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五虎汤调控miR-182-5p表达靶向NOX4/NLRP3/IL-1β信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制研究
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作者 郭超凡 李娇艳 +5 位作者 田娅玲 舒文俊 戴孟庭 周娅微 邓婷 董晓斐 《湖南中医药大学学报》 2026年第1期14-22,共9页
目的探讨五虎汤通过调控miR-182-5p表达靶向烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制。方法将42只Balb/c小鼠随机分为空白组(A组,... 目的探讨五虎汤通过调控miR-182-5p表达靶向烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路缓解哮喘小鼠气道炎症的作用机制。方法将42只Balb/c小鼠随机分为空白组(A组,6只)和造模组(36只)。通过腹腔注射屋尘螨诱导小鼠致敏,并予聚肌胞苷酸模拟病毒感染诱发哮喘急性发作模型。将造模成功的36只小鼠随机分为6组[模型组(B组)、miR-182-5p agomir组(C组)、MicroRNA Agomir negative control组(D组)、五虎汤+miR-182-5p agomir组(E组)、五虎汤+MicroRNA Agomir negative control组(F组)、五虎汤组(G组)],每组6只。C、D组给予纯水灌胃并分别予miR-182-5p agomir、MicroRNA Agomir negative control滴鼻,E、F、G组予以五虎汤灌胃并分别予miR-182-5p agomir、MicroRNA Agomir negative control、DEPC水滴鼻,A、B组予等体积纯水灌胃和DEPC水滴鼻,以上处理均1次/d,连续处理7 d后处死小鼠取材。观察小鼠一般行为学表现;HE、Masson染色法观察小鼠肺组织气道炎症细胞浸润、气道胶原纤维沉积情况;Western blot法检测小鼠肺组织中NOX4、NLRP3、IL-1β的蛋白表达水平;qPCR检测miR-182-5p含量。结果与A组相比,B组小鼠可见不同程度的频繁抓鼻、呼吸加快、腹肌抽动,甚至口唇青紫,行为改变显著。与B组相比,C、F、G组行为改变好转,偶有挠鼻、呼吸频率减慢,无喘息、缺氧表现;E组呼吸频率明显减慢,呼吸平稳;D组行为学无明显改善,呼吸频率快。与A组相比,B组可见大量炎症细胞浸润,支气管间隙水肿;气道及血管下胶原纤维明显沉积。与B组相比,C、F、G组病理表现缓解,炎症细胞浸润减少,间质水肿不同程度吸收,胶原纤维沉积减少;E组改变更加明显,仅有少量炎症细胞浸润,无明显间质水肿,支气管下方胶原纤维沉积明显减少;D组HE染色仍见较多炎症细胞,胶原纤维沉积改善不明显。与A组相比,B组miR-182-5p含量下降(P<0.05),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。与B组相比,C、E、F、G组小鼠miR-182-5p含量上升(P<0.05,P<0.001),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达下降(P<0.05,P<0.001)。与C组相比,D组miR-182-5p含量下降(P<0.05),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。与E组相比,F、G组miR-182-5p含量下降(P<0.05),NOX4、NLRP3、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05)。结论五虎汤可以改善哮喘小鼠哮喘表现,减轻气道炎症,可能与促进miR-182-5p高表达、抑制NOX4/NLRP3/IL-1β通路激活有关。 展开更多
关键词 支气管哮喘 五虎汤 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 mir-182-5p NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3 白细胞介素-
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LncRNA SFTA1P通过调控miR-182-5p/FN1通路促进肾透明细胞癌细胞增殖与迁移 被引量:2
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作者 向威 吕磊 +1 位作者 郑福鑫 袁敬东 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第1期41-48,共8页
目的探讨长链非编码RNA表面活性剂相关1假基因(SFTA1P)通过调控微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/纤连蛋白1(FN1)通路促进肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖与迁移的分子机制。方法应用GEPIA2软件探究TCGA数据库中SFTA1P在ccRCC组织中的表达;实时... 目的探讨长链非编码RNA表面活性剂相关1假基因(SFTA1P)通过调控微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/纤连蛋白1(FN1)通路促进肾透明细胞癌(ccRCC)细胞增殖与迁移的分子机制。方法应用GEPIA2软件探究TCGA数据库中SFTA1P在ccRCC组织中的表达;实时定量PCR(qPCR)检测SFTA1P在ccRCC组织、正常肾脏组织及ccRCC细胞系中的表达;亚细胞定位实验探究SFTA1P在ccRCC细胞系人肾细胞腺癌细胞(ACHN)中的定位;将ACHN细胞分为si-Con组、si-SFTA1P#2组、mimic NC组、miR-182-5p mimic组、anti-miR-Con组、anti-miR-182-5p组、anti-miR-182-5p+si-FN1组、si-Con+anti-miR-Con组、si-SFTA1P#2+anti-miR-Con组及si-SFTA1P#2+anti-miR-182-5p组;CCK-8与transwell小室实验检测细胞增殖与迁移能力;qPCR、Western blot和双荧光素酶报告基因实验检测SFTA1P、miR-182-5p和FN1的调控关系。结果TCGA数据库分析显示,SFTA1P在ccRCC组织中高表达(P<0.05);与正常肾脏组织比较,SFTA1P在ccRCC组织中表达升高(P<0.01);ccRCC细胞系786-O、SN12-PM6、ACHN及A498中SFTA1P表达明显高于人肾近曲小管细胞HK-2(均P<0.01);亚细胞定位实验显示SFTA1P主要分布于ACHN细胞的细胞质中;与si-Con组比较,si-SFTA1P#2组ACHN细胞增殖与迁移能力降低,FN1 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05);与mimic NC组比较,miR-182-5p mimic组ACHN细胞FN1 mRNA及蛋白表达降低(P<0.01);与anti-miR-Con组比较,anti-miR-182-5p组ACHN细胞FN1 mRNA及蛋白表达增加,细胞增殖与迁移能力增强(P<0.05);与anti-miR-182-5p组相比,anti-miR-182-5p+si-FN1组ACHN细胞增殖与迁移能力降低(P<0.05);与si-SFTA1P#2+anti-miR-Con组比较,si-SFTA1P#2+anti-miR-182-5p组ACHN细胞增殖与迁移能力增强,FN1 mRNA及蛋白表达增加(P<0.05)。结论SFTA1P在ccRCC中高表达,其通过调控miR-182-5p/FN1通路促进ccRCC细胞的增殖与迁移。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 SFTA1p mir-182-5p FN1 增殖 迁移
