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犀角地黄汤通过调节miR-146b-3p-PI3K-AKT-p62减轻脓毒性肺损伤的作用机制
1
作者 林名瑞 李红艳 +2 位作者 郭小艳 陈玉榕 陈怀宇 《蛇志》 2025年第2期192-200,共9页
目的探讨犀角地黄汤(RHRD)对脓毒性肺损伤的抗炎作用及其分子机制。方法选取雄性SPF级C57BL/6J小鼠126只,将其中108只小鼠随机分为3组:脂多糖组(LPS)组、LPS+RHRD组和Ctrl组,采用LPS诱导建立脓毒性肺损伤小鼠模型,LPS+RHRD组小鼠在LPS... 目的探讨犀角地黄汤(RHRD)对脓毒性肺损伤的抗炎作用及其分子机制。方法选取雄性SPF级C57BL/6J小鼠126只,将其中108只小鼠随机分为3组:脂多糖组(LPS)组、LPS+RHRD组和Ctrl组,采用LPS诱导建立脓毒性肺损伤小鼠模型,LPS+RHRD组小鼠在LPS干预基础上给予RHRD灌胃,Ctrl组小鼠予以等量生理盐水灌胃;另取18只小鼠随机分为3组:LPS+miR-146b-3p mimic(模拟物)组、LPS+RHRD+miR-146b-3p mimic组和LPS+NC mimic组,通过注射miR-146b-3p mimic在脓毒症小鼠中过表达miR-146b-3p。对干预后的脓毒症小鼠以及经过RHRD治疗和过表达miR-146b-3p的脓毒症小鼠的肺组织进行病理分析,同时检测小鼠肺组织中miR-146b-3p、AKT1、PI3K、mTOR、p62以及促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果组织学检测结果显示,与Ctrl组比较,LPS组小鼠的肺结构受到严重破坏,出现肺泡出血和肺泡腔内炎性细胞明显浸润,LPS+RHRD组小鼠的肺泡结构损伤轻,炎性细胞浸润少。与Ctrl比较,LPS组小鼠血清促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平显著增加,并在24 h达到峰值(P<0.0001);LPS+RHRD组小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平较LPS组显著降低(P<0.0001)。与Ctrl组相比较,LPS组小鼠肺组织中miR-146b-3p的mRNA表达显著降低,RHRD干预可明显改善miR-146b-3p的低表达(P<0.01);LPS处理可显著增加AKT1和p62的表达,而RHRD给药后AKT1、p62表达水平显著降低(P<0.05);尽管LPS显著增加PI3K的表达(P<0.05),但RHRD并未显著改变PI3K的表达;经LPS或RHRD处理均未能显著改变mTOR的表达水平。Western blot分析结果显示,mTOR的蛋白表达与mRNA表达结果一致;p-mTOR表达在LPS组显著增加,在LPS+RHRD组显著降低(P<0.001);LPS可上调PI3K和p-PI3K的蛋白表达,而RHRD降低p-PI3K的蛋白表达(P<0.05),但不降低PI3K在小鼠组织中的表达;p62的蛋白表达随LPS处理而增加,但随RHRD给药而降低(P<0.05)。miR-146b-3p mimic联合RHRD共同作用可进一步缓解LPS干预小鼠肺组织中AKT1、PI3K、mTOR和p62基因的异常表达及mTOR、p-mTOR、PI3K、p-PI3K和p62蛋白异常表达,并改善脓毒性肺损伤。结论RHRD通过激活miR-146b-3p进而调控PI3K-AKT-p62信号轴在小鼠体内发挥抗炎作用并促进自噬以减轻脓毒性肺损伤。 展开更多
关键词 犀牛角地黄汤 脓毒性肺损伤 mir-146b-3p PI3K AKT
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Hsa-miR-146b-3p靶向CREB3L3调控PI3K/Akt通路促进内皮细胞功能障碍及动脉粥样硬化进程 被引量:1
2
作者 周世繁 张书铭 +4 位作者 陈宁园 黄玲 宋重阳 潘尚领 彭均华 《广西医科大学学报》 2025年第3期342-350,共9页
目的:研究hsa-miR-146b-3p对内皮细胞的影响及其在动脉粥样硬化中的潜在作用和机制。方法:通过慢病毒构建EA.hy926内皮细胞干预模型,将细胞分为4组,(1)过表达组:OE_hsa-miR-146b-3p组和OE_control组;(2)沉默组:SH_hsa-miR-146b-3p组和SH... 目的:研究hsa-miR-146b-3p对内皮细胞的影响及其在动脉粥样硬化中的潜在作用和机制。方法:通过慢病毒构建EA.hy926内皮细胞干预模型,将细胞分为4组,(1)过表达组:OE_hsa-miR-146b-3p组和OE_control组;(2)沉默组:SH_hsa-miR-146b-3p组和SH_control组。采用CCK-8实验检测细胞的增殖能力,细胞划痕及Transwell实验检测迁移能力,细胞周期和凋亡检测分别探讨细胞的分布特征和凋亡率;通过转录组测序(RNA-seq测序)和双荧光素酶实验验证hsa-miR-146b-3p的下游靶点;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹实验(western blotting)检测靶基因的表达量。结果:与对照组比较,过表达hsa-miR-146b-3p显著促进EA.hy926细胞增殖(P<0.01)、迁移(P<0.0001)及S期细胞比例(P<0.01),并升高晚期凋亡率和总凋亡率(P<0.05);沉默组则呈现增殖抑制(P<0.05)、迁移能力减弱(P<0.0001)并降低S期比例(P<0.05),同时减少早期凋亡率(P<0.05)。RNA-seq测序联合双荧光素酶实验证实hsa-miR-146b-3p调控PI3K/Akt通路上的CREB3L3(P<0.001)。RT-qPCR和western blotting结果显示,hsa-miR-146b-3p过表达导致CREB3L3表达水平下降。结论:Hsa-miR-146b-3p可能通过下调CREB3L3的表达水平及其所在的PI3K/Akt通路影响内皮细胞的功能并促进动脉粥样硬化的发生发展。 展开更多
关键词 hsa-mir-146b-3p 冠心病 转录组测序 PI3K/AKT信号通路
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血浆miR-146b-5p和miR-222-5p对急性心肌梗死的诊断和预后价值
3
作者 李贺娟 刘正兵 +3 位作者 李翰卿 马赛 江振洲 刘晶 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第6期587-594,共8页
