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Rho激酶调节缺氧处理VSMC收缩反应性与MLC20磷酸化的关系 被引量：5
1
作者 李涛 刘良明 刘建仓 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期34-38,共5页
目的观察Rho激酶调节缺氧处理的VSMC收缩反应性与MLC20磷酸化的关系。方法取肠系膜动脉VSMC,观察缺氧不同时间VSMC收缩反应性变化及Rho激酶活性调节剂对VSMC收缩反应性的影响。同时观察Rho激酶的激动剂和抑制剂对缺氧VSMCMLC20磷酸化水... 目的观察Rho激酶调节缺氧处理的VSMC收缩反应性与MLC20磷酸化的关系。方法取肠系膜动脉VSMC,观察缺氧不同时间VSMC收缩反应性变化及Rho激酶活性调节剂对VSMC收缩反应性的影响。同时观察Rho激酶的激动剂和抑制剂对缺氧VSMCMLC20磷酸化水平以及MLCP和MLCK活性的影响。结果缺氧后,VSMC收缩反应性发生明显变化,缺氧10min时VSMC收缩反应性有所升高,缺氧60、90以及120min后,VSMC收缩反应性明显降低。Rho激酶激动剂Ang-Ⅱ(10-9mol/L)可升高缺氧90minVSMC收缩反应性,Y-27632拮抗Ang-Ⅱ的作用增强。缺氧后VSMCMLC20磷酸化水平明显降低,MLCP活性明显升高,MLCK活性明显降低,Rho激酶激动剂Ang-Ⅱ(10-9mol/L)可使缺氧引起的降低的MLC20磷酸化水平升高,使增高的MLCP活性降低,Y-27632(10-5mol/L)可拮抗Ang-Ⅱ的这一作用。Ang-Ⅱ和Y-27632对缺氧后VSMCMLCK活性无明显影响。结论MLC20磷酸化在Rho激酶调节缺氧VSMC收缩反应性变化中具有重要作用,Rho激酶可通过调节MLCP的活性来调节休克MLC20磷酸化水平,MLCK在Rho激酶调节休克MLC20磷酸化中无明显作用。 展开更多
关键词 RHO激酶 血管平滑肌细胞 肌球蛋白轻链(mlc20) 肌球蛋白轻链磷酸酶(MLCP) 肌球蛋白轻链激酶(MLCK)
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MLC20磷酸化在PKCα、PKCε调节失血性休克大鼠血管钙敏感性中的作用 被引量：1
2
作者 徐竞 杨光明 +4 位作者 李涛 明佳 陈玮 张瑗 刘良明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期1972-1975,共4页
目的观察肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化在蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)调节大鼠失血性休克后血管钙敏感性中的作用,进一步探讨休克血管钙失敏的发生机制。方法采用缺氧大鼠血管平滑肌细... 目的观察肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化在蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)调节大鼠失血性休克后血管钙敏感性中的作用,进一步探讨休克血管钙失敏的发生机制。方法采用缺氧大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)和失血性休克后大鼠肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA),运用Western blot、底物磷酸化等技术方法,观察PKCα、PKCε激动剂作用下,以及抑制CPI-17、ILK、ZIPK后再给予PKCα、PKCε激动剂时,肌球蛋白轻链磷酸酶(myosin light chain phosphatase,MLCP)活性和MLC20磷酸化的变化。结果①缺氧2h后VSMC中MLCP活性增高至正常对照的150.1%(P<0.01),PKCα、PKCε激动剂可显著抑制其增高,使其分别降低至正常对照的103.0%和96.3%(P<0.01),抑制CPI-17、ILK、ZIPK,可显著抑制PKCα激动剂降低MLCP活性的作用,使其分别增高至正常对照的136.7%、127.6%和116.7%(P<0.01);抑制CPI-17、ILK、ZIPK,也可显著抑制PKCε激动剂降低MLCP活性的作用,使其分别增高至134.0%、128.5%和126.0%(P<0.01)。