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miR-30e-3p调控的自噬对缺血缺氧致H9c2心肌细胞损伤的保护作用 被引量:2
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作者 苏波 龙曼云 +1 位作者 郑静 李浪 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第5期784-789,共6页
目的:研究miR-30e-3p在缺血缺氧(IH)环境中对H9c2心肌细胞自噬的调控,以及对心肌细胞损伤的影响。方法:使用H9c2心肌细胞进行体外研究,将慢病毒作为载体转染H9c2心肌细胞以上调或者抑制miR-30e-3p表达。根据本课题组前期研究取9 h作为... 目的:研究miR-30e-3p在缺血缺氧(IH)环境中对H9c2心肌细胞自噬的调控,以及对心肌细胞损伤的影响。方法:使用H9c2心肌细胞进行体外研究,将慢病毒作为载体转染H9c2心肌细胞以上调或者抑制miR-30e-3p表达。根据本课题组前期研究取9 h作为干预时间点,将H9c2心肌细胞随机分为6组,分别为正常对照(Con)组、IH组、IH+miR-30e-3p阴性对照(IH+NC)组、IH+miR-30e-3p mimic(IH+MIR)组、IH+miR-30e-3p inhibitor(IH+MIR inhibitor)组和IH+miR-30e-3p mimic+3-MA(IH+MIR+3-MA)组。以实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测miR-30e-3p表达水平,MTS法检测心肌细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)测定心肌细胞损伤,蛋白质印迹(Western blotting)检测自噬关键蛋白LC3与p62表达变化,共聚焦显微镜观察细胞自噬流。结果:与Con组比较,IH组miR-30e-3p表达与心肌细胞存活率下降,心肌细胞损伤增加,自噬蛋白LC3Ⅱ表达减少,p62表达升高(均P<0.05);与IH组比较,过表达miR-30e-3p后心肌细胞存活率升高,心肌损伤减少,LDH、自噬蛋白LC3Ⅱ表达增加,p62表达降低,同时自噬流增多(均P<0.05)。结论:过表达miR-30e-3p能增加IH环境中H9c2心肌细胞自噬,减轻细胞损伤,起到保护心肌细胞的作用。 展开更多
关键词 mir-30e-3p 心肌细胞 自噬 缺血 缺氧
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miR-30e-3p在弥漫大B细胞淋巴瘤microRNA芯片集测序数据中的表达及机制研究 被引量:1
2
作者 王颖伦 贺菽嘉 +5 位作者 罗洁 石聪 陈茜茜 程澍 李珍珍 顾永耀 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第5期955-961,共7页
目的:探究miR-30e-3p在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的表达意义和潜在分子机制。方法:收集全球范围内4个DLBCL miRNA芯片和miRNA-seq数据集数据,通过计算整合的标准化均数差(SMD)和绘制汇综合受试者工作特征曲线(SROC曲线),检测miR-30e-3p... 目的:探究miR-30e-3p在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的表达意义和潜在分子机制。方法:收集全球范围内4个DLBCL miRNA芯片和miRNA-seq数据集数据,通过计算整合的标准化均数差(SMD)和绘制汇综合受试者工作特征曲线(SROC曲线),检测miR-30e-3p的表达。将miRWalk预测的miR-30e-3p潜在靶标和DLBCL的上调差异基因(DEGs)的交集基因进行功能富集分析。通过6个mRNA基因芯片和RNA-seq数据集验证靶基因的mRNA水平及其与miR-30e-3p的关系。结果:miR-30e-3p在DLBCL组(108个样本)的表达明显低于非肿瘤组(35个样本)(SMD=-2.33)。低表达miR-30e-3p有显著的区分DLBCL和非肿瘤的能力(AUC=0.96)。103个miR-30e-3p潜在靶基因中CDC25A为核心基因,其在171例DLBCL的表达在mRNA水平明显上升(SMD=0.72,AUC=0.93),与miR-30e-3p表达呈明显负相关关系(r=-0.3204,P=0.0281)。结论:miR-30e-3p可能通过负向调控其潜在靶基因CDC25A参与DLBCL的发生发展。 展开更多
关键词 mir-30e-3p CDC25A 弥漫大B细胞淋巴瘤 靶基因 负调控 肿瘤发生
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MiR-30e-3p inhibits gastric cancer development by negatively regulating THO complex 2 and PI3K/AKT/mTOR signaling 被引量:2
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作者 Xiao-Jing Gu Ya-Jun Li +1 位作者 Fang Wang Ting Ye 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 SCIE 2022年第11期2170-2182,共13页
BACKGROUND Gastric cancer(GC)is a common type of digestive cancer with high morbidity and mortality rates worldwide.Considerable effort has been expended in understanding the mechanism of GC development and metastasis... BACKGROUND Gastric cancer(GC)is a common type of digestive cancer with high morbidity and mortality rates worldwide.Considerable effort has been expended in understanding the mechanism of GC development and metastasis.The current study therefore explores the involvement of microRNAs in the regulation of GC progression.AIM To explore the expression and function of miR-30e-3p in GC