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MYCT1-TV对肝癌细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响 被引量:4
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作者 符爽 孙开来 富伟能 《解剖科学进展》 CAS 2014年第3期253-256,261,共5页
目的探讨MYCT1-TV(Myc target 1)基因过表达对肝癌Bel7402细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法将构建的MYCT1-TV-GFP真核表达载体瞬时转染Bel7402细胞,通过RT-PCR和荧光显微镜检测转染效率,分别通过MTT、流式细胞术和Transwell实验检... 目的探讨MYCT1-TV(Myc target 1)基因过表达对肝癌Bel7402细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法将构建的MYCT1-TV-GFP真核表达载体瞬时转染Bel7402细胞,通过RT-PCR和荧光显微镜检测转染效率,分别通过MTT、流式细胞术和Transwell实验检测转染后MYCT1-TV对Bel7402细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。结果转染MYCT1-TV-GFP后,Bel7402细胞活细胞数显著减少,凋亡细胞数显著增加,穿膜细胞数显著减少。结论 MYCT1-TV过表达能抑制Bel7402细胞生长和侵袭,促进Bel7402细胞凋亡。 展开更多
关键词 myct1-tv 肝癌细胞 增殖 凋亡 侵袭
原文传递
MYCT1-TV真核表达载体的构建及鉴定
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作者 符爽 孙开来 富伟能 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第6期1269-1271,共3页
目的:构建MYCT1-TV(Myc target 1 transcript variant 1)真核表达载体,鉴定其在肝癌细胞系Bel7402中的表达。方法:以正常人外周血cDNA为模板,RT-PCR方法扩增该基因的开放阅读框,定向克隆至pEGFP-C1载体后送测序鉴定。将构建好的MYCT1-TV... 目的:构建MYCT1-TV(Myc target 1 transcript variant 1)真核表达载体,鉴定其在肝癌细胞系Bel7402中的表达。方法:以正常人外周血cDNA为模板,RT-PCR方法扩增该基因的开放阅读框,定向克隆至pEGFP-C1载体后送测序鉴定。将构建好的MYCT1-TV-GFP表达载体瞬时转染Bel7402细胞,RTPCR结合荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况并鉴定载体构建是否成功。结果:测序结果证实成功将MYCT1-TV的开放阅读框克隆至pEGFP-C1表达载体,且转染细胞后,MYCT1-TV mRNA的表达水平显著上调,荧光显微镜下可见细胞内重组绿色荧光蛋白的表达。结论:成功构建MYCT1-TV-GFP表达载体,为进一步研究MYCT1-TV在肝癌中的作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 myct1-tv myct1 肝细胞癌 表达载体
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MYCT1新转录本的克隆与表达分析 被引量:2
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作者 符爽 孙开来 富伟能 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期388-392,共5页
目的确定MYCT1基因的转录起始点并克隆该基因新的转录本,探讨该基因的结构和功能。方法利用已知MYCT1的保守序列,应用5′-RACE技术确定转录起始点位置,结合3′-RACE拼接得到新转录本的精确全长;然后利用生物信息学软件对新转录本与MYCT1... 目的确定MYCT1基因的转录起始点并克隆该基因新的转录本,探讨该基因的结构和功能。方法利用已知MYCT1的保守序列,应用5′-RACE技术确定转录起始点位置,结合3′-RACE拼接得到新转录本的精确全长;然后利用生物信息学软件对新转录本与MYCT1的cDNA序列及氨基酸序列进行对比分析;最后利用RT-PCR的方法分析新转录本的细胞表达谱。结果成功克隆得到长1 106 bp的新转录本MYCT1-TV,其转录起始点位于ATG上游140 bp处。MYCT1-TV与MYCT1在结构上无明显差异,并广泛表达于各个细胞系。结论 MYCT1转录起始点的确定和新转录本MYCT1-TV的克隆,为进一步研究MYCT1基因的转录调控机制及基因功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 myct1 myct1-tv 喉癌 RACE
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