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靶向mdr1b/mdr1a基因siRNA逆转T24/ADM多药耐药性研究 被引量：2
1
作者 刘正清 姚启盛 +4 位作者 杨勇 陈从波 龚小新 黄力 王黎 《海南医学院学报》 CAS 2012年第7期865-868,共4页
目的:研究mdr1b/a基因siRNA(small interfering RNA)逆转膀胱癌的多药耐药性。方法:设计mdr1b/a基因的siRNA,转染膀胱癌T24/ADM细胞,用RT-PCR分析mRNA的表达,Rh123分析P-gp活性,流式细胞仪检测细胞内阿霉素积累量。结果:siRNA能明显地逆... 目的:研究mdr1b/a基因siRNA(small interfering RNA)逆转膀胱癌的多药耐药性。方法:设计mdr1b/a基因的siRNA,转染膀胱癌T24/ADM细胞,用RT-PCR分析mRNA的表达,Rh123分析P-gp活性,流式细胞仪检测细胞内阿霉素积累量。结果:siRNA能明显地逆转T24/ADM细胞的多药耐药,使mdr1b/a基因的mRNA表达水平下调,细胞内阿霉素积累量显著增加(P<0.05)。结论:mdr1b/a基因siRNA能够逆转膀胱癌的多药耐药性。 展开更多
关键词 SIRNA mdr1b/a基因 多药耐药 膀胱癌
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Increased susceptibility to Trichuris muris infection and exacerbation of colitis in Mdr1a-/-mice
2
作者 Ekta K Bhardwaj Kathryn J Else +1 位作者 Michael T Rogan Geoffrey Warhurst 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第7期1797-1806,共10页
AIM: To investigate the influence of Trichuris muris (T. muris) infection in a mouse model of genetic susceptibility to inflammatory bowel disease, Mdr1a-/-.
关键词 HELMINTH COLITIS Inflammatory bowel disease P-GLYCOPROTEIN mdr1a
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SALL4对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响及其机制 被引量：1
3
作者 陈梅 陈茜 《山西医科大学学报》 2025年第7期745-750,共6页
目的探讨婆罗双树样基因4(spalt-like transcription factor 4,SALL4)对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响并探讨其可能分子机制。方法构建SALL4过表达质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo-SALL4,分别将空质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo(对照)和SALL4过表... 目的探讨婆罗双树样基因4(spalt-like transcription factor 4,SALL4)对宫颈癌细胞顺铂耐药性的影响并探讨其可能分子机制。方法构建SALL4过表达质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo-SALL4,分别将空质粒pCAG-IRES2-AcGFP1-Neo(对照)和SALL4过表达质粒转染至HeLa和SiHa细胞,通过新霉素(G418)筛选稳定过表达SALL4的HeLa和SiHa细胞株。采用浓度梯度递增法建立HeLa和SiHa细胞的顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞株HeLa-DDP和SiHa-DDP。过表达SALL4组和对照组宫颈癌细胞加入不同浓度的顺铂(3,6,12,24,48μg/mL),培养48 h,采用MTT法计算顺铂半抑制浓度(IC50)。过表达SALL4组和对照组宫颈癌细胞加入浓度为5μg/mL的顺铂,培养不同时间(24,48,72 h),采用MTT法计算细胞活率。应用qRT‑PCR和Western blot法分别检测过表达SALL4细胞及顺铂耐药细胞中SALL4、ABCG2和MDR1的mRNA和蛋白表达水平。结果干预48 h,与对照组相比,过表达SALL4组不同浓度顺铂作用下宫颈癌细胞存活率明显升高,顺铂半抑制浓度(IC_(50))显著升高(P<0.05)。同一浓度顺铂作用下,过表达SALL4组宫颈癌细胞培养48,72 h细胞存活率明显高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,过表达SALL4组宫颈癌细胞中ABCG2和MDR1的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。顺铂耐药细胞株HeLa-DDP和SiHa-DDP细胞中SALL4、ABCG2和MDR1的mRNA和蛋白表达水平均显著高于亲本细胞(P<0.05)。结论过表达SALL4诱导人宫颈癌细胞对顺铂的耐药性,其作用机制可能与SALL4调控细胞耐药相关基因ABCG2和MDR1相关。 展开更多
