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支气管哮喘儿童血清miR-7b、miR-221、miR-126表达及其临床意义
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作者 刘华清 李明 毕雅茹 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第9期1700-1703,共4页
目的 探究支气管哮喘儿童血清微小核糖核酸(miR)-7b、miR-221和miR-126表达及其临床意义。方法 选取2021年1月至2023年12月合肥市妇幼保健院收治的支气管哮喘患儿101例作为观察组,其中发作组40例、缓解组61例,并选取同期体检的健康儿童... 目的 探究支气管哮喘儿童血清微小核糖核酸(miR)-7b、miR-221和miR-126表达及其临床意义。方法 选取2021年1月至2023年12月合肥市妇幼保健院收治的支气管哮喘患儿101例作为观察组,其中发作组40例、缓解组61例,并选取同期体检的健康儿童101名为对照组。治疗后随访1年,根据预后情况将观察组分成复发组17例和未复发组84例。比较发作组与缓解组血清miR-7b、miR-221、miR-126水平;采用多变量Logistic回归模型探究支气管哮喘儿童预后不良的风险因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-7b、miR-221、miR-126及联合检测对支气管哮喘儿童预后不良的诊断效能。结果 发作组的miR-7b、miR-221、miR-126水平均高于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后复发组血清miR-7b、miR-221、miR-126水平均高于未复发组,IFN-γ、FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平均低于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic分析显示,IL-4、IL-6、IgE、miR-7b、miR-221和miR-126水平升高是支气管哮喘儿童预后不良的危险因素,而IFN-γ、FVC、FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平升高是支气管哮喘儿童预后不良的保护因素(P<0.05);血清miR-7b、miR-221、miR-126以及三指标联合检测评估支气管哮喘儿童预后不良的ROC曲线面积为0.852,优于单一预测(P<0.05)。结论 支气管哮喘预后不良患儿血清miR-7b、miR-221和miR-126均呈高表达,三指标联合检测对于支气管哮喘儿童预后不良具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 mir-7b mir-221 mir-126 支气管哮喘儿童 预后不良
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酸枣仁提取物调控miR-7b-3p/5-羟色胺1A受体表达促进骨生长
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作者 罗石任 吴晓龙 谢艳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第12期2450-2457,共8页
背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者... 背景:前期研究发现,酸枣仁提取物通过提高脑组织5-羟色胺1A受体(serotonin 1A receptor,5-HT1AR)表达,使之与5-羟色胺结合,延长小鼠慢波睡眠,促进生长激素的分泌,从而使骨生长。5-HT1AR作为一种蛋白质,其表达丰度受到miRNA的调控。作者推测酸枣仁提取物可能通过miRNA调控5-HT1AR的表达从而发挥药物作用。目的:观察酸枣仁提取物通过干预小鼠脑组织中miR-7b-3p/5-HT1AR通路对骨骼生长的影响。方法:①将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组(灌胃酸枣仁提取物0.320 mg/g),阳性对照组(灌胃酸枣仁皂甙0.013 mg/g)和酸枣仁提取物+5-HT1AR抑制剂组(灌胃酸枣仁提取物最后3 d同时每天侧脑室注射5-HT1AR选择性抑制剂P-MPPF 8μg),25 d后观察酸枣仁提取物对小鼠骨生长、血清生长激素水平及脑组织5-HT1AR表达的影响;②基因芯片法筛选由酸枣仁提取物引起的骨生长小鼠与普通小鼠脑组织差异表达的miRNAs,并通过PCR验证和双荧光素酶报告基因实验证实筛选的miR-7b-3p与5-HT1AR的调控关系;③体外培养小鼠脑皮质细胞并鉴定,利用Western blot法观察酸枣仁提取物对脑皮质细胞中5-HT1AR表达的影响;④将昆明种小鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组小鼠脑组织5-HT1AR表达及5-羟色胺与5-HT1AR结合活性;⑤将SD大鼠分为正常对照组、用药组、miR-7b-3p inhibitor组、用药+miR-7b-3p mimics组、阳性对照组,观察各组大鼠慢波睡眠的变化。结果与结论:①酸枣仁提取物可以促进小鼠体长、胫骨增长,促进生长激素分泌,提高脑组织5-HT1AR含量;②基因芯片筛选出差异表达的miRNAs个数为16个,其中上调有13个,下调有3个;生物信息学预测下调miR-7b-3p可以调控5-HT1AR表达,且双荧光素酶报告基因实验证实二者有直接调控关系;③酸枣仁提取物和沉默脑皮质细胞中miR-7b-3p表达可以引起5-HT1AR高表达;沉默miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均升高;过表达miR-7b-3p后小鼠脑组织5-HT1AR表达、5-羟色胺与5-HT1AR结合活性及生长激素分泌均降低;大鼠慢波睡眠期也相应延长或缩短。结果表明,酸枣仁提取物能够降低脑组织的miR-7b-3p水平,同时增加5-HT1AR的表达量。这种机制有助于延长慢波睡眠周期,并且促进生长激素的生成,对骨骼生长有积极影响,为使用酸枣仁提取物作为促进骨骼生长的潜在手段提供了科学依据。 展开更多
关键词 酸枣仁提取物 mir-7b-3p 脑组织 5-羟色胺 5-羟色胺1A受体 生长激素
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鸡gga-miR-7b靶基因VDAC1-3’UTR双荧光素酶报告基因质粒的构建 被引量:1
