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S-谷胱甘肽诱导巨核细胞株meg-01凋亡 被引量：1
1
作者 王芳 何吉 +4 位作者 秦斐 陈舒 刘晋辉 朱发明 严力行 《中国卫生检验杂志》 CAS 2011年第1期23-25,共3页
目的:探讨一氧化氮供体S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)对巨核细胞株meg-01诱导凋亡的可能作用。方法:将meg-01细胞株分为三组,对照组不加S-谷胱甘肽培养2 h,实验组分别加50μmol/L、100μmol/L、150μmol/L、200μmol/L... 目的:探讨一氧化氮供体S-亚硝基谷胱甘肽(S-nitrosoglutathione,GSNO)对巨核细胞株meg-01诱导凋亡的可能作用。方法:将meg-01细胞株分为三组,对照组不加S-谷胱甘肽培养2 h,实验组分别加50μmol/L、100μmol/L、150μmol/L、200μmol/L的S-谷胱甘肽培养2 h,细胞因子组在含TPO(50 ng/ml)、IL-3(10 ng/ml)、SCF(50 ng/ml)的无血清培养基中培养72 h,再加入150μmol/LS-谷胱甘肽培养2 h。采用流式细胞仪检测凋亡细胞,电子显微镜观察细胞的形态学情况,实时荧光定量PCR检测Bcl2和Bax表达。结果:与对照组相比,实验组凋亡细胞数量明显增加,其中150μmol/L S-谷胱甘肽诱导凋亡细胞数量最多;电子显微镜下可见巨核细胞胞浆有明显空泡,细胞核固缩、破裂;实时荧光PCR检测到Bax的表达不同程度增加,Bcl2表达不同程度降低,其中150μmol/L GSNO诱导后,Bax的表达显著增加,Bcl2表达显著降低。细胞因子组Bax的表达降低,Bcl2表达增加。结论:S-谷胱甘肽可以促进巨核细胞株凋亡,而TPO、IL-3、SCF联合可抑制凋亡。 展开更多
关键词 一氧化氮 meg-01 凋亡
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S-谷胱甘肽诱导巨核细胞株meg-01凋亡
2
作者 陈舒 王芳 +4 位作者 何吉 秦斐 刘晋辉 朱发明 严力行 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期94-94,共1页
关键词 巨核细胞株 meg-01 谷胱甘肽 细胞因子组 GLUTATHIONE 胞核固缩 胎牛血清 亚硝基 一氧化氮供体 无血清培养基
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TSP-1通过CD36/Caspase-3诱导巨核细胞白血病细胞系Meg-01凋亡的研究 被引量：6
3
作者 孔惠敏 苏伟青 +4 位作者 罗毅 戈慧 李亮 杨默 江千里 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期998-1004,共7页
目的:探讨血小板反应蛋白-1(TSP-1)对人巨核细胞白血病细胞系Meg-01凋亡的影响及可能的机制。方法:应用流式细胞术和免疫细胞化学染色检测Meg-01细胞CD36抗原的表达;采用不同浓度的TSP-1和CD36抗体FA6-152作用于Meg-01细胞,培养48 h,应... 目的:探讨血小板反应蛋白-1(TSP-1)对人巨核细胞白血病细胞系Meg-01凋亡的影响及可能的机制。方法:应用流式细胞术和免疫细胞化学染色检测Meg-01细胞CD36抗原的表达;采用不同浓度的TSP-1和CD36抗体FA6-152作用于Meg-01细胞,培养48 h,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡和凋亡蛋白酶Caspase-3的活性;采用细胞计数和小鼠巨核细胞集落(CFU-MK)培养探究TSP-1对巨核细胞生长分化的影响。结果:流式细胞术和免疫细胞化学染色结果均显示,Meg-01细胞表面有CD36抗原的表达。