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长链非编码RNA GAS5通过miR-135b-5p/APC轴抑制胶质瘤进展 被引量:1
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作者 张吉东 王雨涛 冀建文 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第3期243-254,共12页
目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性5(growth arrest-specific 5,GAS5)与miR-135b-5p和腺瘤性结肠息肉病基因(adenomatous polyposis coli,APC)轴之间的相互作用,以阐明其在胶质瘤增殖、转移、侵袭中的生物学功能。方法通过CGGA数据... 目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性5(growth arrest-specific 5,GAS5)与miR-135b-5p和腺瘤性结肠息肉病基因(adenomatous polyposis coli,APC)轴之间的相互作用,以阐明其在胶质瘤增殖、转移、侵袭中的生物学功能。方法通过CGGA数据库分析GAS5表达水平与胶质瘤患者的生存率的关系;通过qRT-PCR检测GAS5在胶质瘤组织和细胞系中的表达水平;人类神经胶质瘤T98和A172细胞系分别用于过表达和敲低实验。通过转染来过表达或者沉默GAS5、miR-135b-5p和APC;通过Western blot与qRT‑PCR技术检测GAS5、miR-135b-5p、APC的表达水平;利用CCK-8实验检测胶质瘤细胞活力,通过Transwell和划痕实验分析肿瘤细胞运动活性;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-135b-5p与GAS5或APC的靶向关系。结果CGGA数据库分析显示GAS5低表达的胶质瘤患者的生存率显著降低(P<0.001)。Western blot与qRT‑PCR检测结果显示,分别与癌旁组织和正常人星形胶质瘤细胞系比较,GAS5在胶质瘤组织和胶质瘤细胞系中的表达下调(P<0.01);CCK-8、Transwell和划痕实验分析表明,与vector组比较,GAS5过表达抑制了胶质瘤细胞活力、侵袭和迁移(P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证明,GAS5和miR-135b-5p之间存在结合位点,且二者mRNA表达水平呈负相关(P=0.019)。CCK-8、Transwell和划痕实验显示,GAS5对胶质瘤细胞生物学功能的影响是通过靶向miR-135b-5p完成的,APC过表达逆转了miR-135b-5p对胶质瘤细胞的促进作用(P<0.01);Western blot结果显示,与mimic_NC比较,miR-135b-5p升高能够抑制APC的表达(P<0.001),GAS5通过靶向miR-135b-5p上调APC的表达(P<0.01)。结论GAS5通过miR-135b-5p/APC轴共同抑制肿瘤发展,揭示了GAS5/miR-135b-5p/APC在胶质瘤发展中的分子调控机制。 展开更多
关键词 长链非编码RNA生长停滞特异性5 神经胶质瘤 mir-135b-5p 腺瘤性结肠息肉病基因
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基于miR-135a/miR-135b调控HOXA10表达探讨滋肾祛瘀解毒方改善子宫内膜异位症性不孕患者冻融胚胎移植结局的机制研究
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作者 周姝 连方 《环球中医药》 2025年第10期1997-2003,共7页
目的探讨滋肾祛瘀解毒方对子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)性不孕患者冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)结局的影响及治疗机制。方法将66例肾虚血瘀型EMs性不孕患者随机分为试验组33例和对照组33例,另选33例男方因素... 目的探讨滋肾祛瘀解毒方对子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)性不孕患者冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)结局的影响及治疗机制。方法将66例肾虚血瘀型EMs性不孕患者随机分为试验组33例和对照组33例,另选33例男方因素不孕症行FET的患者作为观察组。试验组脱落2例(1人未按医嘱服药,1人未完成微创取内膜术),剩余31例行滋肾祛瘀解毒方治疗;对照组脱落2例(2人未按照医嘱服药),剩余31例行安慰剂颗粒治疗;观察组脱落2例(1人因个人原因中途放弃,1人未按医嘱服药),剩余31例行安慰剂颗粒治疗同对照组。治疗3个月经周期后对患者进行综合评价。比较试验组和对照组患者肾虚血瘀证候积分。在胚胎移植后25~38天行超声检查,计算临床妊娠率。检测三组患者子宫内膜HOXA10蛋白、HOXA10 mRNA、miR-135a、miR-135b的表达量,并通过双荧光素酶试验检测HOXA10与miR-135a、miR-135b的结合情况。结果经过3个月经周期的治疗后,试验组与对照组患者的肾虚血瘀证候积分较本组治疗前明显降低(P<0.01),试验组治疗后较对照组肾虚血瘀证候积分降低更多,但未见明显统计学差异(P>0.05)。试验组的临床妊娠率(54.8%,17/31)高于对照组(48.4%,15/31),低于观察组(58.1%,18/31),组间未见明显统计学差异(P>0.05)。治疗后,试验组HOXA10 mRNA及蛋白表达量高于对照组,低于观察组(P<0.01);试验组miR-135a、miR-135b表达量低于对照组,高于观察组(P<0.01)。双荧光素酶报告显示HOXA10与miR-135a、miR-135b直接结合。结论滋肾祛瘀解毒方可以通过下调miR-135a、miR-135b的表达,继而升高HOXA10 mRNA和蛋白表达量,从而提高EMs性不孕患者子宫内膜容受性,改善患者肾虚血瘀体质,促进胚胎着床。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 不孕症 肾虚血瘀 mir-135a/mir-135b/HOXA10通路 滋肾祛瘀解毒方
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MiR-135b在鼻咽癌中的表达及其意义
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作者 窦丽珍 潘文亚 +1 位作者 黎海南 陆伟 《吉林医学》 2025年第6期1271-1273,共3页
