鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响 被引量：3

1

作者 余祖华 丁轲 +13 位作者 贾艳艳 郁川 何雷 廖成水 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 门凯凯 张瑾 余祖玲 周子誉 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期2567-2575,共9页

旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的... 旨在探讨鸡TGFβ1对MDCC-MSB1细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响。作者将构建的鸡TGFβ1过表达载体、干扰表达载体以及相应阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,然后检测转染后各组细胞鸡TGFβ1的表达水平、细胞增殖能力、细胞周期与凋亡,细胞的迁移与侵袭能力。结果显示,与相应阴性对照相比,转染TGFβ1过表达质粒可显著上调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著抑制MDCC-MSB1细胞的增殖,且使G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时增加细胞凋亡率,降低细胞的迁移与侵袭能力;转染TGFβ1干扰表达质粒可显著下调MDCC-MSB1细胞的TGFβ1表达水平,显著促进MDCC-MSB1细胞的增殖,G1期细胞减少、S和G2期细胞增加,同时降低细胞凋亡率,增加细胞的迁移与侵袭能力。结果表明,鸡TGFβ1可抑制MDCC-MSB1细胞增殖、迁移与侵袭,促进其凋亡。 展开更多

关键词 TGFΒ1 MDCC-msb1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

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gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响 被引量：3

2

作者 余祖华 丁轲 +11 位作者 郁川 贾艳艳 何雷 廖成水 李静 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 张梦珂 邱静静 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2496-2504,共9页

为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测... 为了解gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞生物学行为的影响,将人工合成的gga-miR-155模拟物、gga-miR-155抑制物以及阴性对照瞬时转染MDCC-MSB1细胞。然后采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MDCC-MSB1细胞中gga-miR-155的表达水平,CCK-8法检测转染后细胞增殖能力的变化,流式细胞术检测MDCC-MSB1细胞的细胞周期与凋亡的变化,Transwell检测MDCC-MSB1细胞的迁移、侵袭能力的变化。结果显示,gga-miR-155模拟物可显著上调MDCC-MSB1细胞gga-miR-155表达水平,促进MDCC-MSB1细胞增殖,细胞G1期细胞减少,S和G2期细胞增加,同时凋亡减少,迁移、侵袭能力增加;gga-miR-155抑制物可显著下调MDCCMSB1细胞gga-miR-155表达水平,抑制MDCC-MSB1细胞增殖,细胞G1期细胞增加、S和G2期细胞减少,同时凋亡增加,迁移、侵袭能力下降。结果表明,gga-miR-155可促进MDCC-MSB1细胞增殖、迁移和侵袭,抑制其凋亡。 展开更多

关键词 gga-miR-155 MDCC-msb1细胞 细胞增殖 细胞凋亡 迁移 侵袭

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新城疫病毒HN融合蛋白对马立克肿瘤细胞MDCC-MSB1凋亡的影响 被引量：2

3

作者 刘一尘 张春杰 +3 位作者 程相朝 李银聚 吴庭才 张谦 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期651-654,共4页

为研究新城疫病毒HN融合蛋白抗肿瘤细胞的作用机制,以马立克病肿瘤细胞系MDCC-MSB1为体外研究对象,将HN融合蛋白与MDCC-MSB1细胞共培养后,应用CCK-8法检测HN融合蛋白对肿瘤细胞的增殖抑制作用,用琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂程度,用流式... 为研究新城疫病毒HN融合蛋白抗肿瘤细胞的作用机制,以马立克病肿瘤细胞系MDCC-MSB1为体外研究对象,将HN融合蛋白与MDCC-MSB1细胞共培养后,应用CCK-8法检测HN融合蛋白对肿瘤细胞的增殖抑制作用,用琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂程度,用流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果表明,HN融合蛋白对MDCC-MSB1肿瘤细胞的增殖有抑制作用,并呈时间、剂量依赖性;DNA出现断裂现象;MDCC-MSB1细胞出现凋亡。证实,HN融合蛋白体外可诱导MDCC-MSB1肿瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 新城疫病毒 HN融合蛋白 马立克病肿瘤细胞MDCC-msb1 凋亡

