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miR-10a-5p通过调控Apaf1逆转膀胱癌T24细胞顺铂耐药
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作者 张鹰 李鹏 +1 位作者 欧阳慧 刘嵩 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第5期448-454,共7页
目的探讨下调miR-10a-5p表达对人膀胱癌T24细胞顺铂(DDP)耐药的影响,并阐明其分子机制。方法采用实时定量PCR检测人膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP及其亲本T24细胞中miR-10a-5p的表达水平。将T24/DDP细胞分为对照组、inhibitor NC组、miR-1... 目的探讨下调miR-10a-5p表达对人膀胱癌T24细胞顺铂(DDP)耐药的影响,并阐明其分子机制。方法采用实时定量PCR检测人膀胱癌DDP耐药细胞株T24/DDP及其亲本T24细胞中miR-10a-5p的表达水平。将T24/DDP细胞分为对照组、inhibitor NC组、miR-10a-5p inhibitor组、miR-10a-5p inhibitor+si-NC组和miR-10a-5p inhibitor+si-Apaf1组,分别给予不同浓度DDP处理24 h。用MTT法检测各组细胞增殖活性,并计算耐药指数;用流式细胞术检测各组细胞凋亡水平;用Western blotting检测各组细胞中Apaf1、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及胞质中细胞色素C(Cyt C)等蛋白的表达水平;用双萤光素酶报告基因实验验证miR-10a-5p与Apaf1的靶向结合关系。结果与亲本T24细胞比较,T24/DDP细胞中miR-10a-5p表达水平升高(P<0.05)。与inhibitor NC组比较,miR-10a-5p inhibitor组T24/DDP细胞对DDP的敏感性增强,耐药指数降低,凋亡水平升高,且细胞中Apaf1、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及胞质Cyt C等蛋白表达水平升高(均P<0.05)。与miR-10a-5p inhibitor+si-NC组比较,miR-10a-5p inhibitor+si-Apaf1组T24/DDP细胞对DDP敏感性降低,耐药指数升高,凋亡水平降低(均P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验结果显示,Apaf1是miR-10a-5p下游靶基因。结论miR-10a-5p敲低可靶向上调Apaf1,从而逆转T24/DDP细胞对DDP的耐药性。 展开更多
关键词 膀胱癌 mir-10a-5p Apaf1 顺铂 耐药
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Is miR-10a a tumor suppressor that modulates proliferation and invasion in high-grade bladder cancer?
2
作者 THAINáRODRIGUES PATRíCIA CANDIDO +12 位作者 FERES CAMARGO MALUF POLIANA ROMãO CAROLINA MIE MIOSHI VANESSA RIBEIRO GUIMARãES JULIANA ALVES DE CAMARGO KARINA SERAFIM DA SILVA GABRIEL ARANTES DOS SANTOS IRAN AMORIM SILVA KATIA RAMOS MOREIRA LEITE WILLIAM C.NAHAS SABRINA T.REIS RUAN PIMENTA NAYARA IZABEL VIANA 《Oncology Research》 2025年第6期1377-1382,共6页
Objectives:Bladder Cancer(BC)is one of the most commonly diagnosed malignancies worldwide,with high rates of mortality and morbidity.It can be classified as non-muscle invasive bladder cancer(NMIBC)or muscle-invasive ... Objectives:Bladder Cancer(BC)is one of the most commonly diagnosed malignancies worldwide,with high rates of mortality and morbidity.It can be classified as non-muscle invasive bladder cancer(NMIBC)or muscle-invasive bladder cancer(MIBC),with radical cystectomy being the treatment for MIBC,which significantly reduces quality of life.MicroRNAs(miRs)act as critical genetic regulators,with both oncogenic and tumor-suppressive roles.MiR-10a is described as a tumor suppressor in various neoplasms,but its role in BC is controversial.This study aims to assess the activity of miR-10a in cellular invasion and proliferation in two distinct BC cell lines.Methods:The study used high-grade T24 and low-grade RT4 bladder cell lines.Cells were transfected with miR-10a mimic or a non-targeting control.Transfection efficiency was validated by qPCR.Cell proliferation was cultured for 10–14 days.Cell migration and invasion were evaluated using Matrigel.All assays were conducted in triplicate.Results:The T24 cells transfected with miR-10a presented decreased cellular proliferation and invasion compared to the Scramble(p=0.0481 and p<0.0001,respectively).In the RT4 cell line,there was only a significant reduction in cellular proliferation after miR-10a transfection(p=0.0029).Conclusions:Our findings suggest that miR-10a has a tumoral suppressor role in BC,demonstrating higher efficacy in high-grade cells. 展开更多
