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黄连-黄芩抑制mPTP/NLRP3细胞焦亡路径改善CpG1826诱导小鼠细胞因子风暴继发性肺损伤
1
作者 钟青芮 黄虹凯 +3 位作者 兰悦嘉 王欢 曾勇 吴嘉思 《中国中药杂志》 北大核心 2025年第15期4141-4152,共12页
该研究旨在探究黄连-黄芩对CpG1826诱导小鼠细胞因子风暴继发性肺损伤(CSSLI)的治疗作用,揭示黄连-黄芩主要效应成分黄连碱和汉黄芩素抑制线粒体膜通透性转换孔(mPTP)/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体细胞焦亡路径,并减... 该研究旨在探究黄连-黄芩对CpG1826诱导小鼠细胞因子风暴继发性肺损伤(CSSLI)的治疗作用,揭示黄连-黄芩主要效应成分黄连碱和汉黄芩素抑制线粒体膜通透性转换孔(mPTP)/核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体细胞焦亡路径,并减轻CSSLI的潜在分子机制。体内实验通过CpG1826诱导复制CSSLI小鼠模型,结合肺组织湿干比(W/D)评价肺肿胀程度,苏木素-伊红(HE)染色评价小鼠肺损伤程度,透射电镜(TEM)观察肺组织超微结构,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-1β、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、IL-18、IL-1α水平,发现黄连-黄芩水煎液较单味药显著降低肺水肿、肺损伤程度和肺泡灌洗液中相关细胞因子浓度,从而改善CSSLI。体外实验通过小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)建立CpG1826诱导的CSSLI模型,通过钙黄绿素淬灭筛选黄连-黄芩中抑制mPTP通道开启效果最优单体成分,发现黄连碱(5、10、20μmol·L^(-1))和汉黄芩素(10、20、40μmol·L^(-1))明显抑制mPTP通道的开启,作用效果最优且呈剂量依赖性;且黄连碱与汉黄芩素通过抑制mPTP通道开放,减少线粒体DNA(mtDNA)的释放和活性氧(ROS)累积,有效逆转CpG1826导致的线粒体膜电位(MMP)降低。进一步研究发现,2个单体成分能抑制细胞焦亡过程,下调NLRP3/半胱天冬蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路相关蛋白表达。综上所述,黄连-黄芩能改善CpG1826诱导的小鼠CSSLI,与其抑制mPTP/NLRP3细胞焦亡路径有关,为该药的临床应用及开发提供了科学依据。 展开更多
关键词 黄连-黄芩 CpG1826 细胞因子风暴继发性肺损伤 线粒体膜通透性转换孔(mptp) 细胞焦亡
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酒精干预CyPD的表达影响mPTP所致心肌损伤机制
2
作者 胡彬 申强 《临床医学进展》 2025年第5期1807-1813,共7页
CyPD是构成mPTP的基本组成部分之一,且有一些明确的证据支持CyPD是mPTP的主要调节因子;CyPD仍是唯一被遗传学证明的mPTP开放因子;CyPD的表达增加能够经历多种翻译后修饰,如磷酸化、氧化、乙酰化和硝酰化调控mPTP的打开。mPTP的长期开放... CyPD是构成mPTP的基本组成部分之一,且有一些明确的证据支持CyPD是mPTP的主要调节因子;CyPD仍是唯一被遗传学证明的mPTP开放因子;CyPD的表达增加能够经历多种翻译后修饰,如磷酸化、氧化、乙酰化和硝酰化调控mPTP的打开。mPTP的长期开放能够引起线粒体功能障碍,进而导致心肌损伤,目前已有研究表明酒精能够使线粒体上mPTP上CyPD的表达增加及CyPD mRNA表达增加,但酒精通过何种机制引起线粒体上CyPD的表达增加目前尚不清楚,本文就酒精可能通过哪些机制引起CyPD的表达发生变化做一综述。CyPD is one of the fundamental components of mPTP, and substantial evidence indicates that CyPD serves as the primary regulatory factor of mPTP. Moreover, CyPD remains the only genetically validated factor responsible for the opening of mPTP. Enhanced expression of CyPD undergoes various post-translational modifications, including phosphorylation, oxidation, acetylation, and nitroacylation, which collectively regulate the opening of mPTP. The sustained opening of mPTP can lead to mitochondrial dysfunction, thereby causing myocardial injury. Current research demonstrates that alcohol increases the expression of both CyPD and CyPD mRNA in mPTP on mitochondria;however, the precise mechanism underlying alcohol-induced upregulation of CyPD expression on mitochondria remains elusive. This review aims to explore the potential mechanisms by which alcohol may induce changes in CyPD expression. 展开更多
