目的:检测miR-372-3p在膀胱癌组织和转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞中的表达,研究miR-372-3p对膀胱癌5637和T24细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:采集2016年3月至2017年1月武汉中心医院收治的6例膀胱癌患者癌及癌旁组织(距离肿瘤边缘...目的:检测miR-372-3p在膀胱癌组织和转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞中的表达,研究miR-372-3p对膀胱癌5637和T24细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:采集2016年3月至2017年1月武汉中心医院收治的6例膀胱癌患者癌及癌旁组织(距离肿瘤边缘>5 cm),q PCR检测膀胱癌及癌旁组织miR-372-3p表达。采用脂质体转染法将miR-372-3p mimics或者miRNC转入膀胱癌5637和T24细胞。用q PCR和Western blotting检测转染miR-372-3p mimics和miR-NC膀胱癌细胞miR-372-3p和ATAD2 m RNA和蛋白E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期分布,MTT法和集落形成实验检测细胞增殖和集落形成能力,划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:膀胱癌组织miR-372-3p m RNA的表达显著低于癌旁组织(0.65±0.56 vs 1.76±0.34,P<0.01)。和转染miR-NC膀胱癌细胞相比,转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞的miR-372-3p m RNA表达显著增加,ATAD2 m RNA和蛋白的表达显著降低,E-cadherin蛋白表达上调,N-cadherin蛋白表达下调,细胞周期明显阻滞,细胞集落形成和增殖能力显著降低,细胞迁移数和侵袭数减少。结论:miR-372-3p的低表达可能与膀胱癌的发生发展有关,其通过靶向调控ATAD2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能成为膀胱癌生物治疗的新靶标。展开更多
目的在妊娠期糖尿病(GDM)中探讨miR-372-3p表达及其与胰岛素抵抗(IR)的相互关系并初步探究其分子机制;方法选取2018年1月至2019年1月于兰州大学第二附属医院正规产检并住院分娩的56例GDM孕妇为GDM组,选取同期在本院分娩的60例正常孕妇...目的在妊娠期糖尿病(GDM)中探讨miR-372-3p表达及其与胰岛素抵抗(IR)的相互关系并初步探究其分子机制;方法选取2018年1月至2019年1月于兰州大学第二附属医院正规产检并住院分娩的56例GDM孕妇为GDM组,选取同期在本院分娩的60例正常孕妇作为正常对照组(NC组)。观察对比两组孕妇一般临床资料(如年龄、产前BMI、OGTT孕周等)和代谢相关生化指标(总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)空腹血糖值(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、空腹胰岛素(FINS)等),并计算胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);RT-PCR检测两组受试者胎盘组织中的miR-372-3p的表达水平;Pearson相关系数分析GDM组中miR-372-3p表达量与代谢相关指标的相关性;生物信息学选取GLUT-4作为miR-372-3p的目标靶基因,并采用双荧光素酶基因报告实验进行验证两者的靶向关系;在HTR-8细胞中转染miR-372-3p mimics或miR-372-3p inhibitor进行上调或抑制miR-372-3p表达,RT-PCR检测转染效率后,Western blot实验检测miR-372-3p对GLUT-4蛋白表达的影响。结果与NC组相比,GDM组孕产妇仅产前BMI显著增加(P<0.01),其余临床资料差异均无统计学意义(P>0.05);代谢相关指标相比,GDM组的TC、TG、FPG、2 h PG、FINS及HOMA-IR均较NC组显著增加(P<0.01),而HOMA-β显著低于NC组(P<0.01),其余指标差异均无统计学意义(P>0.05);GDM组的胎盘miR-372-3p表达较NC组显著升高(P<0.05)且其表达水平与FPG、FINS、HOMA-IR均呈正相关关系(P<0.05);双荧光素酶基因报告实验证实miR-372-3p可靶向调控GLUT-4表达且在HTR-8细胞中miR-372-3p可负向调控GLU-4蛋白表达;结论在GDM中miR-372-3p可能通过负向调控GLUT-4表达参与胰岛素抵抗。展开更多
文摘目的:检测miR-372-3p在膀胱癌组织和转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞中的表达,研究miR-372-3p对膀胱癌5637和T24细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:采集2016年3月至2017年1月武汉中心医院收治的6例膀胱癌患者癌及癌旁组织(距离肿瘤边缘>5 cm),q PCR检测膀胱癌及癌旁组织miR-372-3p表达。采用脂质体转染法将miR-372-3p mimics或者miRNC转入膀胱癌5637和T24细胞。用q PCR和Western blotting检测转染miR-372-3p mimics和miR-NC膀胱癌细胞miR-372-3p和ATAD2 m RNA和蛋白E-cadherin、N-cadherin蛋白的表达,流式细胞术检测细胞周期分布,MTT法和集落形成实验检测细胞增殖和集落形成能力,划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。结果:膀胱癌组织miR-372-3p m RNA的表达显著低于癌旁组织(0.65±0.56 vs 1.76±0.34,P<0.01)。和转染miR-NC膀胱癌细胞相比,转染miR-372-3p mimics膀胱癌细胞的miR-372-3p m RNA表达显著增加,ATAD2 m RNA和蛋白的表达显著降低,E-cadherin蛋白表达上调,N-cadherin蛋白表达下调,细胞周期明显阻滞,细胞集落形成和增殖能力显著降低,细胞迁移数和侵袭数减少。结论:miR-372-3p的低表达可能与膀胱癌的发生发展有关,其通过靶向调控ATAD2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能成为膀胱癌生物治疗的新靶标。
文摘目的在妊娠期糖尿病(GDM)中探讨miR-372-3p表达及其与胰岛素抵抗(IR)的相互关系并初步探究其分子机制;方法选取2018年1月至2019年1月于兰州大学第二附属医院正规产检并住院分娩的56例GDM孕妇为GDM组,选取同期在本院分娩的60例正常孕妇作为正常对照组(NC组)。观察对比两组孕妇一般临床资料(如年龄、产前BMI、OGTT孕周等)和代谢相关生化指标(总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)空腹血糖值(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、空腹胰岛素(FINS)等),并计算胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);RT-PCR检测两组受试者胎盘组织中的miR-372-3p的表达水平;Pearson相关系数分析GDM组中miR-372-3p表达量与代谢相关指标的相关性;生物信息学选取GLUT-4作为miR-372-3p的目标靶基因,并采用双荧光素酶基因报告实验进行验证两者的靶向关系;在HTR-8细胞中转染miR-372-3p mimics或miR-372-3p inhibitor进行上调或抑制miR-372-3p表达,RT-PCR检测转染效率后,Western blot实验检测miR-372-3p对GLUT-4蛋白表达的影响。结果与NC组相比,GDM组孕产妇仅产前BMI显著增加(P<0.01),其余临床资料差异均无统计学意义(P>0.05);代谢相关指标相比,GDM组的TC、TG、FPG、2 h PG、FINS及HOMA-IR均较NC组显著增加(P<0.01),而HOMA-β显著低于NC组(P<0.01),其余指标差异均无统计学意义(P>0.05);GDM组的胎盘miR-372-3p表达较NC组显著升高(P<0.05)且其表达水平与FPG、FINS、HOMA-IR均呈正相关关系(P<0.05);双荧光素酶基因报告实验证实miR-372-3p可靶向调控GLUT-4表达且在HTR-8细胞中miR-372-3p可负向调控GLU-4蛋白表达;结论在GDM中miR-372-3p可能通过负向调控GLUT-4表达参与胰岛素抵抗。