miR-99a、miR-146a联合CD64对肺源性心脏病合并肺部感染的预测价值

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作者 褚怀德 钱秋敏 许浩军 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第12期2274-2277,共4页

目的探讨miR-99a、miR-146a联合CD64对肺源性心脏病合并肺部感染的预测价值。方法选取2022年1月至2025年3月昆山市第四人民医院收治的肺源性心脏病合并肺部感染患者45例(感染组)。选取无任何感染的肺源性心脏病患者45例(对照组)。比较... 目的探讨miR-99a、miR-146a联合CD64对肺源性心脏病合并肺部感染的预测价值。方法选取2022年1月至2025年3月昆山市第四人民医院收治的肺源性心脏病合并肺部感染患者45例(感染组)。选取无任何感染的肺源性心脏病患者45例(对照组)。比较两组的miR-99a、miR-146a、CD64表达水平。采用ROC曲线分析miR-99a、miR-146a联合CD64对肺心病患者发生肺部感染的预测价值。结果感染组的miR-99a、miR-146a表达水平均高于对照组(P<0.05)。感染组的CD64表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-99a、miR-146a预测肺心病患者发生肺部感染的灵敏度为69.44%、72.22%,特异度为65.93%、64.44%(AUC=0.716,AUC=0.734)。CD64预测肺心病患者发生肺部感染的灵敏度为75.00%,特异度为68.15%(AUC=0.790)。miR-99a、miR-146a联合CD64的灵敏度为86.11%,特异度为70.37%(AUC=0.860)。结论miR-99a、miR-146a联合CD64对肺源性心脏病合并肺部感染具有较高的预测价值。 展开更多

关键词 肺源性心脏病 肺部感染 mir-99a mir-146A 中性粒细胞表面抗原CD64

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调控miR-99a表达对猪颗粒细胞增殖和凋亡的影响

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作者 陈圆 侯晗琦 +3 位作者 任宣 薛青松 徐泰然 李湘萍 《西南大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第6期57-67,共11页

miR-99a是一种在卵巢组织中表达较高的miRNA,与颗粒细胞在卵泡闭锁过程中的凋亡有关。为了解miR-99a对猪颗粒细胞增殖和凋亡的作用,首先检测了miR-99a在不同程度闭锁的猪卵泡中的表达水平,随后通过正负调控miR-99a表达的方法探究其对猪... miR-99a是一种在卵巢组织中表达较高的miRNA,与颗粒细胞在卵泡闭锁过程中的凋亡有关。为了解miR-99a对猪颗粒细胞增殖和凋亡的作用,首先检测了miR-99a在不同程度闭锁的猪卵泡中的表达水平,随后通过正负调控miR-99a表达的方法探究其对猪颗粒细胞增殖和凋亡的影响。结果显示,与健康卵泡(HF)组相比,miR-99a的表达在早期闭锁卵泡(EF)组中显著升高(p<0.01),在晚期闭锁卵泡(PF)组无显著变化(p>0.05)。相较于对照组,miR-99a过表达组的细胞增殖水平下降,细胞凋亡水平上升,细胞周期在S期停滞,细胞周期相关基因CDK1与CDK4及促凋亡基因BAD的表达显著增加(p>0.05)。自噬相关基因ATG13的表达也显著上调(p<0.05),但凋亡相关基因BCL-2与TP53的表达变化差异并不显著(p>0.05)。与对照组相比,抑制miR-99a表达对细胞周期和凋亡无显著影响,CDK1、CDK4、BAD、ATG13、BCL-2、TP53的表达无显著变化(p>0.05)。以上结果表明,miR-99a能够有效抑制猪颗粒细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 mir-99a 颗粒细胞 闭锁卵泡 增殖 凋亡

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miR-2355-3p、miR-337-3p和miR-99a-5p检测在头颈部鳞状细胞癌早期筛查中的价值

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作者 刘敬浩 郭海艳 +1 位作者 甘桂芳 陈福祥 《诊断学理论与实践》 2025年第2期204-211,共8页

目的:探讨miR-2355-3p、miR-337-3p和miR-99a-5p在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)早期筛查中的价值。方法:收集2023年7月至2024年7月在上海交通大学医学院附属第九人民医院首次就诊的60例HNSCC患者(HN... 目的:探讨miR-2355-3p、miR-337-3p和miR-99a-5p在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)早期筛查中的价值。方法:收集2023年7月至2024年7月在上海交通大学医学院附属第九人民医院首次就诊的60例HNSCC患者(HNSCC组)及60例健康体检人群(正常对照组)的血清样本及临床病理资料,以平行检测方式检测miR-2355-3p、miR-337-3p和miR-99a-5p的相对表达量。采用受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评估3种miRNA对HNSCC的筛查、诊断效能。结果:相较于正常对照组,HNSCC组患者血清中miR-2355-3p和miR-337-3p的表达显著上调(P<0.001),而miR-99a-5p的表达显著下调(P=0.002)。肿瘤>2 cm与≤2 cm、肿瘤分期Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期、有及无颈部淋巴结转移的HNSCC患者间,血清中miR-2355-3p及miR-337-3p的表达量差异有统计学意义(P<0.05),不同年龄和性别的HNSCC患者血清中3种miRNA的表达量差异均无统计学意义(P>0.05)。miR-2355-3p、miR-337-3p及miR-99a-5p单项检测诊断HNSCC的最佳截断值分别为0.0867、0.1031和0.1251,曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.892、0.877和0.686。3项miRNA联合检测的AUC(0.954)在高于各单项检测的AUC(P<0.05)的同时,还高于miR-2355-3p、miR-337-3p 2项联合检测的AUC(0.898)(P<0.05)。3项miRNA联合检测早期筛查Ⅰ-Ⅱ期HNSCC的AUC为0.923。结论:miR-2355-3p和miR-337-3p与HNSCC肿瘤的分期、大小及淋巴结转移相关,miR-2355-3p、miR-337-3p及miR-99a-5p联合检测可能用于HNSCC早期筛查。 展开更多

