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Selection of Immunogenic Peptide Mimics of Male Worm Origin of Schistosoma Japonicum using Phage Display Peptide Library
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作者 陈欲晓 易新元 +4 位作者 曾宪芳 王林纤 唐连飞 章洁 Mcreynolds Larry 《Journal of Microbiology and Immunology》 2004年第1期66-69,共4页
To select the immunogenic short peptide mimics of male worm origin of Schistosoma japonicum (Sj) and to explore their protection effect against schistosomiasis in mice, the random phage display peptide library of 12-m... To select the immunogenic short peptide mimics of male worm origin of Schistosoma japonicum (Sj) and to explore their protection effect against schistosomiasis in mice, the random phage display peptide library of 12-mer was screened with IgG to soluble male worm antigen of Sj, and the specific positive clones selected through three rounds of screenings were detected by Dot-ELISA, and then injected subcutaneously into mice for vaccination and protection assessment against Sj. It was found that 18 randomly picked phage displayed clones all showed definite antigenicity with various intensities. The pooled phages displayed clones could induce production of specific antibodies and cause 31.72% of worm reduction rate and 51.54% of egg reduction rate in mice, revealing a significant difference (P<0.001) in comparison with those of the controls. It concludes that the short peptide mimics of male worm origin of Sj obtained by affinity screening phage display peptide library can elicit partial protection against this pathogen. 展开更多
关键词 Schistosoma japonicum male worm Short peptide mimic Phage peptide library Screening
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Isolation and Characterization of 44.6 kDa Protein from Schistosoma japonicum Male Worm
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作者 陈欲晓 易新元 +3 位作者 曾宪芳 袁仕善 张顺科 Larry MCREYNOLDS 《Journal of Microbiology and Immunology》 2004年第2期136-139,共4页
Soluble male worm antigen of Schistosoma japonicum ( Sj ) was investigated for development of new vaccine candidate. SDS-PAGE and Western blotting were performed to compare the difference between soluble antigens from... Soluble male worm antigen of Schistosoma japonicum ( Sj ) was investigated for development of new vaccine candidate. SDS-PAGE and Western blotting were performed to compare the