丙泊酚对脂多糖诱导的MHCC97H细胞黏附、迁移、侵袭和炎症因子的影响及与核转录因子-κB信号通路的关系 被引量：2

1

作者 齐少霞 杨栋宝 +2 位作者 靳涛 王建华 兰基山 《安徽医药》 2025年第2期263-267,I0002,共6页

目的探究丙泊酚与脂多糖(LPS)刺激下MHCC97H细胞功能、炎症水平及核转录因子-κB(NF-κB)表达的关联。方法该研究起止时间为2021年12月至2022年12月。体外培养人MHCC97H细胞系,分为对照组(等量的溶剂),LPS组(1 mg/L LPS),实验组(LPS+6.2... 目的探究丙泊酚与脂多糖(LPS)刺激下MHCC97H细胞功能、炎症水平及核转录因子-κB(NF-κB)表达的关联。方法该研究起止时间为2021年12月至2022年12月。体外培养人MHCC97H细胞系,分为对照组(等量的溶剂),LPS组(1 mg/L LPS),实验组(LPS+6.25组、LPS+12.5组、LPS+25组,LPS组基础上分别加入6.25、12.5和25μmol/L丙泊酚),用酶联免疫吸附试验、细胞计数试剂盒检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)的表达水平和细胞活力筛选出丙泊酚的最适浓度进行后续实验,后将细胞分为对照组、LPS组、LPS+25组和LPS+25+抑制剂组(LPS+25组基础上联合10μmol/L BAY 11-7082),干预24 h。细胞黏附实验测定黏附细胞数;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭水平;蛋白质印迹法测定上皮间质转化(EMT)及NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果根据细胞活力和炎症因子IL-6表达选择LPS+25组进行后续实验,与对照组相比,LPS组细胞黏附数、迁移数、侵袭数、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、IκB激酶α(IKKα)和p-NF-κB p65蛋白水平分别为(152.00±9.01)个、(84.01±10.44)个、(65.67±3.06)个、0.46±0.02、0.47±0.03、0.99±0.02、1.03±0.02、0.95±0.05上调,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达0.42±0.02下调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+25组显著扭转了上述指标的变化(P<0.05);与LPS+25组相比,LPS+25+抑制剂组加入NF-κB通路抑制剂后,上述指标变化扭转得更为显著(P<0.05)。结论丙泊酚对LPS刺激下MHCC97H细胞炎症因子表达、黏附、迁移、侵袭能力及EMT进程具有抑制作用,可能与NF-κB通路活性受到抑制有关。 展开更多

关键词 二异丙酚 mhcc97h 核转录因子-κB信号通路 黏附 迁移 侵袭

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穿心莲内酯对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及其机制研究 被引量：11

2

作者 刘红英 王协奇 +4 位作者 袁丽娜 刘影 彭燕 罗碧怡 何青莲 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第3期395-402,共8页

【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖... 【目的】观察穿心莲内酯(Andro)对人肝癌细胞MHCC97H增殖的影响及作用机制,探讨其体外抗肝癌作用。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测Andro不同浓度(5、10、20、30、40、50μmol/L)及不同处理时间(24、48、72 h)对MHCC97H细胞增殖的影响;采用Annexin V—碘化丙啶(PI)双染法、Hoechst 33342染色法观察细胞凋亡;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测凋亡相关蛋白如Bax、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、裂解型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PAPR),周期相关蛋白如周期素B1(cyclin B1)、周期素依赖性激酶1(CDK1)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白如m TOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)的表达。【结果】穿心莲内酯5、10、20、30、40、50μmol/L组24、48、72 h MHCC97H细胞增殖率下降,且随着Andro浓度、处理时间的增加而逐渐降低。Andro 25、50μmol/L组12、24、48 h MHCC97H细胞凋亡率均升高,呈浓度和时间依赖性。Andro 50μmol/L组48 h MHCC97H细胞发生G2/M期阻滞。与溶剂对照组比较,Andro 50μmol/L组中促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达升高(P<0.05或P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01),周期蛋白cyclin B1和CDK1表达及mTOR信号通路蛋白mTOR、p70S6K的磷酸化水平均下降(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】Andro可能通过调控MHCC97H细胞凋亡相关蛋白Bax、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP、Bcl-2及周期相关蛋白cyclin B1、CDK1的表达及抑制mTOR-p70S6K信号通路的激活,促进细胞凋亡及细胞周期阻滞,从而发挥体外抗肝癌作用。 展开更多

关键词 穿心莲内酯 肝癌 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 MTOR信号通路 mhcc97h细胞

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蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α表达的影响 被引量：4

3

作者 谢群 林扬元 +1 位作者 唐南洪 林建银 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1208-1212,共5页