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鸡p15因子抑制MDCC-MSB1细胞的增殖及端粒酶活性 被引量：1

4

作者 艾永兴 邹亚学 +2 位作者 潘风光 郝军元 张玉静 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1296-1300,共5页

为探讨鸡p15基因的生物学功能,试验构建了鸡p15基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-p15,并转染到鸡MDV转化的淋巴细胞系MDCC-MSB1,应用G418筛选掉未转染的细胞,对存活细胞p15蛋白的表达、细胞增殖力、群体倍增时间、细胞周期和端粒酶的活性... 为探讨鸡p15基因的生物学功能,试验构建了鸡p15基因的真核表达载体pcDNA3.1(+)-p15,并转染到鸡MDV转化的淋巴细胞系MDCC-MSB1,应用G418筛选掉未转染的细胞,对存活细胞p15蛋白的表达、细胞增殖力、群体倍增时间、细胞周期和端粒酶的活性进行了检测。结果表明,与转染空质粒pcDNA3.1(+)细胞相比,转染了p15基因的细胞稳定表达了p15蛋白;细胞的增殖受到了抑制,抑制率达45%～74%;群体倍增时间从27h延长至416h;流式细胞仪分析细胞周期发现,p15蛋白引起了细胞多停滞于G0/G1期,S和G2/M期细胞比例下降;端粒酶活性受到抑制。 展开更多

关键词 P15 MDCC—msb1 细胞增殖 端粒酶活性

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硝酸镧对MDCC-MSB1细胞形态及细胞周期的影响 被引量：1

5

作者 林洪金 丁岚峰 +1 位作者 李金龙 徐世文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期70-74,共5页

以体外培养的MDCC-MSB1细胞为研究对象,分别经终浓度为0、8、32、64μg/mL的硝酸镧作用24、48、72 h后,采用台盼蓝染色测定细胞活性,荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术测定细胞周期。研究了硝酸镧对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细... 以体外培养的MDCC-MSB1细胞为研究对象,分别经终浓度为0、8、32、64μg/mL的硝酸镧作用24、48、72 h后,采用台盼蓝染色测定细胞活性,荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术测定细胞周期。研究了硝酸镧对鸡MD肿瘤细胞株MDCC-MSB1细胞形态及细胞周期的影响,进而探讨硝酸镧对MDCC-MSB1细胞的影响机制。结果表明,硝酸镧能够降低MDCC-MSB1的细胞活性,能够引起典型的凋亡形态学变化及细胞周期的改变,并呈现细胞凋亡的细胞型,变化均呈现时间-剂量效应。证实,一定浓度的硝酸镧具有诱导体外培养MDCC-MSB1细胞凋亡的作用。 展开更多

关键词 硝酸镧 MDCC—msb1细胞 细胞周期 细胞凋亡

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钙稳态失衡在氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用 被引量：1

6

作者 赵兰 李文军 +1 位作者 王金涛 徐世文 《中国家禽》 北大核心 2008年第3期9-12,共4页

为研究钙稳态失衡在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用,将MDCC-MSB1细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,加入终浓度为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0mmol/L的LaCl3,继续培养24h后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率,DNALadder法和TU... 为研究钙稳态失衡在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用,将MDCC-MSB1细胞常规培养于RPMI-1640培养液中,加入终浓度为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0mmol/L的LaCl3,继续培养24h后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率,DNALadder法和TUNEL法检测细胞凋亡,以Fura-2为荧光探针检测细胞内[Ca2+]i的变化。在LaCl3浓度为0.5～4.0mmol/L范围内,细胞的增殖抑制率增加,细胞凋亡数量和细胞内[Ca2+]i呈升高趋势,并呈剂量-效应关系。结果表明,LaCl3能抑制MDCC-MSB1细胞的增殖,并可能通过改变[Ca2+]i而诱导其发生凋亡。 展开更多