关键词 Bladder cancer(BC) mir-10a Tumor suppressor genes Cell proliferation
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终末期肾脏病血液透析患者血清miR-10a、miR-21水平及预后价值
3
作者 钱睿 黄文辉 +4 位作者 李莹屏 卢守燕 董丽婷 贾京京 薛嵘 《疑难病杂志》 2025年第4期468-472,共5页
目的探究终末期肾脏病(ESRD)血液透析患者血清微小RNA-10a(miR-10a)、miR-21的表达水平及其对预后的预测价值。方法选取2021年10月—2023年10月于甘肃省人民医院肾内科进行规律血液透析治疗的ESRD患者150例为研究组,随机选择同期医院首... 目的探究终末期肾脏病(ESRD)血液透析患者血清微小RNA-10a(miR-10a)、miR-21的表达水平及其对预后的预测价值。方法选取2021年10月—2023年10月于甘肃省人民医院肾内科进行规律血液透析治疗的ESRD患者150例为研究组,随机选择同期医院首次需要进行透析治疗的慢性肾脏病4~5期患者60例为对照组。检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、肾小球滤过率(eGFR)、血红蛋白(Hb)、C反应蛋白(CRP)、血钙、血磷,以实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-10a、miR-21表达水平;统计研究组患者随访1年后的生存情况;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-10a、miR-21表达水平对ESRD血液透析患者预后的预测价值;多因素Logistic回归分析ESRD血液透析患者预后的影响因素。结果与对照组比较,研究组血清miR-10a、miR-21表达及SCr水平升高(t/P=7.349/<0.001、8.391/<0.001、18.059/<0.001),eGFR水平降低(t/P=28.867/<0.001);与生存亚组比较,死亡亚组BUN、miR-10a和miR-21表达水平升高,Hb、eGFR水平降低(t/P=5.342/<0.001、8.703/<0.001、8.273/<0.001、2.324/0.022、2.760/0.007);miR-10a、miR-21单独及二者联合预测ESRD血液透析患者预后的AUC分别为0.872、0.826、0.944,二者联合优于各自单独预测效能(Z/P=2.635/0.030、3.294/0.014);eGFR低、血清miR-10a表达水平高、miR-21表达水平高均为ESRD血液透析患者预后死亡的危险因素[OR(95%CI)=1.409(1.100~1.804)、1.364(1.078~1.726)、1.395(1.164~1.671)]。结论ESRD血液透析患者血清中miR-10a、miR-21水平显著上调,且是ESRD血液透析患者预后死亡的危险因素,二者联合对ESRD患者预后具有较高预测价值。 展开更多
关键词 终末期肾脏病 血液透析 微小RNA-10a 微小RNA-21 预后价值
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miR-10a在胰腺癌侵袭转移中的作用 被引量:4
4
作者 谢荣臻 曾祥福 +2 位作者 邓伟 刘晓平 章新华 《东南国防医药》 2017年第4期352-356,共5页
目的探讨microRNA-10a(miR-10a)在胰腺癌侵袭转移中的作用。方法选取2014年1月至2016年12月在赣南医学院第一附属医院切除的胰腺癌组织标本68例,同时选取癌旁组织作为对照,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织标本miR-10a表达;同... 目的探讨microRNA-10a(miR-10a)在胰腺癌侵袭转移中的作用。方法选取2014年1月至2016年12月在赣南医学院第一附属医院切除的胰腺癌组织标本68例,同时选取癌旁组织作为对照,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织标本miR-10a表达;同时选取胰腺癌细胞株Capan-1细胞,以脂质体转染法将miR-10a重组正、反义真核表达质粒载体转染Capan-1细胞,采用RT-PCR检测转染细胞miR-10a表达,Transwell和Matrigel试验观察转染细胞的迁移和侵袭能力,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖能力。结果胰腺癌组织miR-10a相对表达量为(0.213±0.024),明显高于癌旁组织(P<0.01);中低分化胰腺癌miR-10a相对表达量为(0.212±0.011),明显高于高分化胰腺癌(P<0.01);有淋巴结转移胰腺癌miR-10a相对表达量为(0.217±0.017),明显高于无淋巴结转移胰腺癌(P<0.05);TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期胰腺癌miR-10a相对表达量为(0.230±0.015),明显高于Ⅰ~Ⅱ期胰腺癌(P<0.01)。转染48 h后,正义组miR-10a相对表达量为(0.021±0.010),明显高于反义组、空载组和空白对照组(P<0.05);反义组miR-10a相对表达量为(0.003±0.001),明显低于空载组和空白对照组(P<0.05)。正义组24 h和48 h光密度(OD)值分别为(0.602±0.018)和(0.753±0.041),明显高于反义组、空载组和空白对照组(P<0.05);反义组24 h和48 h OD值分别为(0.451±0.023)和(0.591±0.038),明显低于空载组和空白对照组(P<0.05)。正义组迁移和侵袭细胞数分别为(85.22±12.10)个和(140.24±30.54)个,明显高于反义组、空载组和空白对照组(P<0.05);反义组迁移和侵袭细胞数分别为(12.52±3.22)个和(20.41±8.66)个,明显低于空载组和空白对照组(P<0.05)。结论 miR-10a过表达可对胰腺癌有生长促进、增强侵袭和迁移的作用,值得进一步研究。 展开更多
