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miR-200b生物学功能及其对小鼠卵泡发育的影响
1
作者 宋鹏琰 锡建中 +3 位作者 陈晓勇 方翟 邢凤 周荣艳 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第12期5539-5548,共10页
【目的】挖掘miR-200b生物学功能并探究其对小鼠卵泡发育的影响。【方法】利用NCBI数据库获取人、小鼠、大鼠、斑马鱼、猪和绵羊miR-200b成熟序列,通过在线软件WebLogo进行序列分析,利用TargetScan和miRDB软件预测小鼠miR-200b靶基因,... 【目的】挖掘miR-200b生物学功能并探究其对小鼠卵泡发育的影响。【方法】利用NCBI数据库获取人、小鼠、大鼠、斑马鱼、猪和绵羊miR-200b成熟序列,通过在线软件WebLogo进行序列分析,利用TargetScan和miRDB软件预测小鼠miR-200b靶基因,并进一步对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析;通过腹腔注射miRNA antagomir构建小鼠miR-200b颉颃模型,采集小鼠血液及组织器官样本,利用实时荧光定量PCR检测卵巢中miR-200b表达水平;计算脏器系数,通过HE染色观察卵巢组织形态变化,并对卵泡进行计数;利用ELISA检测血清雌二醇(E_(2))水平。【结果】不同物种miR-200b种子序列完全相同、成熟序列末端1~2个碱基存在差异;TargetScan和miRDB软件预测的共有靶基因共607个,其主要显著富集在转录调控、DNA和蛋白结合等GO条目,以及PI3K-Akt、MAPK、长寿调节、雌激素等KEGG信号通路。与Control和antagomir NC组相比,miR-200b颉颃组小鼠卵巢中miR-200b表达水平极显著下调(P<0.01),卵巢指数和腔前卵泡数极显著降低(P<0.01),有腔卵泡数极显著增多(P<0.01),同时伴随卵泡体积增大、颗粒细胞增多;血清雌二醇水平极显著升高(P<0.01)。【结论】miR-200b对小鼠卵泡颗粒细胞生长及卵泡发育起负向调控作用,研究结果为深入剖析miR-200b对卵泡发育的调控功能提供了依据。 展开更多
关键词 小鼠 mir-200b 生物学功能 卵泡发育
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大动脉粥样硬化性缺血性脑卒中血清miR-7-5p和miR-200b-3p表达水平及其临床意义
2
作者 杨小英 阿拉帕特·阿布都古力 徐军伟 《临床研究》 2025年第3期1-6,共6页
目的探讨血清miR-7-5p和miR-200b-3p在中重度大动脉粥样硬化性狭窄的缺血性脑卒中(CIS)的表达水平及对临床的预测价值。方法选择2021年5月至2023年5月在乌鲁木齐市友谊医院神经内科住院治疗且经脑血管造影术(DSA)证实有中、重度动脉粥... 目的探讨血清miR-7-5p和miR-200b-3p在中重度大动脉粥样硬化性狭窄的缺血性脑卒中(CIS)的表达水平及对临床的预测价值。方法选择2021年5月至2023年5月在乌鲁木齐市友谊医院神经内科住院治疗且经脑血管造影术(DSA)证实有中、重度动脉粥样硬化性脑血管狭窄的CIS患者83例为病例组,同期取90例健康体检者作为对照组,对照组患者均进行了头颈部电子计算机断层扫描血管成像(CTA)检查,均不合并大动脉粥样硬化性狭窄。应用荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测病例组和对照组miR-7-5p和miR-200b-3p的表达水平。分析两组基线资料、生化指标及miR-7-5p和miR-200b-3p的表达水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-7-5p和miR-200b-3p对中重度大动脉粥样硬化性狭窄的脑卒中的预测价值。结果(1)病例组患者有吸烟、饮酒不良嗜好及合并有糖尿病、高血压病史的人群比率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组患者年龄、性别、入院时心率、血压比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)病例组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于对照组,肌酐(Cr)、FPG、HbAlc、Hcy、miR-7-5p、miR-200b-3p均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),两组其余变量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)糖尿病(OR=3.892,95%CI 1.803~8.401)、高血压(OR=2.104,95%CI 1.036~4.273)、Cr(OR=1.027,95%CI 1.006~1.049)、HDL-C(OR=0.182,95%CI 0.036~0.920)、miR-7-5p(OR=1.960,95%CI 1.290~2.977)、miR-200b-3p(OR=2.980,95%CI 1.596~5.562)为中重度大动脉粥样硬化性狭窄的CIS的影响因素,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)受试者工作特征(ROC)曲线显示miR-7-5p的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、约登指数分别为0.758、69.90%、72.20%、0.421;miR-200b-3p的AUC、敏感度、特异度、约登指数分别为0.798、75.90%、75.60%、0.515。提示miR-7-5p、miR-200b-3p对中重度大动脉粥样硬化性狭窄的CIS的诊断有一定的临床价值,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)将中重度大动脉粥样硬化性狭窄的CIS患者的影响因素构建预测模型,模型ROC曲线AUC=0.886(95%CI 0.838~0.935),模型Hosmer-Lemeshow检验结果为χ^(2)=2.225,P=0.972,列线图模型的校准曲线和理想模型接近,该模型预测的CIS发生概率与实际发生概率的一致性较好。结论在中重度大动脉粥样硬化性狭窄的脑卒中患者中血清miR-7-5p和miR-200b-3p表达上调、糖尿病、高血压、Cr为大动脉粥样硬化性CIS的危险因素,可能促进了中重度粥样硬化性狭窄的脑卒中的发生、发展,通过预测模型可较好的预测患者发生CIS的风险,对其诊断和预防有较高的临床价值。 展开更多
关键词 mir-7-5p mir-200b-3p 大动脉粥样硬化性缺血性脑卒中 临床意义
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胃癌组织中miR-200a、miR-200b和miR-429的表达及临床意义 被引量：7
3
作者 常靓 霍炳杰 +3 位作者 冯莉 单玉洁 韩晶 刘巍 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1098-1100,共3页
