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水稻OsMYBR2R3-1基因的克隆及生物信息学分析
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作者 史妍 王强 +6 位作者 刘思怡 李悦武 何玉祥 樊江敏 姚有铭 黄英金 王兆海 《分子植物育种》 北大核心 2025年第22期7393-7405,共13页
为探索水稻MYB转录因子基因在水稻抵御逆境胁迫过程中的功能,本研究克隆了1个R2R3-MYB亚家族基因OsMYBR2R3-1,该基因位于水稻第12号染色体上,序列全长为2297 bp,包含3个外显子和2个内含子,CDS全长为903 bp,编码300个氨基酸。生物信息学... 为探索水稻MYB转录因子基因在水稻抵御逆境胁迫过程中的功能,本研究克隆了1个R2R3-MYB亚家族基因OsMYBR2R3-1,该基因位于水稻第12号染色体上,序列全长为2297 bp,包含3个外显子和2个内含子,CDS全长为903 bp,编码300个氨基酸。生物信息学分析表明,Os MYBR2R3-1属于非跨膜非分泌性蛋白,主要由α-螺旋和无规卷曲结构组成,属于不稳定疏水性蛋白,蛋白亚细胞定位预测其位于细胞核上。系统进化树表明Os MYBR2R3-1在单子叶植物中具有较高保守性。时空表达模式分析表明,OsMYBR2R3-1主要在花药和雌蕊中表达。激素响应表达分析表明,OsMYBR2R3-1主要受到JA和ABA这两种植物激素的诱导响应,且在根部的基因表达水平较高;蛋白互作分析发现Os MYBR2R3-1蛋白与胁迫相关蛋白质存在互作关系;这些结果均说明OsMYBR2R3-1可能参与水稻生物和非生物胁迫过程。本研究为进一步研究Os MYBR2R3-1基因在水稻生长发育和应对逆境胁迫过程中的功能提供参考。 展开更多
关键词 水稻 myb(V-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog) OsmybR2R3-1 基因克隆 生物信息学分析
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R2R3型MYB转录因子调控植物胁迫应答的研究进展 被引量:6
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作者 关范圆 郑语嫣 +3 位作者 米芯雨 范菁 王宝纬 王晓晖 《植物医学》 2024年第3期1-9,共9页
MYB转录因子(TF)是植物中最大的转录家族之一,广泛参与植物生命过程. R2R3-MYB转录因子作为MYB TF家族最大的亚家族,在植物响应生物和非生物胁迫过程中发挥着重要作用.本文简要综述了MYB转录因子的分类,并具体论述了R2R3型MYB转录因子... MYB转录因子(TF)是植物中最大的转录家族之一,广泛参与植物生命过程. R2R3-MYB转录因子作为MYB TF家族最大的亚家族,在植物响应生物和非生物胁迫过程中发挥着重要作用.本文简要综述了MYB转录因子的分类,并具体论述了R2R3型MYB转录因子在调控植物应答病害、虫害等生物胁迫和干旱、低温、盐等非生物胁迫中的作用机制. 展开更多
关键词 R2R3myb转录因子 生物胁迫 非生物胁迫
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三色堇VwF3H基因启动子克隆及其功能分析 被引量:1
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作者 许晓兰 黎洁 +4 位作者 许慧娴 周扬 赵莹 彭婷 王健 《南方农业学报》 北大核心 2025年第2期368-377,共10页
【目的】探究三色堇黄烷酮-3-羟化酶基因(VwF3H)启动子功能,并验证其与花青素相关MYB转录因子的互作关系,为揭示F3H基因在植物花青素合成过程中的调控机制提供参考依据。【方法】以三色堇为研究材料,通过FPNI-PCR克隆VwF3H基因启动子序... 【目的】探究三色堇黄烷酮-3-羟化酶基因(VwF3H)启动子功能,并验证其与花青素相关MYB转录因子的互作关系,为揭示F3H基因在植物花青素合成过程中的调控机制提供参考依据。【方法】以三色堇为研究材料,通过FPNI-PCR克隆VwF3H基因启动子序列,分析其功能元件、组织表达特异性及核心功能片段等,并通过酵母单杂交试验探究VwMYB27和VwMYB29能否与VwF3H基因启动子结合。【结果】VwF3H基因启动子序列长2017 bp,含有较多光响应元件及激素响应元件;根据MYB等重要转录因子的位置,将其分为4段:VwF3H1(2017 bp)、VwF3H2(1353 bp)、VwF3H3(745 bp)和VwF3H4(446 bp)。VwF3H基因在三色堇花瓣中的相对表达量最高,显著高于根、茎和叶片中的相对表达量(P<0.05,下同)。VwF3H基因启动子全长具有较强的转录活性,缺失片段-2017~-1353 bp的VwF3HS2转录活性明显降低,缺失更多碱基的VwF3HS3和VwF3HS4则基本无转录活性,说明VwF3H基因启动子的高活性序列位于-2017~-1353 bp区域。VwF3H基因启动子在烟草叶片和花中启动GUS基因的能力不同,以花器官中的转录活性更强,说明VwF3H基因表达存在一定组织特异性;此外,VwF3H基因启动子在烟草中的转录活性明显低于CaMV35S启动子,但在三色堇中的转录活性明显高于CaMV35S启动子,推测VwF3H基因还存在物种偏好性,且更适合作为三色堇花瓣转化载体的启动子。VwF3H基因启动子的3-氨基-1,2,4-三唑(3-AT)自激活抑制浓度为250 mmol/L;VwMYB27与VwF3H基因启动子存在互作关系,而VwMYB29与VwF3H基因启动子无直接的互作关系。【结论】VwF3H基因启动子在三色堇中具有较强的转录活性,其高活性序列位于-2017~-1353 bp区域;VwF3H基因启动子能与VwMYB27相互作用,而参与三色堇花瓣色斑的形成。 展开更多
