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N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍引起vero细胞基因表达改变及有关cDNA片段的初步鉴定 被引量：11
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作者 胡文蔚 余应年 +1 位作者 张小山 董海涛 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期62-66,共5页
运用ｍＲＮＡ差异显示（ＤＤ－ＰＣＲ）技术，通过２６对锚定及任意引物组合显示基因的差异表达情况，分离了７个表达有差异的片段．其中３个片段的相关基因属于对Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）处理的初级反应基因，... 运用ｍＲＮＡ差异显示（ＤＤ－ＰＣＲ）技术，通过２６对锚定及任意引物组合显示基因的差异表达情况，分离了７个表达有差异的片段．其中３个片段的相关基因属于对Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）处理的初级反应基因，２个属于次级反应基因．另有２个片段的差异表达仅在蛋白合成抑制剂环己亚胺（ＣＨＭ）合并ＭＮＮＧ处理时才出现．反向缝隙印迹杂交分析印证了２个片段在ＤＤ－ＰＣＲ中发现的改变，同时分析的本实验室分离的２５个片段中，８个片段的变化被验证与ＤＤ－ＰＣＲ中的改变一致．序列分析结果显示这些片段与许多基因有高同源性，其中包括一些参与信息传导的基因． 展开更多
关键词 亚硝基胍 mmng CDNA 差异显示 MRNA 片段
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单功能烷化剂MNNG对人食管癌Eca 109细胞生物学功能的影响及机制研究
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作者 王婷 张雯雯 +4 位作者 张永欣 曾勇 李响丽 王俊玲 李成云 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2022年第6期490-495,共6页
目的探讨单功能烷化剂N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)对Eca 109细胞生物学功能的影响及调控机制,为食管癌的控制提供依据。方法采用0、3和5μg/ml MNNG染毒高分化食管鳞癌Eca 109细胞48 h,CCK8... 目的探讨单功能烷化剂N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)对Eca 109细胞生物学功能的影响及调控机制,为食管癌的控制提供依据。方法采用0、3和5μg/ml MNNG染毒高分化食管鳞癌Eca 109细胞48 h,CCK8法检测细胞增殖,细胞凋亡、周期检测试剂盒检测细胞凋亡及周期变化情况。划痕实验评估MNNG对Eca 109细胞迁移能力的影响,Western blot测定MNNG染毒后Wnt信号通路相关蛋白的表达水平。结果与对照组相比,48 h后3和5μg/ml MNNG染毒组Eca 109细胞增殖明显上升,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞周期结果显示,3和5μg/ml MNNG染毒组G0/G1期明显降低(P<0.05),G2/M期明显升高(P<0.05)。细胞划痕结果显示,MNNG染毒组Eca 109细胞的迁移能力与对照组相比在24和48 h明显上升(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,染毒组Eca 109细胞TCF7、CK1、β-catenin和p-gsk-3β蛋白的表达水平升高(P<0.05);Axin1蛋白的表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MNNG可促进Eca 109细胞的增殖和迁移,使细胞周期阻滞在G2/M期,从而影响食管癌发展进程,且其机制可能与MNNG激活Wnt信号通路相关。 展开更多
关键词 MNNG 食管鳞癌 Eca 109细胞 WNT信号通路 作用机制
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