development.METHODS MiR-30e-3p was found to be downregulated in GC,with low levels thereof predicting poor outcomes among patients with GC.Functionally,we revealed that miR-30e-3p suppressed cell growth and metastatic behaviors of GC cells.Bioinformatics analysis predicted that THO complex 2(THOC2)was a direct target of miR-30e-3p,and the interaction between miR-30e-3p and THOC2 was further validated by a luciferase reporter assay.RESULTS Our findings revealed that knockdown of THOC2 inhibited the growth and metastatic behaviors of GC cells.After investigating signaling pathways involved in miR-30e-3p regulation,we found that the miR-30e-3p/THOC2 axis regulated the PI3K/AKT/mTOR pathway in GC.CONCLUSION Our findings suggest the novel functional axis miR-30e-3p/THOC2 is involved in GC development and progression.The miR-30e-3p/THOC2 axis could be utilized to develop new therapies against GC. 展开更多
关键词 Gastric cancer mir-30e-3p THO complex2 pI3K/AKT/mTOR signaling
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自然杀伤细胞来源外泌体的miR-30e-3p抑制人食管鳞状细胞癌细胞增殖和侵袭 被引量:1
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作者 孙明月 李洪霖 冯保荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期295-302,共8页
目的 研究自然杀伤(NK)细胞来源外泌体的miR-30e-3p对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 从健康供体的外周血中分离和扩增NK细胞,并分离NK细胞外泌体(EXO)进行鉴定。NK细胞外泌体与NEC细胞进行共培养,随机分为Exo1... 目的 研究自然杀伤(NK)细胞来源外泌体的miR-30e-3p对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 从健康供体的外周血中分离和扩增NK细胞,并分离NK细胞外泌体(EXO)进行鉴定。NK细胞外泌体与NEC细胞进行共培养,随机分为Exo1和Exo2组。采用透射电子显微镜观察外泌体形态及大小。Western blot法检测外泌体凋亡相关基因2相互作用蛋白X(ALIX)、抗肿瘤易感基因101(TSG101)、 CD81、钙联蛋白(calnexin)表达。将miR-30e-3p模拟物(miR-30e-3p mimic)、 miR-30e-3p抑制物(miR-30e-3p inhibitor)及阴性对照(miR-NC)转入NK细胞,并分离相应的外泌体与NEC细胞进行共培养。CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,Transwell^(TM)侵袭实验检测细胞侵袭能力。实时定量PCR检测NCE细胞和外泌体中miR-23b、 miR-422a、 miR-133b、 miR-124、 miR-30e-3p和miR-99a的表达。结果 NK细胞中CD56+CD3+细胞比例为(0.071±0.008)%,CD56+CD16+细胞比例为(90.6±10.6)%。从NK细胞分离的外泌体直径为30~150 nm,且表达ALIX、 TSG101、 CD81,不表达calnexin。NK细胞来源外泌体抑制NEC细胞增殖和侵袭、增加细胞凋亡,降低S期细胞比例并增加G1期细胞比例。过表达miR-30e-3p的NK细胞来源外泌体抑制NEC细胞增殖和侵袭,并阻滞细胞周期和促进细胞凋亡,敲低miR-30e-3p的NK细胞来源外泌体则相反。结论NK细胞来源外泌体miR-30e-3p阻断人ESCC细胞的细胞周期,抑制其增殖和侵袭并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 自然杀伤(NK)细胞 外泌体 mir-30e-3p
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LncRNA MITA1靶向miR-30b-3p对肝细胞癌细胞生物学活性的影响
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作者 金雯 李群 +3 位作者 王波 周健坤 张俊 曹立宇 《承德医学院学报》 2026年第1期1-6,共6页
目的探究Lnc RNA MITA1在肝细胞癌(HCC)发展中的作用机制。方法采用q RT-PCR检测HCC组织及细胞内MITA1 mRNA的表达;采用pcDNA3.1重组质粒载体过表达MITA1。SMMC7721细胞处理后分别标记为空白组、OE-MITA1-NC组、OE-MITA1组。平板克隆实... 目的探究Lnc RNA MITA1在肝细胞癌(HCC)发展中的作用机制。方法采用q RT-PCR检测HCC组织及细胞内MITA1 mRNA的表达;采用pcDNA3.1重组质粒载体过表达MITA1。SMMC7721细胞处理后分别标记为空白组、OE-MITA1-NC组、OE-MITA1组。平板克隆实验检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;免疫印迹法检测Vimentin、MMP-2、N-Cadherin蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证MITA1和miR-30b-3p的靶向关系。结果与癌周正常肝组织相比,HCC组织及细胞内MITA1 mRNA含量呈高表达,而mi R-30b-3p mRNA呈低表达(P<0.05);MITA1过表达下,OE-MITA1组MITA1 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与空白组和OE-MITA1-NC组相比,OE-MITA1组细胞增殖和侵袭数量增加且细胞活性增强(P<0.05);Vimentin、MMP-2、N-Cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,MITA1与mi R-30b-3p之间具有靶向关系,且MITA1与mi R-30b-3p表达呈负调控关系。结论LncRNA MITA1通过绑定mi R-30b-3p调控并促进HCC细胞的增殖、侵袭和细胞活力,可作为HCC诊疗潜在的靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA MITA1 mir-30b-3p 肝细胞癌 增殖 侵袭