关键词 mir-2355-3p mir-337-3p mir-99a-5p 生物标志物 头颈部鳞状细胞癌

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血清miR-99a和miR-374b-5p的表达水平与肺癌病理特征和预后的相关性

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作者 赵钰玲 梁美玲 《中国煤炭工业医学杂志》 2025年第3期225-231,共7页

目的 探究血清中miR-99a和miR-374b-5p的表达水平与肺癌病理特征的相关性,并分析其表达水平对患者预后的影响。方法 随机选取2020年1月—2021年1月西安大兴医院收治的108例肺癌患者作为患病组,选择同期108例参与体检的正常人作为健康对... 目的 探究血清中miR-99a和miR-374b-5p的表达水平与肺癌病理特征的相关性,并分析其表达水平对患者预后的影响。方法 随机选取2020年1月—2021年1月西安大兴医院收治的108例肺癌患者作为患病组,选择同期108例参与体检的正常人作为健康对照组。使用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测两组受检人员血清中miR-99a和miR-374b-5p的表达水平,收集肺癌患者的临床病理特征并分析血清中miR-99a和miR-374b-5p表达水平与临床病理特征的关系,使用Kaplan-Meier法分析血清中miR-99a和miR-374b-5p表达水平与肺癌患者3年生存率之间的关系,使用单因素和多因素Cox回归分析肺癌患者预后的影响因素。结果 患病组血清中miR-99a和miR-374b-5p的表达水平低于健康对照组,差异有统计学意义(t=13.064、11.602,均P<0.05);无淋巴结转移、癌细胞分化程度较高和TNM分期较早的患者血清miR-99a水平和miR-374b-5p水平较高,差异有统计学意义(t=3.948、4.287、4.787、9.503、3.995、4.847,均P<0.001);miR-99a高表达组患者生存率为81.81%,高于miR-99a低表达组(34.37%),差异有统计学意义(χ^(2)=14.099,P<0.05),miR-374b-5p高表达患者生存率为67.74%,高于miR-374b-5p低表达患者(34.78%),差异有统计学意义(χ^(2)=23.632,P<0.05),多因素Cox回归分析结果显示,淋巴结转移(HR=4.637、95%CI:1.771~12.138)、TNM分期(HR=3.238、95%CI:1.237~8.477)、血清miR-99a表达(HR=1.015、95%CI:1.003~1.027)水平和血清miR-374b-5p表达(HR=1.017、95%CI:1.005~1.029)水平是肺癌患者预后的影响因素(P=0.002、0.017、0.013、0.005)。结论 血清miR-99a和miR-374b-5p的表达水平可用作判断肺癌患者预后情况的指标,肺癌患者血清中高水平的miR-99a和miR-374b-5p的淋巴结转移较少、分化程度较高、TNM分期较早,患者预后情况较好。 展开更多

关键词 血清 mir-99a mir-374b-5p 肺癌病理特征 预后

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款冬花多糖通过调控miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量：14

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作者 刘宜峰 杨华 +1 位作者 曹磊 郑杨杨 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2161-2165,共5页

目的探索款冬花多糖通过miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法MTT检测款冬花多糖(10、20、40、80、160 mg/L)对食管癌细胞Eca109细胞存活的影响;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测MMP2、MMP9、C... 目的探索款冬花多糖通过miR-99a/PI3K/Akt通路影响食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法MTT检测款冬花多糖(10、20、40、80、160 mg/L)对食管癌细胞Eca109细胞存活的影响;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测MMP2、MMP9、Cyclin D1、p-PI3K和p-Akt蛋白表达;RT-PCR检测miR-99a表达。在Eca109细胞中转染miR-99a、anti-miR-99a并使用80 mg/L款冬花多糖进行处理,观察其在细胞增殖、迁移和侵袭中的作用。结果款冬花多糖抑制Eca109细胞增殖、迁移、侵袭及MMP2、MMP9、CyclinD1、p-PI3K、p-AKT蛋白表达(P<0.05),促进miR-99a表达(P<0.05)。过表达miR-99a抑制Eca109细胞中Cyclin D1、MMP2、MMP9蛋白表达,减少细胞存活率、迁移细胞数和侵袭细胞数(P<0.05)。低表达miR-99a部分逆转款冬花多糖对细胞增殖、迁移、侵袭、CyclinD1、MMP2、MMP9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达的抑制作用。结论款冬花多糖通过调控miR-99a/PI3K/Akt通路抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 款冬花多糖 食管癌 mir-99a PI3K/AKT信号通路

