱至中等表达。手工检测方式,高压热修复(121℃,2~2.5 min)或煮沸修复(100℃,20 min),MIB1效价浓度(1:50~100)均能实现肺的细胞膜定位,与修复pH和所使用的二抗体系无明确关联。对比全自动平台发现,采用MIB1浓缩液1:50稀释均无法实现正常肺的细胞膜表达。16例HTT MIB1膜染色,BenchMark Ultra和手工相比存在肿瘤细胞膜表达偏弱或无表达的明显差异,16例非HTT病例在各平台上均无细胞膜着色。17例PSH在3种全自动平台膜表达与手工方式相比,肿瘤细胞均存在膜表达不足或缺失的差异。结论高压热修复或煮沸状态下,MIB11:50~100,肺组织可以作为MIB1 HTT染色的理想外部对照。基于上述必备条件,可以实现近100%的HTT膜表达。 展开更多
关键词 Ki-67 mib1克隆 免疫组织化学 细胞膜表达 热修复
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北京黑猪GREB1L和MIB1基因多态性与肋骨数及胴体性状的关联分析
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作者 牛乃琪 赵润泽 +5 位作者 宗文成 刘先策 刘海 石国华 井西涛 张龙超 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期79-86,共8页
旨在开展GREB 1L和MIB 1基因多态性与肋骨数和胴体性状(胴体长、胴体直长、胴体斜长及胴体重)关联分析,筛选关键功能位点。本研究选取屠宰日龄为215天的317头健康北京黑猪,并提取耳组织DNA,对GREB 1L和MIB 1基因进行引物设计、并利用聚... 旨在开展GREB 1L和MIB 1基因多态性与肋骨数和胴体性状(胴体长、胴体直长、胴体斜长及胴体重)关联分析,筛选关键功能位点。本研究选取屠宰日龄为215天的317头健康北京黑猪,并提取耳组织DNA,对GREB 1L和MIB 1基因进行引物设计、并利用聚合酶链式反应(PCR)技术和Sanger测序技术等对SNPs进行基因分型,计算变异位点基因型频率以及等位基因频率分布,并与肋骨数和胴体性状进行关联分析。试验共筛选到6个SNPs,包括GREB 1L基因的3个同义突变、MIB 1基因的2个同义突变和1个内含子区的可变剪切突变。将6个SNPs分别对肋骨数和胴体性状使用Duncan’s多重检验统计分析发现,GREB 1L基因上的3个同义突变6:106574972 G>A、6:106648540 C>T、6:106648558 A>G与性状关联均不显著(P>0.05);MIB 1基因上的1个同义突变6:106936590 C>T与胴体长显著相关(P<0.05);而内含子15~16的6:107016475 A>G可变剪切突变与肋骨数显著相关(P<0.05);第三个同义突变6:107028660 G>A与肋骨数和胴体性状均无显著差异(P>0.05)。结果显示,显著的2个位点可作为北京黑猪肋骨数及胴体长变异的候选基因功能位点。 展开更多
关键词 北京黑猪 GREB 1L MIB 1 肋骨数 胴体性状
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细胞增殖标记物MIB1(Ki-67)在乳腺癌中的表达及核分级的研究 被引量:3
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作者 于颖彦 张伟 张仁元 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1999年第4期268-271,296,I004,共6页
目的 研究细胞增殖标记物MIB1(Ki67) 在乳腺癌中的表达以及肿瘤细胞核分级(Nuclear Grading,NG)在浸润性导管癌中的应用价值,探讨MIB1 和NG二指标的内在联系。 方法 将石蜡切片置于0-01 ... 目的 研究细胞增殖标记物MIB1(Ki67) 在乳腺癌中的表达以及肿瘤细胞核分级(Nuclear Grading,NG)在浸润性导管癌中的应用价值,探讨MIB1 和NG二指标的内在联系。 方法 将石蜡切片置于0-01 molL枸橼酸缓冲液内进行微波修复抗原处理,然后行MIB1 单克隆抗体LSAB免疫组织化学染色。镜下观察结果并计算每张切片内的MIB1 标记指数(MIB1 Labellingindex,MIB1 LI) 。对浸润性导管癌根据癌细胞核大小、异型性及核分裂相多少进行核分级。对乳腺癌病例进行随访,随访期为13 ~24 个月。 结果 乳腺癌的MIB1 表达明显高于乳腺良性病变;MIB1 LI随着肿瘤由导管原位癌(8-27±4-66) 向浸润性导管癌(16-10±11-62)进展而明显增高(P< 0-05);伴随着浸润性导管癌细胞核分级的增加,MIB1 LI也呈增高趋势。随访结果显示,一例NG3 的浸润性导管癌(MIB1 IL14-13) 于术后11 个月死于广泛转移( 经尸体解剖证实),该患者术后对放射治疗不敏感。 结论 MIB1 LI在乳腺良恶性病变鉴别诊断中有辅助作用;在浸润性导管癌的预后判断中,MIB1 展开更多
