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氯胺酮联合吉西他滨对脑胶质瘤大鼠免疫逃逸、瘤体体积及MKK3/6信号通路的影响
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作者 孔博 韩光魁 +2 位作者 刘建国 朱晓东 余云湖 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第6期677-681,692,共6页
目的 探究氯胺酮联合吉西他滨对脑胶质瘤大鼠免疫逃逸、瘤体体积及MKK3/6信号通路的影响。方法 选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(NO)组,模型(MO)组,氯胺酮(KM)组,吉西他滨(GT)组,氯胺酮联合吉西他滨(KG)组,每组10只,对MO、KM、GT... 目的 探究氯胺酮联合吉西他滨对脑胶质瘤大鼠免疫逃逸、瘤体体积及MKK3/6信号通路的影响。方法 选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(NO)组,模型(MO)组,氯胺酮(KM)组,吉西他滨(GT)组,氯胺酮联合吉西他滨(KG)组,每组10只,对MO、KM、GT、KG采用立体定位法进行脑胶质瘤建模,NO组不建立该模型。建模成功后,对KM组腹腔注射100 mg/kg氯胺酮,GT组腹腔注射150 mg/kg吉西他滨,KG组腹腔注射100 mg/kg氯胺酮及150 mg/kg吉西他滨,NO组、MO组同期腹腔注射同体积生理盐水,HE染色检测脑胶质瘤组织病理形态,ELISA及RT-PCR检测免疫逃逸相关因子,免疫印迹法检测MKK3/6蛋白表达。结果 与NO组相比,MO组IL-4、IL-10、TGF-β1含量及mRNA表达升高(P<0.05),MKK3/6蛋白表达明显降低(P<0.05);与MO组相比,KM组、GT组、KG组IL-4、IL-10、TGF-β1含量及mRNA表达降低(P<0.05),肿瘤抑制率、MKK3/6蛋白表达升高(P<0.05),且GT、KM组比较无明显差异(P>0.05),KG组比GT组变化明显(P<0.05);NO组脑组织结构正常,细胞排列整齐,MO组脑组织遭到破坏,可见大量浸润成长的肿瘤细胞及淋巴细胞浸润、癌细胞核染色变深;与MO组比较,KM、GT、KG组病理结构明显改善,癌细胞核染变浅。结论 氯胺酮联合吉西他滨对脑胶质瘤大鼠具有显著疗效,可有效抑制免疫逃逸,并对MKK3/6表达具有显著的调控作用。 展开更多
关键词 氯胺酮 吉西他滨 脑胶质瘤 免疫逃逸 瘤体体积 mkk3/6信号通路
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RAGE-MKK4/MKK7-JNK1通路在2型糖尿病合并肝细胞癌中的作用 被引量:3
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作者 蒙丽恒 黄耀 +1 位作者 李世春 秦映芬 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第10期1509-1514,共6页
目的探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK4)、丝裂原活化蛋白激酶激酶7(MKK7)及c-Jun氨基末端蛋白激酶1(JNK1)在2型糖尿病合并肝细胞癌中的表达及意义。方法收集肝胆外科手术切除的2型糖尿病合并肝细胞癌(D... 目的探讨晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MKK4)、丝裂原活化蛋白激酶激酶7(MKK7)及c-Jun氨基末端蛋白激酶1(JNK1)在2型糖尿病合并肝细胞癌中的表达及意义。方法收集肝胆外科手术切除的2型糖尿病合并肝细胞癌(DMHC组)癌组织和相应癌旁组织标本18例及30例肝细胞癌(HCC组)癌组织和相应癌旁组织,用Western blot法检测其RAGE、MKK4、MKK7及JNK1的蛋白表达情况。结果 (1)DMHC及HCC组癌组织中RAGE、MKK7及JNK1蛋白表达均较相应癌旁组织高,MKK4蛋白表达水平均较相应癌旁组织表达低,差异均有统计学意义(P<0.01)。DMHC组癌组织中MKK7和JNK1蛋白表达高于HCC组癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HCC组低分化的癌组织RAGE、MKK7和JNK1蛋白表达水平均较高分化的癌组织高,而DMHC组低分化的癌组织MKK7和JNK1蛋白表达水平较高分化的癌组织表达高,差异均有统计学意义(P<0.01)。(3)DMHC组发生转移的患者癌组织MKK4蛋白表达水平较未发生转移者降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)DMHC及HCC组癌组织RAGE与MKK7、RAGE与JNK1、MKK7与JNK1蛋白表达水平均呈显著正相关关系(P<0.05),且DMHC组的相关性更显著。结论 RAGE蛋白表达增加可能参与了肝细胞癌的发生和发展;MKK4降低可能是单纯肝细胞癌及2型糖尿病合并肝细胞癌的危险因素之一;糖尿病状态下MKK7、JNK1蛋白更高的表达可能促进了2型糖尿病时肝细胞癌的发生和发展,MKK4降低可能导致了肝癌细胞的转移。MKK7和JNK1可能在一定水平上受RAGE的调控。 展开更多
关键词 RAGE mkk4 mkk7 JNK1 糖尿病 肝细胞癌