关键词 酒精 mptp CyPD 心肌损伤
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皮下和肌内注射MPTP诱导树鼩帕金森病模型的比较研究
3
作者 李波 角建林 +2 位作者 罗婷 冯所芹 孙怀昌 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期45-53,共9页
【目的】通过运动症状表现和脑组织病理变化指标评价皮下和肌内注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)构建的树鼩帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型,为PD研究提供理想的树鼩模... 【目的】通过运动症状表现和脑组织病理变化指标评价皮下和肌内注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)构建的树鼩帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型,为PD研究提供理想的树鼩模型。【方法】通过皮下和肌内注射MPTP药液2 mg/kg诱导树鼩PD模型,参考非人灵长类和PD患者运动症状量化评估标准,从震颤、姿势、运动、步态及平衡5个方面建立树鼩PD模型行为评分表,观察树鼩PD运动症状;通过酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)和α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)免疫组织化学染色观察树鼩中脑形态学的变化;通过qPCR检测分析树鼩PD模型脑组织中TH和α-syn的mRNA表达。【结果】2种注射方法均在第3次注射后出现典型的PD运动症状,第4次注射后PD运动症状最明显,第7次注射后PD运动症状明显减弱,第15次注射时基本消失;TH和α-syn免疫组织化学染色检测发现:皮下和肌内注射模型组黑质均有TH阳性神经纤维数量减少、α-syn异常增加的现象,均能模拟典型的PD病理学表现。皮下和肌内注射模型组脑组织TH mRNA表达量极显著降低,α-syn mRNA表达量极显著升高。【结论】重复皮下和肌内注射2 mg/kg MPTP药液均能诱导树鼩产生较一致的PD典型运动症状和病理变化,均是较好的树鼩PD模型造模方法。 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶(mptp) 帕金森模型 树鼩
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芍药苷对MPP^(+)/MPTP诱导的帕金森病模型小鼠的保护作用 被引量:6
4
作者 陆瑶 鲁婷婷 +2 位作者 郑克迪 秦鹏 郑梅竹 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期121-127,共7页
帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是常见的神经退行性疾病,已严重影响老年人的身体健康。为探究芍药苷(peoniflorin)抗帕金森病作用的活性及作用机制,本试验首先建立了1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP^(+))诱... 帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是常见的神经退行性疾病,已严重影响老年人的身体健康。为探究芍药苷(peoniflorin)抗帕金森病作用的活性及作用机制,本试验首先建立了1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP^(+))诱导PC12帕金森细胞模型。通过细胞形态学观察、检测细胞活性、乳酸脱氢酶(LDH)的释放量、细胞内Ca^(2+)浓度、活性氧(ROS)水平以及细胞凋亡检测,对芍药苷的神经保护作用进行初步的活性评价。再利用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)致PD小鼠模型为研究对象,通过检测自主活动和滚轴能力表现,对芍药苷抗PD的作用进一步验证。在此基础上,通过Western blot检测相关凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达水平研究其作用机制。结果显示,与正常对照组比较,模型组细胞数量减少,细胞体积明显缩小;细胞活性显著降低(P<0.01);MPP^(+)显著增加PC12细胞LDH释放率(P<0.01)、ROS水平(P<0.01)和Ca^(2+)浓度(P<0.01),同时细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。与模型组比较,药物保护组细胞损伤减弱,活细胞数量增多,细胞活性增强;25、50μmol/L剂量芍药苷保护组显著降低MPP^(+)诱导的PC12细胞LDH释放率(P<0.01)、ROS水平(P<0.01)和Ca^(2+)浓度(P<0.01),显著缓解了MPP^(+)诱导的细胞凋亡(P<0.01);MPTP诱导可显著减少小鼠的自主活动次数(P<0.01)和滚轴时间(P<0.01),经芍药苷预处理后显著增加小鼠自发站立次数(P<0.05)和滚轴时间(P<0.01);25、50μmol/L芍药苷保护组显著增加了细胞内Bcl-2/Bax表达(P<0.01),同时降低了Caspase-3的表达(P<0.01)。结果表明,芍药苷对MPP^(+)和MPTP诱导帕金森病体内、外模型均具有神经保护作用,其作用机制是通过增加细胞内Bcl-2/Bax表达,降低了Caspase-3的表达实现的。 展开更多