关键词 宫颈癌 SALL4 基因过表达 顺铂 耐药性 ABCG2 MDR1
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氢溴酸槟榔碱体内对大鼠肝肾转运体表达的影响 被引量：2
4
作者 翟婷 黄祥涛 +1 位作者 王俊俊 陈勇 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期2711-2716,共6页
目的探究氢溴酸槟榔碱对大鼠肝肾转运体表达的影响。方法通过给雄性Wistar大鼠ig氢溴酸槟榔碱(0.8、4、20 mg/kg)21 d,应用荧光RT-PCR检测肝、肾组织中13种转运体m RNA的表达量,考察氢溴酸槟榔碱对大鼠肝、肾转运体m RNA表达的影响。结... 目的探究氢溴酸槟榔碱对大鼠肝肾转运体表达的影响。方法通过给雄性Wistar大鼠ig氢溴酸槟榔碱(0.8、4、20 mg/kg)21 d,应用荧光RT-PCR检测肝、肾组织中13种转运体m RNA的表达量,考察氢溴酸槟榔碱对大鼠肝、肾转运体m RNA表达的影响。结果氢溴酸槟榔碱低剂量时显著抑制了肝脏MRP2和MDR1A m RNA表达,但显著诱导了肾脏MRP5 m RNA表达。氢溴酸槟榔碱高剂量时显著抑制了肝脏OCT2、OAT2、OCTN2、OATP1A1、OATP1A4、OATP2B1、MRP2和MDR1A,以及肾脏MRP2、BCRP、MDR1A的m RNA表达水平,但显著上调了肾脏OCTN2、OATP1A1、OATP1A4及MRP5的m RNA表达量,且对上述转运体m RNA表达的影响有一定剂量依赖性。结论由于肝肾转运体表达与功能的改变会引起药物相互作用,临床上应给予槟榔嗜好者更多关注,以避免发生不良药物相互作用。 展开更多
关键词 氢溴酸槟榔碱 药物转运体 药物相互作用 MRP2 mdr1a OATP1A4 OCTN2
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KB细胞耐药株的建立及其耐药机制的探讨 被引量：63
5
作者 张晓红 张福荣 +1 位作者 籍秀娟 李占荣 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期246-251,共6页
用对长春新碱（ＶＣＲ）敏感的ＫＢ细胞为亲本，通过诱变剂甲基磺酸乙酯刺激，然后在培养液中加入浓度递增的ＣＶＲ，得到耐药细胞株ＫＢＶ２００。此细胞株对ＶＣＲ的耐受程度约为ＫＢ细胞的１７５倍。对其它抗肿瘤药物如紫杉醇、秋水... 用对长春新碱（ＶＣＲ）敏感的ＫＢ细胞为亲本，通过诱变剂甲基磺酸乙酯刺激，然后在培养液中加入浓度递增的ＣＶＲ，得到耐药细胞株ＫＢＶ２００。此细胞株对ＶＣＲ的耐受程度约为ＫＢ细胞的１７５倍。对其它抗肿瘤药物如紫杉醇、秋水仙碱和阿霉素等也有不同程度的交叉耐药性。进一步研究表明，ＫＢＶ２００对３Ｈ－ＶＣＲ的蓄积明显减少，且耐药基因（ｍｄｒ１）表达增加。钙通道阻滞剂维拉帕米（Ｖｅｒ）可增加ＫＢＶ２００对３Ｈ－ＶＣＲ的蓄积和对ＶＣＲ的敏感性。这些结果提示，ＫＢＶ２００耐药的机制可能是由于ｍｄｒ１基因表达增加，产生过量的ｐ－糖蛋白，使药物外排增多所致。 展开更多
关键词 KB细胞 耐药株 长春新碱 MDR1基因
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累积高剂量照射对体外培养的小细胞肺癌细胞系的总RNA及其多药耐药基因的影响 被引量：12
6
作者 聂青 康静波 +3 位作者 段蕴铀 宋鹏 徐云科 官新社 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期829-831,共3页
