manumycin诱导舌鳞癌Tca8113细胞凋亡的作用及机制 被引量：9

1

作者 王葆 梁永钜 +1 位作者 符立梧 许光普 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1104-1111,共8页

目的研究manumycin抑制Tca8113细胞的生长和诱导细胞凋亡的作用及机制。方法细胞毒作用以MTT法测定;凋亡细胞形态以Hoechst33258染色后荧光显微镜观察;凋亡率的检测以AnnexinV染色,流式细胞仪检测;细胞内活性氧(ROS)和线粒体跨膜电位(Δ... 目的研究manumycin抑制Tca8113细胞的生长和诱导细胞凋亡的作用及机制。方法细胞毒作用以MTT法测定;凋亡细胞形态以Hoechst33258染色后荧光显微镜观察;凋亡率的检测以AnnexinV染色,流式细胞仪检测;细胞内活性氧(ROS)和线粒体跨膜电位(ΔΨm)分别用DCFH-DA和DiOC6荧光探针标记,流式细胞仪检测;蛋白质定量检测以Westernblot法。结果manumycin浓度依赖性抑制Tca8113细胞的生长,IC50为(11.33±0.63)μmol.L-1;manumycin可浓度和时间依赖性诱导Tca8113细胞的凋亡,过氧化物清除剂N-乙酰半胱氨酸能清除manumycin介导的细胞活性氧的增加,抑制线粒体跨膜电位降低及细胞凋亡。结论manumycin体外显著抑制舌鳞癌Tca8113的生长及诱导细胞凋亡,其机制可能通过激活线粒体依赖性凋亡通路有关。 展开更多

关键词 manumycin活性氧 N-乙酰半胱氨酸 线粒体膜电位 细胞凋亡 CASPASE

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Manumycin抗人肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤的作用及其对肿瘤血管生成的影响 被引量：2

2

作者 周军民 朱孝峰 +4 位作者 刘宗潮 符立梧 杨小平 梁永钜 潘启超 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期935-939,共5页

背景与目的:法尼基转移酶抑制剂manumycin体内外抗胰腺癌、结肠癌和退行性甲状腺癌的研究已见报道。我们先前的体外研究发现,manumycin能抑制人肝癌HepG2细胞的增殖通路和生存通路。本研究拟探讨manumycin在裸小鼠体内的抗肝癌作用及其... 背景与目的:法尼基转移酶抑制剂manumycin体内外抗胰腺癌、结肠癌和退行性甲状腺癌的研究已见报道。我们先前的体外研究发现,manumycin能抑制人肝癌HepG2细胞的增殖通路和生存通路。本研究拟探讨manumycin在裸小鼠体内的抗肝癌作用及其对肿瘤的血管生成的影响。方法:建立人肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤模型,接种后第8天按肿瘤大小随机分为5组:生理盐水对照组(20ml/kg)、阳性药对照组(CTX,25mg/kg)、0.1%Me2SO阴性对照组(20ml/kg)、manumycin低剂量组(2.5mg/kg)和高剂量组(5mg/kg)。测量各组肿瘤体积观察manumycin的体内抗瘤作用。采用免疫组化方法观察移植瘤的微血管密度(MVD),应用Westernblot法检测VEGF和b鄄FGF的蛋白水平变化,RT鄄PCR法检测VEGFmRNA的水平。结果:manumycin低剂量组和高剂量组的平均肿瘤体积比(V/V0)分别为0.68±0.09和0.59±0.04(n=5),与0.1%Me2SO阴性对照组(V/V0为1.38±0.21)相比,manumycin处理组肿瘤体积明显缩小(P<0.01)。与对照组相比较,manumycin处理组肿瘤组织MVD明显降低(P<0.01)。manumycin能明显抑制HepG2细胞及HepG2细胞裸鼠移植瘤VEGF蛋白的表达,而对b鄄FGF蛋白的表达影响不大。manumycin也明显抑制了HepG2细胞裸小鼠移植瘤VEGFmRNA的表达。结论:manumycin能明显抑制人肝癌HepG2细胞裸小鼠移植瘤的生长。下调VEGF表达,抑制肿瘤的血管生成可能是manumycin抗肿瘤作用的重要机理之一。 展开更多

关键词 肝癌细胞 移植瘤 manumycin/拮抗剂和抑制剂 药理学 VEGF 抑制血管生成/化学诱导 小鼠

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Manumycin通过诱导细胞凋亡抑制人胰腺导管癌细胞Panc-1活性 被引量：1