关键词 三色堇 黄烷酮-3-羟化酶基因(F3H) 启动子 myb转录因子
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R2R3MYB转录因子在果树花青素合成中的调控作用 被引量:5
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作者 李永杰 谢让金 邓烈 《中国南方果树》 北大核心 2014年第6期18-23,共6页
花青素是一类重要的水溶性色素,其影响果实色泽表现,对人体具有非常重要的营养保健价值。花青素生物合成由一系列结构基因编码的酶催化完成,而其关键结构基因的表达主要受R2R3MYB转录因子调控。近年大量研究表明,R2R3MYB的调控作用受外... 花青素是一类重要的水溶性色素,其影响果实色泽表现,对人体具有非常重要的营养保健价值。花青素生物合成由一系列结构基因编码的酶催化完成,而其关键结构基因的表达主要受R2R3MYB转录因子调控。近年大量研究表明,R2R3MYB的调控作用受外界因子如温度、激素和光等的影响。为了向果树花青素形成分子机理的研究者提供相关信息,在介绍果实花青素的种类、功能和合成的基础上,就R2R3MYB的结构特征及其在花青素合成调控中的作用进行了概述。 展开更多
关键词 花青素 果树 R2R3myb 转录调控
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大豆14-3-3蛋白与转录因子蛋白GmMYB173的互作 被引量:2
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作者 董萌 高友菲 +2 位作者 韩天富 东方阳 蒋炳军 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1419-1428,共10页
14-3-3蛋白家族在真核生物中普遍存在,可与其他蛋白相互作用,调控多种生理生化过程。MYB基因家族作为植物中最大的一类转录因子,广泛参与了植物的生长发育和代谢调控。本研究通过分析1个从自贡冬豆中克隆的MYB转录因子Gm MYB173的亚细... 14-3-3蛋白家族在真核生物中普遍存在,可与其他蛋白相互作用,调控多种生理生化过程。MYB基因家族作为植物中最大的一类转录因子,广泛参与了植物的生长发育和代谢调控。本研究通过分析1个从自贡冬豆中克隆的MYB转录因子Gm MYB173的亚细胞定位情况,发现Gm MYB173在细胞核中特异表达;序列分析发现Gm MYB173与Gm MYB176相似,具有1个14-3-3蛋白的潜在结合结构域,即p ST结合结构域。通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)删除了Gm MYB173序列中p ST结合结构域编码序列,发现Gm MYB173细胞核表达特异性消失。酵母双杂交互作分析表明,大豆基因组中所有具有表达的16个14-3-3蛋白Gm SGF14a^Gm SGF14p均能与Gm MYB173互作。β-半乳糖苷酶活性分析发现,与Gm MYB173互作最强的是Gm SGF14n,其次是Gm SGF14k、Gm SGF14e和Gm SGF14o。这些结果说明14-3-3蛋白不仅与Gm MYB173互作,且可能调控其在细胞内的定位,有助于研究14-3-3蛋白与Gm MYB173的互作关系及其在大豆生长发育中的作用。 展开更多
关键词 14-3-3蛋白 GM myb173 亚细胞定位 酵母双杂交
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马铃薯块茎花色素苷合成相关R2R3 MYB蛋白基因的克隆和功能分析 被引量:10
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作者 谈欢 刘玉汇 +3 位作者 李丽霞 王丽 李元铭 张俊莲 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1021-1031,共11页
植物花色素苷的合成代谢受转录因子的调控,其中R2R3 MYB为最主要的转录调控因子。本研究以彩色四倍体马铃薯为试材,克隆了R2R3 MYB基因家族里调控马铃薯块茎花色素苷合成R2R3 MYB-St AN1的3个同源基因,并利用生物信息学分析、稳定烟草... 植物花色素苷的合成代谢受转录因子的调控,其中R2R3 MYB为最主要的转录调控因子。本研究以彩色四倍体马铃薯为试材,克隆了R2R3 MYB基因家族里调控马铃薯块茎花色素苷合成R2R3 MYB-St AN1的3个同源基因,并利用生物信息学分析、稳定烟草遗传转化、q PCR等方法对这3个同源基因的结构和功能进行分析和鉴定,结果表明,这3个同源基因均含有R2和R3保守结构域,其主要差别在于C端由10个氨基酸序列组成的重复结构(R)数目不同,根据R数目将其分别命名为St AN1-R0、St AN1-R1和St AN1-R3,其蛋白分子量分别为28 047.91、29 458.35和31 527.60 Da,等电点(p I)分别为6.14、6.90和8.39,均为亲水蛋白。通过转化烟草发现,转入St AN1-R0、St AN1-R1和St AN1-R3后,烟草叶片叶色变化明显,其中转St AN1-R1烟草叶色呈深红色,其叶片花色素苷含量最高。进一步利用q PCR分析表明,外源St AN1使烟草叶片花色素苷合成代谢途径的关键基因(Nt CHS、Nt CHI、Nt F3H、Nt F3’H、Nt DFR、Nt ANS、Nt UFGT)上调表达,同时烟草内源Ntb HLH基因的表达显著上升;St AN1-R1可以高效地调控烟草内源Ntb HLH基因和结构基因Nt DFR和Nt ANS的表达。结果表明,St AN1的3个同源蛋白均可以调控花色素苷的合成,而只含一个重复序列R的St AN1调控花色素苷合成的能力最强。 展开更多
