LncRNA MITA1靶向miR-30b-3p对肝细胞癌细胞生物学活性的影响

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作者 金雯 李群 +3 位作者 王波 周健坤 张俊 曹立宇 《承德医学院学报》 2026年第1期1-6,共6页

目的探究Lnc RNA MITA1在肝细胞癌(HCC)发展中的作用机制。方法采用q RT-PCR检测HCC组织及细胞内MITA1 mRNA的表达;采用pcDNA3.1重组质粒载体过表达MITA1。SMMC7721细胞处理后分别标记为空白组、OE-MITA1-NC组、OE-MITA1组。平板克隆实... 目的探究Lnc RNA MITA1在肝细胞癌(HCC)发展中的作用机制。方法采用q RT-PCR检测HCC组织及细胞内MITA1 mRNA的表达;采用pcDNA3.1重组质粒载体过表达MITA1。SMMC7721细胞处理后分别标记为空白组、OE-MITA1-NC组、OE-MITA1组。平板克隆实验检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;免疫印迹法检测Vimentin、MMP-2、N-Cadherin蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证MITA1和miR-30b-3p的靶向关系。结果与癌周正常肝组织相比,HCC组织及细胞内MITA1 mRNA含量呈高表达,而mi R-30b-3p mRNA呈低表达(P<0.05);MITA1过表达下,OE-MITA1组MITA1 mRNA表达水平升高(P<0.05)。与空白组和OE-MITA1-NC组相比,OE-MITA1组细胞增殖和侵袭数量增加且细胞活性增强(P<0.05);Vimentin、MMP-2、N-Cadherin蛋白表达升高(P<0.05)。双荧光素酶报告显示,MITA1与mi R-30b-3p之间具有靶向关系,且MITA1与mi R-30b-3p表达呈负调控关系。结论LncRNA MITA1通过绑定mi R-30b-3p调控并促进HCC细胞的增殖、侵袭和细胞活力,可作为HCC诊疗潜在的靶点。 展开更多

关键词 长链非编码RNA MITA1 mir-30b-3p 肝细胞癌 增殖 侵袭

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miR-30b-3p在卵巢型子宫内膜异位症中的表达及意义

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作者 刘晓旭 孙晓清 +3 位作者 吴小华 安莎莎 卢雪景 秦丽欣 《河北医科大学学报》 2026年第2期185-195,共11页

目的探讨miR-30b-3p在卵巢型子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中的表达,并阐述可能的作用机制。方法定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测2023年1月—2024年1... 目的探讨miR-30b-3p在卵巢型子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)组织中的表达,并阐述可能的作用机制。方法定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测2023年1月—2024年12月于河北省石家庄市妇幼保健院收集的60对在位子宫内膜(eutopic endometrium,EU,EMs患者宫腔内膜组织)和异位子宫内膜(ectopic endometrium,EC,同一EMs患者卵巢囊肿囊壁组织)中miR-30b-3p的表达情况。构建miR-30b-3p的mimics和inhibitor,并分别转染Ishikawa细胞,应用细胞克隆形成实验、细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK8)实验、划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验测定miR-30b-3p对Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭等行为的影响。同时应用蛋白质印迹和细胞免疫荧光实验测定上皮―间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)蛋白标志物的表达。结果与EU组织相比,miR-30b-3p在EC组织中的表达显著下调(P<0.001),并且在轻度EMs中的表达高于重度EMs(P=0.006)。上调miR-30b-3p的表达后,Ishikawa细胞的克隆形成率、增殖、迁移、侵袭能力显著下降(均P<0.05);同时,E-cadherin表达水平上升,Ncadherin和Vimentin表达水平下降(均P<0.05),且E-cadherin的荧光强度显著增强,而N-cadherin和Vimentin的荧光强度显著减弱。下调miR-30b-3p的表达后,得到相反的结果。结论miR-30b-3p在EMs组织中差异表达,可能在该病的发生发展中发挥重要作用。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 mir-30b-3p 上皮-间质转化

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miR-30b-3p靶向Wnt信号轴对肝癌细胞生物行为的影响

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作者 金雯 侯宇洁 +1 位作者 王波 曹立宇 《德州学院学报》 2025年第4期43-48,共6页

miR-30b-3p可参与调控多种恶性肿瘤的发生发展,但鲜有报道miR-30b-3p与肝细胞癌发生机制的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测肝癌组织及细胞内miR-30b-3pmRNA的表达水平,构建pcDNA3.1重组质粒载体实现miR-30b-3p的过表达。通... miR-30b-3p可参与调控多种恶性肿瘤的发生发展,但鲜有报道miR-30b-3p与肝细胞癌发生机制的关系。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测肝癌组织及细胞内miR-30b-3pmRNA的表达水平,构建pcDNA3.1重组质粒载体实现miR-30b-3p的过表达。通过细胞水平实验分别检测细胞增殖、侵袭、凋亡和相关蛋白的表达水平;双荧光素酶报告实验验证miR-30b-3p和Wnt的靶向关系;裸鼠体内实验观察肝癌瘤体生长状况。结果显示,肝癌组织及细胞内miR-30b-3pmRNA的表达水平显著低于癌周正常组织和细胞;miR-30b-3p过表达后,肝癌细胞增殖活性降低、侵袭数减少,而细胞凋亡率显著升高;双荧光素酶报告显示miR-30b-3p与Wnt之间具有相互作用,并可抑制荷瘤裸鼠瘤体的生长。研究进一步揭示了miR-30b-3p靶向调控Wnt/β-catenin通路参与肝癌发展的机制。 展开更多