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左归丸对庆大霉素诱导的肾损伤大鼠MKK4、MKK7、JNK的影响 被引量:3
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作者 范为民 王小琴 刘成福 《中国中西医结合肾病杂志》 2013年第2期100-103,I0001,共5页
目的:探讨左归丸对庆大霉素诱导的肾损伤大鼠MKK4、MKK7、JNK的影响。方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、SP600125组、左归丸组,对照组给予腹腔注射0.9%生理盐水2.5ml·kg-1·d-1,模型组腹腔注射硫酸庆大霉... 目的:探讨左归丸对庆大霉素诱导的肾损伤大鼠MKK4、MKK7、JNK的影响。方法:将40只雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、SP600125组、左归丸组,对照组给予腹腔注射0.9%生理盐水2.5ml·kg-1·d-1,模型组腹腔注射硫酸庆大霉素100ml·kg-1·d-1,SP600125组左侧腹腔注射硫酸庆大霉素100ml·kg-1·d-1,2h后右侧腹腔注射SP60012515ml·kg-1·d-1,左归丸组腹腔注射硫酸庆大霉素100ml·kg-1·d-1和灌胃左归丸水溶液2g·200g-1·d-1,4组大鼠连续给药10d。第11天测量各组大鼠尿NAG酶、血Scr、血BUN等生化指标;HE染色观察各种大鼠肾脏病理状况;以免疫组化技术检测各组大鼠肾脏MKK4、MKK7、JNK的表达,并采用Image pro-Plus6.0图像分析软件半定量分析;以Westernblot方法检测各组大鼠肾脏MKK4、MKK7、JNK蛋白的表达。结果:生化指标结果显示:与对照组比较,模型组的大鼠尿NAG酶、血Scr、血BUN值显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,SP600125组与左归丸组生化指标得到改善,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。免疫组化结果显示:与对照组比较,模型组MKK4、MKK7、JNK在肾小管大量表达,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,SP600125组与左归丸组表达少量,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Western blot方法结果显示:模型组MKK4、MKK7、JNK蛋白灰度值较对照组明显升高(P<0.01),SP600125组与左归丸组较模型组灰度值下降(P<0.05)。结论:左归丸对庆大霉素诱导肾损伤大鼠的保护作用可能与抑制MKK4、MKK7、JNK的表达有关。 展开更多
关键词 左归丸 庆大霉素 肾损伤 SP600125 mkk4 mkk7 JNK
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油菜BnMKK4全长基因的克隆及表达分析 被引量:12
4
作者 张腾国 王宁 +5 位作者 王娟 王圆圆 张艳 孙万仓 常燕 夏惠娟 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期491-498,共8页
从‘陇油6号’油菜中克隆得到了一个新的BnMKK4基因的cDNA,全长1317bp,其中包括993bp的开放阅读框,159bp的5'非翻译区(5'UTR),165bp的3'非翻译区(3'UTR)。与拟南芥AtMKK4有很高的同源性,因此命名为BnMKK4(GenBank登录号... 从‘陇油6号’油菜中克隆得到了一个新的BnMKK4基因的cDNA,全长1317bp,其中包括993bp的开放阅读框,159bp的5'非翻译区(5'UTR),165bp的3'非翻译区(3'UTR)。与拟南芥AtMKK4有很高的同源性,因此命名为BnMKK4(GenBank登录号为JF268686)。该基因编码330个氨基酸的蛋白质,分子量36.5kDa,等电点为9.01。实时荧光定量PCR结果显示该基因表达受低温胁迫和盐胁迫的诱导,表明该基因在油菜适应低温胁迫和盐胁迫的过程中发挥作用。 展开更多
关键词 油菜'陇油6号’ mkk4基因 分子克隆 表达分析
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let-7a通过抑制MAP4K3/MKK4/JNK信号通路减少脑出血大鼠神经元调亡 被引量:10
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作者 杨慧 万广 +2 位作者 高绚照 柳毅 王守春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1055-1062,共8页
