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苍术酮调节MLCK/MLC信号通路对炎症性肠病大鼠肠屏障损伤的影响
1
作者 余阳 简辉 +3 位作者 许涛 方军 刘念 张琼 《河北医药》 2026年第1期25-29,共5页
目的 探讨苍术酮调节MLCK/MLC信号通路对炎症性肠病(IBD)大鼠肠屏障损伤的影响。方法 将50只大鼠随机分为CK组、Model组、苍术酮低剂量组、苍术酮高剂量组和ML-7组(MLCK抑制剂),每组10只。称量大鼠质量变化;对大鼠进行疾病活动指数(DAI... 目的 探讨苍术酮调节MLCK/MLC信号通路对炎症性肠病(IBD)大鼠肠屏障损伤的影响。方法 将50只大鼠随机分为CK组、Model组、苍术酮低剂量组、苍术酮高剂量组和ML-7组(MLCK抑制剂),每组10只。称量大鼠质量变化;对大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分;测定大鼠结肠长度;酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-β)、IL-10、内毒素(Endotoxin,ET)与D-乳酸(D-Lactic,D-LAC)水平;商品化试剂盒检测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;HE染色结肠组织病理损伤并进行评分;Western blot检测大鼠结肠组织中闭锁小带蛋白(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、MLCK、p-MLC、MLC信号通路相关蛋白表达。结果 与CK组比较,Model组大鼠结肠组织显著损伤,疾病活动指数(DAI)评分、血清TNF-α、IL-β、ET、D-LAC水平、结肠组织MDA含量和MLCK、p-MLC/MLC蛋白表达显著升高,大鼠体重、结肠长度、血清IL-10水平、结肠组织CAT、SOD活性和ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白表达显著降低(P<0.05);与Model组比较,苍术酮低、高剂量组和ML-7组大鼠结肠组织损伤显著减轻,DAI评分、血清TNF-α、IL-β、ET、D-LAC水平、结肠组织MDA含量和MLCK、p-MLC/MLC蛋白表达显著降低,大鼠体重、结肠长度、血清IL-10水平、结肠组织CAT、SOD活性和ZO-1、Occludin、Claudin-1蛋白表达显著升高(P<0.05);与苍术酮高剂量组比较,ML-7组大鼠各项检测指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论 苍术酮通过抑制MLCK/MLC信号通路可降低IBD大鼠炎性反应和肠屏障损伤。 展开更多
关键词 苍术酮 mlck/MLC信号通路 炎症性肠病 肠屏障损伤
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当归贝母苦参丸调控TNFR2/MLCK通路治疗小鼠溃疡性结肠炎的机制研究
2
作者 杨若彤 卜庆如 +2 位作者 杨玥 汪长中 汪天明 《安徽中医药大学学报》 2026年第2期85-92,共8页
目的探究当归贝母苦参丸通过调控肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2,TNFR2)/肌球蛋白轻链激酶(myosin light-chain kinase,MLCK)信号通路缓解小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制。方法建立葡聚糖硫... 目的探究当归贝母苦参丸通过调控肿瘤坏死因子受体2(tumor necrosis factor receptor 2,TNFR2)/肌球蛋白轻链激酶(myosin light-chain kinase,MLCK)信号通路缓解小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的作用机制。方法建立葡聚糖硫酸钠诱导的UC小鼠模型。采用ELISA法检测小鼠血清及结肠促炎因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)]和抗炎因子(IL-10、IL-4、IL-13)水平及MLCK活性。采用Western blot法检测小鼠肠道屏障相关蛋白及TNFR2/MLCK通路蛋白表达水平;采用免疫组织化学法和荧光免疫标记分析小鼠结肠组织中TNFR2、磷酸化肌球蛋白轻链2(phosphorylated myosin light chain 2,p-MLC2)及MLCK表达水平。结果当归贝母苦参丸显著抑制UC小鼠体质量下降,改善结肠缩短和组织病理评分,升高抗炎因子表达水平并降低促炎因子表达水平。Western blot、免疫荧光结果显示,当归贝母苦参丸可升高紧密连接蛋白表达水平,降低p-MLC2水平。免疫荧光结果显示,MLCK活性降低,透射电子显微镜下可见当归贝母苦参丸组肠上皮紧密连接结构改善。结论当归贝母苦参丸可显著缓解UC,其作用机制与调控TNFR2/MLCK信号通路密切相关。 展开更多
关键词 当归贝母苦参丸 溃疡性结肠炎 TNFR2/mlck通路
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侯氏黑散调控NF-κB/MLCK/MLC2通路保护脑小血管病大鼠内皮屏障的作用研究
3
作者 王含誉 程宏发 张秋霞 《中国中医药信息杂志》 2026年第3期105-111,共7页