difference between soluble antigens from worms of different sex. Mice vaccination with the testing purified protein was followed by Sj cercariae challenge to detect the protective effect against Sj . Sixteen bands were seen for the soluble male worm antigen and 12 for the female worm. In addition, a distinct band of 44.6 kDa from the male worm antigen was observed, and its antigenicity was demonstrated by Western blotting. This 44.6 kDa protein could induce significant worm and egg reduction rate in mice (39.31%, 41.98%, P <0.001). In this study a 44.6 kDa protein was isolated and partially characterized. Its antigenicity, immunogenicity and the partial immune protection suggest its potential vaccine candidte against Sj . 展开更多
关键词 Schistosoma japonicum male adult worm ANTIGENICITY
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日本血吸虫雌雄成虫可溶性蛋白组分的双向电泳分析 被引量:10
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作者 吴忠道 冯明钊 +3 位作者 徐劲 孟玮 阮志燕 余新炳 《热带医学杂志》 CAS 2001年第2期120-122,共3页
目的 分析日本血吸虫雌雄成虫可溶性蛋白组分。方法 双向电泳法。结果 用双向电泳分析雌雄虫体多肽斑点分别有 310个和 2 90个 ,匹配的蛋白点为 5 1个。日本血吸虫雌雄成虫可溶性蛋白中存在一些共同多肽斑点 ,但不同的多肽斑点较多... 目的 分析日本血吸虫雌雄成虫可溶性蛋白组分。方法 双向电泳法。结果 用双向电泳分析雌雄虫体多肽斑点分别有 310个和 2 90个 ,匹配的蛋白点为 5 1个。日本血吸虫雌雄成虫可溶性蛋白中存在一些共同多肽斑点 ,但不同的多肽斑点较多。结论 日本血吸虫雌雄成虫可溶性蛋白组分存在较大差异 ,值得进一步研究。 展开更多
关键词 双向电泳 日本血吸虫 雌虫 雄虫 蛋白质
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从“毒”、“虫”论治少弱精子症 被引量:10
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作者 焦招柱 郑燕飞 +5 位作者 王停 孙冉冉 许璇璇 周开林 张秀平 王琦 《云南中医学院学报》 2014年第6期70-73,共4页
在少弱精子症的诊断治疗上,毒(辐射、高温、化学药品、重金属等)、虫(性传播疾病、微生物感染等)致病因素的影响愈加凸显。从"毒"、"虫"形成论、致病论、可调论三方面论述该病机的发生发展及治疗措施,为少弱精子症... 在少弱精子症的诊断治疗上,毒(辐射、高温、化学药品、重金属等)、虫(性传播疾病、微生物感染等)致病因素的影响愈加凸显。从"毒"、"虫"形成论、致病论、可调论三方面论述该病机的发生发展及治疗措施,为少弱精子症的辨证求因提供新的思路以提高临床疗效。 展开更多
关键词 少弱精子症 男性不育 黄精赞育胶囊
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日本血吸虫抗原的表位模拟肽筛选及免疫保护性 被引量:1
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作者 陈欲晓 易新元 +3 位作者 曾宪芳 袁仕善 张顺科 MCREYNOLDS Larry 《中国热带医学》 CAS 2004年第1期1-3,共3页
目的 筛选日本血吸虫雄虫抗原的表位模拟肽 ,并探讨其诱导小鼠抗日本血吸虫的免疫保护性。 方法 用日本血吸虫可溶性雄虫抗原的IgG对噬菌体随机 1 2肽库进行亲和筛选。 3轮筛选后 ,经Dot-ELISA检测获得阳性噬菌体克隆 ,并用混合特异... 目的 筛选日本血吸虫雄虫抗原的表位模拟肽 ,并探讨其诱导小鼠抗日本血吸虫的免疫保护性。 方法 用日本血吸虫可溶性雄虫抗原的IgG对噬菌体随机 1 2肽库进行亲和筛选。 3轮筛选后 ,经Dot-ELISA检测获得阳性噬菌体克隆 ,并用混合特异性噬菌体克隆免疫小鼠及进行抗日本血吸虫免疫保护性分析。 结果  1 8个特异性噬菌体克隆均显示有抗原性 ,其噬菌体混合克隆免疫诱导小鼠产生了特异性抗体 ,以及 31 72 %的减虫率和 51 54%的减卵率 ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 0 1 )。 结论 筛选噬菌体肽库获得的日本血吸虫可溶性雄虫抗原的表位模拟肽分子能诱导小鼠产生抗日本血吸虫的保护性免疫。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗原 表位模拟肽 筛选 免疫保护性 雄虫