目的:研究微小RNA let-7a对脑出血(ICH)大鼠神经元凋亡的影响及其分子机制。方法:从48只健康SD大鼠中随机选取8只作为假手术组,将2μLⅦ型胶原酶注入其余大鼠苍白球以构建ICH模型。将造模后的大鼠随机分为模型(2μL生理盐水)组、let-7a... 目的:研究微小RNA let-7a对脑出血(ICH)大鼠神经元凋亡的影响及其分子机制。方法:从48只健康SD大鼠中随机选取8只作为假手术组,将2μLⅦ型胶原酶注入其余大鼠苍白球以构建ICH模型。将造模后的大鼠随机分为模型(2μL生理盐水)组、let-7a激动剂(agomir)组、阴性对照(NC)agomir组、let-7a拮抗剂(antagomir)组和NC antagomir组,每组8只,在侧脑室注射相应药物。7 d后进行神经功能评分;HE染色观察病理损伤;RT-qPCR和Western blot检测相关蛋白表达水平;TUNEL染色检测神经元凋亡情况;利用生物信息学软件预测let-7a与丝裂原活化的蛋白激酶激酶激酶激酶3(MAP4K3)的靶向关系,并在HEK293T细胞中用双萤光素酶报告基因实验进一步验证。结果:动物实验中,let-7a过表达时,神经功能评分降低,病理损伤减轻,胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)低表达,神经元凋亡减少,cleaved caspase-3和cleaved PARP低表达(P<0. 05)。细胞实验中,MAP4K3是let-7a的靶基因之一,且两者为负向调控;let-7a过表达抑制MAP4K3/MKK4/JNK的表达。结论:let-7a通过抑制MAP4K3/MKK4/JNK信号通路,减少ICH大鼠神经元凋亡。 展开更多
关键词 脑出血 微小RNA let-7a MAP4K3/mkk4/JNK信号通路 神经元 细胞凋亡
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MKK4基因启动子区-1304T>G多态与食管癌易感性研究 被引量:5
6
作者 冯飞跃 郑健 +2 位作者 姜岚 游永鹤 周翊峰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2012年第2期88-91,共4页
目的:探讨MKK4基因-1304T>G位点单核苷酸多态基因型在中国东部人群中的分布及其对食管癌易感性的影响。方法:设计以医院为基础的病例对照研究,进行食管癌患者与对照人群频数匹配,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法(PCR-RF... 目的:探讨MKK4基因-1304T>G位点单核苷酸多态基因型在中国东部人群中的分布及其对食管癌易感性的影响。方法:设计以医院为基础的病例对照研究,进行食管癌患者与对照人群频数匹配,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性的方法(PCR-RFLP)对571例食管癌患者和785名正常人的MKK4基因-1304T>G位点(rs3826392)进行基因分型。利用Logistic回归分析基因多态性与食管癌发病风险的关联,并校正年龄和性别。结果:MKK4基因-1304T>G位点基因多态性在病例和对照组中分布差异无统计学意义,GG基因型(OR=0.98,95%CI:0.67~1.61),TG基因型(OR=1.12,95%CI:0.90~1.43),P=0.435。结论:MKK4基因-1304T>G位点的单核苷酸多态可能与中国东部人群食管癌易感性无关。 展开更多
关键词 食管癌 mkk4 基因多态性
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鼻咽癌MKK4蛋白表达与-1044A/T多态性的相关性分析 被引量:4
7
作者 鲁明骞 孔庆志 +5 位作者 许新华 卢宏达 赵华山 周刚 徐冰清 郭蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1137-1140,共4页
目的:探讨鼻咽癌组织中MKK4蛋白的表达与-1044A/T多态性的相关性。方法:90例鼻咽癌患者,运用免疫组化法测定MKK4蛋白的表达,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)检测其基因-1044A/T位点单核苷酸多态性。结果:鼻咽癌组织中M... 目的:探讨鼻咽癌组织中MKK4蛋白的表达与-1044A/T多态性的相关性。方法:90例鼻咽癌患者,运用免疫组化法测定MKK4蛋白的表达,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)检测其基因-1044A/T位点单核苷酸多态性。结果:鼻咽癌组织中MKK4蛋白表达(-)为24.4%(22/90),(+)为15.6%(14/90),(++)为34.4%(31/90),(+++)为25.6%(23/90)。低表达(-/+)患者共36例,-1044AA基因型占22例(61.11%),AT基因型占12例(33.33%),TT基因型占2例(5.56%),AT+TT基因型共占14例(38.89%);高表达患者共54例,其中AA基因型占38例(70.37%),AT基因型占15例(27.78%),TT基因型占1例(1.85%),AT+TT基因型共占16例(29.63%)。低表达与高表达发生T基因变异无统计学意义(Z=0.323,P=0.747)。结论:MKK4蛋白表达的高低与-1044A/T启动子基因多态性无明显相关性。 展开更多
关键词 鼻咽癌 mkk4蛋白 1044A/T 多态性
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MKK4基因在喉鳞癌中的表达及其临床意义 被引量:5
8
作者 黄闯 张学渊 +3 位作者 魏运军 向召兰 王洪鹏 陈鸿雁 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期898-901,共4页