目的探索急性心肌梗死患者中具有诊断和预后价值的生物标志物。方法采用实时荧光定量分析法(RTPCR)验证大鼠心肌梗死组心肌组织和血清中mi RNAs芯片筛选出的差异表达的mi RNAs;在61名AMI患者、53名冠心病患者和56名健康对照中,检测其血... 目的探索急性心肌梗死患者中具有诊断和预后价值的生物标志物。方法采用实时荧光定量分析法(RTPCR)验证大鼠心肌梗死组心肌组织和血清中mi RNAs芯片筛选出的差异表达的mi RNAs;在61名AMI患者、53名冠心病患者和56名健康对照中,检测其血浆中选定mi RNAs的表达,并统计分析mi RNAs的诊断价值;最后对AMI患者的临床资料进行了365 d的预后随访分析。结果根据大鼠心肌梗死组织和血清的RT-PCR结果,筛选出mi R-146b-5p、miR-222-5p和mi R-490-5p用于在临床患者血浆中进行研究;患者血浆RT-PCR结果表明,与健康对照相比,AMI患者血浆中mi R-146b-5p水平显著升高(P<0.01),miR-222-5p水平显著降低(P<0.01)。相关性分析结果显示,患者血浆中mi R-146b-5p与c TNI显著相关(r=0.6151;P=0.0018),miR-222-5p与CK-MB显著相关(r=0.6277;P=0.0013)。ROC曲线分析显示,miR-146b-5p和mi R-222-5p对预测AMI均有较好的诊断效果。经365d随访,Logistic回归分析显示,患者血浆mi R-222-5p是AMI患者术后不良事件的重要预测因素。Kaplan-Meier生存分析也表明,miR-222-5p可为术后不良事件提供预测价值(P<0.05)。结论血浆mi R-146b-5p和mi R-222-5p可能是临床诊断AMI的潜在生物标志物;血浆mi R-222-5p可作为术后不良事件的预测指标。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 诊断和预后 生物标志物 mir-146b-5p mir-222-5p
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miR-146b调控ERK1/2-AP-1信号通路参与糖尿病并发脑梗死大鼠模型的分子机制研究
4
作者 刘伶俐 魏若宣 +2 位作者 陈蔚 孔彩霞 刘志红 《现代检验医学杂志》 2025年第2期135-139,共5页
目的探究miR-146b是否可通过调控细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)活化蛋白-1(AP-1)信号通路参与糖尿病并发脑梗死(DM-CI)大鼠的脑损伤过程。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组、DM-CI组、低表达miR-146b组和抑制ERK1/2组,每组20只。美国国... 目的探究miR-146b是否可通过调控细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)活化蛋白-1(AP-1)信号通路参与糖尿病并发脑梗死(DM-CI)大鼠的脑损伤过程。方法将80只SD大鼠随机分为假手术组、DM-CI组、低表达miR-146b组和抑制ERK1/2组,每组20只。美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分衡量大鼠脑功能。RT-qPCR检测大鼠脑组织中miR-146b,ERK1/2,AP-1的mRNA水平;Western blotting检侧大鼠脑组织中ERK1/2,AP-1的蛋白水平;TTC染色检测大鼠脑梗死体积;H&E染色检测大鼠脑组织病理学变化。血糖仪检测大鼠随机血糖水平。结果与假手术组相比,DM-CI组大鼠脑组织中miR-146b,ERK1/2,AP-1的mRNA表达水平显著增加,差异具有统计学意义(t=10.86,15.62,9.87,均P<0.05);ERK1/2,AP-1的蛋白水平增加,差异具有统计学意义(t=11.18,23.81,均P<0.05);NIHSS评分、随机血糖水平增加(t=44.49,30.02,均P<0.05);脑梗死体积增加(t=51.05,P<0.05),脑组织结构紊乱且疏松,部分细胞周围间隙可见水肿。与DM-CI组相比,低表达miR-146b组大鼠脑组织中miR-146b,ERK1/2,AP-1mRNA表达水平减少,差异具有统计学意义(t=38.00,20.03,24.25,均P<0.05);ERK1/2,AP-1蛋白表达减少,差异具有统计学意义(t=12.30,26.70,均P<0.05);NIHSS评分减少、随机血糖水平减少,差异具有统计学意义(t=38.11,33.77,均P<0.05),脑梗死体积减少(t=16.70,P<0.05),脑组织损伤及水肿程度改善。抑制ERK1/2组大鼠脑组织中ERK1/2,AP-1的蛋白及mRNA表达水平减少,差异具有统计学意义(t=13.61~38.00,均P<0.05),大鼠NIHSS评分、随机血糖水平减少,差异具有统计学意义(t=16.48,26.61,P<0.05)。结论miR-146b可通过调控ERK1/2 AP-1通路参与DM-CI大鼠的脑功能结构损伤过程。 展开更多
关键词 糖尿病并发脑梗死 微小RNA-146b 调控细胞外调节蛋白激酶 活化蛋白-1
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超声心动图参数联合血清miR-146b水平检测对病毒性心肌炎患儿疾病转归的预测价值
5
作者 吕怡翔 吕彦磊 张莹莹 《黑龙江医药科学》 2025年第5期42-45,共4页
目的:探究超声心动图参数联合血清微小RNA-146b(miR-146b)水平检测对病毒性心肌炎患儿疾病转归的预测价值。方法:回顾性选取洛阳市妇幼保健院2023年3月至2024年3月收治的108例病毒性心肌炎患儿,根据疾病转归情况将其分为转归良好组、转... 目的:探究超声心动图参数联合血清微小RNA-146b(miR-146b)水平检测对病毒性心肌炎患儿疾病转归的预测价值。方法:回顾性选取洛阳市妇幼保健院2023年3月至2024年3月收治的108例病毒性心肌炎患儿,根据疾病转归情况将其分为转归良好组、转归不良组,对比两组治疗前、后超声心动图参数及血清miR-146b水平,分析治疗后超声心动图参数及血清miR-146b水平与疾病转归的相关性及超声心动图参数及血清miR-146b水平对转归不良的预测价值。结果:治疗前、后转归不良组超声心动图参数左室射血分数(LVEF)低于转归良好组,而左室舒张末期内径(LVDd)、左房内径(LAD)及血清miR-146b水平均高于转归良好组(P<0.05);超声心动图参数LVEF与病毒性心肌炎患儿疾病转归呈负相关,LVDd、LAD及血清miR-146b水平与患儿疾病转归呈正相关(P<0.05);超声心动图参数LVEF是病毒性心肌炎患儿转归不良的保护因素,LVDd、LAD与血清miR-146b水平是病毒性心肌炎患儿转归不良的危险因素(P<0.05);超声心动图参数LVEF、LVDd、LAD与血清miR-146b水平及联合检测预测病毒性心肌炎患儿转归不良的曲线下面积(AUC)分别为0.615、0.644、0.607、0.724、0.886(P<0.05);超声心动图参数LVEF、LVDd、LAD与血清miR-146b高水平患儿转归不良是低水平的0.327倍、2.248倍、1.962倍、2.740倍(P<0.05)。结论:超声心动图参数LVEF、LVDd、LAD及血清miR-146b水平与病毒性心肌炎患儿疾病转归关系密切,联合检测可为临床预测病毒性心肌炎患儿转归不良提供一定应用价值。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 患儿 mir-146b 超声心动图参数