关键词 乳腺癌 mib1 核分级 细胞增殖标记物
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microRNA-10a/b通过抑制Mib1调节斑马鱼神经元的发育 被引量:1
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作者 吕峰 石运伟 +2 位作者 王新 刘东 严兴洪 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第2期191-196,共6页
该文研究了microRNA-10(miR-10)家族miR-10a/b在斑马鱼胚胎发育时期神经管的表达及其对神经元发育的影响。通过斑马鱼胚胎整体原位杂交及Taq Man PCR技术分析研究miR-10a/b在斑马鱼胚胎期神经管的表达情况。利用吗啡啉(morpholino,Mo)... 该文研究了microRNA-10(miR-10)家族miR-10a/b在斑马鱼胚胎发育时期神经管的表达及其对神经元发育的影响。通过斑马鱼胚胎整体原位杂交及Taq Man PCR技术分析研究miR-10a/b在斑马鱼胚胎期神经管的表达情况。利用吗啡啉(morpholino,Mo)修饰的反义寡核苷酸敲低技术建立miR-10a/b下调的斑马鱼模型,研究miR-10a/b下调后神经元发育异常的表型,并分析鉴定miR-10调控神经元发育的下游靶点。结果发现,受精后24 h(24 hours post fertilization,24 hpf)和48 hpf,miR-10a和miR-10b在斑马鱼神经管中高表达;miR-10a/b-Mo下调miR-10a/b的表达后,背神经管中神经元数量明显变少;下调Mib1(mindbomb E3 ubiquitin protein ligase 1)能挽救miR-10下调引起的神经元表型异常;miR-10a/b下调后胚胎神经管中Mib1表达显著上调。上述结果表明,miR-10a/b通过抑制Mib1的表达来影响斑马鱼神经元的发育。 展开更多
关键词 miR-10a MIR-10B 神经元 发育 mib1 斑马鱼
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MIB1、RPS6KA1基因甲基化与激素抵抗型哮喘的相关性研究 被引量:2
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作者 王文艺 陈颖 +1 位作者 冷秋平 陈丽萍 《新疆医学》 2021年第5期499-502,共4页
目的探讨MIB1、RPS6KA1基因甲基化表达状态通过ERK信号通路对激素抵抗型哮喘的影响;方法病例组为确诊激素抵抗型哮喘者20例,病例对照组为确诊支气管哮喘并明确得到有效控制者20例,正常对照组为健康体检者20例,利用Sequenom Mass ARRAY... 目的探讨MIB1、RPS6KA1基因甲基化表达状态通过ERK信号通路对激素抵抗型哮喘的影响;方法病例组为确诊激素抵抗型哮喘者20例,病例对照组为确诊支气管哮喘并明确得到有效控制者20例,正常对照组为健康体检者20例,利用Sequenom Mass ARRAY方法检测基因甲基化表达状态,用SPSS22.0统计软件进行分析;结果本研究共检测RPS6KA1有4个CpG位点、MIB1基因有3个CpG位点,其中RPS6KA1基因低表达,其中CpG1,CpG2,CpG3在病例组与病例对照组、正常对照组间比较差异有统计学意义(P <0.05),而MIB1基因甲基化表达水平在三组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 RPS6KA1基因低表达可能通过影响ERK信号通路而在SRA中起作用。 展开更多
关键词 激素抵抗型哮喘 RPS6KA1基因、mib1基因 甲基化
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激素抵抗型支气管哮喘患者外周血MIB1基因甲基化的相关性研究
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作者 陈颖 冷秋平 +3 位作者 王文艺 邬超 希仁娜依·木哈塔尔 陈丽萍 《国际呼吸杂志》 2021年第10期729-735,共7页