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miR-30e-5p靶向调控GRP78对宫颈鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响
6
作者 蔡莉 李妍雨 +3 位作者 周佳韫 张晶波 王晴 张蓓 《徐州医科大学学报》 2025年第6期397-403,共7页
目的探讨miR-30e-5p靶向调控葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对宫颈鳞癌细胞SiHa的生物学行为的影响。方法收集正常宫颈组织40例、宫颈鳞癌组织60例,采用免疫组化法检测GRP78的表达情况,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对2组不同宫颈组织中miR-30... 目的探讨miR-30e-5p靶向调控葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对宫颈鳞癌细胞SiHa的生物学行为的影响。方法收集正常宫颈组织40例、宫颈鳞癌组织60例,采用免疫组化法检测GRP78的表达情况,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)对2组不同宫颈组织中miR-30e-5p、GRP78 mRNA表达进行检测,并分析其与临床病理特征之间的关系。运用生物信息学网站预测GRP78的上游miRNA,双萤光素酶报告基因实验验证两者靶向关系。过表达miR-30e-5p,通过RT-qPCR和蛋白质印迹实验(Western blot)检测SiHa细胞中GRP78 mRNA和蛋白的表达情况,并采用CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验检测细胞增殖、迁移和侵袭的能力。结果免疫组化结果表明,在宫颈鳞癌组织中GRP78蛋白阳性率显著高于正常宫颈组织(P<0.05)。RT-qPCR结果表明,与正常宫颈组织相比,宫颈鳞癌组织中miR-30e-5p的表达降低,而GRP78的表达升高(P<0.05)。宫颈鳞癌组织中miR-30e-5p、GRP78 mRNA的表达水平与分化程度、淋巴结转移显著相关,其中miR-30e-5p表达水平还与脉管浸润有关。双萤光素酶报告基因实验证实miR-30e-5p与GRP78之间存在靶向关系,SiHa细胞中的miR-30e-5p过表达后,GRP78 mRNA及蛋白表达水平随之下降。细胞功能实验表明,过表达miR-30e-5p后SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到不同程度抑制。结论miR-30e-5p在宫颈鳞癌组织中表达量较低,而GRP78呈现高表达状态,并且两者均与分化程度、淋巴结转移显著相关。miR-30e-5p与GRP78存在靶向关系,过表达miR-30e-5p后GRP78表达随之下调,从而抑制宫颈鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 宫颈鳞癌 mir-30e-5p 葡萄糖调节蛋白78 增殖 迁移 侵袭
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miR-30b-3p靶向Wnt信号轴对肝癌细胞生物行为的影响
7
作者 金雯 侯宇洁 +1 位作者 王波 曹立宇 《德州学院学报》 2025年第4期43-48,共6页
miR-30b-3p可参与调控多种恶性肿瘤的发生发展,但鲜有报道miR-30b-3p与肝细胞癌发生机制的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测肝癌组织及细胞内miR-30b-3pmRNA的表达水平,构建pcDNA3.1重组质粒载体实现miR-30b-3p的过表达。通... miR-30b-3p可参与调控多种恶性肿瘤的发生发展,但鲜有报道miR-30b-3p与肝细胞癌发生机制的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测肝癌组织及细胞内miR-30b-3pmRNA的表达水平,构建pcDNA3.1重组质粒载体实现miR-30b-3p的过表达。通过细胞水平实验分别检测细胞增殖、侵袭、凋亡和相关蛋白的表达水平;双荧光素酶报告实验验证miR-30b-3p和Wnt的靶向关系;裸鼠体内实验观察肝癌瘤体生长状况。结果显示,肝癌组织及细胞内miR-30b-3pmRNA的表达水平显著低于癌周正常组织和细胞;miR-30b-3p过表达后,肝癌细胞增殖活性降低、侵袭数减少,而细胞凋亡率显著升高;双荧光素酶报告显示miR-30b-3p与Wnt之间具有相互作用,并可抑制荷瘤裸鼠瘤体的生长。研究进一步揭示了miR-30b-3p靶向调控Wnt/β-catenin通路参与肝癌发展的机制。 展开更多
关键词 mir-30b-3p WNT 肝细胞癌 增殖 侵袭 凋亡
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circRNA-CHD2通过miR-30e-3p/MDM2/TP53轴促进胰腺癌侵袭转移 被引量:4
8
作者 高博文 罗宇明 +5 位作者 孔瑶 张丁文 堐益垚 杨家彬 贺兴 李文滨 《中华普通外科学文献(电子版)》 CAS 2022年第1期14-19,共6页
目的探究circRNA-CHD2促进胰腺癌侵袭转移的机制。方法采用Kaplan-Meier曲线分析circRNA-CHD2的表达与胰腺癌患者临床病理特征及预后的相关性。通过划痕实验和Transwell实验分析circRNA-CHD2对胰腺癌细胞系侵袭转移功能的影响。采用生... 目的探究circRNA-CHD2促进胰腺癌侵袭转移的机制。方法采用Kaplan-Meier曲线分析circRNA-CHD2的表达与胰腺癌患者临床病理特征及预后的相关性。通过划痕实验和Transwell实验分析circRNA-CHD2对胰腺癌细胞系侵袭转移功能的影响。采用生物信息学分析、RNA pull-down实验和qPCR实验证明circRNA-CHD2与miR-30e-3p的结合。结果与癌旁组织相比,circRNA-CHD2在胰腺癌组织中的表达显著升高(P<0.01)。circRNA-CHD2的高表达与胰腺癌患者的不良预后相关。体外功能实验表明,circRNA-CHD2的过表达可以促进胰腺癌的侵袭转移。进一步的机制实验提示,circRNA-CHD2能够竞争性结合miRNA-30e-3p,上调靶基因MDM2的表达,进一步抑制TP53的表达。结论 circRNA-CHD2介导miR-30e-3p/MDM2/TP53轴调控胰腺癌的侵袭转移,其有望成为胰腺癌的生物学标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 circRNA circRNA-CHD2 mir-30e-3p MDM2