关键词 氯化镧 MDCC—msb1 DNA损伤 钙稳态 凋亡

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chTERT mRNA表达及端粒酶活性在氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用 被引量：1

7

作者 张子威 徐世文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期437-444,共8页

为探讨chTERT mRNA表达及端粒酶活性在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用。将肿瘤细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为3mmol/L的LaCl3共培养,分别于培养第12、24、36和48h,用透射电镜观察LaCl3致MDCC-MSB1细胞的形态学变化,... 为探讨chTERT mRNA表达及端粒酶活性在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用。将肿瘤细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为3mmol/L的LaCl3共培养,分别于培养第12、24、36和48h,用透射电镜观察LaCl3致MDCC-MSB1细胞的形态学变化,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,以TRAP-PCR银染法检测端粒酶活性,以实时荧光定量PCR法检测chTERT基因mRNA的表达量变化。结果显示,3mmol/L的LaCl3作用第12、24、36和48h,透射电镜和流式细胞仪法均检测到明显的细胞凋亡变化,端粒酶活性下降,chTERT mRNA的表达量下降,并呈时间-效应关系。证实,LaCl3可通过降低chTERT mRNA的表达量抑制MDCC-MSB1细胞的端粒酶活性而诱导其发生凋亡。 展开更多

关键词 氯化镧 MDCC-msb1 细胞凋亡 端粒酶活性 端粒酶逆转录酶MRNA

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MSB1细胞上MATSA的分离鉴定及纯化

8

作者 穆杨 张彦明 +4 位作者 童德文 王玉东 李崴 李玉清 郑增忍 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第12期1-5,共5页

将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1... 将培养收获的M SB 1细胞用磷酸盐缓冲液洗涤3次后,调整细胞浓度为2×106/mL,然后每毫升细胞悬液加2 IU木瓜蛋白酶和1 mm o l/L的L-胱氨酸溶液0.1 mL,混匀后37℃作用1 h以分离M SB 1细胞表面M AT-SA。对木瓜蛋白酶处理前后的M SB 1细胞进行间接荧光抗体染色以检测M ATSA的分离情况。获得的M ATSA粗提物经超滤浓缩和Sephadex G-75凝胶纯化后,用SDS-PAGE检测纯化的结果。试验结果表明,从M SB 1细胞表面分离到M ATSA,经电泳获得了纯化的M ATSA,其相对分子质量约为35 ku。结果为M ATSA单克隆抗体的制备及其相关的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 msb1 马立克病肿瘤相关表面抗原 MATSA的分离与纯化

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MDCC-MSB1培养基上清液中DNA活性的定性研究

9

作者 李建伟 马云燕 +3 位作者 白侠 李曦 徐宜为 刘宝全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第5期379-381,共3页

将 Ｍ Ｄ Ｃ Ｃ Ｍ Ｓ Ｂ１ ４８ 小时培养物 １０００ｒ／ｍ ｉｎ 离心的上清液分别用 Ｒ Ｎ Ａ 酶、 Ｄ Ｎ Ａ 酶和蛋白酶 Ｋ 处理后，进行体外试验。结果表明，只有 Ｄ Ｎ Ａ 酶处理后的上清液失去了体外抑制 Ｍ Ｄ Ｖ“８１... 将 Ｍ Ｄ Ｃ Ｃ Ｍ Ｓ Ｂ１ ４８ 小时培养物 １０００ｒ／ｍ ｉｎ 离心的上清液分别用 Ｒ Ｎ Ａ 酶、 Ｄ Ｎ Ａ 酶和蛋白酶 Ｋ 处理后，进行体外试验。结果表明，只有 Ｄ Ｎ Ａ 酶处理后的上清液失去了体外抑制 Ｍ Ｄ Ｖ“８１４”增殖的作用。将该上清液 １００００ｒ／ｍ ｉｎ 离心所得的沉淀分别用上述酶处理后进行体内试验。结果表明，只有 Ｄ Ｎ Ａ 酶处理的样品失去了体内促进 Ｍ Ｄ Ｖ 京１ 株致瘤的作用。同时，电泳分析结果证明，该上清液中确实存在 Ｄ Ｎ Ａ。 展开更多

