利用CRISPR/Cas9技术构建Smad3基因敲除MPC5细胞系 被引量：1

1

作者 杨秀 史姜珊 +4 位作者 王洪连 王丽 粟宏伟 陈晨 赵长英 《生物工程学报》 北大核心 2025年第4期1658-1670,共13页

本研究旨在利用CRISPR/Cas9构建Smad3基因敲除的MPC5小鼠足细胞系细胞模型,并探讨TGF-β1刺激对Smad3基因敲除后MPC5细胞去分化的影响,为Smad3在小鼠足细胞中的功能研究提供工具细胞。根据CRISPR/Cas9设计原理设计针对靶向小鼠Smad3基... 本研究旨在利用CRISPR/Cas9构建Smad3基因敲除的MPC5小鼠足细胞系细胞模型,并探讨TGF-β1刺激对Smad3基因敲除后MPC5细胞去分化的影响,为Smad3在小鼠足细胞中的功能研究提供工具细胞。根据CRISPR/Cas9设计原理设计针对靶向小鼠Smad3基因单向导sgRNA序列,将连接后的pX458-Smad3载体转化至感受态细胞中,提取质粒并转染MPC5细胞。将转染后的细胞采用流式细胞分选仪分选出转染成功的细胞,经单克隆细胞扩增后采用PCR扩增Smad3基因敲除靶点附近序列并测序,分析筛选出潜在敲除细胞并在蛋白水平上验证Smad3蛋白缺失情况来确定敲除效果。在RNA水平和蛋白水平上采用逆转录-聚合酶链反应(reversetranscription-polymerase chainreacting,RT-PCR)和Westernblotting、细胞免疫荧光检测分析Smad3敲除对TGF-β1诱导的MPC5的去分化的影响。根据CRISPR/Cas9设计原理,sgRNA最终设计在Smad3第5个外显子。成功构建pX458-Smad3质粒,并将质粒转染MPC5细胞24h后,根据EGFP荧光蛋白的表达情况确定质粒转染是否成功,将转染成功的细胞经流式细胞分析转染效率,成功率约为0.1%。采用流式细胞分选仪筛选出带有绿色荧光标签转染成功的细胞,经单克隆扩增培养,最终可以得到21个细胞克隆。对Smad3基因位点上sgRNA靶点附近序列PCR扩增测序分析,发现了2个双等位基因移码突变细胞克隆,在蛋白水平上验证其Smad3蛋白表达缺失,表明成功获得2株Smad3基因敲除MPC5细胞株。在正常MPC5细胞中,TGF-β1刺激促进纤维化基因fibronectin和Col1a1(collagen I)mRNA和蛋白的表达,同时抑制足细胞分子标记蛋白synaptopodin和podocin的表达,提示足细胞的上皮-间质转分化。然而,在2株Smad3敲除MPC5细胞中,TGF-β1诱导上皮-间质转分化基因表达特征被显著抑制。本研究成功构建了2株Smad3基因敲除MPC5小鼠足细胞系,为进一步研究Smad3蛋白的功能建立了细胞模型,为研究Smad3在MPC5细胞去分化中的作用提供了思路。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 SMAD3 基因敲除 mpc5细胞

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达格列净对肾足细胞系MPC5自噬及mTOR/S6K1通路的影响

2

作者 阮莎 师维 胡玉海 《中南医学科学杂志》 2025年第4期604-607,共4页

目的探讨达格列净对肾足细胞系MPC5自噬及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体蛋白S6激酶1(mTOR/S6K1)信号通路的影响。方法将MPC5细胞分为对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、达格列净组(10 nmol/L达格列净)及3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(10 nmol/... 目的探讨达格列净对肾足细胞系MPC5自噬及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/核糖体蛋白S6激酶1(mTOR/S6K1)信号通路的影响。方法将MPC5细胞分为对照组、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、达格列净组(10 nmol/L达格列净)及3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(10 nmol/L达格列净+6μmol/L 3-MA)。采用CCK-8法检测细胞活力,透射电镜观察细胞超微结构,免疫荧光检测LC3表达,Western blotting检测Synaptopodin、Beclin1及mTOR/S6K1通路蛋白表达水平。结果与对照组比较,高糖组细胞存活率降低,自噬相关蛋白表达上调(P<0.05);与高糖组相比,达格列净组和3-MA组细胞存活率升高,mTOR/S6K1通路蛋白表达下调(P<0.05);与达格列净组比较,3-MA组细胞存活率降低,自噬相关蛋白表达下调(P<0.05)。结论达格列净可通过抑制mTOR/S6K1通路激活MPC5细胞自噬,改善高糖诱导的细胞损伤。 展开更多