关键词 mir-10a 胰腺癌 侵袭 迁移 临床病理特征 转染
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miR-10a在子宫内膜癌中的表达及意义 被引量:3
5
作者 李学慧 张霞 +4 位作者 齐丽宁 刘晓丽 都治香 高婷 张红真 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第6期848-850,共3页
目的探讨子宫内膜癌组织中miR-10a的表达及意义。方法收集40例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生及30例正常子宫内膜组织,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量逆转录聚合酶链反应[poly(A)-RT-q PCR]检测miR-10a在不同子宫内膜组织中的表达... 目的探讨子宫内膜癌组织中miR-10a的表达及意义。方法收集40例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生及30例正常子宫内膜组织,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量逆转录聚合酶链反应[poly(A)-RT-q PCR]检测miR-10a在不同子宫内膜组织中的表达,并将检测结果和临床及病理资料进行统计学分析。结果 miR-10a在子宫内膜癌组织中的表达高于不典型增生和正常子宫内膜组织,3组间差异有统计学意义(P<0.01);miR-10a在Ⅲ+Ⅳ期子宫内膜癌患者中的表达量高于Ⅰ+Ⅱ期;病理分级为3级的患者中的表达量高于1+2级;肌层浸润深度≥1/2的患者中的表达量高于肌层浸润深度<1/2者;有淋巴结转移的患者中的表达量高于无转移者,差异均有统计学意义(P<0.05);不同年龄、病理类型及雌激素受体、孕激素受体是否阳性的子宫内膜癌患者中其表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-10a在子宫内膜癌组织中高表达,可能作为癌基因调控了子宫内膜癌的发生及发展。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 微小RNA mir-10a 逆转录聚合酶链反应
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miR-10a-5p敲低通过靶向THBS2抑制胃癌细胞的生长和转移 被引量:4
6
作者 任玲玲 王立明 朱雅碧 《世界华人消化杂志》 CAS 2019年第23期1419-1426,共8页
背景在胃癌(gastric cancer,GC)的发病和进展中,已经发现许多miRNAs可发挥抑癌或促癌的作用.但miRNAs数量众多,在GC中仍有众多miRNAs的作用并不明确,因此,继续筛选具有影响GC细胞生长和转移的miRNAs仍十分必要.目的探究miR-10a-5p对GC... 背景在胃癌(gastric cancer,GC)的发病和进展中,已经发现许多miRNAs可发挥抑癌或促癌的作用.但miRNAs数量众多,在GC中仍有众多miRNAs的作用并不明确,因此,继续筛选具有影响GC细胞生长和转移的miRNAs仍十分必要.目的探究miR-10a-5p对GC细胞生长和转移的影响及其机制.方法采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测GC组织和GC细胞(MGC-803和AGS)中miR-10a-5p表达;miR-10a-5p-inhibitor转染入MGC-803和AGS细胞,CCK-8实验,集落形成实验和Transwell实验分别检测细胞的增殖,集落形成,迁移和侵袭.采用Western-blot和RT-qPCR检测GC组织和GC细胞(MGC-803和AGS)中THBS2表达;采用TargetScan在线软件筛选miR-10a-5p的潜在靶基因THBS2,并进一步验证.NC+pcDNA-Con,miR-10a-5pinhibitor+pcDNA-Con和miR-10a-5p-inhibitor+pcDNATHBS2共转染入MGC-803细胞,CCK-8实验,集落形成实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖,集落形成,迁移和侵袭.结果miR-10a-5p在GC组织,MGC-803和AGS细胞中表达异常上调;miR-10a-5p敲低显著降低了MGC-803和AGS细胞的增殖,集落形成和侵袭.THBS2 mRNA和蛋白水平在GC组织、MGC-803和AGS细胞中表达均异常下调;THBS2是miR-10a-5p的靶基因;过表达THBS2能逆转miR-10a-5p敲低对MGC-803细胞增殖,集落形成,迁移和侵袭的抑制作用.结论miR-10a-5p敲低通过靶基因THBS2来抑制GC细胞的生长和转移. 展开更多
关键词 mir-10a-5p THBS2 胃癌 增殖 侵袭
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针刺调控miR-10a改善VD大鼠认知并减轻神经炎症的研究 被引量:3
7
作者 张杰 刘小溪 张雪竹 《天津中医药》 CAS 2023年第4期467-473,共7页
[目的]探讨针刺通过调控Micro RNA 10a(miR-10a)改善血管性痴呆(VD)大鼠认知功能并减轻神经炎症的效应及机制。[方法]采用双侧颈总动脉夹闭法制作VD大鼠模型,并分为假手术组、VD组、针刺组和各miR干预组,针刺组予以“三焦针法”进行治疗... [目的]探讨针刺通过调控Micro RNA 10a(miR-10a)改善血管性痴呆(VD)大鼠认知功能并减轻神经炎症的效应及机制。[方法]采用双侧颈总动脉夹闭法制作VD大鼠模型,并分为假手术组、VD组、针刺组和各miR干预组,针刺组予以“三焦针法”进行治疗;各miR干预组给予相应的miR-10a空白溶剂或抑制剂。采用莫里斯(Morris)水迷宫评价大鼠的认知能力;实时荧光定量(RT-qPCR)法测定miR-10a表达;蛋白质印迹(Western blot)法检测核因子-κB(NF-κB)通路相关蛋白NF-κB p65、磷酸化NF-κBp65的表达。酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平。[结果]与假手术组相比,模型组在水迷宫隐蔽平台实验中的逃避潜伏期显著延长(P<0.01);在空间探索实验中穿越原平台位置的次数减少、首次穿越原平台所需时间延长(P<0.01);而针刺组对上述指标具有改善作用,与模型组相比差异显著(P<0.01)。此外,与假手术组相比,模型组海马miR-10a表达下降,NF-κB t-p65和p-p65蛋白及TNF-α、IL-6水平上升(P<0.05或P<0.01);针刺治疗后上述指标出现相反变化,与模型组相比差异显著(P<0.05或P<0.01)。转染miR-10a抑制剂后发现,抑制剂组海马组织中NF-κB t-p65和p-p65蛋白及TNF-α、IL-6水平较模型组上升(P<0.05或P<0.01);针刺治疗能提高miR-10a抑制剂空白溶剂组大鼠的认知功能,降低其NF-κB及TNF-α、IL-6水平,但在抑制剂组中却未发现上述作用。双荧光素酶报告基因实验发现miR-10a可直接作用于NF-κB并抑制其表达。[结论]针刺能改善VD大鼠的认知功能,其机制部分与调节miR-10a表达,进而抑制缺血脑组织炎症损伤有关。 展开更多