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葛根芩连汤含药血清通过miR-146b/SIRT1信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗的研究 被引量:11
6
作者 隋淼 蒋小飞 +2 位作者 范尧夫 陈国芳 刘超 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第3期630-635,共6页
目的:探讨葛根芩连汤含药血清改善HepG2细胞胰岛素抵抗的机制。方法:建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,用葛根芩连汤含药血清、吡格列酮干预,并设空白对照组和模型组。比色法检测细胞糖原合成能力,实时定量PCR检测miR-146b的表达,Western b... 目的:探讨葛根芩连汤含药血清改善HepG2细胞胰岛素抵抗的机制。方法:建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型,用葛根芩连汤含药血清、吡格列酮干预,并设空白对照组和模型组。比色法检测细胞糖原合成能力,实时定量PCR检测miR-146b的表达,Western blot和实时定量PCR检测SIRT1/FoxO1通路中相关蛋白及mRNA的表达。结果:葛根芩连汤含药血清能逆转胰岛素抵抗HepG2细胞的糖原合成能力下降(P<0.01)。与对照组比较,模型组miR-146b表达显著升高(P<0.01),葛根芩连汤含药血清能显著抑制miR-146b的表达(P<0.01)。Western blot显示,与空白对照组比较,模型组SIRT1、PPARγ蛋白表达显著降低,acetyl-FoxO1蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,葛根芩连汤含药血清组SIRT1、PPARγ蛋白表达显著升高,acetyl-FoxO1蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。过表达的miR-146b能抑制SIRT1蛋白的表达,沉默miR-146b能增强SIRT1蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:葛根芩连汤含药血清能改善棕榈酸诱导的HepG2胰岛素抵抗模型,其机制与调控miR-146b/SIRT1信号通路有关。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 胰岛素抵抗 mir-146b/SIRT1信号通路
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miR-146b对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺组织中ICAM-1表达的调控作用 被引量:7
7
作者 龙光文 张谦 +2 位作者 杨秀林 吉春玲 董裕康 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期587-594,共8页
目的:探讨miR-146b对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺组织中细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,阐明miR-146b治疗ARDS的分子机制。方法:采用尾静脉注射油酸法建立ARDS大鼠模型,并将建模成功的大鼠分为模型组(只给予油酸)、agomir阴性... 目的:探讨miR-146b对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺组织中细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响,阐明miR-146b治疗ARDS的分子机制。方法:采用尾静脉注射油酸法建立ARDS大鼠模型,并将建模成功的大鼠分为模型组(只给予油酸)、agomir阴性对照组和miR-146b agomir组,每组15只,另选15只大鼠作为假手术组(只给予生理盐水,不建模)。术前1 h,miR-146b agomir组大鼠给予miR-146b agomir进行干预,agomir阴性对照组大鼠给予miR-146b agomir阴性对照试剂进行干预。造模成功24 h后,采用血气分析仪检测各组大鼠血氧分压(PaO2)和氧合指数(OI),检测各组大鼠肺组织湿/干重(W/D)比值,ELISA法检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,HE染色观察各组大鼠肺组织病理形态表现,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肺组织中miR-146b和ICAM-1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肺组织中ICAM-1蛋白表达水平,双荧光素酶报告系统检测miR-146b和ICAM-1的靶向关系。结果:与模型组和agomir阴性对照组比较,miR-146b agomir组大鼠动脉血PaO2和OI及肺组织W/D比值升高(P<0.01),BALF中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高(P<0.01)。HE染色,假手术组大鼠肺组织结构正常,无明显炎症病理改变;模型组和agomir阴性对照组大鼠肺组织呈现肺泡腔出血、肺泡壁增厚和红细胞渗出等病理变化;miR-146b agomir组大鼠肺组织上述病理形态变化减轻。与模型组和agomir阴性对照组比较,miR-146b agomir组大鼠肺组织中ICAM-1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而miR-146b表达水平明显升高(P<0.01)。双荧光素酶报告系统实验证实miR-146b靶向调控ICAM-1基因。结论:miR-146b通过靶向抑制ICAM-1表达水平,降低ARDS大鼠肺组织炎症水平,缓解肺组织功能损伤,对ARDS肺组织起到保护作用。 展开更多