目的分析激素抵抗型支气管哮喘(哮喘)及普通哮喘患者外周血MIB1基因甲基化与糖皮质激素反应的相关性。方法使用前瞻性病例对照研究。收集2017年1月至2019年1月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院呼吸与危重症医学中心的20例激素抵抗型哮喘... 目的分析激素抵抗型支气管哮喘(哮喘)及普通哮喘患者外周血MIB1基因甲基化与糖皮质激素反应的相关性。方法使用前瞻性病例对照研究。收集2017年1月至2019年1月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院呼吸与危重症医学中心的20例激素抵抗型哮喘患者、20例普通哮喘患者及20名健康体检者的外周血进行MIB1基因CpG_1、CpG_2、CpG_3位点的甲基化率检测,分析是否存在差异。随后对激素抵抗型哮喘及普通哮喘患者的临床特征(发病年龄、体质量指数、血嗜酸粒细胞计数、血中性粒细胞计数)及CpG_1、CpG_2、CpG_3位点甲基化率进行危险因素的相关性分析。结果3组间两两比较MIB1基因3个位点的甲基化率,差异均无统计学意义(χ2=1.591、0.546、0.282,P值均>0.05)。二元Logistic回归分析显示CpG_1甲基化率和CpG_3甲基化率可能是哮喘患者发生激素抵抗的危险因素。激素抵抗型哮喘组与普通哮喘组间相关指标进行ROC曲线分析结果显示CpG_1甲基化率曲线下面积(AUC=0.734,约登指数1.478)优于CpG_3甲基化率曲线下面积(AUC=0.564,约登指数1.182)。结论CpG_1甲基化率及CpG_3甲基化率可能为哮喘患者发生激素抵抗的预测指标,且CpG_1甲基化率预测效能更优。 展开更多
关键词 哮喘 甲基化 激素抵抗 mib1基因
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二甲双胍通过抑制泛素-蛋白酶体系统上调ABCA1表达
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作者 刘云霞 杨艳 +8 位作者 范蕾 王敏杰 于凌泽 白图雅 张梦迪 吕晓丽 李君 胡玉霞 高峰 《中国动脉硬化杂志》 2025年第6期474-480,共7页
[目的]探讨二甲双胍调控ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达的分子机制。[方法]使用二甲双胍和放线菌酮共同或分别刺激J774A.1巨噬细胞,采用蛋白免疫印迹法检测ABCA1的表达;将His-tagged ABCA1和HA-tagged Ub质粒共同转染至HEK293细胞中,采... [目的]探讨二甲双胍调控ATP结合盒转运体A1(ABCA1)表达的分子机制。[方法]使用二甲双胍和放线菌酮共同或分别刺激J774A.1巨噬细胞,采用蛋白免疫印迹法检测ABCA1的表达;将His-tagged ABCA1和HA-tagged Ub质粒共同转染至HEK293细胞中,采用二甲双胍刺激细胞,免疫共沉淀检测ABCA1与泛素的结合能力;采用基于免疫共沉淀的蛋白质组学,寻找二甲双胍调控ABCA1表达的候选E3泛素蛋白连接酶;构建MIB1过表达质粒并转染至HEK293细胞,采用蛋白免疫印迹法验证二甲双胍能否通过MIB1调控ABCA1的表达。[结果]二甲双胍可增加J774A.1巨噬细胞中ABCA1的表达(P<0.01),并抑制ABCA1的降解(P<0.05);二甲双胍可抑制ABCA1与泛素的结合(P<0.05);二甲双胍调控ABCA1表达的蛋白主要富集于细胞发育、炎症和免疫防御等通路;二甲双胍可通过MIB1上调ABCA1的表达(P<0.05)。[结论]二甲双胍可通过阻断泛素-蛋白酶体系统抑制ABCA1的降解,MIB1是上调ABCA1表达的候选E3泛素蛋白连接酶之一。 展开更多
关键词 二甲双胍 ATP结合盒转运体A1 AMP活化蛋白激酶 MIB E3泛素蛋白连接酶1 蛋白质组学
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甲状腺透明变梁状肿瘤研究进展 被引量:3
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作者 任配友 刘嘉 +1 位作者 王培松 陈光 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第15期774-777,共4页
甲状腺透明变梁状肿瘤是新发现的一种原发性甲状腺肿瘤,肿瘤细胞核形态与甲状腺乳头状癌相似,术前常被误诊为甲状腺乳头状癌。甲状腺透明变梁状肿瘤恶性潜能性尚不确定,但目前研究表明一般预后较好,术前或术中误诊常导致甲状腺的全切除... 甲状腺透明变梁状肿瘤是新发现的一种原发性甲状腺肿瘤,肿瘤细胞核形态与甲状腺乳头状癌相似,术前常被误诊为甲状腺乳头状癌。甲状腺透明变梁状肿瘤恶性潜能性尚不确定,但目前研究表明一般预后较好,术前或术中误诊常导致甲状腺的全切除,提高术前、术中诊断准确率可缩小手术范围。本研究对甲状腺透明变梁状肿瘤的病理特点、诊断及治疗预后等进行综述。 展开更多
关键词 甲状腺透明变梁状肿瘤 甲状腺乳头状癌 诊断 mib1
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