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牦牛MSTN基因第2外显子的遗传变异分析 被引量：3
1
作者 刘应祥 王海芳 +2 位作者 闫永红 陈斌 刘霞 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期15-19,共5页
研究采用PCR-SSCP方法分析了牦牛MSTN基因第2外显子遗传变异特征.结果表明:在第2外显子以及80bp的部分第1内含子和102bp的部分第2内含子,共556bp的区域中存在5处点突变,表现AA、BB、AB、AC 4种基因型,由A、B和C 3个复等位基因控制.各基... 研究采用PCR-SSCP方法分析了牦牛MSTN基因第2外显子遗传变异特征.结果表明:在第2外显子以及80bp的部分第1内含子和102bp的部分第2内含子,共556bp的区域中存在5处点突变,表现AA、BB、AB、AC 4种基因型,由A、B和C 3个复等位基因控制.各基因型频率分别为0.884 0、0.001 4、0.106 0和0.008 6.序列分析表明等位基因B在位于第2外显子411bp处发生A→G突变,导致编码的第235位氨基酸由组氨酸突变为精氨酸,其余4处突变位于等位基因C上,即位于第1内含子31bp处的G→A突变和65bp处的核苷酸缺失以及第2内含子529bp处的A→G突变,还有一处是位于第2外显子第121bp处的T→C沉默突变. 展开更多
关键词 牦牛 MSTN基因 第2外显子 遗传变异
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肌抑素对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响 被引量：1
2
作者 朱喆 张剑英 +6 位作者 华再东 任红艳 肖红卫 张立苹 郑新民 毕延震 卢晟盛 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第2期345-351,共7页
本研究旨在揭示肌抑素(MSTN)与基质金属蛋白酶(MMPs)的调控关系,探明MSTN对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响。对MSTN单等位基因敲除猪背膘组织进行转录组测序分析,复苏前期制备的MSTN基因敲除PK15细胞系:单等位基因敲除的PK3108细胞系和双... 本研究旨在揭示肌抑素(MSTN)与基质金属蛋白酶(MMPs)的调控关系,探明MSTN对PK15细胞MMP-2/7/9表达的影响。对MSTN单等位基因敲除猪背膘组织进行转录组测序分析,复苏前期制备的MSTN基因敲除PK15细胞系:单等位基因敲除的PK3108细胞系和双等位基因敲除的L18细胞系,通过实时荧光定量PCR和Wesrern blotting分别检测PK15、PK3108和L18细胞系中MSTN、MMP-2/7/9基因的mRNA和蛋白表达水平。结果发现,与野生型猪相比,MSTN单等位基因敲除猪背膘组织转录因子C/EBPδ、MMP-2/7基因mRNA表达量均极显著下调(P<0.01);细胞外基质中纤连蛋白(FN)和层连接蛋白(LN)含量均极显著增加(P<0.01)。复苏的PK3108和L18细胞呈现绿色荧光。实时荧光定量PCR结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的mRNA表达量均极显著低于PK15细胞(P<0.01);Western blotting结果显示,PK3108和L18细胞中MSTN、MMP-2/7/9的蛋白表达量均明显低于PK15细胞。本研究结果表明,在MSTN基因敲除的PK15细胞中,MSTN功能缺失能显著降低MMP-2/7/9的表达,且MMP-2/7/9蛋白表达降低的趋势与MSTN蛋白表达的趋势相一致。 展开更多
关键词 猪 肌抑素(MSTN) 基质金属蛋白酶2/7/9(MMP-2/7/9) PK15细胞
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Myostatin通过ERK1/2-PPAR-γ通路抑制猪皮下脂肪前体细胞成脂分化的研究 被引量：1
3
作者 魏庆腾 陈永芳 +3 位作者 刘壮 徐兴昱 邢华 潘士锋 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2022年第10期58-64,共7页