目的观察侯氏黑散对脑小血管病(CSVD)模型大鼠内皮屏障的保护作用,探究其分子机制。方法采用自发性高血压大鼠单侧颈总动脉结扎法建立CSVD模型。将大鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、侯氏黑散低剂量组、侯氏黑散高剂量组和丁苯酞... 目的观察侯氏黑散对脑小血管病(CSVD)模型大鼠内皮屏障的保护作用,探究其分子机制。方法采用自发性高血压大鼠单侧颈总动脉结扎法建立CSVD模型。将大鼠按体质量随机分为假手术组、模型组、侯氏黑散低剂量组、侯氏黑散高剂量组和丁苯酞组。各给药组分别予相应药物灌胃,假手术组和模型组灌胃等量蒸馏水,连续8周。HE染色观察脑血管形态,透射电镜观察血管内皮超微结构,免疫荧光检测白蛋白(Alb)表达,Western blot检测Alb、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、核因子-κB(NF-κB)p65、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)和肌球蛋白轻链2(MLC2)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠血管管腔狭窄,血管周围间隙增大,内皮细胞紧密连接结构破坏,大脑皮层Alb表达显著增强(P<0.01),Alb蛋白表达显著升高(P<0.01),ZO-1蛋白表达显著降低(P<0.05),p-NF-κB p65、MLCK、p-MLC2蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,侯氏黑散低、高剂量组大鼠血管病理损伤和内皮屏障损伤明显减轻,大脑皮层Alb表达显著减弱(P<0.05,P<0.01),侯氏黑散低剂量组Alb、MLCK蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),侯氏黑散高剂量组ZO-1蛋白表达显著升高(P<0.05),p-NF-κB p65、MLCK、p-MLC2蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论侯氏黑散可减轻CSVD大鼠内皮屏障损伤,其作用机制与调控NF-κB/MLCK/MLC2信号通路有关。 展开更多
关键词 侯氏黑散 脑小血管病 内皮屏障 NF-κB/mlck/MLC2通路 大鼠
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银杏叶提取物通过调控p38 MAPK/MLCK信号通路对高氧诱导的急性肺损伤小鼠肠黏膜屏障的保护作用
4
作者 何英 邢周雄 +3 位作者 程云 耿争光 付豹 傅小云 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第2期127-132,共6页
目的探讨银杏叶提取物(GBE)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路,对高氧诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、ALI组、低剂量GBE组、高剂量GBE组和高剂量GBE... 目的探讨银杏叶提取物(GBE)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路,对高氧诱导的急性肺损伤(ALI)小鼠肠黏膜屏障的保护作用。方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、ALI组、低剂量GBE组、高剂量GBE组和高剂量GBE+茴香菌素(anisomycin)组,每组10只。测定小鼠氧分压(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))以及肺湿重与干重比值(W/D);组织学染色观察肺和小肠组织病理变化并评分;酶联免疫吸附试验检测血清炎性细胞因子、D-乳酸(D-LA)和小肠sIgA水平;Western blotting检测相关蛋白表达。结果与对照组相比,ALI组小鼠PaO_(2)及闭合蛋白(occludin)、密封蛋白(claudin)、闭合小带蛋白1(ZO-1)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PaCO_(2)、W/D、肺和小肠病理评分、炎性细胞因子、D-LA、DAO、sIgA水平以及p-p38 MAPK/p38 MAPK和MLCK蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与ALI组比,低剂量GBE组和高剂量GBE组上述指标呈相反变化,且高剂量GBE组改善更显著。而高剂量GBE+anisomycin组与高剂量GBE组比较,治疗作用显著减弱(P<0.05)。结论GBE可能通过调控p38 MAPK/MLCK信号通路,减轻炎症反应,并升高肠黏膜屏障相关蛋白的表达水平,对肠黏膜屏障发挥保护作用。 展开更多
关键词 银杏叶提取物 高氧 急性肺损伤 肠黏膜屏障 p38 MAPK/mlck 炎症
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基于MLCK/MLC2信号通路探讨胃苓汤对腹泻型肠易激综合征大鼠肠道屏障功能的影响
5
作者 张燕燕 严波 +1 位作者 郭虎生 周胜利 《河北医学》 2025年第4期577-582,共6页
目的:观察胃苓汤(WLD)对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠肠道屏障功能的影响,并基于MLCK/MLC2信号通路探讨其可能机制。方法:将50只SD大鼠随机分为对照组(CON组)、模型组(IBS-D组)、匹维溴铵组(PB组,0.13mg/kg)、胃苓汤低剂量组(WLD-L组,... 目的:观察胃苓汤(WLD)对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠肠道屏障功能的影响,并基于MLCK/MLC2信号通路探讨其可能机制。方法:将50只SD大鼠随机分为对照组(CON组)、模型组(IBS-D组)、匹维溴铵组(PB组,0.13mg/kg)、胃苓汤低剂量组(WLD-L组,5.31g/kg)和胃苓汤高剂量组(WLD-H组,10.62g/kg),每组10只。采用醋酸灌肠联合慢性束缚法建立IBS-D大鼠模型,造模成功后,各药物组每天灌服对应药物1次,连续灌服14d。给药结束后,检测各组大鼠的腹泻指数和腹壁撤退反射评分;异硫氰酸荧光素标记葡聚糖(FITC-dextran)法检测肠道通透性;苏木精-伊红(HE)染色观察结肠组织的病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织的炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平;Western blot检测结肠组织紧密连接蛋白(ZO-1、occludin、claudin-1)以及MLCK/MLC2信号通路相关蛋白(MLCK、MLC2、p-MLC2)的表达水平。结果:与IBS-D组相比,PB组、WLD-L组和WLD-H组大鼠的腹泻指数、腹壁撤退反射评分、肠道通透性、炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著降低(P<0.05),结肠组织肠绒毛损伤程度明显减轻,紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1的表达水平明显增加(P<0.05),MLCK/MLC2信号通路相关蛋白MLCK、p-MLC2/MLC2的表达水平明显降低(P<0.05);PB组和WLD-H组的上述指标结果优于WLD-L组(P<0.05)。结论:WLD可能通过抑制MLCK/MLC2信号通路,下调肠道中炎症因子的表达,上调肠道中紧密连接蛋白的表达,从而改善IBS-D大鼠的肠道屏障功能。 展开更多