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LncRNA SNHG15通过miR-30b-3p调控COX6B1轴促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制 被引量:2
9
作者 龚秀莹 侯顺福 +5 位作者 赵苗苗 王晓娜 张致涵 刘清华 尹崇高 李洪利 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1498-1505,共8页
目的探索LncRNA SNHG15是否可以与COX6B1竞争性结合miR-30b-3p调控肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法利用LncRNAs微阵列芯片数据集GSE196584和LncBase预测与miR-30b-3p互用的LncRNA。通过在线数据库查询其与患者预后的关系及其表达量,... 目的探索LncRNA SNHG15是否可以与COX6B1竞争性结合miR-30b-3p调控肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法利用LncRNAs微阵列芯片数据集GSE196584和LncBase预测与miR-30b-3p互用的LncRNA。通过在线数据库查询其与患者预后的关系及其表达量,筛选出长链非编码RNA(LncRNA)核仁RNA宿主基因15(SNHG15)作为接下来的研究对象。FISH检测LncRNA SNHG15的亚细胞定位。使用qRT-PCR检测LncRNA SNHG15在人正常肺上皮细胞和肺腺癌细胞系中的表达水平;将A549细胞分为4组并共转染:sh-NC+miR-NC组(空载质粒+miR-30b-3p对照质粒共转染)、sh-SNHG15+miR-NC组(SNHG15敲低质粒+miR-30b-3p对照质粒共转染)、sh-NC+miR-30b-3p-inhibitor组(空载质粒+miR-30b-3p抑制质粒共转染)、sh-SNHG15+miR-30b-3p-inhibitor组(SNHG15敲低质粒+miR-30b-3p抑制质粒共转染),通过EdU、伤口愈合及Transwell实验检测细胞增殖、迁移与侵袭能力。使用生物信息学数据库预测LncRNA SNHG15与COX6B1的调控关系,Western Blot实验验证敲低LncRNA SNHG15后,COX6B1的表达水平。进一步开展SNHG15与COX6B1的挽救实验,将A549细胞分为4组共转染:sh-NC+CON组(SNHG15对照质粒+COX6B1空载质粒共转染)、sh-SNHG15+oe-CON组(SNHG15敲低质粒+COX6B1空载质粒共转染)、sh-NC+oe-COX6B1组(SNHG15对照质粒+COX6B1过表达质粒共转染)、sh-SNHG15+oe-COX6B1组(SNHG15敲低质粒+COX6B1过表达质粒共转染),进行EdU实验、伤口愈合实验、Transwell实验检测各组A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果LncRNA SNHG15与miR-30b-3p存在靶向关系。LncRNA SNHG15高表达与肺腺癌患者不良预后有关且在肺腺癌组织中高表达。LncRNA SNHG15主要定位在细胞质。LncRNA SNHG15在A549、NCI-H1299细胞中的表达高于在BEAS-2B中的表达(P<0.05)。下调miR-30b-3p可以逆转敲低LncRNA SNHG15导致的A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的减弱(P<0.05)。LncRNA SNHG15和COX6B1存在调控关系且呈正相关(r=0.128,P=0.003)。Western blotting实验证实敲低LncRNA SNHG15可以使COX6B1的表达水平下降(P<0.05)。过表达COX6B1可以挽救下调LncRNA SNHG15导致的A549细胞迁移,侵袭和增殖能力的下降(P<0.05)。结论LncRNA SNHG15可能通过ceRNA机制与COX6B1竞争性结合miR-30b-3p,从而进一步影响肺腺癌的增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 肺腺癌 LncRNA SNHG15 mir-30b-3p COX6B1 迁移 侵袭
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miR-30a-5p靶向KDM3A缓解缺氧诱导H9c2细胞凋亡
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作者 罗梦圆 张辛颖 +2 位作者 张彬 邵明学 田乃亮 《中国分子心脏病学杂志》 2025年第1期6637-6645,共9页
目的探讨miR-30a-5p通过靶向KDM3A调节心肌细胞在低氧条件下的凋亡机制。方法构建急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)小鼠模型并模拟缺氧环境于小鼠心肌原代细胞中,采用qPCR技术定量分析miR-30a-5p的表达水平。同时,结合生... 目的探讨miR-30a-5p通过靶向KDM3A调节心肌细胞在低氧条件下的凋亡机制。方法构建急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)小鼠模型并模拟缺氧环境于小鼠心肌原代细胞中,采用qPCR技术定量分析miR-30a-5p的表达水平。同时,结合生物信息学分析预测miR-30a-5p与KDM3A 3′UTR的结合位点,并通过双荧光素酶报告实验验证二者的结合关系。在H9c2心肌细胞株中模拟低氧环境,建立缺氧诱导的细胞凋亡模型,采用qPCR分析miR-30a-5p的表达变化,并通过Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、c-PARP1)的表达水平。利用TUNEL染色法评估低氧诱导的细胞凋亡程度。低氧处理前,分别转染H9c2细胞miR-30a-5p模拟物/抑制剂和KDM3A siRNA,以评估其对心肌细胞凋亡的影响。结果在小鼠AMI模型、缺氧诱导的小鼠心肌原代细胞及H9c2心肌细胞中,miR-30a-5p的表达显著下降。双荧光素酶实验验证了miR-30a-5p可与KDM3A 3′UTR结合。进一步分析显示,在低氧条件下,KDM3A蛋白的表达水平显著升高。Bax/Bcl-2比值的增加以及c-PARP1蛋白的升高与细胞凋亡率的增加密切相关。过表达miR-30a-5p能够显著逆转低氧诱导的心肌细胞凋亡相关蛋白的变化,而抑制miR-30a-5p则加剧了这些效应。敲低KDM3A亦能减轻低氧诱导的心肌细胞凋亡。结论miR-30a-5p通过靶向KDM3A调控心肌细胞在低氧条件下的凋亡过程,为AMI的治疗提供了新的分子靶点。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 缺氧 mir-30a-5p KDM3A 细胞凋亡