观察累积高剂量外照射对小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞系的总RNA及其MDR1mRNA的影响。采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI H4 4 6小细胞肺癌细胞系进行分次外照射 ,每次 2Gy ,累积总剂量为 5 0Gy。用Trizol分别提取未照射... 观察累积高剂量外照射对小细胞肺癌NCI H4 4 6细胞系的总RNA及其MDR1mRNA的影响。采用GWGP80型远距离60Co治疗机对进入指数生长期的NCI H4 4 6小细胞肺癌细胞系进行分次外照射 ,每次 2Gy ,累积总剂量为 5 0Gy。用Trizol分别提取未照射和已完成全部外照射剂量的NCI H4 4 6细胞系的总RNA。通过RT PCR ,琼脂胶电泳 ,Gelbase电脑软件计算电泳条带的平均OD值 (OD值愈大 ,表示产物愈多 ) ,求两组细胞的MDR1DNA与其β actinDNA的平均OD值的比来确定两组细胞MDR1mRNA表达的高低。结果显示 ,在相同细胞数和相同体积的条件下 ,未照射组和照射组细胞总RNA的浓度分别为 2 5 9μg/ml和 16 6 μg/ml;未照射组细胞MDR1DNA/ β actinDNA为 1 0 78,照射组为 1 338。由此推断MDR1mRNA表达增加。研究表明 ,对小细胞癌细胞系NCI H4 4 6进行累积高剂量外照射可抑制其总RNA的生物合成 ;同时可提高其MDR1mRNA的表达水平。提示累积高剂量放射可能诱发多药耐药。 展开更多
关键词 细胞系 小细胞肺癌 外照射 总RNA MDR1mRNA 治疗
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肾移植后高血压人群中CYP3A4*1G、CYP3A5*3和MDR1 C3435T基因多态性对氨氯地平降压疗效的影响 被引量：20
7
作者 文娟 黄志军 +3 位作者 袁洪 邢晓为 赵秋平 席兰艳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期55-60,共6页
目的探讨CYP3A4*1G、CYP3A5*3和MDR1 C3435T基因多态性对肾移植后高血压人群氨氯地平降压疗效的影响。方法筛选70名肾移植后高血压患者并给予氨氯地平5 mg/d干预4周,应用PCR-RFLP方法检测相关基因型,根据基因型进行分组,比较不同基因型... 目的探讨CYP3A4*1G、CYP3A5*3和MDR1 C3435T基因多态性对肾移植后高血压人群氨氯地平降压疗效的影响。方法筛选70名肾移植后高血压患者并给予氨氯地平5 mg/d干预4周,应用PCR-RFLP方法检测相关基因型,根据基因型进行分组,比较不同基因型高血压患者血压下降水平。结果 3例自动退出试验,67例患者完成试验。经氨氯地平治疗后收缩压和舒张压下降值分别为18.8±6.9 mmHg和12.7±5.4 mmHg,差异有统计学差异(P<0.05)。CYP3A5*3*3基因型舒张压下降幅度(15.0±5.0 mmHg)显著高于CYP3A5*1*3基因型(11.3±5.3 mmHg)和CYP3A5*1*1基因型(10.0±4.1 mmHg)(P<0.05),但三组间收缩压下降幅度差异无显著性(P>0.05);CYP3A4*1G*1G基因型携带者舒张压下降幅度(8.6±4.1 mmHg)显著低于CYP3A4*1G*1基因型(13.2±5.2 mmHg)和CYP3A4*1*1基因型(13.1±5.5 mmHg)(P<0.05),三组间收缩压下降幅度差异无统计学意义(P>0.05);MDR1 C3435T各基因型在治疗前后收缩压和舒张压下降幅度差异均无显著性(P>0.05);CYP3A4*1G和CYP3A5*3具有连锁性,以GGGG、AAAA、AGAG基因型最常见,其中GGGG基因型治疗前后舒张压下降幅度高于其他三组(P<0.05)。结论在肾移植后高血压治疗中,CYP3A5*3和CYP3A4*1G基因多态性可影响氨氯地平的降压疗效,CYP3A5*3*3基因型的舒张压下降幅度最大,CYP3A4*1G*1G基因型的舒张压下降幅度最小,CYP3A4*1G/CYP3A5*3组成的单倍体中GGGG基因型对舒张压下降幅度最大,MDR1C3435T未发现与氨氯地平降压疗效相关。 展开更多
关键词 肾移植 高血压 氨氯地平 基因多态性 CYP3A4 CYP3A5 MDR1
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耐药基因 MDR1、GST-π在乳腺癌组织中的表达及临床应用 被引量：12
8
作者 王立梅 毛慧生 +5 位作者 林晓萍 冯玉梅 陈高明 杨毅 刘洪隐 李春海 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期846-847,共2页
关键词 乳腺癌 MDR1 GST-Π 耐药性 基因表达
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姜黄素逆转HL60/ADR及MCF-7/ADR的多药耐药研究 被引量：13
9
作者 靳胜 陈书恩 +4 位作者 张曼 张敏 张秀敏 郝林 许华林 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期21-23,共3页