关键词 mir-30b-3p WNT 肝细胞癌 增殖 侵袭 凋亡

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miR-222、miR-30b与PHPT患者骨代谢指标及术后复发的关系

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作者 陈晶 白宁 +3 位作者 白勇 叶斯波力·塔斯恒 周高晋 夏依木拉提·迪力木拉提 《中南医学科学杂志》 2025年第6期987-990,1124,共5页

目的分析血清微小RNA(miR)-222、miR-30b与原发性甲状旁腺功能亢进(PHPT)患者骨代谢指标及术后复发的关系。方法选择130例PHPT患者作为PHPT组,选择同期入院健康体检者80例作为对照组。比较两组甲状旁腺功能、骨代谢指标及血清miR-222、m... 目的分析血清微小RNA(miR)-222、miR-30b与原发性甲状旁腺功能亢进(PHPT)患者骨代谢指标及术后复发的关系。方法选择130例PHPT患者作为PHPT组,选择同期入院健康体检者80例作为对照组。比较两组甲状旁腺功能、骨代谢指标及血清miR-222、miR-30b水平。所有患者术后随访1.5年观察复发情况,比较未复发者和复发者的临床指标差异。采用Logistic回归分析PHPT患者术后复发的影响因素;采用ROC曲线分析miR-222、miR-30b对PHPT患者术后复发的预测价值。结果PHPT组血清血磷、25-羟维生素D3[25(OH)D3]、miR-30b水平低于对照组(P<0.05),血清甲状旁腺激素(PTH)、血钙、miR-222及骨代谢指标水平高于对照组(P<0.05)。血清miR-222与血钙、PTH、骨代谢指标呈正相关,与血磷、25(OH)D3呈负相关(P<0.05);而miR-30b与上述指标相关性相反(P<0.05)。PHPT患者术后复发57例(43.85%)。复发患者血清血磷、25(OH)D3、miR-30b低于未复发者(P<0.05),血清PTH、血钙、miR-222及骨代谢指标高于未复发者(P<0.05)。高水平PTH、血钙、miR-222与低水平血磷、25(OH)D3、miR-30b为PHPT患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。miR-222对PHPT患者术后复发预测的AUC为0.906,miR-30b为0.925。结论PHPT患者的血清miR-222、miR-30b表达水平与骨代谢指标具有相关性,对PHPT术后复发具有较高预测效能。 展开更多

关键词 原发性甲状旁腺功能亢进 mir-222 mir-30b 骨代谢 术后复发

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LncRNA SNHG15通过miR-30b-3p调控COX6B1轴促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制 被引量：2

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作者 龚秀莹 侯顺福 +5 位作者 赵苗苗 王晓娜 张致涵 刘清华 尹崇高 李洪利 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1498-1505,共8页

目的探索LncRNA SNHG15是否可以与COX6B1竞争性结合miR-30b-3p调控肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法利用LncRNAs微阵列芯片数据集GSE196584和LncBase预测与miR-30b-3p互用的LncRNA。通过在线数据库查询其与患者预后的关系及其表达量,... 目的探索LncRNA SNHG15是否可以与COX6B1竞争性结合miR-30b-3p调控肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法利用LncRNAs微阵列芯片数据集GSE196584和LncBase预测与miR-30b-3p互用的LncRNA。通过在线数据库查询其与患者预后的关系及其表达量,筛选出长链非编码RNA(LncRNA)核仁RNA宿主基因15(SNHG15)作为接下来的研究对象。FISH检测LncRNA SNHG15的亚细胞定位。使用qRT-PCR检测LncRNA SNHG15在人正常肺上皮细胞和肺腺癌细胞系中的表达水平;将A549细胞分为4组并共转染:sh-NC+miR-NC组(空载质粒+miR-30b-3p对照质粒共转染)、sh-SNHG15+miR-NC组(SNHG15敲低质粒+miR-30b-3p对照质粒共转染)、sh-NC+miR-30b-3p-inhibitor组(空载质粒+miR-30b-3p抑制质粒共转染)、sh-SNHG15+miR-30b-3p-inhibitor组(SNHG15敲低质粒+miR-30b-3p抑制质粒共转染),通过EdU、伤口愈合及Transwell实验检测细胞增殖、迁移与侵袭能力。使用生物信息学数据库预测LncRNA SNHG15与COX6B1的调控关系,Western Blot实验验证敲低LncRNA SNHG15后,COX6B1的表达水平。进一步开展SNHG15与COX6B1的挽救实验,将A549细胞分为4组共转染:sh-NC+CON组(SNHG15对照质粒+COX6B1空载质粒共转染)、sh-SNHG15+oe-CON组(SNHG15敲低质粒+COX6B1空载质粒共转染)、sh-NC+oe-COX6B1组(SNHG15对照质粒+COX6B1过表达质粒共转染)、sh-SNHG15+oe-COX6B1组(SNHG15敲低质粒+COX6B1过表达质粒共转染),进行EdU实验、伤口愈合实验、Transwell实验检测各组A549细胞增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果LncRNA SNHG15与miR-30b-3p存在靶向关系。LncRNA SNHG15高表达与肺腺癌患者不良预后有关且在肺腺癌组织中高表达。LncRNA SNHG15主要定位在细胞质。LncRNA SNHG15在A549、NCI-H1299细胞中的表达高于在BEAS-2B中的表达(P<0.05)。下调miR-30b-3p可以逆转敲低LncRNA SNHG15导致的A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的减弱(P<0.05)。LncRNA SNHG15和COX6B1存在调控关系且呈正相关(r=0.128,P=0.003)。Western blotting实验证实敲低LncRNA SNHG15可以使COX6B1的表达水平下降(P<0.05)。过表达COX6B1可以挽救下调LncRNA SNHG15导致的A549细胞迁移,侵袭和增殖能力的下降(P<0.05)。结论LncRNA SNHG15可能通过ceRNA机制与COX6B1竞争性结合miR-30b-3p,从而进一步影响肺腺癌的增殖、迁移、侵袭。 展开更多