关键词 MDCC-msb1 培养物上清液 MDV DNA

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钙稳态失衡在氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用(英文)

10

作者 赵兰 李文军 +1 位作者 王金涛 徐世文 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期643-648,共6页

为探讨钙稳态失衡在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用,MDCC-MSB1细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5和4mmol·L-1的LaCl3,继续培养24h后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率,DNA Ladder法和TUNEL法检... 为探讨钙稳态失衡在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用,MDCC-MSB1细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5和4mmol·L-1的LaCl3,继续培养24h后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率,DNA Ladder法和TUNEL法检测细胞凋亡,以Fura-2为荧光探针检测细胞内[Ca2+]i的变化。结果表明,在LaCl3浓度为0.5～4mmol·L-1时,细胞的增殖抑制率增加,细胞凋亡数量和细胞内[Ca2+]i呈升高趋势,并呈剂量-效应关系。这表明LaCl3能抑制MDCC-MSB1细胞的增殖,并可能通过改变[Ca2+]i而诱导其发生凋亡。 展开更多

关键词 氯化镧 MDCC-msb1 DNA损伤 钙稳态 凋亡

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鸡传染性贫血病病毒在MDCC-MSB1细胞的传代致弱研究

11

作者 李鸿鑫 吴波良 +4 位作者 张新珩 杨瑞杰 蔺文成 陈伟国 谢青梅 《中国家禽》 北大核心 2017年第15期26-29,共4页

为研究鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)减毒活疫苗,试验将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在鸡淋巴细胞MDCC-MSB1上进行37℃和40℃传代致弱。结果显示:40℃条件下传至60代和37℃下传至90代,病毒的VP1氨基酸分别有2个和3个突变... 为研究鸡传染性贫血病(Chicken infectious anemia,CIA)减毒活疫苗,试验将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在鸡淋巴细胞MDCC-MSB1上进行37℃和40℃传代致弱。结果显示:40℃条件下传至60代和37℃下传至90代,病毒的VP1氨基酸分别有2个和3个突变,两种条件下有2个突变是在同一位置;VP2和VP3很稳定,在试验中未发生氨基酸突变;致病性试验发现,突变毒株仍具有致病性,但有降低的趋势。试验表明,鸡淋巴细胞传代CIAV可以引发包含中和抗原表位的VP1突变,且提高温度能促进变异速度,为进一步研究CIAV的变异特征、弱毒疫苗研发提供了参考依据。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病病毒 MDCC-msb1细胞 传代致弱 疫苗

原文传递

沙冬青生物碱对MDCC-MSB1细胞增殖抑制与诱导凋亡的影响

12

作者 哈利 贾宁 方梅 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1198-1201,共4页

采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、透射电子显微镜观察及流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,... 采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、透射电子显微镜观察及流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞的增殖抑制及诱导凋亡的作用。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具有剂量和时间效应关系。经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞,并进一步诱导HDCC-MSB1细胞凋亡。电子显微镜观察也表明,经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中,大量HDCC-MSB1细胞凋亡。结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞增殖有显著抑制效应,其抑制机理为诱导HDCC-MSB1细胞凋亡。 展开更多

关键词 沙冬青生物碱 HDCC-msb1细胞 增殖抑制 诱导凋亡

原文传递

端粒酶活性在氯化镧诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中的作用

13

作者 张子威 徐世文 《中国稀土学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期838-843,共6页