目的研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin,sv-cystatin)重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法采... 目的研究蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制剂(snake venom cystatin,sv-cystatin)重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响。方法采用ELISA方法检测不同浓度sv-cystatin重组蛋白对人肝癌MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α分泌的影响;实时定量PCR和Western blot法分别分析不同浓度sv-cystatin重组蛋白体外处理人肝癌MHCC97H细胞后TGF-β2、TNF-α的mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,5种浓度的sv-cystatin重组蛋白对MHCC97H细胞TGF-β2、TNF-α的分泌具有明显的抑制作用,并呈剂量依赖性(P<0.05);25、50、100、200 mg·L-14种浓度的重组蛋白能够抑制TGF-β2的mRNA及蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);而50、100、200 mg·L-13种浓度的重组蛋白能够抑制TNF-α的mRNA及蛋白表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 sv-cystatin重组蛋白可能通过抑制TGF-β2和TNF-α的表达来发挥多方面的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 蛇毒 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 肝癌 mhcc97h 转化生长因子Β2 肿瘤坏死因子α

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转录共激活子TAZ对肝癌细胞株MHCC97H增殖能力的影响 被引量：5

4

作者 张雷 王林 +3 位作者 耿智敏 万永 孟凡迪 孟宪魁 《实用癌症杂志》 2017年第8期1219-1223,共5页

目的观察转录共激活子TAZ对肝癌细胞株MHCC97H的增殖能力的影响,以期对阐明原发性肝细胞癌(HCC)的发生发展机制提供1个新的研究思路。方法应用细胞转染、RNA干扰(RNAi)以及过表达技术,在肝癌细胞株MHCC97H中干预TAZ的表达。在转染后提... 目的观察转录共激活子TAZ对肝癌细胞株MHCC97H的增殖能力的影响,以期对阐明原发性肝细胞癌(HCC)的发生发展机制提供1个新的研究思路。方法应用细胞转染、RNA干扰(RNAi)以及过表达技术,在肝癌细胞株MHCC97H中干预TAZ的表达。在转染后提取细胞RNA和总蛋白,应用qRT-PCR和Western blot等方法检测TAZ、Nek7的表达。选用细胞计数kit-8(CCK-8)法检测细胞活性和增殖能力。结果与NC组相比,转染了TAZ特异性靶向干扰片段之后,TAZ的mRNA与蛋白表达水平均出现下调,差异具有统计学意义(P<0.0001);Nek7表达也出现下降,差异具有统计学意义(P<0.0001);功能实验(CKK8)发现MHCC97H细胞活性和增殖能力也降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。另一方面,过表达了TAZ之后,Nek7表达水平也相应上调了,差异具有统计学意义(P<0.0001);MHCC97H细胞活性和增殖能力也提高,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论转录共激活子TAZ能通过调控Nek7的表达对肝癌细胞MHCC97H的增殖能力产生影响,该发现对于阐明TAZ在肝癌发生发展过程中的作用提供一定的实验基础。 展开更多

关键词 TAZ Nek7 肝癌 mhcc97h细胞 增殖

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大蒜素抑制肝癌MHCC97H细胞的迁移、侵袭 被引量：7

5

作者 王文涛 原皓 杨丙信 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第8期1166-1174,共9页

目的:观察大蒜素对肝癌MHCC97H细胞株体外增殖、迁移、侵袭及对MMP-2、MMP-9、CD24 mRNA表达的影响并初步探讨其机制.方法:以肝癌MHCC97H细胞株为研究对象,MTT法、Transwell小室实验检测不同浓度大蒜素对肝癌MHCC97H细胞株迁移、侵袭能... 目的:观察大蒜素对肝癌MHCC97H细胞株体外增殖、迁移、侵袭及对MMP-2、MMP-9、CD24 mRNA表达的影响并初步探讨其机制.方法:以肝癌MHCC97H细胞株为研究对象,MTT法、Transwell小室实验检测不同浓度大蒜素对肝癌MHCC97H细胞株迁移、侵袭能力的影响.实时定量PCR检测(realtime quantitative PCR,qRT-PCR)法检测不同浓度大蒜素对MHCC97H细胞株MMP-2、MMP-9、CD24 mRNA表达的影响.结果:MTT显示大蒜素抑制MHCC97H细胞增殖(P<0.01),呈现剂量依赖性.Transwell小室实验显示大蒜素抑制MHCC97H细胞的迁移(P<0.01),一定范围内呈现剂量依赖性,大蒜素组侵袭细胞较阴性对照组显著减少(P<0.01).qRT-PCR检测发现不同浓度大蒜素可以下调MHCC97H细胞MMP-2、MMP-9、CD24的表达,且呈现一定程度剂量依赖性(P<0.01).结论:大蒜素对肝癌MHCC97H细胞株的增殖、迁移、侵袭有抑制作用,且在一定范围内呈现出剂量依赖性.其机制可能与抑制其MMP-2、MMP-9、CD24 mRAN的表达有关. 展开更多

