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敲降lncRNA LY6E-DT通过影响miR-148a表达调控甲状腺癌细胞的增殖和迁移
1
作者 孙崇镨 衣柳俊 +2 位作者 唐远怀 杨小青 杨艳 《国际医药卫生导报》 2025年第20期3407-3411,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)LY6E-DT通过调控miR-148a表达在甲状腺癌细胞增殖和迁移中的作用。方法研究时间为2023年3月至2024年10月。用UCSC Xena数据库分析甲状腺癌组织中LY6E-DT的表达水平。实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测甲... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)LY6E-DT通过调控miR-148a表达在甲状腺癌细胞增殖和迁移中的作用。方法研究时间为2023年3月至2024年10月。用UCSC Xena数据库分析甲状腺癌组织中LY6E-DT的表达水平。实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测甲状腺癌细胞系(FTC-133、TPC-1、KTC-1、8505C)和甲状腺上皮细胞HTori-3中LY6E-DT的表达水平。根据转染方法将TPC-1细胞分为si-LY6E-DT组和si-NC组。克隆形成实验检测TPC-1细胞的克隆形成能力。Transwell实验检测TPC-1细胞的迁移能力。双荧光素酶报告实验与qPCR验证LY6E-DT与miR-148a的相互作用。Western blot检测TPC-1细胞中PI3K/AKT信号通路蛋白p-PI3K、p-mTOR、p27、p-GLUT4的表达水平。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果甲状腺癌组织中LY6E-DT表达水平高于癌旁组织(P<0.01)。FTC-133、TPC-1、KTC-1、8505C细胞中LY6E-DT表达水平均高于HTori-3细胞(均P<0.01)。si-LY6E-DT组和si-NC组TPC-1细胞中LY6E-DT表达水平分别为1.06±0.59和7.11±1.53(t=7.37,P<0.01)。si-LY6E-DT组和si-NC组克隆形成数分别为(38.01±9.63)个和(113.10±13.33)个(t=4.60,P<0.01),细胞迁移数分别为(45.24±5.99)个和(85.65±5.43)个(t=4.99,P<0.01)。LY6E-DT能够靶向并负调控miR-148a的表达(P<0.01)。与si-NC组比较,si-LY6E-DT组TPC-1细胞中PI3K/AKT信号通路p-PI3K、p-mTOR、p27、p-GLUT4蛋白表达水平均较低(均P<0.01)。结论LY6E-DT在甲状腺癌组织和细胞系中均表达升高。敲降LY6E-DT能通过靶向调控miR-148a表达抑制甲状腺癌TPC-1细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 甲状腺癌 长链非编码RNA LY6E-DT mir-148a 增殖 迁移
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miR-148a在胶质母细胞瘤诊治中的研究进展
2
作者 敖用芳 徐涛 +3 位作者 杨浩辉 朱家宝 安良良 王伟 《中国临床神经外科杂志》 2025年第2期114-117,共4页
胶质母细胞瘤(GBM)是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,具有高侵袭性、高复发性的特点,即使采用手术切除联合放化疗、肿瘤电场治疗及靶向治疗等措施进行综合治疗,疗效仍较差,中位生存期一般不超过15个月。分子生物学研究可以深入了解肿瘤... 胶质母细胞瘤(GBM)是成人最常见的原发性恶性脑肿瘤,具有高侵袭性、高复发性的特点,即使采用手术切除联合放化疗、肿瘤电场治疗及靶向治疗等措施进行综合治疗,疗效仍较差,中位生存期一般不超过15个月。分子生物学研究可以深入了解肿瘤的发生机制,通过筛选和验证与GBM相关的分子靶点,开发出具有特异性和高效性的新型治疗药物,提供更为精准、有效的治疗手段。越来越多的证据表明miR-148a可以作为生物标志物用于GBM的治疗和预后判断。本文主要围绕miR-148a在GBM诊治中的研究进展展开综述。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 mir-148a 生物标志物 治疗 预后
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miR-148a通过Wnt3a/β-catenin影响巨噬细胞M2型极化抑制肝癌细胞增殖的作用机制研究
3
作者 韩光宇 张鼐鹏 +2 位作者 兰秀芬 孙丽莉 张慧欣 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期790-797,共8页
目的探讨miR-148a通过Wnt3a/β联蛋白(β-catenin)影响巨噬细胞M2型极化抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法实时定量PCR检测84名肝癌患者肿瘤组织和相应的邻近非肿瘤肝组织中miR-148a、CD206、白细胞介素10(IL-10)mRNA表达水平;将THP-1... 目的探讨miR-148a通过Wnt3a/β联蛋白(β-catenin)影响巨噬细胞M2型极化抑制肝癌细胞增殖的作用机制。方法实时定量PCR检测84名肝癌患者肿瘤组织和相应的邻近非肿瘤肝组织中miR-148a、CD206、白细胞介素10(IL-10)mRNA表达水平;将THP-1细胞分为空白组(常规培养)、M2组(200 nmol/L佛波酯、20 ng/mL IL-4、20 ng/mL IL-13)、M2联合阴性对照(miR-NC)组(在M2组基础上转染miR-NC)、M2联合miR-148a模拟物(miR-148a mimics)组(在M2组基础上转染miR-148a mimics)、M2和miR-148a mimics联合Wnt3a组(在M2联合miR-148a mimics组基础上,加入100μg/L Wnt3a处理);CCK-8、EdU法检测HuH7细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡及M2型巨噬细胞标志物CD206;化学发光法检测细胞上清液中IL-10水平;实时定量PCR检测细胞中miR-148a、CD206、IL-10 mRNA表达水平;Western blot法检测Wnt3a、β-catenin表达。