TSP-1(5μg/ml)对Meg-01细胞的生长起到抑制作用,而对CD36-的M-07e细胞作用不明显;加入CD36抗体FA6-152(5、10和25μg/ml)之后,TSP-1的抑制作用明显减弱。TSP-1(2.5、5和7.5μg/ml)增加Annexin V的阳性表达(P<0.01),并激活Caspase-3(P<0.01),表明TSP-1诱导细胞凋亡的作用显著;加入CD36抗体FA6-152(25μg/ml)之后,TSP-1诱导Meg-01细胞凋亡的作用明显减弱。TSP-1(5、10和25μg/ml)对小鼠骨髓细胞的CFU-MK形成也有明显的抑制作用,而β-TG则没有这种作用;CD36抗体FA6-152(25μg/ml)可明显减弱TSP-1对CFU-MK的抑制作用。结论:TSP-1有可能通过CD36/Caspase-3诱导巨核细胞白血病细胞系Meg-01细胞凋亡,这为临床上治疗巨核细胞白血病提供了潜在的新药开发研究靶点。 展开更多
关键词 血小板反应蛋白-1 巨核细胞白血病 meg-01 CD36 凋亡
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氨基甾体Z1对MEG-01白血病细胞的抑制增殖及诱导分化作用
4
作者 周阳 张君 +1 位作者 李震 何群 《实用癌症杂志》 2016年第2期175-178,共4页
目的观察氨基甾体Z1对人慢性粒细胞白血病MEG-01细胞的抑制增殖和诱导分化作用。方法采用液体培养实验、集落培养实验、MTT实验观察氨基甾体Z1对MEG-01细胞的抑制增殖作用;采用Wright染色、AS-D NAE染色、细胞膜CD41表面标记物检测氨基... 目的观察氨基甾体Z1对人慢性粒细胞白血病MEG-01细胞的抑制增殖和诱导分化作用。方法采用液体培养实验、集落培养实验、MTT实验观察氨基甾体Z1对MEG-01细胞的抑制增殖作用;采用Wright染色、AS-D NAE染色、细胞膜CD41表面标记物检测氨基甾体Z1对MEG-01细胞的诱导分化作用。结果 10^-8-10^-4mol/L的氨基甾体Z1连续作用后,细胞和集落计数明显减少,处理组MTT值显著降低,且呈浓度依赖;Wright染色显示处理组细胞有分化表现,AS-D NAE染色A值升高（P〈0.01）,流式细胞术检测处理组细胞膜上CD41表面标记表达阳性率为76%。结论氨基甾体Z1能显著抑制MEG-01细胞增殖并诱导其向巨核细胞系分化,提示该药或可成为慢性粒细胞白血病的一种新型诱导分化剂。 展开更多
关键词 氨基甾体 meg-01细胞 增殖分化 白血病
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甲基转移酶样3对巨核细胞系花生四烯酸代谢通路的影响和机制
5
作者 张嘉祺 刘雯雯 +2 位作者 王茜婷 陈夏欢 刘梅林 《中国心血管杂志》 北大核心 2025年第1期75-85,共11页
目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对人成巨核细胞白血病细胞(MEG-01)花生四烯酸(AA)代谢通路的影响和相关机制。方法构建METTL3差异表达的MEG-01,分为正常对照(Blank)组、METTL3过表达(OE)组和过表达阴性对照(OE-NC)组、METTL3敲低(KD)组... 目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对人成巨核细胞白血病细胞(MEG-01)花生四烯酸(AA)代谢通路的影响和相关机制。方法构建METTL3差异表达的MEG-01,分为正常对照(Blank)组、METTL3过表达(OE)组和过表达阴性对照(OE-NC)组、METTL3敲低(KD)组和敲低阴性对照(KD-NC)组。采用定量聚合酶链反应(qPCR)法和免疫印迹(Western blot)法检测各组METTL3、YTH结构域家族蛋白(YTHDF1、YTHDF2)以及参与AA代谢的关键基因前列腺素内过氧化物合酶1/环氧合酶-1(PTGS1/COX-1)、前列腺素内过氧化物合酶2/环氧合酶-2(PTGS2/COX-2)、血栓素A合酶1(TBXAS1)、前列腺素I_(2)合酶(PTGIS)和前列腺素I_(2)受体(PTGIR)的表达量变化。