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血清miR-140-5p和miR-182-5p表达对肺癌诊断及预后的临床价值
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作者 罗红兰 刘凯 +3 位作者 童凯 杨国栋 周冬 陈畇尚 《国际检验医学杂志》 2026年第1期1-6,13,共7页
目的探讨微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、miR-182-5p在肺癌患者血清中的表达水平及其对患者诊断及预后的临床价值。方法选取2020年5月至2021年6月在长江大学附属黄冈市中心医院确诊的98例肺癌患者作为研究组,根据3年预后将患者分为生存组... 目的探讨微小RNA-140-5p(miR-140-5p)、miR-182-5p在肺癌患者血清中的表达水平及其对患者诊断及预后的临床价值。方法选取2020年5月至2021年6月在长江大学附属黄冈市中心医院确诊的98例肺癌患者作为研究组,根据3年预后将患者分为生存组(60例)和死亡组(38例),并选取同期体检健康者100例作为对照组,获取所有受试者的血清,采用实时荧光定量PCR检测血清中miR-140-5p、miR-182-5p相对表达水平;通过多因素Cox回归分析肺癌患者死亡的风险因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-140-5p、miR-182-5p相对表达水平对肺癌患者死亡的诊断价值。结果相比于对照组,研究组miR-140-5p水平明显下降(P<0.05),miR-182-5p水平明显增高(P<0.05)。血清miR-140-5p和miR-182-5p相对表达水平与肿瘤最大径、远处转移、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。生存组与死亡组TNM分期、miR-140-5p、miR-182-5p、胃泌素释放肽前体(ProGRP)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分Ⅲ+Ⅳ期、血清miR-182-5p相对表达水平升高是肺癌患者死亡的独立危险因素(P<0.05),血清miR-140-5p相对表达水平升高是肺癌患者死亡的保护因素(P<0.05)。血清miR-140-5p、miR-182-5p联合诊断肺癌患者死亡的曲线下面积(AUC)为0.939(95%CI:0.892~0.986),联合诊断的AUC大于单独诊断(P<0.05)。结论miR-140-5p、miR-182-5p表达与肺癌疾病进展及患者预后密切相关,有望成为预后标志物。 展开更多
关键词 肺癌 微小RNA-140-5p 微小RNA-182-5p 预后
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血清miR-760-3p和miR-182-5p在急性缺血性脑卒中患者中的表达及与预后的关系 被引量:1
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作者 段凯强 吴艳峰 +3 位作者 薛嘉海 王巍 李春玲 李娟 《中华全科医学》 2025年第10期1701-1705,共5页
目的通过检测急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清miR-760-3p和miR-182-5p表达,探究其与患者病情及预后的关系。方法选取张家口市第一医院2022年2月—2024年2月收治的179例AIS患者为观察组,根据病情严重程度分为轻度组(59例)、中度组(75例)... 目的通过检测急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清miR-760-3p和miR-182-5p表达,探究其与患者病情及预后的关系。方法选取张家口市第一医院2022年2月—2024年2月收治的179例AIS患者为观察组,根据病情严重程度分为轻度组(59例)、中度组(75例)和重度组(45例),根据患者预后情况分为预后良好组(132例)和预后不良组(47例),另选同期本院179例体检健康者作为对照组。分析血清miR-760-3p、miR-182-5p与NIHSS评分的相关性,AIS患者预后的影响因素,血清miR-760-3p、miR-182-5p对AIS患者预后的预测价值。结果观察组、预后不良组血清miR-760-3p、miR-182-5p水平分别低于对照组和预后良好组(P<0.05)。随着病情不断加重,患者血清miR-760-3p、miR-182-5p水平依次降低(P<0.05)。血清miR-760-3p、miR-182-5p水平与患者NIHSS评分呈负相关关系(r s=-0.578、-0.618,P<0.001)。年龄、高血压史、吸烟史和血清miR-760-3p、miR-182-5p水平均为AIS患者预后不良的影响因素(P<0.05)。两者联合预测AIS患者预后的AUC高于miR-760-3p、miR-182-5p单独预测(P<0.05)。结论miR-760-3p和miR-182-5p在AIS患者血清中表达下调,与患者预后密切相关。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 mir-760-3p mir-182-5p 预后
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miR-182-5p靶向XBP1对氧糖剥夺/复氧诱导的神经细胞损伤的影响 被引量:1
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作者 孟智敏 刘品 +2 位作者 倪秀娟 王莉 乔丽娜 《中国细胞生物学学报》 2025年第5期1092-1100,共9页
该文探究mi R-182-5p靶向内质网应激相关蛋白剪接型X盒结合蛋白1(X-box bindingprotein1,XBP1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucosedeprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的神经细胞损伤的影响。选择大鼠神经细胞(PC-12)对研究对象,随机将... 该文探究mi R-182-5p靶向内质网应激相关蛋白剪接型X盒结合蛋白1(X-box bindingprotein1,XBP1)对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucosedeprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的神经细胞损伤的影响。选择大鼠神经细胞(PC-12)对研究对象,随机将其分为:Control组、OGD/R组、mi R-NC组(OGD/R+转染mi R-NC)、mi R-182-5pmimics组(OGD/R+转染mi R-182-5pmimics)、mi R-182-5pmimics+pc DNA-NC组(OGD/R+转染mi R-182-5pmimics+pc DNANC)、mi R-182-5pmimics+pc DNA-XBP1组(OGD/R+转染mi R-182-5pmimics+pc DNA-XBP1)。