关键词 腹泻型肠易激综合征 胃苓汤 mlck/MLC2信号通路 肠道屏障功能
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加味白头翁汤通过p38 MAPK-MLCK信号通路影响溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜紧密连接蛋白 被引量：46
6
作者 张培培 杨欣 +4 位作者 梁国强 朱惠萍 朱慧 王萌 孙宏文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期5719-5726,共8页
从肠黏膜紧密连接蛋白角度探讨加味白头翁汤治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的效果及作用机制。将60只SPF级SD雄性大鼠随机选取10只作为空白组,其余50只采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液构建UC大鼠模型,随机分为5组,每组10只,分别... 从肠黏膜紧密连接蛋白角度探讨加味白头翁汤治疗溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的效果及作用机制。将60只SPF级SD雄性大鼠随机选取10只作为空白组,其余50只采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液构建UC大鼠模型,随机分为5组,每组10只,分别为模型组、美沙拉嗪组以及低、中、高剂量加味白头翁汤组(L-JWBTW、M-JWBTW、H-JWBTW组),连续给药14 d。观察大鼠体质量、大便等一般情况,计算疾病活动指数(disease activity index,DAI);镜下观察结肠组织病理形态学变化,进行损伤程度评分、病理组织学评分;鲎试剂法检测血清内毒素含量,Western blot法分析结肠组织ZO-1、occludin、claudin-1、p38 MAPK、MLCK、MLC2、p-MLC蛋白表达水平。结果显示,与空白组相比,模型组大鼠体质量明显降低,DAI评分、结肠黏膜损伤程度评分、病理组织学评分均显著升高,p38 MAPK、MLCK、MLC2、p-MLC蛋白表达水平以及血清内毒素含量明显升高,ZO-1、occludin、claudin-1蛋白表达水平显著下降。与模型组比较,美沙拉嗪组及各剂量加味白头翁汤组体质量明显增加,DAI评分、结肠黏膜损伤程度评分、病理组织学评分以及p38 MAPK、MLCK、MLC2、p-MLC蛋白表达水平和血清内毒素含量均显著下降,ZO-1、occludin、claudin-1蛋白表达水平显著升高,其中H-JWBTW组变化最为明显。上述结果表明,加味白头翁汤可以通过抑制p38 MAPK/MLCK通路的激活,恢复occludin、claudin-1、ZO-1蛋白的表达水平,降低血清中内毒素含量,促进肠黏膜机械屏障修复,维持紧密连接的完整性,降低肠黏膜的通透性,达到治疗UC的作用。 展开更多
关键词 加味白头翁汤 溃疡性结肠炎 p38 MAPK mlck ZO-1 occludin CLAUDIN-1 内毒素
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通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠c-kit和MLCK表达的影响 被引量：16
7
作者 乐音子 王晓鹏 +3 位作者 甄曙光 孙明明 吴本升 颜帅 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第8期1215-1220,共6页
目的 探讨通便汤对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织c-kit、MLCK蛋白及其他细胞因子的影响。方法 采用洛哌丁胺混悬液灌胃法复制STC大鼠模型,随机分为正常组、模型组、通便汤低、中、高剂量组和莫沙必利组。各组予以不同药物干预2周后,检... 目的 探讨通便汤对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织c-kit、MLCK蛋白及其他细胞因子的影响。方法 采用洛哌丁胺混悬液灌胃法复制STC大鼠模型,随机分为正常组、模型组、通便汤低、中、高剂量组和莫沙必利组。各组予以不同药物干预2周后,检测各组大鼠粪便含水率、小肠活性炭推进率;HE染色观察大鼠结肠病理学特征;酶联免疫法检测结肠一氧化氮(NO)、一氧化氮酶(NOS)的含量;免疫组化法检测结肠c-kit、MLCK的表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠粪便质地干硬,含水率明显下降,小肠活性炭推进率显著下降(P<0.05),结肠组织正常结构被破坏,炎性细胞浸润,结肠组织NO和NOS含量明显上升, c-kit和MLCK蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,通便汤各剂量组增加粪便含水率以及结肠肌层厚度和绒毛高度(P<0.05),提高小肠活性炭推进率,显著上调结肠组织c-kit和MLCK蛋白表达,同时降低结肠组织NO和NOS含量(P<0.05)。结论 通便汤能提高STC大鼠小肠活性炭推进率,增加粪便含水率,改善结肠病理形态,其作用机制可能与调节NO、NOS水平,上调结肠c-kit、MLCK蛋白表达有关。 展开更多