关键词 大蒜素 肝癌mhcc97h细胞株 MMP-2 MMP-9 CD24

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脂肪酸酰胺水解酶抑制剂URB597诱导人肝癌细胞MHCC97H凋亡的作用及其机制研究 被引量：1

6

作者 杨锐 周佳 +2 位作者 李方 张春 卜书红 《药学服务与研究》 CAS 2015年第4期261-264,共4页

目的:观察脂肪酸酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase,FAAH)抑制剂URB597诱导人肝癌高转移细胞MHCC97H凋亡的作用,并探讨其机制。方法:给予不同浓度(1、5、10μmol/L)URB597与MHCC97H孵育,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用蛋白质... 目的:观察脂肪酸酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase,FAAH)抑制剂URB597诱导人肝癌高转移细胞MHCC97H凋亡的作用,并探讨其机制。方法:给予不同浓度(1、5、10μmol/L)URB597与MHCC97H孵育,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用蛋白质印迹技术检测凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)在细胞核中的水平,及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平。采用caspase 3试剂盒检测caspase 3的活性变化。结果:(1)不同浓度(1、5、10μmol/L)URB597作用细胞1、4、7d后,凋亡细胞数目明显增加,呈时间-剂量依赖性;(2)不同浓度URB597作用96h后细胞内caspase3活性明显升高,且细胞核中AIF水平显著增加;(3)10μmol/L URB597作用细胞96h后,与对照组相比,Bcl-2水平明显下调,Bax水平明显上调,Bcl-2/Bax比值显著下降。PI3K抑制剂LY294002亦可显著降低Bcl-2/Bax比值,但与10μmol/L URB597作用相比,对Bcl-2/Bax比值的影响程度较低。结论:URB597可通过促进人肝癌细胞凋亡抑制其增殖,该作用与其下调Bcl-2/Bax比值,影响线粒体通透性,诱导caspase依赖和非caspase依赖的细胞凋亡有关,且部分依赖于PI3K/Akt通路。 展开更多

关键词 脂肪酸酰胺水解酶抑制剂 URB597 肝癌细胞mhcc97h 细胞凋亡 PI3K/AKT信号通路

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肝癌MHCC97H细胞中CD133^+和CD133^-亚群分选及其生物学特性 被引量：1

7

作者 易善永 南克俊 +2 位作者 张丽娟 柯洋 姜丽丽 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第15期4267-4269,共3页

目的分选肝癌MHCC97H细胞中的CD133+和CD133-细胞亚群,并初步探讨CD133+细胞亚群的干细胞特性。方法用磁珠分选技术分选MHCC97H细胞株中的CD133+和CD133-细胞亚群,用流式细胞仪检测分选前后CD133的表达,用MTT法检测其增殖能力,比较其体... 目的分选肝癌MHCC97H细胞中的CD133+和CD133-细胞亚群,并初步探讨CD133+细胞亚群的干细胞特性。方法用磁珠分选技术分选MHCC97H细胞株中的CD133+和CD133-细胞亚群,用流式细胞仪检测分选前后CD133的表达,用MTT法检测其增殖能力,比较其体内成瘤能力,用Western印迹法检测其干细胞相关基因蛋白的表达。结果分选前后MHCC97H细胞中CD133表达分别为(1.09±0.43)vs(86.65±6.49)%(P<0.01)。与CD133-亚群相比,CD133+亚群的体外增殖能力较强,成瘤能力高,高表达干细胞相关基因蛋白(P<0.05,P<0.01)。结论肝癌细胞株MHCC97H中的CD133+细胞亚群具有肿瘤干细胞的特性;CD133是人肝癌MHCC97H细胞株的肿瘤干细胞的表型之一。 展开更多

关键词 肝癌 肿瘤干细胞 CD133 mhcc97h细胞

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17-β-雌二醇对人肝细胞癌细胞MHCC97H侵袭转移的作用及其机制 被引量：2