除Control组常规培养外,其余各组均进行OGD/R诱导。q RT-PCR法检测细胞mi R-182-5p、XBP1m RNA表达情况;CCK8检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA法检测细胞SOD、MDA、IL-6、TNF-α水平;Western blot检测细胞中PCNA、caspase-9、Bax、XBP1蛋白的表达情况;双荧光素酶实验检测mi R-182-5p与XBP1互作情况。结果显示,与Control组相比,OGD/R组mi R-182-5p表达、存活率、克隆数、SOD水平、PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05);与OGD/R组、mi R-NC组相比,mi R-182-5pmimics组mi R-182-5p表达、存活率、克隆数、SOD水平及PCNA蛋白表达水平升高(P<0.05),凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平降低(P<0.05);与mi R-182-5p mimics组、mi R-182-5p mimics+pc DNA-NC组相比,mi R-182-5pmimics+pc DNA-XBP1组存活率、克隆数、SOD水平及PCNA蛋白表达水平降低(P<0.05),凋亡率、MDA、IL-6、TNF-α水平以及Bax、caspase-9、XBP1蛋白表达水平升高(P<0.05);与mi R-NC+XBP1-WT组相比,mi R-182-5pmimics+XBP1-WT组双荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。总之,mi R-182-5p可能通过靶向抑制XBP1表达,进而抑制OGD/R诱导的神经细胞损伤。 展开更多
关键词 氧糖剥夺/复氧 mir-182-5p 内质网应激相关蛋白剪接型X盒结合蛋白1 神经细胞损伤
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c-Jun靶向调控miR-182-5p转录在偏瘫型脑瘫上肢功能康复中的机制研究
6
作者 王优 徐韵贤 +5 位作者 伍启泓 蔡凯茵 吴霖林 刘力茹 徐开寿 唐红梅 《广东医学》 2025年第3期399-406,共8页
目的探讨转录因子c-Jun能否靶向结合miR-182-5p,解析其靶向结合的具体位点,并探讨强制性运动疗法(CIMT)能否通过促进c-Jun/miR-182-5p转录以提高偏瘫型脑瘫(HCP)小鼠上肢运动功能。方法慢病毒转染技术构建c-Jun敲低及过表达的Neuro-2a... 目的探讨转录因子c-Jun能否靶向结合miR-182-5p,解析其靶向结合的具体位点,并探讨强制性运动疗法(CIMT)能否通过促进c-Jun/miR-182-5p转录以提高偏瘫型脑瘫(HCP)小鼠上肢运动功能。方法慢病毒转染技术构建c-Jun敲低及过表达的Neuro-2a细胞并建立稳转株。蛋白免疫印记(Western blot)验证各组细胞c-Jun蛋白的表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)验证miR-182-5p的表达情况;染色质免疫共沉淀(ChIP)验证c-Jun与miR-182-5p的结合位点。随后,构建HCP小鼠模型,予以持续2周的CIMT干预。行为学试验评估CIMT的干预效果,RT-qPCR实验验证各组小鼠左侧大脑运动皮层M1区c-Jun、miR-182-5p的表达情况。结果携带小干扰RNA(siRNA)的c-Jun敲低慢病毒si3(病毒滴度:5E+8 TU/mL)转染Neuro-2a细胞后,c-Jun蛋白表达明显降低(P<0.01);而c-Jun过表达(OE)病毒OE(病毒滴度:5E+8 TU/mL)转染Neuro-2a细胞后,c-Jun蛋白的表达显著升高(P<0.001)。miR-182-5p的转录随着c-Jun表达的减少而显著下降(P<0.01);反之,miR-182-5p转录则随之显著增加(P≤0.001),两者呈现协同变化趋势。进一步研究发现c-Jun可与miR-182-5p启动子上游-1000~-1 bp片段中多个位点结合,其中以Site 2(-71~-65 bp)结合最为明显(P<0.001)。动物行为学试验提示,与HCP组相比,HCP+CIMT组小鼠在疲劳转棒试验(P<0.01)、上肢悬吊试验(P<0.01)中所停留时间均显著延长;并且小鼠脑内M1区c-Jun、miR-182-5p转录水平也同步升高(P<0.001)。结论转录因子c-Jun主要通过靶向结合miR-182-5p启动子上游-71~-65 bp激活其转录活性。本研究从转录水平阐述c-Jun/miR-182-5p调控是CIMT提高HCP上肢功能的重要分子学基础。 展开更多
关键词 C-JUN mir-182-5p 转录调控 偏瘫型脑瘫 强制性运动疗法
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黄芩苷对糖尿病大鼠溃疡创面组织中miR-182-5p/CHL1表达的影响
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作者 周宇 向玥腴 +1 位作者 刘艺 吴标良 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第12期2389-2398,共10页
目的:探讨湿润烧伤膏(moist-exposed burn ointment,MEBO)中的活性成分对糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)创面相关因子微小RNA-182-5p(microRNA-182-5p,miR-182-5p)和细胞黏附分子L1样蛋白(cell adhesion molecule L1-like prote... 目的:探讨湿润烧伤膏(moist-exposed burn ointment,MEBO)中的活性成分对糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)创面相关因子微小RNA-182-5p(microRNA-182-5p,miR-182-5p)和细胞黏附分子L1样蛋白(cell adhesion molecule L1-like protein,CHL1)的调控作用。方法:(1)通过网络药理学的方法找出MEBO治疗DFU的活性成分。(2)建立大鼠全层皮肤缺损的溃疡模型,将MEBO中的活性成分黄芩苷(baicalin,BL)分别配制成10、100、200和400μg/mL的溶液外敷于大鼠溃疡创面,观察大鼠创面愈合情况,选择合适的药物浓度用于后续实验。(3)建立非糖尿病大鼠和糖尿病大鼠的溃疡创面模型,观察大鼠创面miR-182-5p和CHL1的表达变化。以非糖尿病大鼠溃疡创面作为对照(control,CON)组,糖尿病大鼠溃疡创面随机分为糖尿病溃疡(diabetic ulcer,DU)模型组、DU+BL组和DU+牛碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor gel,bFGF)凝胶组。CON组和DU组使用生理盐水外敷创面,DU+BL组使用200μg/mL BL溶液外敷创面,DU+bFGF组使用bFGF外涂创面。分别于第1、7、14天计算大鼠创面愈合率并采集创面组织。HE染色观察创面组织形态结构变化;RT-qPCR分析miR-182-5p和CHL1 mRNA的表达情况;Western blot检测CHL1蛋白表达水平。结果:(1)网络药理学结果显示,MEBO中有潜在治疗DFU的活性成分,包括BL、汉黄芩苷及黄芩素等。(2)随着BL的浓度增加,大鼠溃疡创面愈合率逐渐增高(P<0.05)。BL对创面愈合的半最大效应浓度为206.2μg/mL。(3)DU+BL组创面愈合率高于DU组(P<0.05)。miR-182-5p在糖尿病大鼠溃疡创面中高表达(P<0.05),CHL1在糖尿病大鼠溃疡创面中低表达(P<0.05)。结论:BL可能通过调控糖尿病大鼠溃疡创面的miR-182-5p和CHL1表达,促进创面愈合。 展开更多