目的:探讨miR-135b在鼻咽癌(NPC)中的表达及其意义。方法:选取就诊且经病理检查的NPC患者62例为研究对象,收集患者NPC组织及癌旁组织,经实时荧光定量PCR技术检测表达情况,分析miR-135b与NPC临床特征表现。结果:癌旁组织中miR-135b表达... 目的:探讨miR-135b在鼻咽癌(NPC)中的表达及其意义。方法:选取就诊且经病理检查的NPC患者62例为研究对象,收集患者NPC组织及癌旁组织,经实时荧光定量PCR技术检测表达情况,分析miR-135b与NPC临床特征表现。结果:癌旁组织中miR-135b表达情况高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);高分化与低、中分化miR-135b表达情况比较差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ~Ⅳ分期中miR-135b表达情况高于Ⅰ~Ⅱ分期,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移miR-135b表达情况高于无淋巴结转移,差异有统计学意义(P<0.05);miR-135b与NPC病理结果、临床分期、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论:NPC患者中miR-135b在疾病分期及淋巴结转移中存在着表达异常,为引起NPC发生危险因素,为临床后续NPC早期诊断分子标记物选择提供理论依据。 展开更多
关键词 鼻咽癌 mir-135b 增殖 侵袭
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阿尔兹海默病血清miR-135a、miR-146a、miR-193b表达与疾病进展的关系
4
作者 黄磊 郑春美 +2 位作者 庞卢伟 蒋海潮 凌迎春 《浙江实用医学》 2025年第1期39-41,共3页
目的探讨阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者miR-135a、miR-146a、miR-193b的表达与疾病进展的关系。方法选择2021年3月~2022年4月浙江省绍兴市第七人民医院确诊的AD患者60例(AD组),以及轻度认知障碍(Mild cognitive impairment... 目的探讨阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)患者miR-135a、miR-146a、miR-193b的表达与疾病进展的关系。方法选择2021年3月~2022年4月浙江省绍兴市第七人民医院确诊的AD患者60例(AD组),以及轻度认知障碍(Mild cognitive impairment,MCI)患者60例(MCI组),另选取同期健康体检者60例(正常组),采集三组受试者血液标本,采用实时定量逆转录酶PCR(qRT-PCR)法测定血清miR-135a、miR-146a、miR-193b的表达,并分析与疾病进展的关系。结果AD组miR-135a和miR-193b水平均低于正常组和MCI组(P<0.05);AD组miR-146a水平高于正常组和MCI组(P<0.05)。正常组和MCI组的miR-135a、miR-146a、miR-193b表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论随着阿尔兹海默病的进展,血清miR-135a和miR-193b水平降低,miR-146a水平升高。 展开更多
关键词 阿尔兹海默病 mir-135a mir-146A mir-193b 疾病进展
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lncRNA UCA1调控miR-135b-5p对子痫前期滋养细胞增殖和侵袭的影响
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作者 谢依欣 李小倩 张志慧 《中国优生与遗传杂志》 2025年第5期1062-1068,共7页
目的探讨长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1(lncRNA UCA1)靶向微小RNA-135b-5p(miR-135b-5p)对子痫前期(PE)滋养细胞增殖和侵袭的影响。方法:利用HTR-8/SVneo细胞构建体外PE模型,并检测细胞中lncRNA UCA1和miR-135b-5p的表达量。将构建PE... 目的探讨长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1(lncRNA UCA1)靶向微小RNA-135b-5p(miR-135b-5p)对子痫前期(PE)滋养细胞增殖和侵袭的影响。方法:利用HTR-8/SVneo细胞构建体外PE模型,并检测细胞中lncRNA UCA1和miR-135b-5p的表达量。将构建PE模型的HTR-8/SVneo细胞分为NC组、sh-NC组、sh-lncRNA UCA1组、sh-lncRNA UCA1+anti-miR-NC组、sh-lncRNA UCA1+anti-miR-135b-5p组。通过克隆形成实验和EdU染色检测各组细胞增殖能力;Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;qRT-PCR实验检测各组细胞中lncRNA UCA1、miR-135b-5p以及细胞增殖、侵袭相关基因的表达量;Western blot实验检测细胞增殖和侵袭相关蛋白的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA UCA1和miR-135b-5p靶向关系。结果与Control组相比,Sham组lncRNA UCA1表达量上升(P<0.05),miR-135b-5p表达量下降(P<0.05);与sh-NC组相比,sh-lncRNA UCA1组细胞增殖能力、侵袭能力、lncRNA UCA1、增殖细胞核抗原(PCNA)、周期蛋白依赖性激酶(CDK1)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP14 mRNA表达量和蛋白表达量都明显下降(P<0.05),miR-135b-5p表达量明显上升(P<0.05);而上述指标变化趋势在sh-lncRNA UCA1+anti-miR-135b-5p组中均被逆转(P<0.05)。结论干扰lncRNA UCA1表达可通过靶向上调miR-135b-5p表达抑制PE滋养细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 lncRNA UCA1 mir-135b-5p 子痫前期 增殖 侵袭
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Tumor-derived exosomal miR-425-5p and miR-135b-3p enhance colorectal cancer progression through immune suppression and vascular permeability promotion
6
作者 Chun-Zai Feng Si-Quan Zhong +3 位作者 Shao-Wei Ye Zheng Zheng Hao Sun Shi-Hai Zhou 《World Journal of Gastrointestinal Oncology》 2025年第6期423-438,共16页