关键词 马铃薯 花色素苷 R2R3 myb 基因克隆 生物信息学分析 烟草转化 基因表达分析
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Overexpression of PGA37/MYB118 and MYB115 promotes vegetative-to-embryonic transition in Arabidopsis 被引量:33
7
作者 Xingchun wang Qi-Wen Niu +4 位作者 Chong Teng Chao Li Jinye Mu Nam-Hai Chua Jianru Zuo 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2009年第2期224-235,共12页
Formation of somatic embryos from non-germline cells is unique to higher plants and can be manipulated in a variety of species. Previous studies revealed that overexpression of several Arabidopsis genes, including WUS... Formation of somatic embryos from non-germline cells is unique to higher plants and can be manipulated in a variety of species. Previous studies revealed that overexpression of several Arabidopsis genes, including WUSCHEL (WUS)/PLANT GROWTH ACTIVATOR6 (PGA6), BABY BOOM, LEAFY COTYLEDON1 (LEC1), and LEC2, is able to cause vegetative-to-embryonic transition or the formation of somatic embryos. Here, we report that a gain-offunction mutation in the Arabidopsis PGA37 gene, encoding the MYBI18 transcription factor, induced vegetative-toembryonic transition, the formation of somatic embryos from root explants, and an elevated LEC1 expression level. Double mutant analysis showed that WUS was not required for induction of somatic embryos by PGA37/MYB118. In addition, overexpression of MYBll5, a homolog of PGA37/MYB118, caused a pga37-like phenotype. A myb118 myb115 double mutant did not show apparent developmental abnormalities. Collectively, these results suggest that PGA37/ MYB118 and MYB115 promote vegetative-to-embryonic transition, through a signaling pathway independent of WUS. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS embryogenic competence PGA3 7/myb 118 myb 115 somatic embryos
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桃MYB3基因的克隆及表达分析 被引量:7
8
作者 申晴 殷亚蕊 +2 位作者 武军凯 王海静 张立彬 《河北果树》 2020年第2期8-10,18,I0005,共5页