旨在探讨细胞外信号调节激酶1/2-过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(ERK1/2-PPAR-γ)信号通路在肌肉生长抑制素(MSTN)抑制猪皮下脂肪前体细胞(PSPAs)成脂分化中的作用。PSPAs在诱导分化培养液(DIM)处理同时,随机分3组:对照组(0 ng/mL MSTN)... 旨在探讨细胞外信号调节激酶1/2-过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(ERK1/2-PPAR-γ)信号通路在肌肉生长抑制素(MSTN)抑制猪皮下脂肪前体细胞(PSPAs)成脂分化中的作用。PSPAs在诱导分化培养液(DIM)处理同时,随机分3组:对照组(0 ng/mL MSTN)、100 ng/mL MSTN组(100 ng/mL MSTN)以及ERK1/2特异性抑制剂PD98059和100 ng/mL MSTN联合组(PD98059+100 ng/mL MSTN)。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞增殖活力,油红O染色法及甘油三酯(TG)定量分析成脂分化,使用荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)、CCAAT/增强子结合蛋白-α(C/EBP-α)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、细胞外信号调节激酶(ERK)及其磷酸化ERK(p-ERK)表达。结果表明:细胞增殖活力在3组间无显著性差异(P>0.05)。与对照组相比,100 ng/mL MSTN处理48 h后细胞内脂滴沉积量、油红O阳性细胞数及TG含量均显著降低(P<0.05),PPAR-γ、C/EBP-α、FAS和ACC的mRNA表达量均显著下降(P<0.05),p-ERK/ERK比值显著增加(P<0.05);与100 ng/mL MSTN组相比,PD98059+100 ng/mL MSTN组p-ERK/ERK比值显著降低(P<0.05),而PPAR-γ、C/EBP-α、FAS和ACC的表达均显著升高(P<0.05),与此同时,细胞内脂滴沉积量、油红O阳性细胞数及TG含量均显著升高(P<0.05)。综上,ERK1/2-PPAR-γ信号通路可能介导了MSTN对PSPAs成脂分化的调控,结果为将MSTN作为抑制猪皮下脂肪沉积的分子靶点提供了新的理论依据。 展开更多
关键词 肌肉生长抑制素 猪 皮下脂肪前体细胞 成脂分化 ERK1/2-PPAR-γ通路
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一种新的番鸭MSTN基因转录本的克隆及真核表达 被引量：4
4
作者 郝文博 杨晓宇 +2 位作者 李新华 谷文峰 胡兰 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期377-382,共6页
利用RT-PCR扩增MSTN cDNA全序列,然后进行克隆、测序;将重组质粒pEGFP-N1-MSTN-2通过脂质体瞬时转染番鸭成纤维细胞,用RT-PCR和SDS-PAGE检测其蛋白表达.结果表明,番鸭体内存在2种MSTN基因转录本,MSTN-1(EU336991)和MSTN-2(EU336992),大... 利用RT-PCR扩增MSTN cDNA全序列,然后进行克隆、测序;将重组质粒pEGFP-N1-MSTN-2通过脂质体瞬时转染番鸭成纤维细胞,用RT-PCR和SDS-PAGE检测其蛋白表达.结果表明,番鸭体内存在2种MSTN基因转录本,MSTN-1(EU336991)和MSTN-2(EU336992),大小分别为1128 bp和754 bp,同源性为94%;且MSTN-2是一个全新的MSTN转录本,含有1个开放阅读框,可编码124个氨基酸.将pEGFP-N1-MSTN-2转染番鸭成纤维细胞48 h后,在荧光显微镜下可观察到绿色荧光蛋白表达,蛋白大小约为14 kDa.这对于进一步研究MSTN基因功能及作用机理具有重要意义. 展开更多
关键词 mstn-2 克隆 真核表达
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杜仲总黄酮对大鼠神经源性肌萎缩的影响 被引量：5
5
作者 陈全利 胡莉 +1 位作者 魏玮 李三华 《合肥医学院学报》 2016年第6期563-567,共5页
目的观察杜仲总黄酮对大鼠神经源性肌萎缩的治疗效果。方法以30只1月龄雌性SD大鼠作为实验动物,随机选取24只大鼠夹伤右后肢坐骨神经制作神经源性肌萎缩模型,并分为4组:模型组、杜仲总黄酮低、中、高剂量组;不做坐骨神经夹伤处理的剩余... 目的观察杜仲总黄酮对大鼠神经源性肌萎缩的治疗效果。方法以30只1月龄雌性SD大鼠作为实验动物,随机选取24只大鼠夹伤右后肢坐骨神经制作神经源性肌萎缩模型,并分为4组:模型组、杜仲总黄酮低、中、高剂量组;不做坐骨神经夹伤处理的剩余6只大鼠作为对照组。在自由饮食状态下,模型组和对照组不予以灌胃处理,杜仲总黄酮低、中、高剂量组采用灌胃方式分别喂饲TFE 50、100、200 mg/kg/d,共4周。实验处理结束后,各组大鼠麻醉处死取右后肢腓肠肌称重并制作HE染色切片测量肌细胞横截面积,Western blot方法检测肌肉组织中肌肉抑制素(MSTN)蛋白和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果与对照组相比膜型组的腓肠肌重量和肌细胞的横截面积明显减少;给予杜仲总黄酮的各组中腓肠肌重量和肌细胞的横截面积也減少,但其减少程度较模型组降低,且与剂量呈正相关。与对照组相比,模型组中MSTN蛋白的表达量明显增多;杜仲总黄酮各组中MSTN蛋白与对照组相近,且各组间的表达量无统计学差异。与对照组相比,模型组中促凋亡蛋白Bax表达量明显增加,而抑凋亡蛋白Bcl-2表达量明显下降;杜仲总黄酮的各组中,当给予剂量达到100 mg/kg/d及以上时可明显抑制Bax的表达量和促进Bcl-2的表达量(P<0.05)。结论杜仲总黄酮能改善神经损伤后SD大鼠的肌萎缩症状,可以通过调节MSTN蛋白、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达量而减少其肌肉重量和肌细胞大小的损失。 展开更多