关键词 芍药苷 帕金森 MPP^(+) mptp 凋亡 小鼠
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MPTP对小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D凋亡的影响 被引量:1
5
作者 黄潇枫 盛灵慧 +1 位作者 刘希 王喆 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2024年第2期167-171,共5页
目的:探讨MPTP对小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D凋亡的影响及其可能机制。方法:MN9D细胞分别以0、1μmol/L MPTP处理(对照组和MPTP组),或分别以pcDNA4、pcDNA4-BACE2转染(对照组和BACE2组),采用Western blot法检测BACE2、Cleaved Caspase-... 目的:探讨MPTP对小鼠多巴胺能神经元细胞MN9D凋亡的影响及其可能机制。方法:MN9D细胞分别以0、1μmol/L MPTP处理(对照组和MPTP组),或分别以pcDNA4、pcDNA4-BACE2转染(对照组和BACE2组),采用Western blot法检测BACE2、Cleaved Caspase-3和内源性DSG2蛋白的表达。MN9D细胞分为DSG2组、DSG2+BACE2组和DSG2+BACE2+BACE抑制剂组,分别转染pENTER-DSG2+pcDNA4、pENTER-DSG2+pcDNA4-BACE2以及转染pENTER-DSG2+pcDNA4-BACE2后用1μmol/L的BACE抑制剂处理,采用Western blot法检测DSG2全长以及DSG2各片段的表达。结果:与对照组相比,MPTP组中BACE2及Cleaved Caspase-3表达均上升(P<0.05);与对照组相比,BACE2组Cleaved Caspase-3表达增加,内源性DSG2表达减少(P<0.05)。与DSG2组相比,DSG2+BACE2组中全长DSG2表达下降,DSG2羧基末端片段以及胞外DSG2氨基末端片段均增多(P<0.05),而DSG2+BACE2+BACE抑制剂组中全长DSG2及各DSG2片段的表达与DSG2组相似(P>0.05)。结论:MPTP可通过上调BACE2促进MN9D细胞凋亡,其机制可能与BACE2对DSG2的剪切有关;BACE2和DSG2可能参与了帕金森病的发病。 展开更多
关键词 mptp BACE2 蛋白剪切 CASPASE-3 帕金森病
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丹参饮通过调节线粒体mPTP开放改善缺氧/复氧心肌细胞损伤的机制研究 被引量:1
6
作者 刘孟楠 毛琳慎 +4 位作者 李子一 伍浩 兰琪 薛进宜 李小林 《中药材》 北大核心 2024年第12期3108-3113,共6页
目的:探讨丹参饮通过调节线粒体通透性过渡孔(mPTP)开放对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的改善作用。方法:体外培养H9c2心肌细胞建立H/R损伤模型,以不同浓度丹参饮干预正常及H/R损伤H9c2心肌细胞,用CCK-8法筛选丹参饮的实验浓度。将H... 目的:探讨丹参饮通过调节线粒体通透性过渡孔(mPTP)开放对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的改善作用。方法:体外培养H9c2心肌细胞建立H/R损伤模型,以不同浓度丹参饮干预正常及H/R损伤H9c2心肌细胞,用CCK-8法筛选丹参饮的实验浓度。将H9c2心肌细胞随机分为5组:空白对照组、模型组、丹参饮组、丹参饮+ATR(mPTP激动剂)组、丹参饮+CsA(mPTP抑制剂)组。CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;酶标法检测细胞培养液上清中LDH、Caspase-3水平;Calcein AM荧光探针检测mPTP开放程度;Western Blot检测Bak、Bax、CytC蛋白表达。结果:与模型组比较,丹参饮组细胞活力显著升高,细胞凋亡率、mPTP开放程度及培养液上清LDH、Caspase-3水平和细胞中Bak、Bax、CytC蛋白表达显著降低(P<0.01)。mPTP激动剂ATR可显著减弱丹参饮上述作用(P<0.01),mPTP抑制剂CsA可显著增强丹参饮上述作用(P<0.05或P<0.01)。结论:丹参饮抗心肌缺血-再灌注损伤的保护作用可能通过抑制线粒体mPTP开放进而抑制细胞凋亡来实现。 展开更多
关键词 缺氧复氧损伤 丹参饮 mptp 细胞凋亡
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Fluoro-Jade B法显示神经毒物红藻氨酸和MPTP致小鼠基底神经核损伤引起神经元的变性死亡 被引量:4