0 引言 胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，2006年中国肿瘤发病和死亡资料分析显示，无论城市还是农村，胃癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤第二位，已成为我国今后恶性肿瘤防控的重点[1]。目前，胃癌的病因尚不明确，加之滞后的临床表现... 0 引言 胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，2006年中国肿瘤发病和死亡资料分析显示，无论城市还是农村，胃癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤第二位，已成为我国今后恶性肿瘤防控的重点[1]。目前，胃癌的病因尚不明确，加之滞后的临床表现和诊断，以手术为主、放化疗为辅的综合治疗手段亦未能显著提高患者的5年生存率[2]。所以，探寻胃癌新特异性的分子标志物，为其早期诊断开辟新途径具有重要意义。 展开更多
关键词 mir-200a mir-200b mir-429 胃癌 临床病例特征
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miR-200b靶向DNMT3A抑制非小细胞肺癌细胞增殖与诱导凋亡 被引量：5
4
作者 罗卫民 罗湘玉 +2 位作者 郭家龙 林称意 张军 《天津医药》 CAS 2016年第8期984-988,共5页
目的探讨miR-200b是否通过靶向调控DNMT3A抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖与诱导凋亡。方法运用qRT-PCR检测miR-200b在不同非小细胞肺癌细胞株中的表达;将miR-200b mimics、scramble、DNMT3A-si RNA、control-siRNA分别转染于A549细胞,... 目的探讨miR-200b是否通过靶向调控DNMT3A抑制人非小细胞肺癌A549细胞增殖与诱导凋亡。方法运用qRT-PCR检测miR-200b在不同非小细胞肺癌细胞株中的表达;将miR-200b mimics、scramble、DNMT3A-si RNA、control-siRNA分别转染于A549细胞,其中scramble与control-siRNA分别作为miR-200b mimics与DNMT3A-siRNA的阴性对照组。采用Western blot检测A549细胞中DNMT3A蛋白表达;采用MTT与AnnexinV-FITC/PI染色法分别检测A549细胞的增殖与凋亡,比较mi R-200b mimics与DNMT3A-si RNA对A549细胞增殖与凋亡的影响。结果qRT-PCR结果显示,miR-200b在非小细胞肺癌A549、H1299、L78、H460细胞中的表达均明显低于正常人支气管上皮16HBE细胞,其中以A549细胞下调最为明显(P<0.05)。Western blot结果显示,外源过表达mi R-200b或沉默DNMT3A能明显下调A549细胞中DNMT3A蛋白的水平。MTT结果显示,转染mi R-200b mimics或沉默DN-MT3A 48h、72h、96h后,反映细胞增殖的光密度(OD)值与各自阴性对照组比较明显减小(P<0.05)。AnnexinV-FITC/PI染色结果显示,转染miR-200b mimics或沉默DNMT3A后,A549细胞的凋亡率分别为(23.33%±0.90%、20.41%±0.70%)均高于各自阴性对照组(5.28%±0.55%、5.68%±0.47%,P<0.05)。结论miR-200b通过下调DNMT3A抑制人非小细胞肺癌细胞增殖与诱导凋亡。 展开更多
关键词 微RNAS 癌 非小细胞肺 细胞增殖 细胞凋亡 mir-200b DNA甲基化转移酶3A
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miR-200b对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的负性调控作用 被引量：6
5
作者 刘棣 张寅斌 +5 位作者 闫婉君 赵小瑶 盛倩文 许朋 管海涛 张淑群 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期743-746,共4页
目的研究miRNA-200b对三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法定量PCR检测人乳腺癌细胞株MCF-7、BT-474、MDA-MB-453、SKBR3、MDA-MB-468、MDA-MB-231中miRNA-200a/b/c的表达情况,通过miR-200b抑制剂及拟似物分别抑制、促进miR-200... 目的研究miRNA-200b对三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法定量PCR检测人乳腺癌细胞株MCF-7、BT-474、MDA-MB-453、SKBR3、MDA-MB-468、MDA-MB-231中miRNA-200a/b/c的表达情况,通过miR-200b抑制剂及拟似物分别抑制、促进miR-200b的表达后,观察癌细胞增殖能力、克隆形成及侵袭能力的变化。结果 miRNA-200家族在Luminal型乳腺癌细胞MCF-7、BT-474和Her-2表达型MDA-MB-453、SKBR3的表达量高于三阴性型MDA-MB-468、MDA-MB-231的表达。通过inhibitor、mimics分别抑制、促进MDA-MB-231细胞中miR-200b的表达后,结果显示miR-200b对肿瘤细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),miRNA-200b组对肿瘤细胞的克隆形成有抑制作用(P<0.05),对癌细胞侵袭有抑制作用(P<0.05)。结论miRNA-200b对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231具有负性调控作用,可以作为潜在的早期诊断及治疗靶点。 展开更多
关键词 MIRNA 乳腺癌 mir-200b
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miR-200b靶向VEGF抑制肺癌细胞侵袭 被引量：10
6
作者 罗卫民 罗湘玉 +2 位作者 郭家龙 林称意 张军 《中南医学科学杂志》 CAS 2016年第3期271-274,289,共5页