目的:研究丝裂原活化蛋白激酶激酶4(mitogen-activated protein kinase kinase 4,MKK4)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测42例喉鳞癌、20例喉乳头状瘤及20例声带息肉组织中MKK4 mRNA和蛋... 目的:研究丝裂原活化蛋白激酶激酶4(mitogen-activated protein kinase kinase 4,MKK4)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR和免疫组织化学方法检测42例喉鳞癌、20例喉乳头状瘤及20例声带息肉组织中MKK4 mRNA和蛋白的表达,分析其与喉鳞癌临床病理参数之间的关系。结果:MKK4 mRNA和蛋白表达的阳性率在喉鳞癌、喉乳头状瘤及声带息肉组织中逐渐降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。MKK4 mRNA和蛋白的表达随喉鳞癌的浸润深度增加而上升(P<0.05),在有淋巴结转移组中的表达高于无淋巴结转移组(P<0.05),在临床Ⅲ~Ⅳ期患者中的表达高于临床Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05)。MKK4的表达与患者的年龄、性别、肿瘤发生部位及组织学分级无相关性(P>0.05)。结论:MKK4 mRNA和蛋白在喉鳞癌组织中的表达上调可能与喉鳞癌的发生及浸润转移有关,MKK4可能成为一个潜在的判断喉鳞癌发生与转移的观测指标。 展开更多
关键词 喉肿瘤 反转录聚合酶链反应 免疫组织化学 基因 mkk4
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MKK4蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义 被引量:4
9
作者 鲁明骞 孔庆志 +5 位作者 许新华 卢宏达 卢忠心 谭超 徐冰清 郭蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1235-1238,共4页
目的:探讨MKK4蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法分别检测90例鼻咽癌组织和20例鼻咽慢性炎症组织中MKK4蛋白的表达情况,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果:MKK4蛋白在鼻咽癌组织中阳性表达率为75.6%(68/... 目的:探讨MKK4蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化方法分别检测90例鼻咽癌组织和20例鼻咽慢性炎症组织中MKK4蛋白的表达情况,并分析与鼻咽癌临床病理特征的关系。结果:MKK4蛋白在鼻咽癌组织中阳性表达率为75.6%(68/90),鼻咽慢性炎症组织中阳性表达率为95.5%(19/20),差异有统计学意义(P<0.05)。MKK4蛋白在有淋巴结转移、分化程度较差的组织中的高表达率明显低于无淋巴结转移、分化程度相对较好的组织(P<0.05),但不同年龄、性别、原发部位、T分期并不影响MKK4蛋白的阳性高表达率,无统计学差异(P>0.05)。结论:MKK4在鼻咽癌组织中的表达明显低于鼻咽慢性炎症组织中的表达,差异具有统计学意义;MKK4蛋白在有淋巴结转移、分化程度较差和临床分期较晚的组织中的表达明显低于无淋巴结转移、分化程度较好及临床分期较早的组织,差异具有显著性;但年龄、性别、原发部位、T分期在鼻咽癌组织中MKK4蛋白的表达均无显著性差异。 展开更多
关键词 鼻咽癌 mkk4蛋白 免疫组化
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胶质瘤中MKK7与c-Jun磷酸化的表达及其相关性 被引量:4
10
作者 郅程 赖妙玲 +8 位作者 廖德贵 郝卓芳 王业忠 吴力强 刘锶锶 曾淑莲 黄紫燕 陈丹敏 袁忠民 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第9期790-795,共6页
目的探讨胶质瘤中MKK7和c-Jun磷酸化(p-c-Jun)的表达及意义,分析两者表达的相关性。方法选取弥漫型星形细胞瘤(15例)、少突胶质细胞瘤(5例)、间变性星形细胞瘤(11例)、间变性少突胶质细胞瘤(8例)、胶质母细胞瘤(53例)及其瘤旁正常脑组织... 目的探讨胶质瘤中MKK7和c-Jun磷酸化(p-c-Jun)的表达及意义,分析两者表达的相关性。方法选取弥漫型星形细胞瘤(15例)、少突胶质细胞瘤(5例)、间变性星形细胞瘤(11例)、间变性少突胶质细胞瘤(8例)、胶质母细胞瘤(53例)及其瘤旁正常脑组织(25例)共117例,采用免疫组织化学法检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达。体外培养神经胶质瘤细胞株U87,用脂质体转染MKK4-siRNA、MKK7-siRNA和对照siRNA,48h后Westernblot检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达水平。结果胶质母细胞瘤中p-c-Jun及MKK7的表达均明显高于其他组织学类型胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中的表达(P=0.000,P=0.000)。随着胶质瘤WHO分级的升高,p-c-Jun及MKK7的表达增高,且与WHO分级呈明显正相关(r=0.494,P=0.000;r=0.606,P=0.000)。胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中MKK7与p-c-Jun的表达存在正相关关系(r=0.387,P=0.000)。沉默神经胶质瘤细胞株U87MKK7表达抑制了c-Jun磷酸化水平。结论MKK7可以通过调控JNK/c-Jun活性进而促进胶质母细胞瘤的发生。 展开更多