本试验以桃抗寒性不同的3个品种毛桃、21世纪、优25-3的叶片、越冬的韧皮和花芽为试验材料,根据NCBI数据库中预测的桃MYB3的mRNA(GenBank登录号为XM007218080.2)序列设计一对引物,通过RT-PCR技术克隆得到一个长度2 268 bp的MYB3基因序... 本试验以桃抗寒性不同的3个品种毛桃、21世纪、优25-3的叶片、越冬的韧皮和花芽为试验材料,根据NCBI数据库中预测的桃MYB3的mRNA(GenBank登录号为XM007218080.2)序列设计一对引物,通过RT-PCR技术克隆得到一个长度2 268 bp的MYB3基因序列。生物信息学软件分析表明,其含有2个内含子,3个外显子,含有1个完整的开放阅读框长度为1 128bp,编码375个氨基酸,分子质量为41.931 kD,理论等电点为5.10,具有2个典型的SANT结构域,属于R2R3-MYB.遗传进化分析表明PpMYB3与乌梅(Prunus mume)的亲缘关系最近。荧光定量PCR结果显示,PpMYB3在桃的花芽和韧皮部均有表达,PpMYB3相对表达量与取材时期温度变化趋势相一致。本试验推测PpMYB3转录因子在桃抗寒方面起到负调节作用。 展开更多
关键词 myb3 克隆 基因分析 相对表达量
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桑树MaMYB308基因的克隆及表达分析
9
作者 韦燕梅 赵鑫茹 +3 位作者 李雨珈 王宇宁 李界秋 蒙姣荣 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第11期3481-3488,共8页
为研究桑树MYB转录因子在桑树非生物胁迫及发育中的功能,本研究以桑树品种‘桂优62号’为材料,克隆了桑树MYB转录因子MaMYB308的全长cDNA序列,运用生物信息学手段对其氨基酸序列进行分析,采用酵母单杂交验证其自激活性,采用实时荧光定量... 为研究桑树MYB转录因子在桑树非生物胁迫及发育中的功能,本研究以桑树品种‘桂优62号’为材料,克隆了桑树MYB转录因子MaMYB308的全长cDNA序列,运用生物信息学手段对其氨基酸序列进行分析,采用酵母单杂交验证其自激活性,采用实时荧光定量PCR方法检测基因在不同组织和非生物胁迫下的表达模式。研究结果显示,MaMYB308基因全长1266 bp,包含一个1026 bp的开放阅读框,可编码341个氨基酸,其编码蛋白质分子量为39 kD;具有两个SANT结构域,属于典型的R2R3型MYB转录因子,具有自激活活性。BLAST结果显示,MaMYB308与来源高等植物的多种R2R3-MYB类转录因子均具有较高的同源性,与川桑的MYB308同源性最高,氨基酸水平的一致性为96.48%。实时荧光定量PCR分析结果显示,MaMYB308在桑树根、茎和叶片组织中均有表达,在根中的表达量显著高于茎与叶片的表达量,且对高温、低温、高盐和干旱等非生物胁迫均有响应,其中对低温胁迫诱导最为显著,表达量为对照的40倍左右。本研究结果为进一步研究桑树MaMYB308基因的生物学功能及桑树的抗逆机理提供了帮助。 展开更多
关键词 桑树 R2R3myb转录因子 非生物胁迫 基因表达
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miR-195靶向MYB激活PI3K-Akt通路调控皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移 被引量:2
10
作者 代永霞 任杰 +2 位作者 崔庆标 李露 陈晓宇 《皮肤性病诊疗学杂志》 2020年第6期379-386,共8页
目的:探讨微小RNA 195(miR-195)对皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移的影响及其机制。方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-195和MYB基因在皮肤鳞癌细胞(A431细胞)和人正常皮肤细胞(HaCaT细胞)中的表达。CCK-8实验检测过表达及下调miR-... 目的:探讨微小RNA 195(miR-195)对皮肤鳞癌细胞增殖与恶性转移的影响及其机制。方法:通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-195和MYB基因在皮肤鳞癌细胞(A431细胞)和人正常皮肤细胞(HaCaT细胞)中的表达。CCK-8实验检测过表达及下调miR-195对A431细胞增殖能力的影响;Western blot检测过表达及下调miR-195对A431细胞凋亡相关蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达的影响;Western blot分析过表达及下调miR-195对A431细胞上皮细胞-间充质转化(EMT)的影响。TargetScan和双荧光素酶报告基因实验分析miR-195和MYB之间的关系,分析下调MYB对A431细胞增殖和EMT的影响。Western blot检测过表达MYB后对PI3K-Akt通路的影响。LY294002作用细胞后,检测过表达MYB对A431细胞增殖和EMT的影响。结果:与HaCaT细胞相比,A431细胞中miR-195表达明显下调(P<0.01),MYB表达明显上调(P<0.01)。过表达miR-195抑制A431细胞增殖与EMT,促进细胞凋亡,下调miR-195则起到相反作用;miR-195和MYB具有靶向和负调控关系;下调MYB的表达抑制A431细胞增殖与EMT;过表达MYB激活细胞内PI3K-Akt通路,且通过该通路促进A431细胞增殖与EMT。结论:miR-195通过靶向MYB激活PI3K-Akt通路调控A431细胞的增殖和转移。 展开更多
关键词 miR-195 myb PI3K-AKT 皮肤鳞癌 增殖
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番茄冷诱导基因SlCMYB1的克隆及其在水稻中异源表达研究 被引量:13
11