3

作者 杨惠玲 陶祥 +1 位作者 杨林 郑芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1888-1891,共4页

目的:观察manumycin对人胰腺导管癌细胞Panc-1的抑制效应,并探讨其诱导细胞凋亡是否经 p38MAPK介导。方法:用MTT法检测manumycin对Panc-1细胞的抑癌作用。用caspase-3活性检测试剂盒定量检测 manumycin诱导细胞凋亡的水平及评估特异性的... 目的:观察manumycin对人胰腺导管癌细胞Panc-1的抑制效应,并探讨其诱导细胞凋亡是否经 p38MAPK介导。方法:用MTT法检测manumycin对Panc-1细胞的抑癌作用。用caspase-3活性检测试剂盒定量检测 manumycin诱导细胞凋亡的水平及评估特异性的p38MAPK抑制剂SB203580对它的影响。结果:经manumycin (6／μmol／L、18／μmol／L、54 μmol／L)处理Panc-1细胞24 h,对Panc-1细胞生长具有明显的抑制作用,其抑制率分别为 8．9％、21．9％和67．0％,其中后二者的细胞活性与对照组相比有显著差异(P<0．01),呈量效关系。用药24 h的IC50 为34．7μmol／L。同时,此药物可明显增加caspase-3的活性,且这一效应可部分地被p38抑制剂SB203580阻断。结 论:Manumycin可通过诱导Panc-1细胞凋亡而产生抑癌作用,p38MAPK是manumycin诱导细胞凋亡的通路之一。 展开更多

关键词 manumycin 胰腺导管癌 细胞凋亡 P38MAP激酶

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Manumycin与DDP、PYM、5-FU、ADR联合的体外抗舌癌作用 被引量：1

4

作者 王葆 梁永钜 +1 位作者 符立梧 许光普 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第15期867-870,共4页

目的:探讨Manumycin(手霉素)与常用舌癌化疗药物顺铂、5-氟脲嘧啶、平阳霉素、阿霉素联合作用于舌鳞癌Tca8113的细胞毒作用。方法:细胞毒测定以MTT法;单药细胞毒测定以半倍浓度梯度设计;联合用药细胞毒测定以ChouTC中效原理设计。结果:M... 目的:探讨Manumycin(手霉素)与常用舌癌化疗药物顺铂、5-氟脲嘧啶、平阳霉素、阿霉素联合作用于舌鳞癌Tca8113的细胞毒作用。方法:细胞毒测定以MTT法;单药细胞毒测定以半倍浓度梯度设计;联合用药细胞毒测定以ChouTC中效原理设计。结果:Manumycin以及顺铂、5-氟脲嘧啶、平阳霉素、阿霉素单独应用对Tca8113均有明显的细胞毒作用。联合用药显示在相应比例剂量条件下,Manumycin与顺铂联合(3.75:1)后呈拮抗作用,Manumycin与5-氟脲嘧啶联合(0.75:1)作用后,低浓度联合相互拮抗,而高浓度联合时明显协同,Manumycin与平阳霉素(0.75:1)、阿霉素联合(30:1)作用后呈相互协同的作用(CI<1)。结论:Manumycin与平阳霉素、阿霉素以及与5-氟脲嘧啶高浓度联合作用于Tca8113细胞呈相互协同的细胞毒作用。 展开更多

关键词 manumycin 联合用药 舌癌

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Manumycin对白血病细胞生长及survivin基因表达的影响

5

作者 汪茗 戚之琳 +1 位作者 谢向荣 毕富勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期366-367,共2页

目的:观察不同浓度的Manumycin对白血病K562细胞生长及survivin基因表达的影响,初步探讨其诱导细胞凋亡的分子机制。方法:体外培养K562细胞,采用不同浓度的Manumycin(0、0.5、1、2、4、8μmol/L)掺入细胞,作用48h后采用MTT法检测细胞增... 目的:观察不同浓度的Manumycin对白血病K562细胞生长及survivin基因表达的影响,初步探讨其诱导细胞凋亡的分子机制。方法:体外培养K562细胞,采用不同浓度的Manumycin(0、0.5、1、2、4、8μmol/L)掺入细胞,作用48h后采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测凋亡率,RT-PCR检测细胞中survivinmRNA表达。结果:MTT法显示,1～8μmol/L组对K562细胞具有明显的增殖抑制作用。流式细胞术结果显示,1～8μmol/L组均可诱导细胞凋亡(P<0.01)。RT-PCR结果显示1～8μmol/L组细胞的survivinmRNA水平明显低于空白对照组(P<0.01)。结论:Manumycin可有效抑制K562细胞的增殖,诱导其凋亡,分子机制可能与下调survivin的表达有关。 展开更多