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骨髓间充质干细胞来源外泌体miR-30e-5p改善高血糖诱发的肾小管上皮细胞的焦亡 被引量:8
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作者 吕佳 郝亚宁 +3 位作者 王晓培 路万虹 张亚莉 牛丹 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期859-865,共7页
目的探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-exos)miR-30e-5p对高葡萄糖(HG)诱导的体外培养的人肾近端小管细胞(HK-2)焦亡的影响,并探索治疗糖尿病肾病(DKD)的替代方法。方法BMSC-exos分离并内化到HG处理的HK-2细胞中,测定细胞生存能力和细... 目的探讨骨髓间充质干细胞外泌体(BMSC-exos)miR-30e-5p对高葡萄糖(HG)诱导的体外培养的人肾近端小管细胞(HK-2)焦亡的影响,并探索治疗糖尿病肾病(DKD)的替代方法。方法BMSC-exos分离并内化到HG处理的HK-2细胞中,测定细胞生存能力和细胞毒性。通过流式细胞仪方法评估细胞焦亡,检测miR-30e-5p、IL-1β和IL-18的表达水平,通过Western blotting蛋白质印迹分析测定焦亡相关的细胞因子蛋白。结果BMSC-exos降低了LDH、IL-1β和IL-18的分泌,改善焦亡情况,并抑制了HG诱导的HK-2细胞中的焦亡相关因子(IL-1β、胱天蛋白酶-1、GSDMD-N和NLRP3)的表达。miR-30e-5p敲除逆转了BMSC-exos对HK-2细胞焦亡的改善作用。结论BMSC-exos的miR-30e-5p抑制HG处理的HK-2细胞焦亡,这可能为治疗DKD提供一种新的策略。 展开更多
关键词 焦亡 骨髓间充质干细胞 外泌体 mir-30e-5p 糖尿病性肾病
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miR-30e-5p过表达促进结直肠癌细胞的增殖和迁移:基于下调PTEN激活CXCL12轴 被引量:4
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作者 魏可 石纪雯 +3 位作者 肖雨寒 王文锐 杨清玲 陈昌杰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1081-1092,共12页
目的探讨miR-30e-5p通过PTEN/CXCL12轴对结直肠癌生物学活性的影响及机制。方法实验设置空白对照、阴性对照、miR-30e-5p mimics组、miR-30e-5p inhibitor组及共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN(PTEN过表达)组或miR-30e-5p inhibitor+si-... 目的探讨miR-30e-5p通过PTEN/CXCL12轴对结直肠癌生物学活性的影响及机制。方法实验设置空白对照、阴性对照、miR-30e-5p mimics组、miR-30e-5p inhibitor组及共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN(PTEN过表达)组或miR-30e-5p inhibitor+si-PTEN(PTEN干扰)组。生物信息学分析miR-30e-5p在结直肠癌组织和正常组织中的表达差异;qRT-PCR检测miR-30e-5p在肠上皮细胞和结直肠癌细胞中的差异表达;生物信息学和双荧光素酶实验预测并验证miR-30e-5p与PTEN的靶向关系;平板克隆、CCK-8增殖、细胞周期、细胞凋亡、划痕愈合和Transwell实验检测癌细胞的生物学活性;Western blotting检测癌细胞PTEN、CXCL12表达情况;小鼠体内实验检测miR-30e-5p(miR-NC、miR-30e-5p inhibitor组)对结直肠癌发生发展的影响。结果生信分析结直肠癌组织miR-30e-5p较癌旁组织表达升高(P<0.01);在癌细胞中miR-30e-5p较肠上皮细胞表达升高(P<0.01);双荧光素酶实验证实miR-30e-5p与PTEN存在靶向关系(P<0.05);相对于Control组,miR-30e-5p mimics能增强癌细胞增殖、转移能力并抑制凋亡(P<0.05),共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN能够逆转miR-30e-5p mimics的作用(P<0.05);miR-30e-5p mimics能抑制PTEN表达,增强CXCL12表达(P<0.01);然而miR-30e-5p inhibitor与mimics效果相反,将细胞阻滞在G0/G1期,共转染miR-30e-5p inhibitor+si-PTEN能逆转miR-30e-5p inhibitor的作用(P<0.05);体内实验发现相对于miR-NC组,miR-30e-5p inhibitor可抑制肿瘤发生发展。结论miR-30e-5p过表达通过下调PTEN激活CXCL12轴,从而促进结直肠癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 结直肠癌 mir-30e-5p pTEN CXCL12
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miR-30e-5p调控口腔鳞癌细胞增殖和迁移的实验研究 被引量:1
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作者 朱雪琴 叶冬霞 +1 位作者 秦星 陈万涛 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2018年第3期135-141,共7页
