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miR-30a-5p通过调控CTHRC1抑制甲状腺未分化癌进展
1
作者 陈晶晶 俞建华 +2 位作者 张凤霞 孙成林 康永生 《沈阳医学院学报》 2026年第1期30-37,共8页
目的:探讨三螺旋重复胶原蛋白1(collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1)在甲状腺癌中的表达与患者预后和免疫细胞浸润的关系,并进一步探讨CTHRC1对甲状腺癌未分化癌(anaplastic thyroid cancer,ATC)细胞体外增殖、迁移、侵... 目的:探讨三螺旋重复胶原蛋白1(collagen triple helix repeat containing-1,CTHRC1)在甲状腺癌中的表达与患者预后和免疫细胞浸润的关系,并进一步探讨CTHRC1对甲状腺癌未分化癌(anaplastic thyroid cancer,ATC)细胞体外增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,及miR-30a-5p在其中发挥的作用。方法:基于癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)和基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)分析CTHRC1在甲状腺癌组织中的表达及其与患者生存、临床病理特征和免疫细胞浸润的关系。通过RT-qPCR和Western blot检测CTHRC1 mRNA和蛋白表达。通过CCK8、Transwell和流式细胞术检测ATC细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。通过ENCORI数据库筛选CTHRC1的上游调控因子miR-30a-5p,并分析二者在甲状腺癌中的表达相关性。通过RT-qPCR检测过表达miR-30a-5p对ATC细胞CTHRC1mRNA表达的影响,双荧光素酶报告基因实验验证二者结合。结果:TCGA数据库分析显示CTHRC1 mRNA在甲状腺癌组织中表达上调,且与患者不良预后有关。免疫浸润分析提示,CTHRC1的表达在甲状腺癌中与多种免疫细胞群有关,包括T细胞、B细胞、细胞毒性细胞、NK细胞和树突状细胞等。GEO数据库分析显示CTHRC1在ATC组织中表达上调,RT-qPCR提示CTHRC1 mRNA在多株ATC细胞中表达上调。敲减CTHRC1可以抑制ATC细胞增殖、迁移和侵袭,促进凋亡。CTHRC1与miR-30a-5p结合,过表达miR-30a-5p可以降低ATC细胞中CTHRC1 mRNA表达,miR-30a-5p和CTHRC1的表达在甲状腺癌中呈显著负相关。抑制miR-30a-5p逆转了敲减CTHRC1对ATC细胞体外增殖、迁移和侵袭的抑制,以及凋亡的促进。结论:CTHRC1可能是ATC重要的预后生物标志物,miR-30a-5p通过调控CTHRC1表达抑制ATC细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 甲状腺未分化癌 CTHRC1 mir-30a-5p 细胞迁移和侵袭 细胞凋亡
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gga-miR-30a-5p的表达规律及其对鸡脂肪沉积的调控
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作者 黄华云 刘星 +6 位作者 王钱保 李瑞瑞 杨苗苗 李春苗 吴兆林 孔令琳 赵振华 《中国农业科学》 北大核心 2025年第15期3134-3144,共11页
【目的】miR-30a-5p为miR-30家族成员,其在鸡脂肪沉积中的作用尚未见报道,通过对gga-miR-30a-5p在鸡腹部脂肪及肌内脂肪沉积中的作用研究,为解析鸡腹部脂肪和肌内脂肪生成的机制研究奠定基础。【方法】以优质黄羽肉鸡(矮小型)S3系和隐... 【目的】miR-30a-5p为miR-30家族成员,其在鸡脂肪沉积中的作用尚未见报道,通过对gga-miR-30a-5p在鸡腹部脂肪及肌内脂肪沉积中的作用研究,为解析鸡腹部脂肪和肌内脂肪生成的机制研究奠定基础。【方法】以优质黄羽肉鸡(矮小型)S3系和隐性白羽鸡(RR)为试验对象,利用荧光定量PCR检测gga-miR-30a-5p在腹部脂肪、肝脏和腿肌组织0周(0W)、2、4、8、14和16W及腹部脂肪细胞和肌内脂肪细胞增殖期、分化期的表达变化;腹部脂肪细胞及肌内脂肪细胞中分别转染gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor,荧光定量PCR检测ga-miR-30a-5p的表达变化;油红O染色,异丙醇萃取脂滴,检测转染gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor后腹部脂肪和肌内脂肪细胞脂滴沉积变化;利用生物信息学分析,预测gga-miR-30a-5p的作用靶基因。【结果】gga-miR-30a-5p在不同组织(腹部脂肪、肝脏和腿肌组织)中的表达存在显著的品种差异性(P<0.05)。在腹部脂肪组织中,0周龄时gga-miR-30a-5p在隐性白羽鸡中的表达显著低于S3系鸡(P<0.05)。S3系和隐性白羽鸡0周龄时gga-miR-30a-5p表达最高,显著高于其他周龄(P<0.05),其他周龄间的表达差异不显著(P>0.05);在肝脏组织中,16周龄时gga-miR-30a-5p在RR鸡中表达显著低于S3系鸡(P<0.05)。在S3系鸡中,16周龄肝脏组织中的gga-miR-30a-5p表达水平显著高于其他周龄(P<0.05),在RR鸡中,16周龄肝脏组织中的gga-miR-30a-5p表达水平显著高于0周龄和8周龄(P<0.05);在腿肌组织中,16周龄时gga-miR-30a-5p在RR鸡中的表达显著低于S3系鸡(P<0.05)。gga-miR-30a-5p在S3系鸡14周龄时表达最低,显著低于2、8和16W(P<0.05),RR鸡腿肌组织各个周龄间的表达差异不显著(P>0.05)。在腹部脂肪细胞中,gga-miR-30a-5p在增殖期的表达显著低于分化期4 d和6 d的表达(P<0.05);肌内脂肪细胞中,增殖期与分化期1 d的表达差异不显著(P>0.05),分化期4 d和6 d的表达水平显著高于增殖期(P<0.05),并且随着分化时间的延长,其表达水平逐渐升高;gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor转染腹部脂肪细胞24 h后,gga-miR-30a-5p的表达显著升高和降低,表明gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor已成功转染至腹部脂肪细胞;转染gga-miR-30a-5p mimics 3d后,腹部脂肪细胞脂滴沉积能力显著升高;转染gga-miR-30a-5p inhibitor,腹部脂肪细胞脂滴沉积能力则显著降低(P<0.05);gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor转染肌内脂肪细胞24 h后,gga-miR-30a-5p的表达显著升高和降低,表明gga-miR-30a-5p mimics和inhibitor已成功转染至肌内脂肪细胞;转染gga-miR-30a-5p mimics 3 d后,肌内脂肪细胞脂滴沉积能力显著升高;转染gga-miR-30a-5p inhibitor后,脂滴沉积能力则显著降低(P<0.05)。靶基因GO、Pathway及蛋白互作分析表明,UBE2I、UBE3C、CUL2、SOSC3和RUNX1可能是gga-miR-30a-5p调控脂肪沉积的预测靶基因。【结论】gga-miR-30a-5p在不同组织中的表达存在显著的品种差异性;gga-miR-30a-5p具有促进腹部脂肪和肌内脂肪沉积的作用,UBE2I、UBE3C、CUL2、SOSC3和RUNX1是重要的候选靶基因。 展开更多
关键词 鸡 gga-mir-30a-5p 腹部脂肪 肌内脂肪
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LncRNA DLEU2调节miR-30a-5p/SOX4信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响
3
作者 齐丽宁 王琪 +4 位作者 朱继红 耿艳红 葛新苗 魏旭静 刘彩辉 《中国细胞生物学学报》 2025年第1期28-37,共10页