关键词 通便汤 慢传输型便秘 一氧化氮 C-KIT mlck
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参苓白术散调节ROCK/MLCK信号通路抗IBD的作用机制 被引量：8
8
作者 刘玉晖 曾兰芳 +2 位作者 刘志勇 侯贝贝 游宇 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期719-723,共5页
目的探讨参苓白术散抗脂多糖(LPS)诱导的炎症性肠病(IBD)损伤的作用和机制。方法采用LPS(200μg·m L^(-1))造模,将细胞分为空白组(10%空白血清),模型组(10%空白血清+LPS),参苓白术散低、中、高剂量组(4%含药血清+LPS、8%含药血清+... 目的探讨参苓白术散抗脂多糖(LPS)诱导的炎症性肠病(IBD)损伤的作用和机制。方法采用LPS(200μg·m L^(-1))造模,将细胞分为空白组(10%空白血清),模型组(10%空白血清+LPS),参苓白术散低、中、高剂量组(4%含药血清+LPS、8%含药血清+LPS、16%含药血清+LPS),FBS对照组(10%FBS+LPS)、Rho激酶(ROCK)阻断剂Y27632组(10μmol·L^(-1) Y27632+16%含药血清+LPS)、肌球蛋白亲链激酶(MLCK)阻断剂ML-7组(10μmol·L^(-1) ML-7+16%含药血清+LPS)。建立肠隐窝上皮细胞(IEC-6)与小鼠T淋巴细胞瘤细胞(Cyc-Tag)共培养体系。将共培养细胞接种于Transwell 12孔板中,采用Millipore-ERS电阻仪检测共培养体系下IEC-6细胞跨膜电阻值(TEER);采用Western Blotting法分别检测共培养体系中和Cyc-Tag单独培养下ROCK、MLCK、磷酸化ROCK(Pho-ROCK)及磷酸化MLC(Pho-MLC)蛋白的表达情况。结果共培养体系中,与空白组比较,模型组的IEC-6细胞TEER值显著下降(P<0.01),ROCK、Pho-ROCK、MLCK及Pho-MLC蛋白表达量显著增加(P<0.01);与模型组比较,参苓白术散低、中、高剂量组及Y27632组、ML-7组的IEC-6细胞TEER值均显著升高(P<0.01),ROCK、Pho-ROCK、MLCK及Pho-MLC蛋白表达量均有明显下调(P<0.05,P<0.01)。Cyc-Tag细胞单独培养下,与空白组比较,模型组的ROCK、Pho-ROCK、MLCK及Pho-MLC蛋白表达量显著增加(P<0.01);与模型组比较,参苓白术散低、中、高剂量组及Y27632组、ML-7组的ROCK、Pho-ROCK、MLCK及Pho-MLC蛋白表达量均有明显的下调(P<0.05,P<0.01)。结论参苓白术散含药血清对LPS诱导的IEC-6细胞损伤具有明显地抑制作用,可能与调节ROCK/MLCK信号通路及改善IEC-6细胞通透性有关。 展开更多
关键词 参苓白术散 炎症性肠病 ROCK/mlck信号通路 脂多糖 肠隐窝上皮细胞 小鼠T淋巴细胞瘤细胞 共培养体系
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“和解肝脾腹部推拿法”对非酒精性脂肪肝大鼠肠组织MLCK信号通路的影响 被引量：9
9
作者 石玉生 李海争 张玮 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第10期2200-2203,I0001,共5页
目的：观察和解肝脾腹部推拿法对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠肠黏膜组织MLCK信号通路的调控作用。方法：采用高脂饮食喂养10周建立NAFLD大鼠模型,再以和解肝脾腹部推拿法治疗4周后对比手法干预组和模型对照组体质量、肝湿重变化,用West... 目的：观察和解肝脾腹部推拿法对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠肠黏膜组织MLCK信号通路的调控作用。方法：采用高脂饮食喂养10周建立NAFLD大鼠模型,再以和解肝脾腹部推拿法治疗4周后对比手法干预组和模型对照组体质量、肝湿重变化,用Western blot方法,检测手法干预前后,NAFLD大鼠模型肠黏膜组织MLCK及其介导的PMLC蛋白表达的变化,利用异硫氰酸荧光素-葡聚糖（FITC-Dextran）示踪法检测干预前后大鼠肠黏膜通透性变化。结果：与模型对照组相比较,手法干预组大鼠体质量及肝湿重明显降低（P 〈0. 05）;手法干预组肠黏膜组织MLCK蛋白表达及其介导的P-MLC蛋白表达较对照组明显降低（P 〈0. 05）;手法干预组大鼠肠袋外漏出FITC-Dextran含量与模型对照组相比明显降低（P 〈0. 05）。结论：和解肝脾腹部推拿法可降低NAFLD大鼠体质量与肝湿重,其通过调控肠组织MLCK信号通路,改善肠上皮屏障功能,降低肠道黏膜的通透性,有利于阻断LPS等毒素对肝脏的侵袭,此可能为和解肝脾腹部推拿法治疗NAFLD的作用机制。 展开更多
关键词 mlck信号通路 和解肝脾 非酒精性脂肪肝 揉腹 肠道黏膜通透性
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聚合酶链反应在MLCK表达载体构建中的应用 被引量：3
10
作者 汪渊 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 1997年第5期527-529,共3页
用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）方法扩增出含有ＳａｌⅠ位点和转录起始点ＡＴＧ的肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎＬｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉ－ｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ片段，并插入质... 用聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）方法扩增出含有ＳａｌⅠ位点和转录起始点ＡＴＧ的肌球蛋白轻链激酶（ｍｙｏｓｉｎＬｉｇｈｔｃｈａｉｎｋｉ－ｎａｓｅ，ＭＬＣＫ）ｃＤＮＡ片段，并插入质粒ｐＢＫｒｓｖ中，构建成能在宿主细胞中表达的表达载体，并通过酶切图谱、ＳａｌⅠ位点ＤＮＡ序列分析得到证实。为进一步研究ＭＬＣＫ的表达奠定基础。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 mlck 基因载体 质粒 构建