关键词 胶质瘤 胶质母细胞瘤 U87 mkk7 c-Jun磷酸化
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MKK6过表达调控SIRT1影响食管癌细胞肿瘤行为学的体外研究 被引量:3
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作者 杨晓龙 胡开锋 +3 位作者 刘明佳 任朋亮 陈利弘 刘戟 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期548-553,共6页
目的向食管癌Eca109细胞中转染pcDNA3.1(+)/myc-His A-丝裂原活化蛋白激酶6(MKK6)重组过表达载体,观察过表达MKK6影响沉默信息转录调控因子(SIRT1)表达后肿瘤细胞增殖、凋亡以及侵袭力发生的变化,探讨p38-MAPK-SIRT1调节轴的存在性及其... 目的向食管癌Eca109细胞中转染pcDNA3.1(+)/myc-His A-丝裂原活化蛋白激酶6(MKK6)重组过表达载体,观察过表达MKK6影响沉默信息转录调控因子(SIRT1)表达后肿瘤细胞增殖、凋亡以及侵袭力发生的变化,探讨p38-MAPK-SIRT1调节轴的存在性及其对Eca109细胞各项肿瘤行为学造成的影响。方法根据GenBank中MKK6基因的mRNA序列设计引物,构建MKK6过表达载体;将Eca109细胞分空载体转染组、MKK6过表达载体转染组、MKK6-SIRT1ShRNA共转染组和MKK6-RES(白藜芦醇)组,相应处理后,采用Western blot测定各组Eca109细胞的SIRT1及MKK6表达水平,MTT法检测各组Eca109细胞的增殖活力,Transwell法观察各组Eca109细胞的侵袭力,流式细胞术检测各组Eca109细胞的凋亡情况。结果测序结果表明成功构建MKK6过表达载体;转染MKK6过表达载体可降低Eca109细胞的内源性SIRT1表达,减弱Eca109细胞的增殖活力,促其凋亡,同时可使Eca109细胞的侵袭力增强,以上各项改变均与SIRT1的表达水平有关。结论Eca109细胞内可能存在p38-MAPK-SIRT1调节轴,MKK6及其下游因子对SIRT1可能具有反馈调节作用,可引起Eca109细胞各项肿瘤行为学的变化。 展开更多
关键词 mkk6 SIRT1 ECA109细胞 细胞活力 细胞侵袭力 细胞凋亡 反馈调节轴
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EB病毒-MKK4基因遗传变异的交互作用与鼻咽癌危险性研究 被引量:5
12
作者 刘斌 黄斌芳 +1 位作者 杨磊 吕嘉春 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第2期175-177,共3页
目的:研究EB病毒感染与MKK4基因遗传变异的交互作用在鼻咽癌发病中的作用。方法:收集鼻咽癌病例和正常对照各500名,采用TAQMAN技术分析MKK4基因遗传变异-1304T>G与鼻咽癌发病的关联;并分析基因位点与EB病毒感染状态在鼻咽癌发生中的... 目的:研究EB病毒感染与MKK4基因遗传变异的交互作用在鼻咽癌发病中的作用。方法:收集鼻咽癌病例和正常对照各500名,采用TAQMAN技术分析MKK4基因遗传变异-1304T>G与鼻咽癌发病的关联;并分析基因位点与EB病毒感染状态在鼻咽癌发生中的交互作用。结果:相对TT基因型携带者,G变异基因型鼻咽癌的发病风险下降(TG基因型adjustedOR=0.78,95%CI=0.61~0.94,P=0.02;GG基因型adjustedOR=0.64;95%CI=0.39~0.99;P=0.04),且存在显著的等位基因剂量—效应关联(Ptrend=0.02)。进一步交互作用分析发现EB病毒感染状态可改变G变异基因型降低鼻咽癌发病风险的作用(adjustedP交互作用=0.04)。结论:MKK4基因遗传变异可降低鼻咽癌的发病风险,但其对鼻咽癌的保护作用受EB病毒感染状态影响,提示EB病毒-MKK4基因交互作用可能是我国南方人群易患鼻咽癌的一个危险因素。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 mkk4 EB病毒 基因-环境交互作用
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花生AhMKK4基因的克隆、表达分析和亚细胞定位研究 被引量:4
13
作者 王冕 张朝昕 +3 位作者 陈娜 陈明娜 禹山林 迟晓元 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2328-2337,共10页