BACKGROUND Colorectal cancer(CRC)is a leading cause of cancer-related morbidity and mor-tality globally.Exosomal microRNAs(miRNAs)are known to modulate tumor progression by influencing immune responses and vascular dy... BACKGROUND Colorectal cancer(CRC)is a leading cause of cancer-related morbidity and mor-tality globally.Exosomal microRNAs(miRNAs)are known to modulate tumor progression by influencing immune responses and vascular dynamics.However,the roles of specific exosomal miRNAs,such as miR-425-5p and miR-135b-3p,in CRC remain unclear.AIM To explore the specific roles and underlying mechanisms of exosomal miR-425-5p and miR-135b-3p in CRC progression.METHODS Differentially expressed miRNAs were identified through microarray analysis of exosomes isolated from CRC tissues and adjacent normal mucosa.Functional roles of miR-425-5p and miR-135b-3p were evaluated in vitro using macrophage polarization,T cell differentiation,and vascular permeability assays,as well as in vivo tumor formation and metastasis experiments in nude mice.Validation expe-riments were performed using CRC cell lines(HCT116 and SW620).RESULTS Exosomal miR-425-5p and miR-135b-3p were significantly upregulated in CRC compared to normal tissues.Functional studies revealed that miR-425-5p promo-tes macrophage M2-like polarization and suppresses T cell proinflammatory responses,while miR-135b-3p enhances vascular permeability and angiogenesis.Inhibition of these miRNAs in CRC cell-derived exosomes significantly supp-ressed tumor growth and metastasis in nude mice,reprogramming the tumor microenvironment toward reduced angiogenesis and enhanced immune acti-vation.Combined inhibition of both miRNAs resulted in the most pronounced effects.CONCLUSION Exosomal miR-425-5p and miR-135b-3p drive CRC progression by promoting immune suppression and vascular permeability.Their inhibition offers a promising strategy for modulating the tumor microenvironment and limiting CRC metastasis. 展开更多
关键词 Colorectal cancer EXOSOMES mir-425-5p mir-135b-3p Immune modulation Vascular permeability
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miR-135a-5p通过调控PCDH9核易位促进膀胱癌转移的机制探讨
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作者 文东虎 盛勇 +3 位作者 朱音 曾彦 李艳丽 田晶 《中华养生保健》 2025年第17期5-9,共5页
目的 探究miR-135a-5p对膀胱癌转移的调控作用及分子机制。方法 通过qRT-PCR检测miR-135a-5p在高转移性膀胱癌细胞系5637与人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的表达差异;构建miR-135a-5p mimics(过表达组)及inhibitor(抑制组),用脂质体法转... 目的 探究miR-135a-5p对膀胱癌转移的调控作用及分子机制。方法 通过qRT-PCR检测miR-135a-5p在高转移性膀胱癌细胞系5637与人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1中的表达差异;构建miR-135a-5p mimics(过表达组)及inhibitor(抑制组),用脂质体法转染5637细胞。使用TargetScanHuman v7.2生物信息学在线分析网站预测miR-135a-5p与PCDH9 3′-UTR的序列互作位点。验证转染效率后,qRT-PCR、ELISA及免疫荧光染色结合核质分离技术评估其对PCDH9 mRNA、蛋白表达及核易位的调控作用;CCK-8实验验证miR-135a-5p对膀胱癌细胞增殖的影响,Transwell迁移与侵袭实验探讨miR-135a-5p对膀胱癌转移表型的影响,并开展拯救实验验证因果关系;ELISA实验检测上皮-间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)关键标志物E-cadherin、N-cadherin、Snail、Slug的表达情况。结果 miR-135a-5p在5637细胞中的表达量显著高于SV-HUC-1细胞,mimics组PCDH9 mRNA及蛋白水平均显著下调(P<0.05),核内荧光强度比由(0.31±0.05)升至(0.85±0.12)(P<0.05)。与NC组比较,mimics组细胞增殖能力显著升高,inhibitor组细胞增殖能力降低,共转染PCDH9 OE质粒后,mimics组的细胞增殖能力显著下降。与NC组比较,mimics组迁移与侵袭细胞数显著增加,而inhibitor组显著减少,共转染PCDH9 OE质粒后,mimics组的迁移与侵袭能力显著逆转。EMT通路验证时,相比NC组,mimics组E-cadherin显著下调,N-cadherin、Snail及Slug显著上调;inhibitor组EMT标志物变化幅度较mimics组减小;共转染PCDH9 OE质粒后,mimics组EMT表型显著逆转。结论 miR-135a-5p通过靶向抑制PCDH9表达并诱导其核易位,激活EMT通路,从而促进膀胱癌转移。 展开更多