目的探讨miR-200b是否通过靶向调控血管内皮生长因子(VEGF)抑制人非小细胞肺癌细胞侵袭,以揭示miR-200b的抑瘤机制。方法运用qRT-PCR检测miR-200b在非小细胞肺癌和癌旁正常肺组织中的表达;将非小细胞肺癌A549细胞分为miR-200b mimics组... 目的探讨miR-200b是否通过靶向调控血管内皮生长因子(VEGF)抑制人非小细胞肺癌细胞侵袭,以揭示miR-200b的抑瘤机制。方法运用qRT-PCR检测miR-200b在非小细胞肺癌和癌旁正常肺组织中的表达;将非小细胞肺癌A549细胞分为miR-200b mimics组、miR-200b inhibitors组、scramble组、VEGF-siRNA组和control-siRNA组,分别将miR-200b mimics、miR-200b inhibitors、scramble、VEGF-siRNA、control-siRNA转染于A549细胞;采用Western blot检测A549细胞中VEGF蛋白表达,采用Transwell侵袭实验分别检测A549细胞侵袭能力。结果 qRT-PCR检测结果显示,miR-200b在A549、16HBE细胞的表达分别为0.704±0.053、1.582±0.071,两者比较,差异有显著性(P<0.01);Western blot结果显示,外源过表达miR-200b或沉默VEGF能明显下调A549细胞中VEGF蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验显示,转染miR-200b mimics或沉默VEGF 36 h后穿过基底膜的细胞数分别为(127±6)和(136±8),与对照组(189±14)比较能明显抑制A549细胞的穿膜能力(P<0.05),而转染miR-200b inhibitors可拮抗VEGF-siRNA对A549细胞的侵袭抑制作用。结论 miR-200b通过靶向调控VEGF抑制人非小细胞肺癌细胞侵袭。 展开更多
关键词 mir-200b 非小细胞肺癌 血管内皮生长因子 侵袭
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上调miR-200b对人喉癌Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 被引量：9
7
作者 李国彬 张占成 王新颜 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2018年第4期53-57,共5页
目的探讨上调miR-200b对人喉癌Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法培养人喉癌Hep-2细胞,随机分为miR-200b模拟物组、miR-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR技术检测各组细胞中miR-200b表达,MTT法检测细胞增殖能力,Tra... 目的探讨上调miR-200b对人喉癌Hep-2细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法培养人喉癌Hep-2细胞,随机分为miR-200b模拟物组、miR-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR技术检测各组细胞中miR-200b表达,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中E-cadherin、N-cadherin、β-catenin蛋白表达。结果与空白对照组和miR-对照序列组相比,miR-200b模拟物组细胞中miR-200b相对表达量显著升高,差异有统计学意义(F=70.766,P<0.001);与空白对照组[(0.22±0.05)、(0.45±0.07)、(0.59±0.06)、(0.72±0.08)和(0.85±0.07)]和miR-对照序列组[(0.24±0.06)、(0.46±0.08)、(0.61±0.07)、(0.70±0.05)和(0.84±0.06)]相比,miR-200b模拟物组细胞24、48、72、96 h时吸光度A值[(0.21±0.04)、(0.29±0.06)、(0.40±0.04)、(0.53±0.07)和(0.58±0.05)]均降低,差异均有统计学意义(F=0.134,P=0.876;F=6.449,P=0.010;F=37.299,P<0.001;F=5.352,P=0.018;F=29.921,P<0.001);与空白对照组[(140.2±2.3)、(127.9±6.0)]和miR-对照序列组[(141.0±1.2)、(130.4±7.4)]相比,miR-200b模拟物组迁移细胞数和侵袭细胞数[(98.5±2.4)、(90.9±2.8)]均减少,差异均有统计学意义(F=845.523,P<0.001;F=88.859,P<0.001);与空白对照组[(0.35±0.07)、(0.54±0.10)、(0.76±0.12)]和miR-对照序列组[(0.24±0.03)、(0.60±0.14)、(0.65±0.24)]相比,miR-200b模拟物组细胞中E-cadherin蛋白相对表达量(0.54±0.14)升高,而N-cadherin、β-catenin蛋白相对表达量[(0.31±0.10)、(0.35±0.06)]降低,差异均有统计学意义(F=17.287,P<0.001;F=10.083,P=0.002;F=10.434,P=0.001)。结论上调喉癌细胞中miR-200b基因表达可减少细胞增殖,抑制细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与抑制上皮-间质转化过程有关。 展开更多
关键词 喉癌 mir-200b 细胞增殖 细胞侵袭 上皮-间质转化
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miR-200b对胃癌MGC-803细胞增殖的影响以及对Bcl-2表达的调节 被引量：6
8
作者 王驰 钟鹰 +3 位作者 粟滔 黄靓 毛振江 肖祥 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2010年第20期2077-2083,共7页
目的:研究miR-200b对胃癌MGC-803细胞Bcl-2蛋白及mRNA表达的调节作用,探讨miR-200b对胃癌MGC-803细胞增殖的影响.方法:用人工合成的miR-200b相应的双链互补DNA片段,插入miRNASelectTM pEGP-miR载体,经测序鉴定后作为microRNA的表达质粒... 目的:研究miR-200b对胃癌MGC-803细胞Bcl-2蛋白及mRNA表达的调节作用,探讨miR-200b对胃癌MGC-803细胞增殖的影响.方法:用人工合成的miR-200b相应的双链互补DNA片段,插入miRNASelectTM pEGP-miR载体,经测序鉴定后作为microRNA的表达质粒;用脂质体将miR-200b高表达质粒转染进MGC-803胃癌细胞,经嘌呤霉素筛选获得阳性克隆.构建Bcl-2高表达质粒,转染入MGC-803胃癌细胞和含有miR-200b高表达质粒的MGC-803细胞中.用RT-PCR技术和Western blot方法分别检测Bcl-2的mRNA和蛋白表达;用MTT法检测胃癌MGC-803细胞增殖的变化.结果:Western blot结果显示,与正常MGC-803细胞相比,转染了miR-200b的胃癌MGC-803细胞中,Bcl-2蛋白的表达降低了56.91%,RT-PCR分析显示Bcl-2mRNA表达降低了32.29%;MTT结果显示转染了miR-200b的细胞增殖受到显著抑制.进一步的实验结果显示,转染了Bcl-2高表达质粒的胃癌细胞增殖受到促进,48h最明显增加了16.82%,然而转染了miR-200b和Bcl-2高表达质粒的MGC-803细胞增殖却下降了7.97%;Western blot结果显示,与转染了pCMV6-XL5-Bcl-2高表达质粒的MGC-803细胞组相比,转染了pEGP-miR-200b高表达质粒的MGC-803细胞中Bcl-2蛋白的表达降低了4.84倍,而转染了pEGP-miR-200b和pCMV6-XL5-Bcl-2高表达质粒的MGC-803细胞中Bcl-2蛋白的表达量降低了1.76倍.结论:过表达的miR-200b抑制MGC-803胃癌细胞增殖,这种抑制作用至少部分与Bcl-2基因的低表达有关. 展开更多
