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Phosphorylation modification reverses the transcriptional inhibitory activity of CsMYB4a in tea plants(Camellia sinensis)
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作者 Guoliang Ma Yunyun Han +2 位作者 Tongtong Li Tao Xia Liping Gao 《Horticultural Plant Journal》 2025年第1期406-416,共11页
The members of the fourth subgroup of R2R3-MYB(Sg4 members)are well-known inhibitors of phenylpropanoid and lignin synthesis pathways.The C2 domain is closely related to the transcriptional inhibitory activity of Sg4 ... The members of the fourth subgroup of R2R3-MYB(Sg4 members)are well-known inhibitors of phenylpropanoid and lignin synthesis pathways.The C2 domain is closely related to the transcriptional inhibitory activity of Sg4 members.Phosphorylation modification enhances the transcriptional inhibitory activity of Sg4 members.Here,we identified a phosphorylation site on the C2 domain of Cs MYB4a from tea plants(Camellia sinensis).A mitogen-activated protein kinase(MAPK),named Cs MPK3-2,phosphorylated this site on the C2 domain of Cs MYB4a.Further experiments revealed that phosphorylation of Cs MYB4a weakened its ability to inhibit the gene expression of PAL,C4H,and 4CL in the phenylpropanoid pathway and activated the expression of transcription factor YABBY5,maintaining the adaxial-abaxial polarity of the leaf.Knocking out Nt YAB5 in Cs MYB4a transgenic tobacco partially repaired the leaf wrinkling phenotype caused by Cs MYB4a.The C1 domain exhibited an activation function when the C2 domain of Cs MYB4a was phosphorylated by Cs MPK3-2,causing this reversal phenomenon.These results enrich our understanding of the regulatory diversity of Sg4 members. 展开更多
关键词 Camellia sinensis Cs myb4a Phenylpropanoid pathway MAPK YABBY Leaf development
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Removal of the C4-domain preserves the drought tolerance enhanced by CsMYB4a and eliminates the negative impact of this transcription factor on plant growth
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作者 Mingzhuo Li Guoliang Ma +8 位作者 Xiu Li Lili Guo Yanzhi Li Yajun Liu Wenzhao Wang Xiaolan Jiang De-Yu Xie Liping Gao Tao Xia 《aBIOTECH》 EI CAS CSCD 2024年第3期368-374,共7页