②失血性休克2h后SMA中MLC20磷酸化水平由32.4%显著降低至10.4%(P<0.01),PKCα、PKCε激动剂可显著抑制其降低,使其分别增高至26.4%和25.6%(P<0.01),抑制CPI-17、ILK、ZIPK,可显著削弱PKCα激动剂的增高MLC20磷酸化的作用,使其分别降低至12.7%、10.0%和15.7%(P<0.01);也可显著削弱PKCε激动剂增高MLC20磷酸化的作用,使其分别降低至10.1%、12.5%和10.3%(P<0.01)。结论PKCα、PKCε可能通过CPI-17、ILK、ZIPK调节MLCP活性和MLC20磷酸化,调节失血性休克血管平滑肌的钙敏感性。 展开更多
关键词 钙敏感性 PKCΑ PKCΕ MLCP mlc20
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ERK、p38 MAPK和JNK在缺氧血管平滑肌细胞反应性调节中的作用及与MLC20磷酸化途径的关系
3
作者 杨光明 刘良明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期1983-1983,共1页
关键词 血管平滑肌细胞 mlc20磷酸化 JNK ERK p38 MAPK 收缩反应 失血性休克模型 缺氧损伤 大鼠 去甲肾上腺素
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背俞指针疗法对GERD大鼠胃起搏区MLCK及P_(MLC20)表达水平的影响 被引量：5
4
作者 黄美祯 谭金晶 +7 位作者 宋庆增 刘礼剑 韦金秀 周晓玲 黎丽群 岑前丽 李建锋 谢胜 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1769-1773,共5页
目的:探讨背俞指针疗法对胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)大鼠食管黏膜及胃起搏区组织肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和磷酸化肌球蛋白调节性轻链(phosphorylation 20kD Myosin light chain pho... 目的:探讨背俞指针疗法对胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)大鼠食管黏膜及胃起搏区组织肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)和磷酸化肌球蛋白调节性轻链(phosphorylation 20kD Myosin light chain phosphorylation,P_(MLC20))表达的影响。方法:SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、西药组(枸橼酸莫沙必利分散片联合兰索拉唑肠溶片)和指针组,采用HE染色观察大鼠食管中下段组织的病理变化,荧光定量PCR法检测MLCK mRNA表达,免疫组化法检测MLCK、P_(MLC20)蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组食管鳞状上皮基底细胞中度增生,基底细胞层增厚,固有层乳头延长,固有层内炎细胞浸润,细胞间隙增宽;与模型组比较,指针组和西药组食管黏膜结构基本恢复正常。模型组MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达均明显低于空白组(P<0.05),指针组MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达均明显高于模型组(P<0.05或P<0.01),且指针组MLCK mRNA表达水平明显高于西药组(P<0.05),但MLCK蛋白表达水平明显低于西药组(P<0.05)。结论:GERD的发病与胃起搏区组织的MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达降低有关,背俞指针疗法治疗GERD疗效确切,其机制可能与其上调MLCK mRNA、蛋白及P_(MLC20)表达有关。 展开更多
关键词 背俞指针疗法 胃食管反流病 肌球蛋白轻链激酶 磷酸化肌球蛋白调节性轻链
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散结镇痛胶囊对PGF_(2α)诱发小鼠子宫平滑肌细胞收缩的抑制作用探讨 被引量：8