该研究旨在探讨LncRNA DLEU2调节miR-30a-5p/SOX4信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。对卵巢癌细胞(SK-OV-3、OVCAR-8、A2780、OV90)进行表型筛选,选择SK-OV-3并将其分为control组、si-NC组、si-DLEU2组、mimic NC组、miR-30a-5... 该研究旨在探讨LncRNA DLEU2调节miR-30a-5p/SOX4信号通路对卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响。对卵巢癌细胞(SK-OV-3、OVCAR-8、A2780、OV90)进行表型筛选,选择SK-OV-3并将其分为control组、si-NC组、si-DLEU2组、mimic NC组、miR-30a-5p mimic组、si-DLEU2+inhibitorNC组、si-DLEU2+miR-30a-5pinhibitor组。qRT-PCR检测LncRNADLEU2、miR-30a-5p、SOX4mRNA表达水平;CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Transwell检测细胞侵袭情况;Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况;Westernblot法检测SOX4蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA DLEU2与miR-30a-5p、miR-30a-5p与SOX4的相互作用。结果显示,SK-OV-3与人正常卵巢细胞相比,miR-30a-5p表达水平降低,LncRNA DLEU2、SOX4 mRNA表达水平升高(P<0.05);与control组以及si-NC组比较,si-DLEU2组LncRNA DLEU2表达水平、SOX4表达水平及细胞增殖、迁移和侵袭能力降低,miR-30a-5p表达水平和细胞凋亡率升高(P<0.05)。转染miR-30a-5p mimic对SK-OV-3细胞的影响与转染si-DLEU2相同;与si-DLEU2+inhibitor NC组比较,si-DLEU2+miR-30a-5p inhibitor组细胞SOX4表达水平升高,增殖、迁移和侵袭能力提高,miR-30a-5p水平、细胞凋亡率降低(P<0.05);双荧光素酶活性检测表明,LncRNA DLEU2与miR-30a-5p之间、miR-30a-5p与SOX4之间存在靶向关系。总结得出,干扰LncRNA DLEU2可能通过上调miR-30a-5p表达,抑制SOX4表达,抑制卵巢癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 LncRNA DLEU2 mir-30a-5p SOX4 卵巢癌细胞 恶性生物学行为
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代谢相关脂肪性肝病中hsa-miR-30a-5p调控SLC7A11促进铁死亡
4
作者 柯月 梁灿灿 +1 位作者 纪文静 姚萍 《中国肝脏病杂志(电子版)》 2025年第2期42-48,共7页
目的探讨代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)中微小RNA(microRNA,miRNA)对铁死亡的调控。方法在GSE135251数据集中进行差异表达分析及基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)。在GSE11492... 目的探讨代谢相关脂肪性肝病(metabolic associated fatty liver disease,MAFLD)中微小RNA(microRNA,miRNA)对铁死亡的调控。方法在GSE135251数据集中进行差异表达分析及基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA)。在GSE114923数据集中进行差异分析,并识别靶向调控铁死亡相关基因的miRNA。以2022年3月1日至2023年4月30日于新疆医科大学第一附属医院经腹部超声确诊为MAFLD的10例患者作为MAFLD组,以同期性别和年龄匹配的10例健康志愿者作为健康对照组,采集外周血样本。通过反转录定量聚合酶链式反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot检测miRNA及铁死亡相关蛋白[溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HMOX1)]的表达。通过酶联免疫吸附试验检测谷胱甘肽(glutathione,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和炎症因子[白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)]水平。结果GSE135251和GSE114923数据集分析表明,与健康对照组相比,MAFLD患者中细胞坏死(t=3.229,P=0.022)和铁死亡(t=2.008,P=0.006)通路显著激活,差异分析结果表明MAFLD和对照组间有8687个有差异表达的基因,其中有31个为铁死亡相关基因。在31个差异表达的miRNA中鉴定了7个靶向调控铁死亡的miRNA,hsa-miR-192-5p(4.628±1.234比3.171±0.456;t=2.217,P=0.068)、hsa-miR-122-5p(13.532±0.946比10.536±1.444;t=3.472,P=0.013)、hsa-miR-30a-5p(6.081±0.770比4.106±0.269;t=4.841,P=0.003)、hsa-miR-100-5p(5.888±0.933比3.888±0.721;t=3.395,P=0.015)在MAFLD患者中表达上调,hsa-miR-10b-5p(5.077±0.876比6.439±1.076;t=1.963,P=0.097)、hsa-miR-223-5(0.626±0.723比2.790±1.912;t=2.111,P=0.079)、hsa-miR-215-5p(0.595±0.771比2.738±0.885,t=3.652,P=0.011)表达下调,其中hsa-miR-30a-5p上调水平最显著。RT-qPCR结果表明,与对照组比较,MAFLD患者中hsa-miR-30a-5p表达水平显著升高(1.591±0.229比1.012±0.031;t=9.676,P<0.001),SLC7A11 mRNA(0.598±0.108比0.997±0.034;t=13.64,P<0.001)、GPX4 mRNA(0.724±0.064比1.003±0.029,t=15.34;P<0.001)和HMOX1 mRNA(0.688±0.078比0.993±0.034;t=13.92,P<0.001)表达水平显著降低。Western blot结果显示,与对照组相比,SLC7A11蛋白(0.712±0.074比1.000±0.053;t=10.01,P<0.001)、GPX4蛋白(0.810±0.034比1.000±0.019;t=15.25,P<0.001)和HMOX1蛋白(0.673±0.026比1.000±0.029;t=26.75,P<0.001)在MAFLD患者中表达显著下调。与健康对照组相比,MAFLD患者GSH[(163.684±15.857)U/g比(197.728±11.009)U/g;t=6.109,P<0.001]水平显著降低,MDA[(2.494±0.253)μmol/g比(1.0612±.205)μmol/g;t=7.602,P=0.002]、IL-6[(55.219±0.743)ng/L比(46.456±1.831)ng/L;t=14.48,P<0.001]和TNF-α[(22.883±2.893)μg/L比(13.885±0.169)μg/L;t=10.78,P<0.001]水平显著升高。结论hsa-miR-30a-5p可能通过靶向SLC7A11促进铁死亡,在MAFLD中发挥促炎和促氧化作用。 展开更多
关键词 代谢相关脂肪性肝病 hsa-mir-30a-5p 铁死亡 炎症
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miR-30a-5p靶向KDM3A缓解缺氧诱导H9c2细胞凋亡