关键词 糖尿病 溃疡创面 黄芩苷 微小RNA-182-5p 细胞黏附分子L1样蛋白
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急性缺血性脑卒中患者血清miR-214-3p、miR-182-5p、miR-181b表达水平及其临床意义
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作者 武小蒙 郭静 +3 位作者 彭晓 房娉平 张丽霞 胡素芬 《检验医学与临床》 2025年第24期3356-3361,共6页
目的 探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA(miR)-214-3p、miR-182-5p、miR-181b表达水平与病情程度和预后的关系。方法 选取2021年9月至2024年9月邯郸市第一医院收治的178例AIS患者作为观察组,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIH... 目的 探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清微小RNA(miR)-214-3p、miR-182-5p、miR-181b表达水平与病情程度和预后的关系。方法 选取2021年9月至2024年9月邯郸市第一医院收治的178例AIS患者作为观察组,根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,分为轻型组(NIHSS评分<5分)73例、中型组(NIHSS评分5~15分)47例和重型组(NIHSS评分>15分)58例。根据治疗后3个月的改良Rankin量表评分,将患者分为预后良好组(0~2分)和预后不良组(3~6分)。选取同期该院100例健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测AIS患者和健康者血清miR-214-3p、miR-182-5p、miR-181b的表达水平。采用多因素Logistic回归分析AIS患者预后不良的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-214-3p、miR-182-5p和miR-181b对AIS患者预后不良的预测价值。结果 AIS患者血清miR-214-3p表达水平高于健康者(P<0.05),而血清miR-182-5p、miR-181b表达水平低于健康者(P<0.05);重型组血清miR-214-3p表达水平高于中型组、轻型组(P<0.05),而血清miR-182-5p、miR-181b表达水平低于中型组、轻型组(P<0.05);中型组血清miR-214-3p表达水平高于轻型组(P<0.05),而血清miR-182-5p、miR-181b表达水平低于轻型组(P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组血清miR-214-3p表达水平升高,血清miR-182-5p、miR-181b表达水平降低(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清miR-214-3p水平升高为AIS患者预后不良的危险因素(P<0.05),血清miR-182-5p、miR-181b水平升高为保护因素(P<0.05)。AIS患者预后不良血清miR-214-3p、miR-182-5p、miR-181b联合预测的曲线下面积(AUC)为0.892,高于3项指标单独预测的AUC(Z_(联合-miR-214-3p)=2.192、P=0.028,Z_(联合-miR-182-5p)=2.145、P=0.032,Z_(联合-miR-181b)=2.242、P=0.025)。结论 AIS患者血清miR-214-3p表达水平升高,血清miR-182-5p和miR-181b表达水平降低,且3项指标与AIS患者病情程度和不良预后紧密相关,可以作为预后不良的预测指标,3项指标联合检测对评估AIS患者预后有重要意义。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 微小RNA-214-3p 微小RNA-182-5p 微小RNA-181b 预后
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miR-182-5p在膀胱癌中的表达及其机制 被引量:5
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作者 郝朝辉 张楠 +1 位作者 陈昆 葛雷 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期527-532,共6页
目的:探究miR-182-5p及FOXO3在膀胱癌中的表达意义及其参与膀胱癌可能的机制。方法:收集2017年6月至2019年6月64例于郑州人民医院行手术切除膀胱癌患者的组织标本和临床资料,采用RT-qPCR检测膀胱癌组织及膀胱癌细胞中的miR-182-5p和FOXO... 目的:探究miR-182-5p及FOXO3在膀胱癌中的表达意义及其参与膀胱癌可能的机制。方法:收集2017年6月至2019年6月64例于郑州人民医院行手术切除膀胱癌患者的组织标本和临床资料,采用RT-qPCR检测膀胱癌组织及膀胱癌细胞中的miR-182-5p和FOXO3表达,按照其表达水平分为miR-182-5p高表达组和miR-182-5p低表达组、FOXO3高表达组和FOXO3低表达组,采用Western blot实验检测FOXO3蛋白的表达。采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-182-5p和FOXO3与膀胱癌患者预后的相关性。采用双荧光素酶报告实验分析miR-182-5p与FOXO3的靶向关系,并采用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot检测转染miR-182-5p抑制剂对FOXO3表达的影响;分别采用CCK-8、Transwell实验和流式细胞术检测转染miR-182-5p抑制剂对T24细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。结果:miR-182-5p在膀胱癌组织中的表达量为2.27±0.66,显著高于癌旁组织的1.04±0.36,两者比较差异具有统计学意义(P<0.001),与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05);FOXO3在膀胱癌组织中低表达,与肿瘤大小、分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关(P<0.05);miR-182-5p高表达组、FOXO3低表达组的患者的生存率显著低于miR-182-5p低表达组、FOXO3高表达组(P=0.038,P=0.004)。T24细胞中miR-182-5p高表达(P<0.05)。抑制miR-182-5p上调FOXO3表达,抑制miR-182-5p表达能抑制T24细胞的增殖和侵袭,促进细胞凋亡(P<0.05)。结论:miR-182-5p在膀胱癌组织中高表达,而FOXO3低表达。miR-182-5p促进膀胱癌细胞的增殖和侵袭,抑制其凋亡,可能与负调控FOXO3有关。 展开更多