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18日龄日本血吸虫酵母双杂交cDNA文库的构建 被引量:1
6
作者 李勉 金亚美 +5 位作者 刘金明 程国锋 石耀军 张龙现 蔡幼民 林矫矫 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2009年第4期208-212,共5页
为揭示血吸虫生长发育机理,深入研究血吸虫与宿主、血吸虫雌雄虫之间蛋白质的相互关系,本研究选取血吸虫进入终末宿主体内18天时的虫体(发育成熟初期),采用Clontech Matchmaker技术成功构建日本血吸虫的酵母双杂交cDNA文库。该文... 为揭示血吸虫生长发育机理,深入研究血吸虫与宿主、血吸虫雌雄虫之间蛋白质的相互关系,本研究选取血吸虫进入终末宿主体内18天时的虫体(发育成熟初期),采用Clontech Matchmaker技术成功构建日本血吸虫的酵母双杂交cDNA文库。该文库具有基因多样性和足够大的库容量,库容量为2.5×10^6pfu/mL,插入的双链cDNA片段的长度在0.25~2.0kb之间,文库重组比率为97.9%,具有良好的代表性。该文库的构建为筛选相互作用蛋白并进一步阐明其生理意义提供了基础。 展开更多
关键词 日本血吸虫 酵母双杂交 CDNA文库 雌虫 雄虫
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水牛实验血吸虫病的药物治疗效果比较 被引量:5
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作者 施福恢 沈纬 +12 位作者 钱承贵 林邦发 汪英华 张正达 叶萍 田锷 石耀军 朱顺海 严汉英 朱勤 刘学丽 王正佑 杨正风 《中国兽医寄生虫病》 1993年第2期30-34,共5页
就目前我国家畜血吸虫病的3种药物进行人工感染水牛血吸虫病的不同途径治疗比较试验,并测定吡喹酮的有效血药浓度。结果以吡喹酮30mg/kg和15~25mg/kg,硝硫氰胺2mg/kg及硝硫氰醚15mg/kg应用口服、肌注或第三胃注射等不同疗法的灭虫效果... 就目前我国家畜血吸虫病的3种药物进行人工感染水牛血吸虫病的不同途径治疗比较试验,并测定吡喹酮的有效血药浓度。结果以吡喹酮30mg/kg和15~25mg/kg,硝硫氰胺2mg/kg及硝硫氰醚15mg/kg应用口服、肌注或第三胃注射等不同疗法的灭虫效果和灭雌效果显著。建议在我国疫区根据各地习惯、经济和技术条件择药应用。并对牛体内残存雄虫情况进行了讨论。 展开更多
关键词 水牛 血吸虫病 药物治疗 疗效 吡喹酮 硝硫氰胺 硝硫氰醚
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环孢素A体外抗曼氏血吸虫雄虫的时间生物学研究 被引量:2
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作者 柳建发 L.H.Chappell 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期120-123,共4页
目的:探讨环孢素A体外抗曼氏血吸虫的作用。方法:MF1小鼠实验感染曼氏血吸虫6wk后,经主动脉和门静脉灌注收虫。将雄虫放入含有1μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml和25μg/ml环孢素A的19... 目的:探讨环孢素A体外抗曼氏血吸虫的作用。方法:MF1小鼠实验感染曼氏血吸虫6wk后,经主动脉和门静脉灌注收虫。将雄虫放入含有1μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml和25μg/ml环孢素A的199培养液中体外培养。用扫描电镜对药物所致的虫体皮层损害作时间生物学观察。结果:在体外,雄虫经1μg/ml环孢素A作用后,体嵴的结构疏松;经10μg/ml环孢素A作用24h后,雄虫皮层肿胀;雄虫经15μg/ml环孢素A作用8h-24h后,虫体皮层破溃;虫体经20μg/ml药物作用24h后,雄虫皮层明显破溃;雄虫经25μg/ml环孢素A作用8h后,皮层褶嵴受损;作用16h后,皮层肿胀;作用24h后,皮层极度破溃,皮棘脱落。药物所致的虫体皮层损害与剂量和时间呈依赖关系。结论:环孢素A具有直接杀曼氏血吸虫的作用。 展开更多
关键词 血吸虫 环孢素A 曼氏血吸虫 雄虫 时间生物学
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血吸虫雌雄合抱及其意义 被引量:2
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作者 臧炜(综述) 曹建平(审校) 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2006年第2期63-65,共3页