关键词 mir-146b 细胞间黏附分子1 急性呼吸窘迫综合征 靶向调控 炎症因子
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MiR-146b在急性Stanford A型主动脉夹层患者外周血清和主动脉组织中的表达及其临床意义 被引量:10
8
作者 李杰 周庆 +2 位作者 何孝军 程永庆 王东进 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1136-1142,共7页
目的:研究miR-146b在急性Stanford A型主动脉夹层(Stanford type A aortic dissection,TAAD)患者外周血清及主动脉壁组织中的表达,探讨miR-146b在TAAD发病中的意义及机制。方法:将研究对象分为对照组(n=23)和TAAD组(n=27),收集所有研究... 目的:研究miR-146b在急性Stanford A型主动脉夹层(Stanford type A aortic dissection,TAAD)患者外周血清及主动脉壁组织中的表达,探讨miR-146b在TAAD发病中的意义及机制。方法:将研究对象分为对照组(n=23)和TAAD组(n=27),收集所有研究对象的外周血清、术中主动脉壁组织和临床资料。运用实时荧光定量PCR(quantitative realtime PCR,qRT-PCR)检测各组外周血清及主动脉壁组织中miR-146b的表达水平。比较不同主动脉夹层风险级别的miR-146b水平,对miR-146b水平与TAAD患者主动脉夹层破裂风险进行相关性分析。运用DIANA LAB-TarBase 6.0数据库及TargetScan靶基因预测软件预测miR-146b相关靶基因。结果:TAAD组外周血清和主动脉壁组织中miR-146b表达水平均较对照组增高(P<0.001);中度风险和重度高危的TAAD患者外周血清和主动脉壁组织中miR-146b的表达水平较轻度风险患者明显增高(P<0.05);TAAD外周血清和主动脉壁组织中miR-146b差异表达与主动脉夹层高危风险呈正相关(r=0.862,0.872;P<0.05)。核因子κB1(nuclear factor kappa B1,NF-κB1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)、基质金属蛋白酶-16(matrix metalloproteinase 16,MMP16)和肌动蛋白2(actin alpha 2,ACTA2)为miR-146b的靶基因。 展开更多
关键词 mir-146b 主动脉夹层 核因子κb1 肿瘤坏死因子受体相关因子6 基质金属蛋白酶-16 肌动蛋白2
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miR-146b靶标预测及功能分析 被引量:2
9
作者 朱玲玲 史春梅 +5 位作者 徐广峰 张春梅 陈玲 季晨博 郭锡熔 鲁一兵 《江苏医药》 CAS 北大核心 2013年第3期266-268,共3页
目的通过对miR-146b进行系统的生物信息学分析,预测miR-146b的靶基因及其功能。方法应用miRBase获取并分析miR-146b的序列特征;应用TargetScan、PicTar及miRanda预测miR-146b的靶基因,进行功能注释和信号转导通路分析;应用PubMed、Googl... 目的通过对miR-146b进行系统的生物信息学分析,预测miR-146b的靶基因及其功能。方法应用miRBase获取并分析miR-146b的序列特征;应用TargetScan、PicTar及miRanda预测miR-146b的靶基因,进行功能注释和信号转导通路分析;应用PubMed、Google等信息搜索工具综述miR-146b已有功能研究。结果 miR-146b在各物种之间具有高度保守性。功能注释显示预测靶基因主要富集于促细胞增殖、转录调控、调控细胞分化等生物学过程。信号转导通路分析显示预测靶基因显著富集于白血病、ErbB信号通路、促分裂原活化的蛋白激酶通路等。结论生物信息学分析提示,miR-146b可能与细胞分化、代谢密切相关。 展开更多
关键词 mir-146b MIRNA 生物信息学 人脂肪细胞
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固有免疫信号分子hsa-miR-146b调控脑卒中关联信号分子的生物信息学分析与实验研究 被引量:3
10
作者 吕燕妮 钱贻崧 +4 位作者 付龙生 温金华 陈瑛 蔡军 张洁 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第2期172-178,共7页
该研究旨在运用生物信息学方法预测固有免疫信号分子hsa-mi R-146b与脑卒中关联的分子调控网络。实验运用UCSC基因组浏览器、人类mi RNA疾病数据库、TF-mi RNA调控数据库、mi RNA靶基因预测验证数据库和Genecards数据库研究hsa-mi R-146... 该研究旨在运用生物信息学方法预测固有免疫信号分子hsa-mi R-146b与脑卒中关联的分子调控网络。实验运用UCSC基因组浏览器、人类mi RNA疾病数据库、TF-mi RNA调控数据库、mi RNA靶基因预测验证数据库和Genecards数据库研究hsa-mi R-146b的上游转录因子、下游靶基因及信号通路的多个调控途径,绘制hsa-mi R-146b的核心调控网络图。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激慢病毒感染的小胶质细胞BV2细胞,采用实时定量PCR检测早期生长反应基因1(early growth response 1,EGR1)、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、mi R-146b、脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的m RNA水平变化,对hsa-mi R-146b调控网络进行验证。UCSC数据库中显示,hsa-mi R-146b在多个物种中具有高度保守性。生物信息学分析显示,hsa-mi R-146b受转录因子EGR1调控的同时,又调控下游TLR4、BDNF和MMP9等39个靶基因。所有基因构成一个以hsa-mi R-146b为核心的调控网络,在脑卒中的发生与发展中起着重要作用。在LPS刺激的BV2细胞中,EGR1、TLR4、mi R-146b、BDNF和MMP9m RNA水平升高,而RNA慢病毒技术干扰小胶质细胞中的EGR1的表达后,TLR4、mi R-146b和MMP9 m RNA水平降低,BDNF升高,表明EGR1是调节mi R-146b表达和下游信号分子TLR4、BDNF和MMP9的关键信号分子。综上所述,生物信息学方法预测并初步验证了hsa-mi R-146b分子在脑卒中疾病中的调控网络,为深入阐明hsa-mi R-146b在脑卒中疾病中的机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 生物信息学 固有免疫 hsa-mir-146b 脑卒中 调控网络 小胶质细胞