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清开灵对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤MLCK基因转录的影响 被引量：4
11
作者 玛娜璐璐 朱海燕 +5 位作者 高永红 孙逸坤 赵一舟 娄利霞 娄晋宁 谭丽娜 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第2期327-329,I0011,共4页
目的:研究清开灵对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤MLCK基因转录的影响。方法:细胞分为正常对照组(有糖Earle液)、模型组(缺氧缺糖模拟缺血:无糖Earle液,37℃,5%CO2,1%O2培养24 h)、清开灵低、中、高浓度组(缺氧缺塘+清开灵1%、2%、4%),... 目的:研究清开灵对小鼠脑微血管内皮细胞缺氧损伤MLCK基因转录的影响。方法:细胞分为正常对照组(有糖Earle液)、模型组(缺氧缺糖模拟缺血:无糖Earle液,37℃,5%CO2,1%O2培养24 h)、清开灵低、中、高浓度组(缺氧缺塘+清开灵1%、2%、4%),在37℃、5%CO2培养箱中培养24 h后经MTT比色法检测细胞活力、荧光定时定量PCR检测MLCK基因转录。结果:缺氧缺糖24 h后微血管内皮细胞活性降低(P<0.05)、MLCK基因转录被抑制(P<0.05);清开灵1%、2%、4%组均抑制了缺糖缺氧条件下微血管内皮细胞活性的降低(P<0.05),清开灵4%组降低MLCK的表达(P<0.05)。结论:缺糖缺氧条件下微血管内皮细胞活性降低。清开灵通过抑制MLCK的表达,恢复BBB的部分屏障功能。 展开更多
关键词 清开灵 mlck 脑微血管内皮细胞 缺氧
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加味柴芍六君颗粒对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜屏障及MEK-ERK-MLCK通路的影响 被引量：8
12
作者 陈龙开 万星阳 +2 位作者 罗绪 周泠 黄海舸 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期1265-1269,共5页
目的探究加味柴芍六君颗粒对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜屏障及丝裂原活化蛋白激酶激酶-细胞外信号调节蛋白激酶-肌球蛋白轻链激酶(MEK-ERK-MLCK)通路的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组,模型组,加味柴芍六君颗粒低(0.25 g/ml)、中(0... 目的探究加味柴芍六君颗粒对溃疡性结肠炎模型大鼠肠黏膜屏障及丝裂原活化蛋白激酶激酶-细胞外信号调节蛋白激酶-肌球蛋白轻链激酶(MEK-ERK-MLCK)通路的影响。方法将60只大鼠随机分为对照组,模型组,加味柴芍六君颗粒低(0.25 g/ml)、中(0.50 g/ml)、高剂量(1.00 g/ml)治疗组,每组12只。以三硝基苯磺酸(TNBS)诱导造模,成功后加味柴芍六君颗粒各剂量治疗组大鼠以加味柴芍六君颗粒溶液灌胃治疗5 w,对照组和模型组大鼠以相同剂量生理盐水同样灌胃5 w,然后观察各组大鼠体重变化、大便性状、便血情况进行疾病活动指数(DAI)评分,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠结肠组织病理学变化,进行组织学(HI)评分,髓过氧化物酶(MPO)检测试剂盒检测结肠中MPO的水平,实时荧光定量(qRT)-PCR检测MEK、ERK、MLCK mRNA的表达,Western印迹法检测MEK、ERK、p-ERK、MLCK、p-MLCK蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠DAI评分,HI评分,MPO水平,MEK、ERK、MLCK mRNA表达,MEK、ERK、p-ERK、MLCK、p-MLCK蛋白表达均明显升高(P<0.05);与模型组相比,加味柴芍六君颗粒各剂量治疗组大鼠DAI评分,HI评分,MPO水平,MEK、ERK、MLCK mRNA表达,MEK、ERK、p-ERK、MLCK、p-MLCK蛋白表达均明显降低且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论加味柴芍六君颗粒可以修复溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜屏障,分子机制可能与抑制MEK-ERK-MLCK通路表达有关。 展开更多
关键词 加味柴芍六君颗粒 溃疡性结肠炎 髓过氧化物酶 MEK-ERK-mlck
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MLCK和ROCK对细胞骨架和细胞行为的影响 被引量：5
13
作者 杨本艳姿 王红兵 +1 位作者 杨力 吴泽志 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第4期469-475,共7页
肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和ROCK/ROK/Rho激酶(Rho kinase,ROCK)是肌细胞和非肌细胞中调节肌球蛋白轻链磷酸化的两种重要激酶,肌球蛋白轻链磷酸化调节肌球蛋白的收缩参与了诸如细胞运动、粘附、组织修复和癌症... 肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和ROCK/ROK/Rho激酶(Rho kinase,ROCK)是肌细胞和非肌细胞中调节肌球蛋白轻链磷酸化的两种重要激酶,肌球蛋白轻链磷酸化调节肌球蛋白的收缩参与了诸如细胞运动、粘附、组织修复和癌症转移和疾病发生等重要的生命活动。在这些重要的生命活动中,同样是催化肌球蛋白磷酸化的这两种激酶,MLCK和ROCK定位在不同的细胞区域,以不同的作用方式通过对细胞骨架的影响实现对细胞功能的精细调控。 展开更多