雌雄合抱作为血吸虫发育过程中的一种特殊生物学现象,对血吸虫个体的发育成熟,特别是生殖功能的完善有着非常重要的意义。对雌雄合抱的研究,有助于更深入地了解血吸虫尤其是雌虫发育的过程及影响因素、阐明影响雌虫成熟和产卵的分子机... 雌雄合抱作为血吸虫发育过程中的一种特殊生物学现象,对血吸虫个体的发育成熟,特别是生殖功能的完善有着非常重要的意义。对雌雄合抱的研究,有助于更深入地了解血吸虫尤其是雌虫发育的过程及影响因素、阐明影响雌虫成熟和产卵的分子机制、发掘新的疫苗候选抗原和药物靶点。 展开更多
关键词 血吸虫 雌雄合抱 发育 生殖
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日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响
10
作者 钟沁萍 李俊琳 +2 位作者 明珍平 蒋明森 董惠芬 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期424-427,共4页
目的观察日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌、雄虫体。取雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,将细胞接种于培养瓶中,随机分为对照组和实验组。对照组以... 目的观察日本血吸虫雄虫抽提物对卵黄培养细胞超微结构的影响。方法灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌、雄虫体。取雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,将细胞接种于培养瓶中,随机分为对照组和实验组。对照组以常规培养基培养,实验组以常规培养基含100μg/ml雄虫抽提物培养。培养第7天,取实验组与对照组细胞制备标本并观察。结果实验组成熟卵黄细胞出现概率较对照组高,核和胞质染色均匀;卵黄滴内的卵黄球之间界限清晰,数目可数;线粒体数目较少,电子密度较低。未成熟卵黄细胞胞质中粗面内质网较丰富。对照组中卵黄细胞的核和胞质电子密度降低,脂滴数目增多,空泡化程度严重,未见线粒体;成熟卵黄细胞中卵黄滴内的卵黄球之间已发生融合,有卵黄球从中释放出来,成为裸露体;未成熟卵黄细胞中卵黄球与外面包绕的膜之间空隙增大,粗面内质网扩大和囊泡变,核糖体脱颗粒。结论日本血吸虫雄虫抽提物对雌虫卵黄细胞在体外的发育与存活具有促进作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 卵黄培养细胞 雄虫抽提物 超微结构
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雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞最适浓度的筛选 被引量:3
11
作者 李俊琳 蒋明森 +2 位作者 钟沁萍 明珍平 董惠芬 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期482-486,共5页
目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆,反复冻融3次,离心取上清液,考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌... 目的 筛选雄虫抽提物对日本血吸虫卵黄培养细胞影响的最适作用浓度。方法 灌注法获取28d虫龄的日本血吸虫虫体,无菌处理后分离雌雄虫体。将雄虫匀浆,反复冻融3次,离心取上清液,考马斯亮蓝法测定蛋白后置于-20℃下保存备用。切下雌虫卵黄腺段虫体,冷消化法制备细胞悬液,调整细胞数为1×10^9/L后,将卵黄细胞接种于小盖玻片上,RPMI-1640含20%小牛血清培养,根据加入不同质量浓度雄虫抽提物分为6组(0、10、50、100、150、200mg/L组)。培养第7天,以核仁组织区相关嗜银蛋白(argyrophilic nucleolar organizer region associated proteins,AgNORs)及乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)为评价指标,对卵黄细胞进行AgNORs及LDH染色,Olympus-BH2显微镜观察,输入HPIAS-2000图像分析仪测定培养细胞的灰度值。结果 随着雄虫抽提物质量浓度的增加,培养细胞的AgNORs与LDH着色均逐渐加深,至100mg/L时最深,随后又逐渐变浅。图像分析显示,雄虫抽提物处理的各组细胞AgNORs及LDH均明显高于对照组(q10=14.2189、q50=18.3358、q100=35.6491、q150=13.1849、q200=13.8604,P<0.01;g10=10.3377、q50=11.7532、q100=23.1883、q150=10.2792、q200=9.3052,P<0.01)。雄虫抽提物100mg/L组与其他各组比较,AgNORs及LDH明显升高(q100=21.4302、q50=17.3132、q150=22.4642、q200=21.7887,P<0.01;g10=12.8506、q50=11.4351、q150=12.8896、q200=13.8831,P<0.01)。结论 雄虫抽提物可显著提高日本血吸虫卵黄细胞的增殖能力与代谢活性,其作用的最适质量浓度为100mg/L。 展开更多
关键词 雄虫抽提物 血吸虫日本 卵黄细胞 核仁组织区相关嗜银蛋白 乳酸脱氢酶
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雄性土鳖虫中不同分子量多肽活性研究 被引量:2