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miR-99a表达调控机制及抑制LPS所致内皮细胞炎症作用 被引量：2

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作者 鲍美华 李广意 +4 位作者 曾杰 张青松 董丽萍 项炬 李建明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期149-149,共1页

研究炎症相关转录因子NFκB对miR-99a生成的调控作用,并进一步研究miR-99a对LPS所致内皮炎症的保护作用及机制,为动脉粥样硬化疾病的抗炎治疗提供依据.采用PROMO软件对miR-99a的启动子进行分析.构建不同长度的miR-99a启动子区段载体,... 研究炎症相关转录因子NFκB对miR-99a生成的调控作用,并进一步研究miR-99a对LPS所致内皮炎症的保护作用及机制,为动脉粥样硬化疾病的抗炎治疗提供依据.采用PROMO软件对miR-99a的启动子进行分析.构建不同长度的miR-99a启动子区段载体,并将这些载体与NF-κB共转染,双荧光报告基因检测NF-κB对报告基因表达的影响.采用EMSA法和ChIP法进行验证.采用ELISA法对炎症相关因子TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1进行检测,Westernblot法对NF-κB、IκB、β-actin、HistonH1和mTOR蛋白进行检测.结果表明,NF-κB可直接作用于miR-99a启动子的-1643至-1652位点,促进miR-99a的表达.在内皮细胞中,LPS（10mg·L-1）可明显抑制miR-99a的表达（降低为正常对照组的10.4%）.MiR-99a过表达可明显抑制LPS导致的炎性因子表达升高,抑制mTOR的上调、NF-κB的核易位.miR99a对LPS损伤的内皮细胞具有保护作用,为动脉粥样硬化抗炎治疗的潜在靶点. 展开更多

关键词 动脉粥样硬化 内皮细胞 mir-99a MTOR NF-κB 启动子

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mir-99a的表达与上皮性卵巢癌患者预后的关系 被引量：2

7

作者 徐志宏 吴小华 +3 位作者 姚铁柱 王晓翔 段晓阳 史健 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第3期77-80,共4页

目的探讨mir-99a在上皮性卵巢癌(EOC)患者中的表达与临床病理特征及预后的关系。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测137例EOC患者组织中mir-99a的表达水平,分析mir-99a表达与卵巢癌患者的临床病理资料的相关性。采用Kaplan-Meier... 目的探讨mir-99a在上皮性卵巢癌(EOC)患者中的表达与临床病理特征及预后的关系。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测137例EOC患者组织中mir-99a的表达水平,分析mir-99a表达与卵巢癌患者的临床病理资料的相关性。采用Kaplan-Meier法进行生存分析并绘制生存曲线,生存因素采用log-rank检验。结果 EOC患者组织中mir-99a的表达较癌旁正常组织降低(P<0.001)。mir-99a的低表达与高组织学分级(P=0.027)、淋巴结转移(P=0.001)、腹膜转移(P<0.001)和较高的FIGO分期(P<0.001)有关。Kaplan-Meier分析与log-rank检验结果显示,mir-99a的低表达与EOC患者生存期短有关(对数秩检验,P=0.005)。多因素分析结果显示,mir-99a表达是患者总体生存的独立预测因子(HR为2.368,95%CI:1.621,10.925,P=0.016)。结论mir-99a的表达是上皮性卵巢癌患者独立的预后因素,mir-99a可能成为临床实践中一项新的诊断和预后标志物。 展开更多

关键词 mir-99a 上皮性卵巢癌 临床病理学 预后

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肿瘤相关巨噬细胞相关性miR-99a对子宫内膜癌细胞生长和侵袭的调控作用 被引量：4

8

作者 文静 黄洁 +2 位作者 李云云 张中卒 周勤 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期561-569,共9页