关键词 肺腺癌 LncRNA SNHG15 mir-30b-3p COX6b1 迁移 侵袭

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rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎发病过程中对白细胞介素-10和Toll样受体4表达的调控作用 被引量：8

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作者 孙园园 郭大东 +4 位作者 陈美清 李少玉 刘滨 唐凯 毕宏生 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第4期330-334,共5页

目的探讨rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎中对白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的调控作用。方法构建IL-10、TLR4基因的3’端非编码区域(3’UTR)荧光素酶质粒载体以及结合位点突变质粒载体,将... 目的探讨rno-miR-30b-5p在葡萄膜炎中对白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的调控作用。方法构建IL-10、TLR4基因的3’端非编码区域(3’UTR)荧光素酶质粒载体以及结合位点突变质粒载体,将rnomiR-30b-5p模拟物(mimic)与构建好的报告基因载体共转染293T细胞,通过报告基因相对荧光值的表达改变检测rno-miR-30b-5p对IL-10、TLR4表达的调控作用;制备实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)模型,通过注射视网膜光感受器间维生素A类结合蛋白乳糜液,在造模后12 d分离EAU大鼠的脾脏和淋巴结,实时荧光定量PCR检测rno-miR-30b-5p和IL-10、TLR4基因的表达情况;ELISA检测IL-10和TLR4蛋白的表达情况。结果双荧光素酶报告基因表达结果表明,经rno-miR-30b-5p mimic干预后IL-10、TLR4野生型的报告荧光有明显的下调作用,对其预测靶位点进行突变后,突变型载体中的报告荧光也存在明显的下调作用,与阴性对照相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。实时荧光定量PCR检测结果发现rno-miR-30b-5p在EAU大鼠脾脏和淋巴结中的表达均较对照组明显降低(均为P<0.01),而IL-10 mRNA、TLR4 mRNA表达明显升高(均为P<0.01);ELISA检测发现IL-10、TLR4蛋白表达升高,与对照组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论rno-miR-30b-5p对带有IL-10、TLR4基因片段3’UTR基因表达的调控作用可能不是通过预测到的位点起作用而是通过其他的调控结合位点发挥作用;rno-miR-30b-5p在EAU大鼠脾脏和淋巴结的下调表达导致IL-10和TLR4的表达水平升高,进而调控葡萄膜炎的发展。本研究为进一步探索microRNA在葡萄膜炎发生发展进程中的调控作用、治疗葡萄膜炎奠定了基础。 展开更多

关键词 rno—mir-30b-5p 荧光素酶质粒载体 白细胞介素-10 TOLL样受体4 葡萄膜炎

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血清miR-30b、miR-199a在新生儿缺氧缺血性脑病患儿中的表达及意义 被引量：2

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作者 杨欣 鲁利群 +2 位作者 贺静 黄莉 汪燕 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第24期2963-2968,共6页

目的探讨血清miR-30b、miR-199a在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿中的表达及意义。方法选择2018年1月至2020年6月该院收治的HIE患儿90例,其中轻度组29例、中度组36例、重度组25例,选取同期在该院出生的足月健康新生儿30例作为对照组。... 目的探讨血清miR-30b、miR-199a在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿中的表达及意义。方法选择2018年1月至2020年6月该院收治的HIE患儿90例,其中轻度组29例、中度组36例、重度组25例,选取同期在该院出生的足月健康新生儿30例作为对照组。比较各组血清miR-30b、miR-199a表达水平,以及神经功能和神经损伤指标水平。随访1年,根据预后分为预后良好组和预后不良组,分析影响HIE患儿预后的因素。结果随HIE病情的加重,患儿的血清miR-30b、miR-199a表达水平越低(P<0.05);预后不良组的血清miR-30b、miR-199a表达水平明显低于预后良好组(P<0.05)。miR-30b≥0.85、miR-199a≥1.25是HIE患儿不良预后的保护因素(P<0.05)。结论HIE患儿血清miR-30b、miR-199a表达异常降低,其表达水平与神经损伤程度和患儿预后相关,血清miR-30b≥0.85、miR-199a≥1.25是HIE患儿预后不良的保护因素。 展开更多

关键词 新生儿缺氧缺血性脑病 mir-30b mir-199a 神经损伤 预后 危险因素

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miR-30b/Snail调控糖尿病肾病肾小管上皮细胞EMT 被引量：7

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作者 王彦哲 王筱霞 汪年松 《中国中西医结合肾病杂志》 2017年第4期288-291,I0001,I0002,共6页