为挖掘花生抗逆相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,根据cDNA文库中已知的促丝裂原活化蛋白激酶激酶(MKK)基因EST序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到AhMKK4基因。结果表明,AhMKK4基因序列全长1 434 bp,含有3′非编码区151 bp,... 为挖掘花生抗逆相关基因,本研究以花生品种花育20号为试验材料,根据cDNA文库中已知的促丝裂原活化蛋白激酶激酶(MKK)基因EST序列设计引物,通过RACE-PCR克隆得到AhMKK4基因。结果表明,AhMKK4基因序列全长1 434 bp,含有3′非编码区151 bp,5′非编码区317 bp,开放阅读框全长966 bp,编码一条含有322个氨基酸的蛋白序列。预测其分子量为36.74 kDa,属于MAPKK基因家族D组成员。亚细胞定位显示AhMKK4基因定位于细胞质和细胞核中。RT-qPCR分析发现,AhMKK4基因在根中表达量高于其他组织,说明该基因具有组织表达特异性;AhMKK4基因受JA和IAA诱导时表达量上调,受SA和ABA诱导时表达量下调,说明该基因可能参与到JA和IAA介导的信号转导途径;AhMKK4在盐胁迫下表达量上调,说明该基因可能参与花生对盐胁迫的适应性调控。本研究结果为花生抗逆育种研究提供了新的基因资源。 展开更多
关键词 花生促丝裂原活化蛋白激酶激酶4(mkk4) 基因克隆 表达分析 亚细胞定位
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MKK4基因启动子区-1044A>T多态与鼻咽癌易感性的研究 被引量:2
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作者 鲁明骞 孔庆志 +5 位作者 许新华 卢宏达 卢忠心 徐冰清 史克志 郭蓉 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第34期4793-4795,共3页
目的 探讨MKK4基因启动子区-1044A〉T位点单核苷酸多态基因型与散发性鼻咽癌遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)检测30例健康人和90例鼻咽癌患者的MKK4基因-1044A〉T位点(rs3809728)单核苷... 目的 探讨MKK4基因启动子区-1044A〉T位点单核苷酸多态基因型与散发性鼻咽癌遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)检测30例健康人和90例鼻咽癌患者的MKK4基因-1044A〉T位点(rs3809728)单核苷酸多态性。结果 MKK4基因-1044A〉T位点基因多态性在病例组和对照组中分布差异无统计学意义,AT基因型(OR=0.726,95%CI=0.333-2.151),TT基因型(OR=0.952,95%CI=0.094-9.663),P=0.712。结论 MKK4基因-1044A〉T位点的单核苷酸多态性:可能与散发性鼻咽癌易感性无关。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 mkk4 多态性 单核苷酸
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂对胶质瘤细胞增殖及MKK7表达的影响 被引量:2
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作者 袁忠民 曾敏灵 +2 位作者 唐晓梅 伍燕娜 何国振 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期1-5,共5页
目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)对胶质瘤细胞增殖及MKK7表达的影响。方法体外培养神经胶质瘤细胞株U251,用脂质体转染MKK7-si RNA1、MKK7-si RNA2和对照si RNA,48 h后Western blot检测MKK7表达及... 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)对胶质瘤细胞增殖及MKK7表达的影响。方法体外培养神经胶质瘤细胞株U251,用脂质体转染MKK7-si RNA1、MKK7-si RNA2和对照si RNA,48 h后Western blot检测MKK7表达及JNK/c-Jun活性,Brd U掺入实验检测细胞增殖情况;用0.5μM组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)处理细胞8 h,DMSO作对照,Western blot检测MKK7、p-JNK、JNK、p-c-Jun、c-Jun表达或磷酸化水平;用TSA分别处理细胞8、12、24 h,检测各时间点细胞增殖率;用其他组蛋白去乙酰化酶抑制剂包括伏立诺他(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA),丙戊酸(valproic acid,VPA),M344处理细胞检测MKK7表达及细胞增殖。结果同对照组相比,沉默MKK7表达抑制了JNK/c-Jun活性和细胞增殖(P=0.008);TSA处理细胞8 h显著抑制MKK7表达及JNK/c-Jun活性,SAHA、M344、VPA均显著抑制MKK7表达。TSA处理细胞8 h没有抑制细胞增殖,处理12 h显著抑制增殖(P=0.006),24 h抑制效应更明显(P=0.002);SAHA(P=0.001),M344(P=0.008)或VPA(P=0.002)处理细胞12 h均抑制了细胞增殖。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂可通过抑制MKK7表达抑制神经胶质瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 mkk7 增殖