结果肿瘤组织CD206、IL-10 mRNA、Wnt3a、β-catenin表达高于非肿瘤肝组织,miR-148a降低;M2型巨噬细胞标志物CD206、IL-10 mRNA表达明显增加;与空白组相比,M2组A_(450)值、EdU阳性率、CD206、IL-10 mRNA表达、上清液中IL-10水平、Wnt3a、β-catenin表达增加,凋亡率、miR-148a降低;与M2组、M2联合miR-NC组相比,M2联合miR-148a mimics组A_(450)值、EdU阳性率、CD206、IL-10 mRNA表达、上清液中IL-10水平、Wnt3a、β-catenin表达降低,凋亡率、miR-148a增加;Wnt3a逆转了过表达miR-148a对肝癌细胞增殖的抑制作用。结论过表达miR-148a抑制巨噬细胞M2型极化进而阻止肝癌细胞增殖,可能与抑制Wnt3a/β-catenin通路有关。 展开更多
关键词 巨噬细胞 mir-148a M2型极化 肝癌细胞 增殖 Wnt3a/β-catenin通路
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猪miR-148a-3p的生物信息学分析与靶基因验证
4
作者 齐婧 谭娅 +7 位作者 裴国海 张静 龙建华 赵春萍 杜春林 王婧 田景红 史开志 《中国畜牧杂志》 北大核心 2025年第9期191-201,共11页
miR-148a-3p是前期课题组通过转录组测序发现的在猪卵巢组织中高表达的小RNA(microRNAs,miRNAs)之一,为探究miR-148a-3p对猪繁殖性状的调控作用,本研究围绕miR-148a-3p序列开展进化分析、靶基因预测及功能富集分析、组织表达分析,并通... miR-148a-3p是前期课题组通过转录组测序发现的在猪卵巢组织中高表达的小RNA(microRNAs,miRNAs)之一,为探究miR-148a-3p对猪繁殖性状的调控作用,本研究围绕miR-148a-3p序列开展进化分析、靶基因预测及功能富集分析、组织表达分析,并通过双荧光素酶报告系统验证靶标关系。结果表明,各物种miR-148a-3p的第2~8位碱基完全一致,猪miR-148a-3p与人(Homo sapiens)、小鼠(Mus musculus)和猕猴(Macaca mulatta)亲缘关系较近;对miR-148a-3p靶基因进行GO和KEGG功能富集分析发现,miR-148a-3p的靶基因可富集到子宫内胚胎发育、正向调控转移酶活性、酶联受体蛋白信号通路、PI3K-Akt、TGF-β和MAPK信号通路等与动物繁殖相关的信号通路中。miR-148a-3p可与PRLR基因的CDS区域结合。RT-qPCR结果显示,miR-148a-3p在保育猪卵巢组织中的表达量最高且极显著高于其他组织,且在黄体期的卵巢组织中,miR-148a-3p和PRLR的表达量呈负相关趋势。双荧光素酶报告系统结果显示,超表达miR-148a-3p能显著抑制PRLR野生型载体的荧光活性。综上,miR-148a-3p与PRLR存在靶向关系,且可靶向PRLR-CDS区域,为进一步探究miR-148a-3p调控繁殖性状的分子机制提供了依据。 展开更多
关键词 柯乐猪 mir-148a-3p PRLR 卵巢 繁殖性状
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脐动脉超声血流参数联合血清miR-148a、miR-424-5p表达水平对子痫前期孕妇围产儿结局的预测价值
5
作者 张雨 杨喜惠 王瑜 《免疫学杂志》 2025年第8期582-589,共8页
目的探究脐动脉超声血流参数联合血清miR-148a、miR-424-5p表达水平对子痫前期孕妇围产儿结局的预测价值。方法以2020年6月至2023年7月收治的95例子痫前期孕妇为研究组,根据围产儿结局分为结局不良组(n=37)、结局良好组(n=58)。另纳入同... 目的探究脐动脉超声血流参数联合血清miR-148a、miR-424-5p表达水平对子痫前期孕妇围产儿结局的预测价值。方法以2020年6月至2023年7月收治的95例子痫前期孕妇为研究组,根据围产儿结局分为结局不良组(n=37)、结局良好组(n=58)。另纳入同期152例产检健康孕妇为对照组。彩色多普勒超声检查脐动脉血流参数:阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期最大血流速度与舒张期血流速度比值(S/D)。采用实时荧光定量PCR检测血清miR-148a、miR-424-5p的相对表达水平。采用多因素Logistic回归分析子痫前期孕妇围产儿结局不良的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析脐动脉RI、PI、S/D及血清miR-148a、miR-424-5p对子痫前期孕妇围产儿结局的预测价值。结果与对照组相比,研究组脐动脉RI、PI、S/D及血清miR-424-5p表达水平均升高,血清miR-148a表达水平降低(P<0.01)。研究组围产儿早产、窒息、宫内生长受限、低出生体质量儿比例及结局不良发生率均高于对照组(P<0.05)。与结局良好组相比,结局不良组脐动脉RI、PI、S/D及血清miR-424-5p表达水平均升高,血清miR-148a表达水平降低(P<0.01)。脐动脉RI、PI、S/D以及血清miR-424-5p均为围产儿结局不良的危险因素,血清miR-148a为保护因素(P<0.01)。脐动脉RI、PI、S/D以及血清miR-148a、miR-424-5p联合预测子痫前期孕妇围产儿结局不良的曲线下面积(AUC)显著大于RI(Z=3.489,P<0.001)、PI(Z=3.089,P<0.001)、S/D(Z=3.296,P=0.001)、miR-148a(Z=3.542,P<0.001)、miR-424-5p(Z=2.916,P=0.004)单独预测的AUC,也大于脐动脉超声血流参数(RI、PI、S/D)联合(Z=2.457,P=0.014)、血清miR-148a和miR-424-5p联合(Z=2.214,P=0.027)预测的AUC。结论子痫前期孕妇脐动脉RI、PI、S/D及血清miR-424-5p表达水平均升高,血清miR-148a表达水平降低,且与围产儿结局不良相关,上述指标联合对子痫前期孕妇围产儿结局具有一定的评估价值。 展开更多
关键词 子痫前期 超声血流参数 mir-148a mir-424-5p 围产儿结局
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非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg的表达及其对预后的评估价值