关键词 膀胱癌 mir-182-5p FOXO3 增殖 侵袭
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丙泊酚通过miR-182-5p介导HIF-1α通路对缺氧诱导胎盘滋养细胞生物学活性的影响 被引量:5
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作者 孙艺娟 贾杰 +4 位作者 邓恋 漆冬梅 陈祥楠 黎昆伟 王培宗 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第15期1869-1875,共7页
目的 探讨丙泊酚通过miR-182-5p介导HIF-1α通路对缺氧诱导胎盘滋养细胞生物学活性的影响。方法 采用缺氧诱导体外培养的HTR-8/SVneo细胞,丙泊酚干预,采用CCK-8检测细胞的活力、Transwell测定细胞迁移和侵袭,TUNEL检测细胞凋亡。通过qRT... 目的 探讨丙泊酚通过miR-182-5p介导HIF-1α通路对缺氧诱导胎盘滋养细胞生物学活性的影响。方法 采用缺氧诱导体外培养的HTR-8/SVneo细胞,丙泊酚干预,采用CCK-8检测细胞的活力、Transwell测定细胞迁移和侵袭,TUNEL检测细胞凋亡。通过qRT-PCR测量miR-182-5p和HIF-1α相对mRNA表达水平。Western blot检测相关通路蛋白表达水平。结果 与对照组比较,缺氧组细胞迁移和侵袭能力降低,细胞凋亡率升高(P <0.05),miR-182-5p、MMP-9表达水平降低,HIF-1α、VEGF表达水平升高(P <0.05)。与缺氧组比较,丙泊酚干预后,细胞迁移、侵袭能力恢复,细胞凋亡率降低(P <0.05),miR-182-5p、MMP-9表达水平升高,HIF-1α、VEGF表达水平降低(P <0.05)。转染抑制剂后则逆转了丙泊酚的治疗作用。结论 丙泊酚通过调节miR-182-5p/HIF-1α轴改善缺氧诱导的HTR-8/SVneo细胞毒性。 展开更多
关键词 丙泊酚 人绒毛外滋养细胞 先兆子痫 mir-182-5p/HIF-1α轴
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血清miR-182-5p表达水平对脓毒症患儿继发急性肾损伤的早期预测价值 被引量:4
11
作者 陈小冰 张雪梅 +2 位作者 陈求凝 谢邦贵 卢玉朱 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期2131-2135,共5页
目的:探讨血清miR-182-5p表达对脓毒症患儿继发急性肾损伤(AKI)的早期预测价值。方法:选取2016年1月~2019年6月海南省第三人民医院收治的脓毒症患儿196例,分为继发AKI组(AKI组,n=72)和未继发AKI组(非AKI组,n=124),检测两组血清miR-182-5... 目的:探讨血清miR-182-5p表达对脓毒症患儿继发急性肾损伤(AKI)的早期预测价值。方法:选取2016年1月~2019年6月海南省第三人民医院收治的脓毒症患儿196例,分为继发AKI组(AKI组,n=72)和未继发AKI组(非AKI组,n=124),检测两组血清miR-182-5p、血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)及肾损伤分子-1(KIM-1)水平。应用多因素Logistic回归分析脓毒症患儿继发AKI的危险因素。绘制ROC曲线分析血清miR-182-5p、Scr、Cys-C及KIM-1水平对AKI的早期预测价值,Pearson相关分析检测血清miR-182-5p表达水平与Scr、Cys-C及KIM-1的相关性。结果:AKI组血清miR-182-5p(1.46±0.62 vs 0.35±0.08)、Scr(460.28±84.26 vs 90.42±10.35,μmol/L)、Cys-C(1.83±0.57 vs 0.58±0.12,mg/L)及KIM-1(22.90±6.35 vs 4.75±0.62,μg/L)水平明显高于非AKI组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析发现血清miR-182-5p(OR=2.903,95%CI:1.870~5.116)、Scr(OR=1.704,95%CI:1.105~2.940)、Cys-C(OR=2.063,95%CI:1.434~3.970)及KIM-1(OR=2.530,95%CI:1.524~4.613)水平升高是脓毒症患儿继发AKI的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-182-5p、Scr、Cys-C及KIM-1水平四项联合预测脓毒症患儿继发AKI的曲线下面积(0.956,95%CI:0.903~0.997)最大,其敏感度和特异度较高,为96.4%和90.8%。Pearson相关分析显示,AKI组血清miR-182-5p表达水平与Scr、Cys-C及KIM-1均呈正相关(r=0.683、r=0.795、r=0.847,P<0.01)。结论:血清miR-182-5p表达水平在脓毒症患儿继发AKI中明显升高,是脓毒症患儿继发AKI的独立危险因素,联合Scr、Cys-C及KIM-1水平对预测AKI具有较高的价值。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 儿童 mir-182-5p
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miR-182-5p通过PTEN-AKT信号通路调节肾纤维化 被引量:5
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作者 张璐 程晖 +2 位作者 田茂青 宋远 张丽丽 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2021年第6期907-912,共6页
目的:研究miR-182-5p在肾脏纤维化中的作用,探讨miR-182-5p在肾纤维化发生发展中的可能机制。方法:检索GEO数据库,分析miR-182-5p在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾脏中的表达;收集肾组织标本,检测miR-182-5p的表达;构建UUO肾纤维化小鼠模型... 目的:研究miR-182-5p在肾脏纤维化中的作用,探讨miR-182-5p在肾纤维化发生发展中的可能机制。方法:检索GEO数据库,分析miR-182-5p在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾脏中的表达;收集肾组织标本,检测miR-182-5p的表达;构建UUO肾纤维化小鼠模型,分别予以miR-182-5p抑制剂或阴性对照miRNA处理。Masson染色、天狼星红染色评价各组小鼠肾间质纤维化改变;Western印迹法检测肾组织fibronectin、Ⅰ型胶原纤维(collagen-Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)、蛋白激酶B(AKT)及磷酸化AKT的表达水平。结果:miR-182-5p在慢性肾脏病及单侧输尿管梗阻小鼠肾组织中的表达均显著升高(P<0.05)。肾脏Masson及天狼星红染色结果显示,UUO组较sham组小鼠肾纤维化程度明显加重;与miRNA阴性对照+UUO组比较,miR-182-5p抑制剂+UUO组肾间质胶原纤维显著减少,纤维化程度显著减轻(P<0.05)。Western印迹结果显示,与miRNA阴性对照+UUO相比较,miR-182-5p抑制剂可拮抗UUO模型肾组织fibronectin、collagen-Ⅰ、α-SMA的表达上调,诱导PTEN的表达,减少AKT的过度磷酸化(均P<0.05)。结论:miR-182-5p在肾纤维化的进程中起重要作用,其作用机制与PTEN-AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 mir-182-5p 输尿管梗阻 纤维化 肾间质 pTEN