关键词 白血病 manumycin K562细胞 细胞凋亡 SURVIVIN

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法尼基转移酶抑制剂Manumycin诱导HepG2细胞凋亡的研究 被引量：1

6

作者 周军民 潘启超 +4 位作者 杨小平 刘宗潮 廖端芳 符立梧 梁永钜 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1237-1240,共4页

目的:研究法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤作用,并探讨其诱导凋亡的分子机制。方法:采用MTT(Methythiazolyltetrazolium)法观察法尼基转移酶抑制剂Manumycin对肝癌细胞株HepG2细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜、DN... 目的:研究法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞的抗肿瘤作用,并探讨其诱导凋亡的分子机制。方法:采用MTT(Methythiazolyltetrazolium)法观察法尼基转移酶抑制剂Manumycin对肝癌细胞株HepG2细胞增殖的抑制作用,荧光显微镜、DNA凝胶电泳、流式细胞术等技术检测细胞凋亡,应用Westernblot方法检测bcl-2、p53、bax的蛋白水平变化。结果:法尼基转移酶抑制剂Manumycin能明显抑制HepG2细胞的生长且呈浓度依赖性,其IC50为(17.65±0.58)μmol/L。荧光显微镜检查显示Manumycin处理的HepG2细胞DAPI染色后,细胞核内可见浓染致密的颗粒荧光,典型细胞可见新月型改变,固缩或片段化的核。DNA凝胶电泳可见典型的DNA梯形带。流式细胞DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”,细胞凋亡与Manumycin作用的时间和浓度相关。Manumycin能时间依赖性地诱导HepG2细胞发生G2/M期阻滞。Manumycin处理HepG2细胞后,Westernblot检测结果显示p53蛋白表达明显增加,而bcl-2蛋白和bax蛋白表达无明显变化。结论:法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌细胞株HepG2有强烈的细胞毒作用,其分子机制可能是诱导HepG2细胞凋亡。Manumycin诱导HepG2细胞凋亡与bcl-2蛋白和bax蛋白表达水平无关。 展开更多

关键词 manumycin 细胞凋亡 肝癌

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Manumycin的2D NMR研究 被引量：1

7

作者 郭栋 李勤 +1 位作者 蒋高喜 崔育新 《波谱学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期387-392,共6页

应用 1DNMR和梯度 2DNMR技术 ( gCOSY ,gNOESY ,gHSQC ,gHMBC)深入研究了从链霉菌发酵物中分离提取得到的Manumycin的结构 ,并对其1 H和1 3CNMR化学位移进行了全归属 .

关键词 核磁共振 manumycin结构 链霉菌发酵物 计算机分子模拟 梯度场 碳氢信号全归属

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Manumycin对人肝癌HepG2细胞的生长抑制作用与Ras通路的关系 被引量：8

8

作者 周军民 潘启超 +4 位作者 杨小平 刘宗潮 廖端芳 符立梧 梁永钜 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期364-368,共5页

背景与目的:目前肝癌药物治疗的临床疗效还不尽人意。在肝癌的发生发展过程中,Ras起着重要的作用。Ras必须在法尼基转移酶的作用下,经过法尼基化修饰才具有生物活性。我们观察了法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞株生长的... 背景与目的:目前肝癌药物治疗的临床疗效还不尽人意。在肝癌的发生发展过程中,Ras起着重要的作用。Ras必须在法尼基转移酶的作用下,经过法尼基化修饰才具有生物活性。我们观察了法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞株生长的抑制作用,并探讨其对Ras通路的影响。方法:应用氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入实验观察法尼基转移酶抑制剂Manumycin对人肝癌HepG2细胞株生长的抑制作用,Westernblot技术检测Manumycin对HepG2细胞Ras通路相关蛋白,包括pan-Ras、N-Ras、membrane-pan-Ras、ERK1/2、p-ERK1/2、AKT、p-AKT及MKP-1表达的影响。结果:Manumycin(5、10、20、40、80μmol/L)处理24h对肝癌HepG2细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,其IC50为(17.1±2.6)μmol/L。同时Westernblot分析显示,Manumycin对肝癌HepG2细胞pan-Ras蛋白和N-Ras蛋白及细胞膜pan-Ras蛋白表达均有抑制作用,且对细胞膜pan-Ras蛋白的抑制作用更明显。进一步研究发现Manumycin对Ras蛋白下游ERK1/2和AKT活性也有抑制作用,表现为ERK1/2和AKT磷酸化水平降低。Manumycin对AKT活性的影响与PI3K抑制剂Wortmannin作用相似,两者联用可加强对AKT的抑制。此外,Manumycin诱导MKP-1的表达具有浓度依赖性。 展开更多