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作者 肖春婷 廉传江 +1 位作者 易诚 陈洪岩 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期533-538,共6页
本研究以鸡gga-miR-7b作为研究对象,为了明确与肿瘤形成相关的关键基因VDAC1(Voltage-dependent anion channel 1)是否为gga-miR-7b的靶基因,深入研究gga-miR-7b对VDAC1基因的调控作用,本研究运用TargetScan和miRBD生物学软件预测了gga-... 本研究以鸡gga-miR-7b作为研究对象,为了明确与肿瘤形成相关的关键基因VDAC1(Voltage-dependent anion channel 1)是否为gga-miR-7b的靶基因,深入研究gga-miR-7b对VDAC1基因的调控作用,本研究运用TargetScan和miRBD生物学软件预测了gga-miR-7b与VDAC1 m RNA的3’端非编码区(3’UTR)存在种子结合位点(GTCTTCC),并使用PCR克隆以及同源重组突变的方法构建VDAC1-3’UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因重组质粒,经SacⅠ和XbaⅠ双酶切鉴定及测序结果显示,片段大小符合且序列正确;成功构建了VDAC1-3’UTR野生型和突变型双荧光素酶报告基因重组质粒并命名为pmirGLOVDAC1-wt3’UTR和pmirGLO-VDAC1-mut3’UTR。本研究结果进一步为gga-miR-7b候选靶基因VDAC1的鉴定以及功能研究提供理论依据。 展开更多
关键词 马立克氏病 gga-mir-7b VDAC1基因 pmirGLO-VDAC1-wt-3’UTR pmirGLO-VDAC1-mut-3’UTR
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Gga-miR-7b和靶基因SNCA在两品系鸡脾脏中的表达分析
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作者 肖春婷 廉传江 +1 位作者 易诚 陈洪岩 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第4期874-879,共6页
为确定gga-miR-7b与SNCA的靶向关系以及检测他们在MDV超强毒株Md5感染SPF抗性鸡(B21单倍型)和易感鸡(B19单倍型)后5 d、14 d、25 d脾脏中的表达量。利用TargetScan、miRBD软件预测gga-miR-7b的靶基因,通过双荧光素酶报告基因检测系统体... 为确定gga-miR-7b与SNCA的靶向关系以及检测他们在MDV超强毒株Md5感染SPF抗性鸡(B21单倍型)和易感鸡(B19单倍型)后5 d、14 d、25 d脾脏中的表达量。利用TargetScan、miRBD软件预测gga-miR-7b的靶基因,通过双荧光素酶报告基因检测系统体外验证gga-miR-7b与SNCA之间的靶向关系。qRT-PCR检测SNCA和gga-miR-7b在B21、B19感染Md5脾脏中的表达量。荧光素酶活性结果显示,gga-miR-7b与SNCA-wt-3′UTR共转染后显著抑制萤火虫荧光素酶活性(P<0.05),对SNCA-mut-3′UTR活性无显著影响。qRT-PCR结果显示,SNCA在B21、B19中,Md5感染5 d均显著上调表达(P<0.05),Md5感染25 d时SNCA在B21中极显著上调表达(P<0.01),在B19中极显著下调表达(P<0.01)。gga-miR-7b在Md5感染14 d,在B21中显著上调表达而在B19中显著下调表达(P<0.05),Md5感染25 d,gga-miR-7b在B21、B19中均极显著上调表达(P<0.01)。综上所述,SNCA是gga-miR-7b的靶基因。gga-miR-7b和SNCA可能与MD抗性/易感性以及MD肿瘤转化有关。 展开更多
关键词 gga-mir-7b SNCA 靶向关系 表达分析
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miR-Let-7b靶向LOX-1减轻子宫内膜纤维化的机制
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作者 秦晓洋 戚静宜 +1 位作者 王芳 宋瑞芳 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2024年第6期407-415,共9页
目的:检测miR-Let-7b及LOX-1在纤维化子宫内膜中的表达,分析miR-Let-7b靶向LOX-1在减轻子宫内膜纤维化中的作用。方法:分别构建人子宫内膜间质细胞株(hESCs)纤维化模型(TGF-β1-hESCs)及小鼠宫腔粘连模型,qRT-PCR法检测miR-Let-7b及LOX-... 目的:检测miR-Let-7b及LOX-1在纤维化子宫内膜中的表达,分析miR-Let-7b靶向LOX-1在减轻子宫内膜纤维化中的作用。方法:分别构建人子宫内膜间质细胞株(hESCs)纤维化模型(TGF-β1-hESCs)及小鼠宫腔粘连模型,qRT-PCR法检测miR-Let-7b及LOX-1表达。慢病毒转染法将TGF-β1-hESCs细胞分为NC组、miR-con组、miR-Let-7bmimic组、miR-Let-7b+pcDNA组和miR-Let-7b+pcDNA-LOX-1组,CCK-8法、EdU法及细胞划痕试验检测各组细胞增殖、迁移能力。将小鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组(宫腔注射miR-Let-7bmimic),HE染色观察子宫内膜病理变化,Masson染色法观察子宫内膜纤维化面积,Westernbloting检测各组细胞及子宫内膜组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及纤维连接蛋白(fibronectin,FN)表达。双荧光素酶报告基因法验证miR-Let-7b和LOX-1间的靶向关系。结果:TGF-β1-hESCs细胞及宫腔粘连小鼠子宫内膜组织中miR-Let-7b均呈低表达,而LOX-1呈高表达,差异显著(P<0.001)。miR-Let-7bmimic组细胞活力、EdU阳性率、细胞迁移率均低于NC组及miR-con组,差异具有统计学意义(P<0.05)。miR-Let-7b+pcDNA-LOX-1组细胞活力、EdU阳性率、细胞迁移率均高于miR-Let-7b+pcDNA组,细胞内α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-Let-7b与WT-LOX-1共转染后,miR-Let-7bmimic组细胞荧光素酶活性明显低于miR-con组,差异显著(P<0.001)。与模型组相比,治疗组小鼠子宫内膜腺体数量增多,纤维化面积减少,α-SMA、E-cadherin、FN蛋白表达降低,差异明显(P<0.05)。结论:miR-Let-7b在纤维化子宫内膜中低表达,而LOX-1呈高表达,miR-Let-7b可靶向LOX-1减轻子宫内膜纤维化,机制可能与抑制上皮间充质转化有关。 展开更多