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肝癌组织miR-146b-5p和miR-134的表达下调及临床意义 被引量:3
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作者 王珣 曾会 +2 位作者 陈志娟 刁卓 司毅 《西部医学》 2021年第5期752-755,共4页
目的探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义。方法选取2017年6月~2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组。采用实时荧光定量... 目的探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义。方法选取2017年6月~2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测癌组织和癌旁正常组织中miR-146b-5p和miR-134的表达水平,并分析两者的表达水平与临床病理特征的相关性。结果miR-146b-5p和miR-134在观察组中的相对表达量均低于对照组(P<0.05);miR-146b-5p的表达下调与肿瘤大小(>5cm)、无静脉浸润和TNM分期(Ⅲ/Ⅳ期)相关(均P<0.05);miR-134的表达下调与肿瘤大小(>5cm)、有肝硬化、TNM分期(Ⅲ/Ⅳ期)和无肿瘤包膜相关(均P<0.05)。结论肝癌组织中,miR-146b-5p和miR-134表达水平下调,可能参与肝癌的发生和发展,与肝癌临床恶性表型密切相关。 展开更多
关键词 肝癌 mir-146b-5p mir-134 恶性表型 表达下调
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miR-146b-3p通过RAF1/p38MAPK/COX-2信号通路影响糖尿病发生脑梗死的机制研究 被引量:5
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作者 王剑 王振焕 张钦昌 《中西医结合心脑血管病杂志》 2021年第18期3207-3213,共7页
目的探讨miR-146b-3p通过RAF1/p38MAPK/环氧化酶-2(COX-2)信号通路影响糖尿病脑梗死的发生机制。方法选取我院2015年4月—2017年12月210例糖尿病病人为研究对象,通过随访研究调查病人发生血栓情况,有15例患有脑梗死,作为伴有糖尿病的脑... 目的探讨miR-146b-3p通过RAF1/p38MAPK/环氧化酶-2(COX-2)信号通路影响糖尿病脑梗死的发生机制。方法选取我院2015年4月—2017年12月210例糖尿病病人为研究对象,通过随访研究调查病人发生血栓情况,有15例患有脑梗死,作为伴有糖尿病的脑梗死(DMCI)组,另选取15例无脑梗死病人为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组病人白介素-6(IL-6)、COX-2含量;采用聚合酶链式反应(PCR)及免疫印迹方法检测相关基因的mRNA及蛋白表达。结果两组一般资料及相关指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,DMCI组血中IL-6和COX-2表达升高,但存在一定的局限性;IL-6诱导外周血单核细胞2 h后,COX-2的mRNA和蛋白表达明显增加,COX-2表达受IL-6调控;与对照组相比,miR-146b-3p mRNA在DMCI组表达低于正常组(0.16±0.07与1.12±0.16,P<0.001);与对照组相比,DMCI组RAF1 mRNA的表达增加(P<0.01),且其蛋白表达也增加;DMCI组中COX-2、p-p38MAPK表达增加,p38MAPK蛋白表达减少,说明DMCI病人激活了p38MAPK的信号通路;当用10 ng/mL的IL-6处理外周血单核细胞(PBMC)时,可激活STAT3磷酸化,且当IL-6处理PBMC 1 h后,miR-146b-3p mRNA表达下降,当IL-6处理12 h后,发现miR-146b-3p mRNA在IL-6处理12 h时(0.20±0.12)表达低于对照组(1.02±0.15,P<0.05),还发现IL-6处理中COX-2的mRNA(4.98±0.69)和蛋白质表达高于对照组;DMCI组中miR-146a mRNA表达降低,与miR-146b的表达趋势一致。结论miR-146b-3p的表达通过介导RAF/p38MAPK/COX-2信号通路与糖尿病病人脑梗死的发展密切相关,miR-146b-3p可作为糖尿病脑梗死病人检测和干预的新靶点。 展开更多
关键词 糖尿病 脑梗死 mir-146b-3p RAF1 P38MAPK 环氧化酶 信号通路
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anti-miR-146b对海马神经元OGD/R损伤的凋亡抑制作用 被引量:2
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作者 李雪花 王莹 +3 位作者 孙广大 李兴江 赵庭琪 李文媛 《海南医学院学报》 CAS 2018年第20期1783-1786,共4页
目的:构建海马神经元离体氧糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞模型,探讨miR-146b抑制(anti-miR-146b)对海马神经元缺血/再灌注损伤的凋亡抑制作用。方法:原代培养大鼠海马神经元,建立OGD/R细胞模型,应用anti-miR-146b慢病毒转染抑制miR-146b表达,... 目的:构建海马神经元离体氧糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞模型,探讨miR-146b抑制(anti-miR-146b)对海马神经元缺血/再灌注损伤的凋亡抑制作用。方法:原代培养大鼠海马神经元,建立OGD/R细胞模型,应用anti-miR-146b慢病毒转染抑制miR-146b表达,将细胞分为正常组、OGD/R组和OGD/R+anti-miR-146b组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-146b、KLF7及凋亡相关蛋白Caspase-3,Bcl-2和Bax mRNA表达变化。CCK8法检测各组细胞活性,Hoechst33342/PI双染法检测各组细胞凋亡情况。结果:与正常组比较,OGD/R组和OGD/R+anti-miR-146b组细胞形态受损,细胞活性显著下降,细胞凋亡率显著增高,其中OGD/R+anti-miR-146b组较OGD/R组细胞形态显著改善,细胞活性显著增高,细胞凋亡率显著降低(P <0.05)。与正常组比较,OGD/R组和OGD/R+anti-miR-146b组miR-146b、KLF7、Caspase-3、Bax和Bcl-2mRNA表达水平显著增高,其中OGD/R+anti-miR-146b组KLF7和Bcl-2 mRNA表达显著高于OGD/R组,而miR-146b、Caspase-3和Bax mRNA表达则显著降低(P<0.05)。结论:anti-miR-146b对OGD/R诱导的海马神经元缺血/再灌注细胞损伤具有保护作用,其机制可能与上调KLF7信号通路,下调Caspase-3和Bax表达,上调Bcl-2表达,抑制OGD/R诱导的细胞凋亡途径有关。 展开更多