关键词 Manunycin 蛋白磷酸化 信号转导 肝癌 HEPG2细胞 Ras通路

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Manumycin诱导细胞凋亡抑制乳腺癌细胞SK-BR-3活性 被引量：4

9

作者 陶祥 杨惠玲 +1 位作者 杨林 郑芹 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2311-2315,共5页

目的研究manumycin对乳腺癌腹腔转移癌细胞株SK-BR-3的抑癌效应及其诱导凋亡。方法用MTT法检测manumycin对SK-BR-3细胞的抑癌作用。免疫印迹方法检测p38MAPK蛋白表达。用caspase-3活性检测试剂盒定量检测manumycin诱导细胞凋亡的水平及... 目的研究manumycin对乳腺癌腹腔转移癌细胞株SK-BR-3的抑癌效应及其诱导凋亡。方法用MTT法检测manumycin对SK-BR-3细胞的抑癌作用。免疫印迹方法检测p38MAPK蛋白表达。用caspase-3活性检测试剂盒定量检测manumycin诱导细胞凋亡的水平及评估特异性的p38MAPK抑制剂SB203580对凋亡的影响。结果经6μmol/L、18μmol/L、54μmol/Lmanumycin处理SK-BR-3细胞24h时,其抑制率分别为(74±39)%、(210±44)%和(647±41)%,呈量效关系。其中后2者的细胞活性与对照组比有显著差异(P<001)。用药24h的IC50为425μmol/L。同时此药物可明显增加caspase-3的活性,且这一效应可部分地被p38抑制剂SB203580阻断。免疫印迹结果显示manumycin促进p38的磷酸化。结论manumycin可通过诱导SK-BR-3细胞凋亡而产生抑癌作用,p38MAPK是manumycin诱导细胞凋亡的通路之一。 展开更多

关键词 Manunmycin P38MAP激酶 乳房肿瘤 细胞凋亡

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手霉素抗肿瘤作用的研究现状

10

作者 高会霞 袁文芳 刘玉珍 《河北医药》 CAS 2006年第7期642-644,共3页

关键词 抗肿瘤作用 霉素 manumycin 相关化合物 临床前研究 光谱数据 理化性质 结构特征 研究发现 培养液

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氧化还原状态的改变控制手霉素诱导HL-60白血病细胞凋亡 被引量：7

11

作者 佘妙容 郭坤元 +2 位作者 牛新清 卢晓珣 涂三芳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期772-777,共6页

目的研究手霉素对HL-60白血病细胞的作用,探讨其作用机制,主要是线粒体的改变。方法使用人的白血病细胞株HL-60细胞。MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用Annexin V和一氧化氮(nitric oxide,NO)染料标记细胞,应用流式细胞仪术... 目的研究手霉素对HL-60白血病细胞的作用,探讨其作用机制,主要是线粒体的改变。方法使用人的白血病细胞株HL-60细胞。MTT细胞毒性测定评价对白血病细胞的作用,使用Annexin V和一氧化氮(nitric oxide,NO)染料标记细胞,应用流式细胞仪术检测细胞内NO生成和细胞凋亡。细胞内超氧阴离子通过二氢乙啶(dihydroethidium,DHE)测定。应用化学发光法测定超氧歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。采用荧光法测定谷胱甘肽(glutathi-one,GSH),萤光素-萤光素酶发光法测定ATP含量。免疫印迹技术检测细胞色素C和Mn-SOD的表达。结果手霉素引起HL-60细胞活性的下降,且呈剂量依赖性。手霉素诱导产生反应性氧基(reactive oxygen species,ROS):NO和超氧阴离子,降低GSH,但不影响SOD。手霉素诱导线粒体降低细胞ATP的含量,线粒体肿胀和细胞色素C从线粒体释放到细胞质。手霉素诱导的凋亡与ROS的增加有关。用N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)抑制ROS可保护HL-60细胞逃避手霉素的细胞毒作用和避免手霉素诱导的凋亡。结论细胞内ROS的产生对手霉素的细胞毒作用起非常重要的作用。手霉素通过包括上游ROS产生,线粒体形态改变和细胞色素C释放的线粒体途径,诱导白血病细胞凋亡。 展开更多

