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木薯MeGBSSI与MeSSV的蛋白互作验证
1
作者
郑钧文
陆小花
+5 位作者
李雨恒
农宝昌
葛玉建
王亚杰
姚远
耿梦婷
《热带作物学报》
北大核心
2026年第3期579-587,共9页
颗粒结合淀粉合成酶I(MeGBSSI)是木薯直链淀粉合成的关键酶,主要催化葡萄糖单元在淀粉颗粒上通过α-1,4-糖苷键形成直链淀粉。然而,MeGBSSI与其他淀粉合成相关酶如何协同调控淀粉生物合成的机制仍不明确。本课题组前期通过酵母双杂交技...
颗粒结合淀粉合成酶I(MeGBSSI)是木薯直链淀粉合成的关键酶,主要催化葡萄糖单元在淀粉颗粒上通过α-1,4-糖苷键形成直链淀粉。然而,MeGBSSI与其他淀粉合成相关酶如何协同调控淀粉生物合成的机制仍不明确。本课题组前期通过酵母双杂交技术推测可溶性淀粉合成酶MeSSV为MeGBSSI的潜在结合蛋白。本研究以木薯主栽品种华南8号(SC8)为材料,克隆MeGBSSI和MeSSV基因,构建酵母双杂交载体pGBKT7-MeGBSSI和pGADT7-MeSSV,通过酵母双杂交点对点试验初步验证MeGBSSI与MeSSV之间的互作关系,并采用萤火虫荧光素酶互补(LCA)和双分子荧光互补(BiFC)技术进一步明确二者的直接蛋白互作。结果显示:MeGBSSI和MeSSV基因编码的蛋白序列与测序品种AM560相比,分别发生了4个和2个氨基酸替换;MeGBSSI蛋白对酵母细胞无毒性,且无自激活活性;该蛋白与可溶性淀粉合成酶MeSSV在酵母中发生互作;LCA试验结果显示MeGBSSI与MeSSV共表达后化学信号显著增强;BiFC试验进一步证明二者在植物细胞中能够形成复合体,且互作信号定位于叶绿体。本研究结果为揭示木薯淀粉合成相关酶之间的协同调控机制提供新的视角。
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关键词
木薯
MeGBSSI
messv
酵母双杂交
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职称材料
题名
木薯MeGBSSI与MeSSV的蛋白互作验证
1
作者
郑钧文
陆小花
李雨恒
农宝昌
葛玉建
王亚杰
姚远
耿梦婷
机构
海南大学热带农林学院/热带作物生物育种全国重点实验室
中国热带农业科学院热带生物技术研究所/中国热带农业科学院三亚研究院/农业农村部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室
出处
《热带作物学报》
北大核心
2026年第3期579-587,共9页
基金
海南省自然科学基金项目(No.325RC816)
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(No.1630052025020)
国家自然科学基金项目(No.32460519)。
文摘
颗粒结合淀粉合成酶I(MeGBSSI)是木薯直链淀粉合成的关键酶,主要催化葡萄糖单元在淀粉颗粒上通过α-1,4-糖苷键形成直链淀粉。然而,MeGBSSI与其他淀粉合成相关酶如何协同调控淀粉生物合成的机制仍不明确。本课题组前期通过酵母双杂交技术推测可溶性淀粉合成酶MeSSV为MeGBSSI的潜在结合蛋白。本研究以木薯主栽品种华南8号(SC8)为材料,克隆MeGBSSI和MeSSV基因,构建酵母双杂交载体pGBKT7-MeGBSSI和pGADT7-MeSSV,通过酵母双杂交点对点试验初步验证MeGBSSI与MeSSV之间的互作关系,并采用萤火虫荧光素酶互补(LCA)和双分子荧光互补(BiFC)技术进一步明确二者的直接蛋白互作。结果显示:MeGBSSI和MeSSV基因编码的蛋白序列与测序品种AM560相比,分别发生了4个和2个氨基酸替换;MeGBSSI蛋白对酵母细胞无毒性,且无自激活活性;该蛋白与可溶性淀粉合成酶MeSSV在酵母中发生互作;LCA试验结果显示MeGBSSI与MeSSV共表达后化学信号显著增强;BiFC试验进一步证明二者在植物细胞中能够形成复合体,且互作信号定位于叶绿体。本研究结果为揭示木薯淀粉合成相关酶之间的协同调控机制提供新的视角。
关键词
木薯
MeGBSSI
messv
酵母双杂交
Keywords
cassava
MeGBSSI
messv
yeast two-hybrid system
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
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作者
出处
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1
木薯MeGBSSI与MeSSV的蛋白互作验证
郑钧文
陆小花
李雨恒
农宝昌
葛玉建
王亚杰
姚远
耿梦婷
《热带作物学报》
北大核心
2026
0
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