关键词 mir-Let-7b LOX-1 子宫内膜 纤维化 宫腔粘连
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miR-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡 被引量:6
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作者 秦琴 宁花兰 +3 位作者 陈小燕 陈少英 张艳珍 陈大江 《中国美容医学》 CAS 2018年第7期79-82,共4页
目的:探讨mi R-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡。方法:q PCR法检测mi R-let-7b在黑色素瘤组织和细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测mi R-let-7b与CCND1之间的相互作用;MTT增殖实验检测抑制mi R-le... 目的:探讨mi R-let-7b通过调控相关细胞周期蛋白影响皮肤黑色素瘤的增殖和凋亡。方法:q PCR法检测mi R-let-7b在黑色素瘤组织和细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测mi R-let-7b与CCND1之间的相互作用;MTT增殖实验检测抑制mi R-let-7b后黑色素瘤细胞的增殖能力的变化情况;流式细胞术检测抑制mi R-let-7b后黑色素瘤细胞的凋亡行为的变化情况。结果:与癌旁正常皮肤组织相比,黑色素瘤组织中mi R-let-7b的表达水平相对上调,与其他黑色素瘤细胞株相比,A375细胞中mi R-let-7b表达最高;双荧光素酶实验证实mi R-let-7b能与CCND1的3’UTR特异性结合,可以调控CCND1的表达与活性;抑制mi R-let-7b的表达后可以抑制黑色素瘤细胞的增殖能力;同时可以促进黑色素瘤细胞的凋亡行为。结论:mi R-let-7b可以调控CCND1的表达从而影响黑色素瘤细胞的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 mi R-let-7b 黑色素瘤 CCND1 凋亡 增殖
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miR-320a、miR-18b、miR-22和Let-7b在慢型克山病患者血清中表达及意义的研究 被引量:1
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作者 甄荣霞 王铜 +4 位作者 冯红旗 侯杰 陈向丽 王哲 徐春艳 《中国地方病防治》 CAS 北大核心 2016年第11期1208-1211,共4页
目的通过检测慢型克山病和对照组外周血中miR-320a、miR-18b、miR-22、Let-7b的表达水平,探讨其作为疾病鉴别诊断的生物标志物的意义。方法收集克山病病区慢型克山病患者(40例)、非病区对照组(40例)及病区对照组(40例)的血样标本,采用... 目的通过检测慢型克山病和对照组外周血中miR-320a、miR-18b、miR-22、Let-7b的表达水平,探讨其作为疾病鉴别诊断的生物标志物的意义。方法收集克山病病区慢型克山病患者(40例)、非病区对照组(40例)及病区对照组(40例)的血样标本,采用实时荧光定量PCR技术检测各组研究对象血清中目标miRNA的表达水平。结果 miR-320a、miR-18b和Let-7b在两对照组间比较有统计学意义(P<0.05);比较克山病组和病区对照组,miR-320a和Let-7b有统计学意义(P<0.05),提示这3个目标miRNA与高血压具有相关性。miR-22在三组比较中均无意义。结论 miR-320a、miR-18b、miR-22和Let-7b在克山病患者中未见显著表达,为慢型克山病的鉴别诊断提供了新思路。 展开更多
关键词 克山病 生物标志物 mir-320a mir-18b mir-22 Let-7b
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circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究 被引量:6
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作者 吕飞飞 李昆珊 +1 位作者 胡燕 仇永乐 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第8期1398-1404,共7页
目的:探究circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究。方法:将SCC9/DDP细胞分为SCC9/DDP组、si-NC组、si-VAPA组、miR-125b组、miR-NC组、pcDNA-VAPA组、miR-HOXA7组。qRT-PCR检测细胞中circVAPA和miR-125b表达,MT... 目的:探究circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究。方法:将SCC9/DDP细胞分为SCC9/DDP组、si-NC组、si-VAPA组、miR-125b组、miR-NC组、pcDNA-VAPA组、miR-HOXA7组。qRT-PCR检测细胞中circVAPA和miR-125b表达,MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测细胞耐药、增殖、侵袭和凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中HOXA7蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证VAPA、miR-125b和HOXA7的靶向关系。结果:和HOK相比,SCC9和SCC9/DDP细胞中circVAPA表达明显升高,miR-125b表达明显降低(P<0.05);且SCC9/DDP细胞中circVAPA表达明显高于SCC9细胞,miR-125b表达明显低于SCC9细胞(P<0.05)。