探讨端粒酶活性在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中细胞中的作用。肿瘤细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为3 mmol.L-1的LaCl3,继续培养12,24,36,48 h后,应用琼脂糖凝胶电泳和AO/EB双荧光染色检测细胞凋亡,以FITC-（C3TA2）3PNA... 探讨端粒酶活性在LaCl3诱导MDCC-MSB1细胞凋亡中细胞中的作用。肿瘤细胞常规培养于RPMI1640培养液中,加入终浓度为3 mmol.L-1的LaCl3,继续培养12,24,36,48 h后,应用琼脂糖凝胶电泳和AO/EB双荧光染色检测细胞凋亡,以FITC-（C3TA2）3PNA为荧光探针检测细胞内端粒长度,以TRAP-PCR银染法检测端粒酶活性。LaCl3浓度为3 mmol.L-1,作用0~48 h,细胞的琼脂糖凝胶电泳和AO/EB双荧光染色法均观察到明显的细胞凋亡变化,细胞内端粒长度缩短,端粒酶活性下降,并呈时间-效应关系。LaCl3可通过抑制MDCC-MSB1细胞端粒酶活性而诱导其发生凋亡。 展开更多

关键词 氯化镧 MDCC-msb1 凋亡 端粒酶活性 稀土

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MDCC-MSB1细胞酵母双杂交cDNA表达文库的构建与鉴定 被引量：5

14

作者 崔鹏鹏 高宏雷 +4 位作者 李凯 高立 高玉龙 祁小乐 王笑梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期22-25,共4页

提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度... 提取生长状态良好的MDCC-MSB1细胞的mRNA,以5′端标记有生物素的Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter。分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.1×106 CFU,平均插入片段长度为1190bp,阳性重组率为100%。入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库,平均滴度为1×105 CFU/mL,文库总容量为1.2×106 CFU,平均插入片段长度为1087bp,重组率为100%。构建的表达文库具有较高的质量,为研究鸡传染性贫血病毒的受体及其细胞嗜性奠定了基础。 展开更多

关键词 MDCC-msb1细胞 CDNA文库 鸡传染性贫血 酵母双杂交

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沙冬青生物碱对MDCC-MSB1端粒酶活性和细胞凋亡的影响 被引量：3

15

作者 亢恺 方梅 贾宁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期409-412,共4页

采用单管法一步完成端粒重复序列扩增(TRAP)方法检测沙冬青总生物碱(50、100、150及200μg/mL)对体外培养的鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株作用前后端粒酶活性变化的影响,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期的改变。结果显示,沙冬青... 采用单管法一步完成端粒重复序列扩增(TRAP)方法检测沙冬青总生物碱(50、100、150及200μg/mL)对体外培养的鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株作用前后端粒酶活性变化的影响,并采用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期的改变。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞的端粒酶活性,且这种抑制有剂量和时间效应关系。同时,经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞。上述结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞端粒酶活性具有显著的抑制效果,并进一步诱导了细胞凋亡。 展开更多

关键词 沙冬青生物碱 HDCC-msb1细胞 端粒酶 凋亡

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沙冬青生物碱对MDCC-MSB1细胞增殖及细胞线粒体膜电位的影响 被引量：4

16

作者 哈利 张惠英 +1 位作者 贾宁 方梅 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期232-236,共5页

采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株的增殖抑制及对线粒体膜电位的影响。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具... 采用体外细胞培养技术、噻唑蓝(MTT)还原法、流式细胞技术检测梯度浓度沙冬青总生物碱对体外培养鸡马立克氏病肿瘤HDCC-MSB1细胞株的增殖抑制及对线粒体膜电位的影响。结果显示,沙冬青生物碱可显著抑制HDCC-MSB1细胞增殖,且这种抑制具有剂量和时间效应关系。经沙冬青生物碱作用的HDCC-MSB1细胞培养样本中有明显的DNA低含量颗粒("亚G1期"峰),细胞周期各时相分布发生改变,细胞增殖在G1被阻滞。细胞线粒体膜电位(△Ψm)明显下降,也呈现出剂量和时间效应关系。结果表明,沙冬青生物碱对HDCC-MSB1细胞增殖有显著抑制效应,且抑制依赖于诱导HDCC-MSB1细胞线粒体膜电位(△Ψm)的下降,并进一步诱导了该细胞的凋亡。 展开更多