5
作者 罗梦圆 张辛颖 +2 位作者 张彬 邵明学 田乃亮 《中国分子心脏病学杂志》 2025年第1期6637-6645,共9页
目的探讨miR-30a-5p通过靶向KDM3A调节心肌细胞在低氧条件下的凋亡机制。方法构建急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)小鼠模型并模拟缺氧环境于小鼠心肌原代细胞中,采用qPCR技术定量分析miR-30a-5p的表达水平。同时,结合生... 目的探讨miR-30a-5p通过靶向KDM3A调节心肌细胞在低氧条件下的凋亡机制。方法构建急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)小鼠模型并模拟缺氧环境于小鼠心肌原代细胞中,采用qPCR技术定量分析miR-30a-5p的表达水平。同时,结合生物信息学分析预测miR-30a-5p与KDM3A 3′UTR的结合位点,并通过双荧光素酶报告实验验证二者的结合关系。在H9c2心肌细胞株中模拟低氧环境,建立缺氧诱导的细胞凋亡模型,采用qPCR分析miR-30a-5p的表达变化,并通过Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2、c-PARP1)的表达水平。利用TUNEL染色法评估低氧诱导的细胞凋亡程度。低氧处理前,分别转染H9c2细胞miR-30a-5p模拟物/抑制剂和KDM3A siRNA,以评估其对心肌细胞凋亡的影响。结果在小鼠AMI模型、缺氧诱导的小鼠心肌原代细胞及H9c2心肌细胞中,miR-30a-5p的表达显著下降。双荧光素酶实验验证了miR-30a-5p可与KDM3A 3′UTR结合。进一步分析显示,在低氧条件下,KDM3A蛋白的表达水平显著升高。Bax/Bcl-2比值的增加以及c-PARP1蛋白的升高与细胞凋亡率的增加密切相关。过表达miR-30a-5p能够显著逆转低氧诱导的心肌细胞凋亡相关蛋白的变化,而抑制miR-30a-5p则加剧了这些效应。敲低KDM3A亦能减轻低氧诱导的心肌细胞凋亡。结论miR-30a-5p通过靶向KDM3A调控心肌细胞在低氧条件下的凋亡过程,为AMI的治疗提供了新的分子靶点。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 缺氧 mir-30a-5p KDM3A 细胞凋亡
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慢性牙周炎患者血清miR-181a-5p、miR-30a-5p水平及其与疾病严重程度的相关性
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作者 刘文艳 任秀秀 +3 位作者 郭雪娇 李雅珍 张艳艳 张帅 《微循环学杂志》 2025年第4期56-61,68,共7页
目的:分析慢性牙周炎(CP)患者血清微小核糖核酸-181a-5p(miR-181a-5p、miR-30a-5p)水平及其与疾病严重程度的相关性。方法:选取2023年2月-2024年2月本院收治的112例CP患者(CP组),根据疾病严重程度标准将其分为轻度组(38例)、中度组(42例... 目的:分析慢性牙周炎(CP)患者血清微小核糖核酸-181a-5p(miR-181a-5p、miR-30a-5p)水平及其与疾病严重程度的相关性。方法:选取2023年2月-2024年2月本院收治的112例CP患者(CP组),根据疾病严重程度标准将其分为轻度组(38例)、中度组(42例)和重度组(32例)。选取同期在本院就诊且牙周组织健康的志愿者112例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测研究对象血清中miR-181a-5p、miR-30a-5p水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-6(IL-6)水平。收集CP患者探诊深度(PD)、龈沟出血指数(SBI)、附着丧失(AL)、菌斑指数(PLI)等临床指标。运用Pearson相关性分析CP患者血清miR-181a-5p、miR-30a-5p水平与PD、SBI、AL、PLI、IL-17A、IL-6水平的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-181a-5p、miR-30a-5p单独及联合检测对重度CP患者的诊断价值。结果:与对照组比较,CP组患者血清中miR-181a-5p水平显著降低,miR-30a-5p水平显著升高(P<0.05)。且CP各亚组中,miR-181a-5p水平呈轻度组>中度组>重度组,miR-30a-5p、PD、SBI、AL、PLI、IL-17A、IL-6水平呈轻度组<中度组<重度组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,CP患者血清miR-181a-5p水平与PD(r=-0.554)、SBI(r=-0.468)、AL(r=-0.625)、PLI(r=-0.547)、IL-17A(r=-0.588)、IL-6(r=-0.631)水平均呈负相关(P<0.01),miR-30a-5p水平与PD(r=0.636)、SBI(r=0.588)、AL(r=0.628)、PLI(r=0.591)、IL-17A(r=0.604)、IL-6(r=0.497)水平均呈正相关(P<0.01)。ROC曲线分析显示,与单独检测相比,血清miR-181a-5p和miR-30a-5p联合检测对CP重度患者诊断的曲线下面积(AUC)最高。结论:CP患者血清中miR-181a-5p水平降低,miR-30a-5p水平升高,且其水平与疾病严重程度及炎性因子水平有关。联合检测miR-181a-5p和miR-30a-5p对CP重度患者具有较高的诊断价值,可为临床病情评估提供参考。 展开更多
关键词 慢性牙周炎 mir-181a-5p mir-30a-5p 严重程度 诊断价值
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LncRNA SNHG14靶向miR-30a-5p对高糖诱导的足细胞损伤的影响
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作者 孔翠文 路延双 +1 位作者 孙丽萍 于芬芬 《天津医药》 2025年第9期903-909,共7页
目的探究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因14(LncRNA SNHG14)靶向调控微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)对高糖诱导的足细胞损伤的影响。方法体外培养足细胞,并将其分为标准糖(NG)组、高糖(HG)组、si-NC+HG组、si-SNHG14+HG组、miR-NC+HG组、mi... 目的探究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因14(LncRNA SNHG14)靶向调控微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)对高糖诱导的足细胞损伤的影响。方法体外培养足细胞,并将其分为标准糖(NG)组、高糖(HG)组、si-NC+HG组、si-SNHG14+HG组、miR-NC+HG组、miR-30a-5p mimics+HG组、si-SNHG14+inhibitor NC+HG组、siSNHG14+miR-30a-5p inhibitor+HG组。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测LncRNA SNHG14、miR-30a-5p表达;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平;分别采用黄嘌呤氧化法、钼酸铵比色法、硫代巴比妥酸法检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平;双萤光素酶报告基因检测LncRNA SNHG14与miR-30a-5p的靶向关系;Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果与NG组相比,HG组LncRNA SNHG14表达、细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平升高,miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平降低(P<0.05)。