作者 张欣 程治军 +2 位作者 林启冰 王久林 万建民 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期587-594,共8页
从番茄中克隆了一个编码MYB转录因子家族R2R3-MYB亚类基因SlCMYB1。不同逆境胁迫下的表达模式分析结果表明,该基因受低温、高盐、干旱和ABA胁迫诱导表达。洋葱表皮亚细胞定位研究表明,SlCMYB1为核定位蛋白。为深入了解SlCMYB1基因与非... 从番茄中克隆了一个编码MYB转录因子家族R2R3-MYB亚类基因SlCMYB1。不同逆境胁迫下的表达模式分析结果表明,该基因受低温、高盐、干旱和ABA胁迫诱导表达。洋葱表皮亚细胞定位研究表明,SlCMYB1为核定位蛋白。为深入了解SlCMYB1基因与非生物逆境应答的关系,我们构建了SlCMYB1基因过表达载体来转化水稻,获得了16个转基因水稻株系。SlCMYB1在水稻中异源表达能显著提高转基因水稻植株的苗期抗冷性,增加脯氨酸合成的关键酶基因OsP5CS1,膜转运蛋白基因OsWCOR413等低温胁迫应答基因的表达水平,这暗示着SlCMYB1与OsP5CS1、OsWCOR413基因处于同一低温调控信号转导路径。本研究结果为通过遗传工程操控低温信号通路的方法改良冷敏感植物抗冷性提供了理论基础。 展开更多
关键词 R2R3-类型myb转录因子 SlCmyb1 水稻 抗冷性
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MYB转录因子基因MIXTA及其同源基因功能的研究进展 被引量:5
12
作者 张旸 吴佳岩 +2 位作者 吴雅妮 汤明威 解莉楠 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1230-1241,共12页
被子植物表皮细胞的形态学建成是目前研究工作中较为流行的生物学现象,其大致包括:表皮细胞形状的改变、表皮细胞附属衍生物的形成、根毛和毛状体的分化等方面,根据大量的试验结果总结发现MIXTA及其同源基因的生物学功能与该现象密切相... 被子植物表皮细胞的形态学建成是目前研究工作中较为流行的生物学现象,其大致包括:表皮细胞形状的改变、表皮细胞附属衍生物的形成、根毛和毛状体的分化等方面,根据大量的试验结果总结发现MIXTA及其同源基因的生物学功能与该现象密切相关。MIXTA是编码一个具有R2R3 MYB结构域的转录因子,自从1994年首次报道在金鱼草中被克隆以来,已经受到广泛的关注并在不同种属试验材料中被更深入地研究和讨论。MIXTA最早被证实的调节功能是促进金鱼草花瓣表皮细胞发生锥形化,使花瓣内表皮具有天鹅绒状质感,野生型金鱼草花瓣表面的锥形细胞在MIXTA突变时形状发生显著扁平化,花瓣内表皮的天鹅绒状质感消失,异位表达的MIXTA同时调控锥形细胞和多细胞腺体毛状体在不同组织部位的生长。近几年的研究发现,除金鱼草外,许多物种中都存在一些类似于MIXTA的基因,统称为MIXTA-like,如唐松草、猴面花、番茄、拟南芥等,特别是在拟南芥中,发现了很多与MIXTA具有高度相似性的基因,这些基因的功能与金鱼草中MIXTA的功能大同小异,并且对其下游基因的调节通路研究的较为透彻。同时,MIXTA作为MYB类转录因子可通过与b HLH转录因子及WD40转录因子结合发生互作,以复合物的形式间接地调控花青素的合成。MIXTA的存在可以影响花瓣表面的温度、气味、颜色、湿度、质感、光学特性等一系列生物学特征,并且通过改变植物花瓣的表型间接影响植物的授粉方式,建立自身的防御保护系统,由此体现MIXTA的生物学功能广泛,对其进行研究的生物学意义可见一斑。文章中首先简要介绍了MIXTA的基本结构,利用氨基酸序列比对及系统发生树等生物信息学技术比较分析MIXTA及其同源蛋白的亲源关系以及它们共同具有的R2R3 MYB结构域,然后从表皮细胞形状的改变(主要指表皮细胞锥形化)、表皮附属衍生物的形成(包括表皮蜡质的合成,毛状体和根毛细胞的分化)、参与激素代谢途径进而间接调控表皮细胞形态建成3方面来论述MIXTA及其同源基因的具体生物学功能,最后对MIXTA在农业、观赏园艺的应用及未来的研究方向进行了展望。 展开更多
关键词 MIXTA R2R3 myb结构域 myb转录因子 表皮细胞
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丹参中转录因子SmMYB87基因的克隆、亚细胞定位和表达分析 被引量:5
13
作者 张顺仓 冯思念 +3 位作者 顾雯 冯立国 王幼平 梁宗锁 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第17期3597-3604,共8页
目的克隆丹参Salvia miltiorrhiza中第14亚群R2R3 MYB转录因子基因SmMYB87的全长序列,并对其进行生物信息学和表达分析。方法以丹参总RNA为模板,利用同源克隆和c DNA快速扩增(RACE)技术获得SmMYB87 cDNA全长序列。运用生物信息学软件对... 目的克隆丹参Salvia miltiorrhiza中第14亚群R2R3 MYB转录因子基因SmMYB87的全长序列,并对其进行生物信息学和表达分析。方法以丹参总RNA为模板,利用同源克隆和c DNA快速扩增(RACE)技术获得SmMYB87 cDNA全长序列。运用生物信息学软件对该基因及其编码蛋白进行结构和理化性质分析,利用q RT-PCR测定SmMYB87在各器官中的表达并构建融合表达载体pTF-486-SmMYB87分析SmMYB87蛋白的亚细胞定位。结果 SmMYB87基因含有2个内含子和1个732 bp的开放阅读框(ORF),编码243个氨基酸。该基因在根、茎、叶和花中均有表达,且4个器官中的表达量没有显著差异。SmMYB87蛋白在细胞核和细胞膜上均有分布。结论 SmMYB87的序列结构和表达分析为进一步研究其在丹参中的生物学作用奠定了理论基础。 展开更多