目的:探讨miR-30b/Snail调控高糖诱导人源肾小管上皮细胞(HK2)-间充质转化(EMT)的可能机制,为糖尿病肾病(DN)间质纤维化的防治提供新的实验依据及思路。方法:通过生物信息学预测调控Snail的候选miRNAs;在db/db小鼠肾组织中验证所有候选m... 目的:探讨miR-30b/Snail调控高糖诱导人源肾小管上皮细胞(HK2)-间充质转化(EMT)的可能机制,为糖尿病肾病(DN)间质纤维化的防治提供新的实验依据及思路。方法:通过生物信息学预测调控Snail的候选miRNAs;在db/db小鼠肾组织中验证所有候选miRNAs的表达并分别与Snail做pearson相关性分析,筛选出与Snail负相关最显著的miRNA;以高糖诱导的HK2细胞为载体,转染该miRNA mimics 72 h后,采用real-time PCR、western blot方法,观察该miRNA、Snail以及EMT相关蛋白的表达改变。结果:调控Snail的候选miRNAs共6个,分别是miR-30b-5p、miR-25-3p、miR-199a-5p、miR-128-3p、miR-22-3p、miR-27-3p,其中miR-30b与Snail存在明显负相关,r2=0.775 49;高糖诱导HK2细胞miR-30b表达下调,肾小管上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达减少;过表达miR-30b-5p可抑制HK2细胞Snail表达,同时上调E-cadherin表达,而Vimentin、α-SMA表达下调。结论:miR-30b/Snail参与调控高糖引起的肾小管上皮细胞EMT。 展开更多

关键词 近端肾小管上皮细胞 上皮细胞-间充质转化(EMT) mir-30b SNAIL 生物信息学

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miR-30b靶向Beclin1参与慢性肾脏病血管钙化 被引量：2

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作者 马晓迎 生玉平 +4 位作者 王娜 张浩然 徐海平 孙福云 杨星梦 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期1900-1904,共5页

目的 探究miR-30b在慢性肾脏病(CKD)大鼠血管钙化(VC)中的作用及miR-30b与自噬基因Beclin1的靶向关系。方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组(CKD)、miR-30b组(CKD+miR-30b模拟物)和miR-30b阴性对照(NC)组(CKD+miR-30b NC)。使用全... 目的 探究miR-30b在慢性肾脏病(CKD)大鼠血管钙化(VC)中的作用及miR-30b与自噬基因Beclin1的靶向关系。方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组(CKD)、miR-30b组(CKD+miR-30b模拟物)和miR-30b阴性对照(NC)组(CKD+miR-30b NC)。使用全自动生化分析仪检测血清中血尿素氮(BUN)、血钙(Ca)、血磷(P)、血肌酐(Scr)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织和肾主动脉组织的病理学变化;茜素红染色观察主动脉钙化结节情况;使用试剂盒检测血管壁钙含量及碱性磷酸酶(ALP)水平;反转录荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测主动脉miR-30b水平;Western印迹检测主动脉中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达水平;透射电镜观察血管平滑肌细胞(VSMC)中自噬小体的变化;双荧光素酶测定miR-30b与Beclin1的靶向关系。结果 与对照组相比,模型组肾小球萎缩,间质增宽,肾小管扩张严重,炎性细胞浸润严重,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著升高(P<0.05),自噬小体数量、miR-30b相对表达水平及Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组和miR-30b NC组相比,miR-30b组肾组织损伤明显减轻,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著降低(P<0.05),细胞的自噬小体数量及Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 miR-30b可通过靶向Beclin1对CKD大鼠的血管钙化起到保护作用。 展开更多

关键词 mir-30b 慢性肾脏病 血管钙化 自噬基因bECLIN1

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miR-30a和miR-30b靶向GW182的生物学功能研究 被引量：3

10

作者 苏雪婷 夏伟 +7 位作者 陈颖 李少华 丁红梅 李慧 黄皑雪 赵强 李洁 邵宁生 《生物技术通讯》 CAS 2013年第5期604-609,共6页

目的:通过证明miR-30a、miR-30b靶向GW182,探索HeLa细胞中miR-30a、miR-30b及GW182的生物学功能。方法:生物信息学预测分析表明GW182的3'UTR区存在4个保守的miR-30a、miR-30b靶位点,将含有靶位点的序列片段构建到萤光素酶报告载体中... 目的:通过证明miR-30a、miR-30b靶向GW182,探索HeLa细胞中miR-30a、miR-30b及GW182的生物学功能。方法:生物信息学预测分析表明GW182的3'UTR区存在4个保守的miR-30a、miR-30b靶位点,将含有靶位点的序列片段构建到萤光素酶报告载体中,检测miR-30a、miR-30b与靶位点的结合情况;用阳离子脂质体转染GW182siRNA和miR-30a、miR-30b mimics,检测GW182下游功能的变化。结果:miR-30a、miR-30b能够靶向GW182;qPCR及Western印迹证明miR-30a、miR-30b可以在mRNA与蛋白水平上降低GW182的表达,同时影响GW182所参与的miRNA/siRNA对靶基因的抑制作用。结论:GW182是miR-30a、miR-30b的靶基因,揭示了miR-30a、miR-30b通过靶向GW182影响miRNA/siRNA作用途径的新功能。 展开更多

关键词 mir-30a mir-30b GW182 靶点

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rno-miR-30b-5p调控Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达在实验性自身免疫性葡萄膜炎中的作用 被引量：2

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作者 刘滨 孙园园 +4 位作者 殷学伟 唐凯 王慧 毕宏生 郭大东 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第4期301-305,共5页