8

作者 邹三鹏 沙焕臣 《山西医科大学学报》 CAS 2016年第1期14-18,共5页

目的观察17-β-雌二醇对人MHCC97H肝癌细胞侵袭转移的作用,探讨其相应机制。方法用不同浓度17-β-雌二醇(0,0.1,1,10μmol/L)干预MHCC97H肝癌细胞24 h。Transwell小室法检测17-β-雌二醇干预后MHCC97H肝癌细胞侵袭能力的改变。利用real-... 目的观察17-β-雌二醇对人MHCC97H肝癌细胞侵袭转移的作用,探讨其相应机制。方法用不同浓度17-β-雌二醇(0,0.1,1,10μmol/L)干预MHCC97H肝癌细胞24 h。Transwell小室法检测17-β-雌二醇干预后MHCC97H肝癌细胞侵袭能力的改变。利用real-time PCR和Western blot法检测17-β-雌二醇干预对MHCC97H肝癌细胞中E-cadherin和Vimentin RNA和蛋白表达水平的改变。Western blot检测17-β-雌二醇对MHCC97H细胞中Smad2和p-Smad2蛋白表达水平的影响。结果 17-β-雌二醇能够有效抑制MHCC97H肝癌细胞的侵袭能力,随着浓度的升高抑制能力逐渐增强(P<0.05)。当浓度超过0.1μmol/L时,17-β-雌二醇能够有效抑提高MHCC97H肝癌细胞中E-cadherin的转录和蛋白表达,并同时抑制细胞中Vimentin蛋白的表达(P<0.05);当浓度超过0.2μmol/L时,17-β-雌二醇能够有效抑制Vimentin的转录(P<0.05)。进一步的检测发现当浓度超过0.1μmol/L时,17-β-雌二醇能够有效抑制MHCC97H细胞中Smad2的磷酸化水平(P<0.05)。结论 17-β-雌二醇能够有效抑制MHCC97H肝癌细胞的侵袭,这种作用可能与其通过抑制Smad2的磷酸化进一步调节E-cadherin和Vimentin的表达有关。 展开更多

关键词 17-Β-雌二醇 肝细胞癌 mhcc97h细胞 细胞侵袭 SMAD 2 E-CADHERIN VIMENTIN

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MST4表达对MHCC97H肝癌细胞细胞因子、ERK蛋白、p-ERK蛋白表达的影响及其意义 被引量：2

9

作者 赵小丽 高鹏 +3 位作者 刘俊华 周凤蕊 王佳乐 李广明 《天津医科大学学报》 2019年第2期124-127,共4页

目的:探讨MHCC97H肝癌细胞中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4/(MST4)的表达与细胞因子、ERK蛋白、p-ERK蛋白表达的关系及其意义。方法:将MHCC97H肝癌细胞培养至对数生长期后,接种于96孔板上培养,分为空白组、高表达组(MST4转染高表达)、低表达组... 目的:探讨MHCC97H肝癌细胞中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4/(MST4)的表达与细胞因子、ERK蛋白、p-ERK蛋白表达的关系及其意义。方法:将MHCC97H肝癌细胞培养至对数生长期后,接种于96孔板上培养,分为空白组、高表达组(MST4转染高表达)、低表达组(MST4转染siRNA),采用Western-blot法检测各组共培养24 h后的MST4蛋白表达水平,采用ELISA法检测各组培养24 h后上清液中白细胞介素-2(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、趋化因子-2(CCL2),采用Western-blot法检测各组的细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白的表达,采用MTT实验检测3组肿瘤细胞的增殖能力,采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭迁移能力。结果:高表达组的MST4蛋白表达显著高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的MST4蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05);高表达组的上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL2水平均显著高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α、CCL2水平差异无统计学意义(P>0.05);空白组、高表达组和低表达组的ERK蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);高表达组的pERK蛋白显著高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的p-ERK蛋白差异无统计学意义(P>0.05);高表达组的MTT实验吸光度值、Transwell实验MHCC97H肝癌细胞迁移数目高于空白组和低表达组(P<0.05);空白组和低表达组的MTT实验吸光度值、Transwell实验MHCC97H肝癌细胞迁移数目差异无统计学意义(P>0.05)。结论:MHCC97H肝癌细胞中MST4高表达,将会激活p-ERK蛋白表达,从而提高细胞因子的表达,提高MHCC97H肝癌细胞的增殖、侵袭能力。 展开更多

关键词 mhcc97h肝癌细胞 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4 增殖 侵袭迁移

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DAPT对人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长的影响

10

作者 司云飞 吴德全 +2 位作者 胡彦华 裘铠杰 李大川 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2015年第9期1050-1052,共3页