背景与目的:肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)浸润与肿瘤进展密切相关,但作用机制尚不明确,因此,探索miR-99a对单核巨噬细胞极化的影响及其对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞生长、侵袭的影响。方法:检测EC组... 背景与目的:肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)浸润与肿瘤进展密切相关,但作用机制尚不明确,因此,探索miR-99a对单核巨噬细胞极化的影响及其对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞生长、侵袭的影响。方法:检测EC组织中巨噬唾液酸蛋白(macrosialin)CD68表达并分析其与临床病理学特征之间的关系;运用人EC细胞系HEC-1B、RL95-2培养上清液诱导人单核细胞U937向TAM(M2型巨噬细胞)分化;将人工合成的miR-99a模拟物片段转染至诱导后的巨噬细胞,转染后运用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)及流式细胞术检测巨噬细胞相关因子CD68、CD163以及巨噬细胞甘露糖受体(mcrophage mannose receptor)CD206表达量变化,并运用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测巨噬细胞分泌相关细胞因子IL-12、IL-4和IL-10分泌量变化;将转染miR-99a的诱导后巨噬细胞与EC细胞共培养,运用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和transwell法检测其对EC细胞增殖和侵袭能力的影响,并初步分析其可能的作用机制。结果:EC组织CD68高表达并与肿瘤肌层浸润及血管生成呈正相关;肿瘤细胞培养上清液成功诱导单核细胞向M2型TAM极化。转染miR-99a后单核细胞组CD68及CD163表达较对照组下降(P<0.01),而CD206表达差异无统计学意义(P>0.05),流式细胞术进一步证实上述表达变化;ELISA结果发现,转染miR-99a诱导后巨噬细胞中IL-12分泌增多(P<0.01),而IL-4、IL-10分泌减少(P<0.01),提示巨噬细胞向M2型极化受抑制。将诱导后巨噬细胞与EC细胞共培养,共培养后EC细胞增殖侵袭能力较对照组增加,而转染miR-99a模拟片段至诱导后巨噬细胞能够抑制其对增殖(P<0.01)及侵袭能力的促进作用(P<0.05)。诱导后巨噬细胞中过表达miR-99a后细胞中mTOR及其通路受到抑制。结论:EC间质巨噬细胞浸润与肿瘤肌层浸润及血管新生相关,miR-99a能够逆转单核细胞向M2表型极化,并抑制EC细胞介导TAM的促EC细胞生长和侵袭作用,其作用可能通过调控mTOR通路产生。 展开更多

关键词 肿瘤相关巨噬细胞 mir-99a 子宫内膜癌 细胞增殖 细胞侵袭

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miR-99a模拟物提高膀胱癌细胞化疗药物敏感性的机制研究 被引量：2

9

作者 奉友刚 刘军 +4 位作者 梁博 姜明东 刘泓建 康永明 杨平 《海南医学院学报》 CAS 2016年第24期2940-2943,共4页

目的:研究miR-99a模拟物对膀胱癌细胞增殖及化疗药物敏感性的影响及相关分子机制。方法:培养膀胱癌BIU-87细胞株,随机分为对照组、吡柔比星组、miR-99a组、吡柔比星+miR-99a组,分别采用不含血清的培养基、1.0μg/mL的吡柔比星、miR-99a... 目的:研究miR-99a模拟物对膀胱癌细胞增殖及化疗药物敏感性的影响及相关分子机制。方法:培养膀胱癌BIU-87细胞株,随机分为对照组、吡柔比星组、miR-99a组、吡柔比星+miR-99a组,分别采用不含血清的培养基、1.0μg/mL的吡柔比星、miR-99a的模拟物以及miR-99a的模拟物联合1.0μg/mL的吡柔比星进行处理,处理后12、24、48h时分别测定细胞活力以及PI3K、AKT、ABCE1、MRPS5的表达量。结果:吡柔比星组、miR-99a组、吡柔比星+miR-99a组的细胞活力值以及PI3K、AKT、ABCE1、MRPS5的表达量均显著低于对照组,吡柔比星+miR-99a组的细胞活力值以及PI3K、AKT、ABCE1、MRPS5的表达量均显著低于吡柔比星组和miR-99a组。结论:miR-99a模拟物能够通过靶向抑制PI3K/AKT信号通路及下游ABCE1、MRPS5基因表达的方式抑制膀胱癌细胞增殖、增加膀胱癌细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多

关键词 膀胱癌 mir-99a 吡柔比星 磷脂酰肌醇3激酶 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶

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miR-99a对乳腺癌细胞侵袭和迁移的负向调控机制研究 被引量：7

10

作者 张玮 陈罗泉 +1 位作者 叶治国 王青青 《浙江医学》 CAS 2016年第5期317-321,335,I0001,共7页

目的探讨miR-99a对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响,并初步分析其影响乳腺癌细胞侵袭及迁移的可能分子机制。方法利用荧光实时定量PCR检测乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中miR-99a的表达。运用脂质体介导的转染方法分别将miR-99a模拟物(miR-... 目的探讨miR-99a对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响,并初步分析其影响乳腺癌细胞侵袭及迁移的可能分子机制。方法利用荧光实时定量PCR检测乳腺癌细胞系MDA-MB-231和MCF-7中miR-99a的表达。运用脂质体介导的转染方法分别将miR-99a模拟物(miR-99a mimics)、miR-99a抑制物(miR-99a inhibitors)以及相应对照miRNA转染MDA-MB-231和MCF-7细胞,通过Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭力;采用Transwell迁移实验及划痕实验检测细胞的迁移能力;利用生物信息学方法预测miR-99a的靶基因,并对靶基因进行验证。结果(1)高转移潜能的MDA-MB-231细胞中miR-99a表达明显低于低转移潜能的MCF-7细胞,划痕实验中转染miR-99a mimics的与转染control mimics的MDA-MB-231细胞比较迁移能力显著减弱(P<0.05),而MCF-7细胞转染miR-99a inhibitors后迁移能力明显增强(P<0.01)。(2)Transwell的侵袭及迁移实验显示,转染miR-99a mimics后MDA-MB-231细胞的侵袭和迁移能力明显减弱(P<0.01);MCF-7细胞转染miR-99a inhibitors后迁移能力增强(P<0.01),而侵袭能力基本不变(P>0.05)。(3)生物信息学方法预测徼管相关蛋白(MTMR3)是miR-99a的靶点,实时定量PCR和3'UTR荧光素酶报告基因实验验证了该靶点。(4)干扰了MTMR3后MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力明显减弱。结论(1)miR-99a对乳腺癌细胞的侵袭及迁移发挥负向调控作用。(2)miR-99a可能通过靶向于MTMR3发挥其对乳腺癌细胞迁移和侵袭的调控作用。 展开更多