采用酶联免疫吸附分析(ELISA)法测定细胞培养上清中AA代谢产物前列腺素H_(2)(PGH_(2))和血栓素B_(2)(TXB_(2))的水平。采用蛋白稳定性实验和RNA结合蛋白质免疫沉淀(RIP)实验验证YTHDF1与COX-1 mRNA的结合情况。结果qPCR和Western blot检测显示,OE组YTHDF1、PTGS1/COX-1的mRNA和蛋白水平较OE-NC组升高,KD组较KD-NC组降低(均为P<0.05)。ELISA测定显示,细胞培养上清中OE组PGH_(2)、TXB_(2)的含量高于OE-NC组,KD组TXB_(2)的含量低于KD-NC组(均为P<0.05)。蛋白稳定性实验和RIP实验证实,METTL3通过YTHDF1参与COX-1 mRNA的翻译调控。结论METTL3可能通过促进N6-甲基腺苷(m6A)修饰介导的COX-1 mRNA翻译效率,调控巨核细胞系的AA代谢通路。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 N6-甲基腺苷甲基化 meg-01细胞 花生四烯酸 心血管疾病
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5-HT通过5-HT2BR促进巨核细胞生长和抗巨核细胞凋亡
6
作者 孔惠敏 岑玉蓉 +2 位作者 杨默 彭强 黄金棋 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第1期75-81,共7页
目的:探讨5-羟色胺(5-HT)对巨核细胞Meg-01增殖、凋亡以及巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的影响及其可能的机制。方法:反相高效液相色谱-电化学检测法检测Meg-01细胞对5-HT的摄取和5-HT在Meg-01细胞中的代谢。免疫荧光染色检测骨髓巨核细... 目的:探讨5-羟色胺(5-HT)对巨核细胞Meg-01增殖、凋亡以及巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的影响及其可能的机制。方法:反相高效液相色谱-电化学检测法检测Meg-01细胞对5-HT的摄取和5-HT在Meg-01细胞中的代谢。免疫荧光染色检测骨髓巨核细胞5-羟色胺2B型受体(5-HT2BR)的表达。将5-HT和/或5-HT2BR抑制剂Ketanserin加入到Meg-01细胞中培养48 h,应用MTT检测法和台盼蓝染色法检测细胞的增殖及细胞活率。Meg-01细胞中加入5-HT和/或Ketanserin孵育72 h,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡情况和凋亡蛋白酶caspase-3的活性。采用CFU-MK培养探究5-HT对巨核细胞分化的影响。结果:Meg-01细胞可以摄取5-HT,并将摄取的5-HT分解成5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)。免疫荧光染色表明骨髓巨核细胞表面有5-HT2BR的表达。5-HT对Meg-01细胞的增殖有促进作用,呈剂量依赖性(r=0.82),5-HT浓度为200 nmol/L时,对Meg-01细胞的促增殖作用最明显(P<0.001)。台盼蓝染色结果也提示200 nmol/L的5-HT对Meg-01细胞的存活率影响最明显(P<0.05)。在5-HT单独存在时,可明显促进Meg-01细胞的增殖(P<0.001),加入Ketanserin后,此作用减弱。5-HT可以明显降低Meg-01细胞的早期凋亡率(P<0.001)和caspase-3的活性(P<0.05),加入Ketanserin之后,Meg-01细胞的早期凋亡率明显增加(P<0.001),caspase-3的活性也有所增加。CFU-MK形成结果表明,5-HT可促进骨髓细胞CFU-MK的形成,且呈剂量依赖性(r=0.89);而在5-HT的基础上加入Ketanserin,5-HT对CFU-MK形成的促进作用减弱(P<0.01)。结论:巨核细胞内有可能存在代谢分解5-HT的单胺氧化酶,将5-HT分解为5-HIAA。5-HT有可能通过5-HT2BR促进巨核细胞的的增殖和分化。此外,在5-HT作用下还可以降低巨核细胞的凋亡,其抗凋亡作用可能是通过5-HT2BR和caspase-3通路介导的。 展开更多