关键词 mir-200b bCL-2 MGC-803细胞
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急性缺血性脑卒中病人血清miR-7和miR-200b表达水平及与脑侧支循环分级的关系探讨 被引量：7
9
作者 范崇桂 付国惠 +2 位作者 闪海霞 张保朝 邢娟 《中西医结合心脑血管病杂志》 2020年第4期670-674,共5页
目的检测急性缺血性脑卒中(CIS)病人血清miR-7和miR-200b表达水平,探讨二者对CIS病人脑侧支循环途径的预测价值。方法选择2016年5月—2018年5月在我院神经内科住院治疗的126例CIS病人为研究对象,根据脑侧支循环的建立情况分为一级侧支... 目的检测急性缺血性脑卒中(CIS)病人血清miR-7和miR-200b表达水平,探讨二者对CIS病人脑侧支循环途径的预测价值。方法选择2016年5月—2018年5月在我院神经内科住院治疗的126例CIS病人为研究对象,根据脑侧支循环的建立情况分为一级侧支循环组(44例)、二级侧支循环组(63例)和三级侧支循环组(19例),同期选取健康体检者50名作为对照组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测受试者血清miR-7、miR-200b水平,并进行分析。结果与对照组比较,CIS病人血清miR-7、miR-200b水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。检测血清miR-7、miR-200b水平诊断CIS疾病的ROC曲线下面积(AUC)分别为:0.734、0.667,灵敏度分别为63.41%、57.89%,特异度分别为75.70%、74.61%。miR-7、miR-200b表达水平与CIS病人脑侧支循环分级和美国介入和治疗神经放射学会/介入放射学会(ASITN/SIR)血流分级有关(P<0.05)。miR-7、miR-200b水平预测CIS病人建立三级侧支循环途径的AUC分别为0.894、0.876,灵敏度分别为79.82%、71.90%,特异度分别为86.91%、84.73%。结论CIS病人血清miR-7、miR-200b低表达,且在脑侧支循环分级不同的病人存在明显差异,检测血清miR-7、miR-200b水平对CIS病人脑侧支循环途径的预测具有一定价值。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 mir-7 mir-200b 脑侧支循环 血栓
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半滑舌鳎miR-200a和miR-200b前体克隆及其免疫应答分析 被引量：2
10
作者 沙珍霞 陈学杰 +1 位作者 陈亚东 颜慧 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期314-320,共7页
为了探究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)miR-200a和miR-200b在免疫应答中的作用,采用PCR方法克隆了半滑舌鳎miR-200家族的miR-200a和miR-200b的前体序列,长度分别为82和88 bp;用The mfold Web Server和Clustalx1.83软件对其前体序列... 为了探究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)miR-200a和miR-200b在免疫应答中的作用,采用PCR方法克隆了半滑舌鳎miR-200家族的miR-200a和miR-200b的前体序列,长度分别为82和88 bp;用The mfold Web Server和Clustalx1.83软件对其前体序列进行了二级结构和同源性分析,miR-200a和miR-200b都具有典型的颈环结构,与其他物种具有较高的同源性。qRT-PCR分析结果显示,miR-200a和miR-200b在健康半滑舌鳎13种组织(肝脏、肠、脾脏、头肾、后肾、鳃、血液、脑、皮肤、肌肉、胃、心脏和卵巢)中均有表达,miR-200a在头肾中表达量最高,在血液中表达量最低,miR-200b在肝脏中表达量最高,在肌肉中表达量最低;miR-200a和miR-200b在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染半滑舌鳎后不同时间点的4种免疫相关组织(肝脏、肠、脾脏和头肾)中的表达呈现出先上调后下降的规律,但表达达到峰值的时间点有所不同。miR-200a在肝脏和脾中的表达峰值出现在鳗弧菌感染后6h,在肠和头肾中则是鳗弧菌感染后12h,miR-200b在肠、脾和头肾中均在鳗弧菌感染后12h达到表达高峰;miR-200a和miR-200b在脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、葡聚糖(WGP)、聚肌胞苷酸(poly I:C)4种病原模拟物刺激后的半滑舌鳎肝脏细胞系中呈现出上调表达趋势,其中Poly I:C刺激半滑舌鳎肝脏细胞系后miR-200a上调表达趋势明显,6h的表达量为0h的9倍,在WGP刺激半滑舌鳎肝脏细胞后miR-200b上调表达趋势明显,2h的表达量为0的9倍。研究结果为揭示miRNA在半滑舌鳎免疫应答中的作用提供了科学依据。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 mir-200a mir-200b 前体克隆 荧光实时定量PCR 免疫应答
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miR-200b调控肌球蛋白轻链激酶／磷酸化肌球蛋白轻链信号通路对肠上皮紧密连接的影响 被引量：3
11
作者 沈玉洁 张琮 陈颖伟 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期538-541,共4页
目的探究mi R-200b对肠上皮紧密连接的影响及作用机制。方法利用阴性对照慢病毒及表达mi R-200b的慢病毒感染Caco-2细胞形成NC株和200b株,以10 ng/m L肿瘤坏死因子(TNF-α)处理建立体外肠上皮损伤模型,并分为NC组、NC+TNF-α组、200b组... 目的探究mi R-200b对肠上皮紧密连接的影响及作用机制。方法利用阴性对照慢病毒及表达mi R-200b的慢病毒感染Caco-2细胞形成NC株和200b株,以10 ng/m L肿瘤坏死因子(TNF-α)处理建立体外肠上皮损伤模型,并分为NC组、NC+TNF-α组、200b组和200b+TNF-α组。测量4组细胞对肠上皮跨膜电阻抗(TEER)及对异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FITC-dextran)的通透性;Western blot检测肌球蛋白轻链激酶(MLCK)及磷酸化肌球蛋白轻链(P-MLC)表达。结果与NC组相比,NC+TNF-α组TEER值降低、对FITC-dextran通透量显著增高、MLCK和P-MLC表达上调,差异均有统计学意义(P?<0.05)。与NC+TNF-α组相比,200b+TNF-α组TEER显著升高、FITC-dextran通透量显著降低、MLCK和P-MLC表达显著下调,差异均有统计学意义(P?<0.05)。结论 mi R-200b可调控MLCK/P-MLC信号通路修复TNF-α导致的肠上皮紧密连接损伤。 展开更多