6
作者 郭华 赵静 李丹丹 《实用癌症杂志》 2025年第3期366-368,372,共4页
目的 分析非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、表皮生长因子受体(EGRF)及鳞状细胞癌抗原(SCCAg)表达情况及对预后的评估价值。方法 选择97例化疗治疗的非小细胞肺癌患者,检测肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达情况。随访1年,根据患... 目的 分析非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、表皮生长因子受体(EGRF)及鳞状细胞癌抗原(SCCAg)表达情况及对预后的评估价值。方法 选择97例化疗治疗的非小细胞肺癌患者,检测肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达情况。随访1年,根据患者是否发生淋巴转移分为预后不良组(淋巴转移)、预后良好组(无淋巴转移),比较2组肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达情况,分析非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达对预后的评估价值。结果 随访1年,97例非小细胞肺癌患者中,26例发生淋巴转移,预后不良发生率为26.80%(26/97)。预后不良组肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达高于预后良好组(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达与预后有关(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达对预后评估的AUC分别为0.876、0.721、0.719,均有一定诊断价值。结论 非小细胞肺癌组织中miR-148a-3p、EGFR及SCCAg表达情况与预后有关,对预后具有一定的评估价值。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 鳞状细胞癌抗原 mir-148a-3p 预后
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miR-148a-3p在儿童癫痫疾病中的功能研究
7
作者 徐健 岳保珠 +3 位作者 李锦亮 岳娜 计岳龙 丁砚生 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第7期1201-1203,1207,共4页
目的探讨miR-148a-3p在儿童癫痫疾病中的作用,为癫痫的临床诊断和治疗开辟一条新途径。方法分析2022年1月至2023年6月在潍坊市妇幼保健院就诊癫痫患儿19例设为实验组,另选15名同期体检健康儿童为对照组。通过荧光定量PCR法检测miR-148a... 目的探讨miR-148a-3p在儿童癫痫疾病中的作用,为癫痫的临床诊断和治疗开辟一条新途径。方法分析2022年1月至2023年6月在潍坊市妇幼保健院就诊癫痫患儿19例设为实验组,另选15名同期体检健康儿童为对照组。通过荧光定量PCR法检测miR-148a-3p的表达。应用TargetScan及miRNADB数据库预测miR-148a-3p靶基因并分别进行GO功能和KEGG通路分析。流式细胞术检测miR-148a-3p及其靶基因与细胞凋亡之间的关系。结果实验组患者血浆中miR-148a-3p表达水平显著高于对照组,差异有统计学(P<0.05)。TargetScan和miRNADB数据库预测503个交集靶基因。miR-148a-3p的503个交集靶基因,通过PPI网络分析,显示出10个MCODE结构模块。显著富集的GO包括神经元识别、突触泡循环等。显著富集Pathway主要包括癌症相关、FoxO信号通路、PI3K/Akt信号通路、TGF-beta信号通路等。细胞凋亡实验发现抑制miR-148a-3p可降低KA诱导的神经元细胞凋亡。SYNJ1被鉴定为miR-148-3p的靶基因。结论miR-148a-3p可能通过激活SYNJ1信号通路作为凋亡促进剂,促进癫痫的发生,是一个颇有研究价值的生物学靶标。 展开更多
关键词 癫痫 mir-148a-3p 靶基因 神经元凋亡
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慢性心力衰竭患者外周血miR-148a表达水平与炎症因子、心功能和心室重构的关系 被引量：16
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作者 曹春晖 王蓉 +2 位作者 高登峰 周媛 吕亚瑞 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第20期3969-3973,共5页
目的:探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清miR-148a表达水平与炎症因子、心功能和心室重构的关系。方法:选择2017年1月~2019年1月在我院就诊的CHF患者136例,按照美国纽约心脏病学会(NYHA)心功能分级将患者分为Ⅱ级57例、Ⅲ级43例和Ⅳ级36例... 目的:探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清miR-148a表达水平与炎症因子、心功能和心室重构的关系。方法:选择2017年1月~2019年1月在我院就诊的CHF患者136例,按照美国纽约心脏病学会(NYHA)心功能分级将患者分为Ⅱ级57例、Ⅲ级43例和Ⅳ级36例。实时荧光定量PCR检测血清miR-148a的表达,血清中白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量用酶联免疫吸附试验检测,使用超声心动图检测心功能和心室重构指标,主要包括左室舒张末期内径(LVEDD)、舒张末室间隔厚度(IVSD)、舒张末左室后壁厚度(PWD)、左室质量指数(LVMI)、左室射血分数(LVEF)和左室重构指数(LVRI),采用Pearson积矩相关系数分析血清miR-148a表达水平与血清炎症因子、超声心动图指标之间的相关性。结果:CHF患者血清miR-148a表达量随心功能分级升高而降低(P均<0.05)。炎症因子(IL-1、IL-6和TNF-α)水平和LVEDD、PWD、IVSD、LVMI随心功能分级升高而升高,LVRI和LVEF随心功能分级升高而降低(P<0.05)。血清miR-148a表达量与炎症因子、IVSD、PWD和LVMI呈负相关(P<0.05);与LVEF和LVRI呈正相关(P<0.05)。结论:血清miR-148a表达量与CHF患者血清炎症因子水平、心功能及心室重构关系密切,提示检测血清miR-148a有助于反映CHF患者病情的严重程度。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 mir-148a 炎症因子 心功能 心室重构