关键词 达格列净 肾足细胞mpc5 自噬 MTOR S6K1

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参芪复方含药血清对高糖环境下MPC5细胞的保护作用及机制研究

3

作者 陈晓晓 陈应奇 +3 位作者 罗斯敏 杨子璇 唐诗韵 唐宋琪 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2072-2075,共4页

目的观察参芪复方含药血清对高糖环境下MPC5细胞活力、细胞凋亡及细胞结构蛋白的影响,并探讨其作用机制。方法将同步化后的MPC5细胞分为正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖溶液GS+10%空白血清)、高糖组(30mmol/L GS+10%空白血清)、参芪复方含... 目的观察参芪复方含药血清对高糖环境下MPC5细胞活力、细胞凋亡及细胞结构蛋白的影响,并探讨其作用机制。方法将同步化后的MPC5细胞分为正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖溶液GS+10%空白血清)、高糖组(30mmol/L GS+10%空白血清)、参芪复方含药血清低剂量组(30mmol/L GS+5%含药血清)、参芪复方含药血清中剂量组(30mmol/L GS+7.5%含药血清)、参芪复方含药血清高剂量组(30mmol/L GS+10%含药血清)。干预48h后收集细胞,采用CCK-8检测细胞活力,流式细胞测定细胞凋亡率,免疫荧光检测Nephrin、Synaptopodin、Podocin蛋白表达水平,Western blot检测mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。结果参芪复方中剂量含药血清可提高高糖环境下MPC5细胞的存活率(P<0.05),降低高糖环境下MPC5细胞的凋亡率(P<0.05),提高MPC5细胞结构蛋白Nephrin、Podocin、Synaptopodin表达水平,降低p-mTOR蛋白表达水平(P<0.05)。结论参芪复方含药血清可提高高糖环境下肾小球足细胞存活率,降低细胞凋亡率,维持足细胞结构完整性,其机制可能与抑制mTOR信号通路的激活密切相关。 展开更多

关键词 参芪复方 糖尿病肾病 足细胞 mpc5细胞 凋亡

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高糖下调小鼠永生性MPC5肾小球足细胞α-Klotho水平 被引量：2

4

作者 陈立 袁军 +2 位作者 詹理睿 万亚琴 王小琴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期807-810,共4页

目的研究α-Klotho在小鼠永生性MPC5肾小球足细胞系中的表达及高糖刺激下α-Klotho的水平变化。方法采用30 mmol/L葡萄糖刺激MPC5足细胞,与空白组及高渗对照组比较,反转录PCR检测MPC5足细胞α-Klotho mRNA水平,Western blot法和免疫荧... 目的研究α-Klotho在小鼠永生性MPC5肾小球足细胞系中的表达及高糖刺激下α-Klotho的水平变化。方法采用30 mmol/L葡萄糖刺激MPC5足细胞,与空白组及高渗对照组比较,反转录PCR检测MPC5足细胞α-Klotho mRNA水平,Western blot法和免疫荧光细胞化学染色检测MPC5足细胞α-Klotho蛋白的水平和定位。结果免疫荧光细胞化学染色结果显示,空白组及高渗对照组细胞α-Klotho表达丰富,模型组α-Klotho表达极少。正常足细胞α-Klotho mRNA和蛋白高表达,高糖作用后24、48 h后,足细胞α-Klotho mRNA和蛋白水平较正常组显著降低,与24 h模型组相比,高糖作用48 h的足细胞α-Klotho mRNA和蛋白水平也显著降低。结论 MPC5足细胞中α-Kloth存在一定量的表达,葡萄糖可下调足细胞α-Klotho水平。 展开更多