关键词 膀胱癌 mir-135a-5p PCDH9 癌细胞转移 上皮间质转化
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男性不育患者精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平检测的价值 被引量:3
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作者 朱媛媛 卞玉莹 +4 位作者 徐天 邵永 张春妮 王成 顾万建 《临床检验杂志》 CAS 2023年第10期740-744,共5页
目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿、胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南... 目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿、胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUC^(ROC));相关性分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14,P<0.01;H=21.37,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低(U=687,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U=779,P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC分别为0.764(95%CI:0.675~0.854),0.711(95%CI:0.612~0.810)和0.782(95%CI:0.695~0.869),0.733(95%CI:0.637~0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p和miR-135b-5p为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。 展开更多
关键词 男性不育 精浆 mir-135a-5p mir-135b-5p
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miR-135b促进肝癌细胞侵袭和转移 被引量:12
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作者 张彦兵 王妍华 +3 位作者 郭亚焕 廖子君 徐瑞 阮之平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1316-1321,共6页
目的探讨miR-135b对肝癌细胞浸润转移的影响及其分子机制。方法分别在肝癌细胞系中过表达和下调miR-135b,通过Transwell^(TM)实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,利用肝癌移植瘤模型检测肝癌细胞的体内增殖能力和成瘤能力;采用Western blo... 目的探讨miR-135b对肝癌细胞浸润转移的影响及其分子机制。方法分别在肝癌细胞系中过表达和下调miR-135b,通过Transwell^(TM)实验检测肿瘤细胞迁移和侵袭能力,利用肝癌移植瘤模型检测肝癌细胞的体内增殖能力和成瘤能力;采用Western blot法结合双荧光素酶基因报告系统预测miR-135b的下游靶基因。结果 miR-135b在高侵袭性的MHCC97肝癌细胞系中高表达;过表达miR-135b能够增强HepG2和Bel-7402肝癌细胞的体外侵袭和转移能力,促进肝癌细胞的体内转移能力;通过靶向miR-135b的干扰载体pcDNA-miR-135b-Sponge下调miR-135b的表达,MHCC97肝癌细胞的体外侵袭转移能力及移植瘤的转移能力明显受到抑制;双荧光素酶基因报告系统和Western blot实验结果显示miR-135b能够靶向Hippo信号通路中的关键分子,包括大型肿瘤抑制因子同源蛋白2(LATS2)、含β转导素重复序列蛋白(β-TrCP)、N-myc下游调节基因2(NDR2)和亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)等。结论 miR-135b可能通过靶向Hippo信号通路相关基因促进肝癌细胞的侵袭和转移。 展开更多
关键词 mir-135b Hippo信号通路 肝癌 转移 侵袭
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参麦地黄汤联合缬沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激、血管内皮功能及血清miR-133b、miR-135b的影响 被引量:15
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作者 赵立昌 袁超 +4 位作者 殷娜 计忠宁 相春波 曾菁蓉 李萍 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1034-1038,共5页
目的探究参麦地黄汤联合缬沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激、血管内皮功能及血清miR-133b、miR-135b的影响。方法选取2017年1月至2020年10月于江阴市中医院门诊就诊的90例糖尿病肾病患者为研究对象,依据随机数字表法将其分为对照组、观察... 目的探究参麦地黄汤联合缬沙坦对糖尿病肾病患者氧化应激、血管内皮功能及血清miR-133b、miR-135b的影响。方法选取2017年1月至2020年10月于江阴市中医院门诊就诊的90例糖尿病肾病患者为研究对象,依据随机数字表法将其分为对照组、观察组各45例。对照组采用缬沙坦分散片口服治疗,观察组在对照组治疗基础上加服参麦地黄汤。2组疗程均为3个月,治疗前后评估2组患者中医证候积分变化,检测2组患者空腹血糖(FPG)和血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白/肌酐比值(UACR)、氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)]、血管内皮功能指标[可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)及内皮素-1(ET-1)]及miR-133b、miR-135b变化。结果治疗后,2组患者中医症候积分、FPG、SCr、BUN、UACR及MDA、sICAM-1、ET-1、miR-133b、miR-135b表达水平均显著下降,SOD活性明显升高(P<0.01),观察组优于对照组(P<0.01)。观察组治疗总有效率高于对照组(P<0.01)。结论参麦地黄汤联合缬沙坦可有效改善糖尿病肾病临床症状,可能与其调控机体氧化应激、血管内皮功能、血清miR-133b、miR-135b水平有关。 展开更多