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miR-148a对肝癌细胞株侵袭和迁移的抑制作用及机制 被引量：3
9
作者 贾筱琴 缪俊俊 +3 位作者 雍军 张子兰 花晨 李国利 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期412-417,共6页
背景与目的:原发性肝癌是肝细胞或肝内胆管上皮发生的恶性肿瘤,其复发和转移十分常见。本实验以慢病毒介导miR-148a,感染人肝癌SMMC-7721细胞,观察其对SMMC-7721细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:选用SMMC-7721肝癌细胞株,进行miR-148a... 背景与目的:原发性肝癌是肝细胞或肝内胆管上皮发生的恶性肿瘤,其复发和转移十分常见。本实验以慢病毒介导miR-148a,感染人肝癌SMMC-7721细胞,观察其对SMMC-7721细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:选用SMMC-7721肝癌细胞株,进行miR-148a慢病毒载体的构建,筛选稳定表达miR-148a肝癌细胞株。RTPCR检测细胞中miR-148a的表达水平。划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞侵袭迁移能力。采用明胶酶谱法测定MMP-2、MMP-9的活性。蛋白质印迹法(Western blot)检测MMP-2、MMP-9和EMT相关蛋白(E-cadherin、vimentin)的表达情况。结果:RT-PCR结果显示,和对照组相比,LV-miR-148a肝癌细胞感染组表达miR-148a明显增高,体外侵袭实验细胞划痕实验显示过表达miR-148a后SMMC-7721的侵袭和迁移能力明显下降。明胶酶谱法结果显示过表达miR-148a的肝癌细胞,MMP-2和MMP-9降解明胶的能力下降(P<0.05)。过表达miR-148a同时能降低肝癌细胞SMMC-7721中vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白的表达,但并未影响E-cadherin的表达。结论:miR-148a在体外能抑制肝癌细胞SMMC-7721的侵袭和迁移,其机制可能与下调MMP-2、MMP-9和vimentin的表达水平有关。 展开更多
关键词 mir-148a 肝细胞癌 侵袭 迁移 MMP-2 MMP-9
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胃癌组织中miR-148a基因甲基化状态与DNA甲基转移酶1的关系 被引量：7
10
作者 居峰 左君波 +4 位作者 朱阿考 晏江 夏加增 张熔熔 万佳艺 《中华实用诊断与治疗杂志》 2013年第4期361-363,367,共4页
目的探讨胃癌组织中miR-148a基因甲基化与临床病理特征、DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)表达的关系。方法 40例胃癌患者的胃癌组织(胃癌组)及其癌旁组织(癌旁组),采用荧光定量PCR法检测2组miR-148a表达情况,采用甲基化... 目的探讨胃癌组织中miR-148a基因甲基化与临床病理特征、DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)表达的关系。方法 40例胃癌患者的胃癌组织(胃癌组)及其癌旁组织(癌旁组),采用荧光定量PCR法检测2组miR-148a表达情况,采用甲基化特异性PCR检测miR-148a甲基化状态,采用免疫组织化学法检测DNMT1表达情况。结果胃癌组miR-148a表达水平明显低于癌旁组(P<0.01),胃癌组miR-148a甲基化率为70.0%,癌旁组为17.5%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组miR-148a甲基化状态在肿瘤大小、浸润深度上差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组DNMT1蛋白阳性率为72.5%,癌旁组为27.5%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组DNMT1阳性率与miR-148a甲基化状态呈正相关(r=0.33,P<0.05)。结论胃癌组织中miR-148a基因呈高度甲基化状态,可能与DNMT1过表达有关。 展开更多
关键词 胃癌 mir-148a 荧光定量PCR 甲基化特异性PCR 免疫组织化学染色
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热性惊厥患儿血清miR-148a-3p HMGB125(OH)D水平与癫痫发作的相关性 被引量：9
11
作者 张义堂 秦小菀 +7 位作者 石岩 侯海燕 殷雪 李哲 徐会民 刘麦叶 李万桢 宋春雨 《中国实用神经疾病杂志》 2023年第5期599-604,共6页
目的探讨热性惊厥患儿血清微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、25-羟维生素D(25(OH)D)水平与癫痫发作的相关性。方法回顾性分析2018-01—2022-03南阳市中心医院收治的122例热性惊厥患儿,根据热性惊厥患儿预后结局... 目的探讨热性惊厥患儿血清微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、25-羟维生素D(25(OH)D)水平与癫痫发作的相关性。方法回顾性分析2018-01—2022-03南阳市中心医院收治的122例热性惊厥患儿,根据热性惊厥患儿预后结局是否发生癫痫,分为热性惊厥癫痫组36例和热性惊厥非癫痫组86例,同期选择55例未发生惊厥的呼吸道感染仅发热的患儿为对照组,比较3组患儿的血清miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D水平。