与HG组、si-NC+HG组相比,si-SNHG14+HG组LncRNA SNHG14表达、细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化型胱天蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达水平降低,miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平、B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)表达水平升高(P<0.05);与HG组、miR-NC+HG组相比,miR-30a-5p mimics+HG组LncRNA SNHG14表达无变化(P>0.05),miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白表达升高,细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05);与si-SNHG14+HG组、si-SNHG14+inhibitor NC+HG组相比,si-SNHG14+miR-30a-5p inhibitor+HG组LncRNA SNHG14表达无变化(P>0.05),miR-30a-5p表达、SOD、CAT水平、Bcl-2蛋白表达水平降低,细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β、MDA水平、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验证实LncRNA SNHG14靶向负调控miR-30a-5p。结论抑制LncRNA SNHG14可靶向miR-30a-5p减轻高糖诱导的足细胞损伤。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 足细胞 细胞凋亡 炎症 LncRNA SNHG14 mir-30a-5p 高糖
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养阴抗癌汤对晚期胃癌患者的疗效及血清miR-21-5p、miR-30a水平的影响
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作者 孙延沙 赵坤 +2 位作者 王伟 李婷婷 常万华 《中医药学报》 2025年第10期91-96,共6页
目的:分析养阴抗癌汤治疗晚期胃癌的效果及对患者血清miR-21-5p、miR-30a水平的影响。方法:回顾性分析2022年4月—2024年4月淮安市淮安医院收治的63例晚期胃癌患者的临床资料,依据是否服用养阴抗癌汤分为对照组(30例,化疗及对症支持治疗... 目的:分析养阴抗癌汤治疗晚期胃癌的效果及对患者血清miR-21-5p、miR-30a水平的影响。方法:回顾性分析2022年4月—2024年4月淮安市淮安医院收治的63例晚期胃癌患者的临床资料,依据是否服用养阴抗癌汤分为对照组(30例,化疗及对症支持治疗)和观察组(33例,化疗及对症支持治疗+养阴抗癌汤)。比较两组治疗前后的中医证候积分、血清miR-21-5p、miR-30a水平,观察两组不良反应发生情况。所有患者从治疗3个月后随访至2024年10月,记录两组随访1、3、6个月的生存率,统计无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)。结果:观察组客观缓解率78.79%(26/33)和疾病控制率51.52%(17/33)显著高于对照组的53.33%(16/30)、26.67%(8/30),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组的中医证候积分及血清miR-21-5p表达水平均低于对照组(P<0.05,P<0.01),miR-30a表达水平高于对照组(P<0.05)。观察组随访1、3、6个月的生存率(分别为96.8%、90.3%、83.1%)显著高于对照组(分别为85.8%、70.0%、52.6%),差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。截至随访终点,观察组的中位PFS(16.5个月)长于对照组(11.7个月),中位OS(17个月)长于对照组(13个月)。结论:养阴抗癌汤治疗晚期胃癌效果显著,可降低血清miR-21-5p表达水平,升高miR-30a表达水平,延长患者的生存时间,且不会增加不良反应。 展开更多
关键词 养阴抗癌汤 晚期胃癌 血清 mir-21-5p mir-30a
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血清miR-30a-5p、PGC-1α对阵发性心房颤动患者射频消融术后复发的预测价值
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作者 徐佐厅 彭超 支娟 《中国循证心血管医学杂志》 2025年第6期688-694,共7页
目的探讨微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)对阵发性心房颤动患者射频导管消融(RFCA)术后复发的预测价值。方法选取2021年6月至2023年6月于兴义市人民医院心血管内科接受RFCA治疗的155... 目的探讨微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)对阵发性心房颤动患者射频导管消融(RFCA)术后复发的预测价值。方法选取2021年6月至2023年6月于兴义市人民医院心血管内科接受RFCA治疗的155例阵发性心房颤动患者为研究对象(作为阵发性心房颤动组),根据术后随访结果又分为两个亚组:复发组(n=62)和非复发组(n=93),另选取同期于本院体检结果正常的155例健康人作为对照组。采用qRT-PCR和ELISA法分别检测阵发性心房颤动组和对照组的血清miR-30a-5p、PGC-1α水平,并比较两组心脏参数的不同;采用ENCORI数据库预测miR-30a-5p与PGC-1α的靶向结合位点;采用Pearson法分析miR-30a-5p、PGC-1α水平与心脏参数的相关性;对复发组和非复发组患者的临床资料进行单因素分析,采用Logistic回归分析患者RFCA术后复发的影响因素;采用ROC曲线评估miR-30a-5p、PGC-1α对患者RFCA术后复发的预测价值;采用χ^(2)检验比较miR-30a-5p、PGC-1α高/低表达与患者复发率的关系。结果阵发性心房颤动组患者血清中的miR-30a-5p表达水平高于对照组,PGC-1α低于对照组(P<0.05);阵发性心房颤动组患者的左心房直径(LAD)、左心室舒张内径(LVD)高于对照组,左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(FS)低于对照组(P<0.05)。miR-30a-5p与PGC-1α存在靶向结合位点,且阵发性心房颤动患者的miR-30a-5p与PGC-1α呈负相关(r=-0.804,P<0.05)。阵发性心房颤动组患者的miR-30a-5p水平与LAD、LVD呈正相关,与LVEF、FS呈负相关;PGC-1α与LAD、LVD呈负相关,与LVEF、FS呈正相关(P<0.05)。复发组患者的LAD、LVD、miR-30a-5p高于非复发组,LVEF、FS、PGC-1α低于非复发组(P<0.05)。miR-30a-5p(OR=3.526)及LAD(OR=2.269)、LVD(OR=2.987)为阵发性心房颤动患者术后复发的危险因素,PGC-1α(OR=0.398)及LVEF(OR=0.527)、FS(OR=0.506)为保护因素(P<0.05)。miR-30a-5p与PGC-1α联合预测阵发性心房颤动患者术后复发的AUC为0.934,优于单一指标miR-30a-5p(Z=3.125,P<0.05)、PGC-1α(Z=3.752,P<0.05)的AUC。miR-30a-5p低表达组患者的复发率低于高表达组(χ^(2)=18.162,P<0.05);PGC-1α低表达组患者的复发率高于高表达组(χ^(2)=32.766,P<0.05)。结论阵发性心房颤动患者的血清miR-30a-5p上调,PGC-1α下调,二者联合预测阵发性心房颤动患者RFCA术后复发的价值更高。 展开更多
关键词 阵发性心房颤动 mir-30a-5p PGC-1Α 射频消融术 复发