目的探讨DAPT对人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法人肝癌细胞株MHCC97H接种于3~4周鼠龄的雄性裸鼠BALB/C-nu背部1周,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录裸鼠体质量。24只成瘤裸鼠随机分为4组,高剂量DAPT组（10 mg/kg,0.03 ml/... 目的探讨DAPT对人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法人肝癌细胞株MHCC97H接种于3~4周鼠龄的雄性裸鼠BALB/C-nu背部1周,建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录裸鼠体质量。24只成瘤裸鼠随机分为4组,高剂量DAPT组（10 mg/kg,0.03 ml/只）、低剂量DAPT组（5 mg/kg,0.03 ml/只）、DAPT溶剂二甲基亚砜（DMSO）对照组（0.05%,0.03 ml/只）、空白对照组（生理盐水,0.03 ml/只）,腹腔注射给药。间隔2 d给药1次,共6次。观察裸鼠肿瘤生长情况及生存状态。于末次给药48 h后采用颈椎脱臼法处死全部裸鼠,称量裸鼠体质量,解剖瘤体,测量肿瘤体积,计算抑瘤率。结果药物干预前,4组移植瘤模型的裸鼠体质量差异无统计学意义（P〉0.05）;药物干预后,高剂量DAPT组与低剂量DAPT组较其他两组生存状态佳,高剂量DAPT组裸鼠体质量明显高于其他3组,差异有统计学意义（P〈0.05）;相比于其他3组,高剂量DAPT组移植瘤体积最小,差异有统计学意义（P〈0.05）;高剂量DAPT组及低剂量DAPT组的抑瘤率分别与DMSO对照组及空白对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 DAPT抑制人肝癌细胞MHCC97H裸鼠皮下移植瘤生长,改善人肝癌细胞MHCC97H荷瘤裸鼠的生存状态。 展开更多

关键词 DAPT 移植瘤 人肝癌细胞mhcc97h Notch细胞信号

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干扰素诱导跨膜蛋白3过表达对胆囊癌细胞MHCC97H增殖、迁移、侵袭的影响

11

作者 何小伟 陈雪菊 +1 位作者 石世代 刘勇帆 《癌症进展》 2020年第11期1107-1110,共4页

目的探讨过表达干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)对胆囊癌细胞MHCC97H增殖、迁移、侵袭的影响。方法构建IFITM3-pc DNA3.1过表达载体,并将IFITM3-pc DNA3.1及pc DNA3.1转入MHCC97H细胞中,同时设立正常对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(... 目的探讨过表达干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)对胆囊癌细胞MHCC97H增殖、迁移、侵袭的影响。方法构建IFITM3-pc DNA3.1过表达载体,并将IFITM3-pc DNA3.1及pc DNA3.1转入MHCC97H细胞中,同时设立正常对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测IFITM3、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(BAX)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)表达,CCK-8法检测细胞活力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。结果酶切结果证实IFITM3过表达载体构建成功。与正常对照组及过表达对照组比较,过表达组MHCC97H细胞IFITM3 m RNA表达量上调,光密度值(OD)升高,细胞迁移速率加快,细胞侵袭数目增加,Bcl-2 m RNA表达水平上调,BAX m RNA表达水平下调,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论过表达IFITM3能显著促进MHCC97H胆囊癌细胞增殖、迁移及侵袭,与调控Bcl-2及BAX表达有关。 展开更多

关键词 干扰素诱导跨膜蛋白3 胆囊癌细胞 mhcc97h 增殖 迁移 侵袭

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CCDC137基因在肝细胞癌组织中表达的临床意义及其对MHCC97H细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：2

12

作者 王芊文 李文华 +4 位作者 王小芳 耿玉庆 赵彬 吴向未 陈雪玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期904-910,共7页

目的:分析卷曲螺旋结构域蛋白137(CCDC137)基因在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲低CCDC137基因对肝癌MHCC97H细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载HCC数据集,获得C... 目的:分析卷曲螺旋结构域蛋白137(CCDC137)基因在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系,探讨敲低CCDC137基因对肝癌MHCC97H细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载HCC数据集,获得CCDC137基因表达谱和临床资料信息,利用生物信息学方法分析CCDC137基因在HCC组织中的表达水平与患者临床病理指标的相关性以及对预后的影响;用基因集富集分析(GSEA)预测CCDC137基因在HCC中可能调控的信号通路,用Kaplan-Meier法及Log-Rank检验进行生存分析,并运用Cox比例风险回归模型分析影响患者预后的危险因素。采用小干扰RNA技术抑制肝癌MHCC97H细胞中CCDC137基因的表达,用qPCR法、WB法、CCK-8法及Transwell实验分别检测干扰后细胞CCDC137 mRNA和蛋白表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:在TCGA数据库检索到的371例HCC患者中,CCDC137 mRNA表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),其高表达与肿瘤组织学分级、癌组织分期、T分期等存在显著关联(OR=0.014、0.007、0.047,均P<0.05),CCDC137高表达的患者OS明显低于CCDC137基因低表达的患者(P<0.05),多因素Cox回归分析提示CCDC137基因可作为HCC患者的独立预后因子。GSEA结果发现,CCDC137基因高表达的样本存在碱基切除修复和剪接体等多个通路基因集的富集(P<0.01,FDR<0.05)。敲低CCDC137基因后,MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(均P<0.01)。结论:CCDC137基因在HCC组织中高表达,其高表达与HCC的发生发展及预后不良有关。敲低CCDC137基因表达抑制MHCC97H细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 肝细胞癌 卷曲螺旋结构域蛋白137 mhcc97h细胞 增殖 迁移 侵袭 预后

