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gpc3/mxr7基因的原核表达及其多克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 李慎菁 秦建民 +3 位作者 满晓波 王红阳 邱秀华 吴孟超 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第8期15-17,共3页
目的 :通过原核表达并纯化GPC3蛋白 ,免疫家兔获得抗 -GPC3多克隆抗体 ,为深入研究 gpc3/mxr7基因的功能及其临床应用奠定基础。方法 :将 gpc3/mxr7基因片段亚克隆至 pPROEXTMHTb原核表达载体 ,采用融合 6 -his的融合蛋白方法原核表达G... 目的 :通过原核表达并纯化GPC3蛋白 ,免疫家兔获得抗 -GPC3多克隆抗体 ,为深入研究 gpc3/mxr7基因的功能及其临床应用奠定基础。方法 :将 gpc3/mxr7基因片段亚克隆至 pPROEXTMHTb原核表达载体 ,采用融合 6 -his的融合蛋白方法原核表达GPC3蛋白质 ,纯化蛋白后免疫家兔 ,鉴定并纯化出抗 -GPC3多克隆抗体。结果 :原核诱导表达出GPC3蛋白 ,免疫家兔后获得多克隆抗体 ,经鉴定为抗一GPC3特异性多克隆抗体 ,并能识别原核、真核表达的外源性及HepG2和Hu -h7细胞内源性GPC3蛋白。结论 :GPC3蛋白多克隆抗体能特异识别GPC3蛋白 ,可应用于gpc3/mxr7基因的功能研究 ,并为临床原发性肝癌的血清学早期诊断提供新的标记物。 展开更多
关键词 gpc3/mxr7基因 原发性肝癌 表达 诊断
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Study on MXR7 methylation in hepatocellular carcinoma
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作者 郭婷婷 曾锦章 王红阳 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2005年第4期193-196,共4页
Objective:To obtain information at the molecular level on the possible mechanism of MXR7 gene overexpressed in hepatocellular carcinoma (HCC) and also to provide a clue for further study. Methods:Genomic DNA was i... Objective:To obtain information at the molecular level on the possible mechanism of MXR7 gene overexpressed in hepatocellular carcinoma (HCC) and also to provide a clue for further study. Methods:Genomic DNA was isolated from 20 samples of hepatoma and paired non-HCC liver tissues, 2 cases of blood tumor and two types of cells (HepG2, MCF-7) and digested with two kinds of endonucleases (EcoR I and Eag I which is methylation sensitive endonuclease). And the condition of MXR7 gene methylation was examined and analyzed by Southern blot. Results: MXR7 was unmethylated neither in tested tumorous liver samples nor in paired non HCC liver tissues. In addition, the same result was found in 2 blood tumor samples and HepG2. Only two paired samples had different methylation outcome, one was unmethylated and the other was partly methylated. Conclusion: MXR7 is unmethylated in HHC, suggesting methylation of MXR7 may have no relation with its expression and regulation. 展开更多
关键词 mxr7/gpc3 METHYLATION hepatocellular carcinoma
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gpc3/mxr7基因在原发性肝癌及其它肿瘤组织中的表达 被引量:8
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作者 李慎菁 满晓波 +5 位作者 王红阳 唐亮 秦建民 曹慧芳 曾锦章 吴孟超 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 2004年第1期35-37,共3页
目的 研究原发性肝癌及其它肿瘤组织中 gpc3/mxr7基因的表达与临床病理指标的关系。方法 收集正常成人肝、肾、肺等组织 ,原发性肝癌组织 79例和其它肿瘤组织 9例 ,采用Northern杂交方法 ,检测 gpc3/mxr7基因的表达 ,并分析其与临床... 目的 研究原发性肝癌及其它肿瘤组织中 gpc3/mxr7基因的表达与临床病理指标的关系。方法 收集正常成人肝、肾、肺等组织 ,原发性肝癌组织 79例和其它肿瘤组织 9例 ,采用Northern杂交方法 ,检测 gpc3/mxr7基因的表达 ,并分析其与临床病理指标的相关性。 结果 Northern杂交显示 gpc3/mxr7基因在正常肝脏组织中不表达 ,在肾、肺中有低丰度的表达。 79例肝癌组织中 gpc3/mxr7基因阳性率为 73 4 1% (5 8/ 79) ,明显高于其癌旁组织 (6 32 % ,5 / 79,P <0 0 1) ,其阳性率与肝癌的大小和恶性程度呈正相关 (P <0 0 5 )。gpc3/mxr7基因在其它肿瘤中均不表达。结论 gpc3/mxr7基因可能是具有肝癌组织特异性的高表达基因 ,可望成为临床肝癌诊断、治疗和预后的辅助参考指标。 展开更多
关键词 表达 基因 原发性肝癌 肿瘤组织 临床病理指标 肝癌组织 诊断 NORTHERN杂交 丰度 肝脏组织
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