目的探讨rno-miR-30b-5p对Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达的调控作用及其在实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)中的表达变化。方法 双荧光素酶检测mo-miR-30b-5p对Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达的调控... 目的探讨rno-miR-30b-5p对Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达的调控作用及其在实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)中的表达变化。方法 双荧光素酶检测mo-miR-30b-5p对Atg5、Atg12和Becn1自噬基因表达的调控作用。Lewis大鼠随机分为正常对照组和EAU组,每组各6只,EAU组诱导EAU模型,两组大鼠每天用Genesis-A眼底相机观察眼底情况。免疫后12 d,取眼球观察睫状体、视网膜的病理学表现;分离大鼠的脾脏和淋巴结,实时荧光定量PCR(Q-PCR)检测rno-miR-30b-5p、Atg5、Atg12和Becn1 mRNA的表达情况;ELISA方法检测Atg5、Atg12和Becn1蛋白的表达水平。结果双荧光素酶检测结果证实Atg5、Atg12和Becn1为rno-miR-30b-5p调控的靶基因。免疫后12 d,EAU组大鼠眼底血管严重肿胀,病理学检测可见睫状体、视网膜内大量炎性细胞浸润。Q-PCR检测结果示,与正常对照组相比,免疫后12 d EAU组大鼠脾脏和淋巴结中rno-miR-30b-5p mRNA水平分别为0.46±0.01和0.29±0.17,均呈下调表达(均为P<0.01);Atg5、Atg12和Becn1 mRNA水平均呈上调表达,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA检测结果示,EAU组大鼠脾脏和淋巴结中Atg5、Atg12和Becn1蛋白表达水平均明显高于正常对照组大鼠(均为P<0.05)。结论 rno-miR-30b-5p可调控Atg5、Atg12和Becn1的表达。在EAU大鼠脾脏和淋巴结中,rno-miR-30b-5p的下调表达使Atg5、Atg12和Becn1基因和蛋白的表达水平均明显升高,从而影响葡萄膜炎的发展进程。 展开更多

关键词 rno-mir-30b-5p Atg5 Atg12 becn1 葡萄膜炎

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胃癌组织miR-30b和HOXA1的表达及与临床病理特征的关系 被引量：6

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作者 林玲 李政文 +1 位作者 韩峰 牟大礼 《河北医药》 CAS 2019年第13期2007-2011,共5页

目的探讨胃癌组织miR-30b和HOXA1表达及其与临床病理特征的关系。方法选择胃癌患者142例,实时荧光逆转录法及免疫组化法测定miR-30b及HOXA1在胃癌组织(胃癌组)及正常胃组织(癌旁组)中的表达水平,分析其与临床病理参数和预后的关系。结... 目的探讨胃癌组织miR-30b和HOXA1表达及其与临床病理特征的关系。方法选择胃癌患者142例,实时荧光逆转录法及免疫组化法测定miR-30b及HOXA1在胃癌组织(胃癌组)及正常胃组织(癌旁组)中的表达水平,分析其与临床病理参数和预后的关系。结果胃癌组MiR-30bmRNA表达水平低于癌旁组,HOXA1mRNA表达水平高于癌旁组(P<0.01);胃癌组MiR-30b蛋白表达评分低于癌旁组,HOXA1蛋白表达评分高于癌旁组(P<0.01);胃癌组MiR-30b蛋白表达阳性率低于癌旁组、HOXA1蛋白表达阳性率高于癌旁组(P<0.01);MiR-30b、HOXA1蛋白表达与年龄相关性不明显(P>0.05);与TMN分期、病理学分级、复发、浸润深度、淋巴血管间隙浸润、肿瘤最大径、淋巴结转移相关性明显,且TMN分期越高、病理学分期越高、有复发、浸润深度越深、有淋巴血管间隙浸润、肿瘤最大径≥5cm、有淋巴结转移,MiR-30b蛋白阳性表达率越低、HOXA1蛋白阳性表达率越高(P<0.01);MiR-30b阳性组3年生存率及生存期均明显高于MiR-30b阴性组,HOXA1阴性组3年生存率及生存期均明显高于HOXA1阳性组(P<0.01)。结论胃癌组织MiR-30b表达降低,HOXA1表达增加;MiR-30b在胃癌的发生发展过程中起抑制作用,HOXA1起促进作用;MiR-30b高表达、HOXA1低表达的胃癌患者能获得较好的预后。 展开更多

关键词 胃癌 mir-30b HOXA1

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血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量对帕金森病的诊断效能 被引量：15

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作者 韩凯 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第11期72-74,共3页

目的评价血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量在帕金森病中的诊断效能。方法采用RTPCR法检测90例帕金森病患者(观察组)及24例健康人(对照组)外周血清中miR-103a、miR-30b、miR-29a。采用受试者工作曲线法观察血清miR-103a、miR-30... 目的评价血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量在帕金森病中的诊断效能。方法采用RTPCR法检测90例帕金森病患者(观察组)及24例健康人(对照组)外周血清中miR-103a、miR-30b、miR-29a。采用受试者工作曲线法观察血清miR-103a、miR-30b、miR-29a用于诊断帕金森病的效能。结果观察组外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量分别为1.12±0.10、1.57±0.37、1.23±0.09,对照组分别为0.43±0.03、0.97±0.07、0.51±0.04,观察组外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量均高于对照组,P均<0.05。外周血清miR-103a诊断帕金森病的AUC为0.816,选择0.715为诊断阈值时约登指数最大,此时外周血清miR-103a诊断帕金森病的灵敏度为71.3%,特异度为83.9%。外周血清miR-30b诊断帕金森病的AUC为0.789,选择1.120为诊断阈值时约登指数最大,此时外周血清miR-30b诊断帕金森病的灵敏度为70.5%,特异度为84.6%。外周血清miR-29a诊断帕金森病的AUC为0.756,选择1.001为诊断阈值时约登指数最大,此时外周血清miR-29a诊断帕金森病的灵敏度为72.1%,特异度为80.8%。结论帕金森病患者外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量升高。外周血清miR-103a、miR-30b、miR-29a相对表达量在帕金森疾病中的诊断效能好。 展开更多