7
作者 曹荣 扈慧静 +2 位作者 王艳芹 张金萍 陈良为 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期452-455,共4页
目的探讨应用Fluoro-JadeB(FJB)染色法检测基底神经核神经元变性死亡的方法。方法制备纹状体定位注射红藻氨酸(KA)损伤大鼠模型、腹腔注射MPTP损伤小鼠模型、以及培养纹状体神经元KA损伤细胞模型,用FJB荧光染色显示和分析变性死亡的神... 目的探讨应用Fluoro-JadeB(FJB)染色法检测基底神经核神经元变性死亡的方法。方法制备纹状体定位注射红藻氨酸(KA)损伤大鼠模型、腹腔注射MPTP损伤小鼠模型、以及培养纹状体神经元KA损伤细胞模型,用FJB荧光染色显示和分析变性死亡的神经元。结果FJB染色可清晰地显示KA和MPTP致大、小鼠损伤引起的变性神经元胞体和部分突起。在脑组织切片上,KA模型纹状体内、MPTP模型黑质致密部内分布许多FJB染色阳性的变性神经元,而对照组动物未见变性神经元。在培养纹状体神经元体系内,FJB也能清楚地显示KA损伤后变性的神经元。单位面积内计数FJB阳性神经元占培养纹状体神经元总数的比率(均值±标准差),KA损伤组为(8·42±1·09)%,较对照组(3·42±0·45)%明显增多(P<0·01)。结论FJB方法快速、简便、经济、可靠。可以用于脑组织切片和培养细胞显示变性神经元,能成功检测出KA和MPTP损伤后基底神经核的变性神经元。 展开更多
关键词 FLUORO-JADE B 红藻氨酸 1-甲基-4-苯基-四氢吡啶(mptp) 基底神经核 神经元变性 大鼠 小鼠 mptp损伤 细胞显示
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硫酸化茯苓多糖对MPTP诱导帕金森小鼠的神经保护作用研究 被引量:16
8
作者 高贵珍 汪俊博 +3 位作者 姜芳 李光坤 刘小阳 薛宏宇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1699-1704,共6页
目的本实验通过检测硫酸化茯苓多糖(SP)对MPTP诱导的帕金森小鼠中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量,探讨SP对帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞的保护作用。方法将ICR小鼠随机分为对照组、MPTP组... 目的本实验通过检测硫酸化茯苓多糖(SP)对MPTP诱导的帕金森小鼠中抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量,探讨SP对帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞的保护作用。方法将ICR小鼠随机分为对照组、MPTP组和SP治疗组(SP 50、100、150mg·kg^(^(-1))),腹腔注射给药,取中脑和脑皮层匀浆,利用酶标仪检测小鼠中脑和脑皮层中SOD、GSH-Px、CAT活性、抗超氧阴离子活力、MDA及过氧化氢含量。结果 SP治疗组小鼠中脑和脑皮层3种抗氧化酶活性有不同程度的增强、抗超氧阴离子活力升高、MDA及过氧化氢含量不同程度下降。结论 SP对MPTP诱导的帕金森小鼠中脑和脑皮层神经元细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 硫酸化茯苓多糖 帕金森模型 mptp SOD GSH-PX CA
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Bcl-2/Bad/mPTP通路介导14-3-3γ对抗脂多糖所致心肌损伤 被引量:10
9
作者 刘丹 彭易安 +3 位作者 刘卓琦 汤蕾 尹东 何明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期48-52,共5页
目的探讨Bcl-2/Bad/mPTP通路在14-3-3γ对抗脂多糖所致心肌损伤中的作用。方法构建pFLAG-14-3-3γ重组质粒,转染至原代乳鼠心肌细胞中,然后行LPS损伤处理。处理结束后,取培养液检测LDH活性,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞... 目的探讨Bcl-2/Bad/mPTP通路在14-3-3γ对抗脂多糖所致心肌损伤中的作用。方法构建pFLAG-14-3-3γ重组质粒,转染至原代乳鼠心肌细胞中,然后行LPS损伤处理。处理结束后,取培养液检测LDH活性,MTT比色法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,线粒体肿胀实验检测mPTP开放,Western blot检测14-3-3γ、Bad、phospho-Bad以及线粒体Bcl-2蛋白表达。结果 LPS损伤使心肌细胞LDH活性升高、细胞存活率下降、凋亡细胞增加、mPTP开放加剧,转染pFLAG-14-3-3γ重组质粒后再行LPS损伤,则LDH活性下降、细胞存活率升高、mPTP开放与细胞凋亡减少,同时phospho-Bad蛋白表达增加,线粒体Bcl-2蛋白表达增加。结论 pFLAG-14-3-3γ能够对抗脂多糖所致的心肌细胞损伤,其机制可能与磷酸化Bad,释放Bcl-2至线粒体,抑制mPTP的开放有关。 展开更多
关键词 BCL-2 BAD 线粒体 mptp 质粒转染 脂多糖 心肌 损伤
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首乌制剂对MPTP引起的小鼠帕金森病的防治 被引量:18