关键词 参麦地黄汤 缬沙坦 糖尿病肾病 氧化应激 血管内皮功能 mir-133b mir-135b
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miR-135a通过下调SOX2抑制喉癌Hep-2细胞的恶性生物学行为和增强对奥沙利铂的敏感性 被引量:8
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作者 刘扬帆 屈中玉 +2 位作者 王文亷 孙星 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期955-961,共7页
目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-... 目的:探讨敲降miR-135a对人喉癌上皮Hep-2细胞的恶性生物学行为和奥沙利铂敏感性的影响。方法:收集2018年1月至2018年6月郑州大学附属南阳医院南阳市中心医院行喉癌切除术10例患者的喉癌组织和癌旁组织标本。采用qPCR检测喉癌组织和Hep-2细胞中miR-135a的表达水平。miR-135 inhibitor转染喉癌Hep-2细胞后,采用CCK-8检测Hep-2细胞活性,集落形成实验检测Hep-2细胞集落形成能力,Transwell实验检测Hep-2细胞的侵袭及迁移能力,WB实验检测Hep-2细胞中SOX2蛋白的表达水平。0.5、1.0、1.5、2.0μmol/L的奥沙利铂处理已转染miR-135 inhibitor的Hep-2细胞,CCK-8实验检测Hep-2细胞的增殖活性,Annexin-V-FITC/PI染色流式细胞术检测Hep-2细胞的凋亡率。采用miR-135a inhibitor质粒、对照pcDNA空载体(SOX2-Con)质粒、pcDNA-SOX2(SOX2-OE)质粒共转染Hep-2细胞,构建miR-135a inhibitor+SOX2-Con组和miR-135a inhibitor+SOX2-OE组,检测此2组细胞的增殖活性、集落形成能力、侵袭及迁移能力。结果:与癌旁组织比较,喉癌组织中miR-135a表达水平显著升高(P<0.01);与正常NHP细胞比较,miR-135a在Hep-2细胞中表达水平明显上调(P<0.01);转染miR-135a inhibitor导致Hep-2细胞中miR-135a表达水平明显降低(P<0.01)。敲降miR-135a明显降低Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移、侵袭和SOX2表达(均P<0.01);明显增强细胞对奥沙利铂敏感性(P<0.01);与miR-135a inhibitor+SOX2-Con组比较,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞的增殖活性、细胞集落数、迁移与侵袭能力均明显增加(均P<0.01);同时,用不同浓度的奥沙利铂处理此2组细胞,相对于miR-135a inhibitor+SOX2-Con组,miR-135a inhibitor+SOX2-OE组的Hep-2细胞存活率显著升高(P<0.01)。结论:敲降miR-135a可能通过下调转录因子SOX2的表达抑制Hep-2细胞的恶性生物学行为,并增强其对奥沙利铂的敏感性。 展开更多
关键词 喉癌 HEP-2细胞 mir-135a SOX2 奥沙利铂
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基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒调控线粒体自噬抑制肝星状细胞活化的机制 被引量:9
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作者 张文富 吴姗姗 +4 位作者 戴铭 吕建林 黄晶晶 李晓龙 王振常 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2024年第4期30-34,I0011-I0014,共9页
目的基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒通过调控线粒体自噬来抑制肝星状细胞活化与增殖的影响及其机制。方法HSC-T6分为空白组、H_(2)O_(2)组、miR-135a-NC组、miR-135a-mimic组、miR-135a-in-hibitor-NC+H 2 O2组、miR-135... 目的基于miR-135a/FOXO1/PINK1通路探讨柔肝化纤颗粒通过调控线粒体自噬来抑制肝星状细胞活化与增殖的影响及其机制。方法HSC-T6分为空白组、H_(2)O_(2)组、miR-135a-NC组、miR-135a-mimic组、miR-135a-in-hibitor-NC+H 2 O2组、miR-135a-inhibitor+H_(2)O_(2)组、柔肝化纤颗粒含药血清对照组、H_(2)O_(2)+含药血清对照组、H_(2)O_(2)+含药血清组、H_(2)O_(2)+含药血清+miR-135a-NC组及H_(2)O_(2)+含药血清+miR-135a-mimic组。分别采用Real-time PCR、Western Blot、ELISA及流式细胞术检测miR-135a、FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ、Smad2、p-Smad2、转化生长因子-β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、NF-κB p65、p-NF-κB p65、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TNF-α表达及线粒体膜电位、活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成。结果给予H_(2)O_(2)及过表达miR-135a可显著上调HSC-T6 miR-135a、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、p-Smad2、TGF-β1、p-NF-κB p65、TNF-α表达及ROS生成(P<0.01);下调FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ表达与线粒体膜电位(P<0.01)。给予柔肝化纤颗粒及抑制miR-135a表达可显著下调HSC-T6 miR-135a、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、p-Smad2、TGF-β1、p-NF-κB p65、TNF-α表达及ROS生成(P<0.01);上调FOXO1、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ表达与线粒体膜电位(P<0.01)。给予柔肝化纤颗粒同时过表达miR-135a可抑制柔肝化纤颗粒对HSC-T6的影响(P<0.01)。结论线粒体自噬可抑制HSC-T6活化,其机制与线粒体自噬抑制ROS生成,进而抑制TGF-β1/Smad2通路及炎症反应有关;柔肝化纤颗粒亦可抑制HSC-T6活化,其机制与柔肝化纤颗粒抑制miR-135a表达,活化FOXO1/PINK1通路,从而促进线粒体自噬有关。 展开更多