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慢性肾衰竭患者血清Klotho、TN-C、miR-30a与肾间质纤维化的关系 被引量：1
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作者 刘惠敏 马少林 +1 位作者 管肖依 崔玉秀 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第6期1146-1149,共4页
目的 分析慢性肾衰竭(CRF)患者血清中Klotho、肌腱蛋白-C(TN-C)、微小核糖核酸-30a(miR-30a)的变化及与肾间质纤维化(RIF)的关系。方法 选取2021年1月至2024年1月于保定市第二中心医院诊治的120例CRF患者为试验组,并将试验组患者依据肾... 目的 分析慢性肾衰竭(CRF)患者血清中Klotho、肌腱蛋白-C(TN-C)、微小核糖核酸-30a(miR-30a)的变化及与肾间质纤维化(RIF)的关系。方法 选取2021年1月至2024年1月于保定市第二中心医院诊治的120例CRF患者为试验组,并将试验组患者依据肾组织病理活检结果分为RIF组45例和非RIF组75例,选取同期在本院进行健康体检的50例健康受试者纳入对照组。分别比较试验组与对照组、RIF组与非RIF组中Klotho、TN-C及miR-30a水平的差异。Logistic回归分析影响CRF患者发生RIF的危险因素,分析Klotho、TN-C、miR-30a对CRF患者发生RIF的诊断价值。结果 试验组血清中Klotho、miR-30a水平明显低于对照组,TN-C水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);RIF组血清中Klotho、miR-30a水平明显低于非RIF组,TN-C水平明显高于非RIF组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素分析显示,Klotho和miR-30a是发生RIF的保护因素,TN-C是发生RIF的危险因素(P<0.05);接受者操作特性(ROC)曲线结果显示,Klotho、TN-C、miR-30a单独检测诊断RIF时曲线下面积(AUC)分别为0.789、0.803、0.817,联合诊断为0.942,明显高于单独诊断(P<0.05)。结论 RIF患者血清Klotho、miR-30a降低,均为CRF患者发生RIF的保护因素;TN-C升高,为CRF患者发生RIF的危险因素,三者联合预测对RIF预后具有重要的诊断价值。 展开更多
关键词 慢性肾衰竭 KLOTHO 肌腱蛋白-C 微小核糖核酸-30a 肾间质纤维化
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miR-30a-3p通过抑制肝细胞自噬促进脂质沉积而加剧小鼠非酒精性脂肪性肝病
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作者 陈雕 陈永鑫 +4 位作者 王贵婷 袁必容 胡龙堃 张甜 郭兵 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期953-964,共12页
目的:探讨微小RNA-30a-3p(miR-30a-3p)是否通过调控自噬影响肝细胞脂质沉积参与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病过程。方法:选取8周龄C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组和高脂饮食(HFD)组。HFD组小鼠给予60%的高脂饲料饲养10周,诱导小鼠... 目的:探讨微小RNA-30a-3p(miR-30a-3p)是否通过调控自噬影响肝细胞脂质沉积参与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病过程。方法:选取8周龄C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组和高脂饮食(HFD)组。HFD组小鼠给予60%的高脂饲料饲养10周,诱导小鼠出现NAFLD表型,之后各组小鼠分别尾静脉注射过表达miR-30a-3p的腺相关病毒,后以高脂饲料继续饲养4周。检测小鼠的糖耐量水平和胰岛素抵抗情况;检测小鼠肝脏丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量;苏木素-伊红染色和油红O染色观察小鼠肝脏病理形态以及脂质沉积情况;Western blot检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、自噬相关蛋白5(ATG5)、beclin-1和p62表达水平。在体外实验中采用棕榈酸和油酸(PO)联合诱导AML12细胞建立体外NAFLD模型。RTqPCR检测miR-30a-3p shRNA转染后肝细胞中miR-30a-3p的表达量,试剂盒检测miR-30a-3p敲减后的TG和TC含量;尼罗红染色观察脂滴聚集情况;双荧光重组腺病毒Ad-mCherry-GFP-LC3B转染AML12细胞观察自噬流。结果:HFD组小鼠出现明显的胰岛素抵抗与糖耐受降低,肝脏组织出现明显的脂质沉积,小鼠肝脏ALT、AST、TG、TC含量升高。LC3-II、beclin-1和ATG5的表达降低,p62的表达增加(P<0.01)。在过表达miR-30a-3p后,HFD组小鼠的血糖及胰岛素抵抗明显增加,肝脏组织脂滴沉积进一步加重,肝脏TG、TC、AST和ALT浓度明显增加。LC3-II、beclin-1和ATG5的表达进一步降低,p62的表达也明显增加(P<0.01)。在体外细胞实验中,PO诱导的AML12细胞中TG和TC含量显著增加;细胞中出现明显的红染脂滴,且LC3-II、beclin-1和ATG5的水平下降,p62的水平增加(P<0.01)。在AML12细胞敲减miR-30a-3p后,TG含量明显下降,脂滴聚积得到明显改善;LC3-II、beclin-1和ATG5的表达增加,p62的表达显著下降,自噬流通畅(P<0.01)。结论:miR-30a-3p加剧NAFLD小鼠的肝脏脂质沉积,导致肝脏发生严重的肝脂肪变性和肝损伤,从而促进NAFLD的发生发展,其机制可能与抑制肝脏自噬水平有关。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 微小RNA-30a-3p 自噬 脂质沉积 胰岛素抵抗
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小儿原发性肾病综合征患者血清和尿液miR-30a-5p水平增加及临床意义 被引量：8
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作者 时永辉 罗阳 +7 位作者 王成 陈熹 曾科 张辰宇 夏正坤 蔡晓懿 汪俊军 张春妮 《现代检验医学杂志》 CAS 2013年第3期14-18,共5页
目的 检测分析原发性肾病综合征（NS）患儿血清全基因组微小核糖核酸（miRNA）表达谱,验证其中表达上调的miR-30a-5p,探讨其作为NS分子诊断指标的可能性.方法 收集南京军区南京总医院2010～2011年期间33例住院NS患儿未经治疗前血清和尿... 目的 检测分析原发性肾病综合征（NS）患儿血清全基因组微小核糖核酸（miRNA）表达谱,验证其中表达上调的miR-30a-5p,探讨其作为NS分子诊断指标的可能性.方法 收集南京军区南京总医院2010～2011年期间33例住院NS患儿未经治疗前血清和尿液样本,同时以30例年龄、性别匹配的健康儿童作对照.用高通量的TaqMan低密度芯片技术分别检测NS患儿和健康儿童的混合血清全基因组miRNA的表达量,再用TaqMan实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法对在患儿血清中表达上调的miR-30a-5p进行验证,同时测定miR-30a-5p在尿液中的含量.结果 低密度芯片结果显示,30种miRNA在患儿血清中的表达量是健康儿童的2倍以上,其中miR-30a-5p为正常对照的104倍.qRT-PCR检测证实,miR-30a-5p在患儿血清中的含量4.34±0.08,显著高于对照组1.00±0.02（Z=5.916,P〈0.000 1）,在患儿尿液中的水平也明显升高（3.44±0.05 vs 1.00±0.04）（Z=3.312,P=0.001）.用于诊断NS的血清miR-30a-5p ROC曲线下面积（AUCROC）为0.960（95% CI,0.915～1.000）,敏感度和特异度均为98.3%.相关性分析显示,血清或尿液中的miR-30a-5p含量与患儿年龄、性别、肾功能及血脂水平均无明显关联（P〉0.05）.结论 NS患儿血清miRNA表达谱与健康儿童有明显差异,miR-30a-5p在患儿血清及尿液中水平显著升高,与NS密切相关,是NS潜在的分子诊断指标. 展开更多