关键词 针刺 血管性痴呆 认知功能 mir-10a 神经炎症
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抑癌因子miR-10a抑制Tiam1表达对胃癌细胞凋亡和迁移的影响 被引量:1
8
作者 吴江 阿里木江•阿不都热合曼 +5 位作者 庞澜 朱勇荷 马秀英 陈鹏 张荔霜 岳跃明 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第15期2830-2837,2867,共9页
目的:探讨miR-10a抑制Tiam1表达对胃癌细胞凋亡和侵袭的影响。方法:获取胃上皮组织细胞及胃癌组织细胞,利用q PCR及Western blot实验检测两种细胞中mi R-10a表达与Tiam1的m RNA及蛋白表达水平,同时检测胃癌细胞S746T及正常胃粘膜细胞RG... 目的:探讨miR-10a抑制Tiam1表达对胃癌细胞凋亡和侵袭的影响。方法:获取胃上皮组织细胞及胃癌组织细胞,利用q PCR及Western blot实验检测两种细胞中mi R-10a表达与Tiam1的m RNA及蛋白表达水平,同时检测胃癌细胞S746T及正常胃粘膜细胞RGM-1和NGEC中mi R-10a表达与Tiam1蛋白表达水平。通过将mi R-10a mimic和mi R-10a inhibitor转染HS746T细胞,利用流式细胞术检测HS746T的细胞周期和细胞凋亡,TranswellTM实验检测HS746T细胞的侵袭能力,qPCR及Western blot实验检测凋亡相关蛋白caspase3、caspase9和Bax以及周期相关蛋白P21表达水平;荧光素酶活性分析实验检测Tiam1是mi R-10a的作用靶点。已构建的Tiam1高表达的Tiam1-pcDNA3.1质粒和敲除Tiam1基因的PX458质粒分别转染HS746T细胞,通过流式细胞术及TranswellTM实验检测HS746T细胞的凋亡及侵袭能力。结果:与胃上皮组织细胞相比,早期胃癌临床组织细胞中mi R-10a表达降低,Tiam1的m RNA及蛋白表达升高;mi R-10a的表达与早期胃癌患者的肿瘤转移密切相关,与年龄、性别和肿瘤分期无关;与正常胃粘膜细胞RGM-1和NGEC相比,胃癌细胞HS746T中的mi R-10a表达降低,而Tiam1蛋白表达升高;mi R-10a可抑制HS746T细胞侵袭,促进细胞凋亡,使其停滞于G0/G1期;mi R-10a靶向作用于Tiam1基因的3’非翻译区(3’UTR),减少Tiam1的蛋白表达;Tiam1可抑制HS746T细胞凋亡,促进HS746T细胞侵袭。结论:mi R-10a靶向作用于Tiam1基因的3’UTR,抑制HS746T细胞的增殖及侵袭,促进HS746T细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 mir-10a TIAM1 细胞凋亡 细胞侵袭
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miR-10a对类风湿性关节炎滑膜细胞侵袭、迁移能力的影响及机制 被引量:3
9
作者 杨海 穆楠 +4 位作者 顾锦涛 张阔 张旺倩 张伟 赵金康 《生物技术通讯》 CAS 2016年第4期468-473,共6页
目的:以类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞为研究对象,明确mi R-10a对滑膜细胞侵袭、迁移能力的影响及机制。方法:首先用q RT-PCR对筛选得到的异常表达mi RNA进行验证,进而利用生物信息学分析结合报告基因、Western印迹方法,明确mi R-10a... 目的:以类风湿性关节炎(RA)患者滑膜细胞为研究对象,明确mi R-10a对滑膜细胞侵袭、迁移能力的影响及机制。方法:首先用q RT-PCR对筛选得到的异常表达mi RNA进行验证,进而利用生物信息学分析结合报告基因、Western印迹方法,明确mi R-10a的靶基因,最后采用Transwell、划痕实验考察mi R-10a对RA成纤维细胞样滑膜细胞(FLS细胞)侵袭能力的影响。结果:mi R-10a在RA患者滑膜组织及细胞中低表达;TAK1和BTRC是mi R-10a的靶基因;mi R-10a可促进IL-6、IL-8等炎症因子的表达;mi R-10a可促进FLS细胞的侵袭、迁移。结论:mi R-10a可通过调节NF-κB的活性影响RA FLS细胞的侵袭、迁移。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 mir-10a 成纤维细胞样滑膜细胞
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LncRNA SNHG7调控miR-10a-5p影响高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤 被引量:6
10
作者 宋丹 杜少斐 +1 位作者 彭佳欣 李继业 《中国中西医结合肾病杂志》 2020年第11期978-982,共5页
目的:探讨长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)是否通过调控微小RNA-10a-5p(miR-10a-5p)的表达而参与高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的过程。方法:体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,随机分为8组:对照组、高糖组、高糖+pcDNA组、高糖+pcDNA-SN... 目的:探讨长链非编码RNA SNHG7(LncRNA SNHG7)是否通过调控微小RNA-10a-5p(miR-10a-5p)的表达而参与高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的过程。