关键词 anti-mir-146b 氧糖剥夺/复氧 海马神经元 凋亡
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miR-146b-5p通过抑制ATR通路诱导肺癌A594细胞凋亡 被引量:2
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作者 陈晓 魏立 +1 位作者 陈重 李基伟 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第20期3238-3241,共4页
目的:研究miR-146b-5p对ATR的靶向抑制、诱导A594细胞凋亡的作用。方法:CCK8实验、克隆形成实验检测对照组、miR-146b-5p类似物转染组和阴性转染组,观察A594细胞增殖和存活能力;Target Scan7.1与miRanda软件预测miR-146b-5p靶向ATR。实... 目的:研究miR-146b-5p对ATR的靶向抑制、诱导A594细胞凋亡的作用。方法:CCK8实验、克隆形成实验检测对照组、miR-146b-5p类似物转染组和阴性转染组,观察A594细胞增殖和存活能力;Target Scan7.1与miRanda软件预测miR-146b-5p靶向ATR。实时定量PCR检测对照组、miR-146b-5p组和Negative mimics组ATR mRNA表达变化。设计ATR 3'UTR突变序列(ATR-3'UTR-mut)和荧光报告载体实验验证miR-146b-5p对ATR的靶向作用;Western Blot实验检测各组癌细胞中ATR通路蛋白ATR、Chk1、p53表达变化,流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果:CCK8实验和克隆形成实验结果:与对照组比较,miR-146b-5p组细胞数降低,克隆形成率从0.98±0.01降低到0.57±0.03,差异显著(P<0.05);Negative mimics组细胞数和克隆形成率0.92±0.03均无显著差异(P>0.05)。实时定量PCR结果与对照组比较,miR-146b-5p组ATR mRNA表达从0.96±0.02降低到0.38±0.03,差异显著(P<0.05);无义序列组ATR mRNA表达为0.94±0.02,差异不显著(P>0.05);荧光报告载体实验结果:ATR 3'UTR miR-1 4 6 b-5p组ATR mRNA降低到0.36±0.03,差异显著(P<0.05);ATR 3'UTR-mut miR-146b-5p组ATR mRNA表达量为0.96±0.02,差异不显著(P>0.05)。Western Blot结果显示miR-146b-5p组ATR、Chk1、p53蛋白表达降低。流式细胞仪结果显示miR-146b-5p组细胞凋亡率增加(26±2.18)%,差异显著(P<0.05)。结论:miR-146b-5p通过抑制ATR信号通路诱导肺癌A594细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-146b-5p ATR 肺癌 细胞凋亡
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增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:1
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作者 林凡 王欣 +2 位作者 俞亚红 王敏 洪晓泉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期646-650,共5页
目的探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达。将Pre-miR-hsa-miR... 目的探讨增强miR-146b-3p表达对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 Real time PCR检测miR-146b-3p在6种人胰腺癌细胞系(MIA PaCa-2、BxPC-3、AsPC-1、PANC-1、SW1990、PC-3)和手术切除的12对胰腺癌/癌旁组织中的表达。将Pre-miR-hsa-miR-146b-3p Precursor转染MIA PaCa-2细胞,Real time PCR检测转染后miR-146b-3p的表达变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-8的表达变化。结果与正常胰腺组织相比,miR-146b-3p在6种胰腺癌细胞系中均呈低表达,以MIA PaCa-2细胞最为明显;12对胰腺组织中,癌组织miR-146b-3p表达水平均低于癌旁组织。同阴性对照组比较,转染前体组的MIA PaCa-2细胞,miR-146b-3p表达增强383.25倍,细胞增殖能力下降,细胞凋亡率增加,蛋白Bcl-2表达降低(50.0%),Bax表达升高(4.29倍)。结论 miR-146b-3p在胰腺癌细胞系和癌组织中低表达;上调胰腺癌细胞MIA PaCa-2中miR-146b-3p的表达,能够抑制增殖和诱导细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2表达,上调Bax的表达有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 mir-146b-3p 细胞增殖 细胞凋亡
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MiR-146b在白藜芦醇保护缺氧/复氧心肌细胞损伤中的作用及其机制 被引量:2
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作者 李琼 王磊 高波 《临床与病理杂志》 2020年第3期556-564,共9页