The MYB4 transcription factor family regulates plant traits.However,their overexpression often results in undesirable side effects like growth reduction.We have reported a green tea(Camellia sinensis)MYB4 transcriptio... The MYB4 transcription factor family regulates plant traits.However,their overexpression often results in undesirable side effects like growth reduction.We have reported a green tea(Camellia sinensis)MYB4 transcription factor(CsMYB4)that represses the phenylpropanoid and shikimate pathways and stunts plant growth and development.In the current study,we observed that in CsMYB4a transgenic tobacco(Nicotiana tabacum)plants,primary metabolism was altered,including sugar and amino acid metabolism,which demonstrated a pleiotropic regulation by CsMYB4a.The CsMYB4a transgenic tobacco plants had improved drought tolerance,which correlated to alterations in carbohydrate metabolism and an increase in proline content,as revealed by metabolic profiling and transcriptomic analysis.To mitigate the undesirable repressive side effects on plant traits,including dwarfism,shrunken leaves,and shorter roots of CsMYB4a transgenic plants,we deleted the C4 domain of CsMYB4a to obtain a CsMYB4a-DC4 variant and then overexpressed it in transgenic plants(CsMYB4a-DC4).These CsMYB4a-DC4 plants displayed a normal growth and had improved drought tolerance.Metabolite analysis demonstrated that the contents of carbohydrates and proline were increased in these transgenic plants.Our findings suggest that an approriate modification of TFs can generate novel crop traits,thus providing potential agricultural benefits and expanding its application to various crops. 展开更多
关键词 Tea MYB4 repressor Development Carbohydrate metabolism Drought stress C4-domain
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白颖苔草CrMYB4基因的克隆和表达分析
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作者 魏雨佳 李岩 +7 位作者 康语涵 弓晓楠 杜敏 涂岚 石鹏 于子涵 孙彦 张昆 《生物技术通报》 北大核心 2025年第7期248-260,共13页
【目的】探究CrMYB4在白颖苔草生长发育及非生物胁迫中的作用,为进一步研究其在白颖苔草抗逆机制中的功能提供理论指导。【方法】基于前期白颖苔草盐响应组学结果,筛选到的1个CrMYB4蛋白,并对其生物信息学特征、亚细胞定位、启动子顺式... 【目的】探究CrMYB4在白颖苔草生长发育及非生物胁迫中的作用,为进一步研究其在白颖苔草抗逆机制中的功能提供理论指导。【方法】基于前期白颖苔草盐响应组学结果,筛选到的1个CrMYB4蛋白,并对其生物信息学特征、亚细胞定位、启动子顺式作用元件分析及不同组织、非生物胁迫和外源激素处理下的表达情况进行评价。【结果】CrMYB4序列编码区为747 bp,编码248个氨基酸。进化分析发现其属于典型的R2R3-MYB类群,与莎草科植物亲缘关系较近。亚细胞定位分析显示,CrMYB4蛋白定位于细胞核中。CrMYB4基因在新叶和老叶中高表达,而在根、幼芽、叶鞘等组织中的表达量较低。启动子顺式元件分析显示,CrMYB4启动子区域含有多个参与激素响应、植物生理和转录识别相关的保守功能元件。CrMYB4基因在盐、干旱和低温胁迫下均有着快速响应,在处理1 h后迅速上调,推测CrMYB4可能参与白颖苔草的非生物胁迫响应。在不同植物激素(ABA、SA、IAA和GA3)处理下,CrMYB4均显著上调,在6 d时达到最大值,且在IAA处理后响应最为明显,推测CrMYB4可能参与白颖苔草的激素响应。【结论】CrMYB4在白颖苔草生长发育、逆境胁迫和激素响应等方面均具有潜在作用,在盐胁迫和IAA信号通路中起关键作用。 展开更多
关键词 白颖苔草 MYB转录因子 MYB4 基因克隆 盐胁迫 木质素 生长发育 非生物胁迫