关键词 帕金森病 微小RNA mir-103a mir-30b mir-29a

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miR-30b在子宫内膜异位症中的表达及功能研究 被引量：1

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作者 黄敏 徐超逸 +3 位作者 陈海燕 朱旦华 梁宗文 段萍 《中国现代医生》 2022年第4期35-39,43,F0003,共7页

目的检测miR-30b在子宫内膜异位症中的表达水平,并探究miR-30b对子宫内膜异位症的治疗作用。方法2018年7月至2020年7月在温州医科大学附属第二医院手术获取的27例子宫内膜异位症患者病理组织为子宫内膜异位症组,15例子宫肌瘤患者子宫内... 目的检测miR-30b在子宫内膜异位症中的表达水平,并探究miR-30b对子宫内膜异位症的治疗作用。方法2018年7月至2020年7月在温州医科大学附属第二医院手术获取的27例子宫内膜异位症患者病理组织为子宫内膜异位症组,15例子宫肌瘤患者子宫内膜组织为正常子宫内膜组。实时定量PCR(qRT-PCR)检测组织中miR-30b的表达量。培养人原代子宫内膜间质细胞(HESCs),5-乙炔基-2′-脱氧尿苷掺入(EdU)法来检测miR-30b对细胞增殖能力的影响。根据starBase 2.0软件预测与miR-30b相互作用的长链非编码RNA(lncRNA),使用qRT-PCR初步验证该lncRNA在异位内膜中的表达量及与miR-30b的相互关系。进一步建造子宫内膜异位症SD大鼠模型,在活体实验水平,使用miR-30b的模拟物来验证miR-30b对子宫内膜异位症异位囊肿的治疗作用。结果与正常子宫内膜(EN)相比,miR-30b在子宫内膜异位症(EC)中的表达显著下降。miR-30b的外源性过表达抑制了HESCs的增殖能力,同时,下调miR-30b的表达量可促进HESCs的增殖能力。StarBase 2.0软件预测lncRNA OIP5-AS1与miR-30b有多个结合位点,与正常内膜比较,lncRNA OIP5-AS1在异位内膜中表达上调,且与miR-30b的表达量呈负相关。此外,在子宫内膜异位症的大鼠模型中,miR-30b模拟物显著抑制子宫内膜异位症异位囊肿的生长。结论miR-30b在异位子宫内膜中低表达且抑制HESCs的增殖能力,可能成为子宫内膜异位症潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 mir-30b lncRNA OIP5-AS1 增殖 SD大鼠

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miR-30b在高磷诱导的血管平滑肌细胞凋亡中的作用

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作者 刘兰 张东雪 +1 位作者 张胜雷 白亚玲 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第7期58-65,共8页

目的 观察微小RNA30b(microRNA 30b, miR-30b)在高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)凋亡中的作用及机制。方法 体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为正常组和高磷组(给予10 mmol/Lβ-甘油磷酸盐刺激)。采用实时... 目的 观察微小RNA30b(microRNA 30b, miR-30b)在高磷诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)凋亡中的作用及机制。方法 体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分为正常组和高磷组(给予10 mmol/Lβ-甘油磷酸盐刺激)。采用实时荧光定量PCR检测各组VSMCs miR-30b表达、Western blot法测定促凋亡基因BAX、抑凋亡基因Bcl-2的表达情况,采用MTT法检测各组细胞的增殖情况、采用流式细胞法检测各组细胞的凋亡情况。为进一步验证miR-30b对VSMCs凋亡的影响,给与转染miR-30b的抑制物inhibitor-30b和类似物mimic-30b,观察VSMCs增殖和凋亡情况以及BAX、Bcl-2表达情况。结果 (1)高磷对VSMCs凋亡的影响:流式结果显示,高磷组VSMCs凋亡细胞显著增多(P<0.05);MTT结果显示,高磷组细胞增殖减少(P<0.05);高磷组BAX表达升高、Bcl-2表达降低(P<0.05);高磷组miR-30b的表达显著下降(P<0.05)。(2)miR-30b对VSMCs凋亡的影响:转染inhibitor-30b后VSMCs凋亡细胞显著增多(P<0.05);转染inhibitor-30b后MTT显示细胞增殖减少(P<0.05);转染inhibitor-30b后,BAX表达升高、Bcl-2表达降低(P<0.05);转染mimic-30b后VSMCs凋亡细胞显著减少(P<0.05);转染mimic-30b后,BAX表达降低、Bcl-2表达升高(P<0.05)。结论 高磷可以诱导细胞凋亡,其可能机制之一是高磷通过抑制miRNA-30b表达,进而促进凋亡基因BAX表达,降低抑凋亡基因Bcl-2表达,导致VSMCs发生凋亡。 展开更多

关键词 血管平滑肌细胞 高磷 凋亡 mir-30b bAX

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心肌细胞特异性miR-30b转基因小鼠的建立及其功能研究 被引量：1

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作者 范元元 龙波 +3 位作者 刘昉 周露玙 王昆 李培峰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第6期575-582,共8页