关键词 丹参 R2R3 myb Smmyb87基因 基因克隆 亚细胞定位 组织特异性表达
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两个大豆MYB转录因子在原核细胞中的高效表达 被引量:1
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作者 李晓薇 苏连泰 +5 位作者 赵旭 翟莹 张海军 张庆林 李景文 王庆钰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期99-102,114,共5页
大豆(Glycine max)GmMYB12a与GmMYB12B2基因属于典型的植物R2R3-MYB转录因子。为进一步研究两个MYB12转录因子与相应顺式作用元件的相互作用,构建了两基因的原核表达载体,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中实现高效表达。利用PCR技术,将两端... 大豆(Glycine max)GmMYB12a与GmMYB12B2基因属于典型的植物R2R3-MYB转录因子。为进一步研究两个MYB12转录因子与相应顺式作用元件的相互作用,构建了两基因的原核表达载体,并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中实现高效表达。利用PCR技术,将两端带有特异酶切位点的GmMYB12a与GmMYB12B2全长基因亚克隆于原核表达载体pET-28a(+),酶切、测序鉴定确认获得两基因的重组原核表达载体pET-28a-GmMYB12a与pET-28a-GmMYB12B2。然后把重组载体转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达,提取细胞蛋白并采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达情况。结果表明,成功构建了两基因的原核表达载体,在IPTG浓度为1.2 mmol/L,诱导6 h后,目的蛋白能在Rosetta(DE3)中高效表达。 展开更多
关键词 大豆 myb转录因子 载体构建 pET-28a(+) Rosetta(DE3) 原核表达
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基于转录组的芒果MYB家族基因的鉴定及分析 被引量:7
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作者 郑斌 武红霞 +4 位作者 王松标 马小卫 许文天 罗纯 姚全胜 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第7期1285-1294,共10页
MYB家族作为植物中较大的转录因子家族之一,参与调控植物的多种生理活动。本研究基于芒果果实转录组测序结果,鉴定出71个MYB家族蛋白,其中包含1个4R-MYB蛋白、3个R1R2R3-MYB蛋白、60个R2R3-MYB蛋白和7个MYB相关蛋白。进化树及基序分析表... MYB家族作为植物中较大的转录因子家族之一,参与调控植物的多种生理活动。本研究基于芒果果实转录组测序结果,鉴定出71个MYB家族蛋白,其中包含1个4R-MYB蛋白、3个R1R2R3-MYB蛋白、60个R2R3-MYB蛋白和7个MYB相关蛋白。进化树及基序分析表明:除个别蛋白外,相同类型的MYB蛋白均聚在一起,且相近分支的MYB蛋白具有相同或相似的基序。60个全长MYB家族蛋白中,大部分为不稳定蛋白,且均为不含跨膜结构和信号肽的亲水性蛋白,亚细胞定位分析均定位于细胞核。进化树分析发现芒果R2R3-MYB蛋白与拟南芥有较高的保守性。R2R3-MYB蛋白保守域分析发现,R2和R3结构域均有多个氨基酸保守不变。GO分析发现芒果R2R3-MYB蛋白共注释到生物学过程、细胞组分和分子功能3大类功能的15个亚类。 展开更多
关键词 芒果 myb家族基因 R2R3-myb 生物信息学
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木薯MeHsfB3a互作蛋白的筛选和鉴定 被引量:3
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作者 李琳琳 王超群 +6 位作者 李春霞 骆凯 王红刚 陈银华 张肖飞 姚远 耿梦婷 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第12期3850-3856,共7页
热激蛋白转录因子Me Hsf B3a参与调控木薯对细菌性枯萎病的抗性,然而该蛋白不具有热激蛋白转录因子典型的转录激活结构域,可能与其他转录因子协同调控下游抗病基因表达。本研究构建了pGBKT7-MeHsfB3a载体,通过自激活实验证明Me Hsf B3a... 热激蛋白转录因子Me Hsf B3a参与调控木薯对细菌性枯萎病的抗性,然而该蛋白不具有热激蛋白转录因子典型的转录激活结构域,可能与其他转录因子协同调控下游抗病基因表达。本研究构建了pGBKT7-MeHsfB3a载体,通过自激活实验证明Me Hsf B3a不具有转录激活活性,通过筛选Xpm HN11病原菌侵染的SC8木薯cDNA文库,获得Me Hsf B3a的候选互作蛋白MeMYB268,该蛋白属于MYB转录因子基因家族。克隆获得MeMYB268基因的编码区,全长936 bp,编码311个氨基酸。利用酵母点对点杂交进一步验证了MeHsfB3a与MeMYB268的互作关系。分析NCBI数据库中Xpm病原菌侵染木薯叶片0、5、7 d后的转录组数据,发现MeMYB268基因的表达受病原菌侵染诱导,在侵染7 d后该基因表达为对照的11倍。表明MeMYB268参与木薯对细菌性枯萎病的响应过程。本研究筛选获得了MeHsfB3a的互作蛋白MeMYB268,有助于进一步解析MeHsfB3a调控木薯对细菌性枯萎病的抗病机理。 展开更多