关键词 α-Klotho 足细胞 mpc5细胞 高糖

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BDM模式下MPC555外部FLASH编程的设计与实现 被引量：1

5

作者 田宏伟 王宜怀 《现代电子技术》 2006年第10期84-87,共4页

BDM是目前单片机普遍采用的调试方式之一,以Freescale 32位处理器MPC555处理器和AMD的FLASH存储模块AM29LV160DB为基础讨论了BDM模式下对MPC555外部扩展的FLASH进行编程的设计,给出了MPC555外部存储器扩展原理及硬件设计、BDM接口板硬... BDM是目前单片机普遍采用的调试方式之一,以Freescale 32位处理器MPC555处理器和AMD的FLASH存储模块AM29LV160DB为基础讨论了BDM模式下对MPC555外部扩展的FLASH进行编程的设计,给出了MPC555外部存储器扩展原理及硬件设计、BDM接口板硬件设计、软件编程方法及测试例程。重点讨论了BDM模式下对AM29LV160DB进行擦除和写入的编程原理。 展开更多

关键词 BDM mpc5S5 AM29LV160DB FLASH编程

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lncRNA TUG1对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5凋亡的影响 被引量：9

6

作者 马媛 张大鹏 +1 位作者 王想 任蕾 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第6期863-866,共4页

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸调节基因1(lncRNA TUG1)对高糖诱导的足细胞MPC5凋亡的影响。方法:小鼠足细胞MPC5分成对照组、高糖组、阴性对照高糖组、TUG1过表达高糖组,培养48 h后采用qRT-PCR检测TUG1表达变化,PI及Annexin V-FITC染色... 目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸调节基因1(lncRNA TUG1)对高糖诱导的足细胞MPC5凋亡的影响。方法:小鼠足细胞MPC5分成对照组、高糖组、阴性对照高糖组、TUG1过表达高糖组,培养48 h后采用qRT-PCR检测TUG1表达变化,PI及Annexin V-FITC染色后采用流式细胞术测定细胞凋亡率,Western blot法检测细胞中Cleaved-Caspase-12、Cleaved-PARP、CHOP、p-eIF2α、GRP78蛋白表达水平。结果:与对照组比较,高糖组细胞中TUG1表达水平降低,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-12、Cleaved-PARP、CHOP、p-eIF2α、GRP78蛋白表达水平增加(P<0.05)。与阴性对照高糖组比较,TUG1过表达高糖组细胞中TUG1表达水平升高,细胞凋亡率和Cleaved-Caspase-12、Cleaved-PARP、CHOP、p-eIF2α、GRP78蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:lncRNA TUG1可抑制高糖诱导的足细胞MPC5凋亡,作用机制可能与降低内质网应激有关。 展开更多

关键词 lncRNA TUG1 足细胞 糖尿病 凋亡 mpc5细胞 小鼠

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葛根素通过抑制miR-370缓解高糖处理的MPC5细胞损伤 被引量：3

7

作者 李晓艳 张汝 +1 位作者 程莹 吴绮楠 《西部医学》 2022年第2期195-199,共5页

目的探讨葛根素对高糖处理的MPC5细胞损伤的影响及分子机制。方法将小鼠足细胞MPC5分为对照组、模型组、低、中、高剂量葛根素组、anti-miR-NC组、anti-miR-370组、高剂量葛根素+miR-NC组、高剂量葛根素+miR-370组。流式细胞术检测细胞... 目的探讨葛根素对高糖处理的MPC5细胞损伤的影响及分子机制。方法将小鼠足细胞MPC5分为对照组、模型组、低、中、高剂量葛根素组、anti-miR-NC组、anti-miR-370组、高剂量葛根素+miR-NC组、高剂量葛根素+miR-370组。流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-370表达水平。结果与对照组相比,模型组MPC5细胞的凋亡率升高,p62表达水平升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平降低,miR-370表达水平升高(均P<0.05)。与模型组相比,低、中、高剂量葛根素组MPC5细胞凋亡率降低,p62表达水平降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平升高,miR-370表达水平降低,且呈剂量依赖性(均P<0.05)。干扰miR-370表达后,MPC5细胞凋亡率降低,p62表达水平降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平升高(均P<0.05)。过表达miR-370逆转了葛根素对高糖处理的MPC5细胞凋亡及自噬的影响。结论葛根素可能通过下调miR-370表达减轻高糖所致的MPC5细胞损伤。 展开更多