MicroRNAs(miRNAs)基因芯片结果显示,携带有MYH7基因突变的家族性肥厚性心肌病病人的心脏组织以及小鼠心力衰竭模型中miR-30b表达下调,提示miR-30b可能在心脏疾病发生发展过程中发挥了重要功能.为研究miR-30b在心脏组织中的功能,本实验... MicroRNAs(miRNAs)基因芯片结果显示,携带有MYH7基因突变的家族性肥厚性心肌病病人的心脏组织以及小鼠心力衰竭模型中miR-30b表达下调,提示miR-30b可能在心脏疾病发生发展过程中发挥了重要功能.为研究miR-30b在心脏组织中的功能,本实验室首先建立了在心肌细胞特异性启动子琢肌球蛋白重链(琢-MHC,5.5 kb)控制下过表达miR-30b的转基因小鼠.通过qRT-PCR方法,证实miR-30b表达水平在转基因小鼠心脏组织中明显升高(P<0.05).miR-30b转基因小鼠心重/体重比和左心室/体重比无明显变化,心肌组织结构未见异常.目前,关于miR-30b在心肌梗死中的功能及相关机制未见报道.本文通过冠状动脉左前降支结扎法建立心肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)模型,以假手术组作为对照组.生化检测结果及TTC-Evans blue双染结果显示,I/R损伤后,与野生型小鼠相比,转基因小鼠LDH、CK-MB和cTn玉浓度显著减小(P<0.05),并且心肌梗死面积明显减少(P<0.05).超声心动图检测结果显示,转基因小鼠心功能显著改善.由此得出结论:miR-30b对缺血再灌注损伤的心肌具有保护作用,该研究成果可能为预防和治疗心肌梗死提供新策略. 展开更多

关键词 mir-30b 心脏 转基因 小鼠 心肌梗死

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rno-miR-30b-5p对葡萄膜炎大鼠Notch1和Dll4基因表达的调控作用 被引量：3

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作者 殷学伟 刘滨 +3 位作者 魏慧霞 唐凯 毕宏生 郭大东 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第1期12-16,共5页

目的探讨rno-miR-30b-5p对Notch1和Dll4基因表达的调控作用及其在实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)中的表达变化。方法应用双荧光素酶检测rno-miR-30b-5p对Notch1和Dll4基因表达的调控作用。6～8周龄健康... 目的探讨rno-miR-30b-5p对Notch1和Dll4基因表达的调控作用及其在实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)中的表达变化。方法应用双荧光素酶检测rno-miR-30b-5p对Notch1和Dll4基因表达的调控作用。6～8周龄健康Lewis大鼠12只,随机分为对照组和EAU模型组,EAU模型组大鼠建立EAU模型。于免疫后12 d分离大鼠的脾脏、淋巴结和眼组织,Q-PCR检测rno-miR-30b-5p、Notch1和Dll4基因的表达水平,ELISA检测Notch1和Dll4蛋白的表达变化;流式细胞仪检测两组大鼠脾脏和淋巴结中Th17和Treg细胞的表达水平。结果双荧光素酶检测结果表明,Notch1和Dll4为rno-miR-30b-5p调控的靶基因。Q-PCR分析结果显示,相比于正常对照组(1. 00),免疫后12 d,rno-miR-30b-5p基因在EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中的相对表达水平分别为0. 41±0. 12、0. 37±0. 09和0. 25±0. 07,均呈显著下调表达,而Notch1和Dll4基因呈显著上调表达,且差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。ELISA检测结果显示,免疫后12 d,EAU模型组大鼠脾脏、淋巴结和眼组织中Notch1和Dll4蛋白的表达水平均明显高于对照组(均为P <0. 05)。流式细胞仪检测结果显示,免疫后12 d,EAU模型组大鼠脾脏和淋巴结中Th17细胞因子的表达水平明显升高,而Treg细胞因子的表达水平明显降低。结论 rno-miR-30b-5p可负调控Notch1和Dll4基因的表达。在EAU模型大鼠的脾脏、淋巴结和眼组织中,rno-miR-30b-5p的下调表达可使Notch1和Dll4基因的表达水平显著升高,并使Th17/Treg比例发生紊乱,从而影响葡萄膜炎的发生发展。 展开更多

关键词 rno-mir-30b-5p NOTCH1 DLL4 实验性自身免疫性葡萄膜炎

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miR-30b-3p通过靶向调控COX6B1抑制肺腺癌细胞的增殖和侵袭 被引量：5

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作者 陈琳 陈新璐 +4 位作者 刘璐 赵燕乔 左伟 尹崇高 李洪利 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期567-574,共8页