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山新杨MYB4基因在胁迫条件下的组织表达分析
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作者 李嘉哲 田广宇 +4 位作者 张敬鑫 茶新有 杨建坤 董晨肖 张荣沭 《分子植物育种》 北大核心 2025年第11期3574-3582,共9页
在植物中,MYB家族是最大的转录因子家族之一,能调控植物胁迫响应及生长发育等多种关键生理生化过程。为筛选杨树抗逆性基因,优化育种,以山新杨为试材,采用反转录PCR技术克隆获得927 bp的Pd PapMYB4(Potri.002G173900.v3.1)基因,生物信... 在植物中,MYB家族是最大的转录因子家族之一,能调控植物胁迫响应及生长发育等多种关键生理生化过程。为筛选杨树抗逆性基因,优化育种,以山新杨为试材,采用反转录PCR技术克隆获得927 bp的Pd PapMYB4(Potri.002G173900.v3.1)基因,生物信息学分析表明该基因共编码308个氨基酸,PdPapMYB4为非跨膜亲水性不稳定蛋白。蛋白比对分析获得9条(来源于9个植物物种)与PdPapMYB4序列一致性最高的MYB蛋白序列。RT-qPCR分析发现,PdPapMYB4在根中表达量最高。非生物胁迫处理发现其表达水平受干旱胁迫影响较大。以5种植物土传致病真菌胁迫48 h,尖孢镰刀菌、核盘菌、立枯丝核菌、细链格孢菌和金黄壳囊孢菌使其茎尖、叶及根内表达量显著上调。受脱落酸、水杨酸和茉莉酸诱导48 h,茎尖、叶及根内的表达量显著上调。本研究揭示了山新杨MYB4基因响应多种诱导的组织特异性表达谱,为培育高抗性杨树优良品种及进一步揭示该基因的功能提供依据。 展开更多
关键词 山新杨 MYB4基因 胁迫 RT-QPCR 表达模式
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甘蓝型油菜MYB4基因RNA干扰载体构建 被引量:2
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作者 王玉明 曹廷 +1 位作者 冯瑜 柴友荣 《作物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期23-27,共5页
拟南芥(Arabidopsis thaliana)MYB4(AtMYB4)编码负调控转录因子,通过对苯丙烷途径中关键酶C4H(肉桂酸4-羟化酶)基因的抑制来调控重要次生代谢物质芥子酸酯的生物合成,在防御紫外线中起重要作用。同为十字花科的芸薹属(Brassica)有多种... 拟南芥(Arabidopsis thaliana)MYB4(AtMYB4)编码负调控转录因子,通过对苯丙烷途径中关键酶C4H(肉桂酸4-羟化酶)基因的抑制来调控重要次生代谢物质芥子酸酯的生物合成,在防御紫外线中起重要作用。同为十字花科的芸薹属(Brassica)有多种重要的油料、蔬菜和园林作物,如甘蓝型油菜(B.napus)、白菜(B.rapa)、甘蓝(B.oleracea)和芥菜(B.juncea)等。本研究克隆了甘蓝型油菜MYB4基因家族的RNA干扰片段BMYB4I,将其反义片段、正义片段采用NcoI+AatII和BamHI+XbaI分别插入到改进型植物RNA干扰基础载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成重组载体pF-GC5941M-BMYB4I(简称为pBMYB4I)。经复合PCR鉴定表明,载体构建成功,并转化根癌农杆菌获得工程菌株。为揭示芸薹属MYB4基因调控芥子酸酯等苯丙烷物质合成的分子机理以及探索抗紫外线分子育种奠定了基础。 展开更多
关键词 芸薹属 MYB4 RNAI 载体构建 紫外线
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甘蓝型油菜MYB4基因反义植物表达载体的构建
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作者 尹锐 柴友荣 《湖北农业科学》 北大核心 2013年第14期3428-3430,共3页
将甘蓝型油菜(Brassica napus L.)MYB4基因家族共保守的467 bp反义片段构建到中间载体pCambia2301G中,替换GUS基因,由CaMV35S启动子驱动,形成了反义植物表达载体,命名为pCambia2301G-MYB4A,并转化到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefacien... 将甘蓝型油菜(Brassica napus L.)MYB4基因家族共保守的467 bp反义片段构建到中间载体pCambia2301G中,替换GUS基因,由CaMV35S启动子驱动,形成了反义植物表达载体,命名为pCambia2301G-MYB4A,并转化到根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中形成工程菌株,为进一步研究甘蓝型油菜MYB4基因家族的功能奠定基础。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜(Brassica NAPUS L ) 苯丙烷代谢途径 MYB4基因
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绿萼凤仙花MYB4的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 李泽凤 向南星 +4 位作者 魏春梅 李新艺 孟丹晨 黄海泉 黄美娟 《山东农业科学》 北大核心 2023年第1期8-14,共7页
MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)是调控植物木质素合成的转录因子之一。为探讨绿萼凤仙花木质素合成调控的分子机制,本试验克隆了绿萼凤仙花MYB4基因,对其进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR技术分析其表达模式... MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)是调控植物木质素合成的转录因子之一。为探讨绿萼凤仙花木质素合成调控的分子机制,本试验克隆了绿萼凤仙花MYB4基因,对其进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR技术分析其表达模式。结果表明:(1)成功克隆到绿萼凤仙花MYB4基因的3个片段,其cDNA全长分别为666、888、771 bp,编码221、295、256 aa,命名为IcMYB4-1、IcMYB4-2和IcMYB4-3。(2)3个IcMYB4基因都含有MYB家族的DNA结合结构域(R2和R3)以及抑制型的保守基序EAR,其氨基酸序列与其他物种具有较高的相似性,同源性达62%左右。IcMYB4-1和IcMYB4-2氨基酸处于一个分支,推测其为直系同源关系;IcMYB4-3与前两者分属两个分支,推测其为旁系同源关系。(3)qRT-PCR结果表明,3个IcMYB4基因在绿萼凤仙花的不同部位均有表达,其中IcMYB4-1在绿萼凤仙花不同部位的表达均为最低,以根部表达量最高;IcMYB4-2和IcMYB4-3基因在绿萼凤仙花的根、茎和叶中的表达量依次升高,推测其对绿萼凤仙花木质素合成起负调控作用。综上所述,IcMYB4基因在绿萼凤仙花不同部位的作用机理存在一定差异,但均在绿萼凤仙花的木质素合成调控中发挥了重要作用。该结果为增加凤仙花的木质化程度以及品种改良提供了基础数据。 展开更多
关键词 绿萼凤仙花 MYB4基因 木质素 基因克隆 表达分析
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‘摩尔多瓦’葡萄MYB4b基因克隆鉴定及表达分析 被引量:1
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作者 孙洋 王超霞 +3 位作者 田淑芬 刘丹 罗盼 王荣 《中外葡萄与葡萄酒》 北大核心 2022年第3期8-15,共8页
为探究MYB4b基因在调控植物生长发育以及对外界环境的响应,以‘摩尔多瓦’葡萄为材料,通过PCR克隆得到VvMYB4b基因序列,通过在线软件分析其基本序列特征,采用荧光定量PCR方法检测VvMYB4b基因在‘摩尔多瓦’不同组织部位和不同农艺技术... 为探究MYB4b基因在调控植物生长发育以及对外界环境的响应,以‘摩尔多瓦’葡萄为材料,通过PCR克隆得到VvMYB4b基因序列,通过在线软件分析其基本序列特征,采用荧光定量PCR方法检测VvMYB4b基因在‘摩尔多瓦’不同组织部位和不同农艺技术处理下的转录表达水平,同时检测了相应的花色苷含量。结果发现,从‘摩尔多瓦’葡萄中克隆到VvMYB4b转录因子的序列全长729 bp,编码242个氨基酸,属于亲水性的非分泌碱性蛋白,系统进化树显示其与拟南芥的AtMYB4同源性较高。VvMYB4b在葡萄不同组织中均有表达,其中表达量最高的组织为茎尖,表达量最低的组织为幼果期果实;各农艺技术处理果实均显示下调VvMYB4b基因的表达,其中0.3%盐和壳聚糖的下调表达更强烈。由此推测,VvMYB4b可能参与调控‘摩尔多瓦’葡萄生理环境应答过程,为进一步研究葡萄VvMYB4b基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 摩尔多瓦 MYB4b转录因子 克隆 信息分析
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拟南芥MYB4基因GUS载体构建及其转基因植株的筛选
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作者 欧阳剑 吴席 +1 位作者 徐杰娜 樊婷婷 《安徽农业科学》 CAS 2019年第3期82-83,162,共3页
[目的]进一步验证MYB4基因在响应干旱胁迫中的应答功能,构建ProMYB4:GUS载体,通过筛选鉴定获得相应的转基因植株。[方法]以野生型拟南芥植株的全基因组为模板,利用特异性引物扩增MYB4基因启动子,将目的基因连接到pART27载体上。然后将... [目的]进一步验证MYB4基因在响应干旱胁迫中的应答功能,构建ProMYB4:GUS载体,通过筛选鉴定获得相应的转基因植株。[方法]以野生型拟南芥植株的全基因组为模板,利用特异性引物扩增MYB4基因启动子,将目的基因连接到pART27载体上。然后将构建成功的重组载体转化至农杆菌GV3101,浸花法转化野生型植株。最后通过抗性筛选和PCR鉴定获得阳性转基因植株。[结果]MYB4启动子成功克隆,测序结果经过比对完全正确。抗性筛选获得了阳性转基因植株。[结论]成功获得ProMYB4:GUS阳性转基因植株,为进一步研究MYB4基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 拟南芥 MYB4基因 MYB4启动子 转基因植株
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