关键词 原发性小儿肾病综合征 血清 尿液 微小核糖核酸 mir-30a-5p
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肠胃清方对人结肠癌HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤miR-30a/Beclin1通路的影响 被引量：8
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作者 张瑞娟 许建华 +4 位作者 孙珏 梁芳 张勇 余倩云 范忠泽 《世界华人消化杂志》 CAS 2017年第12期1061-1070,共10页
目的本课题旨在分子生物学技术和中医基础理论指导下,从miRNAs与自噬相关联的角度,讨论miR-30a与自噬基因Beclin1在结肠癌化疗耐药中的相关性,并探讨肠胃清对miR-30a介导自噬的调控作用及逆转结肠癌耐药的分子机制.方法建立人结肠癌耐... 目的本课题旨在分子生物学技术和中医基础理论指导下,从miRNAs与自噬相关联的角度,讨论miR-30a与自噬基因Beclin1在结肠癌化疗耐药中的相关性,并探讨肠胃清对miR-30a介导自噬的调控作用及逆转结肠癌耐药的分子机制.方法建立人结肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白组、L-OHP组、肠胃清方组、肠胃清方低剂量+L-OHP组、肠胃清方高剂量+L-OHP组.治疗结束后采用RT-PCR、免疫组织化学、Tunnel等研究肠胃清对瘤体组织中miR-30a、Beclin1、LC3的表达及细胞凋亡的影响.结果奥沙利铂组可见Beclin1、LC3的上调,miR-30a的下调,细胞凋亡的减少.而肠胃清联用奥沙利铂组可见Beclin1、LC3的下调,miR-30a的上调,细胞凋亡的增加(P<0.05或P<0.01).结论奥沙利铂诱导保护性自噬导致细胞凋亡减少可能是其耐药的机制.肠胃清可通过调控miR-30a/Beclin1通路而抑制自噬逆转结肠癌耐药. 展开更多
关键词 肠胃清 奥沙利铂 结肠癌 mir-30a 自噬 耐药
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炎性骨组织中miR-23a和miR-30a的表达改变及其生物学作用的研究 被引量：5
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作者 杨博 陆群 +2 位作者 汪平 苏凌云 杨帆 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第4期231-234,共4页
目的:观察研究体外炎性微环境下的牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)、成骨细胞(MC3T3-E1)和体内大鼠牙周炎牙龈组织、骨组织中miR-23a和miR-30a的表达变化,证实miR-23a和miR-30a在牙周炎性骨缺失中发挥重要调控作用,探讨... 目的:观察研究体外炎性微环境下的牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)、成骨细胞(MC3T3-E1)和体内大鼠牙周炎牙龈组织、骨组织中miR-23a和miR-30a的表达变化,证实miR-23a和miR-30a在牙周炎性骨缺失中发挥重要调控作用,探讨其生物学作用。方法:1μg/mL LPS刺激PDLCs、MC3T3-E1细胞模拟炎性微环境,24 h后收集细胞。采用正畸结扎丝结扎各SD大鼠右侧上颌第一磨牙颈部,左侧未结扎作为自身对照,21 d后取其牙龈、牙槽骨组织。采用荧光定量PCR分别检测处于炎性微环境下的细胞、大鼠牙周炎牙龈组织、牙周骨组织中miR-23a和miR-30a的表达。结果:炎性环境下PDLCs、MC3T3-E1细胞中miR-23a和miR-30a的表达水平均较对照组明显增高(P<0.05)。大鼠牙周炎牙龈组织、牙槽骨组织中miR-23a和miR-30a的表达水平明显高于正常对照侧(P<0.05)。结论:miR-23a和miR-30a参与调控炎性环境下骨代谢和成骨细胞活性。 展开更多
关键词 mir-23a mir-30a 炎症 骨缺失
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卒中后抑郁卒中后抑郁患者血浆中miR-30a-5p的差异性表达及其作用机制的生物信息的生物信息学预测 被引量：10
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作者 胡佳 周志明 +1 位作者 杨倩 杨科 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期922-929,共8页
目的探讨卒中后抑郁(PSD)患者miR-30a-5p的表达差异性及其在PSD中的诊断价值,基于生物信息学方法,分析其可能作用机制。方法检索Pub Med数据库,利用VENNY2.1在线软件获取到目标micro RNA。贯续性纳入2018年10月~2019年3月就诊于皖南医... 目的探讨卒中后抑郁(PSD)患者miR-30a-5p的表达差异性及其在PSD中的诊断价值,基于生物信息学方法,分析其可能作用机制。方法检索Pub Med数据库,利用VENNY2.1在线软件获取到目标micro RNA。贯续性纳入2018年10月~2019年3月就诊于皖南医学院弋矶山医院神经内科卒中病房并首次诊断为急性脑梗死的患者,收集患者入院时人口统计学资料、卒中危险因素、既往卒中病史、美国国立卫生研究院脑卒中量表(NHISS)评分等临床基线资料及影像学资料,并与入院当天留取研究对象外周静脉血5 mL。随访3个月根据Hamilton抑郁量表(HAMD-17)行抑郁程度的评价,对于评分值≥7者按照《美国精神病学会叶精神疾病诊断与统计手册》第4版(DSM-IV)诊断标准诊断抑郁,分为PSD组(n=11)和non-PSD组(n=25)。使用q RT-PCR法检测卒中后抑郁患者(PSD)和非卒中后抑郁患者(NPSD)外周血miR-30a-5p表达水平,利用ENCORI数据库和CTD(Comparative Toxicogenomics Database)数据库共同预测和筛选miR-30a-5p调控的抑郁相关可能作用的靶基因,通过生物信息学方法对靶基因的可能作用机制进行进一步分析。结果通过交叉筛选得到同时与卒中和抑郁相关的miR-30a-5p,临床样本q RT-PCR验证miR-30a-5p在PSD和non-PSD组有差异性表达(2.462±0.326 vs 1±0.126,P<0.0001)。ROC曲线分析提示miR-30a-5p预测PSD的AUC=0.869(95%CI,0.745-0.993,P=0.0005),cut-off值为1.597,对应的敏感性和特异性分别为0.727、0.840。靶蛋白主要作用的生物学过程包括信号转导、细胞间通讯、核酸碱基、核苷、核苷酸和核酸代谢的调节;KEGG通路富集分析发现,靶蛋白主要作用于神经营养素信号通路、轴突导向信号通路、胰岛素信号传导系统;经过Cyto HUBBA分析得出可能与卒中后抑郁相关的前20种HUB基因。结论外周血miR-30a-5p在卒中后抑郁患者和非卒中后抑郁患者中存在差异性表达,可以作为诊断PSD的临床标志物,其可能是通过神经营养素信号通路、轴突导向信号通路、胰岛素信号传导系统来影响PSD的发生。 展开更多
关键词 卒中后抑郁 mir-30a-5p 生物信息学
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猫眼草提取物通过miR-30a-5p/NF-κB抑制白介素-1β诱导结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量：3
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作者 吴雄健 朱海燕 +2 位作者 胡滢 黄子倩 刘晓平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1890-1895,共6页