关键词 白血病 凋亡 手霉素 反应性氧基 一氧化氮 超氧 阴离子 线粒体 超氧歧化酶

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手霉素对人卵巢癌3AO细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3

12

作者 张正茂 顾来梅 +5 位作者 刘洁 张超 张风华 康山 单保恩 王士杰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期651-655,共5页

目的:探讨手霉素对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:MTT法检测手霉素对3AO细胞的增殖抑制作用;Giemsa染色、透射电子显微镜下观察及FCM分析手霉素对3AO细胞的凋亡诱导作用;FCM检测手霉素对3AO细胞ras、sur... 目的:探讨手霉素对人卵巢癌3AO细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:MTT法检测手霉素对3AO细胞的增殖抑制作用;Giemsa染色、透射电子显微镜下观察及FCM分析手霉素对3AO细胞的凋亡诱导作用;FCM检测手霉素对3AO细胞ras、survivin和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)(p65)蛋白表达的影响。结果:手霉素能显著抑制3AO细胞的增殖(P<0.05),并且这种抑制作用随着手霉素浓度的增加和作用时间的延长而增强。Giemsa染色和透射电子显微镜下观察发现,手霉素可诱导3AO细胞出现典型的凋亡形态学变化及超微结构改变。FCM分析结果显示,与对照组相比,手霉素诱导3AO细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞周期中的G2/M期细胞也明显增加(P<0.05);3AO细胞的ras、NF-κB(p65)和survivin蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。结论:手霉素可明显抑制人卵巢癌3AO细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调细胞ras、NF-κB(p65)和survivin蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 基因表达 细胞凋亡 手霉素 细胞 3AO

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手霉素联合顺铂对人卵巢癌细胞3AO的增殖抑制作用 被引量：2

13

作者 张正茂 兰静 +8 位作者 杨雪梅 顾来梅 刘洁 张超 张风华 范玉香 康山 单保恩 王士杰 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期210-216,共7页

目的:研究手霉素联合顺铂对人卵巢癌细胞3AO体外增殖及裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其机制。方法:MTT法检测手霉素及手霉素联合顺铂对3AO细胞的体外增殖抑制作用;建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,采用免疫组织化学SP法检测手霉素及手霉... 目的:研究手霉素联合顺铂对人卵巢癌细胞3AO体外增殖及裸鼠移植瘤生长的抑制作用,并探讨其机制。方法:MTT法检测手霉素及手霉素联合顺铂对3AO细胞的体外增殖抑制作用;建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,采用免疫组织化学SP法检测手霉素及手霉素联合顺铂对移植瘤组织survivin、NF-κB、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和caspase-3蛋白的表达,FCM检测移植瘤细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果:手霉素对3AO细胞的增殖有明显抑制作用,且呈时间和剂量依赖效应(P<0.05)。手霉素可增强顺铂对3AO细胞的增殖抑制作用,随着手霉素浓度的增加(10～40 μmol/L),对3AO细胞的增殖抑制作用增强。手霉素或顺铂单药组以及联合用药组的裸鼠移植瘤体积均明显小于对照组,其中联合用药组裸鼠移植瘤体积明显小于手霉素或顺铂单药组(P<0.05)。各给药组裸鼠移植瘤组织中survivin、NF-κB和VEGF蛋白的表达水平均低于对照组(P<0.05),其中联合用药组又明显低于各单药组(P<0.05);各给药组caspase-3蛋白的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。手霉素单药组、顺铂单药组和手霉素联合顺铂组的细胞凋亡率依次升高,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,G0/G1期细胞依次减少(P<0.05),G2/M期细胞依次增多(P<0.05),S期细胞变化不明显。结论:手霉素联合顺铂可明显抑制3AO细胞的体内外增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调survivin、NF-κB和VEGF以及上调caspase-3蛋白的表达有关。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 手霉素 顺铂 细胞凋亡 SURVIVIN NF-κB 血管内皮生长因子 CASPASE-3