目的:探讨miR-146b在白藜芦醇保护缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)心肌细胞损伤中的作用及其机制。方法:将体外培养的心肌细胞分为正常组、H/R组、白藜芦醇组、白藜芦醇+antimiR-NC组和白藜芦醇+anti-miR-146b组。采用荧光定量PC... 目的:探讨miR-146b在白藜芦醇保护缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)心肌细胞损伤中的作用及其机制。方法:将体外培养的心肌细胞分为正常组、H/R组、白藜芦醇组、白藜芦醇+antimiR-NC组和白藜芦醇+anti-miR-146b组。采用荧光定量PCR检测miR-146b的表达,ELISA法检测细胞上清液中IL-1β,TNF-α和IL-6含量,MTT法检测细胞存活率,比色法检测LDH漏出率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测Bcl-2,caspase-3,NF-κB和TRAF6蛋白的表达,双荧光素酶报告基因实验检测miR-146b和TRAF6的靶向关系。结果:与正常组相比,H/R组细胞中miR-146b和Bcl-2蛋白的表达水平、细胞存活率显著降低,而细胞上清液中IL-1β,TNF-α,IL-6含量和LDH漏出率、细胞凋亡率以及caspase-3,NF-κB蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);与H/R组相比,白藜芦醇组中miR-146b和Bcl-2蛋白的表达水平、细胞存活率显著升高,而IL-1β,TNF-α,IL-6含量和LDH漏出率、细胞凋亡率以及caspase-3,NF-κB蛋白的表达水平显著降低(P<0.05);与白藜芦醇组相比,白藜芦醇+anti-miR-146b组中miR-146b和Bcl-2蛋白的表达水平、细胞存活率显著降低,而IL-1β,TNF-α,IL-6含量和LDH漏出率,细胞凋亡率以及caspase-3,NF-κB蛋白的表达水平显著升高(P<0.05);而白藜芦醇+anti-miR-NC组与白藜芦醇组相比差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因和蛋白质印迹法证实TRAF6是miR-146b靶基因,且miR-146b可靶向调控其表达。结论:miR-146b抑制心肌细胞凋亡和炎症反应是白藜芦醇减轻H/R心肌细胞损伤的调控机制,其作用原理可能与靶向调控TRAF6有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 心肌细胞 缺氧/复氧 mir-146b TRAF6
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miR-146b-3p通过靶向BTG2基因调控肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制研究 被引量:1
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作者 贺丽娜 刘力 +2 位作者 贺晓旭 王建钧 何松 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2021年第9期816-821,共6页
目的:探讨miR-146b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常肝细胞系L025和人不同肝癌细胞系Huh7、MHCC97-H、HCCLM3中miR-146b-3p的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测B细胞... 目的:探讨miR-146b-3p对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常肝细胞系L025和人不同肝癌细胞系Huh7、MHCC97-H、HCCLM3中miR-146b-3p的表达水平,免疫印迹法(Western blot)检测B细胞易位基因2(BTG2)蛋白表达水平。在肝癌Huh7细胞中转染miR-146b-3p inhibitor干扰miR-146b-3p的表达,通过噻唑蓝(MTT)和Transwell实验分析干扰miR-146b-3p对Huh7细胞增殖、侵袭和迁移的影响。生物信息学和双荧光素酶报告基因实验检测miR-146b-3p和BTG2的靶向关系。功能恢复实验检测沉默BTG2对miR-146b-3p调控的Huh7细胞增殖、侵袭和迁移的影响。结果:与人正常肝细胞系比较,人肝癌细胞系Huh7、MHCC97-H、HCCLM3中miR-146b-3p的表达水平明显上调(P<0.05),BTG2的表达明显下调(P<0.05)。干扰miR-146b-3p能够上调BTG2的表达。生物信息学预测显示BTG2可能是miR-146b-3p的直接靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实了二者的靶向关系。干扰miR-146b-3p能够抑制Huh7细胞增殖、侵袭和迁移。沉默BTG2能够逆转干扰miR-146b-3p导致的Huh7细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用。结论:干扰miR-146b-3p通过靶向上调BTG2的表达抑制肝癌Huh7细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 肝癌细胞 mir-146b-3p bTG2基因 增殖 侵袭 迁移
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血浆miR-146b-5p在胃癌患者中的表达及临床意义 被引量:2
18
作者 万岱维 杨勇 +2 位作者 韩野 代晨 支巧明 《中国血液流变学杂志》 CAS 2019年第3期263-267,292,共6页
目的基于GEO数据集分析的基础上,探讨胃癌患者血浆中miR-146b-5p的表达水平及临床意义.方法应用实时荧光定量PCR技术检测miR-146b-5p在32例胃癌患者癌组织及癌旁组织中的表达情况;另取92例胃癌患者以及35名健康人的血浆样本,分析其中miR... 目的基于GEO数据集分析的基础上,探讨胃癌患者血浆中miR-146b-5p的表达水平及临床意义.方法应用实时荧光定量PCR技术检测miR-146b-5p在32例胃癌患者癌组织及癌旁组织中的表达情况;另取92例胃癌患者以及35名健康人的血浆样本,分析其中miR-146b-5p的表达,并对其临床意义进行分析.结果与癌旁组织相比,胃癌组织中的miR-146b-5p表达水平明显升高;与健康组相比,胃癌患者血浆中miR-146b-5p也存在高表达;其受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.680,在胃癌诊断效能中,其敏感性为0.79,特异性为0.77;胃癌患者的淋巴结转移、疾病分期及生存期与miR-146b-5p的表达密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05);比例风险回归分析发现胃癌的独立预后因子中包括了血浆miR-146b-5p的表达(P<0.05).结论胃癌肿瘤分期和预后与血浆中miR-146b-5p表达水平存在相关性,可作为辅助胃癌诊断及预测预后的分子标志物. 展开更多