关键词 葛根素 miR-370 高糖 mpc5细胞 损伤 自噬

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基于mTOR/p70S6K信号通路探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤的影响 被引量：2

8

作者 姚春红 李国红 +1 位作者 周波 徐佳 《河北医学》 CAS 2023年第1期65-70,共6页

目的:探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响。方法:将小鼠足细胞MPC5分为:对照组(5.5mmoL/L葡萄糖)、高糖诱导组(30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷低浓度组(... 目的:探究紫丁香苷对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)信号通路的影响。方法:将小鼠足细胞MPC5分为:对照组(5.5mmoL/L葡萄糖)、高糖诱导组(30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷低浓度组(2.5μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷中浓度组(5μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)、紫丁香苷高浓度组(10μmoL/L紫丁香苷+30mmoL/L葡萄糖)。各组向RPMI 1640培养基中加入上述浓度的相应试剂或药物,培养72h。酶标仪测定各组MPC5细胞吸光度值,计算细胞活力;流式细胞仪测定各组MPC5细胞凋亡情况;鬼笔环肽染色观察各组MPC5细胞骨架形态;荧光定量PCR和蛋白印迹法分别测定各组MPC5细胞mTOR、p70S6K信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达。结果:对照组MPC5细胞骨架形态正常,细胞长轴呈线性分布,荧光染色明显;与对照组比较,高糖诱导组MPC5细胞骨架断裂,细胞萎缩,荧光染色黯淡,吸光度值、细胞活力显著降低,凋亡率、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与高糖诱导组比较,紫丁香苷低、中、高浓度组MPC5细胞骨架结构恢复清晰,荧光强度逐渐变亮,足突趋于明显,吸光度值、细胞活力依次升高,凋亡率、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平依次降低(P<0.05)。结论:紫丁香苷对高糖诱导的MPC5细胞损伤具有保护作用,能明显促进MPC5细胞增殖,抑制其凋亡;其机制可能与紫丁香苷抑制高糖状态下MPC5细胞中mTOR/p70S6K通路的激活有关。 展开更多

关键词 紫丁香苷 高糖 小鼠足细胞mpc5 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/p70核糖体蛋白S6激酶信号通路

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肾炎防衰液对硫酸苯酯诱导小鼠肾足细胞损伤及自噬作用机制研究 被引量：2

9

作者 张婧 马雷雷 +3 位作者 杨思齐 韩玉 赵晰 王耀光 《天津中医药》 CAS 2024年第6期766-772,共7页

[目的]观察肾炎防衰液对硫酸苯酯(PS)诱导的小鼠肾脏足细胞损伤及自噬相关蛋白表达的影响,探讨其对足细胞损伤及自噬的干预作用。[方法]选取SD大鼠,分别灌胃肾炎防衰液及缬沙坦水溶液,制备低、中、高浓度含药血清及西药对照血清。体外... [目的]观察肾炎防衰液对硫酸苯酯(PS)诱导的小鼠肾脏足细胞损伤及自噬相关蛋白表达的影响,探讨其对足细胞损伤及自噬的干预作用。[方法]选取SD大鼠,分别灌胃肾炎防衰液及缬沙坦水溶液,制备低、中、高浓度含药血清及西药对照血清。体外培养足细胞,分为空白对照组(Con)组、PS刺激(PS)组、肾炎防衰液低、中、高浓度治疗组(SYFS-L、SYFS-M、SYFS-H)、缬沙坦(XST)组。细胞活力检测(CCK-8)法筛选最合适的PS干预浓度及含药血清给药浓度,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western Blot)检测Podocin、CD2AP、BNIP3、p62、LC3Ⅱ/ⅠmRNA和蛋白表达。[结果]CCK-8法检测细胞增殖率确定了190μmol/L浓度的PS处理足细胞24 h作为本实验的造模方法。与Con组比较,PS组CD2AP、Podocin、BNIP3、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白及mRNA表达显著下调,p62蛋白及mRNA表达显著上调;与PS组比较,肾炎防衰液给药组可明显上调CD2AP、Podocin、BNIP3、LC3 mRNA和蛋白的表达,降低p62的表达,且优于缬沙坦组。[结论]PS可能通过抑制足细胞线粒体自噬造成足细胞损伤,而肾炎防衰液通过上调LC3、BNIP3,下调p62蛋白表达,增强细胞自噬,抑制细胞凋亡,改善足细胞损伤。 展开更多