原文传递

甲氧胺联合手霉素对白血病U937细胞凋亡的影响 被引量：2

14

作者 佘妙容 郭坤元 +1 位作者 牛新清 卢晓珣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期835-839,共5页

背景与目的:DNA损伤修复对细胞生存很重要。我们既往的研究发现手霉素可诱导肿瘤细胞出现DNA损害反应。因此,碱基切除修复抑制剂甲氧胺(methoxyamine)有可能增强手霉素(manumycin)的抗肿瘤作用。为此,本实验研究甲氧胺对手霉素诱导白血... 背景与目的:DNA损伤修复对细胞生存很重要。我们既往的研究发现手霉素可诱导肿瘤细胞出现DNA损害反应。因此,碱基切除修复抑制剂甲氧胺(methoxyamine)有可能增强手霉素(manumycin)的抗肿瘤作用。为此,本实验研究甲氧胺对手霉素诱导白血病细胞凋亡的影响,探讨联合甲氧胺和手霉素诱导白血病细胞凋亡过程中线粒体凋亡途径的变化。方法:不同浓度手霉素和甲氧胺处理U937细胞48h后,MTT细胞毒性测定U937细胞存活率,软琼脂法检测细胞的克隆形成。应用流式细胞术检测细胞凋亡。免疫印迹技术检测细胞色素C、Caspase-9、聚腺苷核糖聚合酶(poly-adenosyl ribose polymerase,PARP)的表达。中位效应方法评价两药的相互作用。结果:甲氧胺使手霉素的剂量反应曲线向左边移动,结合指数(CI)<1(P<0.05)。1μmol/L手霉素、5mmol/L甲氧胺和联合两药处理U937细胞,相对于对照组的克隆形成分别是0.3641±0.0463,0.7541±0.0379,0.0473±0.0024(联合用药组与对照组、手霉素组或甲氧胺组相比,P<0.05);进一步发现,联合两药协同诱导细胞凋亡,引起Annexin V荧光值增加,阳性细胞增加,分别是(2.34±0.30)%、(8.80±0.95)%、(2.21±0.19)%、(13.37±0.91)%,联合用药组与对照组、手霉素组或甲氧胺组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。联合甲氧胺和手霉素增强细胞色素C从线粒体释放到细胞浆,Caspase-9激活,PARP特异性裂解。结论:甲氧胺增强手霉素通过线粒体凋亡途径诱导U937细胞凋亡,提示甲氧胺联合FTIs和DNA修复抑制剂治疗白血病的可能性。 展开更多

关键词 白血病 法尼基转移酶抑制剂 甲氧胺 手霉素 碱基切除修复抑制剂 U937细胞 凋亡

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手霉素通过上调P53诱导22Rv1前列腺癌细胞凋亡 被引量：2

15

作者 李劲高 陈景 佘妙容 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期1812-1815,共4页

目的探讨手霉素对前列腺癌(prostate cancer,PC)细胞株22Rv1细胞的作用及其机制。方法使用MTT细胞毒性测定法评价人22Rv1细胞的活性,使用Annexin v和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染料标记细胞,应用流式细胞术检测细胞凋亡。采用免疫... 目的探讨手霉素对前列腺癌(prostate cancer,PC)细胞株22Rv1细胞的作用及其机制。方法使用MTT细胞毒性测定法评价人22Rv1细胞的活性,使用Annexin v和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)染料标记细胞,应用流式细胞术检测细胞凋亡。采用免疫印迹技术检测Caspase-3、H2AX和P53蛋白的表达。结果手霉素有效杀伤前列腺癌22Rv1细胞,随着手霉素剂量的增加,细胞活性逐渐下降。手霉素能诱导22Rv1细胞凋亡,早期凋亡率和晚期凋亡率均增加。手霉素通过caspase途径有效诱导22Rv1细胞凋亡。同时手霉素快速增加22Rv1细胞H2AX磷酸化和上调P53的表达。结论手霉素通过上调P53的表达和激活H2AX诱导前列腺癌细胞凋亡,杀伤前列腺癌细胞。 展开更多

关键词 前列腺癌 凋亡 手霉素 H2AX P53

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手性霉素联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂对人卵巢癌细胞的抑制作用 被引量：1