收集3组患儿临床资料进行多因素Logistic回归分析,绘制ROC曲线分析miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D对热性惊厥患儿癫痫发作的预测价值。结果热性惊厥癫痫组的血清miR-148a-3p表达量、HMGB1水平高于热性惊厥非癫痫组、对照组[(2.26±0.57)vs(1.71±0.43)vs(1.50±0.38);(7.45±1.87)μg/L vs(6.70±1.58)μg/L vs(5.33±1.29)μg/L;均P<0.05],血清25(OH)D水平低于热性惊厥非癫痫组、对照组[(26.83±6.79)μg/L vs(34.24±8.56)μg/L vs(42.16±4.15)μg/L;P<0.05]。惊厥类型、惊厥持续时间、退热后脑电图结果、miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D与癫痫发作存在相关关系(P<0.05)。miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D预测热性惊厥患儿癫痫发作的灵敏度为83.33%、77.78%、72.22%,特异度为74.42%、68.60%、63.95%。结论血清miR-148a-3p、HMGB1、25(OH)D水平与热性惊厥患儿癫痫发作有一定相关性,可作为临床辅助诊断标志物。 展开更多
关键词 热性惊厥 癫痫 mir-148a-3p 高迁移率族蛋白B1 25-羟维生素D
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SLC9A3-AS1调控miR-148a-3p/ROCK1信号轴影响肾癌细胞生物学功能 被引量：4
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 章传华 袁敬东 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期161-167,共7页
目的检测lncRNA SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织与肾癌细胞中的表达水平,探讨其促进肾癌细胞恶性生物学行为的机制。方法应用GEPIA2在线软件(http://gepia2.cancer-pku.cn/)分析TCGA数据库中SLC9... 目的检测lncRNA SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)组织与肾癌细胞中的表达水平,探讨其促进肾癌细胞恶性生物学行为的机制。方法应用GEPIA2在线软件(http://gepia2.cancer-pku.cn/)分析TCGA数据库中SLC9A3-AS1在ccRCC组织中的表达水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SLC9A3-AS1在不同肾癌细胞系、24例ccRCC组织与癌旁正常肾脏组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和Transwell小室迁移实验检测敲低SLC9A3-AS1表达对肾癌细胞增殖与迁移的影响;应用蛋白质免疫印迹法检测增殖与迁移相关信号通路蛋白的表达水平;采用双荧光素酶报告基因实验验证SLC9A3-AS1与miR-148a-3p/ROCK1轴的靶向调控关系。结果GEPIA2软件分析结果显示,相较正常肾脏组织,SLC9A3-AS1在肾透明细胞癌组织中表达显著上调(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,相较癌旁正常肾脏组织,SLC9A3-AS1在24例ccRCC组织中表达显著上调(P<0.01);相较永生化肾小管上皮细胞,SLC9A3-AS1在4种肾癌细胞系中表达均显著上调,以786-O细胞最为显著(P<0.01)。干扰SLC9A3-AS1表达,可显著抑制786-O细胞的增殖与迁移能力,上调E-cadherin的蛋白表达水平,而下调N-cadherin、MMP2的蛋白表达水平(均P<0.05);过表达miR-148a-3p可显著抑制786-O细胞的增殖与迁移能力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果表明,SLC9A3-AS1可特异性结合miR-148a-3p,后者进一步靶向结合ROCK1 mRNA的3′UTR区域;过表达miR-148a-3p可明显下调ROCK1 mRNA的表达水平,敲低miR-148a-3p表达则产生相反的效应;敲低SLC9A3-AS1表达可显著下调786-O细胞中ROCK1 mRNA与蛋白的表达水平(P<0.01);下调miR-148a-3p表达可部分逆转SLC9A3-AS1沉默对786-O细胞增殖与迁移的抑制作用(P<0.05)。结论SLC9A3-AS1在ccRCC中通过调控miR-148a-3p/ROCK1轴发挥促癌作用,有望成为ccRCC的一个新的分子标志物。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 SLC9A3-AS1 mir-148a-3p ROCK1
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miR-148a通过靶定DNMT1调节大鼠间充质干细胞向心肌细胞的分化 被引量：5
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作者 张文才 宫俊龙 +1 位作者 杨帆 赵洛沙 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2019年第1期11-16,共6页
目的:探讨miR-148a对间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的调控作用。方法:将miR-148a及对照分别转染入大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),与新生大鼠心室心肌细胞(NRVMs)共培养,观察BMSCs的分化,通过增强及抑制miR-148a的表达水平观察miR-148... 目的:探讨miR-148a对间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的调控作用。方法:将miR-148a及对照分别转染入大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),与新生大鼠心室心肌细胞(NRVMs)共培养,观察BMSCs的分化,通过增强及抑制miR-148a的表达水平观察miR-148a对BMSCs向心肌细胞分化的调控作用。运用荧光素酶报告实验、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和免疫印迹(WesternBlot)验证miR-148a靶向下调DNA甲基转移酶1(DNMT1)参与调节该过程。结果:过表达miR-148a有利于BMSCs向心肌细胞的分化,而当利用抑制剂下调miR-148a的表达,则阻止BMSCs向心肌细胞的分化。荧光素酶报告实验、qRT-PCR和WesternBlot实验发现miR-148a可以靶向下调DNMT1的表达,且DNMT1参与调节上述过程。结论:miR-148a通过靶向下调DNMT1促进MSCs向心肌细胞的分化过程。 展开更多