关键词 ROCK mlck 肌球蛋白轻链磷酸化 细胞骨架
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从CaM-MLCK信号通路探究不同频率摩腹对脾虚家兔的手法效应 被引量：2
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作者 蔡伟蓝 王继红 +3 位作者 许嘉英 张强 任雪晗 黄志凯 《广州中医药大学学报》 CAS 2023年第10期2561-2567,共7页
【目的】通过观察不同频率摩腹对脾虚家兔胃组织钙调蛋白(CaM)-肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响,探析摩腹的手法效应。【方法】将72只家兔随机分为空白组、模型组、低频摩腹组(机械臂摩腹101~150次/min)、高频摩腹组(机械臂摩腹20... 【目的】通过观察不同频率摩腹对脾虚家兔胃组织钙调蛋白(CaM)-肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路的影响,探析摩腹的手法效应。【方法】将72只家兔随机分为空白组、模型组、低频摩腹组(机械臂摩腹101~150次/min)、高频摩腹组(机械臂摩腹201~250次/min)、低频摩腹+抑制剂组[机械臂摩腹101~150次/min+腹腔注射MLCK抑制剂ML-92.0 mg·kg^(-1)]、高频摩腹+抑制剂组(机械臂摩腹201~250次/min+腹腔注射ML-92.0 mg·kg^(-1))。除空白组外,其余各组采用苦寒泻下法联合饥饱失常法构建脾虚家兔模型。干预结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胃黏膜病理变化,实时定量聚合酶链反应(qPCR)法、Western Blot法分别对应检测胃小弯组织CaM、MLCK的mRNA、蛋白表达水平。【结果】(1)模型组出现明显脾虚症状,低频摩腹组、低频摩腹+抑制剂组、高频摩腹+抑制剂组家兔脾虚症状较模型组改善,而高频摩腹组脾虚症状较模型组加重。(2)与模型组比较,低频摩腹组、低频摩腹+抑制剂组、高频摩腹+抑制剂组家兔胃黏膜组织结构和形态均有所恢复,而高频摩腹组家兔胃黏膜组织结构和形态损伤均有所加重。(3)与空白组比较,模型组家兔胃小弯组织CaM、MLCK的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,低频摩腹组CaM、MLCK的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),高频摩腹组、低频摩腹+抑制剂组与高频摩腹+抑制剂组CaM、MLCK的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】低频率(101~150次/min)摩腹可通过上调CaM、MLCK mRNA和蛋白表达,促进脾虚家兔胃肠消化功能恢复,具有补的良性效应;相反,高频率(201~250次/min)摩腹一定程度上阻碍了脾虚家兔胃肠消化功能的恢复,具有泻的损益效应,其作用可能与抑制CaM、MLCK mRNA和蛋白表达有关。 展开更多
关键词 摩腹 脾虚 频率 补泻 钙调蛋白(CaM) 肌球蛋白轻链激酶(mlck) 家兔
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熊胆粉通过抑制MLCK/pMLC2通路改善肠上皮屏障功能缓解结肠炎 被引量：1
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作者 田瑶 梁琪 +3 位作者 李金虎 吴雨柔 魏大能 吴纯洁 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期4659-4664,共6页
目的:探究熊胆粉对结肠炎的治疗作用及机制。方法:小鼠自由饮用含3%葡聚糖硫酸钠的水溶液诱导结肠炎模型,造模成功后给予不同剂量的熊胆粉溶液(150、300、600 mg/kg)连续7 d,进行小鼠疾病活动指数(DAI)评分;测量结肠长度;HE染色观察结... 目的:探究熊胆粉对结肠炎的治疗作用及机制。方法:小鼠自由饮用含3%葡聚糖硫酸钠的水溶液诱导结肠炎模型,造模成功后给予不同剂量的熊胆粉溶液(150、300、600 mg/kg)连续7 d,进行小鼠疾病活动指数(DAI)评分;测量结肠长度;HE染色观察结肠病理学变化;阿尔新蓝染色观察黏蛋白含量;FITC-葡聚糖检测肠屏障完整性;免疫荧光染色和Western Blot观察Occludin、E-cadherin、Dsg2蛋白表达;Western Blot检测MLCK/pMLC2信号通路蛋白。结果:与空白组比较,模型组小鼠体质量出现显著下降,DAI评分和组织学评分显著上升,结肠变短(P<0.01)。低、中剂量的熊胆粉可缓解体质量的下降,降低DAI评分,保护小鼠结肠组织完整性,减轻结肠的缩短,降低组织学评分(P<0.01),提高Occludin、Dsg2、E-cadherin蛋白的表达(P<0.01),减少了MLCK蛋白的表达,降低了pMLC2/MLC2蛋白的比例(P<0.01)。结论:熊胆粉通过抑制MLCK/pMLC2信号通路,保护细胞连接蛋白,修复肠屏障,而发挥抗结肠炎作用。 展开更多
关键词 熊胆粉 结肠炎 黏蛋白 肠道屏障 mlck/pMLC2通路
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四神丸对脾肾阳虚泄泻大鼠胃窦组织Ghrelin-CaM-MLCK信号通路的影响 被引量：11
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作者 蔺晓源 邓娜 +1 位作者 蔡莹 刘芳 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2017年第12期34-37,共4页