16

作者 任源 查晓 张国楠 《四川肿瘤防治》 2007年第1期13-15,18,共4页

目的:研究手性霉素(Manumycin)联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂(LY294002)对人卵巢癌细胞株的抑制作用,为临床治疗中晚期妇科肿瘤提供实验资料。方法:Manumycin和LY294002分别及联合在不同药物浓度下作用于人卵巢癌细胞株HO8910PM和OVCAR-3,... 目的:研究手性霉素(Manumycin)联合磷脂酰肌醇-3激酶抑制剂(LY294002)对人卵巢癌细胞株的抑制作用,为临床治疗中晚期妇科肿瘤提供实验资料。方法:Manumycin和LY294002分别及联合在不同药物浓度下作用于人卵巢癌细胞株HO8910PM和OVCAR-3,用MTT法评价其抑癌效果。结果:Manumycin单独使用,对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为70.3μM/L和59.8μM/L;LY294002单独使用,对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为76.7μM/L和26.5μM/L;Manumycin与LY294002联用(固定LY294002浓度),对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为68.5μM/L和32.9μM/L,LY294002与Manumycin联用(固定Manumycin浓度),对HO8910PM和OVCAR-3的IC50分别为65.0μM/L和13.6μM/L。结论:Manumycin和LY294002对人卵巢癌细胞株均有抑制作用,与单独用药相比,二者联用有显著增效作用。 展开更多

关键词 手性霉素 磷脂酰肌醇-3激酶 卵巢癌 细胞

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手霉素对白血病干细胞和骨髓干细胞的细胞毒作用

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作者 姜振宇 马宁 +1 位作者 张彦东 姚程 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2257-2258,共2页

目的探讨手霉素对白血病干细胞(LSC)的细胞毒作用。方法采用MTT法检测手霉素对LSC的细胞增殖抑制作用,采用Annex-inⅤ-FITC法检测LSC细胞凋亡情况并采用流式细胞术分析细胞周期。结果随着手霉素浓度的增高,LSC细胞增生抑制率明显增高,... 目的探讨手霉素对白血病干细胞(LSC)的细胞毒作用。方法采用MTT法检测手霉素对LSC的细胞增殖抑制作用,采用Annex-inⅤ-FITC法检测LSC细胞凋亡情况并采用流式细胞术分析细胞周期。结果随着手霉素浓度的增高,LSC细胞增生抑制率明显增高,细胞凋亡率也逐渐增高,且阻滞于G2/M期的细胞比率明显增加。结论手霉素通过阻滞LSC于G2/M期,促进凋亡而抑制其增长,而对正常造血干细胞(HSC)无细胞毒作用。 展开更多

关键词 法尼基转移酶抑制剂 手霉素 白血病干细胞 细胞增生 细胞凋亡

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手霉素对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响

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作者 艾军 赵洪源 +2 位作者 李巧霞 张超 单保恩 《癌变·畸变·突变》 CAS CSCD 2012年第4期249-252,共4页

目的:探讨手霉素对食管癌细胞Eca109体外增殖活性的影响及其作用机制。方法:用不同浓度的手霉素(10、20、40、80、120μmol/L)处理Eca109细胞24、48和72 h后,采用MTT方法测定肿瘤细胞生长抑制率;吉姆萨染色和透射电镜技术观察手霉素对... 目的:探讨手霉素对食管癌细胞Eca109体外增殖活性的影响及其作用机制。方法:用不同浓度的手霉素(10、20、40、80、120μmol/L)处理Eca109细胞24、48和72 h后,采用MTT方法测定肿瘤细胞生长抑制率;吉姆萨染色和透射电镜技术观察手霉素对食管癌细胞Eca109形态变化的影响;流式细胞分析技术检测手霉素对Eca109细胞周期和凋亡的影响。结果:不同浓度的手霉素对Eca109细胞增殖均有明显的抑制作用,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);Giemsa染色及透射电镜结果显示手霉素诱导Eca109细胞出现较典型的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变;流式细胞分析结果显示,10、20、40、80和120μmol/L的手霉素作用Eca109细胞48 h后的细胞凋亡率分别为4.520%±1.035%、14.490%±1.707%、28.883%±4.299%、35.107%±2.276%、47.940%±8.126%,与对照组凋亡率(1.370%±0.028%)相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);且凋亡率呈明显的剂量依赖关系;而细胞周期分布显示G2/M期细胞显著增多。结论:手霉素体外可显著抑制人食管癌细胞Eca109增殖,诱导细胞凋亡可能是其重要途径。 展开更多