关键词 神经源性肌萎缩 杜仲 黄酮 腓肠肌 MSTN蛋白 BAX BCL-2
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转移因子对肉鸡增重及细胞因子影响的研究 被引量：1
6
作者 刘霞 董玉兰 +7 位作者 郭卉 盛晓丹 秦春芝 张新超 黄迪海 张再辉 秦卓明 肖希龙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第7期44-48,共5页
为了探讨转移因子(TF)对肉鸡增重及细胞因子的影响,试验将随机选取的200只1日龄健康肉鸡分为4组,1~3组自5日龄开始灌服不同剂量的TF,分别为0.1 mL/只(T1组)、0.25 mL/只(T2组)、1 mL/只(T3组),第4组为空白对照(不灌服TF,CK组)。每次连... 为了探讨转移因子(TF)对肉鸡增重及细胞因子的影响,试验将随机选取的200只1日龄健康肉鸡分为4组,1~3组自5日龄开始灌服不同剂量的TF,分别为0.1 mL/只(T1组)、0.25 mL/只(T2组)、1 mL/只(T3组),第4组为空白对照(不灌服TF,CK组)。每次连续灌服7 d,间隔7 d后再次灌服,共灌服3次。在每个灌服期末,即第12,26,40日龄进行称重,采血检测白细胞介素2(IL-2)、肌肉生长抑制素(MSTN)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量,利用DPS 2000软件进行统计学分析,Origin 9.0软件进行相关性分析,并选择使肉鸡增重最明显的TF剂量进行田间推广试验。结果表明:给肉鸡灌服TF后,T1~T3组的平均体重在第26,40日龄均明显高于CK组,尤其是在第40日龄时,T1~T3组与CK组比较差异显著(P<0.05);T1~T3组IL-2的分泌量比CK组显著增加(P<0.05),而MSTN和TGF-β1的分泌量显著减少(P<0.05);IL-2含量和体重之间呈正相关,而MSTN、TGF-β1含量和体重之间呈负相关;TF应用组肉鸡体重比空白组提高4.12%。说明连续使用TF具有明显的增重效应,且与细胞因子的调控密切相关。 展开更多
关键词 转移因子(TF) 商品肉鸡 白细胞介素2(IL-2) 肌肉生长抑制素(MSTN) 转化生长因子-β1(TGF-β1) 增重
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IGFs和MSTN基因表达量与种猪生长性状的相关性研究 被引量：6
7
作者 张斌 相德才 +8 位作者 赵智勇 吴国权 刘韶娜 胡清泉 陈吉红 韩敏 常雅洁 杨仁灿 赵彦光 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第2期263-270,共8页
【目的】探寻简洁、高效的种猪分子育种方法,检测和分析胰岛素样生长因子基因(IGF-1、IGF-2)和肌生成抑制素基因(MSTN)在大约克公猪、杜洛克公猪和长白公猪耳组织中的相对表达量。【方法】采用荧光定量PCR技术对目的基因在种猪耳组织中... 【目的】探寻简洁、高效的种猪分子育种方法,检测和分析胰岛素样生长因子基因(IGF-1、IGF-2)和肌生成抑制素基因(MSTN)在大约克公猪、杜洛克公猪和长白公猪耳组织中的相对表达量。【方法】采用荧光定量PCR技术对目的基因在种猪耳组织中的相对表达量进行检测,并运用SPSS软件进行表达量数据分析及其与种猪生长性状的相关性分析。【结果】大约克公猪中IGF-1基因与MSTN基因表达量均显著高于IGF-2基因表达量(P<0.05),杜洛克公猪中IGF-1基因与IGF-2基因表达量存在显著相关(P<0.05),长白公猪中目的基因表达量两两之间存在显著差异(P<0.05);IGF-1基因和MSTN基因在长白猪中相对表达量显著高于大约克猪(P<0.05);IGF-1基因在长白公猪耳组织表达量与生长性状(饲料利用率、总耗料、日耗料和生长指数)存在显著相关(P<0.05),MSTN基因在耳组织表达量与大约克公猪(体长、胸围、胸深、日增重、总耗料、日耗料和生长指数)、杜洛克公猪(体长、半腿臀围)、长白公猪(生长指数)生长性状呈显著相关(P<0.05),联合分析显示目的基因在不同猪种耳组织中表达量与其生长性状均显著相关(P<0.05)。【结论】IGF-1、IGF-2和MSTN基因可能在猪生长性状的形成过程中具有协同调控作用,为种猪分子育种提供了理论基础。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 胰岛素样生长因子-2 肌生成抑制素 荧光定量PCR 公猪 生长性状
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