方法:体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,随机分为8组:对照组、高糖组、高糖+pcDNA组、高糖+pcDNA-SNHG7组、高糖+anti-miR-NC组、高糖+anti-miR-10a-5p组、高糖+pcDNA-SNHG7+miR-NC组、高糖+pcDNA-SNHG7+miR-10a-5p组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SNHG7、miR-10a-5p的表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证SNHG7与miR-10a-5p的靶向结合关系;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)的表达量。结果:与对照组比较,高糖组SNHG7的表达水平显著降低(P<0.05),miR-10a-5p的表达水平显著升高(P<0.05);与对照组比较,高糖组IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平显著升高(P<0.05);与高糖+pcDNA组比较,高糖+pcDNA-SNHG7组IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平显著降低(P<0.05);与高糖+anti-miR-NC组比较,高糖+anti-miR-10a-5p组IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05),Bax蛋白水平显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实SNHG7可靶向调控miR-10a-5p的表达及活性;与高糖+pcDNA-SNHG7+miR-NC组比较,高糖+pcDNA-SNHG7+miR-10a-5p组IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05),Bax蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:SNHG7过表达可能通过靶向调控miR-10a-5p的表达从而减轻高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 LncRNA SNHG7 mir-10a-5p 肾小管上皮细胞 炎症 凋亡
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子宫内膜癌组织中miR-10a及let-7i的表达及临床意义 被引量:2
11
作者 齐丽宁 张红真 +5 位作者 魏旭静 郭艳蒲 翟爱丽 王琪 李淼 朱继红 《肿瘤代谢与营养电子杂志》 2019年第1期75-78,共4页
目的探讨miR-10a及let-7i在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法选取子宫内膜癌组织40例、子宫内膜不典型增生组织20例及正常子宫内膜组织30例,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量逆转录聚合酶链反应[poly(A)-RT-qPCR]测定miR-10a及let-7i... 目的探讨miR-10a及let-7i在子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法选取子宫内膜癌组织40例、子宫内膜不典型增生组织20例及正常子宫内膜组织30例,采用多聚腺苷酸加尾实时荧光定量逆转录聚合酶链反应[poly(A)-RT-qPCR]测定miR-10a及let-7i在三种子宫内膜组织中的表达,并将结果与临床及病理资料进行分析。结果miR-10a在子宫内膜癌组织中高表达(高于正常及不典型增生的子宫内膜组织,P<0.01);在病理分级为3级的患者中高表达(高于1+2级者);在Ⅲ+Ⅳ期患者中高表达(高于Ⅰ+Ⅱ期者);在有淋巴结转移的患者中高表达,在深肌层浸润(浸润深度≥1/2)的患者中高表达;差异显著(P<0.05)。在不同年龄、雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)是否阳性的子宫内膜癌患者中其表达量差异无统计学意义(P>0.05)。let-7i在子宫内膜癌组织低表达(低于正常和不典型增生的子宫内膜组织,P<0.01)。结论在子宫内膜癌组织中miR-10a表达上调,let-7i表达下调,miR-10a可能参与并促进了子宫内膜癌的侵袭和转移。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 mir-10a Let-7i
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miR-10a-5p靶向ITSN1对宫颈癌细胞增殖和顺铂化疗敏感性的影响 被引量:3
12
作者 李妘 王静 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第1期32-37,共6页
目的探讨miR-10a-5p对宫颈癌细胞增殖及对化疗药物顺铂敏感性的影响及机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测23对宫颈癌及配对癌旁组织miR-10a-5p的相对表达水平。利用空载体病毒(阴性对照组)或miR-10a-5p过表达慢病毒(miR-10a-5p过... 目的探讨miR-10a-5p对宫颈癌细胞增殖及对化疗药物顺铂敏感性的影响及机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测23对宫颈癌及配对癌旁组织miR-10a-5p的相对表达水平。利用空载体病毒(阴性对照组)或miR-10a-5p过表达慢病毒(miR-10a-5p过表达组)感染人宫颈癌细胞株Caski,同时设置不作处理的空白对照组。使用CCK-8法检测各组细胞增殖及对顺铂敏感性的影响,检测指标为吸光度和细胞生长抑制率。qRT-PCR和Western blot检测三组细胞中ITSN1的mRNA和蛋白水平。使用荧光素酶报告基因验证miR-10a-5p的潜在靶点。结果与宫颈癌癌旁组织相比,宫颈癌组织中miR-10a-5p表达显著降低(P<0.05)。与空白对照组及阴性对照组相比,miR-10a-5p过表达组细胞吸光度显著减小,细胞增殖能力显著降低(P<0.05),对顺铂的化疗敏感性显著增强(P<0.05),空白对照组和阴性对照组间细胞增殖能力和对顺铂的化疗敏感性差异无统计学意义(P>0.05)。miR-10a-5p可与ITSN1靶向结合,降低ITSN1表达水平。结论miR-10a-5p可能通过靶向ITSN1抑制Caski细胞增殖,并增强Caski细胞对顺铂的药物敏感性。 展开更多
关键词 mir-10a-5p ITSN1 宫颈癌 耐药
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二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a及其靶基因HOXA1的表达改变
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作者 沈月兰 蒋义国 +1 位作者 周兰兰 付娟 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期81-84,共4页