目的:研究miR-30e-5p对口腔鳞癌细胞增殖和迁移能力的影响,探讨其在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法:实时荧光定量PCR检测miR-30e-5p在人口腔鳞癌组织、癌旁组织、正常口腔黏膜上皮细胞和HN6细胞系中的表达水平。应用miR-30e-5p mimics... 目的:研究miR-30e-5p对口腔鳞癌细胞增殖和迁移能力的影响,探讨其在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法:实时荧光定量PCR检测miR-30e-5p在人口腔鳞癌组织、癌旁组织、正常口腔黏膜上皮细胞和HN6细胞系中的表达水平。应用miR-30e-5p mimics、miR-30e-5p inhibitor、mimics NC、inhibitor NC分别转染HN6细胞,实时荧光定量PCR检测转染后miR-30e-5p的表达变化;采用细胞增殖实验、平板克隆形成实验、划痕实验分别检测miR-30e-5p对HN6细胞生长和迁移的影响。结果:相对于癌旁正常组织,miR-30e-5p在口腔鳞癌组织中的表达显著下调(P<0.05)。相对于正常口腔黏膜上皮细胞,miR-30e-5p在口腔鳞癌细胞中的表达显著下调(P<0.05)。转染miR-30e-5p mimics后,HN6细胞的增殖能力、克隆形成能力及迁移能力显著降低,而转染miR-30e-5p inhibitor后,HN6细胞的增殖能力、克隆形成能力及迁移能力则明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-30e-5p在口腔鳞癌组织中低表达,与口腔鳞癌细胞的生长和迁移密切相关,提示miR-30e-5p在口腔鳞癌的发生、发展过程中可能起抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 mir-30e-5p 口腔鳞癌 增殖 迁移
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miR-30e-5p通过靶向PIK3CD介导PI3K/AKT/mTOR信号通路对肝癌细胞侵袭和迁移的影响 被引量:4
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作者 郝云鹤 邹瑞 +1 位作者 赵晓彪 李铎 《中国现代普通外科进展》 CAS 2024年第1期19-24,共6页
目的:探讨mi R-30e-5p通过靶向磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3CD)介导磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制肝癌细胞的侵袭、迁移的机制。方法:将Hep G2通过转染相应质粒后分为对照组、miR-... 目的:探讨mi R-30e-5p通过靶向磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3CD)介导磷酸肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制肝癌细胞的侵袭、迁移的机制。方法:将Hep G2通过转染相应质粒后分为对照组、miR-30e-5p mimics组、PIK3CD敲低组、阴性对照组、miR-30e-5p mimics+PIK3CD过表达组,实时荧光定量PCR和免疫印迹检测细胞miR-30e-5p、PIK3CD与PI3K/AKT/mTOR信号通路表达;CCK-8法检测各组细胞增殖率;细胞划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测各组细胞迁移、侵袭情况;以免疫印迹实验检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9及E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。采用双荧光素酶报告实验检测miR-30e-5p对PIK3CD的靶向调节。结果:与对照组相比,mi R-30e-5p mimics组、PIK3CD敲低组增殖率、迁移率、侵袭数、PIK3CD蛋白与mRNA表达、N-cadherin、MMP2、MMP9、磷酸化PI3K、磷酸化AKT、磷酸化m TOR蛋白表达降低(P<0.05),E-cadherin表达升高(P<0.05)。过表达PIK3CD减弱了miR-30e-5p mimics对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用,并升高PI3K/AKT/mTOR通过相关蛋白表达。miR-30e-5p可靶向下调PIK3CD表达。结论:上调miR-30e-5p可通过降低PIK3CD表达而阻止PI3K/AKT/mTOR信号激活,从而抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 mir-30e-5p pIK3CD pI3K/AKT/MTOR 肝肿瘤 侵袭 迁移
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基于miRNA-30b-3p调控Wnt信号通路研究吴门肾炎口服液Ⅰ对阿霉素诱导足细胞损伤的保护机制
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作者 梁国强 金伟民 +4 位作者 宋永亮 陈伟 倪道磊 许田俊 蒋春波 《中国医院药学杂志》 北大核心 2025年第1期6-14,共9页
目的:讨论吴门肾炎口服液Ⅰ保护阿霉素诱导足细胞损伤的作用机制。方法:将大鼠肾足细胞分为空白组,阿霉素模型组,吴门肾炎口服液Ⅰ低、中、高剂量以及miRNA模拟物、抑制剂和转染等交互干预组。其中阿霉素模型组给予0.40μg·mL^(-1... 目的:讨论吴门肾炎口服液Ⅰ保护阿霉素诱导足细胞损伤的作用机制。方法:将大鼠肾足细胞分为空白组,阿霉素模型组,吴门肾炎口服液Ⅰ低、中、高剂量以及miRNA模拟物、抑制剂和转染等交互干预组。其中阿霉素模型组给予0.40μg·mL^(-1)阿霉素诱导足细胞损伤,吴门肾炎口服液Ⅰ干预组给予低、中、高剂量(0.1、0.5、1.0 mg·mL^(-1))中药进行药物干预。采用CCK-8、蛋白质免疫印迹、实时荧光定量PCR和细胞免疫荧光检测等研究方法检测细胞活力以及细胞凋亡、Wnt/β-catenin通路相关蛋白、mRNA和免疫荧光染色情况,观察吴门肾炎口服液Ⅰ对于miRNA-30b-3p介导的Wnt/β-catenin通路及凋亡相关蛋白表达的影响。结果:吴门肾炎口服液Ⅰ能减轻阿霉素诱导的足细胞损伤并抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活,表现为足细胞活力增加和Wnt/β-catenin通路中关键分子的表达改善;通过抑制剂LY2090314抑制GSK-3β通路,吴门肾炎口服液Ⅰ的足细胞保护作用受到干扰,并与下调Wnt1表达有关;吴门肾炎口服液Ⅰ能明显增加足细胞miR-30b-3p的表达,转染miR-30b-3p特异性模拟物或抑制物后能激活或抑制miR-30b-3p表达,并分别导致吴门肾炎口服液Ⅰ干预后的大鼠足细胞Wnt1表达明显增强或减弱。结论:吴门肾炎口服液Ⅰ通过上调miR-30b-3p表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路,改善阿霉素诱导的足细胞功能障碍。 展开更多