目的观察四神丸对脾肾阳虚型泄泻模型大鼠胃窦组织Ghrelin-Ca M-MLCK信号通路的影响,探讨其作用机制。方法采用灌服腺嘌呤和番泻叶水煎剂制作脾肾阳虚型泄泻大鼠模型。将72只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和四神丸高、中、低... 目的观察四神丸对脾肾阳虚型泄泻模型大鼠胃窦组织Ghrelin-Ca M-MLCK信号通路的影响,探讨其作用机制。方法采用灌服腺嘌呤和番泻叶水煎剂制作脾肾阳虚型泄泻大鼠模型。将72只SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组和四神丸高、中、低剂量组,每组12只。各给药组给予相应药物灌胃,连续14 d,免疫组化和Western blot分别检测胃窦组织脑肠肽胃促生长素(Ghrelin)及其受体(GHSR)、钙调素(Ca M)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的蛋白表达。结果模型组大鼠胃窦组织Ghrelin、GHSR、Ca M和MLCK蛋白表达均较正常组明显升高(P<0.01);各给药组上述指标蛋白表达均明显低于模型组(P<0.05,P<0.01),且以四神丸高剂量组最为明显。结论四神丸对脾肾阳虚泄泻模型大鼠的作用可能与调节Ghrelin-Ca M-MLCK信号通路指标的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 四神丸 泄泻 胃促生长素 胃促生长素受体 钙调素 肌球蛋白轻链激酶 大鼠
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基于p38 MAPK/NF-κB/MLCK信号通路探讨半夏泻心汤修复肠黏膜屏障的作用机制 被引量：3
17
作者 刘蕾蕾 梁书志 刘西建 《中医药信息》 2024年第9期1-6,17,共7页
目的:探寻半夏泻心汤(BXD)在体内抑制肠道炎症反应及修复肠黏膜屏障的作用机制。方法:36只雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(美沙拉嗪组)以及半夏泻心汤低剂量组(BXD-低剂量组)、中剂量组(BXD-中剂量组)、高剂量组(BXD-... 目的:探寻半夏泻心汤(BXD)在体内抑制肠道炎症反应及修复肠黏膜屏障的作用机制。方法:36只雌性SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、西药组(美沙拉嗪组)以及半夏泻心汤低剂量组(BXD-低剂量组)、中剂量组(BXD-中剂量组)、高剂量组(BXD-高剂量组)。适应性喂养7 d后,除空白组外,其余各组大鼠自由饮用5%DSS 7 d构建溃疡性结肠炎大鼠模型,造模成功后,空白组与模型组灌胃生理盐水,西药组灌胃美沙拉嗪,0.054 g/d),半夏泻心汤低剂量组(2.205 g/kg)、中剂量组(4.41 g/kg)、高剂量组(8.82 g/kg)灌胃给予半夏泻心汤提取物,均给药15 d。采用疾病活动指数评估造模及药物治疗后大鼠的一般变化情况;苏木精-伊红(HE)染色法,确认结肠组织病变损伤程度;ELISA检测血清中炎性因子含量表达变化情况;qRT-PCR法、Western blot法检测p38 MAPK/NF-κB/MLCK/信号通路关键蛋白表达。结果:5%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠出现体质量减轻、腹泻、脓血便及结肠缩短,造模成功。BXD及美沙拉嗪给药后,大鼠的DAI评分出现不同程度的降低。HE结果显示美沙拉嗪及高剂量BXD给药后明显改善了DSS导致的大鼠结肠组织的病理情况。酶联免疫吸附实验结果提示,高剂量BXD及美沙拉嗪给药后可以显著抑制大鼠促炎因子的表达水平,从而达到抑制肠道炎症的治疗效果。Western blot和qPCR结果表明,BXD可通过调控MAPK、MLCK、NF-κB、Occludin的表达量修复肠黏膜屏障。结论:半夏泻心汤可降低肠黏膜通透性以及修复受损的肠黏膜,其机制可能是通过抑制p38 MAPK/NF-κB/MLCK信号通路实现的。 展开更多
关键词 半夏泻心汤 溃疡性结肠炎 p38 MAPK/NF-κB/mlck通路 肠黏膜屏障
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柴胡疏肝散对胃肠功能紊乱大鼠模型胃肠平滑肌细胞MLCK表达的影响 被引量：14
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作者 彭雷 程阔菊 +2 位作者 朱丹 罗云 程俊 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期613-617,共5页
目的:研究柴胡疏肝散汤剂对胃肠功能紊乱大鼠胃肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响。方法:将8周龄SD大鼠按随机数字表法分为sham组(对照组)、FGID组(模型组)、sham+柴胡疏肝散组、FGID+柴胡疏肝散组4组各20只。利用腹腔注射... 目的:研究柴胡疏肝散汤剂对胃肠功能紊乱大鼠胃肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响。方法:将8周龄SD大鼠按随机数字表法分为sham组(对照组)、FGID组(模型组)、sham+柴胡疏肝散组、FGID+柴胡疏肝散组4组各20只。利用腹腔注射利血平建立大鼠胃肠功能紊乱动物模型,利用Real-Time PCR、western Blot和组织免疫荧光技术检测柴胡疏肝散汤剂对胃肠功能紊乱大鼠胃肠平滑肌细胞MLCK表达的影响。结果:Real-Time PCR、Westeron Blot和组织免疫荧光显示FGID组大鼠胃肠平滑肌细胞内MLCK表达量显著减少,经柴胡疏肝散干预后MLCK表达显著上升。结论:柴胡疏肝散汤剂能提高胃肠功能紊乱大鼠胃肠平滑肌细胞内MLCK的表达。 展开更多
关键词 柴胡疏肝散 胃肠平滑肌细胞 肌球蛋白轻链激酶
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开胃进食汤超微颗粒对胃肠平滑肌细胞MLCK表达的影响 被引量：5
19
作者 陈斌 蔡光先 +1 位作者 戴飞跃 刘柏炎 《湖南中医药大学学报》 CAS 2010年第5期9-11,共3页