目的检测二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平,探讨其与靶基因HOXA1癌基因的关系。方法以正常支气管上皮细胞为对照组,二羟环氧苯并芘恶性转化细胞为实验组,用茎环结构逆转录引物逆转录,定量PCR检测两组细胞miR-10a表达水平。运... 目的检测二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平,探讨其与靶基因HOXA1癌基因的关系。方法以正常支气管上皮细胞为对照组,二羟环氧苯并芘恶性转化细胞为实验组,用茎环结构逆转录引物逆转录,定量PCR检测两组细胞miR-10a表达水平。运用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、定量PCR和流式细胞术间接法检测2组细胞HOXA1 mRNA和蛋白表达水平。结果二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a表达水平是对照组的0.01倍,RT-PCR HOXA1 mRNA是对照组的(3.12±0.23)倍,定量PCR HOXA1 mRNA是对照组的8.75倍,HOXA1蛋白表达是对照组的3.48倍。结论二羟环氧苯并芘恶性转化细胞miR-10a可能反向调控靶基因HOXA1的表达。 展开更多
关键词 二羟环氧苯并芘 恶性转化细胞 mir-10a HOXA1
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MiR-10a*重组腺病毒促进B组3型柯萨奇病毒在心肌细胞的复制
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作者 佟雷 胡盛林 +1 位作者 屈允月 钟照华 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4845-4851,共7页
为了明确miR-10a*在小鼠原代心肌细胞中对CVB3复制的作用,本研究在HEK293细胞中包装带有红色荧光(mCherry)并表达miR-10a*的重组腺病毒,将其感染HeLa细胞应用荧光显微镜观察荧光表达,RT-qPCR检测miR-10a*的表达;将Ad-miR-10a*感染HeLa... 为了明确miR-10a*在小鼠原代心肌细胞中对CVB3复制的作用,本研究在HEK293细胞中包装带有红色荧光(mCherry)并表达miR-10a*的重组腺病毒,将其感染HeLa细胞应用荧光显微镜观察荧光表达,RT-qPCR检测miR-10a*的表达;将Ad-miR-10a*感染HeLa细胞后,再感染CVB3,观察荧光表达,RTqPCR检测CVB3 RNA的表达;将Ad-miR-10a*感染小鼠原代心肌细胞再感染CVB3-eGFP,在不同时间点观察红色、绿色荧光表达;CVB3-eGFP感染小鼠原代心肌细胞,不同时间点观察绿色荧光表达,RT-qPCR检测miR-10a*的表达。本研究成功建立带有mCherry并表达miR-10a*的重组腺病毒(Ad-miR-10a*)并在HeLa细胞中观察到红荧光表达及检测到miR-10a*过表达。Ad-miR-10a*显著促进CVB3在HeLa中的复制;同样在小鼠原代心肌细胞中,Ad-miR-10a*可以促进CVB3的复制,并且Ad-miR-10a*感染细胞与CVB3感染细胞高度重合;CVB3-eGFP感染小鼠原代心肌细胞明显促进miR-10a*的表达。综上所述,Ad-miR-10a*可在HeLa、小鼠原代心肌细胞中过表达有生物学活性的miR-10a*;Ad-miR-10a*促进CVB3在原代心肌细胞中的复制,同时CVB3-eGFP促进miR-10a*在心肌细胞中的表达,CVB3可能通过此方式获得有利于自身复制和感染的环境,推测这可能是CVB3感染引起心肌疾病的重要机制之一。 展开更多
关键词 mir-10a* 重组腺病毒 B组3型柯萨奇病毒 心肌细胞
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miR-10a通过BDNF信号通路对精神分裂症大鼠海马神经元细胞的作用研究 被引量:4
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作者 易善志 刘汉东 房茂胜 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第8期1469-1475,共7页
目的:探究miR-10a对精神分裂症(SZ)大鼠海马神经元细胞的作用及其可能的机制。方法:30只大鼠随机分为空白对照组、生理盐水组和SZ组,每组10只。应用MK-801建立SZ大鼠模型。Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;旷场实验检测大鼠自主行为... 目的:探究miR-10a对精神分裂症(SZ)大鼠海马神经元细胞的作用及其可能的机制。方法:30只大鼠随机分为空白对照组、生理盐水组和SZ组,每组10只。应用MK-801建立SZ大鼠模型。Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;旷场实验检测大鼠自主行为与紧张度;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和Western blot检测miR-10a、脑源性神经营养因子(BDNF)通路相关基因的表达;荧光素酶报告基因实验验证miR-10a与BDNF之间的靶向结合作用;CCK-8检测海马神经元细胞活力;流式细胞术检测海马神经元细胞周期及凋亡情况。结果:与生理盐水组相比,SZ组大鼠逃跑潜伏期、移动距离、移动速度和垂直次数均显著增加(P<0.05);与空白对照组相比,SZ组大鼠海马BDNF通路被抑制,miR-10a表达显著升高(P<0.05);BDNF为miR-10a的靶基因;与NC组相比,miR-10a mimic和K252a显著抑制SZ大鼠海马神经元细胞BDNF通路和细胞活力(P<0.05),阻滞细胞周期进程,促进细胞凋亡,miR-10a inhibitor则作用相反;与miR-10a inhibitor组相比,miR-10a inhibitor+K252a处理显著抑制BDNF通路活化和细胞活力(P<0.05),阻滞细胞周期进程,促进细胞凋亡。结论:miR-10a通过BDNF信号通路抑制SZ大鼠海马神经元细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-10a BDNF信号通路 精神分裂症 细胞增殖 细胞凋亡
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miR-10a通过FBXW7-ZEB2轴调控非小细胞肺癌肿瘤化疗耐药的动物实验研究 被引量:2