10
作者 袁崇刚 白桦 阳飞昆 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期95-98,共4页
实验选用成年ICR纯系小鼠 ,通过对小鼠主动运动以及脑内多巴胺 (DA)含量的测定 ,观察首乌的醇提取物对MPTP引起的小鼠帕金森病的预防与治疗作用。实验发现 ,注射MPTP后 ,小鼠主动性活动明显减少 ,脑内DA含量明显降低 ,表现出帕金森病的... 实验选用成年ICR纯系小鼠 ,通过对小鼠主动运动以及脑内多巴胺 (DA)含量的测定 ,观察首乌的醇提取物对MPTP引起的小鼠帕金森病的预防与治疗作用。实验发现 ,注射MPTP后 ,小鼠主动性活动明显减少 ,脑内DA含量明显降低 ,表现出帕金森病的特征。对这些小鼠再注射首乌制剂能促进小鼠的运动 ,脑内DA的含量得以恢复。若同时注射MPTP和首乌制剂 ,则小鼠主动性活动时间以及纹状体多巴胺的含量都明显高于单独注射MPTP组。实验提示 ,MPTP可引起ICR小鼠脑内多巴胺神经元损伤并产生帕金森病症状 ,而首乌制剂对MPTP的毒性作用有明显的预防作用和一定的治疗作用 ,这可能与首乌制剂抑制B型单胺氧化酶的活性有关。 展开更多
关键词 首乌制剂 疾病防治 小鼠 帕金森病 mptp 多巴胺 中药 单胺氧化酶 神经毒性
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二苯乙烯苷对MPTP诱导的帕金森病小鼠模型黑质多巴胺转运体的影响 被引量:8
11
作者 张玲玲 陈磊 +4 位作者 陶丽珍 李雪芬 张磊 陈良为 陈建宗 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期33-37,共5页
目的:研究2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-gluco-side,TSG)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)表达的影响。方法:将1-甲基-4-苯... 目的:研究2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-gluco-side,TSG)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)表达的影响。方法:将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)注入小鼠腹腔制作PD模型,然后采用爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化,免疫荧光组织化学法观察黑质DAT阳性神经元数目。结果:行为学检测结果表明:模型组小鼠较正常对照组爬杆时间延长,悬挂能力下降(P<0.01),而TSG干预后可有效缩短小鼠的爬杆时间,并提高其悬挂能力(P<0.05,P<0.01)。免疫荧光结果显示:模型组小鼠黑质DAT阳性神经元的数目明显少于正常对照组(P<0.01),而TSG干预后,小鼠DAT阳性神经元数目的减少降低(P<0.05,P<0.01)。结论:TSG可改善PD小鼠的行为学、提高黑质DAT阳性神经元的存活数目,表明TSG对黑质多巴胺能神经元有一定的保护作用。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 mptp 多巴胺转运体 黑质 PD小鼠
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MPTP诱导的褐鼠黑质基因差异表达的研究 被引量:8
12
作者 徐磊 吕立夏 +4 位作者 杨秀丽 刘振国 陈生弟 李学礼 王尧 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期355-357,共3页
本研究目的在于获取1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的褐鼠黑质差异表达的表达序列标签(EST)。通过MPTP腹腔注射建立褐鼠帕金森病模型,利用差别显示反转录PCR(DDRT- PCR)技术分... 本研究目的在于获取1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的褐鼠黑质差异表达的表达序列标签(EST)。通过MPTP腹腔注射建立褐鼠帕金森病模型,利用差别显示反转录PCR(DDRT- PCR)技术分析MPTP 处理褐鼠与正常褐鼠黑质基因差异表达的状况,并筛选差异表达基因片段。结果经DDRT-PCR 筛选并通过反Northern 杂交去除假阳性,最终获得2 个差异表达基因片段。对其中一个片段进行克隆、测序和同源性比较发现,该片段为一个新的EST 序列,并且与胰岛素原样α肽具有同源性。本研究的结果提示,差异表达序列的分析有可能为研究MPTP诱导的褐鼠黑质变性的分子机理提供线索。 展开更多
关键词 帕金森病 mptp 褐鼠 黑质基因 DDRT-PCR EST
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MPTP损伤的小鼠PD模型的制作与评价 被引量:16
13
作者 许耀刚 庞晓峰 汲娟娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1014-1018,共5页