目的观察姜黄素对HL60/ADR以及MCF-7/ADR多药耐药(MDR)的逆转。方法用MTT法观察细胞的生长抑制效应,流式细胞仪检测凋亡以及细胞内阿霉素浓度,RT-PCR以及Western Blot检测Mdr1、MRP基因和Bcl-2蛋白表达。结果加入姜黄素后耐药细胞系逆... 目的观察姜黄素对HL60/ADR以及MCF-7/ADR多药耐药(MDR)的逆转。方法用MTT法观察细胞的生长抑制效应,流式细胞仪检测凋亡以及细胞内阿霉素浓度,RT-PCR以及Western Blot检测Mdr1、MRP基因和Bcl-2蛋白表达。结果加入姜黄素后耐药细胞系逆转指数分别为4.18(HL60/ADR)和3.39(MCF-7/ADR),与单纯应用阿霉素相比差异有统计学意义;流式细胞仪检测显示有明显的促凋亡作用,耐药细胞系内的ADR浓度明显升高;RT-PCR以及Western Blot检测发现姜黄素对上述耐药细胞系的MRP以及Bcl-2表达有抑制作用。结论姜黄素可能作为多药耐药的逆转剂应用于MDR逆转。 展开更多
关键词 姜黄素 肿瘤多药耐药 MDR1基因 MRP基因 Bcl-2基因
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三维培养药敏实验测定的胃癌药物敏感性与多药耐药基因蛋白表达的关系 被引量：9
10
作者 袁庶强 周志伟 +4 位作者 梁永钜 符立梧 陈功 Rajiv Prasad Keshari 张丽仪 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第4期337-343,共7页
背景与目的:目前胃癌化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对药物的敏感性来指导临床治疗,以提高疗效,早已成为化疗界瞩目的问题。本研究通过三维培养药敏实验测定胃癌的药物敏感性,并通过测定多药耐药基因表达产物水平,分析两者之间的关... 背景与目的:目前胃癌化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对药物的敏感性来指导临床治疗,以提高疗效,早已成为化疗界瞩目的问题。本研究通过三维培养药敏实验测定胃癌的药物敏感性,并通过测定多药耐药基因表达产物水平,分析两者之间的关系。方法:应用三维培养体外药敏实验技术,测定表阿霉素、顺铂、草酸铂、5-FU、泰素帝、伊立替康6种单药和5-FU+表阿霉素+顺铂、5-FU+伊立替康、5-FU+草酸铂、5-FU+泰素帝+顺铂4组联合用药对22例胃癌组织的抑制率,并计算敏感率;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法检测胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2基因蛋白的表达。结果:单药组中5-FU对胃癌组织的抑制率和敏感率最高,分别为29.8%和50.0%;联合用药组抑制率最高为5-FU+泰素帝+顺铂(59.8%),敏感率最高为5-FU+表阿霉素+顺铂(77.3%);联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组(P<0.05)。胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2mRNA的阳性率分别为90.9%、54.5%、77.3%,MDR1、MRP1、ABCG2蛋白的阳性率分别为36.4%、54.5%、36.4%;多药耐药蛋白高表达与胃癌对表阿霉素的耐药有相关性(P<0.05)。结论:胃癌组织中多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2蛋白高表达与胃癌组织对表阿霉素的耐药有关,提示这三种耐药基因可能参与介导表阿霉素的耐药。 展开更多
关键词 胃肿瘤 三维培养 药敏实验 表阿霉素 多药耐药 MDR1 MRP1 ABCG2
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三维培养药敏实验测定的结直肠癌化疗敏感性与多药耐药基因蛋白表达的关系 被引量：8
11
作者 袁庶强 周志伟 +4 位作者 梁永钜 符立梧 陈功 邱海波 张丽仪 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第9期932-938,共7页
背景与目的:目前肿瘤化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对化疗药物的敏感性来指导临床治疗,有可能提高化疗疗效。本研究通过三维培养药敏实验测定结直肠癌的药物敏感性,并分析与肿瘤组织多药耐药基因表达产物水平的关系。方法:应用三... 背景与目的:目前肿瘤化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对化疗药物的敏感性来指导临床治疗,有可能提高化疗疗效。本研究通过三维培养药敏实验测定结直肠癌的药物敏感性,并分析与肿瘤组织多药耐药基因表达产物水平的关系。方法:应用三维培养体外药敏实验技术,检测表阿霉素、顺铂、草酸铂、氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)、泰素帝、伊立替康6种单药和5-FU+表阿霉素+顺铂、5-FU+伊立替康、5-FU+草酸铂、5-FU+泰素帝+顺铂4组联合用药对22例结直肠癌组织的抑制率,抑制率大于30%定义为敏感,计算敏感率。