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木薯MeCML42基因启动子克隆及激素响应分析
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作者 侯静怡 甄兴厚 +6 位作者 王亚杰 张慧敏 李瑞梅 刘姣 郭建春 耿梦婷 姚远 《分子植物育种》 北大核心 2025年第18期6001-6009,共9页
钙调素类似蛋白(calmodulin-like proteins,CMLs)是一种植物中特有的钙离子感受器,在植物生长发育过程及响应逆境胁迫中起着重要作用。为了探讨木薯MeCML42的表达调控模式,本研究克隆并分析木薯干旱响应MeCML42基因的启动子。构建启动... 钙调素类似蛋白(calmodulin-like proteins,CMLs)是一种植物中特有的钙离子感受器,在植物生长发育过程及响应逆境胁迫中起着重要作用。为了探讨木薯MeCML42的表达调控模式,本研究克隆并分析木薯干旱响应MeCML42基因的启动子。构建启动子活性鉴定载体pCAMBIA1304-proMeCML42-GUS-GFP,并转化木薯脆性胚性愈伤组织,研究ABA、MeJA、IAA、SA等激素对转基因体胚中MeCML42启动子活性的影响。结果表明:MeCML42启动子活性受ABA、MeJA、IAA、SA激素调控,其中ABA、MeJA、IAA正调控MeCML42启动子活性,而SA对MeCML42启动子活性则为负调控。本研究为解析激素信号调控MeCML42表达影响木薯抗逆性的分子机理提供一定的参考。 展开更多
关键词 木薯 钙调素类似蛋白 mecml42 启动子 激素
原文传递
木薯MeCML42互作蛋白筛选 被引量:1
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作者 张慧敏 葛玉建 +6 位作者 侯静怡 梁宝娟 任治欣 郭建春 姚远 王亚杰 耿梦婷 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2251-2257,共7页
木薯(Manihot esclentaCrantz)具有抗旱、耐贫瘠、适应性强等优良的种植特点,是全世界10亿多人口的主要粮食作物。CMLs(calmodulin-like proteins)是一种植物类钙调蛋白,是存在于细胞内的钙感受器,与其他钙调素结合蛋白相互作用调控细... 木薯(Manihot esclentaCrantz)具有抗旱、耐贫瘠、适应性强等优良的种植特点,是全世界10亿多人口的主要粮食作物。CMLs(calmodulin-like proteins)是一种植物类钙调蛋白,是存在于细胞内的钙感受器,与其他钙调素结合蛋白相互作用调控细胞生理过程,参与植物逆境胁迫响应。木薯MeCML42基因受干旱胁迫诱导,为了研究该基因参与的干旱胁迫响应通路,本研究利用酵母双杂交筛选MeCML42的互作蛋白。首先利用同源重组技术构建pGBKT7-MeCML42诱饵载体,通过自激活检测证明MeCML42蛋白无自激活活性。毒性检测实验证明,MeCML42蛋白对酵母菌没有毒性,不影响酵母正常生长。通过酵母双杂交进行cDNA文库筛选,获得7个候选互作蛋白。通过酵母双杂回转实验验证了MeCML42与硫氧还蛋白MeCDSP32存在互作关系。甘露醇模拟干旱胁迫发现,MeCML42与MeCDSP32均受干旱诱导表达,且在胁迫48 h的表达量最高,此结果说明MeCML42蛋白与MeCDSP32蛋白协同参与了木薯对干旱胁迫的响应。本研究结果为MeCML42参与木薯响应干旱胁迫通路提供新的依据。 展开更多
关键词 木薯 mecml42 酵母双杂交 MeCDSP32
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