和SCC9/DDP组相比,si-VAPA组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P<0.05)。和miR-NC组相比,miR-125b组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P<0.05)。靶向关系结果显示,miR-125b组荧光素酶活性明显低于miR-NC组(P<0.05);si-VAPA组细胞中miR-125b表达明显高于si-NC组(P<0.05),miR-125b组细胞中HOXA7表达明显低于miR-NC组(P<0.05)。和miR-125b组相比,pcDNA-VAPA组和miR-HOXA7组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显升高,细胞凋亡能力明显降低(P<0.05)。结论:低表达circVAPA可通过调控miR-125b/HOXA7轴来逆转口腔癌细胞化疗耐药,抑制口腔癌化疗耐药细胞增殖、侵袭并诱导凋亡。 展开更多
关键词 circVAPA mir-125b/HOXA7 口腔癌细胞 化疗耐药
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miR-let-7b慢病毒载体促进大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化 被引量:1
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作者 周雪颖 李双月 +4 位作者 曲淑贤 曲宴慧 邵颖 孙经淞 朴丰源 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第7期1146-1152,共7页
微小RNA在生命体生长、衰老的过程中起着重要的作用,参与骨髓间充质干细胞(MSCs)重要的生物学进程,包括增殖、分化、信号转导和死亡等。该文探讨了miR-let-7b对MSCs来源神经细胞的调控作用。体外分离、扩增大鼠MSCs,通过细胞形态学观察... 微小RNA在生命体生长、衰老的过程中起着重要的作用,参与骨髓间充质干细胞(MSCs)重要的生物学进程,包括增殖、分化、信号转导和死亡等。该文探讨了miR-let-7b对MSCs来源神经细胞的调控作用。体外分离、扩增大鼠MSCs,通过细胞形态学观察、表面标志物的流式细胞仪检测进行鉴定。将MSCs分为miR-let-7b+组、miR-let-7b-组和对照组,分别转染miR-let-7b慢病毒载体、Anti-rno-miR-let-7b Inhibitor载体及不进行任何转染操作,实时荧光定量PCR(RTq PCR)检测各组细胞miR-let-7b的表达水平,确认转染情况。多因子联合法诱导各组MSCs向神经细胞分化,RT-q PCR检测神经细胞标志物MAP-2的表达,免疫细胞化学染色检测神经原特异性烯醇化酶(NSE)的表达和各组MSCs的神经细胞分化率。分离培养的MSCs在镜下呈长梭形或成纤维细胞样,CD90、CD44阳性表达率均大于90%,CD45的表达不足2%,证实得到的细胞即为MSCs。RTq PCR结果显示,与对照组相比,miR-let-7b+组的miR-let-7b表达水平升高,miR-let-7b-组几乎未检测到miR-let-7,提示miR-let-7b载体及miR-let-7b Inhibitor载体均成功转染了MSCs。经诱导分化后,与对照组相比,miR-let-7b+组神经细胞标志蛋白SIM312、Gap43、MBP和NSE与对照组相比表达水平显著升高(P<0.05);miR-let-7b-组SIM312、Gap43、MBP和NSE表达水平与miR-let-7b+组相比具有明显差异(P<0.05)。结果提示,miR-let-7b可以促进MSCs向神经细胞分化,通过控制miR-let-7b的水平可以调控MSCs的神经细胞分化率。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 mir-let-7b 神经元 诱导分化 慢病毒
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MiR-let-7b、IMP3、HMGA2在宫颈鳞癌中的表达及临床意义 被引量:6
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作者 龙玲艳 王晴 张蓓 《临床与病理杂志》 CAS 2022年第3期539-546,共8页
目的:探究宫颈鳞癌组织中miR-let-7b、IMP3及HMGA2的表达情况,并探讨其相关性以及临床意义。方法:选取2016年1月至2020年7月徐州市中心医院的207例宫颈组织标本为研究对象,其中包括正常宫颈(normal cervix,NC)30例、低度鳞状上皮内病变(... 目的:探究宫颈鳞癌组织中miR-let-7b、IMP3及HMGA2的表达情况,并探讨其相关性以及临床意义。方法:选取2016年1月至2020年7月徐州市中心医院的207例宫颈组织标本为研究对象,其中包括正常宫颈(normal cervix,NC)30例、低度鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)32例、高度鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)39例、宫颈鳞癌(squamous cancer cervix,SCC)106例。采用real-timeRT-PCR法检测宫颈组织中miR-let-7b的表达水平,免疫组织化学法检测宫颈组织中IMP3、HMGA2的表达,分析miR-let-7b、IMP3、HMGA2在宫颈组织中表达的相关性以及三者与SCC患者临床病理学特征的关系。结果:MiR-let-7b在NC、LSIL、HSIL、SCC中的相对表达量呈逐渐下降的趋势(P<0.01)。IMP3在NC、LSIL、HSIL、SCC中的阳性表达率分别为3.3%、46.9%、79.5%、89.6%;HMGA2在NC、LSIL、HSIL、SCC中的阳性表达率分别为13.33%、53.13%、87.18%、88.68%。SCC、HSIL、LSIL与NC及SCC、HSIL与LSIL的IMP3及HMGA2相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);SCC与HSIL比较,二者的表达组间差异无统计学意义(P=0.05)。SCC患者宫颈组织中miR-let-7b、IMP3、HMGA2表达在不同年龄组的差异无统计学意义(分别P=0.691,P=0.957,P=0.132),而三者在不同分化程度、淋巴结转移状态、FIGO分期、浸润深度的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SCC组织中miR-let-7b低表达,IMP3、HMGA2高表达,miR-let-7b与IMP3、HMGA2表达呈负相关,IMP3与HMGA2表达呈正相关。三者表达与SCC患者的FIGO分期、分化程度、淋巴结转移状态、浸润深度有关,联合检测miR-let-7b和IMP3、HMGA2表达可能对宫颈鳞癌的早期诊断、疾病分期、判断预后提供一定帮助。 展开更多