关键词 mir-148a DNMT1 间充质干细胞 分化 心肌细胞
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miR-148a-3p通过抑制IL-12/IL-12Rβ_(1)/IL-12Rβ_(2)/IFN-γ通路抑制Th1细胞极化 被引量：4
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作者 张晗 李雪 +10 位作者 刘元林 刘伟江 王洋 白海涛 张金霞 苏菲娅 袁福临 李露 孟广雨 郑荣秀 张毅 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期816-823,共8页
目的探讨miR-148a-3p调控1型辅助性T(Th1)细胞极化调控的分子机制。方法分离6周龄小鼠的脾单个核细胞,经免疫磁珠阴性分选获得初始CD4+(naïveCD4+)Th细胞,用流式细胞术测定naïve CD4+Th细胞CD62L表达水平。用小鼠白细胞介素12... 目的探讨miR-148a-3p调控1型辅助性T(Th1)细胞极化调控的分子机制。方法分离6周龄小鼠的脾单个核细胞,经免疫磁珠阴性分选获得初始CD4+(naïveCD4+)Th细胞,用流式细胞术测定naïve CD4+Th细胞CD62L表达水平。用小鼠白细胞介素12(IL-12)和IL-2及抗小鼠IL-4,CD28和CD3ε单克隆抗体的混合因子体外诱导naïveCD4+Th细胞向Th1细胞极化,同时在诱导体系中加入miR-148a-3p模拟物,诱导72 h。流式细胞术检测干扰素γ(IFN-γ)和CD4双阳性(IFN-γ+CD4+)细胞百分比,实时荧光定量PCR检测Th1细胞极化相关基因IFN-γ、信号转导与转录激活因子1(STAT1)、IL-12受体β_(1)(IL-12Rβ_(1))、IL-12Rβ_(2)、STAT4和T细胞介导的转录调节因子21(Tbx21)mRNA表达水平;Western印迹法检测Th1细胞极化关键转录因子STAT4和磷酸化STAT4(p⁃STAT4)蛋白表达水平。经生物信息学分析预测miR-148a-3p对IL-12/IL-12Rβ_(1)/IL-12Rβ_(2)/IFN-γ通路分子IL-12Rβ_(1),IL-12Rβ_(2),Tbx21和STAT4的调控靶标序列,用双荧光素酶载体psiCHECK2分别构建IL-12Rβ_(1),IL-12Rβ_(2),Tbx21和STAT4的3′UTR序列(psi-wt)及靶标点突变(psi-mutant)序列的克隆载体。将psi-wt和psi-mutant载体分别与miR-148a-3p模拟物共转染至人宫颈癌HeLa细胞,转染36 h后裂解细胞进行双荧光素酶报告基因检测。结果经免疫磁珠分选获得的naïveCD4+Th细胞高表达CD62L,表明naïveCD4+Th细胞分离成功;诱导后Th1细胞极化百分比为(71±5)%,miR-148a-3p模拟物转染后Th1细胞极化百分比下降至(61±3)%(P<0.05)。miR-148a-3p模拟物转染可下调Th1极化关键转录因子STAT1(P<0.01),Tbx21(P<0.01)和STAT4(P<0.01)mRNA表达水平,同时IL-12/IL-12Rβ_(1)/IL-12Rβ_(2)/IFN-γ通路的关键受体IL-12Rβ_(1)(P<0.05)和IL-12Rβ_(2)(P<0.01)及调控Th1极化关键细胞因子IFN-γ(P<0.01)mRNA表达水平亦显著下调。miR-148a-3p模拟物转染可显著下调Th1极化过程所必需的STAT4和p-STAT4蛋白表达水平。生物信息学预测miR-148a-3p靶标并用双荧光素酶报告载体构建含其psi-wt和psi-mutant序列的克隆载体;经双荧光素酶报告系统检测证实,miR-148a-3p可靶向下调IL-12/IL-12Rβ_(1)/IL-12Rβ_(2)/IFN-γ通路的多个关键分子STAT4(P<0.01),Tbx21(P<0.01),IL-12Rβ_(1)(P<0.01)和IL-12Rβ_(2)(P<0.01)表达。结论miR-148a-3p通过靶向抑制IL-12/IL-12Rβ_(1)/IL-12Rβ_(2)/IFN-γ通路中STAT4,Tbx21,IL-12Rβ_(1)和IL-12Rβ_(2)蛋白表达抑制Th1细胞极化。 展开更多
关键词 mir-148a-3p 1型辅助性T细胞 细胞极化 干扰素Γ
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miR-148a促进人诱导性多能干细胞向心肌样细胞的分化 被引量：3
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作者 毛庆 庞毅恒 +1 位作者 卢永祥 梁秀琳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第19期2978-2984,共7页
背景:研究发现,miR-148a可以促进人骨髓间充质干细胞定向分化为成熟心肌样细胞,但关于miR-148a对人诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化的影响则未见报道。目的:探讨miR-148a对人诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化的影响。方法:将人诱导... 背景:研究发现,miR-148a可以促进人骨髓间充质干细胞定向分化为成熟心肌样细胞,但关于miR-148a对人诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化的影响则未见报道。目的:探讨miR-148a对人诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化的影响。方法:将人诱导性多能干细胞分为3组向心肌样细胞诱导分化,对照组细胞不做处理,低表达组细胞用miR-148a抑制物处理28 d,高表达组细胞用miR-148a模拟物处理28 d;另取常规培养28 d的人诱导性多能干细胞为空白对照组。CCK-8检测细胞增殖活力,qRT-PCR检测miR-148a mRNA的表达,免疫荧光染色和Western blot检测MHC和cTnT蛋白的表达。结果与结论:①低表达组细胞内miR-148a mRNA表达、细胞增殖活力低于空白对照组和对照组,高表达组高于其他3组(P<0.01);②空白对照组无MHC和cTnT的阳性表达,对照组、低表达组和高表达组均有MHC和cTnT的阳性表达;③低表达组细胞MHC和cTnT蛋白表达低于对照组,高表达组高于其他3组(P<0.01);④以上结果提示,miR-148a可促进人诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化。 展开更多
