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重组Mash1慢病毒表达载体的构建
1
作者
张瑞
许予明
+4 位作者
赵国强
郭建新
宋波
张世杰
韩志强
《神经损伤与功能重建》
2006年第2期105-107,共3页
目的:克隆小鼠Mash1基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1,为进一步研究Mash1在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:应用RT-PCR从小鼠13d胚胎中扩增出Mash1cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感...
目的:克隆小鼠Mash1基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1,为进一步研究Mash1在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:应用RT-PCR从小鼠13d胚胎中扩增出Mash1cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态细菌J M109,通过蓝白筛选、PCR扩增和双酶切鉴定出阳性菌落,并对其进行基因测序。BamHⅠ和XholⅠ双酶切pGEM-T-Mash1和Lentivirus获得的目的基因双粘片段与Lentivirus双粘线性质粒相连接,转化J M109,酶切方法鉴定重组阳性菌落。结果:PCR扩增、酶切分析及序列测定证实成功获取Mash1cDNA克隆;酶切鉴定证实Lentivirus-Mash1含有大小正确的正向Mash1cDNA片段。结论:成功建立了小鼠Mash1cDNA克隆并构建了慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1。
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关键词
Mash1
慢病毒表达载体
RT-PCR
基因
暂未订购
远志总皂苷对海马神经干细胞定向分化的作用及对Mash1表达的影响
被引量：
3
2
作者
朱晓峰
戚旬中
+2 位作者
时晶
赵锦程
田金洲
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1193-1196,1202,共5页
目的观察远志总皂苷（TEN）对体外培养海马神经干细胞向胆碱能神经元定向分化的作用，并进一步分析其对神经干细胞Mash1表达的影响。方法分离新生24h内昆明小鼠海马，悬浮培养神经干细胞，取第3代神经干细胞进行分化诱导。实验分4组：...
目的观察远志总皂苷（TEN）对体外培养海马神经干细胞向胆碱能神经元定向分化的作用，并进一步分析其对神经干细胞Mash1表达的影响。方法分离新生24h内昆明小鼠海马，悬浮培养神经干细胞，取第3代神经干细胞进行分化诱导。实验分4组：空白对照组、5mg／LTEN组、20mg／LTEN组、100mg／LTEN组。应用免疫组织化学法检测神经干细胞中神经元特异性烯醇化酶（NSE）及胆碱乙酰转移酶（CHAT）阳性细胞比率；采用RT-PCR半定量法检测各组神经干细胞Mash1的表达。结果免疫组化结果显示：与对照组比较．TEN组神经干细胞向神经元及胆碱能神经元分化的比率明显升高，以20mg／L剂量最明显，差异均有统计学意义（P〈0．05）；20mg／L组Mash1的表达（0．9426±0．07286）亦明显高于对照组（0.7141±0．04016），差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论TEN能够促进体外培养的海马神经干细胞向神经元及胆碱能神经元定向分化，能够促进神经于细胞中Mash1的表达。
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关键词
神经干细胞
胆碱能神经元
远志总皂苷
Mash1
原文传递
Mash1在室管膜前下区神经干细胞向神经元分化中的作用
被引量：
1
3
作者
张治元
杨辉
+3 位作者
刘仕勇
何家全
邱克军
宋业纯
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
2006年第5期471-474,共4页
目的研究Mashl在室管膜前下区(SVZa)神经干细胞向神经元分化中的作用。方法体外分离培养新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞,原位杂交检测Mashl在SVZa神经干细胞的表达;构建Mashl与绿色荧光蛋白(GFP)正义、反义融合蛋白表达质粒,转染SVZa...