关键词 mir-let-7b IMP3 HMGA2 宫颈鳞癌
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miR-let-7b-5p对急性胰腺炎AR42J细胞凋亡及自噬的作用研究 被引量:4
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作者 刘东菊 潘路娟 +4 位作者 梁华益 周青宏 李雪颀 潘春风 覃月秋 《右江民族医学院学报》 2022年第1期6-10,共5页
目的探讨miR-let-7b-5p对急性胰腺炎AR42J细胞凋亡和自噬的影响。方法以未处理的AR42J细胞作为正常对照组,1×10^(-8) mol/L浓度的雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)24h建立体外急性胰腺炎模型,慢病毒携带miR-let-7b-5p的模拟物(mi... 目的探讨miR-let-7b-5p对急性胰腺炎AR42J细胞凋亡和自噬的影响。方法以未处理的AR42J细胞作为正常对照组,1×10^(-8) mol/L浓度的雨蛙素诱导大鼠胰腺腺泡细胞(AR42J)24h建立体外急性胰腺炎模型,慢病毒携带miR-let-7b-5p的模拟物(miRNA mimic)、抑制物(miRNA inhibitio)和空病毒转染急性胰腺炎模型细胞作为miR-let-7b-5p过表达组、低表达组和阴性对照组,RT-qPCR验证转染效果,检测凋亡基因Caspase-3 mRNA和自噬基因LC3ⅡmRNA的表达量;Western Blot检测Caspase-3及LC3Ⅱ的蛋白表达。结果与正常对照组相比,阴性对照组的miRlet-7b-5p表达量显著降低(P<0.01),凋亡基因Caspase-3mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.01),自噬基因LC3ⅡmRNA及蛋白表达增加(P<0.05)。与阴性对照组相比,过表达组miR-let-7b-5p表达量显著增加(P<0.01),凋亡基因Caspase-3mRNA及蛋白表达均减少(P<0.05),LC3ⅡmRNA及蛋白表达均增加(P<0.05);低表达组miR-let-7b-5p表达量显著降低(P<0.01),凋亡基因Caspase-3mRNA及蛋白表达均增加(P<0.05)、自噬基因LC3ⅡmRNA及蛋白表达均增加(P<0.05)。结论miR-let-7b-5p可调控急性胰腺炎AR42J细胞的凋亡基因Caspase-3和自噬基因LC3Ⅱ的表达,从而影响胰腺细胞的凋亡和自噬。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 mir-let-7b-5p 凋亡 自噬
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miR-570对胃癌细胞B7-H1蛋白表达的抑制作用
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作者 杨鹏 朱健洁 +3 位作者 孙静 李锐 汪维鹏 张学光 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期270-275,共6页
B7-H1是一种重要的负性共刺激分子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,而微小RNA具有直接的转录后调控作用。本文研究miR-570对B7-H1表达的调控作用。首先将miR-570及其抑制剂anti-miR-570分别转染B7-H1表达阳性的人胃癌细胞SGC-7901和B7-H... B7-H1是一种重要的负性共刺激分子,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用,而微小RNA具有直接的转录后调控作用。本文研究miR-570对B7-H1表达的调控作用。首先将miR-570及其抑制剂anti-miR-570分别转染B7-H1表达阳性的人胃癌细胞SGC-7901和B7-H1表达阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-435,以流式细胞术检测B7-H1分子表达情况;然后构建pcDNA/B7-H1表达质粒与miR-570共转染CHO细胞,以流式细胞术检测CHO细胞上B7-H1分子的表达情况;最后分别构建含B7-H1基因3-UTR片段和含miR-570作用靶点序列的荧光素酶表达载体与miR-570共转染CHO细胞,用双荧光素酶报告系统检测荧光素酶活性。结果显示miR-570能显著抑制SGC-7901细胞和B7-H1基因转染细胞膜上B7-H1蛋白的表达,并能显著抑制荧光素酶表达载体表达的荧光素酶蛋白,而且anti-miR-570能上调MDA-MB-435细胞上B7-H1表达。本研究证明miR-570能显著抑制B7-H1蛋白表达,为通过抑制B7-H1信号通路以增强机体抗肿瘤免疫力的治疗途径奠定了基础。 展开更多
关键词 mir-570与b7-H1 SGC7901细胞、MDA-Mb-435细胞与CHO细胞 重组质粒 双荧光素酶报告系统
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miR-let-7b对卵泡颗粒细胞发育的作用
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作者 巩转娣 魏黎敏 +4 位作者 白生菊 拜小强 牛宇辉 杨娟 魏锁成 《西北民族大学学报(自然科学版)》 2020年第3期35-40,共6页