关键词 mir-200b 肠上皮紧密连接 肌球蛋白轻链激酶 肌球蛋白轻链磷酸化 细胞
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宫颈癌组织miR-200b-5p、miR-424-5p表达与临床病理特征、PI3K/AKT/mTOR信号通路和预后的关系研究 被引量：4
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作者 王燕 高婉 +3 位作者 王聪 李亚萍 李冰琳 张淑会 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第19期3714-3718,共5页
目的:探讨宫颈癌组织微小核糖核酸(miRNA)-200b-5p、miR-424-5p表达与临床病理特征、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路和预后的关系。方法:选取2016年7月~2019年6月西安市中心医院收治的123... 目的:探讨宫颈癌组织微小核糖核酸(miRNA)-200b-5p、miR-424-5p表达与临床病理特征、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)信号通路和预后的关系。方法:选取2016年7月~2019年6月西安市中心医院收治的123例宫颈癌患者,采用定量聚合酶链式反应(qPCR)检测癌组织与癌旁组织中miR-200b-5p、miR-424-5p、PI3K信使RNA(mRNA)、AKT mRNA、mTOR mRNA表达。分析miR-200b-5p、miR-424-5p表达与PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达的相关性及与临床病理特征的关系。采用K-M法绘制不同miR-200b-5p、miR-424-5p表达宫颈癌患者生存曲线。结果:与癌旁组织比较,宫颈癌组织中miR-200b-5p、miR-424-5p表达降低,PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达升高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,宫颈癌组织中miR-200b-5p、miR-424-5p表达与PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达均呈负相关,PI3K mRNA、AKT mRNA、mTOR mRNA表达呈两两相关(P<0.05)。miR-200b-5p、miR-424-5p表达与宫颈癌分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。随访3年,123例宫颈癌患者累积生存率为62.60%(77/123)。K-M生存曲线分析显示,miR-200b-5p、miR-424-5p高表达组累积生存率分别高于miR-200b-5p、miR-424-5p低表达组(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中miR-200b-5p、miR-424-5p低表达,与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移、PI3K/AKT/mTOR信号通路和预后有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 mir-200b-5p mir-424-5p 病理特征 PI3K/AKT/mTOR信号通路 预后
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miR-200b-3p/NBR1轴对乳腺癌细胞自噬及生长的影响 被引量：3
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作者 蒋雪梅 易瑛 +1 位作者 陈宇 杨诚诚 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第12期1259-1266,共8页
目的miR-200b-3P靶向NBR1调控乳腺癌自噬的作用仍未完全探索,文章旨在探讨miR-200b-3p是否靶向NBR1影响乳腺癌细胞自噬及生长。方法介绍些分组选择人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)为研究对象,分为阴性对照组(转染mimic NC或inhibitor NC)、miR... 目的miR-200b-3P靶向NBR1调控乳腺癌自噬的作用仍未完全探索,文章旨在探讨miR-200b-3p是否靶向NBR1影响乳腺癌细胞自噬及生长。方法介绍些分组选择人乳腺癌细胞(MDA-MB-453)为研究对象,分为阴性对照组(转染mimic NC或inhibitor NC)、miR-20Ob-3p mimic组(转染miR-200b-3p模拟物)、miR-200b-3p inhibitor组(转染miR-200b-3p抑制剂),采用CCK-8法和克隆形成实验检测各组细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Tmnswell实验检测细胞侵袭能力;透射电镜观察细胞超微结构;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-200b-3p mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blot)检测Beclin-1、P62、LC3Ⅱ/Ⅰ、NBR1蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证miR-200b-3p与NBR1之间的靶向关系。结果qRT-PCR检测结果显示,与mimic NC组(1.000±0.069)比较,miR-200b-3p mimic组miR-200b-3p mRNA表达(1.314±0.093)明显升高;与inhibitor NC组(1.009±0.055)比较,miR-200b-3p inhibitor组miR-200b-3p mRNA表达(0.581±0.031)明显降低(P<0.05);与miR-200b-3p mimic组比较,miR-200b-3p inhibitor组miR-200b-3p mRNA表达明显降低(P<0.05)。