关键词 乳腺癌 mir-99a侵袭 迁移 MTMR3

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肿瘤抑制因子miR-99a对口腔鳞状细胞癌细胞迁移、增殖和凋亡的影响 被引量：4

11

作者 梁源 张珊 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第11期2406-2410,共5页

目的探讨肿瘤抑制因子miR-99a对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、增殖和凋亡的影响。方法逆转录-定量聚合酶链反应分析miR-99a在OSCC细胞系中的表达水平。CCK-8试验评估细胞增殖,细胞划痕和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力。流式细... 目的探讨肿瘤抑制因子miR-99a对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞迁移、增殖和凋亡的影响。方法逆转录-定量聚合酶链反应分析miR-99a在OSCC细胞系中的表达水平。CCK-8试验评估细胞增殖,细胞划痕和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力。流式细胞仪检测miR-99a对HN4细胞周期和凋亡的影响。结果 miR-99a的上调抑制了HN4和SCC6细胞增殖,miR-99a的上调抑制了HN4和SCC6细胞侵袭和迁移能力。流式细胞仪分析证实,miR-99a的上调促进了HN4和SCC6细胞的凋亡,细胞周期中G1期的百分比明显升高,在G2期和S期的百分比明显降低。结论 miR-99a可能是OSCC肿瘤发生中的肿瘤抑制因子。 展开更多

关键词 MICRORNA mir-99a 口腔鳞状细胞癌

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腺病毒介导miR-99a过表达抑制人结肠癌HCT-8细胞的生长抑制及其作用机制 被引量：3

12

作者 罗玉政 李铁军 王佾 《兰州大学学报（医学版）》 CAS 2016年第3期22-28,共7页

目的探讨miR-99a过表达对人结肠癌HCT-8细胞的生长抑制及其作用机制。方法构建miR-99a的重组腺病毒Ad5-miR-99a,并感染人结肠癌HCT-8细胞。采用甲基化特异性PCR检测miR-99a、抑癌基因SOCS1和P16的甲基化水平;采用实时荧光定量PCR和Weste... 目的探讨miR-99a过表达对人结肠癌HCT-8细胞的生长抑制及其作用机制。方法构建miR-99a的重组腺病毒Ad5-miR-99a,并感染人结肠癌HCT-8细胞。采用甲基化特异性PCR检测miR-99a、抑癌基因SOCS1和P16的甲基化水平;采用实时荧光定量PCR和Western Blot检测miR-99a、DNAC5胞嘧啶甲基转移酶、SOCS1和P16的表达情况;采用MTT法、细胞集落形成和流式细胞术检测HCT-8细胞的体外增殖凋亡情况;采用裸鼠体内荷瘤实验检测HCT-8细胞体内成瘤性。结果成功构建miR-99a腺病毒载体Ad5-miR-99a。Ad5-miR-99a感染HCT-8细胞后,Ad5-miR-99a组细胞中miR-99a表达显著高于空载腺病毒组和空白对照组(P<0.05),而其甲基化水平显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P<0.05);Ad5-miR-99a组细胞中DNAC5胞嘧啶甲基转移酶表达显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P<0.05);Ad5-miR-99a组细胞中SOCS1和P16表达显著高于空载腺病毒组和空白对照组(P<0.05),而其甲基化水平显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P<0.05)。MTT法、细胞集落形成、流式细胞术和裸鼠体内荷瘤实验显示,Ad5-miR-99a组细胞的体外增殖和体内成瘤能力显著低于空载腺病毒组和空白对照组(P<0.05)。结论 miR-99a可显著抑制人结肠癌HCT-8细胞的体外增殖和体内成瘤能力,其机制可能与miR-99a过表达导致DNMT1表达升高,降低抑癌基因SOCS-1和P16甲基化程度,使得SOCS-1和P16高表达,从而发挥抑制肿瘤细胞生长的作用。 展开更多

关键词 腺病毒 mir-99a 结肠癌 HCT-8细胞 作用机制

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miR-99a对口腔鳞癌增殖能力的影响 被引量：1

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作者 王科 彭国光 +2 位作者 谭玉莲 何善志 罗翠芬 《上海口腔医学》 CAS 北大核心 2021年第1期44-49,共6页