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消癌平注射液对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞侵袭和转移抑制作用及分子机制研究 被引量：3

13

作者 杨姣 张湘奇 +3 位作者 陈君君 肖霄 祁美娟 韩永龙 《中国药师》 CAS 2019年第3期412-417,共6页

目的:研究消癌平注射液(XAP)对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞侵袭和转移抑制作用及分子机制。方法:MTT法检测XAP对人肝癌细胞株HepG2和MHCC97H的增殖抑制作用,通过划痕实验、Transwell实验检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞迁移能力的抑制作用,采... 目的:研究消癌平注射液(XAP)对人肝癌HepG2和MHCC97H细胞侵袭和转移抑制作用及分子机制。方法:MTT法检测XAP对人肝癌细胞株HepG2和MHCC97H的增殖抑制作用,通过划痕实验、Transwell实验检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞迁移能力的抑制作用,采用Transwell包被基质胶实验检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞侵袭能力的抑制作用,应用Western blotting方法检测XAP对HepG2和MHCC97H细胞MYOF、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果:MTT法结果显示,当XAP浓度为80μl·ml^(-1)作用24 h时,HepG2和MHCC97H细胞的存活率约为70%; XAP浓度为120μl·ml^(-1)及160μl·ml^(-1)时,对HepG2和MHCC97H细胞的增殖抑制作用逐渐增强(P<0.01)。48 h时,XAP呈剂量依赖性抑制HepG2和MHCC97H细胞的增殖(P<0.05或P<0.01)。划痕实验和Transwell实验结果显示XAP呈剂量依赖性地抑制佛波酯(12-O-tetradecanoylphorbol13-acetate,TPA)诱导的HepG2和MHCC97H细胞迁移(P<0.05或P<0.01)。Transwell包被基质胶实验显示XAP呈剂量依赖性地抑制TPA诱导的HepG2和MHCC97H细胞的侵袭(P<0.05或P<0.01)。Western blotting结果表明XAP抑制TPA诱导的HepG2和MHCC97H细胞中MYOF、MMP-2、MMP-9蛋白表达的升高(P<0.05或P<0.01)。结论:消癌平注射液能够抑制肝癌HepG2和MHCC97H细胞的侵袭和转移,其抑制作用可能与调控MYOF从而抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9表达相关。 展开更多

关键词 消癌平注射液 HEPG2 mhcc97h 侵袭 转移

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TGFβR Ⅱ基因对肝癌细胞MHCC97H体外增殖和侵袭能力的影响 被引量：1

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作者 于琨 蒋小峰 +3 位作者 邓武坚 程林 黄启顺 陈德 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第5期719-722,共4页

目的:研究慢病毒介导TGFβRⅡ基因对肝癌细胞MHCC97H体外增殖和侵袭能力的影响。方法:构建TGFβRⅡ慢病毒载体Lenti-TGFβRⅡ-puromycin-e GFP并转染至人肝癌细胞MHCC97H。qPCR和Western Blot检测TGFβRⅡ的表达。应用MTS和Transwell观... 目的:研究慢病毒介导TGFβRⅡ基因对肝癌细胞MHCC97H体外增殖和侵袭能力的影响。方法:构建TGFβRⅡ慢病毒载体Lenti-TGFβRⅡ-puromycin-e GFP并转染至人肝癌细胞MHCC97H。qPCR和Western Blot检测TGFβRⅡ的表达。应用MTS和Transwell观察97H细胞增殖和侵袭能力的改变。结果 :97H细胞成功转入TGFβRⅡ,与对照组相比,qPCR和Western Blot提示TGFβRⅡ表达明显升高。MTS和Transwell实验结果显示在高表达TGFβRⅡ后其增殖和侵袭能力下降。结论:过表达TGFβRⅡ基因抑制肝癌细胞生长,提示该基因有望成为肝癌治疗的一个新方法。 展开更多

关键词 肝肿瘤 增殖 侵袭 TGFΒ1 TGFβRⅡ mhcc97h

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人肝细胞肝癌MHCC97H裸鼠移植模型的建立及索拉菲尼的药效研究 被引量：1

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作者 杨璐 吴燕华 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2016年第9期1084-1090,共7页