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miR-182-5p调控FHIT对喉鳞癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响 被引量:3
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作者 王刘中 赵冬丽 +2 位作者 桑建中 张亚民 曹华 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期286-291,共6页
目的探讨miR-182-5p调控脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)对喉鳞癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法选取喉鳞癌组织和癌旁正常组织标本各39例,将anti-miR-NC、anti-miR-182-5p、miR-NC、miR-182-5... 目的探讨miR-182-5p调控脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)对喉鳞癌细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法选取喉鳞癌组织和癌旁正常组织标本各39例,将anti-miR-NC、anti-miR-182-5p、miR-NC、miR-182-5p载体质粒分别转染至FD-LSC-1喉鳞癌细胞中,分别记为anti-miR-NC组、anti-miR-182-5p组、miR-NC组、miR-182-5p组;将anti-miR-182-5p质粒分别与si-NC、si-FHIT载体质粒共转染至FD-LSC-1细胞中,分别记为anti-miR-182-5p+si-NC组、anti-miR-182-5p+si-FHIT组;转染均采用脂质体法。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测喉癌组织、癌旁组织中的FHIT及miR-182-5p表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)法检测FHIT、细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测miR-182-5p和FHIT的靶向关系。结果与癌旁组织相比,喉鳞癌组织中miR-182-5p表达水平显著升高,FHIT表达水平显著降低。抑制miR-182-5p表达可降低细胞活性和迁移、侵袭数量,提高细胞凋亡率,降低CyclinD1、Bcl-2、MMP-2表达水平,提高p21、Bax、E-cadherin表达水平。miR-182-5p可靶向调控FHIT,抑制FHIT能逆转抑制miR-182-5p对喉鳞癌细胞FD-LSC-1增殖、迁移、侵袭的抑制和凋亡促进作用。结论抑制miR-182-5p表达可抑制喉鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制可能与FHIT表达相关。 展开更多
关键词 mir-182-5p FHIT 喉鳞癌 增殖 凋亡
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miR-182-5p通过靶向调节KLF7抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:4
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作者 孔令伟 纪海茹 +4 位作者 曹胜 吕家兴 李佳欣 刘春雨 金宇 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第14期2498-2503,共6页
目的:研究miR-182-5p对人骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法:用qRT-PCR检测法比较人骨肉瘤细胞系(U2OS、MG63、SAOS2)、人正常细胞和人成骨细胞(HFOB1.19)中miR-182-5p的表达水平。转染miRNA模拟物或抑制剂或模拟物+KLF7,以转染mi... 目的:研究miR-182-5p对人骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法:用qRT-PCR检测法比较人骨肉瘤细胞系(U2OS、MG63、SAOS2)、人正常细胞和人成骨细胞(HFOB1.19)中miR-182-5p的表达水平。转染miRNA模拟物或抑制剂或模拟物+KLF7,以转染miR-182-5p表达的上调或下调。通过EDU、迁移分析和侵袭分析来检测细胞功能。双荧光素酶报告分析检测miR-182-5p与KLF7的关系,蛋白质印迹分析检测KLF7的表达。结果:miR-182-5p在骨肉瘤细胞系中被下调。miR-182-5p过表达抑制肿瘤生长、迁移和侵袭。随后的研究显示,KLF7是骨肉瘤细胞中miR-182-5p的直接和功能靶点。miR-182-5p通过调节KLF7来抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。结论:miR-182-5p通过靶向调节KLF7而起到抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用。 展开更多
关键词 mir-182-5p 骨肉瘤 KLF7 细胞增殖 迁移 侵袭
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白山毛桃根提取物通过调控miR-182-5p/PCDH10表达抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭 被引量:4
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作者 胡玉海 王晨 +2 位作者 谢宇端 余婷 汪浩 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第23期5383-5387,共5页
目的探讨白山毛桃根提取物是否调控miR-182-5p/PCDH10表达影响非小细胞肺癌细胞生物学行为。方法设置对照组(无白山毛桃根提取物)、白山毛桃根提取物组(浓度40 mg/ml)、白山毛桃根提取物+miR-182-5p组、白山毛桃根提取物+miR-NC组、anti... 目的探讨白山毛桃根提取物是否调控miR-182-5p/PCDH10表达影响非小细胞肺癌细胞生物学行为。方法设置对照组(无白山毛桃根提取物)、白山毛桃根提取物组(浓度40 mg/ml)、白山毛桃根提取物+miR-182-5p组、白山毛桃根提取物+miR-NC组、anti-miR-182-5p组、anti-miR-NC组。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)法检测各组细胞增殖。Transwell检测各组细胞的侵袭和迁移;qRT-PCR检测非小细胞肺癌H1299细胞中miR-182-5p和PCDH10 mRNA的表达;蛋白免疫印迹检测PCDH10蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测荧光活性。结果相较于对照组,白山毛桃根提取物组非小细胞肺癌H1299细胞迁移和侵袭数量显著减少(P<0.05),PCDH10 mRNA和蛋白表达升高,miR-182-5p表达显著降低(P<0.05);miR-182-5p可靶向调控PCDH10的表达。抑制miR-182-5p表达后,迁移和侵袭的H1299细胞数量显著降低(P<0.05)。miR-182-5p过表达可逆转白山毛桃根提取物对非小细胞肺癌的影响。结论白山毛桃根提取物可能通过下调miR-182-5p/PCDH10轴对非小细胞肺癌H1299细胞发挥抗增殖、抗迁移和抗侵袭作用。 展开更多