目的研究Mashl在室管膜前下区(SVZa)神经干细胞向神经元分化中的作用。方法体外分离培养新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞,原位杂交检测Mashl在SVZa神经干细胞的表达;构建Mashl与绿色荧光蛋白(GFP)正义、反义融合蛋白表达质粒,转染SVZa神经干细胞,GFP活体荧光标记SVZa神经干细胞;采用细胞计数和流式细胞仪检测在Mashl作用下SVZa神经干细胞分化为神经元的比例。结果体外培养的新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞Mashl原位杂交检测阳性;Mashl-GFP+组SVZa神经干细胞分化为神经元的比例明显高于空白对照组;Mashl-GFP-组 SVZa神经干细胞分化为神经元的比例明显低于空白对照组。结论体外培养的新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞表达Mashl;Mashl可以促进SVZa神经干细胞向神经元方向分化。
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关键词
Mash1
室管膜前下区
神经干细胞
分化
小鼠
原文传递
题名
重组Mash1慢病毒表达载体的构建
1
作者
张瑞
许予明
赵国强
郭建新
宋波
张世杰
韩志强
机构
郑州大学第一附属医院神经内科
郑州大学基础医学院微生物与免疫学教研室
郑州大学第一附属医院临床药学部
出处
《神经损伤与功能重建》
2006年第2期105-107,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30570624)
河南省教委杰出人才资助项目
郑州市重大科技攻关项目(03BA02BMYB05)
文摘
目的:克隆小鼠Mash1基因的全长cDNA,构建其慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1,为进一步研究Mash1在神经发育及干细胞神经分化中的作用奠定基础。方法:应用RT-PCR从小鼠13d胚胎中扩增出Mash1cDNA片段,经回收纯化与pGEM-T载体连接并转化感受态细菌J M109,通过蓝白筛选、PCR扩增和双酶切鉴定出阳性菌落,并对其进行基因测序。BamHⅠ和XholⅠ双酶切pGEM-T-Mash1和Lentivirus获得的目的基因双粘片段与Lentivirus双粘线性质粒相连接,转化J M109,酶切方法鉴定重组阳性菌落。结果:PCR扩增、酶切分析及序列测定证实成功获取Mash1cDNA克隆;酶切鉴定证实Lentivirus-Mash1含有大小正确的正向Mash1cDNA片段。结论:成功建立了小鼠Mash1cDNA克隆并构建了慢病毒表达载体Lentivirus-Mash1。
关键词
Mash1
慢病毒表达载体
RT-PCR
基因
Keywords
mashl
lentiviral expression vector
RT-PCR
分类号
R741 [医药卫生—神经病学与精神病学]
暂未订购
题名
远志总皂苷对海马神经干细胞定向分化的作用及对Mash1表达的影响
被引量：
3
2
作者
朱晓峰
戚旬中
时晶
赵锦程
田金洲
机构
北京中医药大学东直门医院老年医学研究所
佳木斯大学神经科学研究所
出处
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第12期1193-1196,1202,共5页
基金
国家重点基础研究发展规划（2003CB51710430170963）：国家自然科学基金（30170963）
文摘
目的观察远志总皂苷（TEN）对体外培养海马神经干细胞向胆碱能神经元定向分化的作用，并进一步分析其对神经干细胞Mash1表达的影响。方法分离新生24h内昆明小鼠海马，悬浮培养神经干细胞，取第3代神经干细胞进行分化诱导。实验分4组：空白对照组、5mg／LTEN组、20mg／LTEN组、100mg／LTEN组。应用免疫组织化学法检测神经干细胞中神经元特异性烯醇化酶（NSE）及胆碱乙酰转移酶（CHAT）阳性细胞比率；采用RT-PCR半定量法检测各组神经干细胞Mash1的表达。结果免疫组化结果显示：与对照组比较．TEN组神经干细胞向神经元及胆碱能神经元分化的比率明显升高，以20mg／L剂量最明显，差异均有统计学意义（P〈0．05）；20mg／L组Mash1的表达（0．9426±0．07286）亦明显高于对照组（0.7141±0．04016），差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论TEN能够促进体外培养的海马神经干细胞向神经元及胆碱能神经元定向分化，能够促进神经于细胞中Mash1的表达。
关键词
神经干细胞
胆碱能神经元
远志总皂苷
Mash1
Keywords
Neural stem cell
Cholinergic neuron
Tenuigenin
mashl
分类号
R686 [医药卫生—骨科学]
原文传递
题名
Mash1在室管膜前下区神经干细胞向神经元分化中的作用
被引量：
1
3
作者
张治元
杨辉
刘仕勇
何家全
邱克军
宋业纯
机构
第三军医大学新桥医院神经外科
出处
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
2006年第5期471-474,共4页
基金
国家自然科学基金重点课题(30130110)
文摘
目的研究Mashl在室管膜前下区(SVZa)神经干细胞向神经元分化中的作用。方法体外分离培养新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞,原位杂交检测Mashl在SVZa神经干细胞的表达;构建Mashl与绿色荧光蛋白(GFP)正义、反义融合蛋白表达质粒,转染SVZa神经干细胞,GFP活体荧光标记SVZa神经干细胞;采用细胞计数和流式细胞仪检测在Mashl作用下SVZa神经干细胞分化为神经元的比例。结果体外培养的新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞Mashl原位杂交检测阳性;Mashl-GFP+组SVZa神经干细胞分化为神经元的比例明显高于空白对照组;Mashl-GFP-组 SVZa神经干细胞分化为神经元的比例明显低于空白对照组。结论体外培养的新生0 d昆明小鼠的SVZa神经干细胞表达Mashl;Mashl可以促进SVZa神经干细胞向神经元方向分化。
关键词
Mash1
室管膜前下区
神经干细胞
分化
小鼠
Keywords
mashl
SVZa
Neural stem cells
Differentiation
Mouse
分类号
Q421 [生物学—神经生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组Mash1慢病毒表达载体的构建
张瑞
许予明
赵国强
郭建新
宋波
张世杰
韩志强
《神经损伤与功能重建》
2006
0
暂未订购
2
远志总皂苷对海马神经干细胞定向分化的作用及对Mash1表达的影响
朱晓峰
戚旬中
时晶
赵锦程
田金洲
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
原文传递
3
Mash1在室管膜前下区神经干细胞向神经元分化中的作用
张治元
杨辉
刘仕勇
何家全
邱克军
宋业纯
《中华神经医学杂志》
CAS
CSCD
2006
1
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
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