索拉菲尼是靶向血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)、B-Raf原癌基因(B-Raf proto-oncogene)等多种酪氨酸激酶的抑制剂,能有效延长晚期肝细胞肝癌(简称肝癌)患者的生存时间。该研究利用人肝癌细胞... 索拉菲尼是靶向血管内皮生长因子受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)、B-Raf原癌基因(B-Raf proto-oncogene)等多种酪氨酸激酶的抑制剂,能有效延长晚期肝细胞肝癌(简称肝癌)患者的生存时间。该研究利用人肝癌细胞MHCC97H成功建立了裸鼠皮下异位移植模型以及原位移植模型,并评估了索拉菲尼对MHCC97H移植瘤的治疗作用。结果表明,MHCC97H可以在裸鼠皮下形成异位移植瘤,每天灌胃30 mg/kg索拉菲尼可显著抑制肿瘤生长。同时,MHCC97H也可以在裸鼠肝脏形成原位移植瘤。每天灌胃30 mg/kg索拉菲尼可以显著抑制裸鼠的血清甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)水平及原位瘤生长。综上所述,MHCC97H是构建皮下异位移植以及原位移植模型的一个理想肝癌细胞系,灌胃索拉菲尼在这两种移植瘤模型中都表现出显著的肿瘤抑制效果。 展开更多

关键词 索拉菲尼 mhcc97h 异位皮下移植模型 原位移植模型

原文传递

紫花牡荆素通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路抑制肝癌MHCC97H细胞的迁移和侵袭 被引量：5

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作者 娄磊 王靓厚 +1 位作者 王智 李翔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期868-875,共8页

目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;... 目的用紫花牡荆素(casticin,CAS)处理MHCC97H细胞,观察其迁移和侵袭能力的变化,并初步探讨CAS的分子作用机制。方法CCK-8试剂盒检测不同浓度CAS对MHCC97H细胞活力的影响;分组开展细胞迁移和侵袭实验,评估MHCC97H细胞的迁移和侵袭能力;逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CAS处理后,MHCC97H细胞的miR-148a-3p和Wnt1 mRNA表达变化;迁移侵袭相关蛋白(MMP2、MMP9)和Wnt1蛋白表达量采用Western blot检测;Dual-Luciferase报告基因检测miR-148a-3p与Wnt13′-UTR的结合情况。结果CAS明显抑制MHCC97H细胞的生存活力,其对这种细胞的IC_(50)约为10.0μmol·L^(-1),亚细胞毒浓度的CAS(3.0μmol·L^(-1))可减弱这种细胞的迁移和侵袭能力;miR-148a-3p mimic或CAS均能抑制MHCC97H细胞迁移和侵袭能力,且两者联合处理后的抑制作用强于单独使用;过表达Wnt1能有效减弱CAS的抑制作用;CAS能明显上调MHCC97H细胞miR-148a-3p表达,同时Wnt1、MMP2和MMP9的表达呈现下降;Dual-Luciferase报告基因发现,miR-148a-3p可以直接靶向Wnt13′-UTR。结论CAS可通过miR-148a-3p/Wnt1信号通路减弱肝癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 紫花牡荆素 肝癌 mhcc97h细胞 miR-148a-3p/Wnt1信号通路 细胞迁移 细胞侵袭

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miR-199-3p通过对FGF2的调控抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖、迁移作用及机制 被引量：3

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作者 韩银淑 徐艺丹 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第13期2250-2257,共8页

目的:探讨miR-199-3p通过靶向调控抑制靶基因FGF2从而抑制肝癌MHCC97H细胞的增殖和迁移及机制。方法:qRT-PCR检测癌旁正常组织及肝癌肿瘤组织中miR-199-3p的表达水平;Transwell细胞侵袭实验检测肝癌细胞株Huh7、MHCC-97L、SMMC7721、He... 目的:探讨miR-199-3p通过靶向调控抑制靶基因FGF2从而抑制肝癌MHCC97H细胞的增殖和迁移及机制。方法:qRT-PCR检测癌旁正常组织及肝癌肿瘤组织中miR-199-3p的表达水平;Transwell细胞侵袭实验检测肝癌细胞株Huh7、MHCC-97L、SMMC7721、HepG2和MHCC97H株其侵袭能力;qRT-PCR检测miR-199-3p在5株肝癌细胞系中的表达量;通过生物信息软件预测靶基因FGF2mRNA3'UTR的碱基存在miR-199-3p可能互补结合的位点并用荧光报告基因法及WB进行验证;通过qRT-PCR、免疫组化及Western blot检测FGF2在肝癌肿瘤组织和癌旁正常组织及各类肝癌细胞株表达的影响;Transwell、划痕、CCK8及流式细胞法检测miR-199-3p与FGF2对肝癌MHCC97H细胞增殖、侵袭、迁移及周期S期聚集能力的调控;采用MHCC97H细胞构建肝癌肿瘤异种移植小鼠模型进行肿瘤观测及免疫组化实验验证miR-199-3p对肝癌的调控作用。结果:miR-199-3p的表达水平与肝癌细胞侵袭转移能力相关;miR-199-3p能够通过抑制FGF2的mRNA翻译,抑制FGF2蛋白水平表达;FGF2与肝癌细胞侵袭转移能力相关;miR-199-3p可以负调控FGF2抑制肝癌MHCC97H细胞的生物行为;miR-199-3p可抑制肝癌细胞中阳性信号,细胞增殖水平显著降低。结论:miR-199-3p通过抑制FGF2抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖和迁移。 展开更多