关键词 线粒体自噬 HSC-T6 柔肝化纤颗粒 mir-135a FOXO1
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抑郁症患者血清miR-135a、miR-221表达水平与认知功能、事件相关电位P300和炎症细胞因子的相关性分析 被引量:14
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作者 林虹 谢友许 +2 位作者 李启荣 林伟成 钟书铭 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第1期173-176,共4页
目的:探讨抑郁症患者血清微小核糖核酸(mi R)-135a、mi R-221表达水平与认知功能、事件相关电位P300和炎症细胞因子的相关性。方法:选择2019年1月至2021年1月我院收治的216例抑郁症患者(抑郁症组)和同期于我院体检的200例健康志愿者(对... 目的:探讨抑郁症患者血清微小核糖核酸(mi R)-135a、mi R-221表达水平与认知功能、事件相关电位P300和炎症细胞因子的相关性。方法:选择2019年1月至2021年1月我院收治的216例抑郁症患者(抑郁症组)和同期于我院体检的200例健康志愿者(对照组)。检测血清mi R-135a、mi R-221表达水平及白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、简易精神状态检查量表(MMSE)评估认知功能。采用全功能肌电诱发电位仪检测P3潜伏期和P3波幅。Pearson相关性分析mi R-135a、mi R-221表达水平与MoCA评分、MMSE评分、IL-6,hs-CRP,TNF-α、P3潜伏期和P3波幅的相关性。结果:抑郁症组血清mi R-221表达水平、P3潜伏期,血清IL-6、hs-CRP、TNF-α水平高于对照组(P<0.05),mi R-135a表达水平、MMSE评分、MoCA评分、P3波幅低于对照组(P<0.05)。mi R-221表达水平与P3潜伏期,血清IL-6、hs-CRP、TNF-α水平呈正相关(P<0.05),与MMSE评分、MoCA评分、P3波幅呈负相关(P<0.05);mi R-135a表达水平与P3潜伏期,血清IL-6、hs-CRP、TNF-α水平呈负相关(P<0.05),与MMSE评分、MoCA评分、P3波幅呈正相关(P<0.05)。结论:抑郁症患者血清mi R-135a表达水平降低,mi R-221表达水平增高,mi R-135a低表达和mi R-221高表达与抑郁症患者认知功能降低、机体炎症反应有关。 展开更多
关键词 抑郁症 认知功能 炎症细胞因子 事件相关电位P300 mir-135a mir-221
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miR-135a靶向调节SP1对人骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响 被引量:5
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作者 史栋梁 史桂荣 +2 位作者 谢静 杜旭召 杨豪 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1140-1145,共6页
目的探讨miR-135a通过靶向调节SP1对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖和凋亡的影响。方法收集人正常成骨组织和OS组织,培养正常成骨细胞(h FOB1.19)和OS细胞(MG-63),Real-time PCR法检测miR-135a和SP1的表达,Western blot法检测SP1表... 目的探讨miR-135a通过靶向调节SP1对人骨肉瘤(osteosarcoma,OS)细胞增殖和凋亡的影响。方法收集人正常成骨组织和OS组织,培养正常成骨细胞(h FOB1.19)和OS细胞(MG-63),Real-time PCR法检测miR-135a和SP1的表达,Western blot法检测SP1表达。转染miR-135a mimics和inhibitor,MTT法和Brd U-ELISA法检测OS细胞增殖变化,Western blot法检测凋亡蛋白Bax、BCL-2和Caspase 3的表达。双荧光素酶报告基因检测miR-135a与SP1的靶定关系。Western blot法检测miR-135a对OS细胞中SP1表达的影响。Western blot法检测miR-135a对OS细胞中JAK2/STAT3表达的影响。结果 OS组织和细胞中miR-135a表达均显著降低,SP1表达均显著升高。转染miR-135a mimics可降低OS细胞活性,减少Brd U阳性标记率。同时,miR-135a mimics增加OS细胞Bax和Caspase 3的表达,减少BCL-2的表达。miR-135a mimics降低荧光素酶报告基因的荧光强度,结合位点突变后荧光素酶活性升高。上调miR-135a显著降低SP1的表达并降低JAK2和STAT3的磷酸化水平。miR-135a inhibitor作用均与mimics相反。结论 miR-135a可通过靶向调节SP1抑制人OS细胞增殖,诱导OS细胞凋亡,并下调JAK2/STAT3活化。 展开更多
关键词 骨肿瘤 骨肉瘤 mir-135a SP1 JAK2/STAT3
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miR-135a-5p通过Smad4基因调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡 被引量:5
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作者 杜静 吴日然 +2 位作者 林秀峰 柯玩娜 高子轩 《热带医学杂志》 CAS 2020年第7期892-897,911,共7页