背景与目的肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是当前最常见的肺癌亚型,微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)是一类非编码小RNA,在细胞活动中发挥核心作用。mi R-30b-3p在许多类型的癌症中均起到了关键作用,但关于其在肺腺癌中如何发挥作用的研... 背景与目的肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)是当前最常见的肺癌亚型,微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)是一类非编码小RNA,在细胞活动中发挥核心作用。mi R-30b-3p在许多类型的癌症中均起到了关键作用,但关于其在肺腺癌中如何发挥作用的研究仍然很少。本研究通过探索mi R-30b-3p在肺腺癌增殖和侵袭中的作用和机制,以期为临床上抑制肺腺癌的增殖和侵袭拓展新的方向。方法利用NCBI生物数据库查找肺腺癌中差异表达明显的mi RNA,并查询其差异表达及生存曲线;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测mi R-30b-3p在各肺腺癌细胞系中的表达;5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,Ed U)细胞增殖实验和Transwell实验检测各组A549细胞增殖和侵袭能力的变化;使用在线预测数据网站确定mi R-30b-3p的靶蛋白;Western blot验证COX6B1在不同组肺腺癌细胞中的表达情况;双荧光素酶实验证实mi R-30b-3p与COX6B1是否存在结合位点。结果mi R-30b-3p在肺腺癌组织和细胞中表达下调(P<0.05),低表达水平的mi R-30b-3p与肺腺癌患者的不良预后有关(P=0.005,8);过表达mi R-30b-3p能够抑制肺腺癌细胞的增殖与侵袭能力(P<0.05);双荧光素酶实验证明mi R-30b-3p和COX6B1存在结合位点(P<0.05);Western blot实验表明在肺腺癌细胞A549中,过表达mi R-30b-3p能够下调COX6B1的表达(P<0.05);Ed U细胞增殖实验和Transwell侵袭实验表明,mi R-30b-3p的过表达能够逆转上调COX6B1对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的促进作用(P<0.05)。结论mi R-30b-3p在肺腺癌中起到了抑癌基因的作用,并能够通过调控COX6B1的表达来抑制肺腺癌的增殖和侵袭。 展开更多

关键词 肺肿瘤 mir-30b-3p 细胞色素C氧化酶6b1亚基 增殖 侵袭

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miR-30b在三叉神经痛模型大鼠中的表达及作用 被引量：3

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作者 胡婷婷 何帆 +2 位作者 刘明政 徐文华 王元银 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第7期1078-1083,共6页

目的探讨miR-30b在三叉神经痛(TN)模型大鼠三叉神经节(TG)中发挥的作用。方法采用眶下神经缩窄术(ION-CCI)构建大鼠TN模型。用Von Frey毛刷检测大鼠的机械痛阈。通过qRT-PCR及Western blot检测术侧TG内miR-30b和激活转录因子3(ATF3)表... 目的探讨miR-30b在三叉神经痛(TN)模型大鼠三叉神经节(TG)中发挥的作用。方法采用眶下神经缩窄术(ION-CCI)构建大鼠TN模型。用Von Frey毛刷检测大鼠的机械痛阈。通过qRT-PCR及Western blot检测术侧TG内miR-30b和激活转录因子3(ATF3)表达变化。经眶下孔分别向ION-CCI大鼠的TG内定位注射miR-30b的类似物(agomir)和agomir的阴性对照(agomir NC),检测大鼠的机械痛阈及干预后ATF3表达的变化。结果ION-CCI组大鼠在术后第2~28天出现机械痛阈的降低(P<0.05)。ION-CCI组较假手术组(Sham组)术后TG中miR-30b表达降低,ATF3表达升高(P<0.05)。ION-CCI组过表达miR-30b后,大鼠机械痛阈升高,TG中ATF3表达降低(P<0.05)。结论miR-30b参与调控TN的发生、发展,miR-30b可能是TN潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 三叉神经痛 眶下神经缩窄术 mir-30b ATF3

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MiR-30b通过靶向CCL22调控人NK/T细胞淋巴瘤细胞株SNK-6和YTS顺铂耐受的研究 被引量：1

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作者 王健红 刘芳 +5 位作者 段晓辉 郝彩霞 刘祥祥 鲁英娟 王哲 梁蓉 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1838-1844,共7页

目的:探讨miR-30b对人NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受的调控及其作用机制。方法:培养正常NK细胞以及SNK-6和YTS细胞,应用real-time PCR法和Western blot分别检测miR-30b和巨噬细胞来源的趋化因子(CCL22)mRNA和蛋白的表... 目的:探讨miR-30b对人NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受的调控及其作用机制。方法:培养正常NK细胞以及SNK-6和YTS细胞,应用real-time PCR法和Western blot分别检测miR-30b和巨噬细胞来源的趋化因子(CCL22)mRNA和蛋白的表达。以miR-30b过表达和miR-30b抑制剂分别转染SNK-6和YTS细胞,MTT法检测SNK-6和YTS细胞对顺铂耐受性的影响;caspase-3试剂盒检测caspase-3活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平。双荧光素酶报告基因检测miR-30b与CCL22的靶向关系。Western blot法检测CCL22表达,评估CCL22对细胞耐受性和caspase-3活性的影响。结果:与正常NK细胞相比,SNK-6和YTS细胞中miR-30b表达均显著降低(P<0.01),CCL22 mRNA表达均显著升高(P<0.01)。miR-30b过表达可降低细胞活性,顺铂耐受性显著降低(P<0.05),细胞凋亡比例显著增高(P<0.05),Caspase-3活性增加(P<0.05)。miR-30b抑制剂作用与miR-30b过表达作用相反。荧光素酶活性分析显示,miR-30b过表达显著降低荧光素酶报告基因的荧光强度,而结合位点突变后荧光素酶活性不变,表明CCL22是miR-30b的直接靶分子。此外,miR-30b过表达显著降低CCL22表达(P<0.05)。而CCL22过表达可增加SNK-6细胞活性,降低Caspase-3活性,逆转miR-30b的作用,增加对顺铂的耐受性。结论:miR-30b可通过靶向CCL22抑制人NKTCL SNK-6和YTS细胞的顺铂耐受性。 展开更多

关键词 mir-30b 顺铂耐受 巨噬细胞来源的趋化因子 NK/T细胞淋巴瘤

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