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作者 任宝恒 丁海斌 +3 位作者 杨栓盈 范志刚 陈旭 陈静 《现代生物医学进展》 CAS 2022年第13期2431-2435,共5页
目的:通过动物实验,具体探讨微小RNA(mi R-10a)通过含F-框WD重复域蛋白7(FBXW7)-E盒锌指结合蛋白2(ZEB2)轴调控非小细胞肺癌的肿瘤化疗耐药作用。方法:非小细胞肺癌模型小鼠(n=42)随机平分为三组-模型组、mi R-10a组与环磷酰胺组,模型... 目的:通过动物实验,具体探讨微小RNA(mi R-10a)通过含F-框WD重复域蛋白7(FBXW7)-E盒锌指结合蛋白2(ZEB2)轴调控非小细胞肺癌的肿瘤化疗耐药作用。方法:非小细胞肺癌模型小鼠(n=42)随机平分为三组-模型组、mi R-10a组与环磷酰胺组,模型组给予生理盐水0.2 m L腹腔注射,环磷酰胺组给予环磷酰胺20 mg/kg腹腔注射,mi R-10a组给hsa-miR-10a mimics15 mg/kg联合环磷酰胺20 mg/kg腹腔注射,1次/d,持续给药14 d。结果:mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第7 d与第14 d的肿瘤体积低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的瘤体质量低于模型组,抑瘤率高于模型组,mi R-10a组与环磷酰胺组对比差异也有统计学意义(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的肿瘤细胞凋亡指数高于模型组,mi R-10a组高于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的血清FBXW7、ZEB2含量低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的FBXW7、ZEB2 m RNA与蛋白相对表达水平低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。结论:过表达mi R-10a能抑制非小细胞肺癌小鼠的FBXW7-ZEB2轴的激活,抑制血清FBXW7、ZEB2的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡,改善肿瘤化疗耐药性,促进缩小肿瘤体积。 展开更多
关键词 mir-10a 非小细胞肺癌 小鼠 含F-框WD重复域蛋白7 E盒锌指结合蛋白2 化疗耐药 细胞凋亡
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miR-10a在非酒精性脂肪性肝病大鼠中的表达及作用机制 被引量:2
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作者 刘贤 徐宝宏 +1 位作者 郭雅丽 李亚强 《国际消化病杂志》 CAS 2020年第1期59-62,共4页
目的研究miR-10a在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠中的表达,并探讨其可能的调节机制。方法采用饲喂高脂饲料的方法构建NAFLD模型,将实验大鼠随机分为4组:空白组(A组)、模型组(B组)、Ad-ctrl组(C组)、Ad-Si-miR-10a组(D组)... 目的研究miR-10a在高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠中的表达,并探讨其可能的调节机制。方法采用饲喂高脂饲料的方法构建NAFLD模型,将实验大鼠随机分为4组:空白组(A组)、模型组(B组)、Ad-ctrl组(C组)、Ad-Si-miR-10a组(D组),每组各10只。C组尾静脉注射空载质粒的腺病毒,D组尾静脉注射沉默miR-10a质粒的腺病毒。大鼠饲喂10周后,收集肝脏组织,称重,计算肝脏指数;ELISA法检测肝脏组织中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;油红O染色观察肝脏组织病理变化;Real-time PCR法检测肝脏组织中miR-10a、HDAC3 mRNA的表达水平;Western blot法检测肝脏组织中组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)蛋白的表达水平。结果与A组相比,B、C组的体质量、TG、TC、LDL-C、miR-10a水平显著升高,HDAC3 mRNA水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与B、C组相比,D组的体质量、肝脏指数、TG、TC、LDL-C、miR-10a水平显著降低(P<0.05),肝脏组织脂滴沉积有所改善,HDAC3 mRNA、HDAC3蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论抑制miR-10a的表达可上调HDAC3水平,从而改善高脂饮食诱导的大鼠肝脏组织脂滴沉积。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 mir-10a 组蛋白去乙酰化酶3
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miR-10a-5p通过靶向RORA促进胃癌细胞侵袭、迁移 被引量:2
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作者 丁晓娇 章海斌 +3 位作者 赵报 殷文博 陈莹 王子安 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第10期1005-1012,共8页
目的探讨miR-10a-5p是否通过靶向维甲酸受体相关孤儿受体A(RAR-related orphan receptor A,RORA)对胃癌细胞侵袭、迁移产生影响及其作用机制。方法qRT-PCR检测人正常胃黏膜细胞GES-1与三株胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BGC-823中miR-10a-5... 目的探讨miR-10a-5p是否通过靶向维甲酸受体相关孤儿受体A(RAR-related orphan receptor A,RORA)对胃癌细胞侵袭、迁移产生影响及其作用机制。方法qRT-PCR检测人正常胃黏膜细胞GES-1与三株胃癌细胞株AGS、SGC-7901、BGC-823中miR-10a-5p的表达水平。以miR-10a-5p高表达的胃癌细胞株SGC-7901作为后续实验研究胃癌细胞株,分为control组(只转染Lipofectamine 2000)、NC组(转染Lipofectamine 2000和NC序列,即转染无关序列)和miR-10a-5p inhibitor组(转染Lipofectamine 2000和miR-10a-5p inhibitor),qRT-PCR检测转染后各组细胞株中miR-10a-5p的表达水平。