关键词 吴门肾炎口服液Ⅰ 阿霉素足细胞损伤 Wnt/β-catenin信号通路 mir-30b-3p
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miR-30e-5p在各类疾病中的表达及其对各类疾病影响的研究进展
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作者 金萌 李飞 《临床医学进展》 2022年第6期5875-5881,共7页
微小RNA(miRNAs)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,这些小分子RNA通过碱基配对与靶mRNA序列的3’非翻译区或编码区结合以调控基因的表达,对细胞增殖及凋亡、脂肪代谢等起着重要的调控作用。目前研究发现miR... 微小RNA(miRNAs)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,这些小分子RNA通过碱基配对与靶mRNA序列的3’非翻译区或编码区结合以调控基因的表达,对细胞增殖及凋亡、脂肪代谢等起着重要的调控作用。目前研究发现miR-30家族中含有5个高度保守且成熟的成员:miR-30a、miR-30b、miR-30c、miR-30d和miR-30e。也有研究表明,miR-30e-5p在肿瘤、心血管疾病及自身免疫性疾病等疾病中都发挥着一定作用,现对miR-30e-5p在不同疾病的中的表达及其通过不同途径对各类疾病产生影响的研究予以综述。 展开更多
关键词 mir-30e-5p 表达 疾病
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miR-30e-5p靶向BIM调控缺氧诱导细胞凋亡的应用研究
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作者 吴宁夏 李飞 《临床医学进展》 2024年第6期344-352,共9页
目的:研究miR-30e-5p与H2O2损伤后心肌细胞凋亡的关系,探讨miR-30e-5p靶向BIM基因调控H2O2损伤后心肌细胞凋亡的作用,为心肌梗死的诊断以及治疗提供新的靶点。方法:将40天CA16分为正常组(N)、缺氧组(H)、过表达对照组(NC+H)、miR-30e-5... 目的:研究miR-30e-5p与H2O2损伤后心肌细胞凋亡的关系,探讨miR-30e-5p靶向BIM基因调控H2O2损伤后心肌细胞凋亡的作用,为心肌梗死的诊断以及治疗提供新的靶点。方法:将40天CA16分为正常组(N)、缺氧组(H)、过表达对照组(NC+H)、miR-30e-5p过表达组(miR+H)。N组置于正常培养箱下培养;H组置于缺氧培养箱培养24 h;NC+H组与miR+H组分别为稳定感染装载有miR-NC和miR-30e-5p的重组慢病毒后缺氧处理24 h。应用RT-qPCR检测CA16中miR-30e-5p和BIM的mRNA表达水平,应用Caspase-3活性实验和流式细胞技术检测hiPSC-CMs的凋亡水平。利用生物信息学miRNA数据库预测miR-30e-5p的靶基因,并应用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果:1) 与N组比较,H组miR-30e-5p表达水平明显下调;与NC+H组比较,miR+H组miR-30e-5p表达水平则明显上调。2) 与N组比较,H组Caspase-3活性水平明显升高;与NC+H组比较,miR+H组Caspase-3活性水平下降。3) 与N组比较,H组CA16细胞凋亡比例明显上升;与NC+H组比较,miR+H组CA16凋亡比例则明显下降。4) 与N组比较,H组蛋白BIM表达水平上调;与NC+H组比较,miR+H组蛋白BIM表达水平下调。5) 通过miRNA数据库分析发现BIM是miR-30e-5p的潜在靶基因之一。结论:1) miR-30e-5p调控缺氧诱导CA16的凋亡。2) BIM是miR-30e-5p的靶基因之一。3) miR-30e-5p靶向BIM调控缺氧诱导CA16的凋亡。4) miR-30e-5p在急性心肌梗死的发生、发展过程中可能发挥抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 mir-30e-5p CA16 抑制缺氧 凋亡
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Beclin-1、ANGPTL4及miR-30e-5p在急性脑梗死中的表达及相关性 被引量:4
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作者 于贺花 赵方敏 《河南医学高等专科学校学报》 2022年第4期428-431,共4页
目的分析自噬效应蛋白(Beclin-1)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、miR-30e-5p在急性脑梗死中的表达及相关性。方法选取150例急性脑梗死患者作为观察组,另选取同期进行体检的150例健康人员作为对照组。根据进展情况将观察组患者分为进展性... 目的分析自噬效应蛋白(Beclin-1)、血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、miR-30e-5p在急性脑梗死中的表达及相关性。方法选取150例急性脑梗死患者作为观察组,另选取同期进行体检的150例健康人员作为对照组。根据进展情况将观察组患者分为进展性组(65例)、非进展性组(85例),按照高级中枢损伤严重程度评定量表(MESSS)将观察组患者分为轻度组(84例)、中度组(45例)及重度组(21例)。分析Beclin-1、ANGPTL4、miR-30e-5p的表达情况且分析三者的相关性。结果对照组Beclin-1、ANGPTL4水平低于观察组,miR-30e-5p表达高于观察组;非进展性组Beclin-1、ANGPTL4水平低于进展性组,miR-30e-5p表达高于进展性组;轻度组Beclin-1、ANGPTL4水平高于中度组、重度组,miR-30e-5p表达低于中度组、重度组,差异均有统计学意义(P<0.05)。采用Pearson相关性分析Beclin-1、ANGPTL4、miR-30e-5p三者在急性脑梗死中的相关性,结果发现,Beclin-1、ANGPTL4呈正相关(r=6.617,P=0.011);Beclin-1、miR-30e-5p呈负相关(r=-5.341,P=0.024);ANGPTL4、miR-30e-5p呈负相关(r=-13.960,P=0.001)。结论Beclin-1、ANGPTL4在急性脑梗死中呈异常上升趋势,miR-30e-5p呈异常下降趋势,且随着疾病的发展,Beclin-1、ANGPTL4上升程度越大,miR-30e-5p下降程度越大。 展开更多
关键词 急性脑梗死 自噬效应蛋白 血管生成素样蛋白4 mir-30e-5p