关键词 肾炎防衰液 硫酸苯酯 mpc5足细胞 自噬

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白花丹参水提取物通过调控NOD2基因表达对高糖诱导小鼠肾脏足细胞损伤的保护作用及其机制研究 被引量：4

10

作者 段荣 夏林 +2 位作者 蒋健 杨志忠 郑晓玉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期777-783,共7页

目的研究白花丹参水提取物对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞MPC5损伤的影响及分子作用机制。方法高糖刺激和白花丹参水提取物处理MPC5细胞,qRT-PCR检测NOD2、podocin和nephrin mRNA表达,Western blot检测NOD2、podocin和nephrin蛋白表达,流... 目的研究白花丹参水提取物对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞MPC5损伤的影响及分子作用机制。方法高糖刺激和白花丹参水提取物处理MPC5细胞,qRT-PCR检测NOD2、podocin和nephrin mRNA表达,Western blot检测NOD2、podocin和nephrin蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡率。结果NOD2在大多数人糖尿病肾病组织中呈高表达;高糖抑制小鼠足细胞MPC5中podocin和nephrin的表达,促进MPC5细胞凋亡,诱导MPC5细胞中NOD2 mRNA和蛋白的表达;白花丹参水提取物可以促进高糖诱导的MPC5细胞中podocin和nephrin的表达,抑制NOD2基因的表达,抑制高糖诱导的MPC5细胞凋亡,抑制NOD2表达可促进高糖诱导的MPC5细胞中podocin和nephrin的表达,并抑制细胞凋亡;过表达NOD2逆转了白花丹参水提取物对高糖诱导的MPC5细胞损伤的作用。结论白花丹参水提取物可能通过调控NOD2基因表达减轻高糖诱导的小鼠肾脏足细胞MPC5的损伤,抑制细胞凋亡。白花丹参水提取物对糖尿病肾病具有潜在治疗作用。 展开更多

关键词 白花丹参 高糖 小鼠肾脏足细胞 mpc5 NOD2 凋亡

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远志皂苷调控miR-325-5p/GADD45B对高糖诱导小鼠足细胞损伤的影响及其机制 被引量：2

11

作者 高虹 焦宏伟 +1 位作者 贝宁 叶苗苗 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第4期911-915,共5页

目的探讨远志皂苷(TEN)对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞MPC5损伤的影响及分子作用机制。方法将MPC5细胞分为正常对照(NG)组、高糖刺激(HG)组、TEN低中高3个浓度实验组,NG组用5 mmol/L D-葡萄糖处理,HG组用30 mmol/L D-葡萄糖处理,实验组用... 目的探讨远志皂苷(TEN)对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞MPC5损伤的影响及分子作用机制。方法将MPC5细胞分为正常对照(NG)组、高糖刺激(HG)组、TEN低中高3个浓度实验组,NG组用5 mmol/L D-葡萄糖处理,HG组用30 mmol/L D-葡萄糖处理,实验组用低中高(50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L)TEN进行处理,实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测MPC5细胞中miR-325-3p和GADD45BmRNA的表达,Western印迹检测GADD45B、podocin和nephrin蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证miR-325-3p与GADD45B的关系。结果TEN可使高糖诱导的小鼠足细胞MPC5中miR-325-3p、podocin、nephrin和B细胞淋巴瘤(Bcl)-2含量显著升高(P<0.05),GADD45B、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达量及细胞凋亡率显著降低(P<0.05),抑制高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤和凋亡;miR-325-3p靶向负调控GADD45B的表达;过表达miR-325-3p可抑制高糖诱导的MPC5损伤,并抑制细胞凋亡;抑制miR-325-3p表达逆转了TEN对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的作用。结论远志皂苷通过调控miR-325-3p/GADD45B减轻高糖诱导的小鼠肾脏足细胞MPC5的损伤,抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 远志皂苷 高糖 小鼠肾脏足细胞 mpc5 miR-325-3p GADD45B 损伤 凋亡