关键词 木薯 MeHsfB3a转录因子 Me myb268转录因子 酵母双杂 互作蛋白
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非小细胞肺癌放疗患者发生放射性肺炎的影响因素
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作者 晁储瑞 王太芳 《中国民康医学》 2025年第11期4-6,10,共4页
目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)放疗患者发生放射性肺炎(RP)的影响因素。方法:选取2022年1月至2024年2月该院收治的102例NSCLC放疗患者进行横断面研究,统计NSCLC放疗患者RP发生情况,并根据是否发生RP将其分为发生组与未发生组。采用Logis... 目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)放疗患者发生放射性肺炎(RP)的影响因素。方法:选取2022年1月至2024年2月该院收治的102例NSCLC放疗患者进行横断面研究,统计NSCLC放疗患者RP发生情况,并根据是否发生RP将其分为发生组与未发生组。采用Logistic回归分析NSCLC放疗患者发生RP的影响因素。结果:102例NSCLC放疗患者中,发生RP 30例,发生率为29.41%(30/102);两组性别、吸烟史、饮酒史、合并基础疾病(高血压、糖尿病、冠心病)、病理类型、临床分期、肿瘤直径、肿瘤分化程度、肿瘤位置、放疗技术、放疗方法比较,差异均无统计学意义(P>0.05);发生组年龄≥60岁、单周期放射总剂量≥60 Gy、叉头样转录因子3(FOXP3)表达阳性、成髓细胞瘤转录因子第2亚型(MYBL2)表达阳性占比均高于未发生组,差异有统计学意义(P<0.05);Logistic回归分析结果显示,年龄≥60岁、单周期放射总剂量≥60 Gy、FOXP3表达阳性、MYBL2表达阳性均为NSCLC放疗患者发生RP的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:年龄≥60岁、单周期放射总剂量≥60 Gy、FOXP3表达阳性、MYBL2表达阳性均为NSCLC放疗患者发生RP的危险因素。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 放射性肺炎 叉头样转录因子3 成髓细胞瘤转录因子第2亚型 影响因素
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GDNF在精原干细胞中对H19和A-myb表达的调控研究 被引量:3
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作者 查巍巍 曹静萍 +2 位作者 张迪 冯立新 程金科 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1715-1718,1723,共5页
目的通过研究胶质细胞神经源性营养因子(GDNF)对H19和A-myb表达的调控,探讨GDNF调节精原干细胞自我更新的分子机制。方法采用混合酶消化和差速贴壁法从出生后6 d的小鼠睾丸中分离、鉴定并培养精原干细胞。用GDNF分别刺激精原干细胞和经... 目的通过研究胶质细胞神经源性营养因子(GDNF)对H19和A-myb表达的调控,探讨GDNF调节精原干细胞自我更新的分子机制。方法采用混合酶消化和差速贴壁法从出生后6 d的小鼠睾丸中分离、鉴定并培养精原干细胞。用GDNF分别刺激精原干细胞和经磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路抑制剂LY294002预处理的精原干细胞后,采用RT-PCR技术检测细胞H19和A-myb的表达。结果相关鉴定分析证实分离培养的细胞为精原干细胞。RT-PCR检测结果显示:GDNF刺激下的精原干细胞的H19和A-myb表达均显著上调,而经LY294002预处理的精原干细胞在GDNF刺激下其H19和A-myb的表达无明显变化。结论在体外培养的小鼠精原干细胞中,GDNF通过PI3K/Akt信号通路上调H19和A-myb的表达。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 精原干细胞 H19 A-myb 磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B
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SmPAP1基因特异性沉默导致转基因丹参体内的酚酸含量显著下降 被引量:5
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作者 王健 王浩如 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2348-2354,共7页