关键词 mir-146b-5p 胃癌 诊断 预后
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miR-146b过表达对脂多糖刺激仔猪肠上皮细胞Toll样受体4基因表达和促炎因子产生的影响
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作者 陶新 邓波 +2 位作者 门小明 刘淑杰 徐子伟 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期623-631,共9页
本研究旨在探讨miR-146b过表达对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)Toll样受体4(TLR4)基因表达和促炎因子产生的影响。首先利用LPS刺激IPEC-J2细胞,然后使用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测LPS刺激对IPEC-J... 本研究旨在探讨miR-146b过表达对脂多糖(LPS)刺激仔猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)Toll样受体4(TLR4)基因表达和促炎因子产生的影响。首先利用LPS刺激IPEC-J2细胞,然后使用荧光定量PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分别检测LPS刺激对IPEC-J2细胞中TLR4和促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和干扰素-γ(IFN-γ)等的mRNA表达以及对分泌到细胞培养液中促炎因子含量的影响。在此基础上,通过miR-146b mimic细胞转染试验,探讨miR-146b过表达对LPS刺激的IPEC-J2细胞中TLR4的mRNA表达和促炎因子产生的抑制作用。结果表明:1)与未刺激处理相比,LPS刺激处理的IPEC-J2细胞中TLR4、IL-1β、TNF-α、IL-8和IFN-γ的mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01),细胞培养液中TNF-α、IL-8和IFN-γ含量极显著升高(P<0.01)。2)与LPS处理相比,LPS+miR-146b mimic处理的miR-146b的相对表达量极显著升高(P<0.01),IPEC-J2细胞中TLR4、TNF-α、IL-8和IFN-γ的mRNA相对表达量分别显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),细胞培养液中TNF-α、IL-8和IFN-γ含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,miR-146b在LPS刺激的IPEC-J2细胞中可通过抑制促炎因子的产生发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 脂多糖 mir-146b 仔猪 肠上皮细胞 促炎因子
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miR-146b-5p靶向调控NAIF1抑制胃癌细胞凋亡 被引量:2
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作者 马君 王燕忠 牟一平 《全科医学临床与教育》 2020年第9期788-792,共5页
目的分析miR-146b-5p对胃癌细胞MGC803增殖与凋亡的调控作用及分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、MKN28、MKN45和SGC7901)中miR-146b-5p水平;应用miR-146b-5p抑制剂(inhibitor)和阴性对照(miRN... 目的分析miR-146b-5p对胃癌细胞MGC803增殖与凋亡的调控作用及分子机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、MKN28、MKN45和SGC7901)中miR-146b-5p水平;应用miR-146b-5p抑制剂(inhibitor)和阴性对照(miRNA-NC)分别转染胃癌细胞MGC803,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡比例;TargetScan数据库分析miR-146b-5p的潜在靶基因,蛋白免疫印迹技术(western blot)检测核诱导凋亡因子1(NAIF1)蛋白表达水平;双荧光素酶实验验证miR-146b-5p和NAIF1之间的关系。结果不同胃癌细胞系(MGC803、BGC823、SGC7901、MKN45和MKN28)miR-146b-5p水平均高于正常人胃黏膜细胞(GES-1)(t分别=26.21、13.08、11.09、11.09、6.41,P均<0.05)。miR-146b-5p inhibitor转染胃癌细胞MGC803后miR-146b-5p水平明显降低(t=9.14,P<0.05)。抑制MGC803胃癌细胞miR-146b-5p水平后,细胞活力明显降低,细胞凋亡比例升高(t分别=3.73、9.55,P均<0.05)。miR-146b-5p mimics转染组WT-NAIF1荧光素酶活性明显低于miRNA-NC组(t=8.35,P<0.05)。Western blot结果表明,上调miR-146b-5p水平后,NAIF1蛋白表达明显降低(t=5.67,P<0.05),而下调miR-146b-5p水平后,NAIF1蛋白表达明显升高(t=4.32,P<0.05),在过表达NAIF1的基础上转染miR-146b-5p,细胞活力明显升高,细胞凋亡比例降低(t分别=6.54、4.73,P均<0.05)。结论miR-146b-5p通过靶向抑制NAIF1抑制胃癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 mir-146b-5p 核诱导凋亡因子1 凋亡
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