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基于LC-MS细胞代谢组学技术的环黄芪醇对多柔比星诱导足细胞损伤保护作用机制研究 被引量：3

12

作者 郭敏 崔婷 +4 位作者 张立超 刘月涛 李科 秦雪梅 李爱平 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期910-917,共8页

目的基于LC-MS细胞代谢组学方法研究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)保护多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导小鼠足细胞(mouse podocyte clone 5,MPC5)损伤的作用机制。方法体外培养永生型MPC5,分为空白对照组、DOX诱导MPC5细胞损伤模型组、... 目的基于LC-MS细胞代谢组学方法研究环黄芪醇(cycloastragenol,CAG)保护多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导小鼠足细胞(mouse podocyte clone 5,MPC5)损伤的作用机制。方法体外培养永生型MPC5,分为空白对照组、DOX诱导MPC5细胞损伤模型组、CAG治疗组。MTT法检测MPC5的存活率;Western blot分析各组MPC5中关键蛋白Nephrin、Podocin的表达;结晶紫法检测MPC5黏附性;通过LC-MS代谢组学技术结合多元统计分析筛选潜在药效标志物和关键代谢通路,阐明其作用机制。结果各浓度CAG均能有效改善DOX损伤存活率;12.5μg·mL;的CAG能增加MPC5关键蛋白Nephrin、Podocin的表达,可显著改善DOX损伤MPC5黏附性;细胞代谢组学结果显示,DOX损伤的MPC5内共发现22种差异代谢物发生显著性变化,给予CAG干预后,细胞内20种差异代谢物得到了不同程度的回调,这些代谢物主要涉及甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、谷胱甘肽代谢、精氨酸生物合成、嘧啶代谢通路。结论CAG对DOX诱导的MPC5损伤有改善作用,表现在能改善MPC5结构、活性和黏附性,其具体机制可能与甘油磷脂代谢、氨基酸代谢、谷胱甘肽代谢、嘧啶代谢密切相关。 展开更多

关键词 环黄芪醇 足细胞 多柔比星 代谢组学

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不同浓度AOPPs对肾小球足细胞MCP-1表达及合成的影响 被引量：2

13

作者 王育娴 龙海波 《热带医学杂志》 CAS 2016年第5期579-581,共3页

目的观察不同浓度晚期蛋白氧化产物(AOPPs)对体外培养足细胞(MPC5)内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨AOPPs对糖尿病肾病病情进展的影响。方法以体外培养的足细胞进行研究,共设立5个组,包括正常对照组、小鼠血清白蛋白(MSA)组... 目的观察不同浓度晚期蛋白氧化产物(AOPPs)对体外培养足细胞(MPC5)内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的影响,探讨AOPPs对糖尿病肾病病情进展的影响。方法以体外培养的足细胞进行研究,共设立5个组,包括正常对照组、小鼠血清白蛋白(MSA)组、不同浓度的AOPPs(50、100、200μmol/L)干预组。实时荧光定量PCR检测足细胞内MCP-1 m RNA的表达,用酶联免疫(ELISA)法检测培养足细胞上清中MCP-1蛋白的表达。结果与对照组及MSA组相比,AOPPs诱导足细胞24 h后,上清MCP-1蛋白浓度明显升高(P<0.01),并且随AOPPs浓度的增大而逐渐增高,呈浓度依赖性升高;与对照组及MSA组相比,AOPPs诱导足细胞24 h后,细胞内MCP-1m RNA的表达明显增强(P<0.01),并且随浓度的增大而逐渐增强。结论 AOPPs可诱导肾小球足细胞MCP-1表达升高,并且具有浓度依赖性,升高的MCP-1可能参与了糖尿病肾病病情的发展。 展开更多

关键词 AOPPs 足细胞 MCP-1

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