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异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的流行性及mgrA基因对万古霉素耐药性影响的研究 被引量：22
1
作者 刘彩林 明亮 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2020年第2期175-180,共6页
目的 监测郑州大学第一附属医院近5年来异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycinintermediated Staphylococcus aureus, hVISA)的流行性,并进一步研究金黄色葡萄球菌mgrA基因对万古霉素耐药性的影响。方法采用琼脂... 目的 监测郑州大学第一附属医院近5年来异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycinintermediated Staphylococcus aureus, hVISA)的流行性,并进一步研究金黄色葡萄球菌mgrA基因对万古霉素耐药性的影响。方法采用琼脂稀释法和E-test法检测万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC);MHA5T和菌群曲线分析法(PAP/AUC)检测hVISA,Real-time RT-PCR法测定hVISA和non-hVISA菌株中mgrA基因的mRNA表达水平,通过SOE-PCR+同源重组的方法敲除mgrA基因。结果 823株MRSA中共检出hVISA 147株,检出率为17.9%,hVISA菌株mgrA基因的mRNA表达水平是non-hVISA菌株的2.65倍,明显高于non-hVISA菌株(t=7.326, P<0.001),成功构建mgrA基因缺失株,并发现mgrA基因缺失株万古霉素耐药性有所下降。结论 本地区hVISA的流行率为17.9%,并且5年来检出率呈逐年上升的趋势,mgrA基因可能与万古霉素耐药性有关,本研究推测mgrA基因下调可使万古霉素耐药性下降,研究为进一步明确金黄色葡萄球菌对万古霉素的耐药机制提供了新的理论基础。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 mgra基因 HVISA 基因敲除
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金黄色葡萄球菌多药耐药调节基因MgrA蛋白的纯化
2
作者 王炜 赵淑敏 孔祥玉 《承德医学院学报》 2009年第1期14-16,共3页
目的:获得大量重组MgrA蛋白,为深入研究其功能提供必要的材料。方法:用构建好的含有目的基因mgrA的His融合表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞,在IPTG诱导下进行高密度发酵,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE凝胶电泳检测鉴定其特性。... 目的:获得大量重组MgrA蛋白,为深入研究其功能提供必要的材料。方法:用构建好的含有目的基因mgrA的His融合表达载体,转化大肠杆菌感受态细胞,在IPTG诱导下进行高密度发酵,对所得蛋白进行纯化、复性,以SDS-PAGE凝胶电泳检测鉴定其特性。结果:①表达诱导菌体的裂解上清经金属螫合亲和层析,聚丙烯酰胺凝胶电泳证实获得初步纯化的蛋白中仍含一些杂蛋白。②重组获得多个蛋白洗脱峰,再经聚丙烯酰胺凝胶电泳法证实获得纯度较高的目的蛋白。结论:获得了纯化的MgrA蛋白重组蛋白。 展开更多
关键词 mgra基因 mgra蛋白 诱导 纯化
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