关键词 沙冬青生物碱 HDCC-msb1细胞 线粒体膜电位(△Ψm) 增殖抑制

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牛磺酸对MDCC-MSB1细胞端粒酶表达水平及其活性的影响 被引量：1

17

作者 于洋洋 陈涛 +3 位作者 邱淑敏 林淑梅 胡建民 汉丽梅 《饲料工业》 北大核心 2014年第5期17-19,共3页

为探讨牛磺酸对鸡MDCC-MSB1肿瘤细胞系增殖的影响及其可能的作用机理,研究在牛磺酸应用适宜浓度范围内,使用添加0%、0.5%、1.0%、2.0%牛磺酸的RPMI1640培养基,培养MDCCMSB1细胞系,探讨牛磺酸对鸡MD肿瘤细胞chTERT的表达及其端粒酶活性... 为探讨牛磺酸对鸡MDCC-MSB1肿瘤细胞系增殖的影响及其可能的作用机理,研究在牛磺酸应用适宜浓度范围内,使用添加0%、0.5%、1.0%、2.0%牛磺酸的RPMI1640培养基,培养MDCCMSB1细胞系,探讨牛磺酸对鸡MD肿瘤细胞chTERT的表达及其端粒酶活性的影响。结果显示,与对照组相比,各牛磺酸组MD肿瘤细胞chTERT转录水平和端粒酶活性均降低,其中1%、2%牛磺酸浓度组的chTERT转录水平和端粒酶活性显著低于对照组(P<0.05)。牛磺酸对chTERT转录水平及端粒酶活性的下调,可能抑制肿瘤细胞的增殖。 展开更多

关键词 牛磺酸 端粒酶 MDCC—msb1细胞系

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鸡RORα真核表达载体的构建及其在MSB1细胞中的表达

18

作者 尤钊 左珂朦 +5 位作者 余祖华 丁轲 王垚垚 刘彤 张梦珂 邱静静 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第7期1791-1797,共7页

为构建鸡维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)的真核表达载体,并检测其在MSB1细胞中的表达效果,本研究参照GenBank中鸡RORα基因序列(登录号:NM_001289887.1)设计特异性引物,从鸡肝脏组织中... 为构建鸡维甲酸相关孤核受体α(retinoid acid receptor related orphan receptorα,RORα)的真核表达载体,并检测其在MSB1细胞中的表达效果,本研究参照GenBank中鸡RORα基因序列(登录号:NM_001289887.1)设计特异性引物,从鸡肝脏组织中提取总RNA,经反转录合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增,将扩增的特异性RORα基因片段连接pMD18-T载体,构建克隆载体pMD18-T-RORα,再用SalⅠ和BamHⅠ双酶切克隆载体pMD18-T-RORα和真核表达载体pEGFP-N1,将酶切回收的RORα与pEGFP-N1片段进行连接,构建重组真核表达载体pEGFP-N1-RORα,经PCR、酶切和测序验证准确性后,将其转染MSB1细胞,于转染后48h荧光显微镜下观察EGFP的表达情况,并采用实时荧光定量PCR检测鸡RORα在MSB1细胞中的表达水平。结果显示,从构建的重组质粒pEGFP-N1-RORα中可扩增出大小约1 600bp的特异性片段,用SalⅠ和BamHⅠ可切出大小约4 700和1 600bp的两条带。实时荧光定量PCR结果显示,转染MSB1细胞48h后,与对照组相比,重组真核表达载体转染组中鸡RORα基因mRNA水平显著增加(P<0.05)。表明本试验成功构建了鸡RORα的真核表达载体,该载体可在MSB1细胞中表达鸡RORα,为进一步研究鸡RORα对MSB1细胞增殖的影响奠定基础。 展开更多