目的:探讨miR-99a在口腔鳞状细胞中的表达及对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响。方法:检索GEO数据库中与口腔鳞癌相关的miRNA芯片进行二次分析。检测63例口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞株内miR-99a的表达,分析其与临床病理指标及患者预后之... 目的:探讨miR-99a在口腔鳞状细胞中的表达及对口腔鳞癌细胞生物学行为的影响。方法:检索GEO数据库中与口腔鳞癌相关的miRNA芯片进行二次分析。检测63例口腔鳞癌组织和口腔鳞癌细胞株内miR-99a的表达,分析其与临床病理指标及患者预后之间的关系。上调miR-99a的表达,检测其对口腔鳞癌细胞生长和克隆形成的影响,并通过Targetscan等软件预测其靶基因。采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析。结果:GSE103931芯片显示,miR-99a在口腔鳞癌中下调最显著,且miR-99a也在口腔鳞癌细胞株内显著低表达。miR-99a的表达与患者T分期、病理分级和预后密切相关。上调miR-99a的表达可抑制口腔鳞癌细胞增殖;而抑制miR-99a的表达,则促进口腔鳞癌细胞增殖。通过Targetscan等软件发现,mTOR是miR-99a的靶基因,且与miR-99a的表达呈负相关。结论:miR-99a在口腔鳞癌组织和细胞系中低表达。上调miR-99a能抑制口腔鳞癌细胞株SCC25和SCC9的增殖能力,其机制是通过调控mTOR的表达而实现。 展开更多

关键词 mir-99a 口腔鳞状细胞癌 MTOR 细胞增殖

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MiR-99a调控CTDSPL影响儿童急性髓性白血病细胞增殖及凋亡 被引量：1

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作者 张丽丹 林文浩 +4 位作者 程玉才 张祖涵 唐燕来 罗学群 黄礼彬 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2015年第5期232-236,250,共6页

目的探讨miR-99a对儿童急性髓性白血病(AML)的影响及其作用机制,为寻找新的靶向治疗方法提供理论依据。方法用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测57例AMLL患儿及10例对照患儿的骨髓标本中miR-99a的表达;在细胞系水平通过对miR-99a... 目的探讨miR-99a对儿童急性髓性白血病(AML)的影响及其作用机制,为寻找新的靶向治疗方法提供理论依据。方法用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测57例AMLL患儿及10例对照患儿的骨髓标本中miR-99a的表达;在细胞系水平通过对miR-99a过表达或抑制表达,利用MTT细胞增殖及双染凋亡试验研究miR-99a对AML细胞增殖、凋亡的影响。用在线软件预测miR-99a可能的靶基因,并通过双荧光报告及蛋白印迹技术对其靶基因进行验证。结果miR-99a在AML患儿初诊时高表达,在完全缓解(CR)时低表达;miR-99a促进AML细胞的增殖,抑制其凋亡;采用双荧光报告及蛋白印迹技术在细胞系中验证出CTDSPL可能是miR-99a的靶基因;并通过蛋白印迹技术在AML患儿标本中验证出miR-99a抑制CTDSPL蛋白的表达。结论miR-99a通过靶向负调控CTDSPL基因影响AML细胞增殖及凋亡,靶向抑制miR-99a表达可能成为治疗AML的一个新策略。 展开更多

关键词 mir-99a CTDSPL 急性髓性白血病 儿童

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miR-99a-3p靶向调控CD36基因对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及其机制 被引量：1

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作者 刘倩 白建民 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期2799-2803,共5页

目的探讨miR-99a-3p对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及其机制。方法将小鼠足细胞分为对照(NG)组、高糖(HG)组、miR-NC组、miR-99a-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-99a-3p组、HG+miR-NC组、HG+miR-99a-3p组、HG+si-NC组、HG+si-CD36组... 目的探讨miR-99a-3p对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及其机制。方法将小鼠足细胞分为对照(NG)组、高糖(HG)组、miR-NC组、miR-99a-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-99a-3p组、HG+miR-NC组、HG+miR-99a-3p组、HG+si-NC组、HG+si-CD36组、HG+miR-99a-3p+pcDNA组、HG+miR-99a-3p+pcDNA-CD36组,转染均采用脂质体法。qRT-PCR检测miR-99a-3p和CD36 mRNA的表达水平;Western印迹检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果高糖可以促进CD36的表达,抑制miR-99a-3p的表达,且促进小鼠足细胞凋亡。过表达miR-99a-3p表达和抑制表达CD36可保护高糖刺激的小鼠足细胞损伤。miR-99a-3p靶向调控CD36的表达,过表达CD36能逆转miR-99a-3p过表达对高糖刺激小鼠足细胞损伤的保护作用。结论miR-99a-3p可能通过下调CD36对高糖刺激的小鼠足细胞损伤起保护作用。 展开更多

关键词 mir-99a-3p CD36 高糖 糖尿病肾病 足细胞损伤 凋亡

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miR-99a-5p靶向SLC44A1对肺癌细胞系A549增殖的影响 被引量：2