5
作者 刘莉娜 吕耀中 +3 位作者 孙兰 周军 王振中 萧伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期732-736,共5页
目的研究散结镇痛胶囊对前列腺素F_(2α)致原代小鼠子宫平滑肌细胞收缩变化的影响,初步探讨其对痛经的治疗作用。原代培养小鼠子宫平滑肌细胞并进行纯度鉴定,给药后监测动态钙离子变化,染色法观察细胞收缩的情况,免疫荧光法测定细胞钙... 目的研究散结镇痛胶囊对前列腺素F_(2α)致原代小鼠子宫平滑肌细胞收缩变化的影响,初步探讨其对痛经的治疗作用。原代培养小鼠子宫平滑肌细胞并进行纯度鉴定,给药后监测动态钙离子变化,染色法观察细胞收缩的情况,免疫荧光法测定细胞钙调蛋白(calmodulin,CaM)、肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)、磷酸化的肌球蛋白轻链2(phosphorylation of myosin light chain 2,p-MLC_(20))的蛋白表达水平。结果平滑肌肌动蛋白免疫荧光染色呈强阳性。与PGF_(2α)组比较,散结镇痛胶囊组的钙离子荧光值明显降低(P≤0.05);细胞面积明显增加(P≤0.01);CaM的蛋白表达水平明显降低(P≤0.05);MLCK的蛋白水平有下调趋势;p-MLC_(20)的蛋白表达水平明显降低(P≤0.01)。结论散结镇痛胶囊能治疗痛经,可能与其能抑制平滑肌细胞内钙离子内流,缓解细胞的收缩,降低CaM,p-MLC_(20)的蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 原代小鼠子宫平滑肌细胞 钙离子 细胞收缩 前列腺素F2Α CaM p-mlc20
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香砂六君子汤对脾胃虚弱型功能性消化不良大鼠的干预机制研究 被引量：12
6
作者 刘梦雅 成映霞 +5 位作者 白敏 赵琳娜 李润法 张延英 安耀荣 段永强 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期232-239,共8页
目的 探讨香砂六君子汤对脾胃虚弱型功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)大鼠的干预机制。方法 将60只SPF级雄性SD乳鼠随机分为空白组(n=10)和造模组(n=50),造模组大鼠采用综合造模法(碘乙酰胺灌服+游泳力竭+饥饱失常)复制脾胃虚... 目的 探讨香砂六君子汤对脾胃虚弱型功能性消化不良(functional dyspepsia, FD)大鼠的干预机制。方法 将60只SPF级雄性SD乳鼠随机分为空白组(n=10)和造模组(n=50),造模组大鼠采用综合造模法(碘乙酰胺灌服+游泳力竭+饥饱失常)复制脾胃虚弱型FD大鼠模型。模型复制成功后将造模组大鼠随机分为模型组、阳性对照组和香砂六君子汤高、中、低剂量组,共5组,每组10只。空白组和模型组大鼠给予10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,阳性对照组给予1.35 mg/(kg·d)莫沙必利药剂灌胃,香砂六君子汤高、中、低剂量组分别给予12、6、3 g/(kg·d)香砂六君子汤汤剂灌胃,持续干预14 d。造模和给药前后观察大鼠一般状况,测定大鼠体重、3 h进食量。给药干预结束后,测定大鼠胃排空率、肠推进率,采用苏木素-伊红染色观察胃组织病理改变,采用生化试剂盒测定大鼠胃组织匀浆液中Mg2+-ATP酶含量,采用蛋白免疫印迹法检测胃组织中CaM、MLCK、p-MLC20蛋白表达水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠毛发枯乱、倦懒怠动、行动缓迟,一般状况评分显著降低,体重、3 h进食量、胃排空率及肠推进率均显著下降(P<0.05);胃组织病理未见明显异常;胃组织中Mg2+-ATP酶含量减少,胃组织中CaM、MLCK、p-MLC20蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,高、中剂量给药组大鼠一般状况评分显著提升,体重、3 h进食量以及胃排空率显著增加(P<0.05);胃组织病理未见明显差异;胃组织中Mg2+-ATP酶含量显著增加,胃组织中CaM、MLCK、p-MLC20蛋白表达水平显著升高(P<0.05),上述指标香砂六君子汤组干预作用呈剂量依赖性。结论 香砂六君子汤能够有效改善脾胃虚弱型FD大鼠一般状况及胃动力,作用机制可能与其激活胃组织中CaM/MLCK/MLC20通路调控平滑肌舒缩,促进胃动力有关。 展开更多