应用逆转录聚合酶链反应和免疫组化法测定结直肠癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2基因蛋白表达水平;用Spearman相关分析法分析肿瘤药物敏感性和多药耐药蛋白表达的相关性。结果:单药组抑制率最高为草酸铂(17.5%),敏感率最高为5-FU(36.4%);联合用药组抑制率最高为5-FU+草酸铂(54.1%),敏感率最高为5-FU+表阿霉素+顺铂(71.4%)和5-FU+泰素帝+顺铂(71.4%);联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组(P<0.05)。MDR1、MRP1、ABCG2mRNA的阳性率分别为88.9%、55.6%、55.6%;MDR1、MRP1、ABCG2蛋白的阳性率分别为55.6%、33.3%、50.0%;多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2mRNA和蛋白的表达无相关性(P>0.05)。ABCG2蛋白高表达与结直肠癌对表阿霉素的耐药有相关性(P<0.05)。结论:结直肠癌多药耐药蛋白表达与肿瘤药物敏感性有一定相关性;结合三维培养药敏实验和多药耐药基因表达产物水平检测,有可能对个体肿瘤的化疗敏感性进行预测,筛选化疗敏感药物。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 三维培养 药敏实验 多药耐药性 MDR1 MRP1 ABCG2
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姜黄素对人肝癌细胞Sk-hep-1抗癌作用的研究 被引量：15
12
作者 王伟章 张碧鱼 +1 位作者 陈宏远 张黎 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期485-488,共4页
目的:研究姜黄素对人肝癌细胞Sk-hep-1体外抗癌作用,探讨其抗癌作用的分子机制。方法:应用MTT法、DA-PI核染色法和细胞周期分析法,检测姜黄素对Sk-hep-1细胞生长和凋亡的影响,并通过RT-PCR方法检测姜黄素对Sk-hep-1细胞抗凋亡基因(Survi... 目的:研究姜黄素对人肝癌细胞Sk-hep-1体外抗癌作用,探讨其抗癌作用的分子机制。方法:应用MTT法、DA-PI核染色法和细胞周期分析法,检测姜黄素对Sk-hep-1细胞生长和凋亡的影响,并通过RT-PCR方法检测姜黄素对Sk-hep-1细胞抗凋亡基因(Survivin和Bcl-xL)和耐药基因(DRG2和MDR1)mRNA表达的影响。结果:姜黄素抑制Sk-hep-1细胞增殖呈量效关系。姜黄素处理组肝癌细胞Sk-hep-1,HepG2和Hep3B细胞发生不同程度的凋亡,正常肝细胞Chang’s liver无明显凋亡。姜黄素处理组Sk-hep-1细胞周期发生变化,G0/G1或G2/M期细胞比例增多。姜黄素处理组Sk-hep-1细胞耐药基因MDR1 mRNA水平显著下降,而抗凋亡基因的表达无明显变化。结论:姜黄素能够抑制Sk-hep-1细胞增殖,并诱导其凋亡,推测可能是通过下调MDR1 mRNA的表达而起作用。 展开更多
关键词 姜黄素 肝癌细胞株Sk-hep-1 细胞凋亡 MDR1基因
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CyclinD1,Bax及MDR1在非小细胞肺癌中的表达及生物学特性 被引量：8
13
作者 王鸿程 曹乃清 +4 位作者 张程 简丽萍 许学亮 孙绍娟 曹兵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期781-783,共3页
目的：探讨细胞周期蛋白CyclinD1、促凋亡基因Bax及多药耐药基因MDR1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及生物学特性：方法：用鼠抗人CyclinD1、鼠抗人MDR1及鼠抗人Bax单克隆抗体（mAb）对56例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染... 目的：探讨细胞周期蛋白CyclinD1、促凋亡基因Bax及多药耐药基因MDR1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及生物学特性：方法：用鼠抗人CyclinD1、鼠抗人MDR1及鼠抗人Bax单克隆抗体（mAb）对56例石蜡包埋的原发性NSCLC组织进行免疫组化染色，并与20例肺良性病变作对照，对其表达情况进行检测分析。结果：CyclinD1表达为恶性病变高于良性病变（P＜0．05），与P—TNM分期及分化程度无关。Bax蛋白在NSCLC和肺良性病变中表达无明显差异性，但在NSCLC中，肿块≥3cm时其表达高于肿块＜3cm，有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者，Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期，中～高分化高于低～中分化（各组P＜0．05）：MDR1在NSCLC中的表达高于肺良性病变（P＜0．05），并且在肿块≥3cm高于肿块＜3cm（P＜0．05），有淋巴结转移高于无淋巴结转移（P＜0．05）：结论：CyclinD1的过表达与肺癌的发生有关：Bax在NSCLC发生的早期低表达，而在中晚期高表达，说明Bax在早期的抑制有诱癌形成的可能，晚期则加速癌细胞凋亡，参与机体的抗癌机制；MDR1的过表达与NSCLC的发展与预后有关，并有利于NSCLC耐药的监测与评价。 展开更多