关键词 5-羟色胺 meg-01细胞 5-羟色胺2B型受体 增殖 凋亡
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PDGF-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的造血保护作用研究 被引量：2
7
作者 罗毅 孔惠敏 +5 位作者 苏伟青 伊文芳 戈慧 陈卉 李亮 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1873-1880,共8页
目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的骨髓保护作用和减少人巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。在小鼠辐照前(d 0)和照射后d 7... 目的:探讨血小板衍生生长因子(PDGF)-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的骨髓保护作用和减少人巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。在小鼠辐照前(d 0)和照射后d 7、14和21对小鼠进行体重称量和外周血细胞计数;取d 21处死后的小鼠胸骨组织进行形态学观察和股骨骨髓细胞进行集落细胞形成单位的培养。无血清培养Meg-01细胞24 h诱导细胞凋亡,PDGFBB处理Meg-01细胞48 h后进行细胞计数,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡、线粒体膜电位(JC-1)和凋亡蛋白酶CasPpase-3活性的表达。结果:小鼠外周血计数结果表明,PDGF-BB可刺激放射后小鼠白细胞、红细胞和血小板的恢复(<0.05),对白细胞尤为明显。PDGF-BB处理组小鼠可观察到骨髓增生,巨核细胞及其祖细胞数量均高于对照组。细胞集落形成的培养结果显示,PDGF-BB处理组可明显刺激CFU-MK、CFU-GM、BFU-E和CFU-F的形成。不同浓度PPDGF-BB处理Meg-01细胞后,结果显示,PDGF-BB在5-50 ng/ml浓度范围内对细胞具有较强的促进增殖作用(<0.001)。PDGF-BB(50 ng/ml)可明显降低Annexin V的阳性表达(P<0.01);与PDGF-BB处理组相比,对照组细胞中线粒体膜电位下降,表明凋亡细胞数量明显增加(PP<0.01);PDGF-BB处理组的Caspase-3的表达明显低于对照组(<0.05)。结论:PDGF-BB对放射诱导骨髓抑制模型小鼠的造血系统具有保护作用,尤其是巨核细胞及其祖细胞。对Meg-01有促增殖和抗凋亡作用,其抗凋亡作用可能是通过JC-1和Caspase-3通路介导的。 展开更多
关键词 血小板衍生生长因子-BB 造血保护 meg-01细胞 细胞凋亡
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当归补血汤及其主要成分对骨髓抑制小鼠的抗造血细胞凋亡的研究 被引量：24
8
作者 孔惠敏 苏伟青 +4 位作者 叶红 王华 李亮 陈卉 杨默 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1679-1687,共9页
