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猪MITF-M的转录调控分析 被引量:3
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作者 张廷焕 柴捷 +1 位作者 陈磊 龙熙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2349-2358,共10页
旨在研究猪MITF-M(microphthalmia associated transcription factor M)转录调控区域活性以及验证重要转录因子。以猪DNA为模板,利用PCR扩增获得MITF-M转录调控区,基因克隆得到5′端缺失重组载体,运用双荧光素酶报告基因试验进行转录活... 旨在研究猪MITF-M(microphthalmia associated transcription factor M)转录调控区域活性以及验证重要转录因子。以猪DNA为模板,利用PCR扩增获得MITF-M转录调控区,基因克隆得到5′端缺失重组载体,运用双荧光素酶报告基因试验进行转录活性分析,再通过干扰RNA试验验证重要转录因子。本试验成功克隆得到MITF-M 6 414bp的转录调控区域;构建了9个调控区5′端缺失重组载体;鉴定出MITF-M转录调控区内3个转录活性显著变化区域(P<0.001),分别是位于-1 140~-1 397和-5 429~-6 036bp的正调控区域、-2 470~-3 753bp的负调控区域;发现了转录因子KLF4显著负向调控MITF-M的转录活性(P<0.01)。结果提示,转录因子KLF4抑制MITF-M的转录活性,调控黑色素细胞色素的合成与沉积,从而影响猪毛色的表型。本试验为进一步研究猪MITF-M基因的表达机制奠定了基础,对深入研究猪毛色变化的表达调控机理具有重要意义。 展开更多
关键词 MITF-M 转录活性 KLF4
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