关键词 白山毛桃根提取物 mir-182-5p pCDH10 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭
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去甲斑蝥素通过调控miR-182-5p抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭 被引量:5
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作者 杨瑞英 张翠亚 +3 位作者 卫海宁 李鹏哲 闫宇华 侯风敏(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期1848-1852,共5页
目的:研究去甲斑蝥素(ND)对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响及分子机制。方法:CCK-8和Transwell检测不同浓度的ND给药后SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化;qRT-PCR和Western blot检测给药前后LKB1/AMPK信号通路蛋白和上皮间充质转化(EMT)相... 目的:研究去甲斑蝥素(ND)对卵巢癌细胞增殖和侵袭能力的影响及分子机制。方法:CCK-8和Transwell检测不同浓度的ND给药后SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化;qRT-PCR和Western blot检测给药前后LKB1/AMPK信号通路蛋白和上皮间充质转化(EMT)相关蛋白表达;加入LKB1/AMPK通路激动剂GSK621后,CCK-8和Transwell分别检测SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化;qRT-PCR和Western blot检测给药前后EMT相关蛋白和LKB1/AMPK信号通路蛋白变化;si-miR-182-5p转染SKOV3细胞后CCK-8和Transwell检测miR-182-5p对SKOV3细胞增殖和侵袭能力影响;qRT-PCR和Western blot检测转染前后LKB1/AMPK信号通路蛋白和EMT相关蛋白表达。结果:30μmol/L ND对SKOV3细胞增殖抑制效果最明显;ND显著抑制SKOV3细胞侵袭同时显著激活LKB/AMPK信号通路和EMT。加入GSK621可以部分消除ND对SKOV3细胞增殖和侵袭影响,ND抑制miR-182-5p表达而激活LKB1/AMPK磷酸化和EMT。结论:ND可能通过抑制miR-182-5p阻滞LKB1/AMPK信号通路和EMT发生抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 去甲斑蝥素 mir-182-5p LKB1/AMpK 卵巢癌 增殖 侵袭
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miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用 被引量:5
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作者 陈勇 韩俊 +2 位作者 蒋现永 钟群琼 余国力 《解放军医药杂志》 CAS 2019年第7期15-19,共5页
目的 探讨miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用。方法 收集2017年10月—2018年5月我院经病理检查确诊为骨肉瘤的组织及癌旁正常组织,检测miR-182-5p和Bcl-2在人骨肉瘤组织中表达情况。将骨肉瘤细胞株MG-63分... 目的 探讨miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移的调节作用。方法 收集2017年10月—2018年5月我院经病理检查确诊为骨肉瘤的组织及癌旁正常组织,检测miR-182-5p和Bcl-2在人骨肉瘤组织中表达情况。将骨肉瘤细胞株MG-63分为实验组、对照组和空白组;实验组将miR-182-5p过表达后转染到骨肉瘤细胞,对照组不做处理,空白组加入同等剂量的Bcl-2空白转染液。采用蛋白免疫印迹实验检测骨肉瘤细胞株MG-63中miR-182-5p调控Bcl-2的表达情况,细胞划痕实验检测miR-182-5p对骨肉瘤细胞株MG-63迁移能力的影响,MTT实验检测miR-182-5p对骨肉瘤细胞株MG-63增殖能力的影响。结果 人骨肉瘤组织中miR-182-5p表达水平低于癌旁正常组织( P <0.01)。过表达miR-182-5p后骨肉瘤细胞株MG-63中Bcl-2的表达水平相对上调。实验组miR-182-5p表达水平高于对照组和空白组,细胞增殖率低于空白组和对照组( P <0.05)。实验组骨肉瘤细胞株MG-63迁移距离低于空白组和对照组( P <0.05)。结论 miR-182-5p靶向原癌基因Bcl-2对骨肉瘤细胞增殖和迁移有一定的抑制作用,表明miR-182-5p在人骨肉瘤的发生发展过程中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mir-182-5p BCL-2 细胞增殖 细胞运动
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miR-182-5p通过HOXB7基因调控膀胱癌细胞的增殖和侵袭迁移 被引量:5
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作者 肖飞 辛士永 +2 位作者 邵长帅 张建国 高中伟 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第8期1103-1107,1123,共6页