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miR-30a-3p靶向NOD1对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响 被引量:4
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作者 刘建花 雷大洲 +2 位作者 周凡 齐俊杰 李世勋 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期414-420,共7页
目的探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系,及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。方法将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组,经过缺氧复氧处理后,转染相应的miRNA处理细胞,RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1... 目的探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系,及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。方法将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组,经过缺氧复氧处理后,转染相应的miRNA处理细胞,RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1基因表达水平,荧光素酶报告检测miR-30a-3p和NOD1靶向关系,Western blot检测NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平,CCK8法检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测LDH、CK、MDA、T-SOD水平。结果miR-30a-3p表达水平随缺氧复氧处理时间增长而下降,NOD1基因表达水平随缺氧复氧处理时间增长而升高。在荧光素酶报告实验中,NOD1 WT+miR-30a-3p mimic荧光素酶活性显著低于NOD1 WT+NC组。与Ctrl组比较,H/R组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低,NOD1、p-RPI2、p38MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高;与H/R组比较,miR-30a-3p mimic组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平升高,NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率降低,miR-30a-3p inhibitor组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低,NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、clcaspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高。结论miR-30a-3p可靶向作用于NOD1,缓解心肌细胞缺氧复氧造成的损伤,其作用机制可能与调控NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 缺氧复氧损伤 心肌缺血再灌注 NOD1 mir-30a-3p
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木棉花提取物通过调控miR-30b-3p/PDCD5的表达对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及其机制研究 被引量:8
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作者 唐晓栋 赵庆 +1 位作者 葛黁黁 唐仲海 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第10期2425-2431,共7页
目的:研究木棉花提取物对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及潜在的作用机制。方法:用浓度分别为15、30、60 mg/L的木棉花提取物处理骨关节炎软骨细胞作为木棉花提取物组,以无木棉花提取物处理的细胞作为对照组;将miR-NC、miR-30b-3p、anti-m... 目的:研究木棉花提取物对骨关节炎软骨细胞损伤的影响及潜在的作用机制。方法:用浓度分别为15、30、60 mg/L的木棉花提取物处理骨关节炎软骨细胞作为木棉花提取物组,以无木棉花提取物处理的细胞作为对照组;将miR-NC、miR-30b-3p、anti-miR-NC、anti-miR-30b-3p、si-NC、si-PDCD5质粒转染至骨关节炎软骨细胞中,分别记为miR-NC组、miR-30b-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-30b-3p组、si-NC组、si-PDCD5组;将anti-miR-NC、anti-miR-30b-3p质粒转染至骨关节炎软骨细胞后再用60 mg/L的木棉花提取物处理48 h,记为木棉花提取物+anti-miR-NC组和木棉花提取物+anti-miR-30b-3p组;转染均采用脂质体法。qRT-PCR检测骨关节炎软骨细胞中miR-30b-3p、PDCD5 mRNA表达;Western blot检测Bcl-2、Bax、PDCD5蛋白表达;ELISA法检测上清液中IL-6、IL-1β含量;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测荧光活性。结果:与对照组比较,随着木棉花提取物浓度的升高,培养上清中IL-6、IL-1β含量及骨关节炎软骨细胞的凋亡率逐渐降低;miR-30b-3p、Bcl-2表达水平逐渐升高,PDCD5、Bax表达水平逐渐降低(P<0.05)。miR-30b-3p过表达和抑制PDCD5表达可显著降低培养上清中IL-6、IL-1β含量,降低骨关节炎软骨细胞的凋亡率(P<0.05)。miR-30b-3p靶向调控PDCD5的表达,抑制miR-30b-3p表达逆转了木棉花提取物对骨关节炎软骨细胞的凋亡抑制作用。结论:木棉花提取物可抑制骨关节炎软骨细胞IL-6、IL-1β的分泌及其凋亡,其机制可能与调控miR-30b-3p/PDCD5的表达有关。 展开更多
关键词 木棉花提取物 mir-30b-3p pDCD5 骨关节炎软骨细胞 凋亡
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