12
作者 李亚男 胡祥昊 +9 位作者 董丹华 马青琳 王笑 吴明泽 李敏 王少平 刘玉军 丛竹凤 代龙 高鹏 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第9期1922-1925,共4页
目的:对雄性土鳖虫不同分子量物质进行活性测定,得到最强活性片段。方法:采用不同截留孔径的超滤、纳滤;DA201-c树脂、葡聚糖G25对样品进行分子量分离,得到不同分子量组分,并采用体外抗凝实验、溶栓实验、平板实验等测定其活性。结果:... 目的:对雄性土鳖虫不同分子量物质进行活性测定,得到最强活性片段。方法:采用不同截留孔径的超滤、纳滤;DA201-c树脂、葡聚糖G25对样品进行分子量分离,得到不同分子量组分,并采用体外抗凝实验、溶栓实验、平板实验等测定其活性。结果:采用超滤、纳滤得到小于1000 Da、1000~3000 Da、大于3000 Da组分,并通过实验测定得到1000~3000 Da的物质活性最强,再通过DA201-C树脂对活性组分进行极性分离,得到三个洗脱组分:25%乙醇洗脱组分、50%乙醇洗脱组分、75%乙醇洗脱组分。并通过抗凝、溶栓试验得到50%乙醇洗脱组分活性最强。再将50%乙醇洗脱组分经过G25进行分离,得到三个峰位,分别记为FIV1、FIV2、FIV3。经抗凝、溶栓实验测得FIV2活性强。在经过高效液相得出FIV2组分的分子量集中于1000~1500 Da。结论:通过超滤、树脂、尺寸排阻色谱分离得到的活性组分,可以进一步进行分离,为以后的肽段测序奠定基础。 展开更多
关键词 雄性土鳖虫 分子量 活性 分离
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环孢素A体外抗曼氏血吸虫雄虫的电镜观察
13
作者 柳建发 《农垦医学》 1995年第3期145-149,共5页
MF1小鼠感染曼氏血吸虫六周后,经主动脉和门静脉灌注收虫.配对的成虫暴露在不含环孢素A及分别含有1微克/毫升、10微克/毫升、20微克/毫升的环孢素A的199型培养液中体外培养.药物导致的虫体损害分别作扫描电镜和透射电镜观察.药物作用后... MF1小鼠感染曼氏血吸虫六周后,经主动脉和门静脉灌注收虫.配对的成虫暴露在不含环孢素A及分别含有1微克/毫升、10微克/毫升、20微克/毫升的环孢素A的199型培养液中体外培养.药物导致的虫体损害分别作扫描电镜和透射电镜观察.药物作用后,雄虫外质膜损伤,外皮层基质出现水肿和空泡,分泌体减少.进行性表皮损害、肿胀以及皮(?)缺损最终导致皮质膜和合胞体的崩溃.本结果表明,环孢素A抗曼氏血吸虫的作用方式是直接的.而外皮质似乎是药物首先攻击的部位. 展开更多
关键词 环孢素A 曼氏血吸虫 雄虫 扫描电镜 透射电镜 皮层损害
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血吸虫生殖生理的研究进展
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作者 王珍芹 陈铁涛 吕永艳 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期33-35,共3页
关键词 血吸虫 雌雄合抱 成虫产卵 生殖生理 体外培养
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免疫蛋白质组学技术筛选鉴定日本血吸虫雄虫诊断候选抗原
15
作者 刘晓龙 王越 +4 位作者 马安 施晓华 朱明东 汤益 干小仙 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2013年第4期239-243,F0003,共6页
目的应用经典的免疫蛋白质组技术筛选、鉴定日本血吸虫雄虫抗原蛋白质,以期获得敏感性高、特异性强的诊断抗原。方法从人工感染日本血吸虫的家兔门静脉中收集血吸虫雄性成虫,提取可溶蛋白;采用双向凝胶电泳与Western印迹相结合(2.D... 目的应用经典的免疫蛋白质组技术筛选、鉴定日本血吸虫雄虫抗原蛋白质,以期获得敏感性高、特异性强的诊断抗原。方法从人工感染日本血吸虫的家兔门静脉中收集血吸虫雄性成虫,提取可溶蛋白;采用双向凝胶电泳与Western印迹相结合(2.DWestern印迹)筛选特异性抗原蛋白质点;MALDI.TOF/TOF串联质谱鉴定各抗原蛋白质;将筛选出的体被抗原、ER Calcistorin基因用PCR扩增后插入到pIVEX1.4WC和pgr-28a载体上,分别用麦胚无细胞表达体系和原核表达系统获得重组抗原,Western印迹鉴定其抗原性。结果用2-DWestern印迹共筛选到36个阳性蛋白质点,其中12个点同时也能与健康兔血清反应;24个特异性抗原蛋白质点经MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定,其中19个(79.2%)在NCBI数据库找到匹配蛋白质数据资料。体被抗原均能在麦胚无细胞体系和原核表达体系中表达;免疫印迹显示麦胚无细胞体系表达的重组蛋白有较好抗原性,检测敏感性90%,特异性100%。结论基于凝胶电泳的免疫蛋白质组学技术用于诊断抗原筛选、鉴定切实可行;与E.coli原核表达体系相比,麦胚无细胞表达体系表达的重组蛋白具有较好的抗原性。 展开更多
关键词 血吸虫 日本 免疫蛋白质组学 雄虫 抗原
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