关键词 干细胞 人诱导性多能干细胞 心肌样细胞 定向分化 mir-148a 微小RNA 人肌球蛋白重链 心脏肌钙蛋白T
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miR-148a在5-aza诱导间充质干细胞心肌样分化中的调控作用及机制 被引量：6
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作者 蒋昌科 龚放 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期514-518,543,共6页
目的:探讨miR-148a在5-aza诱导人骨髓间充质(hMSCs)成心肌样分化中的表达及miR-148a对hMSCs体外成心肌样分化的生物学作用。方法:免疫荧光检测5-aza诱导hMSCs分化后心肌细胞特异性标志物α-MHC表达水平;qRT-PCR和Western blot分别检测mi... 目的:探讨miR-148a在5-aza诱导人骨髓间充质(hMSCs)成心肌样分化中的表达及miR-148a对hMSCs体外成心肌样分化的生物学作用。方法:免疫荧光检测5-aza诱导hMSCs分化后心肌细胞特异性标志物α-MHC表达水平;qRT-PCR和Western blot分别检测miR-148a和DNMT1在hMSCs成肌样分化中的表达水平。利用Lipofectamine TM 2000将miR-148a mimics和miR-148a inhibitor分别瞬时转染hMSCs,Western blot检测心肌细胞特异性标志物α-MHC的蛋白表达水平。利用生物信息学技术预测miR-148a的靶基因结合位点利用双荧光素酶报告基因系统鉴定其对靶基因3’UTR的结合序列。通过DNMT1 shRNA和miR-148a inhibitors共转到hMSCs中,研究miR-148a在hMSCs成心肌样分化中的调控作用。结果:hMSCs经5-aza诱导分化后,心肌细胞特性标志物α-MHC蛋白水平明显上调。miR-148a在hBMSCs成肌样分化中显著性增加(P<0.01),DNMT1表达水平显著降低。过表达miR-148a能提高hBMSCs中心肌细胞特异性标志物α-MHC表达水平,而抑制miR-148a则能降低其水平(P<0.01)。DNMT1沉默可以阻断miR-148a对hMSCs的诱导成肌样分化作用。结论:miR-148a在hMCCs成肌样分化中表达上调,通过靶定和调控DNMT1基因的表达,并对hMSCs心肌向分化具有正向调控作用。 展开更多
关键词 mir-148a 骨髓间充质 心肌样分化 DNMT1
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miR-148a克隆及逆转录病毒载体构建 被引量：2
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作者 徐学虎 全天一 +2 位作者 曾伟霞 陈欣洁 李伟明 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1545-1547,1557,共4页
目的克隆微小RNA hsa-miR-148a并构建逆转录病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-148a前体序列和pMSCV载体经双酶切连接产生pMSCV-miR-148a逆转录病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆。用pMSCV-miR-148a和PIK packaging质粒... 目的克隆微小RNA hsa-miR-148a并构建逆转录病毒表达载体。方法将PCR扩增得到的miR-148a前体序列和pMSCV载体经双酶切连接产生pMSCV-miR-148a逆转录病毒表达载体,双酶切后测序鉴定,筛选阳性克隆。用pMSCV-miR-148a和PIK packaging质粒以磷酸钙共沉淀法转染包装细胞293FT,包装产生逆转录病毒。将病毒感染NIH3T3细胞进行滴度测定。结果经双酶切鉴定和测序证实,成功构建了miR-148a的逆转录病毒表达载体pMSCV-miR-148a。并测得病毒滴度为5×108CFU/ml。结论以miR-148a前体序列构建的逆转录病毒表达载体pMSCV-miR-148a能够产生高滴度的逆转录病毒,为深入研究miR-148a的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 has-mir-148a DNA甲基转移酶 肿瘤 甲基化 逆转录病毒
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丙戊酸钠通过激活miR-148a-3p/Mcl-1通路促进SH-SY5Y细胞凋亡 被引量：1
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作者 戴旭芳 闫小晶 +1 位作者 谢鹏 连继勤 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1195-1200,共6页