目的:探讨当归补血汤(danggui buxue tang,DBT)及其主要成分当归多糖(angelica polysaccharide,APS)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide,ASPS)对骨髓抑制小鼠的造血保护作用和对巨核细胞系Meg-01细胞抗凋亡的机制研究。方法:用4 Gy的... 目的:探讨当归补血汤(danggui buxue tang,DBT)及其主要成分当归多糖(angelica polysaccharide,APS)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide,ASPS)对骨髓抑制小鼠的造血保护作用和对巨核细胞系Meg-01细胞抗凋亡的机制研究。方法:用4 Gy的^(137)Csγ射线辐照小鼠,建立小鼠骨髓抑制模型。DBT、APS或ASPS(10mg/kg)注射小鼠,在小鼠辐照前(d0)和辐照后d7、14和21对小鼠进行一般状况评估、外周血细胞计数,以及d 21收集小鼠贫血小板血浆检测血小板生成素(TPO)浓度;取d21处死后的小鼠股骨骨髓细胞进行集落细胞形成单位的培养。无血清培养Meg-01细胞24h诱导细胞凋亡,DBT、APS或ASPS处理Meg-01细胞72h后,采用流式细胞术检测细胞的早期凋亡(Annexin V)、线粒体膜电位(JC-1)和凋亡蛋白酶(Caspase-3)的活性。结果:DBT可刺激骨髓抑制小鼠白细胞、红细胞和血小板的恢复,对白细胞和血小板尤为明显(P<0.01,P<0.05)。DBT治疗组小鼠骨髓细胞BFU-E、CFU-MK和CFU-GM的形成数量较对照组明显增多(BFU-E&CFU-GM:P<0.05;CFU-MK:P<0.01)。DBT对小鼠血液中TPO浓度的影响不明显(P=0.89)。与对照组相比,APS组红细胞、白细胞和血小板数均有明显升高(P<0.05);ASPS组白细胞数较对照组明显升高(P<0.05)。CFU培养结果显示,APS可刺激CFU-F、CFU-MK和CFU-GM的形成(P<0.05);而ASPS组只有CFU-GM的数量较对照组增多(P<0.05)。凋亡实验结果显示,DBT可明显降低Meg-01细胞的凋亡(P<0.05)。APS(100μg/ml)处理组Meg-01细胞的早期凋亡率和总死亡率较对照组明显降低(P<0.01,P<0.05);ASPS(100μg/ml)组早期凋亡率较对照组明显降低(P<0.05)。JC-1和Caspase-3结果显示,APS(100μg/ml)处理后,细胞凋亡率明显降低(P<0.01,P<0.05)。结论:DBT对放射诱导骨髓抑制小鼠的造血系统具有保护作用,尤其是白细胞和血小板;对Meg-01细胞有抗凋亡作用。DBT上述作用主要是由APS引起的,其对抗细胞凋亡的机制主要是通过JC-1和Caspase-3途径进行的。 展开更多
关键词 当归补血汤 当归多糖 黄芪多糖 造血保护 meg-01细胞 凋亡
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人参总皂甙对白血病祖细胞作用的实验观察 被引量：15
9
作者 高瑞兰 牛泱平 B.H.Chong 《上海中医药杂志》 北大核心 1999年第9期46-48,共3页
采用白血病祖细胞集落形成（ＣＦＵＡＭＬ） 培养法，观察不同浓度人参总皂甙（ＴＳＰＧ） 对ＨＬ６０、Ｍｅｇ０１ 白血病细胞株和急性髓细胞白血病患者的骨髓细胞集落形成的影响，并以正常粒单祖细胞（ＣＦＵＧＭ）作比较。... 采用白血病祖细胞集落形成（ＣＦＵＡＭＬ） 培养法，观察不同浓度人参总皂甙（ＴＳＰＧ） 对ＨＬ６０、Ｍｅｇ０１ 白血病细胞株和急性髓细胞白血病患者的骨髓细胞集落形成的影响，并以正常粒单祖细胞（ＣＦＵＧＭ）作比较。结果：正常和白血病祖细胞均对低浓度（５～２５ｕｇ／ｍｌ） 的ＴＳＰＧ有反应，集落数提高２６．１～３５．４％ ；中等浓度（７５ｕｇ／ｍｌ） 的ＴＳＰＧ仍然刺激正常ＣＦＵＧＭ 集落增加，但抑制ＨＬ６０、Ｍｅｇ０１ 和ＣＦＵＡＭＬ集落生长，抑制率分别为５０．８％ 、２５ ．１ ％ 和１９．０％ ；较高浓度（１００ｕｇ／ｍｌ） 的ＴＳＰＧ对白血病祖细胞的抑制作用更明显，ＨＬ６０ 不能形成集落，对Ｍｅｇ０１ 和ＣＦＵＡＭＬ的抑制率分别为５３．３％ 和２８ ．９ ％ ，而正常ＣＦＵＧＭ 仍生长良好。提示ＴＳＰＧ对白血病祖细胞的影响不同于正常祖细胞。 展开更多
关键词 人参总皂甙 白血病祖细胞 中药 药理
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