生物信息学网站Target Scan预测miR-10a-5p与RORA的靶向结合位点。qRT-PCR、Western blot实验分析miR-10a-5p与RORA的靶向调控关系。集落克隆和Transwell实验分别检测下调miR-10a-5p对SGC-7901细胞增殖和侵袭迁移能力的影响。为探究RORA基因对胃癌细胞侵袭、迁移能力的影响,实验分为control组(只转染Lipofectamine 2000)、RORA NC转染组(转染Lipofectamine 2000及NC序列)、RORA过表达组(转染Lipofectamine 2000及RORA过表达序列),Transwell实验检测上调RORA对SGC-7901细胞侵袭迁移能力的影响。Western blot法检测侵袭、迁移相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Snail的相对表达水平。结果miR-10a-5p在胃癌细胞株中相对于正常胃黏膜细胞中高表达(P<0.05)。生物信息学软件Target Scan预测结果显示,RORA 3′UTR上存在潜在与miR-10a-5p靶向结合的位点(P<0.05),miR-10a-5p能够负向调控RORA基因表达。下调miR-10a-5p后SGC-7901细胞的增殖、侵袭和迁移显著被抑制(P<0.05)。过表达RORA能抑制SGC-7901细胞侵袭、迁移能力(P<0.05)。过表达RORA后N-cadherin、Snail蛋白表达降低,E-cadherin表达增加(P<0.05)。结论miR-10a-5p通过靶向RORA促进胃癌细胞侵袭、迁移,侵袭、迁移机制可能与上皮间质转化有关。 展开更多
关键词 胃癌 mir-10a-5p 侵袭 迁移
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猪E2F3基因3′UTR双荧光素酶报告基因质粒构建及其与miR-10a-5p的靶向验证 被引量:3
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作者 刘鸿艳 郑仰清 +1 位作者 徐晶 张廷荣 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第15期28-32,169,共6页
为了鉴定miR-10a-5p与猪E2F3基因的靶向关系,试验从生物信息miRNA Base数据库查询miR-10a-5p的相关信息,并运用MEGA 6.0软件分析其保守性,通过Target Scan生物信息学网站预测其潜在的靶基因及结合位点,然后PCR扩增E2F3基因3′非编码区(3... 为了鉴定miR-10a-5p与猪E2F3基因的靶向关系,试验从生物信息miRNA Base数据库查询miR-10a-5p的相关信息,并运用MEGA 6.0软件分析其保守性,通过Target Scan生物信息学网站预测其潜在的靶基因及结合位点,然后PCR扩增E2F3基因3′非编码区(3′UTR)片段,构建E2F3的野生型(E2F3-3′UTR-wt)和突变型(E2F3-3′UTR-mut)双荧光素酶报告基因质粒,并分别与miR-10a-5p mimics、mimics NC共转染至293T细胞中,检测双荧光素酶活性变化。结果表明:miR-10a-5p在7个物种间具有高度保守性,成熟序列均为UACCCUGUAGAUCCGAAUUUGU;Target Scan生物信息学网站预测到miR-10a-5p具有包括E2F3基因在内的共241个潜在的靶基因;E2F3基因片段经PCR扩增获得大小约1 288 bp的清晰条带,测序结果与预期一致;转染miR-10a-5p mimics能显著降低猪E2F3基因野生型质粒双荧光素酶活性(P<0.05)。说明猪E2F3基因3′UTR双荧光素酶报告基因质粒构建成功,且其与miR-10a-5p之间存在靶向关系。 展开更多
关键词 E2F3 mir-10a-5p 保守性 双荧光素酶 靶向验证 转染
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扩张型心肌病患者miR-210、miR-10a水平与心肌纤维化的关系研究 被引量:1
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作者 杨栩鹏 崔晓征 +1 位作者 邹鹏 杨倩倩 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2023年第5期5663-5668,共6页
目的探究扩张型心肌病(DCM)患者miR-210、miR-10a水平与心肌纤维化的关系。方法连续性纳入2020年8月至2022年8月确诊的DCM患者118例为研究对象,所有患者均接受心脏磁共振(CMR)检查,根据检查结果将DCM患者分为心肌纤维化组(n=66)和非心... 目的探究扩张型心肌病(DCM)患者miR-210、miR-10a水平与心肌纤维化的关系。方法连续性纳入2020年8月至2022年8月确诊的DCM患者118例为研究对象,所有患者均接受心脏磁共振(CMR)检查,根据检查结果将DCM患者分为心肌纤维化组(n=66)和非心肌纤维化组(n=52),另选取同期体检的健康体检者58例为对照组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测miR-210、miR-10a表达水平,分析miR-210、miR-10a水平与心功能指标、心肌纤维化血清学指标的相关性,受试者操作特征(ROC)曲线评估miR-210、miR-10a对DCM患者心肌纤维化的诊断价值。结果各组超敏C反应蛋白(hs-CRP)、B型钠尿肽(BNP)、左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期直径(LVEDd)、左心室收缩末期直径(LVESd)、前胶原蛋白C肽末端-Ⅲ(PⅢNP)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。三组血清miR-210、miR-10a水平比较:心肌纤维化组>非心肌纤维化组>对照组(P<0.05)。相关性分析结果显示,miR-210、miR-10a与LVEF呈负相关(P<0.05),与BNP、LVEDd和LVESd均呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-210、miR-10a诊断DCM患者心肌纤维化的曲线下面积(AUC)值分别为0.903、0.850(P<0.05),截断值分别为0.87、0.27。结论miR-210、miR-10a在DCM患者血清中呈高表达状态,表达水平与心功能、心肌纤维化指标存在相关性;二者或可作为DCM患者出现心肌纤维化的评估指标。 展开更多
关键词 扩张型心肌病 心肌纤维化 微RNA mir-210 mir-10a
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