帕金森病(Parkinson!sdisease,PD)动物模型研究的目的是揭示多巴胺能神经元特异性损伤的机制,进而探索针对这种损伤的神经保护方法或治疗方法.由神经毒素MPTP损伤的小鼠PD模型,广泛应用于散发性PD的研究中.根据注射总剂量、两次注射间... 帕金森病(Parkinson!sdisease,PD)动物模型研究的目的是揭示多巴胺能神经元特异性损伤的机制,进而探索针对这种损伤的神经保护方法或治疗方法.由神经毒素MPTP损伤的小鼠PD模型,广泛应用于散发性PD的研究中.根据注射总剂量、两次注射间隔时间、注射方式的不同,制成了适合于不同研究目的的各种小鼠PD模型.关于MPTP导致的PD模型动物神经损伤的评价方式也是多层面、多指标并存的.对MPTP动物模型的起源和MPTP导致多巴胺能神经元损伤途径进行了较为系统的概述,并对MPTP小鼠PD模型的制作方法与评价指标进行较为详细的归纳. 展开更多
关键词 帕金森病(PD) mptp 小鼠 模型
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二至丸对MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用研究 被引量:13
14
作者 吴欣芳 段冷昕 +2 位作者 高晓乐 郭曼琳 王冬梅 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期4219-4224,共6页
该研究旨在探讨二至丸对MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用及可能的作用机制。模型组腹腔注射MPTP(30 mg·kg-1),1次/d,连续8 d;给药组灌胃给予二至丸(2. 5 g·kg-1),1次/d,连续30 d;正常组给予等体积生理盐水。行为学方面通过爬... 该研究旨在探讨二至丸对MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用及可能的作用机制。模型组腹腔注射MPTP(30 mg·kg-1),1次/d,连续8 d;给药组灌胃给予二至丸(2. 5 g·kg-1),1次/d,连续30 d;正常组给予等体积生理盐水。行为学方面通过爬杆、悬挂、游泳实验检测小鼠肢体运动协调能力,Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力;血清学指标检测小鼠血清中SOD,GSH-PX活性及MDA含量;Western blot法检测脑组织中TH,MAOB及凋亡相关因子CHOP,caspase-12的蛋白表达水平;免疫组化法检测小鼠脑组织切片TH的表达情况。结果显示,行为学方面,与模型组相比,给药组小鼠肢体运动得分、空间学习记忆得分均显著升高(P<0. 05);血清学指标方面,与模型组相比,给药组小鼠血清中SOD,GSH-PX活性均显著升高,MDA含量显著降低(P<0. 05);Western blot法结果显示,与模型组相比,给药组小鼠脑组织TH的蛋白水平显著上调,MAOB及凋亡相关因子CHOP,caspase-12的蛋白水平均显著下调(P<0. 05);免疫组化结果表明,与模型组相比,给药组小鼠脑组织TH阳性细胞数目显著增加(P<0. 05)。综上,二至丸对MPTP诱导的PD小鼠有一定的防治作用,可显著改善PD小鼠肢体运动协调能力、空间学习记忆能力,这可能与其下调凋亡相关因子CHOP,caspase-12的表达,减轻多巴胺能神经元的损伤,抑制多巴胺能神经凋亡有关。 展开更多
关键词 二至丸 帕金森病 mptp 内质网应激
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红景天苷对MPTP诱导的帕金森病小鼠黑质多巴胺转运蛋白的影响 被引量:6
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作者 李雪芬 何虹 +3 位作者 王松海 王乐 栗艳 陈建宗 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期149-153,共5页
目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)表达的影响。方法:将神经毒素1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phen-yl-1,2,3,6-tetrahydropyridi... 目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)表达的影响。方法:将神经毒素1-甲基-4苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phen-yl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)注入C57BL/6小鼠腹腔内,制备PD模型,Rotarod实验和游泳实验观察小鼠行为学变化,免疫荧光组织化学法检测黑质DAT阳性神经元数目的变化。结果:行为学实验结果显示,Rotarod实验中模型组小鼠在滚轴上运动的时间明显短于正常组(P<0.01),给予不同剂量的Sal后,小鼠在滚轴上运动的时间有所延长,并呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。游泳实验结果与Rotarod结果一致,模型组小鼠游泳时间明显短于正常组(P<0.01),给予不同剂量Sal后,小鼠游泳时间不同程度增加(P<0.05,P<0.01)。免疫荧光结果显示,模型组小鼠黑质中DAT阳性神经元的数目明显少于正常组(P<0.01),而给予不同剂量Sal干预后,小鼠DAT阳性神经元数目的减少有所恢复(P<0.05,P<0.01)。结论:Sal可以改善PD小鼠行为协调能力,提高DAT阳性神经元存活的数目,并呈剂量依赖性,表明Sal对多巴胺(dopamine,DA)能神经元具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 红景天苷 mptp 帕金森病 多巴胺转运蛋白 免疫组织化学 小鼠