目的探讨抗癫痫药丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对神经细胞的凋亡诱导作用及相关机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)用不同剂量VPA处理,流式分析细胞凋亡水平变化,Western blot检测Mcl-1蛋白水平变化,定量PCR分析Mcl-1 mRNA与mi... 目的探讨抗癫痫药丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)对神经细胞的凋亡诱导作用及相关机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)用不同剂量VPA处理,流式分析细胞凋亡水平变化,Western blot检测Mcl-1蛋白水平变化,定量PCR分析Mcl-1 mRNA与miR-148a-3p水平变化,报告基因实验检测Mcl-1启动子活性变化。用miR-148a-3p抑制剂联合VPA处理细胞,观察miR-184a-3p在VPA下调Mcl-1表达中的作用及对VPA促SH-SY5Y细胞凋亡效果的影响。结果VPA可促进SH-SY5Y细胞凋亡,并抑制SH-SY5Y细胞中Mcl-1的蛋白和mRNA水平(P<0.05)。VPA处理不影响SH-SY5Y细胞中Mcl-1的启动子活性(P>0.05)。VPA可显著增强SH-SY5Y细胞中miR-148a-3p的表达(P<0.05),使用miR-148a-3p抑制剂可减轻VPA对Mcl-1表达的抑制作用,并减弱VPA的促细胞凋亡效果。结论VPA可能通过激活miR-148a-3p/Mcl-1信号通路促进SH-SY5Y细胞凋亡。 展开更多
关键词 丙戊酸钠 SH-SY5Y细胞 MCL-1 mir-148a-3p 凋亡
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miR-148a/b真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞系中的表达 被引量：1
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作者 肖卫东 刘智文 +3 位作者 文武 王福飞 廖国良 李勇 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2014年第1期7-9,F0003,共4页
目的构建miR-148a/b真核表达质粒,转染胰腺癌AsPC-1细胞,并观察其miR-148a/b的表达水平。方法根据miRBase提供的序列合成miR-148a/b前体,PCR扩增后形成双链,插入线性化真核表达质粒pcDNA3.1,构建pcDNA3.1/miR-148a/b,进行酶切和测序鉴... 目的构建miR-148a/b真核表达质粒,转染胰腺癌AsPC-1细胞,并观察其miR-148a/b的表达水平。方法根据miRBase提供的序列合成miR-148a/b前体,PCR扩增后形成双链,插入线性化真核表达质粒pcDNA3.1,构建pcDNA3.1/miR-148a/b,进行酶切和测序鉴定。将胰腺癌AsPC-1细胞分4组进行质粒转染:转染pcDNA3.1/miR-148a(miR-148a组)、转染pcDNA3.1/miR-148b(miR-148b组)、转染pcDNA3.1(空质粒对照组)和仅加脂质体(空白对照组)。转染48 h后,采用定量PCR法检测各组细胞中miR-148a/b的表达量。结果 pcDNA3.1/miR-148a/b的酶切和测序与miRBase提供的序列完全一致。转染48 h后,miR-148a组AsPC-1细胞中的miR-148a表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组(6.76±0.35比1.00±0.54、1.02±0.40,均P<0.05),miR-148b组AsPC-1细胞中的miR-148b表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组(3.28±0.08比1.02±0.35、1.01±0.28,均P<0.05)。结论成功构建了miR-148a/b真核表达质粒pcDNA3.1/miR-148a/b,该质粒能显著上调胰腺癌AsPC-1细胞的miR-148a/b表达水平。 展开更多
关键词 mir-148a b 真核表达质粒 胰腺癌
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miR-148a靶向S1PR1抑制弥漫大B细胞淋巴瘤细胞增殖和迁移机制研究 被引量：2
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作者 唐懿 刘彦麟 宋黎 《河北医药》 CAS 2021年第15期2275-2278,2283,共5页
目的研究miR-148a靶向调控1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1PR1)抑制弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY19)增殖和迁移的机制。方法miR-148a mimic对OCI-LY19细胞进行转染,实验分为对照组、miR-148a阴性对照组、miR-148a mimic组,实时荧光定量法测定... 目的研究miR-148a靶向调控1型1-磷酸鞘氨醇受体(S1PR1)抑制弥漫大B细胞淋巴瘤细胞(OCI-LY19)增殖和迁移的机制。方法miR-148a mimic对OCI-LY19细胞进行转染,实验分为对照组、miR-148a阴性对照组、miR-148a mimic组,实时荧光定量法测定转染后OCI-LY19细胞中miR-148a表达水平,蛋白印迹法(WB)测定S1PR1、ERK蛋白磷酸化水平、STAT3蛋白磷酸化水平、PDGF-A、PDGF-B、BcL-XL、McL-1表达水平,MTT法测定转染后OCI-LY19细胞活性,划痕实验测定OCI-LY19细胞体外迁移能力。TargetScan数据库预测miR-148a的靶基因并采用荧光素酶报告实验进行验证。结果与HMy2.CIR细胞组相比,对照组OCI-LY19细胞miR-148a表达水平显著降低(P<0.05),S1PR1蛋白表达水平、ERK蛋白磷酸化水平、STAT3蛋白磷酸化水平明显升高(P<0.05)。与对照组、miR-148a阴性对照组相比,miR-148a mimic组OCI-LY19细胞miR-148a、S1PR1、ERK蛋白磷酸化水平、STAT3蛋白磷酸化水平、PDGF-A、PDGF-B、BcL-XL、McL-1表达水平、细胞增殖、迁移能力明显降低(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示S1PR1是miR-148a靶基因,双荧光素酶实验证实S1PR1是miR-148a作用靶点。结论上调miR-148a可下调S1PR1蛋白表达,可能通过调控ERK/STAT3信号通路抑制OCI-LY19细胞增殖和迁移。 展开更多
关键词 mir-148a 1型1-磷酸鞘氨醇受体 弥漫大B细胞淋巴瘤细胞 增殖 迁移
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