关键词 CYCLIND1 BAX MDR1 NSCLC 细胞凋亡 生物学特性
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白血病多药耐药裸鼠荷瘤模型的建立 被引量：8
14
作者 曹渊 惠璐璐 +3 位作者 秦蓉 方悦 许文林 沈慧玲 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期302-307,共6页
目的建立人白血病荷瘤小鼠多药耐药模型。方法将人白血病细胞K562接种于裸鼠背部皮下,持续低剂量瘤内注射阿霉素,逐步诱导建立耐阿霉素的白血病荷瘤裸鼠模型。绘制裸鼠移植瘤生长曲线;MTT法检测阿霉素诱导后移植瘤细胞对各化疗药物的敏... 目的建立人白血病荷瘤小鼠多药耐药模型。方法将人白血病细胞K562接种于裸鼠背部皮下,持续低剂量瘤内注射阿霉素,逐步诱导建立耐阿霉素的白血病荷瘤裸鼠模型。绘制裸鼠移植瘤生长曲线;MTT法检测阿霉素诱导后移植瘤细胞对各化疗药物的敏感性;荧光定量PCR检测MDR1、MRP1、LRP1基因表达水平;免疫组化和流式细胞技术检测P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达;流式细胞技术检测移植瘤细胞周期分布和细胞内阿霉素浓度。结果裸鼠皮下移植瘤的成瘤率为100%;化疗组瘤细胞对ADR、VP16、DNR和VCR的IC50均明显高于对照组,其耐药指数分别为40.78、20.59、21.24、18.81;阿霉素诱导组MDR、MRP1、LRP1基因mRNA表达水平分别是对照组的31.55、3.35、3.16倍;免疫组化和流式细胞术检测结果均显示诱导组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达较对照组明显升高;流式细胞术检测显示诱导耐药组瘤细胞S期比例[(8.0±1.32)%]较对照组[(56.92±1.41)%]明显降低,细胞内阿霉素浓度较对照组明显减少。结论成功建立白血病多药耐药动物荷瘤模型,为克服肿瘤继发多药耐药的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 移植瘤 白血病 多药耐药 K562 MDR1 MRP1 LRP1 P-GP
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白血病细胞中NF-κB调控MDR1基因、P糖蛋白及逆转耐药的研究 被引量：12
15
作者 王漪 刘心 +2 位作者 张海涛 余敏 王晖 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期950-954,共5页
本研究探讨NF-κB调控的血液肿瘤细胞抗凋亡机制中是否有mdr1的参与,并通过对NF-κB的抑制希望获得血液肿瘤的耐药逆转,为难治性白血病的治疗探索一条新的道路。取不同终浓度的NF-κB抑制剂PDTC作用的,或者同一浓度作用不同时间后的K562... 本研究探讨NF-κB调控的血液肿瘤细胞抗凋亡机制中是否有mdr1的参与,并通过对NF-κB的抑制希望获得血液肿瘤的耐药逆转,为难治性白血病的治疗探索一条新的道路。取不同终浓度的NF-κB抑制剂PDTC作用的,或者同一浓度作用不同时间后的K562/A02细胞,分别用免疫组织化学加计算机图像分析仪方法半定量检测每1份样本中NF-κB的活性和P-gp的表达,以及用反转录多聚酶链反应方法半定量检测每2份样本中mdr1的活性,通过统计学来分析mdr1、P-gp的表达是否与NF-κB的活化有关。结果表明:随着NF-κB抑制剂PDTC作用浓度的不断升高、作用时间的不断延长,K562/A02细胞NF-κB/p65的表达不断降低,P-gp和mdr1mRNA的表达也逐渐降低,而且三因子之间均有显著相关性。结论:通过对K562/A02细胞高表达的NF-κB的抑制可降低该细胞的mdr1mRNA和P-gp的表达,从而提高血液肿瘤细胞的放化疗敏感性。 展开更多
关键词 K562/A02 NF—KB PDTC P—GP MDR1
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急性淋巴细胞白血病耐药机制的研究进展 被引量：24
16
作者 马晶晶 陈月 于亮 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期261-265,共5页