目的探讨微小RNA-182-5p(miR-182-5p)对膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常膀胱上皮细胞(HUC)和膀胱癌细胞(T24、5637、SW780)中miR-182-5p和同源异型盒基因B7(HOXB7)表达;生物学信息预... 目的探讨微小RNA-182-5p(miR-182-5p)对膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测正常膀胱上皮细胞(HUC)和膀胱癌细胞(T24、5637、SW780)中miR-182-5p和同源异型盒基因B7(HOXB7)表达;生物学信息预测和双荧光素酶报告基因实验分析miR-182-5p和HOXB7的靶向关系;蛋白质印迹法(Western Blot)检测过表达miR-182-5p或抑制HOXB7表达对SW780细胞中HOXB7、P53和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白水平的影响;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,Transwell小室法检测细胞侵袭和迁移。共转染pcDNA-HOXB7和miR-182-5p模拟物,观察过表达HOXB7对miR-182-5p作用于膀胱癌细胞的影响。结果HUC细胞相比,miR-182-5p在膀胱癌细胞系中表达下调(P<0.05),HOXB7 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。miR-182-5p在SW780细胞中的表达量最低。HOXB7是miR-182-5p的靶基因。miR-182-5p过表达可抑制细胞活力、侵袭和迁移,降低P53和MMP-2蛋白表达量,差异有统计学意义(P<0.05),与抑制HOXB7表达结果相同。过表达HOXB7可以逆转miR-182-5p对膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论miR-182-5p通过靶向调控HOXB7表达抑制膀胱癌细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 膀胱癌 细胞 mir-182-5p HOXB7
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Hsa_circ_USP42竞争性结合miR-182-5p抑制三阴性乳腺癌转移的机制研究 被引量:2
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作者 于金玲 高蓓敏 +3 位作者 沈卫达 崔静 王浩峰 朱江帆 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2020年第2期205-210,共6页
目的探索hsa_circ_USP42作为miR-182-5p海绵在TNBC中的生物学功能及调控机制。方法 RT-PCR技术检测hsa_circ_USP42在TNBC癌组织及癌旁组织中表达;通过双荧光素酶报告基因分析等技术研究hsa_circ_USP42和miR-182-5p的相互作用;过表达hsa_... 目的探索hsa_circ_USP42作为miR-182-5p海绵在TNBC中的生物学功能及调控机制。方法 RT-PCR技术检测hsa_circ_USP42在TNBC癌组织及癌旁组织中表达;通过双荧光素酶报告基因分析等技术研究hsa_circ_USP42和miR-182-5p的相互作用;过表达hsa_circ_USP42,qPCR技术及Western印迹法检测靶miRNA miR-182-5p及靶基因MTSS1的表达水平;Transwell及CCK8实验检测hsa_circ_USP42对细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果 Hsa_circ_USP42在TNBC中表达明显下调(P=0.000),淋巴结阳性组表达低于淋巴结阴性组(P=0.003)。双荧光素酶实验证实hsa_circ_USP42与靶miR-182-5P可有效结合;细胞功能实验表明,过表达hsa_circ_USP42可抑制TNBC细胞迁移、侵袭和增殖。体外实验表明,过表达hsa_circ_USP42后,靶miRNA miR-182-5p上调,而靶基因MTSS1在转录水平及蛋白水平均降低。结论 Hsa_circ_USP42在TNBC中低表达,与miR-182-5p有效结合,可发挥miRNA海绵上调MTSS1表达,抑制TNBC侵袭及转移,是参与TNBC生物学行为机制之一。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 hsa_circ_USp42 mir-182-5p 转移
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外泌体miR-182-5p通过靶向Cofilin1-PINK1-Parkin通路增加胃癌细胞化疗敏感性
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作者 吴芳华 赵若琴 +6 位作者 陈魁 龚超 林正清 余江跃 陈艳 黄身宙 王力群 《肿瘤学杂志》 2025年第8期703-710,共8页
[目的]探讨外泌体miR-182-5p(exomiR-182-5p)促进胃癌细胞对化疗药物的敏感性及其分子机制。[方法]培养5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感/耐药人胃癌细胞株SGC-7901和SGC-7901/5-FU作为研究对象,采用MTT法检测细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。通过超... [目的]探讨外泌体miR-182-5p(exomiR-182-5p)促进胃癌细胞对化疗药物的敏感性及其分子机制。[方法]培养5-氟尿嘧啶(5-FU)敏感/耐药人胃癌细胞株SGC-7901和SGC-7901/5-FU作为研究对象,采用MTT法检测细胞的半数抑制浓度(IC_(50))。通过超速离心法提取SGC-7901细胞分泌的外泌体,并通过PKH26红色荧光探针验证SGC-7901/5-FU细胞对外泌体的摄取。将SGC-7901细胞分为空白组、阴性组、mi R-182-5p组、miR-182-5p+CFL1阴性组和miR-182-5p+CFL1组。miR-182-5p组和阴性组分别转染miR-182-5p mimics或相应的阴性对照序列,miR-182-5p+CFL1组和miR-182-5p+CFL1阴性组分别将miR-182-5p mimics和pCDNA 3.1-CFL1表达载体/空载体共转染。转染后,提取外泌体,与SGC-7901/5-FU细胞共同培养48 h。利用双荧光素酶报告基因验证miR-182-5p和Cofilin1转录基因(CFL1)的相互作用。Western blot法检测Cofilin1-PINK1-Parkin通路相关蛋白表达变化。[结果]SGC-7901/5-FU细胞对5-FU的IC_(50)为(169.33±7.12)μg/mL,明显高于SGC-7901细胞[(19.57±2.95)μg/mL](P<0.001)。通过PKH26红色荧光标记,SGC-7901分泌的外泌体可被SGC-7901/5-FU受体细胞成功吸收。与空白组和阴性组相比,miR-182-5p组SGC-7901/5-FU细胞对5-FU的敏感性增强,其IC_(50)降低至(65.31±3.94)μg/mL;同时CFL1 mRNA水平显著降低(P<0.001)。双荧光素酶报告基因分析表明,CFL1是miR-182-5p的直接作用靶点。在挽救实验中,miR-182-5p+CFL1组SGC-7901/5-FU细胞对5-FU的IC_(50)值高于miR-182-5p组和miR-182-5p+CFL1阴性组(P<0.001)。此外,与空白组和阴性组比较,miR-182-5p组和miR-182-5p+CFL1阴性组Cofilin1、PINK1和Parkin蛋白表达水平显著降低(P均<0.001);而mi R-182-5p+CFL1组Cofilin1、PINK1和Parkin蛋白表达水平较mi R-182-5p+CFL1阴性组升高(P均<0.001)。[结论]exomiR-182-5p增加了耐药胃癌细胞SGC-7901/5-FU对化疗药物5-FU的敏感性,其作用机制可能与负调控Cofilin1-PINK1-Parkin通路信号的活性有关。 展开更多
关键词 微小RNA-182-5p Cofilin1-pINK1-parkin信号通路 胃肿瘤 外泌体 化疗敏感性
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