关键词 香砂六君子汤 脾胃虚弱型 CaM/MLCK/mlc20通路 功能性消化不良
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莲子心新碱对肠系膜血管平滑肌收缩的抑制作用及分子机制 被引量：2
7
作者 张军利 肖敏 +3 位作者 王鹏 张弦 潘扬 杨光明 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期313-318,共6页
目的 研究莲子心新碱(Neo)对小鼠肠系膜血管及血管平滑肌细胞(VSMCs)收缩的抑制作用;并通过观察其对肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化和RhoA相关蛋白激酶(ROCK1)表达的影响,初步探讨引起该抑制的作用机制。方法 采用离体微血管张力测定仪观察... 目的 研究莲子心新碱(Neo)对小鼠肠系膜血管及血管平滑肌细胞(VSMCs)收缩的抑制作用;并通过观察其对肌球蛋白轻链(MLC20)磷酸化和RhoA相关蛋白激酶(ROCK1)表达的影响,初步探讨引起该抑制的作用机制。方法 采用离体微血管张力测定仪观察高钾溶液(KCl)对经Neo预处理后肠系膜血管收缩的影响,并通过Urea/glycerolPAGE法检测其MLC20磷酸化水平的变化。同时,利用成像分析技术考察高钾溶液对经Neo预处理后VSMCs收缩的影响,并通过细胞免疫荧光法测定VSMCs中ROCK1蛋白的表达水平。结果 经Neo预处理后的肠系膜血管能明显抑制高钾溶液引起的收缩,其IC50值为6.019μmol/L;且可阻断高钾溶液产生MLC20磷酸化。另外,与模型组(KCl)VSMCs的长度(40.94±1.94)μm相比,药物组(Neo+KCl)VSMCs的长度(44.95±5.15)μm显著延长(P<0.01),其ROCK1蛋白的表达也明显下降。结论 Neo对肠系膜血管平滑肌收缩具有明显的抑制作用,其作用机制可能与阻断平滑肌MLC20磷酸化和下调其ROCK1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 莲子心新碱 平滑肌收缩 抑制作用 mlc20磷酸化 ROCK1
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周细胞对脓毒症大鼠血管反应性的保护作用 被引量：4
8
作者 张紫森 刘良明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2029-2034,共6页
目的观察周细胞(pericyte, PC)对脓毒症大鼠血管舒缩反应性的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔诱导大鼠脓毒症模型,将SD大鼠(12~14周龄,雌雄各半,体质量180~220 g)按随机单位设计方法分为4组(n=16):正常对照组、脓毒症组、常规治疗组(乳... 目的观察周细胞(pericyte, PC)对脓毒症大鼠血管舒缩反应性的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔诱导大鼠脓毒症模型,将SD大鼠(12~14周龄,雌雄各半,体质量180~220 g)按随机单位设计方法分为4组(n=16):正常对照组、脓毒症组、常规治疗组(乳酸林格液体复苏+血管活性药多巴胺+头孢呋辛钠)、PC治疗组(PC 106/只+常规治疗),观察不同处理组大鼠肠系膜微动脉舒缩反应性、肠系膜微血管动静脉流速、肝肾血流量及肠系膜上动脉p-MLC20表达的变化。结果与正常对照组相比,脓毒症大鼠血管反应性明显降低(P<0.01);常规治疗可轻微改善脓毒症血管反应性;PC治疗后,脓毒症大鼠微动脉的舒缩反应性、组织器官的灌注量明显改善(P<0.01),肠系膜微动脉的收缩和舒张反应性分别增加至81.5%和86.9%。机制研究发现PC对脓毒症大鼠血管反应性的保护作用与血管p-MLC20有关(P<0.01)。结论 PC通过改善脓毒症大鼠血管收缩和舒张反应性从而实现了对整体器官的保护作用。 展开更多
关键词 脓毒症 周细胞 血管反应性 p-mlc20
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