急性淋巴细胞性白血病是一种从淋巴细胞起源的恶性克隆性疾病。急性淋巴细胞白血病的治疗包括化疗造血干细胞移植,免疫治疗,分子靶向治疗等月前在临床上首先以化疗取得完全缓解后再选择其他治疗,但白血病细胞对化疗药物的耐药成为急性... 急性淋巴细胞性白血病是一种从淋巴细胞起源的恶性克隆性疾病。急性淋巴细胞白血病的治疗包括化疗造血干细胞移植,免疫治疗,分子靶向治疗等月前在临床上首先以化疗取得完全缓解后再选择其他治疗,但白血病细胞对化疗药物的耐药成为急性淋巴细胞白血病治疗过程中的主要障碍。目前关于急性淋巴细胞白血病耐药机制的研究非常活跃,本文将从经典耐药机制加膜转运蛋白、基因改变,以及新的耐药机制,如骨髓微环境的改变、微小RNA(Micro RNA)等方面作一综述。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 耐药机制 MICRO RNA MDR1 自噬
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非小细胞肺癌MDR1-mRNA、MRP-mRNA及LRP-mRNA表达的研究 被引量：9
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作者 杨俊兰 戴为民 +1 位作者 石廷章 魏秀芳 《中国肺癌杂志》 CAS 2001年第3期175-177,共3页
目的　观察肺癌组织及癌旁肺组织MDR1 mRNA、MRP mRNA及LRP mRNA的表达。方法　采用RT PCR法检测 30例肺癌患者癌组织和正常肺组织中MDR1 mRNA、MRP mRNA和LRP mRNA的表达情况。结果　MDR1 mRNA在肺癌组织及癌旁肺组织的表达阳性率分别... 目的　观察肺癌组织及癌旁肺组织MDR1 mRNA、MRP mRNA及LRP mRNA的表达。方法　采用RT PCR法检测 30例肺癌患者癌组织和正常肺组织中MDR1 mRNA、MRP mRNA和LRP mRNA的表达情况。结果　MDR1 mRNA在肺癌组织及癌旁肺组织的表达阳性率分别为 40 %及 16 .6 7% (P =0 .0 45 ) ,其表达与细胞分化程度、临床分期及病理类型无明显关系。MRP mRNA在肺癌组织及癌旁肺组织的表达分别为 43 .33 %及 2 6 .6 7% ,低分化者MRP的表达率明显高于中高分化者 (P =0 .0 3) ,其表达与临床分期无明显关系。LRP mRNA在肺癌组织及癌旁肺组织的表达分别为 5 6 .6 7%及 10 % (P =0 .0 0 0 4) ,其表达与肿瘤类型、临床分期及癌细胞的分化程度无明显关系。 30例肺癌组织中MDR1 mRNA、MRP mRNA、LRP mRNA共同表达者 7例(2 3 .33 % ) ,三者均无表达者 10例 (33 .33 % ) ,三者的一致性达 5 6 .6 7%。结论　MDR1 mRNA、MRP mRNA、LRP mRNA在肺癌的耐药中可能起重要作用。 展开更多
关键词 MDR1 MRP LRP RT-PCR MRNA 非小细胞肺癌
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靶向MDR1基因的RNAi稳定逆转结肠癌细胞的多药耐药性 被引量：13
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作者 夏忠胜 朱兆华 +4 位作者 陈其奎 钟荚强 张立勇 刘仲敏 ADAM Bao-ling 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期898-903,共6页
目的:探讨靶向多药耐药蛋白-1(MDR1)基因的RNA干扰(RNAi)对结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性的稳定逆转作用。方法:分别构建含编码#4029MDR1 siRNA和#4123MDR1 siRNA的质粒载体,并转染COLO320DM结肠癌多药耐药细胞,采用G418筛选克... 目的:探讨靶向多药耐药蛋白-1(MDR1)基因的RNA干扰(RNAi)对结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性的稳定逆转作用。方法:分别构建含编码#4029MDR1 siRNA和#4123MDR1 siRNA的质粒载体,并转染COLO320DM结肠癌多药耐药细胞,采用G418筛选克隆细胞,经实时定量RT-PCR及Western blotting鉴定阳性克隆细胞。MTT法检测细胞活力并计算各抗肿瘤药的IC50。流式细胞术检测细胞周期并计算PI/AI值。流式细胞仪测定细胞内adriamycin药物累积浓度。结果:阳性克隆细胞(clone#4029和clone#4123)的MDR1mR-NA和P-gp的表达均被抑制。COLO320DM结肠癌亲本细胞adriamycin及vincristine的IC50分别为9.616μmol/L和0.358μmol/L,而clone#4029的IC50分别降至1.094μmol/L和0.023μmol/L(P<0.01),clone#4123的IC50分别降至0.780μmol/L和0.035μmol/L(P<0.01)。