细胞侵袭结果显示,与mimic NC组比较,miR-200b-3p mimic组穿过基膜的细胞数明显降低(P<0.01),与inhibitor NC组比较,miR-200b-3p in-hibitor组穿过基膜的细胞数明显升高(P<0.0l),与miR-200b-3p mimic组比较,miR-200b-3p inhibitor组穿过基膜的细胞数明显升高(P<0.05)。细胞周期阻滞结果显示,与mimic NC组比较,miR-200h-3p mimic组细胞在G2/M期、S期均明显减少,G1/G0期细胞均明显增多,与inhibitor NC组比较,miR-200b-3p inhihitor组细胞在G2/M期、S期均明显增多(P<0.05),G1/G0期细胞均明显减少(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,与mimic NC组比较,miR-200b-3p mimic组细胞中Beclin-1、LC3II/I蛋白水平明显升高,P62蛋白表达明显降低(P<0.01),与inhibitor NC组比较,miR-20Ob-3p inhibitor组细胞中Beclin-1、LC3II/I蛋白水平明显降低,P62蛋白表达明显升高(P<0.01)。Weatem blot检测结果显示NBR1蛋白表达于转染miR-200b-3p mimic后明显降低,转染miR-200b-3p inhibitor后明显升高(P<0.01)。结论miR-200b-3p mimic可能通过靶向NBR1表达抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖、侵袭,促进细胞凋亡及自噬。 展开更多
关键词 乳腺癌 自噬 mir-200b-3p 细胞侵袭
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miR-200b调控PDCD4的表达对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响 被引量：2
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作者 李娟 高青山 +1 位作者 牟成金 何力 《局解手术学杂志》 2020年第5期358-362,共5页
目的探讨miR-200b对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响及其可能的分子机制。方法利用荧光实时定量PCR检测人乳腺癌组织及乳腺癌细胞株中miR-200b的表达差异;利用生物信息学方法预测miR-200b的靶基因,并使用免疫蛋白印迹实验对靶基因的表达进... 目的探讨miR-200b对乳腺癌细胞增殖及侵袭的影响及其可能的分子机制。方法利用荧光实时定量PCR检测人乳腺癌组织及乳腺癌细胞株中miR-200b的表达差异;利用生物信息学方法预测miR-200b的靶基因,并使用免疫蛋白印迹实验对靶基因的表达进行验证;分别将miR-200b siRNA、PDCD4 mimics以及相应对照miRNA转染MCF-7细胞,通过CCK-8实验检测细胞的增殖能力;采用Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭能力。结果miR-200b在乳腺癌组织中呈低表达水平,进一步抑制miR-200b的表达,乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力显著增强(P<0.05);将miR-200b siRNA、PDCD43′-UTR共转染到乳腺癌MCF-7细胞中,双荧光素酶报告基因结果显示抑制miR-200b的表达后,PDCD4的表达及活性相应上调(P<0.05);同时通过蛋白免疫印迹实验可以发现,抑制miR-200b表达后,PDCD4蛋白表达含量降低,乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力明显增强(P<0.05);而过表达PDCD4后PDCD4蛋白表达含量增加(P<0.05),乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论miR-200b可靶向上调PDCD4基因的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖及侵袭能力。 展开更多
关键词 mir-200b 乳腺癌 PDCD4 增殖 侵袭 基因治疗
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MiR-200b通过调控PIK3CA/AKT通路抑制大鼠角膜血管新生 被引量：5
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作者 李雪 曹浪 +1 位作者 甘敏 周善璧 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期407-413,共7页
目的探讨microRNA-200b(miR-200b)在大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成中的作用及其调节机制。方法24只雌性SD大鼠采用一眼经缝线法构建CNV模型(实验组),另一眼作为正常对照组,于裂隙灯下观察建模后第4、7、14天角... 目的探讨microRNA-200b(miR-200b)在大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成中的作用及其调节机制。方法24只雌性SD大鼠采用一眼经缝线法构建CNV模型(实验组),另一眼作为正常对照组,于裂隙灯下观察建模后第4、7、14天角膜新生血管情况,采用HE染色观察角膜组织结构改变及炎性细胞浸润情况,RT-PCR检测造模后第14天各组大鼠角膜组织中miR-200b以及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达。利用脂质体转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),分为miR-200b模拟物(miR-200b mimic)组、阴性对照(miR-NC)组、空白对照(CON)组,利用RT-PCR验证转染效果,分别采用CCK-8检测HUVECs增殖能力,划痕实验检测HUVECs迁移能力,Matrigel胶成管实验检测HUVECs管腔形成能力。并通过Western blot检测VEGF及PIK3CA、AKT蛋白的表达。结果成功构建大鼠CNV模型,HE染色显示与正常组相比,缝线后第4、7、14天,大鼠角膜组织排列紊乱,炎性细胞浸润逐渐加重(P<0.05),RT-PCR结果显示缝线后第14天角膜组织中miR-200b表达明显降低,而VEGF表达明显升高(P<0.01)。与CON组和miR-NC组相比,miR-200b mimic组中miR-200b相对表达量显著升高(P<0.01),而增殖、迁移及管腔形成能力显著下降(P<0.05),转染miR-200b mimic后,HUVECs中VEGF、PIK3CA、p-AKT蛋白表达均明显下降(P<0.05)。结论miRNA-200b可显著抑制HUVECs的增殖、迁移及成管能力,可能通过抑制PIK3CA/AKT通路参与CNV的发生和发展。 展开更多
关键词 角膜新生血管 mir-200b PIK3CA/AKT通路 人脐静脉内皮细胞
