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NF-YC15转录因子调控木薯抗细菌性枯萎病的互作蛋白筛选及功能验证
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作者 刘永敏 杨澜 +1 位作者 闫文雷 曾鸿秋 《福建农业学报》 北大核心 2026年第1期1-12,共12页
【目的】探明NF-YC15转录因子调控木薯(Manihot esculenta)抗细菌性枯萎病的分子机制。【方法】利用酵母双杂交筛选MeNF-YC15的互作蛋白,通过双分子荧光互补、Pull down等试验进一步进行互作验证。在木薯中构建超表达植株,通过接种细菌... 【目的】探明NF-YC15转录因子调控木薯(Manihot esculenta)抗细菌性枯萎病的分子机制。【方法】利用酵母双杂交筛选MeNF-YC15的互作蛋白,通过双分子荧光互补、Pull down等试验进一步进行互作验证。在木薯中构建超表达植株,通过接种细菌性枯萎病致病菌后的表型鉴定,分析蛋白互作如何调控木薯的抗病能力。采用转录组测序,鉴定MeNF-YC15调控的下游抗病基因,通过定量PCR试验分析各超表达植株中下游基因的表达水平,解析MeNF-YC15通过蛋白互作调控木薯抗病的分子机制。【结果】筛选到1个MeNF-YC15的候选互作蛋白,为茉莉酸信号转导途径中的关键抑制因子——茉莉酸ZIM结构域蛋白(Jasmonate ZIM-domain2.2, MeJAZ2.2),并验证了这两个蛋白在植物体内外是相互作用的。进一步通过抗病功能分析发现MeNF-YC15超表达植株的细菌数和病斑面积显著低于对照,MeJAZ2.2超表达植株的细菌数和病斑面积显著高于对照。MeNF-YC15-MeJAZ2.2共超表达株系的细菌数量和病斑面积显著高于MeNF-YC15超表达植株,且显著低于MeJAZ2.2超表达植株。进一步的研究结果表明MeNF-YC15正调控3个茉莉酸下游抗病基因WRKY68、Matrix metalloproteinase-3(MMP-3)、Leucine-rich repeat receptorlike kinases(LRR-RLK)的表达。同时,MeJAZ2.2能够抑制WRKY68、MMP-3、LRR-RLK的表达。【结论】MeNF-YC15与MeJAZ2.2的蛋白互作共同调控茉莉酸下游的抗病基因的表达,通过茉莉酸途径调控木薯对细菌性枯萎病的抗性,为解析MeNF-YC15通过植物激素调控木薯抗病的分子机制提供新的方向与思路。 展开更多
关键词 木薯 细菌性枯萎病 menf-yc15 抗病 茉莉酸
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