目的研究开胃进食汤超微配方颗粒对脾虚大鼠胃肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响,探求其对大鼠胃肠动力调节作用的机制。方法采用利血平脾虚模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、开胃进食汤超微配方颗粒(超微)组、传统汤剂... 目的研究开胃进食汤超微配方颗粒对脾虚大鼠胃肠平滑肌细胞肌球蛋白轻链激酶(MLCK)表达的影响,探求其对大鼠胃肠动力调节作用的机制。方法采用利血平脾虚模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、开胃进食汤超微配方颗粒(超微)组、传统汤剂(煎剂)组和健胃消食片对照(健胃)组,用免疫组化半定量分析MLCK的表达情况,同时观察药物对其影响。结果模型组大鼠胃窦平滑肌内MLCK表达明显减少,空肠平滑肌内明显增强,与正常组比较差异具有统计学意义(P<0.05);健胃组、煎剂组和超微组胃窦平滑肌内MLCK表达较模型组增强,差异具有统计学意义(P<0.05),煎剂组和超微组空肠平滑肌内MLCK表达低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论开胃进食汤超微配方颗粒能促进胃窦平滑肌收缩和空肠平滑肌舒张,可能与其提高胃窦平滑肌组织和降低空肠平滑肌组织内MLCK水平表达有关。 展开更多
关键词 开胃进食汤超微颗粒 脾虚 肌球蛋白轻链激酶 大鼠 木香 神曲
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基于p38 MAPK/MLCK信号通路探讨通腑泻肺灌肠液对急性肺损伤大鼠肠道屏障及肠道菌群的影响 被引量：13
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作者 马鸣 汪坤 +6 位作者 杨艳华 岳孟茹 任权娜 陈雨晗 宋永真 徐子福 赵旭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期5919-5931,共13页
该研究旨在探讨通腑泻肺灌肠液(TFXF)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路改善肠道屏障及肠道菌群结构治疗急性肺损伤大鼠的作用机制。将60只SPF级Wistar大鼠随机分为对照(CON)组、脂多糖(LPS,7.5 mg&#... 该研究旨在探讨通腑泻肺灌肠液(TFXF)通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)/肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路改善肠道屏障及肠道菌群结构治疗急性肺损伤大鼠的作用机制。将60只SPF级Wistar大鼠随机分为对照(CON)组、脂多糖(LPS,7.5 mg·kg^(-1))组、LPS+地塞米松(DEX,3.5 mg·kg^(-1))组、LPS+高剂量(HD,14.74 g·kg^(-1))-TFXF组、LPS+中剂量(MD,7.37 g·kg^(-1))-TFXF组、LPS+低剂量(LD,3.69 g·kg^(-1))-TFXF组。腹腔注射LPS建立大鼠急性肺损伤(ALI)模型。测定大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度和乳酸脱氢酶(LDH)活性;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测大鼠肺组织和结肠组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)等炎症因子水平;苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠肺组织和结肠组织的病理表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测大鼠肺组织p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、TNF-α和IL-1βmRNA表达;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠结肠组织中p38 MAPK/MLCK信号通路相关蛋白表达;16S rRNA测序检测大鼠肠道菌群组成及含量变化,相关性分析探讨肠道菌群改善ALI大鼠的调节作用。结果显示,与LPS组比较,各给药组大鼠肺及结肠组织病理学评分、BALF中LDH活性和总蛋白浓度均明显降低;除LPS+LD-TFXF组外,其余给药均能显著降低大鼠肺组织及结肠组织中TNF-α和IL-1β含量;各给药组大鼠结肠组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)/p38、磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)/肌球蛋白轻链2(MLC2)和MLCK蛋白表达明显降低;LPS+HD-TFXF组肺组织p38 MAPK、TNF-α和IL-1βmRNA表达水平显著降低。16S rRNA测序结果显示,LPS+HD-TFXF组肠道菌群丰度显著升高,肠道菌群Sobs、Shannon、Npshannon指数均显著升高,肠道微生物β多样性分布趋向于CON组,厚壁菌门显著升高、变形杆菌门显著降低,拟杆菌属丰度显著降低,瘤胃球菌属显著升高,物种差异主要为经黏液真杆菌属Blautia、罗氏菌499(Roseburia_sp_499)、丁酸球菌属Butyricicoccus等。大鼠肺组织TNF-α和IL-1β分别与Muri菌属、未分类的粪真杆菌群、瘤胃球菌属呈负相关,与拟杆菌属呈显著正相关;大鼠结肠组织TNF-α和IL-1β分别与未分类的粪真杆菌群、瘤胃球菌属呈负相关,与拟杆菌属呈显著正相关。预测菌群生物功能与次生代谢物的生物合成、氨基酸的生物合成、糖代谢和氧化磷酸化等相关。上述研究表明,TFXF可调节ALI大鼠肠道菌群物种的丰度和多样性,修复肺及结肠组织结构,调节炎性因子水平。其治疗ALI大鼠的作用机制可能与通过p38 MAPK/MLCK信号通路抑制炎症,改善肠黏膜通透性,维持肠道菌群稳态和屏障有关。 展开更多
关键词 通腑泻肺灌肠液 急性肺损伤 16S rRNA测序 肠道屏障 p38 MAPK/mlck信号通路
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