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油菜MKK2基因原核表达及特性分析 被引量:1
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作者 张腾国 郭艳峰 +3 位作者 王圆圆 寇明刚 王娟 孙万仓 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期405-410,共6页
MAP激酶级联途径在信号传导过程中发挥着重要作用.以白菜型冬油菜"陇油6号"为材料,利用RT-PCR法克隆到全长MKK2基因cDNA,生物信息学分析表明油菜MKK2蛋白为亲水蛋白,包含有MAPKK蛋白所特有的磷酸化基序S/T-X_(3-5)-S/T.将其... MAP激酶级联途径在信号传导过程中发挥着重要作用.以白菜型冬油菜"陇油6号"为材料,利用RT-PCR法克隆到全长MKK2基因cDNA,生物信息学分析表明油菜MKK2蛋白为亲水蛋白,包含有MAPKK蛋白所特有的磷酸化基序S/T-X_(3-5)-S/T.将其与大肠杆菌表达载体pET30a连接,构建原核表达载体pET30a-MKK2,并转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE以及Western blotting检测结果表明该基因表达了1个约43 kD的蛋白.实时荧光定量PCR结果显示该基因表达没有组织特异性,其转录受UV-B胁迫的诱导. 展开更多
关键词 陇油6号 mkk2基因 原核表达 UV-B胁迫
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细粒棘球蚴MKK1和MKK2基因原核表达载体的构建及其诱导表达 被引量:1
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作者 张传山 杨乐 +4 位作者 王丽敏 李亮 王俊华 吕国栋 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第1期43-47,共5页
目的分别构建细粒棘球蚴(Eg)丝裂原活化蛋白激酶激酶MKK1和MKK2基因原核表达载体,诱导表达并纯化EgMKK1和EgMKK2蛋白。方法采集绵羊肝脏感染的Eg原头蚴,Trizol法提取原头蚴总RNA,反转录PCR分别扩增EgMKK1和EgMKK2基因片段,克隆至原核表... 目的分别构建细粒棘球蚴(Eg)丝裂原活化蛋白激酶激酶MKK1和MKK2基因原核表达载体,诱导表达并纯化EgMKK1和EgMKK2蛋白。方法采集绵羊肝脏感染的Eg原头蚴,Trizol法提取原头蚴总RNA,反转录PCR分别扩增EgMKK1和EgMKK2基因片段,克隆至原核表达载体pET28a(+),经限制性内切酶双酶切和测序鉴定正确后转化大肠埃希菌感受态细胞BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,采用镍柱亲和层析法纯化蛋白,并进行SDS-PAGE分析。结果测序证明pET28a-EgMKK1和pET28a-EgMKK2原核表达载体构建正确,在37℃经IPTG(终浓度1mmol/L)诱导可表达EgMKK1和EgMKK2蛋白,分子质量单位分别为44.96ku和64.01ku,与理论值相符,且以包涵体形式存在。表达产物纯化后的可溶性蛋白EgMKK1和EgMKK2含量分别为0.64mg/ml和1.2mg/ml。结论成功构建了MKK1和MKK2基因原核表达载体,表达蛋白可用于动物免疫,为研究EgMKK1和EgMKK2在Eg体内的生物学作用奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 mkk1和mkk2基因 基因表达 蛋白纯化
原文传递
MEKK1, MKK1/MKK2 and MPK4 function together in a mitogen-activated protein kinase cascade to regulate innate immunity in plants 被引量:42
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作者 Minghui Gao Jinman Liu +3 位作者 Dongling Bi Zhibin Zhang Fang Cheng2, Sanfeng Chen Yuelin Zhang 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2008年第12期1190-1198,共9页
Mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascades play important roles in regulating plant innate immune responses. In a genetic screen to search for mutants with constitutive defense responses, we identified multipl... Mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascades play important roles in regulating plant innate immune responses. In a genetic screen to search for mutants with constitutive defense responses, we identified multiple alleles of mpk4 and mekkl that exhibit cell death and constitutive defense responses. Bimolecular fluorescence complemen- tation (BiFC) analysis showed that both MPK4 and MEKK1 interact with MKK1 and MKK2, two closely related MAPK kinases, mkkl and mkk2 single mutant plants do not have obvious mutant phenotypes. To test whether MKK1 and MKK2 function redundantly, mkkl mkk2 double mutants were generated. The mkkl mkk2 double mutant plants die at seedling stage and the seedling-lethality phenotype is temperature-dependent. Similar to the mpk4 and mekkl mutants, the mkkl mkk2 double mutant seedlings accumulate high levels of H202, display spontaneous cell death, constitutively express Pathogenesis Related (PR) genes and exhibit pathogen resistance. In addition, activation of MPK4 by fig22 is impaired in the mkkl mkk2 double mutants, suggesting that MKK1 and MKK2 function together with MPK4 and MEKK1 in a MAP kinase cascade to negatively regulate innate immune responses in plants. 展开更多
关键词 MAPK innate immunity MPK4 MEKK1 mkk1 mkk2
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MKK4在肿瘤发生发展中的作用 被引量:2
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作者 罗洪亮 朱培谦 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期2094-2097,共4页
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)是真核生物信号传递网络中的重要途径之一,在调控细胞凋亡、生长以及一些重要基因的表达中发挥重要作用[1]。现已经确认在哺乳动物中存在4条不同的MAPK通路:
关键词 mkk4基因 机制 丝裂原活化蛋白激酶 综述
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mkk4基因启动子区多态性对结肠癌易感性的影响 被引量:1
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作者 罗洪亮 黄俊 +1 位作者 赖斌 朱培谦 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期3208-3211,共4页
目的通过检测结肠癌患者mkk4启动子区单核苷酸多态性位点及其与蛋白表达的关系,探讨mkk4基因多态性与结肠癌易感性的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术(PCR-rflp)分别检测120例结肠癌患者与120例健康对照组的mkk4基... 目的通过检测结肠癌患者mkk4启动子区单核苷酸多态性位点及其与蛋白表达的关系,探讨mkk4基因多态性与结肠癌易感性的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态技术(PCR-rflp)分别检测120例结肠癌患者与120例健康对照组的mkk4基因这两处位点多态性,并用免疫组化的方法观察结肠癌组织的mkk4表达量。结果发现在rs3826392(T/G)位点结肠癌组携带G变异基因型(T/G+G/G)频率显著低于健康对照组(P=0.043,OR=0.576,95%CI=0.337~0.985);肿瘤组织中mkk4蛋白表达在G变异基因型中明显增高(P<0.001);rs3809728(A/T)则无统计学意义。结论 mkk4基因rs3826392(T/G)位点G变异与mkk4的表达增加和结肠癌的发病风险降低相关,是结肠癌发病的一个保护因素。而rs3809728(A/T)多态性则与散发性结直肠癌无明显相关。 展开更多
关键词 结肠癌 基因多态性 mkk4基因
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