关键词 手霉素 食管癌 细胞增殖 细胞凋亡

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手霉素对甲状腺癌KAT-18细胞的作用及其机制

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作者 李劲高 黄晖婷 +2 位作者 李倩 宛霞 佘妙容 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第15期2426-2429,共4页

目的:探讨手霉素对甲状腺未分化癌KAT-18细胞株的作用及其机制。方法:使用SRB细胞毒性测定法评价KAT-18细胞的活性,使用Annexin v和一氧化氮(NO)染料标记细胞,应用流式细胞术检测细胞内NO生成和细胞凋亡,二氢乙啶(DHE)方法测定细胞内超... 目的:探讨手霉素对甲状腺未分化癌KAT-18细胞株的作用及其机制。方法:使用SRB细胞毒性测定法评价KAT-18细胞的活性,使用Annexin v和一氧化氮(NO)染料标记细胞,应用流式细胞术检测细胞内NO生成和细胞凋亡,二氢乙啶(DHE)方法测定细胞内超氧阴离子。应用化学发光法测定超氧歧化酶(SOD)活性,Mn-SOD的表达采用免疫印迹技术检测。谷胱甘肽(GSH)含量采用荧光法测定。结果:手霉素有效杀伤KAT-18细胞,随着手霉素剂量的增加,细胞活性逐渐下降。手霉素诱导产生NO和超氧阴离子,降低GSH,但不影响Mn-SOD的蛋白表达和6 h的SOD活性,但24 h的SOD活性代偿性增加。手霉素诱导的凋亡与NO和超氧阴离子增加及GSH下降有关。用N-乙酰基-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)抑制NO和超氧阴离子产生,提高GSH可减少手霉素诱导KAT-18细胞凋亡,从而逃避细胞被手霉素杀伤。结论:手霉素通过细胞内NO和超氧阴离子的产生诱导甲状腺癌细胞凋亡,杀伤甲状腺癌细胞。 展开更多

关键词 甲状腺未分化癌 手霉素 凋亡 反应性氧基 谷胱甘肽 超氧歧化酶

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手霉素抗肿瘤及诱导细胞凋亡作用的实验研究

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作者 高会霞 袁文芳 +3 位作者 刘玉珍 程丽荣 张静 单保恩 《河北医药》 CAS 2006年第8期667-669,共3页

目的研究手霉素(manumycin)的体外抗肿瘤及其诱导肿瘤细胞凋亡的作用,初步探讨手霉素抗肿瘤作用机制,为将来这种新型药物的抗肿瘤作用开发提供理论基础和临床应用提供试验依据。方法MTT法检测药效动力学特征;采用Gimsa染色技术、透射电... 目的研究手霉素(manumycin)的体外抗肿瘤及其诱导肿瘤细胞凋亡的作用,初步探讨手霉素抗肿瘤作用机制,为将来这种新型药物的抗肿瘤作用开发提供理论基础和临床应用提供试验依据。方法MTT法检测药效动力学特征;采用Gimsa染色技术、透射电镜技术、流式细胞技术、DNA提取及琼脂糖凝胶电泳技术测定和观察癌细胞凋亡的情况;流式细胞技术检测凋亡相关基因bcl-2、bax表达水平。结果手霉素抑制细胞生长呈时效和量效关系;Gimsa染色、透射电镜结果显示手霉素诱导人乳腺癌细胞株MCF-7出现较典型的细胞凋亡形态学变化及超微结构改变;流式细胞分析的DNA直方图上可见G1期峰出现细胞凋亡峰亚G1期峰,乳腺癌细胞的周期也发生了改变,多数细胞被阻滞在G2/M期;琼脂糖凝胶电泳可观察到具有凋亡特征的梯形条带;流式细胞仪分析的实验结果显示手霉素作用MCF-7细胞前后bcl-2和bax蛋白表达水平无明显改变。结论(1)手霉素体外具有很强的抗肿瘤作用,可以抑制多种细胞增殖。(2)诱导肿瘤细胞凋亡是手霉素发挥抗肿瘤作用的一条重要途径。经手霉素作用后,肿瘤细胞bcl-2和bax蛋白表达水平无明显变化,手霉素诱导肿瘤细胞凋亡作用并非通过调控bcl-2和bax的表达水平实现。 展开更多

关键词 手霉素 抗肿瘤作用 MTT法 细胞凋亡 流式细胞仪 bcl-2 BAX 人乳腺癌细胞株MCF-7

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