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作者 王丽华 吕建峰 《解剖科学进展》 CAS 2021年第2期138-142,共5页

目的探讨miR-99a-5p通过靶点SLC44A1对肺腺癌(LUAD)细胞系增殖的抑制作用及可能机制。方法从基因表达综合数据库(GEO)中检索并筛选GPL18058的microRNA(miRNA)表达阵列,筛选出肺癌与正常组织差异表达的miR-99a-5p后,通过Target Scan Huma... 目的探讨miR-99a-5p通过靶点SLC44A1对肺腺癌(LUAD)细胞系增殖的抑制作用及可能机制。方法从基因表达综合数据库(GEO)中检索并筛选GPL18058的microRNA(miRNA)表达阵列,筛选出肺癌与正常组织差异表达的miR-99a-5p后,通过Target Scan Human数据库预测其下游靶点SLC44A1,并利用UALCAN分析SLC44A1在肺癌组织中的表达情况和LUAD预后关系。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肺腺癌细胞系miR-99a-5p和SLC44A1的表达水平。在A549细胞中转染miR-99a-5p模拟物,通过CCK-8试验、克隆形成实验检测A549的增殖情况;qRT-PCR和Westernblot检测SLC44A1的表达。在A549细胞中过表达SLC44A1,评估其对肺癌调节中的miR-99a-5p的选择性作用。结果在LUAD组织和细胞系中,miR-99a-5p的表达异常下调,过度异位表达的miR-99a-5p抑制A549细胞的增殖(P<0.05)。在LUAD组织和细胞系的基因和蛋白质水平上,miR-99a-5p负性调控SLC44A1(P<0.05)。SLC44A1过度表达有效地逆转了miR-99a-5p在体外对A549细胞增殖的抑制作用。SLC44A1的低表达有利于患者生存率的提高(P<0.05)。结论 miR-99a-5p抑制LUAD中A549细胞系的增殖,并通过负性调控SLC44A1发挥作用。 展开更多

关键词 肺腺癌 A549 mir-99a-5p SLC44A1

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miR-99a通过下调RRM2抑制人子宫颈癌HeLa细胞系增殖、迁移和侵袭

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作者 贺春花 刘冷 张小柳 《基础医学与临床》 2022年第11期1737-1743,共7页

目的探讨miR-99a与核糖核苷酸还原酶小亚基M2(RRM2)的靶向关系,并分析二者对人子宫颈癌(CC)HeLa细胞系增殖、侵袭及迁移的影响。方法将HeLa细胞,分为对照组(control)、阴性对照组(inhibitor-NC)、抑制miR-99a表达组(miR-99a-inhibitor)... 目的探讨miR-99a与核糖核苷酸还原酶小亚基M2(RRM2)的靶向关系,并分析二者对人子宫颈癌(CC)HeLa细胞系增殖、侵袭及迁移的影响。方法将HeLa细胞,分为对照组(control)、阴性对照组(inhibitor-NC)、抑制miR-99a表达组(miR-99a-inhibitor)、共转染组(RRM2-siRNA+miR-99a-inhibitor)。MTT法、平板集落实验检测细胞增殖;划痕实验、Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭;Western blot检测RRM2、细胞增殖核抗原(PCNA)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、N-钙黏附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)蛋白表达;免疫荧光法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin定位及表达;生物信息学及双荧光素酶报告基因实验验证miR-99a与RRM2靶向关系;RT-qPCR检测细胞中miR-99a、RRM2 mRNA水平。结果下调miR-99a表达,可增高HeLa细胞增殖率(100.00比128.86±4.25,P<0.05);上调集落形成率、划痕愈合率、侵袭细胞数;增加RRM2、PCNA、N-cadherin与vimentin蛋白表达,降低E-cadherin蛋白表达(P<0.05)。抑制RRM2表达能减轻下调miR-99a对HeLa细胞生物学行为的影响(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验及RT-qPCR证实miR-99a与RRM2存在靶向关系(P<0.05)。结论抑制miR-99a可能靶向上调RRM2表达并促进HeLa细胞增殖,有望成为CC新的潜在治疗靶点。 展开更多

关键词 mir-99a 核糖核苷酸还原酶小亚基M2 宫颈癌细胞 增殖 迁移

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miR-99a对帕金森模型细胞活力及ROS水平的影响

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作者 张敏 刘国荣 《医学食疗与健康》 2020年第2期8-9,共2页

目的:分析miR-99a对帕金森病细胞模型作用。方法:采用Western blotting以及Real-time PCR方法,对miR-99a以及其靶基因FZD5表达水平进行研究。采用CCK-8方法,检测细胞存活力。结果:过表达miR-99a,可将MPP+抑制PC12细胞存活作用明显缓解,... 目的:分析miR-99a对帕金森病细胞模型作用。方法:采用Western blotting以及Real-time PCR方法,对miR-99a以及其靶基因FZD5表达水平进行研究。采用CCK-8方法,检测细胞存活力。结果:过表达miR-99a,可将MPP+抑制PC12细胞存活作用明显缓解,该作用是通过调控miR-99a/FZD5轴完成的。结论:miR-99a在帕金森病细胞模型中,可对MPP+导致的PC12细胞存活抑制作用明显缓解,是通过靶向及下调FZD5实现的。 展开更多