R2R3-MYB类转录因子在植物次生代谢中具有十分重要的调控作用。丹参SmPAP1是一个R2R3-MYB类转录因子基因。为了探讨SmPAP1是否参与丹参酚酸类化合物生物合成的调控,本研究以拟南芥miRNA319前体为基本骨架,通过over-lapping PCR技术构建a... R2R3-MYB类转录因子在植物次生代谢中具有十分重要的调控作用。丹参SmPAP1是一个R2R3-MYB类转录因子基因。为了探讨SmPAP1是否参与丹参酚酸类化合物生物合成的调控,本研究以拟南芥miRNA319前体为基本骨架,通过over-lapping PCR技术构建artifical miRNA(amiRNA)植物表达载体进而对SmPAP1进行特异性沉默。Real-time PCR和杂交结果显示:与对照株相比,阳性转基因株系中SmPAP1的mRNA水平均呈现不同程度的显著下降,同时酚酸类化合物合成途径中酶基因也呈现不同程度的显著下调;总酚含量测定结果显示:转化株系中总酚酸含量均约为同期野生型丹参的50%。研究结果说明SmPAP1可能作为一个重要的转录因子参与丹参酚酸类活性物质的代谢调控。 展开更多
关键词 丹参 amiRNA R2R3myb类转录因子 基因特异性沉默 酚酸
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MYB34, MYB51, and MYB 122 Distinctly Regulate Indolic Glucosinolate Biosynthesis in Arabidopsis thaliana 被引量:35
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作者 Henning Frerigmann Tamara Gigolashvili 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2014年第5期814-828,共15页
The MYB34, MYB51, and MYB122 transcription factors are known to regulate indolic glucosinolate (IG) biosynthesis in Arabidopsis thaliana. To determine the distinct regulatory potential of MYB34, MYB51, and MYB122, t... The MYB34, MYB51, and MYB122 transcription factors are known to regulate indolic glucosinolate (IG) biosynthesis in Arabidopsis thaliana. To determine the distinct regulatory potential of MYB34, MYB51, and MYB122, the accumulation of IGs in different parts of plants and upon treatment with plant hormones were analyzed in A. thaliana seedlings. It was shown that MYB34, MYB51, and MYB122 act together to control the biosynthesis of 13M in shoots and roots, with MYB34 controlling biosynthesis of IGs mainly in the roots, MYB51 regulating biosynthesis in shoots, and MYB122 having an accessory role in the biosynthesis of IGs. Analysis of glucosinolate levels in seedlings of myb34, myb51, myb122, myb34 myb51 double, and myb34 myb51 myb122 triple knockout mutants grown in the presence of abscisic acid (ABA), salicylic acid (SA), jasmonate (JA), or ethylene (ET) revealed that: (1) MYB51 is the central regulator of IG synthesis upon SA and ET signaling, (2) MYB34 is the key regulator upon ABA and JA signaling, and (3) MYB122 plays only a minor role in JA/ET-induced glucosinolate biosynthesis. The myb34 myb51 myb122 triple mutant is devoid of IGs, indicating that these three MYB factors are indispensable for IG production under standard growth conditions. 展开更多
关键词 indolic glucosinolates regulation R2R3 myb the triple myb34 myb51 myb122 mutant.
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