目的:目前为止,尚不清楚micro-RNA(miR)-let-7b是否通过MAP3K1调节卵泡颗粒细胞(FGCs)凋亡,本研究拟运用PCR和Western blotting方法对此进行实验验证.方法:应用CCK-8测定细胞存活率.设计合成miR-let-7b和MAP3K1 mRNA特异性引物,利用qRT-... 目的:目前为止,尚不清楚micro-RNA(miR)-let-7b是否通过MAP3K1调节卵泡颗粒细胞(FGCs)凋亡,本研究拟运用PCR和Western blotting方法对此进行实验验证.方法:应用CCK-8测定细胞存活率.设计合成miR-let-7b和MAP3K1 mRNA特异性引物,利用qRT-PCR和Western Blotting分析FGCs中miR-let-7b和MAP3K1 mRNA基因与蛋白的表达水平.结果:随着miR-let-7b模拟物剂量(40、60、80、100、120μM)的增加,FGC的增殖活性逐渐降低,MIM-4组的增殖活性明显低于CG和MIM-1组(P<0.05).miR-let-7b表达水平随着模拟物剂量的增加而逐渐降低,MIM-3和MIM-4组的miR-let-7b水平低于MIM-1(P<0.05或P<0.01).MIM-3和MIM-4组MAP3K1 mRNA和蛋白水平显著低于CG,而且MIM-4组MAP3K1 mRNA和蛋白水平低于MIM-1组(P<0.05).结论:miR-let-7b可明显降低FGC增殖活性.下调FGC中miR-let-7b mRNA表达水平,miR-let-7b处理可剂量依赖性地降低MAP3K1 mRNA和蛋白质表达水平. 展开更多
关键词 微小RNA let-7b 卵泡颗粒细胞 MAP3K1 蛋白表达
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miR-98和let-7bb抑制乳腺癌细胞的增殖影响 被引量:1
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作者 张志强 王晓舟 +3 位作者 马怡 郑爽 韩彧佳 赫丽杰 《实用癌症杂志》 2020年第9期1412-1414,共3页
目的检测miR-98和let-7b在乳腺癌细胞中的表达水平,并研究其对乳腺癌细胞增殖的影响。方法收集乳腺癌患者和健康人对照的临床组织标本,RT-PCR检测其中miR-98和let-7b的表达水平。培养SKBR3细胞系,分别加入miR-98和let-7b的mimic或inhibi... 目的检测miR-98和let-7b在乳腺癌细胞中的表达水平,并研究其对乳腺癌细胞增殖的影响。方法收集乳腺癌患者和健康人对照的临床组织标本,RT-PCR检测其中miR-98和let-7b的表达水平。培养SKBR3细胞系,分别加入miR-98和let-7b的mimic或inhibitor,MTT法检测细胞增殖水平的变化。结果乳腺癌患者中miR-98和let-7b表达水平显著低于健康人的组织标本。加入miR-98和let-7b的mimic后,SKBR3细胞增殖受到抑制,而加入miR-98和let-7b的inhibitor后,乳腺癌细胞的增殖受到促进。结论miR-98和let-7b在乳腺癌中下调,并抑制乳腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-98 let-7b
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miRlet-7b抑制乳腺癌MCF-7细胞迁移及其机制 被引量:3
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作者 曲杰 王胜林 +2 位作者 吕喜英 李青山 杨宗伟 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2012年第4期328-331,共4页
目的:观察miR let-7b对乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法:合成miR let-7b并转染乳腺癌MCF-7细胞,以miR-control作参照。通过划痕实验观察转染前后细胞迁移能力的变化,运用PCR和蛋白质印迹法检测转染miR let-7b前后M... 目的:观察miR let-7b对乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响并探讨其作用机制。方法:合成miR let-7b并转染乳腺癌MCF-7细胞,以miR-control作参照。通过划痕实验观察转染前后细胞迁移能力的变化,运用PCR和蛋白质印迹法检测转染miR let-7b前后MCF-7细胞内IL-6表达水平的变化。最后通过信息生物学软件及双荧光酶素报告基因方法验证miR let-7b与IL-6结合。结果:与对照组比较,转染miR let-7b的MCF-7细胞迁移能力明显降低,而anti-miR let-7b明显促进细胞迁移。转染miR let-7b的乳腺癌MCF-7细胞中IL-6的表达水平较对照组明显降低,而转染anti-miR let-7b的细胞内IL-6的表达水平明显提高。信息生物学软件和双荧光酶素报告基因证实miR let-7b与IL-6结合。结论:miR let-7b在转录水平抑制乳腺癌MCF-7细胞IL-6的表达从而抑制MCF-7细胞的迁移。 展开更多
关键词 miRlet-7b IL-6 乳腺癌MCF-7细胞 迁移
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急性缺血性脑卒中患者血浆miR let-7b-3p水平及意义
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作者 张彩玲 《牡丹江医学院学报》 2021年第3期64-67,97,共5页
目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆miR let-7b-3p水平及意义。方法选取2016年5月至2019年5月间平顶山市第二人民医院收治的355例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据预后情况分为预后不良组和预后良好组。采用实时荧光定量PCR法(RT-q... 目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆miR let-7b-3p水平及意义。方法选取2016年5月至2019年5月间平顶山市第二人民医院收治的355例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,根据预后情况分为预后不良组和预后良好组。采用实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测患者血浆miR let-7b-3p相对表达量,并分析其与预后的关系。结果355例急性缺血性脑卒中患者出院后3个月内预后不良发生率为45.07%。预后不良组血浆let-7b-3p相对表达量低于预后良好组(P<0.05);出血转化、发病-治疗时间(ONT)、同型半胱氨酸及miR let-7b-3p与急性缺血性脑卒中患者预后密切相关。出血转化、ONT、同型半胱氨酸、let-7b-3p等联合评估急性缺血性脑卒中患者预后的曲线下面积(AUC)高于miR let-7b-3p及出血转化、ONT、同型半胱氨酸的联合(P<0.05)。结论血浆let-7b-3p与急性缺血性脑卒中患者预后关系密切,检测miR let-7b-3p表达情况有助于预测患者预后。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 miR let-7b-3p 预后