关键词 mir-99a 帕金森病细胞模型 FZD5

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miR-99a-5p在MDS患者骨髓中的表达及功能分析 被引量：1

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作者 乐颖 张绪湃 +6 位作者 熊艳秋 李虹颖 赵卫华 龙媛 罗军 程鹏 刘振芳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期134-140,共7页

目的:检测miR-99a-5p在骨髓增生异常综合症(MDS)患者中的表达,利用生物信息学预测其靶基因并进行功能分析,探讨miR-99a-5p在MDS的发生发展中可能的作用。方法:利用qRT-PCR技术检测miR-99a-5p在初治MDS患者骨髓中的表达量,分析其与MDS临... 目的:检测miR-99a-5p在骨髓增生异常综合症(MDS)患者中的表达,利用生物信息学预测其靶基因并进行功能分析,探讨miR-99a-5p在MDS的发生发展中可能的作用。方法:利用qRT-PCR技术检测miR-99a-5p在初治MDS患者骨髓中的表达量,分析其与MDS临床病理参数的相关性;运用靶基因在线预测软件Targetscan、Miranda和Microcosm预测其可能的靶基因,取预测结果的交集作为miR-99a-5p在MDS中的潜在靶基因。结果:与正常对照组相比,MDS患者骨髓中miR-99a-5p表达升高(P<0.001)。按IPSS的预后评分,将MDS患者分为相对低危组(包括低危险组和中危1组)和相对高危组(包括中危2组和高危组)发现,在相对低危组中miR-99a-5p的表达量是正常对照组的2.40倍(P<0.001),相对高危组中miR-99a-5p的表达量是对照组的6.66倍(P<0.001),相对高危组中miR-99a-5p表达量是相对低危组的2.80倍(P<0.001);转白血病组(t-MDS)中miR-99a-5p的表达量是对照组的6.35倍(P<0.001)。相关分析显示,患者骨髓miR-99a-5p表达量与原始细胞比例呈显著正相关(P<0.001);而与染色体核型、外周血血象无明显相关。利用靶基因在线预测软件预测mi R-99a-5p的可能靶基因,并结合文献,得出ST5可能是mi R-99a-5p在MDS中的潜在靶基因。结论:mi R-99a-5p在MDS患者中表达明显上调,且随着危险度的增加其表达呈上升趋势,并可能通过负性调控靶基因ST5参与MDS的发病。 展开更多

关键词 骨髓增生异常综合症 mir-99a-5p ST5

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miR-99a对类风湿性关节炎及TH17/Treg细胞的影响 被引量：3

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作者 李佳莹 刘暘 《临床检验杂志》 CAS 2020年第7期539-543,共5页

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-99a的表达与辅助性T细胞17(T helper cell 17,TH17)、调节性T细胞(regulatory cells,Treg)比率失衡的关系。方法收集于我院就诊的RA患者80例,分为活动期RA组(42例)和稳定期R... 目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miR-99a的表达与辅助性T细胞17(T helper cell 17,TH17)、调节性T细胞(regulatory cells,Treg)比率失衡的关系。方法收集于我院就诊的RA患者80例,分为活动期RA组(42例)和稳定期RA组(38例),以体检健康者42例作为健康人对照组。流式细胞术测定各组外周血PBMC中TH17、Treg细胞数;ELISA法检测各组血清IL-17、IL-6、TFN-α、IFN-γ、IL-4和IL-10的表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别测定TH17和Treg细胞特异性转录因子RORγt和FoxP3 mRNA以及RA患者PBMC中miR-99a的表达水平;western blot检测各组RORγt和FoxP3蛋白的表达水平。结果与健康人对照组相比,活动期和稳定期RA患者的TH17细胞数、RORγt mRNA和蛋白质的表达水平均显著升高,Treg细胞数及FoxP3 mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低(P均<0.01)。活动期RA患者血清IL-17、IL-6、TNF-α、IFN-γ的表达水平均显著升高,而IL-4和IL-10的表达水平均显著降低(P均<0.01)。此外,活动期RA患者TH17细胞中miR-99a的表达水平显著升高,Treg细胞中miR-99a的表达水平显著降低(P均<0.01)。Pearson相关分析结果显示,RA患者TH17细胞中miR-99a与RORγt mRNA的表达水平呈正相关(r=0.721,P<0.01),Treg细胞中miR-99a与FoxP3 mRNA的表达水平呈正相关(r=0.815,P<0.01)。结论RA患者TH17和Treg细胞中miR-99a的表达与TH17、Treg细胞发育分化关键转录因子RORγt、FoxP3密切相关,miR-99a可能通过影响RORγt和FoxP3,参与RA患者TH17/Treg细胞比率失衡。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎 mir-99a TH17 TREG RORΓT FOXP3

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