目的研究猫眼草提取物是否通过miR-30a-5p/核因子κB(NF-κB)调节白介素-1β(IL-1β)诱导的结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法将HT29细胞分为:NC组、IL-1β组、低剂量(2.5 mg·L^(-1))+IL-1β组、中剂量(5 mg·L^(-1))+IL-1... 目的研究猫眼草提取物是否通过miR-30a-5p/核因子κB(NF-κB)调节白介素-1β(IL-1β)诱导的结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法将HT29细胞分为:NC组、IL-1β组、低剂量(2.5 mg·L^(-1))+IL-1β组、中剂量(5 mg·L^(-1))+IL-1β组、高剂量(10 mg·L^(-1))+IL-1β组、miR-NC+IL-1β组、miR-30a-5p+IL-1β组、anti-miR-NC+高剂量+IL-1β组、anti-miR-30a-5p+高剂量+IL-1β组。采用细胞计数试剂盒-8法检测各组细胞增殖活性,克隆形成实验检测细胞克隆,Transwell法检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测细胞蛋白的表达水平,qRT-PCR检测miR-30a-5p表达水平。结果与NC组比较,IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移及侵袭数量增多,miR-30a-5p表达水平减弱(均P<0.01)。与IL-1β组比较,低剂量+IL-1β组、中剂量+IL-1β组、高剂量+IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移及侵袭数量降低,miR-30a-5p表达水平提升(均P<0.01);高剂量+IL-1β组中p-p65表达水平低于IL-1β组(P<0.01)。miR-30a-5p+IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移和侵袭数量比miR-NC+IL-1β组降低(均P<0.01)。anti-miR-30a-5p+高剂量+IL-1β组结直肠癌细胞HT29的增殖活性、细胞克隆数、迁移和侵袭数量高于anti-miR-NC+高剂量+IL-1β组(均P<0.01)。结论猫眼草提取物通过上调miR-30a-5p、下调NF-κB信号通路活性,抑制IL-1β诱导的结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 猫眼草提取物 IL-1Β mir-30a-5p NF-ΚB 增殖 转移
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miR-30a-5p靶向调控TRIM31表达对结直肠癌细胞5-氟尿嘧啶耐药的逆转作用及其机制 被引量：4
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作者 卢瑞云 谷敬锋 +2 位作者 张建 张新 徐菲 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期714-723,共10页
目的:探讨miR-30a-5p靶向三结构域蛋白31(TRIM31)基因对结直肠癌(CRC)细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响,并阐明其作用机制。方法:收集27例5-FU化疗敏感(5-FU/S组)CRC患者和23例5-FU化疗耐药(5-FU/R组)CRC癌患者的CRC组织,实时荧光定量PCR... 目的:探讨miR-30a-5p靶向三结构域蛋白31(TRIM31)基因对结直肠癌(CRC)细胞5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药的影响,并阐明其作用机制。方法:收集27例5-FU化疗敏感(5-FU/S组)CRC患者和23例5-FU化疗耐药(5-FU/R组)CRC癌患者的CRC组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测癌组织中miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达水平,Pearson相关分析法分析miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达的相关性。体外培养人CRC 5-FU耐药细胞HT-29/5-FU细胞及其亲本HT-29细胞,MTT法检测2种细胞增殖活性并计算半数抑制浓度(IC50)和耐药指数(RI),RT-qPCR法检测2种细胞中miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达水平,Western blotting法检测2种细胞中TRIM31蛋白表达水平。将HT-29/5-FU细胞分为空白对照组、mimics NC组(转染miR-30a-5p阴性对照mimics NC)、miR-30a-5p mimics组(转染miR-30a-5p mimics)、miR-30a-5p mimics+vector组(转染miR-30a-5p mimics和阴性对照空载体)和miR-30a-5p mimics+TRIM31组(转染miR-30a-5p mimics和TRIM31过表达载体)。RT-qPCR法检测各组HT-29/5-FU细胞中miR-30a-5p和RTIM31 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组HT-29/5-FU细胞中TRIM31蛋白表达水平,MTT法检测各组HT-29/5-FU细胞增殖活性,流式细胞术检测各组HT-29/5-FU细胞凋亡率,双荧光素酶报告基因系统验证miR-30a-5p与TRIM31的靶向关系。结果:与5-FU/S组比较,5-FU/R组患者CRC组织中miR-30a-5p表达水平降低(P<0.01),TRIM31 mRNA表达水平升高(P<0.01),miR-30a-5p和TRIM31 mRNA表达水平呈负相关关系(R2=0.885,P<0.01)。与HT-29细胞比较,HT-29/5-FU细胞中miR-30a-5p表达水平降低(P<0.01),TRIM31 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01)。HT-29/5-FU细胞和HT-29细胞的IC50值分别为(104.41±0.22)和(9.82±0.31)mg·L^(-1),RI值为12.42。与空白对照组和mimics NC组比较,miR-30a-5p mimics组HT-29/5-FU细胞中miR-30a-5p表达水平升高(P<0.01),TRIM31蛋白表达水平降低(P<0.01),HT-29/5-FU细胞增殖活性明显降低(P<0.01),HT-29/5-FU细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。与miR-30a-5p mimics组比较,miR-30a-5p mimics+TRIM31组HT-29/5-FU细胞中TRIM31蛋白表达水平升高(P<0.01),HT-29/5-FU细胞增殖活性明显升高(P<0.01),HT-29/5-FU细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因系统证实TRIM31是miR-30a-5p的靶基因。结论:miR-30a-5p通过靶向TRIM31基因表达增强CRC耐药细胞对5-FU的敏感性。 展开更多
关键词 mir-30a-5p 三结构域蛋白31 结直肠肿瘤 5-氟尿嘧啶 化疗耐药
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miR-30a在心肌梗死大鼠心肌纤维化中的作用机制及对心功能的影响 被引量：5
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作者 陈立文 朱琳琳 +7 位作者 季倩 朱灏 任怡稚 樊仲国 李小波 高晓飞 张瑶俊 田乃亮 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第1期80-86,共7页