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miR-129对乳腺癌肿瘤干细胞自我更新能力的调控作用及其机制探讨 被引量:3
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作者 贺炳胜 王猛 +4 位作者 杜宁 肖国栋 李翔 任宏 唐守清 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第18期2826-2831,共6页
目的:探究miR-129在乳腺癌中对肿瘤干细胞自我更新能力的调控作用及其机制。方法:应用免疫组化检测乳腺癌肿瘤干细胞在肿瘤组织与癌旁组织中的数量及其与乳腺癌肿瘤分期的关系,验证miR-129和Numb与乳腺癌肿瘤干细胞之间的相关关系。在... 目的:探究miR-129在乳腺癌中对肿瘤干细胞自我更新能力的调控作用及其机制。方法:应用免疫组化检测乳腺癌肿瘤干细胞在肿瘤组织与癌旁组织中的数量及其与乳腺癌肿瘤分期的关系,验证miR-129和Numb与乳腺癌肿瘤干细胞之间的相关关系。在体外实验中应用Western Blotting及RT-PCR验证miR-129通过阻断雌激素受体alpha(ER alpha,ESR1)对Notch信号通路的调节作用及其调节的具体机制;应用裸鼠成瘤实验验证miR-129在裸鼠体内水平对乳腺癌肿瘤干细胞的影响。结果:肿瘤组织中乳腺癌肿瘤干细胞的比例高于癌旁组织并与肿瘤分期具有相关性;乳腺癌肿瘤干细胞比例与临床样本中miR-129和Numb的表达水平呈负相关;乳腺癌肿瘤干细胞中miR-129的过表达与Notch信号通路的抑制直接相关,这种作用很可能是miR-129通过调控ESR1所引起的Let-7b的表达下调进而导致Numb的释放来实现的;miR-129在裸鼠体内实验中可以抑制乳腺癌肿瘤干细胞的成瘤。结论:miR-129在乳腺癌组织中可以通过调控Notch信号通路影响乳腺癌肿瘤干细胞自我更新的能力,具体的调节机制可能是通过调控ESR1所引起的Let-7b的表达下调进而导致Numb的释放来最终抑制Notch信号通路的激活。 展开更多
关键词 mir-129 雌激素受体alpha Let-7b NUMb NOTCH信号通路
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核因子-κB抑制物激酶ε促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的实验研究 被引量:2
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作者 郭彩丽 郭高超 +1 位作者 黄强 张振中 《肿瘤基础与临床》 2018年第6期464-468,共5页
目的探讨核因子-κB抑制物激酶ε(IKKε)通过IKKε-Yes相关蛋白1(Yap1)-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的具体作用机制。方法构建IKKε短发夹核糖核酸(shRNA)慢病毒及YAP1小干扰RNA(siRNA)。以IKKεshRNA慢病毒转染U87-M... 目的探讨核因子-κB抑制物激酶ε(IKKε)通过IKKε-Yes相关蛋白1(Yap1)-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展的具体作用机制。方法构建IKKε短发夹核糖核酸(shRNA)慢病毒及YAP1小干扰RNA(siRNA)。以IKKεshRNA慢病毒转染U87-MG细胞,下调细胞中IKKε的表达水平。通过RT-PCR及Western blot检测细胞中IKKε、YAP1及miR-Let-7b/i的表达;通过Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化。以YAP1 siRNA转染U87-MG细胞株,下调细胞中YAP1的表达水平。通过RT-PCR及Western blot检测细胞中YAP1及miR-Let-7b/i的表达。结果与对照组和无义序列组相比较,转染IKKεshRNA组IKKε蛋白及mRNA水平明显降低;YAP1蛋白水平明显降低;miR-Let-7b/i水平明显升高;穿过小室细胞数明显降低(P均<0.05)。与对照组和无义序列组相比较,转染YAP1 siRNA组YAP1蛋白及mRNA水平明显降低;miR-Let-7b/i水平明显升高(P均<0.05)。结论 IKKε可以通过IKKε-YAP1-miR-Let-7b/i途径促进人脑胶质母细胞瘤恶性进展,有望为人胶质母细胞瘤的治疗提供新的治疗策略。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 核因子-κb抑制物激酶ε Yes相关蛋白1 mir-Let-7b mir-Let-7i
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原发性胆汁性肝硬化患者miR-let-7b的异常表达及其意义 被引量:11
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作者 钱琤 任传路 +3 位作者 陈孙孝 仲人前 秦琴 邓安梅 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期533-536,共4页