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类叶升麻苷对MPTP所致帕金森病小鼠模型的神经保护作用 被引量:35
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作者 赵磊 蒲小平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期42-46,共5页
目的研究类叶升麻苷在MPTP诱导的C57小鼠的帕金森病(PD)模型中的神经保护作用及机制。方法通过自主活动实验和滚筒实验研究动物的行为表现,通过高效液相电化学检测方法观察脑纹状体多巴胺的变化,通过脑黑质酪氨酸羟化酶(tyroxinehydroxy... 目的研究类叶升麻苷在MPTP诱导的C57小鼠的帕金森病(PD)模型中的神经保护作用及机制。方法通过自主活动实验和滚筒实验研究动物的行为表现,通过高效液相电化学检测方法观察脑纹状体多巴胺的变化,通过脑黑质酪氨酸羟化酶(tyroxinehydroxylase,TH)免疫组化染色观察多巴胺能神经元的损伤程度。并对黑质纹状体进行α-突触核蛋白(α-synuclein)的免疫印迹分析以探讨药物作用机制。结果①经MPTP诱导的C57小鼠,其自主活动次数、滚筒运动潜伏期均低于对照组(P<0·01);纹状体多巴胺含量明显降低(P<0·01);多巴胺能神经元数量明显减少;黑质纹状体α-synuclein蛋白水平下降。②经类叶升麻苷(10、30mg·kg-1)预处理后能明显改善MPTP诱导的C57小鼠的行为学表现,增加脑内多巴胺递质的含量,增加多巴胺能神经元的数量,增加黑质纹状体α-synuclein蛋白水平。结论类叶升麻苷具有神经保护作用,能对抗MPTP诱导的C57小鼠PD模型中的神经损伤。其机制可能与上调α-synuclein蛋白水平有关。 展开更多
关键词 类叶升麻苷 mptp PD模型 酪氨酸羟化酶 Α-突触核蛋白 神经保护
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单侧颈内动脉注入 MPTP 建立偏侧帕金森病灵长类模型的研究 被引量:10
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作者 张进禄 刘玉军 +4 位作者 鲁强 王元身 徐群渊 李坤城 谷晔炳 《首都医科大学学报》 CAS 1998年第1期1-4,共4页
分别向未夹闭颈外动脉(A组)和夹闭颈外动脉(B组)的恒河猴(Macaque)的一侧颈总动脉注入甲基苯基四氢吡啶(MPTP),制造帕金森病(PD)灵长类动物模型。发现未夹闭组动物均需重复注射MPTP2~4次方可出现... 分别向未夹闭颈外动脉(A组)和夹闭颈外动脉(B组)的恒河猴(Macaque)的一侧颈总动脉注入甲基苯基四氢吡啶(MPTP),制造帕金森病(PD)灵长类动物模型。发现未夹闭组动物均需重复注射MPTP2~4次方可出现PD症状;而夹闭组动物均经1次手术获得成功。术后1个月脑核磁共振检查显示注射侧黑质区域密度减低、面积缩小。抗酪氨酸羟化酶免疫组化脑切片显示手术侧中脑多巴胺能神经元明显少于对侧。研究结果表明:夹闭颈外动脉向颈总动脉注入MPTP,是一种简便有效的建立灵长类偏侧帕金森病模型的方法。 展开更多
关键词 震颤性麻痹 疾病模型 mptp 四氢吡啶
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MPTP诱导小鼠帕金森病亚急性模型和慢性模型的比较 被引量:18
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作者 樊开阳 朱丽娜 +3 位作者 张文利 张海瑞 张瑜 马莉 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期4-6,共3页
目的探讨对比1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠亚急性模型和慢性模型的行为学及组织病理学变化。方法亚急性模型C57/BL小鼠腹腔注射MPTP 25 mg/kg,每天1次,连续注射7 d;慢性模型C57/BL小鼠腹腔注射MPTP 25 m... 目的探讨对比1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠亚急性模型和慢性模型的行为学及组织病理学变化。方法亚急性模型C57/BL小鼠腹腔注射MPTP 25 mg/kg,每天1次,连续注射7 d;慢性模型C57/BL小鼠腹腔注射MPTP 25 mg/kg,每周注射2次,连续注射5 w。通过爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化;应用高效液相色谱法检测纹状体内多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)的含量;应用免疫组化染色法检测中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果与对照组相比,慢性组小鼠行为学改变明显,而亚急性组小鼠无明显改变。在爬杆实验中,慢性组小鼠爬杆所用的时间长于亚急性组;悬挂实验中,慢性组小鼠悬挂时间低于亚急性组。两组小鼠纹状体DA含量明显降低(P<0.05),但慢性组与亚急性组相比DA含量降低程度更明显(P<0.05);而5-HT含量未见明显改变(P>0.05);中脑黑质致密部TH阳性细胞减少方面,亚急性组下降至对照组28%,慢性组下降至对照组的17%;慢性组HE染色切片中的神经细胞凋亡最多,而亚急性组神经细胞相对凋亡较少。结论 MPTP的PD小鼠慢性模型与亚急性模型相比,具有更明显的与人类PD相似的临床症状,是以后进一步研究PD病理生理学机制的潜在稳定模型。 展开更多