目的探讨miR-30a在大鼠心肌梗死后对心肌纤维化的作用机制及对心功能的影响。方法构建携带大鼠miR-30a基因的载体,在HEK293细胞中包装病毒载体r AAV9-miR-30a及阴性对照r AAV9-miR-30a-NC,提取纯化后通过冠脉注射方法分别传导PBS缓冲液... 目的探讨miR-30a在大鼠心肌梗死后对心肌纤维化的作用机制及对心功能的影响。方法构建携带大鼠miR-30a基因的载体,在HEK293细胞中包装病毒载体r AAV9-miR-30a及阴性对照r AAV9-miR-30a-NC,提取纯化后通过冠脉注射方法分别传导PBS缓冲液、r AAV9-miR-30-NC和r AAV9-miR-30a至大鼠心脏,再建立大鼠心肌梗死模型,分别设为PBS组、miR-30-NC组和miR-30a组,同时设立假手术组(sham组)。用心脏彩色多普勒超声检测心功能指标,包括短轴缩短率(FS)及左室射血分数(LVEF);Masson染色观察心肌胶原容积分数(CVF);免疫组化法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达;实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测心肌miR-30a及TGF-β1和CTGF mRNA表达;蛋白印迹法(Western blot)检测TGF-β1及CTGF蛋白的表达。结果 miR-30a组心功能较PBS组及miR-30-NC组显著改善(P<0.05)。miR-30a组的心肌CVF及Ⅰ、Ⅲ胶原表达水平、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值较PBS组及miR-30-NC组显著降低(P<0.01);miR-30a组心肌TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平与PBS组及miR-30-NC组比较显著下降(P<0.001);CTGF mRNA及蛋白表达水平较PBS组及miR-30-NC组显著降低(P<0.001)。结论 miR-30a过表达能下调心肌梗死后心肌TGF-β1、CTGF mRNA及蛋白水平,从而减少心肌胶原产生,抑制心肌纤维化,进而改善心功能。 展开更多
关键词 mir-30a 心肌梗死 心肌纤维化 转化生长因子Β1 结缔组织生长因子
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miR-30a在同型半胱氨酸致足细胞凋亡中的作用 被引量：5
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作者 丁宁 郭凤英 +8 位作者 谢琳 曹军 王青青 张玲 马胜超 卢冠军 张鸣号 姜怡邓 杨晓玲 《广东医学》 CAS 2019年第6期762-766,共5页
目的探讨miR-30a在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导足细胞凋亡中的作用。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,分为Control组(0μmol/L Hcy)与Hcy组(80μmol/L Hcy),干预细胞48 h后,流式细胞术检测足细胞凋亡水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR... 目的探讨miR-30a在同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导足细胞凋亡中的作用。方法体外培养小鼠肾小球足细胞,分为Control组(0μmol/L Hcy)与Hcy组(80μmol/L Hcy),干预细胞48 h后,流式细胞术检测足细胞凋亡水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-30a的表达水平;巢式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测miR-30a启动子区DNA甲基化水平;透射电镜观察感染miR-30a前体(miR-30a mimic)和抑制物(miR-30a inhibitor)后足细胞凋亡及超微结构的变化。结果与Control组相比,Hcy组足细胞凋亡水平增加(P<0.05),而miR-30a表达水平降低(P<0.01);同时,miR-30a启动子区DNA甲基化程度升高(P<0.05);感染miR-30a mimic后,足细胞损伤明显减轻,凋亡形态的细胞数量减少,而感染miR-30a inhibitor后足细胞损伤程度加剧,凋亡形态的细胞数量增加。结论 miR-30a可抑制足细胞凋亡,其机制可能是miR-30a启动子区DNA低甲基化发挥重要作用。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 足细胞凋亡 mir-30a DNA甲基化
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miR-30a-3p靶向NOD1对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响 被引量：4
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作者 刘建花 雷大洲 +2 位作者 周凡 齐俊杰 李世勋 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第4期414-420,共7页
目的探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系,及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。方法将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组,经过缺氧复氧处理后,转染相应的miRNA处理细胞,RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1... 目的探究miR-30a-3p与NOD1的靶向关系,及其对心肌细胞缺氧复氧损伤的影响和机制。方法将细胞分为Ctrl组、H/R组、miR-30a-3p mimic组和miR-30a-3p inhibitor组,经过缺氧复氧处理后,转染相应的miRNA处理细胞,RT-PCR检测miR-30a-3p和NOD1基因表达水平,荧光素酶报告检测miR-30a-3p和NOD1靶向关系,Western blot检测NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平,CCK8法检测细胞活性,Hoechst检测细胞凋亡,试剂盒检测LDH、CK、MDA、T-SOD水平。结果miR-30a-3p表达水平随缺氧复氧处理时间增长而下降,NOD1基因表达水平随缺氧复氧处理时间增长而升高。在荧光素酶报告实验中,NOD1 WT+miR-30a-3p mimic荧光素酶活性显著低于NOD1 WT+NC组。与Ctrl组比较,H/R组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低,NOD1、p-RPI2、p38MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高;与H/R组比较,miR-30a-3p mimic组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平升高,NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、cl-caspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率降低,miR-30a-3p inhibitor组miR-30a-3p基因表达水平、细胞活性、T-SOD水平降低,NOD1、p-RPI2、p38 MAPK、NF-κB(p65)、clcaspase-3蛋白表达水平、LDH、CK、MDA水平、细胞凋亡率升高。结论miR-30a-3p可靶向作用于NOD1,缓解心肌细胞缺氧复氧造成的损伤,其作用机制可能与调控NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 缺氧复氧损伤 心肌缺血再灌注 NOD1 mir-30a-3p
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