目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)microRNA(miR—let-7b)的表达及其临床意义。方法以60例PBC患者和35名健康对照者作为研究对象,应用荧光定量RT-PCR方法检测miR-let-To的表达。分析miR-let-7b)与May... 目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMC)microRNA(miR—let-7b)的表达及其临床意义。方法以60例PBC患者和35名健康对照者作为研究对象,应用荧光定量RT-PCR方法检测miR-let-To的表达。分析miR-let-7b)与Mayo风险评分及临床分期的相关性。检测PBC患者血清白细胞介素18、总胆红素、碱性磷酸酶、y-谷氨酰转移酶的水平,分析其与miR-let-7b的相关性。独立样本数据比较用非参数Mann-Whitney检验;相关分析采用Spearman相关性检验。结果PBC患者的PBMC miR-let-7b的相对表达水平显著低于健康对照者,差异有统计学意义(0.096±0.047与1.000±0.293,Z=-8.101,P〈0.01)。Ⅱ、Ⅲ、IV期PBC患者PBMCmiR-let-7b的相对表达水平显著低于Ⅰ期患者,与Ⅰ期比较,q值分别为7.697,7.075,12.07,P值均〈0.01;IV期患者显著低于Ⅱ、Ⅲ期患者,q值分别为6.499和4.423,P值均〈0.01。PBC患者PBMCmiR-let-7b的相对表达水平与Mayo风险评分呈负相关(r=-0.4930,P〈0.01),与白细胞介素18(r=-0.4643,P〈0.01)、碱性磷酸酶(r=-4119,P〈0.01)水平也呈负相关,与总胆红素、y-谷氨酰转移酶无明显相关陛。结论PBC患者PBMC miR-let-7b)表达水平显著降低,与疾病进程呈负相关,这为今后PBC的诊断和预防提供了新的线索。 展开更多
关键词 原发性胆汁性肝硬化 mir-let-7b 自身免疫性疾病
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Melatonin modifies SOX2^+ cell proliferation in dentate gyrus and modulates SIRT1 and MECP2 in long-term sleep deprivation 被引量:2
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作者 Alan Hinojosa-Godínez Luis F. Jave-Suarez +5 位作者 Mario Flores-Soto Alma Y. Gálvez-Contreras Sonia Luquín Edith Oregon-Romero Oscar González-Pérez Rocio E. González-Castaneda 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第10期1787-1795,共9页
Melatonin is a pleiotropic molecule that,after a short-term sleep deprivation,promotes the proliferation of neural stem cells in the adult hippocampus.However,this effect has not been observed in long-term sleep depri... Melatonin is a pleiotropic molecule that,after a short-term sleep deprivation,promotes the proliferation of neural stem cells in the adult hippocampus.However,this effect has not been observed in long-term sleep deprivation.The precise mechanism exerted by melatonin on the modulation of neural stem cells is not entirely elucidated,but evidence indicates that epigenetic regulators may be involved in this process.In this study,we investigated the effect of melatonin treatment during a 96-hour sleep deprivation and analyzed the expression of epigenetic modulators predicted by computational text mining and keyword clusterization.Our results showed that the administration of melatonin under sleep-deprived conditions increased the MECP2 expression and reduced the SIRT1 expression in the dentate gyrus.We observed that let-7 b,mir-132,and mir-124 were highly expressed in the dentate gyrus after melatonin administration,but they were not modified by sleep deprivation.In addition,we found more Sox2^+/5-bromo-2’-deoxyuridine(BrdU)^+cells in the subgranular zone of the sleep-deprived group treated with melatonin than in the untreated group.These findings may support the notion that melatonin modifies the expression of epigenetic mediators that,in turn,regulate the proliferation of neural progenitor cells in the adult dentate gyrus under long-term sleep-deprived conditions.All procedures performed in this study were approved by the Animal Ethics Committee of the University of Guadalajara,Mexico(approval No.CI-16610)on January 2,2016. 展开更多
关键词 sleep-deprivation MELATONIN microRNA NEUROGENESIS SIRTUIN 1 SIRT1 methyl-CpG-binding protein 2 MECP2 epigenetic text-mining mir-9 let-7b
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