关键词 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶(mptp) 帕金森病
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银杏叶提取物对MPTP诱导帕金森小鼠保护作用的研究 被引量:10
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作者 李金凤 徐桂梅 +5 位作者 张辰子 费帆 杨林 代路路 孙侠 邝少松 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期46-53,共8页
目的观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导不同年龄段的帕金森(parkinson’s disease,PD)小鼠的防治作用。方法将8周龄及32周龄各60只C57BL/6小鼠随机分为阴性组,模型组,GBE给药高... 目的观察银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导不同年龄段的帕金森(parkinson’s disease,PD)小鼠的防治作用。方法将8周龄及32周龄各60只C57BL/6小鼠随机分为阴性组,模型组,GBE给药高、中、低剂量组及阳性组,采用腹腔注射MPTP法制备PD动物模型,采用银杏叶提取物进行灌胃治疗。运用爬杆、悬挂和游泳实验检测小鼠肢体运动功能,采用分光光度法测定小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,采用免疫组化法观察小鼠大脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)及纹状体多巴胺转运蛋白(DAT)阳性细胞数目的变化。结果 (1)与阴性对照组比较,8周龄模型组小鼠运动功能得分、大脑GSH-Px活性、黑质TH阳性细胞及纹状体DAT阳性细胞平均光密度值均显著下降,脑组织MDA含量显著升高,说明PD模型复制成功。与模型组比较,银杏叶提取物给药组8周龄小鼠运动功能得分、SOD与GSH-Px活性、黑质TH阳性细胞平均光密度值均显著提高,MDA含量显著下降。(2)与阴性对照组比较,32周龄模型组小鼠运动功能得分、黑质TH阳性细胞以及纹状体DAT阳性细胞平均光密度值均显著下降,SOD与GSH-Px活性降低,脑组织MDA含量升高,说明模型复制成功。与模型组比较,银杏叶提取物给药组32周龄小鼠运动功能得分、SOD活性、黑质TH及纹状体DAT阳性细胞平均光密度值均显著提高,脑组织MDA含量显著下降。结论银杏叶提取物对MPTP诱导的不同年龄段PD小鼠有一定的防治作用。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 帕金森病 mptp 氧化应激 神经元
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黄连解毒汤对MPTP所致帕金森病小鼠的防治作用 被引量:10
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作者 段冷昕 李瑞芳 +3 位作者 金瑾 王文嘉 张杨 周秋丽 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期2004-2006,共3页
目的观察黄连解毒汤(HJD)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致C57BL小鼠帕金森病模型的防治作用。方法 C57BL小鼠腹腔注射MPTP30mg·kg-1.d-1,连续5d,诱导小鼠帕金森病模型。观察HJD对小鼠肢体运动(爬杆、悬挂、游泳)功能... 目的观察黄连解毒汤(HJD)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致C57BL小鼠帕金森病模型的防治作用。方法 C57BL小鼠腹腔注射MPTP30mg·kg-1.d-1,连续5d,诱导小鼠帕金森病模型。观察HJD对小鼠肢体运动(爬杆、悬挂、游泳)功能的影响;HPLC-ECD法检测小鼠脑纹状体内多巴胺(DA)及其代谢产物二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)的含量;分光光度计法测定小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)的含量。结果与对照组比较,模型组小鼠肢体运动功能明显降低(P<0.05,P<0.01),纹状体内DA、DOPAC及HVA的含量明显减少(P<0.01),脑组织中SOD及GSH-Px酶活力明显降低,但MDA的含量却显著升高(P<0.01);HJD对小鼠运动功能的减退和脑神经组织的代谢异常有不同程度的调节和改善作用。结论黄连解毒汤对MPTP所致帕金森病小鼠有一定的防治作用。 展开更多
关键词 黄连解毒汤 帕金森病 mptp 多巴胺
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