关键词 鸡 甲酸相关孤核受体α(RORα)基因 真核表达载体 msb1细胞 表达

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gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞转录组的影响

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作者 余祖华 贾艳艳 +7 位作者 何雷 廖成水 李静 魏颖 陈建 陈松彪 尚珂 丁轲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期663-672,共10页

旨在探讨gga-miR-155对马立克病病毒转化的肿瘤细胞系MDCC-MSB1细胞转录组水平变化的影响。本研究以MDCC-MSB1细胞为研究对象,首先将gga-miR-155模拟物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,在转染后48 h提取总RNA,用安捷伦2100核酸检测仪分... 旨在探讨gga-miR-155对马立克病病毒转化的肿瘤细胞系MDCC-MSB1细胞转录组水平变化的影响。本研究以MDCC-MSB1细胞为研究对象,首先将gga-miR-155模拟物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,在转染后48 h提取总RNA,用安捷伦2100核酸检测仪分析各组细胞总RNA的完整性,采用RT-qPCR分析gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞中的过表达情况;然后利用高通量测序技术,分析gga-miR-155过表达后MDCC-MSB1细胞转录水平的变化,筛选差异表达基因,结合生物信息学分析预测差异表达基因中gga-miR-155靶mRNA。结果显示:制备了gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞过表达样本并构建了高通量测序文库;与对照组相比,gga-miR-155过表达组的差异表达基因有87个,其中,上调表达的基因有47个,下调表达的基因有40个;GO与KEGG分析显示,这些差异表达基因显著富集于代谢和蛋白结合过程/信号通路;通过Targetscan和miRada软件预测下调表达基因中鸡BACH1为gga-miR-155的靶mRNA(P<0.05)。综上,过表达gga-miR-155可调控MDCC-MSB1细胞的转录组水平,差异表达基因中BACH1基因可能在gga-miR-155的作用下参与了MDCC-MSB1细胞的代谢过程。 展开更多

关键词 gga-miR-155 马立克病 MDCC-msb1细胞 转录组

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鸡Tgfβ1干扰表达载体的构建及在MDCC-MSB1细胞中的干扰表达

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作者 门凯凯 刘佳隆 +2 位作者 郭亚格 张瑾 余祖华 《河南科技大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2022年第4期86-91,M0007,M0008,共8页

构建鸡转化生长因子β1(Tgfβ1)干扰表达载体,在马立克病毒转化的肿瘤细胞系(MDCC-MSB1)中鉴定其抑制表达效果。根据GenBank中鸡Tgfβ1序列以及pG1.2载体序列,设计合成3条干扰鸡Tgfβ1表达的短发夹核糖核酸(shRNA)干扰序列,分别将其插... 构建鸡转化生长因子β1(Tgfβ1)干扰表达载体,在马立克病毒转化的肿瘤细胞系(MDCC-MSB1)中鉴定其抑制表达效果。根据GenBank中鸡Tgfβ1序列以及pG1.2载体序列,设计合成3条干扰鸡Tgfβ1表达的短发夹核糖核酸(shRNA)干扰序列,分别将其插入表达载体pG1.2,构建pG1.2-Tgfβ1干扰表达载体。将构建的质粒转染MDCC-MSB1细胞后,用qRT-PCR和Western blot检测MDCC-MSB1细胞鸡Tgfβ1表达量。研究结果表明:pG1.2载体中被插入了设计合成的鸡Tgfβ1 shRNA干扰序列,构建了pG1.2-Tgfβ1干扰表达载体。pG1.2-Tgfβ1干扰表达载体转染细胞后,鸡Tgfβ1的表达量显著降低。本文构建的鸡Tgfβ1的干扰表达载体,可有效干扰MDCC-MSB1细胞中Tgfβ1的表达。 展开更多

关键词 鸡 TGFΒ1基因 SHRNA MDCC-msb1

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