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miR-200b介导血肿瘤屏障通透性增加的机制 被引量：1
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作者 马腾 薛一雪 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第1期1-5,共5页
目的:研究微小RNA(microRNA,miRNA)miR-200b是否介导血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性增加。方法:测量跨内皮阻抗值(TEER)、辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血脑屏障(bloodbrain barrier,BBB)和BTB通透性的改变,应用Real-time... 目的:研究微小RNA(microRNA,miRNA)miR-200b是否介导血肿瘤屏障(blood-tumor barrier,BTB)通透性增加。方法:测量跨内皮阻抗值(TEER)、辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析血脑屏障(bloodbrain barrier,BBB)和BTB通透性的改变,应用Real-time PCR检测血脑屏障BBB和BTB大鼠脑微血管内皮细胞(rat cerebral microvascular endothelial cell RCMEC,ECs)miR-200b的表达,应用miR-200b agomir和miR-200b antagomir分别转染GECs(ECs和U87脑胶质瘤细胞共培养的细胞)后分析血肿瘤屏障的通透性改变;应用Western blot检测紧密连接相关蛋白ZO-1(zonula occludens-1)的表达;应用免疫荧光方法观察GECs紧密连接相关蛋白ZO-1和丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)结构和分布的改变。结果:与BBB相比,BTB的TEER值显著降低,HRP显著升高;与BBB的ECs相比,GECs内源性miR-200b表达显著降低;miR-200b agomir和miR-200b antagomir成功转染到GECs中;miR-200b agomir组TEER值显著升高,HRP流量显著降低,以及ZO-1表达显著升高,抑制ZO-1由内皮细胞的边缘向细胞质转移,抑制丝状肌动蛋白由细胞膜边缘向细胞中央区分布,F-actin分布于细胞边缘明显增加,应力纤维形成明显减少;miR-200b antagomir结果与miR-200b agomir实验结果相反。结论:MiR-200b介导BTB通透性增加。 展开更多
关键词 mir-200b 血脑屏障 血肿瘤屏障 ZO-1 肌动蛋白重排
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miR-200b靶向MAP2对缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响 被引量：3
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作者 王宏宇 董俊兴 +1 位作者 陈阵仁 任皓楠 《分子诊断与治疗杂志》 2021年第5期757-761,共5页
目的研究miR-200b对缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响及潜在机制。方法将大鼠皮质神经细胞分为正常对照组(不做处理),缺氧缺糖模型组(含0.5 mmol/L连二亚硫酸钠的无糖Earle.s液培养48 h),anti-miR-NC组、anti-miR-200b组、miR... 目的研究miR-200b对缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤的影响及潜在机制。方法将大鼠皮质神经细胞分为正常对照组(不做处理),缺氧缺糖模型组(含0.5 mmol/L连二亚硫酸钠的无糖Earle.s液培养48 h),anti-miR-NC组、anti-miR-200b组、miR-NC组和miR-200b组,qRT-PCR检测细胞中miR-200b、calpain1 m RNA和MAP2 mRNA的含量,Western blot测定MAP2、calpain1、凋亡相关蛋白pro-caspase3和cl-caspase3的水平,CCK8法和流式细胞术分别检测细胞存活率和凋亡率,双荧光素酶报告系统验证miR-200b与MAP2的靶向关系。结果与对照组相比,缺氧缺糖模型组大鼠皮质神经元细胞中miR-200b和calpain1 mRNA水平均升高(P<0.05),MAP2 mRNA水平降低(P<0.05),细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);在缺氧缺糖模型组大鼠皮质神经元细胞中抑制miR-200b可提高细胞存活率(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05),提高pro-caspase3、MAP2mRNA和蛋白含量(P<0.05),降低cl-caspase3、calpain1 mRNA和蛋白含量(P<0.05),过表达miR-200b则结果相反;双荧光素酶报告实验结果表明,MAP2是miR-200b的靶点。结论miR-200b可能靶向MAP2调控缺氧缺糖诱导的大鼠皮质神经细胞损伤和凋亡。 展开更多
关键词 大鼠皮质神经细胞 mir-200b 缺氧缺糖 MAP2 存活率 凋亡率
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赤芍总苷通过调控miR-200b-3p/FSCN1轴抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移 被引量：5
18
作者 张媛媛 李文芸 +1 位作者 古扎丽努尔·阿不力孜 古里给娜·阿布都热西提 《中国优生与遗传杂志》 2021年第7期899-904,共6页
目的探讨赤芍总苷对卵巢癌增殖、侵袭和迁移的影响及可能机制。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,经不同剂量(50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL)赤芍总苷干预24 h、或转染miR-200b-3p模拟物至SKOV3细胞、或200μg/mL的赤芍总苷干预转染miR-20... 目的探讨赤芍总苷对卵巢癌增殖、侵袭和迁移的影响及可能机制。方法体外培养卵巢癌细胞SKOV3,经不同剂量(50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL)赤芍总苷干预24 h、或转染miR-200b-3p模拟物至SKOV3细胞、或200μg/mL的赤芍总苷干预转染miR-200b-3p抑制剂的SKOV3细胞24 h后,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,Transwell检测细胞侵袭,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-200b-3p表达,Western blot检测细胞中肌动蛋白成束蛋白(FSCN1)表达。