COLO320DM结肠癌亲本细胞用adriamycin及vincristine处理后其PI/AI值分别为5.68及9.59,而clone#4029的PI/AI值分别降至2.74及3.59(P<0.01),clone#4123的PI/AI值分别降至2.75及3.24(P<0.01)。COLO320DM结肠癌亲本细胞用10μmol/Ladriamycin处理后细胞内adriamycin累积浓度为27.92,而clone#4029及clone#4123细胞内adriamycin累积浓度分别增加至187.24和215.57(P<0.01)。结论:稳定转染含编码MDR1siRNA的质粒载体能稳定逆转结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 多药耐药性 RNA干扰 基因 MDR1 转染
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新型Taq Man-MGB探针实时荧光定量PCR检测人类mdr1基因 被引量：9
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作者 邹亚伟 封志纯 +4 位作者 胡斌 乔英飒 吴梓梁 陈福雄 叶铁真 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期466-468,共3页
目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量PCR检测新方法。方法用Primer Express 2．0引物设计软件设计引物和MGB探针,以Taq Man-MGB探针技术为基础,运用Taq Man-MGB探针,以含有目的基因mdr1cDN... 目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量PCR检测新方法。方法用Primer Express 2．0引物设计软件设计引物和MGB探针,以Taq Man-MGB探针技术为基础,运用Taq Man-MGB探针,以含有目的基因mdr1cDNA的质粒pHaMDR1／A为阳性模板,建立实时荧光定量PCR检测方法。结果所建立方法的最低检测限度为15个基因拷贝／反应,在待扩增DNA浓度为3．061×103 cps／ml-3．061×109cps／ml范围时,模板浓度与循环阈值(Ct)之间的相关性良好,决定系数r2为0．988243。结论应用Taq Man-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测人类mdr1基因,具有灵敏度高、特异性高和精确性高等优点。 展开更多
关键词 TAQ Man-MGB探针 实时荧光定量PCR mdr1
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中药方剂R_1对耐阿霉素人乳腺癌细胞P糖蛋白表达的影响 被引量：31
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作者 张文卿 刘叙仪 +2 位作者 韩复生 杨敬贤 王萍 《中药药理与临床》 CAS CSCD 1996年第1期18-22,共5页
免疫细胞化学技术和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证实ＭＣＦ７ａｄｒ细胞Ｐ－糖蛋白（ＰＧＰ）过量表达，而ＭＣＦ７细胞无ＰＧＰ表达。１：６０Ｒ１（复方Ｒ１）和１：９０Ｒ１处理细胞２小时、３小时均使ＭＣＦ２ａｄｒ细胞ＰＧＰ表达... 免疫细胞化学技术和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证实ＭＣＦ７ａｄｒ细胞Ｐ－糖蛋白（ＰＧＰ）过量表达，而ＭＣＦ７细胞无ＰＧＰ表达。１：６０Ｒ１（复方Ｒ１）和１：９０Ｒ１处理细胞２小时、３小时均使ＭＣＦ２ａｄｒ细胞ＰＧＰ表达下降，并且与药物作用时间和浓度有关。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析示ＭＣＦ１ａｄｒ细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ高表达，而ＭＣＦ７细胞无表达。１：６０Ｒ１、１：９０Ｒ１处理２小时或３小时均使ＭＣＦ７ａｄｒ细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达降低，且随着时间的延长而更加明显。浓度（１：６０Ｒ１，１：９０Ｒ１）改变对耐药细胞ｍｄｒ１ｍＲＮＡ表达下降的影响程度无明显差异。结果提示Ｒ１的逆转作用机理之一可能与其从蛋白质和ｍＲＮＡ水平使耐药细胞ＰＧＰ表达下降．从而增加细胞内药物聚集量和抗癌药细胞毒性有关。 展开更多
关键词 过量表达 耐药细胞 mdr1 阿霉素 中药方剂 P糖蛋白 人乳腺癌细胞 机理 降低 药物
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