目的探讨微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)通过调控SMAD家庭成员4(Smad4)表达而调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡。方法体外培养人卵巢颗粒细胞KGN与人正常卵巢上皮细胞IOSE80,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹... 目的探讨微小RNA-135a-5p(miR-135a-5p)通过调控SMAD家庭成员4(Smad4)表达而调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞的增殖及凋亡。方法体外培养人卵巢颗粒细胞KGN与人正常卵巢上皮细胞IOSE80,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测miR-135a-5p、Smad4的表达量;分别用anti-miR-con、anti-miR-135a-5p、anti-miR-135a-5p与si-con、anti-miR-135a-5p与si-Smad4转染至卵巢颗粒细胞;甲基噻唑基四唑法(MTT)检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测过表达miR-135a-5p对野生型和突变型Smad4荧光素酶活性的影响;Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期依赖蛋白激酶2(CDK2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达量。结果与正常卵巢上皮细胞IOSE80比较,KGN细胞中miR-135a-5p的表达水平显著升高,Smad4 mRNA及蛋白表达量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与anti-miR-con组比较,anti-miR-135a-5p组细胞活力显著降低,克隆形成数显著减少,细胞凋亡率显著升高,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著降低,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告实验证实miR-135a-5p能够抑制Smad4的3′-UTR区荧光素酶活性;与anti-miR-135a-5p+sicon组比较,anti-miR-135a-5p+si-Smad4组细胞活力显著升高,克隆形成数显著增多,细胞凋亡率显著降低,Cyclin D1、CDK2、Bcl-2蛋白水平显著升高,Bax、Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论干扰miR-135a-5p可能通过靶向调控Smad4的表达从而抑制卵巢颗粒细胞增殖及促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-135a-5p SMAD4 多囊卵巢综合征 卵巢颗粒细胞 增殖 凋亡
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miR-224、miR-135a在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理的关系 被引量:6
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作者 张洪岩 鲁继斌 +1 位作者 杨伟 陈宽冰 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第10期2057-2059,共3页
目的:检测miR-224与miR-135a两种microRNA(miRNA)在非小细胞肺癌中的表达,探讨其与肺癌临床病理的关系。方法:采用Real time RT-PCR法对31例非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织的miR-224与miR-135a进行定量分析,结果由2(-△△CT)处理,并... 目的:检测miR-224与miR-135a两种microRNA(miRNA)在非小细胞肺癌中的表达,探讨其与肺癌临床病理的关系。方法:采用Real time RT-PCR法对31例非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织的miR-224与miR-135a进行定量分析,结果由2(-△△CT)处理,并分析与临床病理资料的关系。结果:相对内参U6,miR-224在非小细胞肺癌组织中表达量为4.2761±0.8731,在正常肺组织中的表达量为0.8967±0.2154,两者相比P<0.05,miR-135a在非小细胞肺癌组织中表达量为0.3551±0.0985,在正常肺组织中的表达量为1.7443±0.3125,两者相比P<0.05。miR-224与miR-135a的表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分级密切相关。结论:miR-224高表达及miR-135a低表达与非小细胞肺癌的临床分期、病理分级密切相关,miR-224有可能作为非小细胞肺癌的重要肿瘤标志物。 展开更多
关键词 mir-224 mir-135a 非小细胞肺癌 REAL TIME RT-PCR
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miR-135a在调节小细胞肺癌多药耐药中的作用 被引量:3
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作者 苏文媚 林燕明 +5 位作者 罗亮 梁亚海 刘美莲 赖振南 杨志雄 梁荣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期304-309,共6页
目的:探讨miR-135a在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)多药耐药中的作用。方法:收集2008年1月至2013年12月本院肿瘤科及呼吸内科就诊的48例SCLC患者外周血液标本,将其分为化疗敏感组(28例)和耐药组(20例),采用QRT-PCR法检测患... 目的:探讨miR-135a在小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)多药耐药中的作用。方法:收集2008年1月至2013年12月本院肿瘤科及呼吸内科就诊的48例SCLC患者外周血液标本,将其分为化疗敏感组(28例)和耐药组(20例),采用QRT-PCR法检测患者血液标本、SCLC敏感细胞株H69及耐药细胞株H69AR中miR-135a的表达,分析其与临床预后的关系,并应用miR-135a模拟物和抑制剂分别上、下调细胞株中miR-135a的表达,采用CCK-8法检测细胞对各种化疗药物(ADM、DDP和VP-16)敏感性的影响。结果:与化疗敏感组相比,miR-135a在化疗耐药患者血液标本中的表达明显增高[(2.174±3.981)vs(-1.963±3.750),P<0.001];在临床患者血液标本中,miR-135a的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05),与疾病的分期、化疗敏感性及患者的生存时间相关(均P<0.01)。miR-135a在H69AR细胞中的表达明显高于H69细胞[(7.841±0.392)vs(1.047±0.081),P<0.01];通过miR-135a抑制剂下调H69AR中miR-135a的表达能够显著增加细胞对化疗药物的敏感性,H69AR细胞对DDP、ADM及VP-16的IC50值明显下降[(247.09±11.55)vs(76.64±10.00)、(150.83±8.03)vs(40.72±5.06)、(436.63±61.19)vs(163.35±20.00);H69细胞转染miR-135a mimics后对化疗药物DDP、ADM和VP-16的IC50值明显增加[(18.58±1.37)vs(159.27±3.29)、(24.37±2.63)vs(129.19±2.64),(48.55±2.59)vs(359.87±2.92)μg/ml,P<0.01]。结论:miR-135a参与调节SCLC的多药耐药,下调miR-135a基因的表达可能增加细胞对化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 mir-135a 多药耐药