双荧光素酶报告基因实验验证FSCN1和miR-200b-3p调控关系。结果赤芍总苷可降低SKOV3细胞光密度(OD)值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及细胞中FSCN1蛋白表达(P<0.05),而促进miR-200b-3p表达(P<0.05),且呈剂量依赖性。过表达miR-200b-3p可降低SKOV3细胞OD值、克隆形成数、划痕愈合率、侵袭数及细胞中FSCN1蛋白表达(P<0.05)。miR-200b-3p靶向负调控FSCN1。敲减miR-200b-3p减弱赤芍总苷对SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论赤芍总苷可能通过调控miR-200b-3p/FSCN1轴抑制卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 赤芍总苷 卵巢癌 mir-200b-3p 细胞增殖 侵袭
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miR-200b-3p诱导FOSL2抑制子宫内膜癌细胞增殖和转移的机制研究 被引量：1
19
作者 王静 何丽杰 韩喆 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2024年第12期1089-1095,共7页
目的本研究旨在探究miR-200b-3p如何通过诱导激活蛋白1(AP1)转录家族的FOS样抗原2(FOSL2)的表达来抑制子宫内膜癌(EC)细胞的增殖和转移。方法EC细胞系HEC-1-A细胞分为12组:NC-mimic(转染阴性对照NC mimic)、miR-200b-3p mimic(转染miR-2... 目的本研究旨在探究miR-200b-3p如何通过诱导激活蛋白1(AP1)转录家族的FOS样抗原2(FOSL2)的表达来抑制子宫内膜癌(EC)细胞的增殖和转移。方法EC细胞系HEC-1-A细胞分为12组:NC-mimic(转染阴性对照NC mimic)、miR-200b-3p mimic(转染miR-200b-3p mimic)、NC-inhibitor(转染阴性对照NC inhibitor)、miR-200b-3p inhibitor组(转染miR-200b-3p inhibitor)、si-NC(转染阴性对照si-NC)、si-FOSL2(转染si-FOSL2)、oe-NC(转染阴性对照oe-NC)、oe-FOSL2组(转染oe-FOSL2)、miR-200b-3p mimic联合oe-NC组(共转染miR-200b-3p mimic联合oe-NC)、miR-200b-3p mimic联合oe-FOSL2组(共转染miR-200b-3p mimic联合oe-FOSL2)、miR-200b-3p inhibitor联合si-NC组(共转染miR-200b-3p inhibitor联合si-NC)、miR-200b-3p inhibitor联合si-FOSL2组(共转染miR-200b-3p inhibitor联合si-FOSL2)。采用实时荧光定量PCR、Western blot法、CCK-8实验、划痕实验、Transwell^(TM)实验检测miR-200b-3p mRNA表达量、FOSL2 mRNA和蛋白表达水平,细胞增殖、侵袭和迁移。结果在EC细胞系中,miR-200b-3p表达显著下调,而FOSL2表达显著上调。与NC-mimic组相比,miR-200b-3p mimic组FOSL2、神经钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达显著降低,上皮钙黏素(E-cadherin)表达水平显著升高,细胞增殖、迁移率和穿膜细胞数显著降低。与miR-200b-3p mimic联合oe-NC组相比,miR-200b-3p mimic联合oe-FOSL2组的FOSL2、N-cadherin和Vimentin的表达显著增高,E-cadherin表达水平显著降低,细胞增殖、迁移率和穿膜细胞数显著增高。与NC-inhibitor组相比,miR-200b-3p inhibitor组的FOSL2、N-cadherin和Vimentin的表达显著增高,E-cadherin表达水平显著降低,细胞增殖、迁移率和穿膜细胞数显著增高。与miR-200b-3p inhibitor联合si-NC组相比,miR-200b-3p inhibitor联合si-FOSL2组的FOSL2、N-cadherin和Vimentin表达显著降低,E-cadherin表达水平显著升高,细胞增殖、迁移率和穿膜细胞数显著降低。结论miR-200b-3p在EC细胞中的表达下调,可通过调控上皮间质转化(EMT)过程来抑制EC细胞的增殖、侵袭和迁移过程,其机制与其靶向负调控FOSL2的表达有关。 展开更多
关键词 mir-200b-3p FOSL2 子宫内膜癌(EC) 细胞增殖 细胞转移 上皮间质转化(EMT)
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miR-200b、miR-200c靶向肝细胞生长因子抑制结直肠癌细胞 被引量：1
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作者 徐永良 刘贵波 +3 位作者 马英 李明秋 潘艳明 张大伟 《智慧健康》 2023年第23期130-133,共4页
目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结... 目的研究miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖的机制。方法采用生物信息学软件预测和验证miR-200b、miR-200c靶基因,分析miR-200b、miR-200c过表达抑制HGF表达,并分析miR-200b、miR-200c在体外影响结直肠癌细胞增殖活性的情况。结果培养1d、2d、3d,阴性对照模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b模拟物、miR-200c模拟物、miR-200b/c模拟物(P<0.05),阴性对照抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂、miR-200b/c抑制剂(P<0.05),miR-200b模拟物、miR-200c模拟物的结直肠癌细胞增殖活性均高于miR-200b/c模拟物(P<0.05),miR-200b抑制剂、miR-200c抑制剂的结直肠癌细胞增殖活性均低于miR-200b/c抑制剂(P<0.05)。结论miR-200b、miR-200c对肝细胞生长因子进行靶向调节抑制结直肠癌细胞增殖,可以作为潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 结直肠癌 细胞增殖 mir-200b mir-200C 靶向调节 肝细胞生长因子 机制
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