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鼠γ疱疹病毒68(MHV68):研究γ疱疹病毒感染的模型
被引量：
2
1
作者
尹志华
姚开泰
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期283-287,共5页
关键词
鼠
γ疱疹病毒68
mhv68
感染
生物学特性
基因组
分离
暂未订购
RIK蛋白的重组表达、多克隆抗体制备及其功能的初步研究
2
作者
张朝璨
邝林林
+2 位作者
蒋望
陈桂芳
梁小珍
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期435-440,共6页
目的本研究从MHV68转化得到的小鼠B淋巴瘤细胞中筛选出一种功能尚未明确的蛋白质,暂时命名为RIK。通过对RIK基因克隆、表达和纯化并成功制备其多克隆抗体,并初步探讨其生物学功能,为该蛋白的进一步深入研究奠定基础。方法通过RT-PCR的...
目的本研究从MHV68转化得到的小鼠B淋巴瘤细胞中筛选出一种功能尚未明确的蛋白质,暂时命名为RIK。通过对RIK基因克隆、表达和纯化并成功制备其多克隆抗体,并初步探讨其生物学功能,为该蛋白的进一步深入研究奠定基础。方法通过RT-PCR的方法检测B淋巴瘤细胞系和原代B细胞中的RIK m RNA水平,并扩增出RIK的基因片段,采用基因重组技术构建出RIK的原核表达载体,经诱导表达后,利用镍离子柱亲和纯化出RIK重组蛋白,免疫新西兰大耳兔,制备抗RIK多克隆抗体,ELISA和Western blot检测抗体灵敏度和特异性。最后,通过在过表达鼠源RIK的小鼠NIH3T12细胞中,进行MHV68病毒感染实验,初步确定其生物学功能。结果 RT-PCR检测发现RIK在B淋巴瘤细胞系中m RNA水平高于原代B细胞,并且成功构建人源和鼠源重组表达质粒p ET-28a(+)-h/m RIK,实现包涵体形式RIK蛋白的诱导表达纯化和抗体制备,SDS-PAGE和Western blot证实获得的抗RIK多克隆抗体与预期结果一致,能够特异地识别RIK蛋白。同时,研究发现,在小鼠NIH3T12细胞中过表达m RIK蛋白,能够有效的抑制MHV68对该细胞的感染。结论本研究成功实现了RIK的重组表达、抗体制备,并且发现RIK蛋白对于MHV68的感染具有十分有效的抑制作用,实现了对其功能的初步研究,并且为深入研究奠定了基础。
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关键词
RIK
RT-PCR
重组表达
多克隆抗体
mhv68
感染
原文传递
题名
鼠γ疱疹病毒68(MHV68):研究γ疱疹病毒感染的模型
被引量：
2
1
作者
尹志华
姚开泰
机构
中南大学肿瘤研究所
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第3期283-287,共5页
基金
国家科技部恶性肿瘤发生与发展的基础性研究(G1998051201)
关键词
鼠
γ疱疹病毒68
mhv68
感染
生物学特性
基因组
分离
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
暂未订购
题名
RIK蛋白的重组表达、多克隆抗体制备及其功能的初步研究
2
作者
张朝璨
邝林林
蒋望
陈桂芳
梁小珍
机构
上海大学生命科学学院
中国科学院上海巴斯德研究所
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期435-440,共6页
文摘
目的本研究从MHV68转化得到的小鼠B淋巴瘤细胞中筛选出一种功能尚未明确的蛋白质,暂时命名为RIK。通过对RIK基因克隆、表达和纯化并成功制备其多克隆抗体,并初步探讨其生物学功能,为该蛋白的进一步深入研究奠定基础。方法通过RT-PCR的方法检测B淋巴瘤细胞系和原代B细胞中的RIK m RNA水平,并扩增出RIK的基因片段,采用基因重组技术构建出RIK的原核表达载体,经诱导表达后,利用镍离子柱亲和纯化出RIK重组蛋白,免疫新西兰大耳兔,制备抗RIK多克隆抗体,ELISA和Western blot检测抗体灵敏度和特异性。最后,通过在过表达鼠源RIK的小鼠NIH3T12细胞中,进行MHV68病毒感染实验,初步确定其生物学功能。结果 RT-PCR检测发现RIK在B淋巴瘤细胞系中m RNA水平高于原代B细胞,并且成功构建人源和鼠源重组表达质粒p ET-28a(+)-h/m RIK,实现包涵体形式RIK蛋白的诱导表达纯化和抗体制备,SDS-PAGE和Western blot证实获得的抗RIK多克隆抗体与预期结果一致,能够特异地识别RIK蛋白。同时,研究发现,在小鼠NIH3T12细胞中过表达m RIK蛋白,能够有效的抑制MHV68对该细胞的感染。结论本研究成功实现了RIK的重组表达、抗体制备,并且发现RIK蛋白对于MHV68的感染具有十分有效的抑制作用,实现了对其功能的初步研究,并且为深入研究奠定了基础。
关键词
RIK
RT-PCR
重组表达
多克隆抗体
mhv68
感染
Keywords
RIK
RT-PCR
Recombinant expression
Polyclonal antibody
mhv68
infection
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鼠γ疱疹病毒68(MHV68):研究γ疱疹病毒感染的模型
尹志华
姚开泰
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004
2
暂未订购
2
RIK蛋白的重组表达、多克隆抗体制备及其功能的初步研究
张朝璨
邝林林
蒋望
陈桂芳
梁小珍
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
原文传递
已选择
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参考文献
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