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miR-135a-5p抑制胆囊癌细胞增殖的研究 被引量:7
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作者 殷保兵 王一飞 +3 位作者 杨光华 周华丁 马保金 蔡端 《外科理论与实践》 2014年第2期140-144,共5页
目的:探讨miR-135a-5p对胆囊癌的作用及其机制。方法:采用实时PCR检测miR-135a-5p和VLDLR在23对胆囊癌与癌旁组织的表达。采用miR-135a-5p模拟物转染胆囊癌细胞,通过细胞增殖(CCK-8)曲线、单克隆集落形成实验和细胞周期实验(流式细胞仪)... 目的:探讨miR-135a-5p对胆囊癌的作用及其机制。方法:采用实时PCR检测miR-135a-5p和VLDLR在23对胆囊癌与癌旁组织的表达。采用miR-135a-5p模拟物转染胆囊癌细胞,通过细胞增殖(CCK-8)曲线、单克隆集落形成实验和细胞周期实验(流式细胞仪),检测miR-135a-5p对胆囊癌细胞增殖的影响。用Western印迹和Luciferase双荧光素酶报告系统验证和VLDLR受miR-135a-5p的调控。结果:在23对胆囊癌与癌旁组织中,癌组织的miR-135a-5p表达水平低于癌旁组织。体外实验证实miR-135a-5p通过G1期阻滞抑制胆囊癌细胞的增殖,且可通过作用于VLDLR mRNA降低其蛋白质水平。结论:miR-135a-5p抑制胆囊癌的增殖,可能是胆囊癌治疗靶点。 展开更多
关键词 mir-135a-5p 胆囊癌 增殖 极低密度脂蛋白受体
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miR-135a/b逆转肺癌A549/CDDP细胞对顺铂耐药性及相关机制研究 被引量:2
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作者 周丽 邱天竹 +3 位作者 陈雯姣 朱伟 束永前 刘平 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期449-455,共7页
目的:研究miR-135a/b对肺癌耐顺铂细胞株A549/CDDP顺铂耐药的影响。方法:运用实时荧光定量PCR检测miR-135a/b在A549和A549/CDDP细胞株中的差异表达;MTT法检测转染后A549及A549/CDDP细胞对CDDP的敏感性;构建MCL1-3′-UTR荧光素酶报告质... 目的:研究miR-135a/b对肺癌耐顺铂细胞株A549/CDDP顺铂耐药的影响。方法:运用实时荧光定量PCR检测miR-135a/b在A549和A549/CDDP细胞株中的差异表达;MTT法检测转染后A549及A549/CDDP细胞对CDDP的敏感性;构建MCL1-3′-UTR荧光素酶报告质粒验证miR-135a/b的靶基因;Western blot检测转染前后细胞MCL1蛋白的表达差异;流式细胞术检测转染后耐药细胞对顺铂诱导凋亡的影响。结果:miR-135a/b在A549/CDDP细胞中表达量降低;在耐药株中上调miR-135a/b后显著增加细胞对顺铂的敏感性;荧光素酶实验证实MCL1是miR-135a/b的靶基因;抗凋亡蛋白MCL1在A549/CDDP细胞中呈高表达,上调miR-135a/b明显抑制耐药细胞中MCL1蛋白的表达;miR-135a/b显著增加A549/CDDP细胞对顺铂诱导的凋亡。结论:miR-135a/b通过靶向调控MCL1蛋白表达增加NSCLC细胞对顺铂的敏感性和凋亡。 展开更多
关键词 mir-135a b 顺铂耐药 凋亡 MCL1 肺癌
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miR-135b-5p靶向CMTM3调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力 被引量:4
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作者 李永红 刘文明 +3 位作者 李伟 董链 杨峥嵘 衷敬华 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第19期3305-3310,共6页
目的:探究miR-135b-5p通过靶向CMTM3基因调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌组织和细胞系中CMTM3和miR-135b-5p的表达水平。利用慢性病毒转染技术将miR-135b-5p inhibitor转染至胃癌细胞,R... 目的:探究miR-135b-5p通过靶向CMTM3基因调节胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测胃癌组织和细胞系中CMTM3和miR-135b-5p的表达水平。利用慢性病毒转染技术将miR-135b-5p inhibitor转染至胃癌细胞,RT-qPCR检测转染效率;CCK-8比色法和Transwell实验检测转染后细胞的增殖、侵袭和迁移能力;Western blotting检测转染后细胞中CMTM3蛋白表达水平。利用生物信息学网站预测miR-135b-5p潜在靶基因CMTM3,利用荧光素酶实验进行验证。结果:RT-qPCR检测结果表明,miR-135b-5p在胃癌组织和胃癌细胞株中呈现高表达,CMTM3在胃癌组织中呈现低表达(P<0.01)。RT-qPCR检测转染效率,结果显示,转染miR-135b-5p inhibitor敲低了miR-135b-5p的表达水平(P<0.001);CCK-8和Transwell实验结果表明,敲低miR-135b-5p后抑制了胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力(P<0.01),Western blotting实验结果表明,敲低miR-135b-5p促进了CMTM3蛋白的表达。生物信息学网站预测CMTM3为miR-135b-5p的潜在靶基因,荧光素酶实验证实了miR-135b-5p直接靶向胃癌细胞中CMTM3基因(P<0.01)。结论:miR-135b-5p作为重要的调节因子,反向调节抑癌靶基因CMTM3,从而促进胃癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 mir-135b-5p 胃癌 CMTM3
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