关键词 肝癌 miR-199-3p FGF2 mhcc97h

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野菊花提取物对人肝癌MHCC97H细胞增殖和凋亡的影响 被引量：4

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作者 王志东 李宗芳 +5 位作者 张澍 代志军 李君 梁容瑞 王宝太 袁爱华 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期286-289,共4页

目的 观察中药野菊花提取物（chrysanthemum indicum extact,CIE）对人肝癌MHCC97H 细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人肝癌MHCC97H细胞,以0.4、0.8、1.2 mg/ml的CIE（实验1、2、3组）作用于MHCC97H细胞,并设立空白对照... 目的 观察中药野菊花提取物（chrysanthemum indicum extact,CIE）对人肝癌MHCC97H 细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养人肝癌MHCC97H细胞,以0.4、0.8、1.2 mg/ml的CIE（实验1、2、3组）作用于MHCC97H细胞,并设立空白对照组.分别于药物作用24、48、72 h时,应用MTT法检测细胞增殖情况.于药物作用24 h时,用AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡、Rhol23检测细胞线粒体膜电位（△Ψm）变化;Western blot检测细胞色素C、Caspase-9、-3的蛋白表达.结果 三种浓度的CIE对MHCC97H细胞的增殖均有明显的抑制作用,且呈明显的时间和浓度依赖性.与对照组相比,各实验组MHCC97H细胞的凋亡率明显增高（P＜0.05）,线粒体膜电位水平明显降低（P＜0.05）,细胞色素C、Caspase-9和-3的蛋白表达显著增强（P＜0.05）,以上各项均呈明显的量效关系.结论 野菊花提取物对肝癌MHCC97H的增殖具有抑制作用,这可能与药物诱导肝癌细胞凋亡有关.线粒体途径可能是CIE诱导MHCC97H细胞凋亡的主要机制之一. 展开更多

关键词 癌 肝细胞 野菊花 凋亡 mhcc97h 线粒体膜电位

原文传递

雷公藤红素对人肝癌MHCC97H细胞侵袭转移的影响及机制研究 被引量：5

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作者 陈永安 韩峭青 +2 位作者 周敏 汪晨 凌昌全 《中医学报》 CAS 2014年第5期623-625,共3页

目的:探讨雷公藤红素对人肝癌MHCC97H细胞侵袭转移的抑制作用及相关机制。方法:应用Transwell技术观察不同浓度(2.5μmol·L-1、5.0μmol·L-1、10.0μmol·L-1)雷公藤红素对MHCC97H细胞侵袭力和迁移力的影响。Westernblot... 目的:探讨雷公藤红素对人肝癌MHCC97H细胞侵袭转移的抑制作用及相关机制。方法:应用Transwell技术观察不同浓度(2.5μmol·L-1、5.0μmol·L-1、10.0μmol·L-1)雷公藤红素对MHCC97H细胞侵袭力和迁移力的影响。Westernblot法检测雷公藤红素处理后对C-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及NF-κB/p65核浆分布变化的影响。结果:雷公藤红素处理后24 h,迁移实验及侵袭实验结果显示,加药组透膜细胞数较对照组明显减少(P<0.05)。Westerblot结果显示磷酸化JNK表达上调,NF-κB/p65入核减少。结论:雷公藤红素体外具有抑制人肝癌细胞侵袭和转移的作用,其机制可能与活化JNK通路、抑制NF-κBp65入核有关。 展开更多

关键词 雷公藤红素 肝癌 mhcc97h JNK NF-ΚB

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牛大力总生物碱的抗肝癌作用及其作用机制

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作者 莫惠宁 裴京楠 +2 位作者 李倩 韦彩柳 张洪平 《中医药导报》 2025年第5期28-32,共5页

目的:探究牛大力总生物碱(AMC)的抗肿瘤活性及其作用机制。方法:利用有机溶剂提取法制备AMC,MTT法检测AMC对肝癌HepG2细胞和MHCC97H细胞增殖能力的影响,划痕实验和Transwell实验检测AMC对HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响;为了探究AMC对... 目的:探究牛大力总生物碱(AMC)的抗肿瘤活性及其作用机制。方法:利用有机溶剂提取法制备AMC,MTT法检测AMC对肝癌HepG2细胞和MHCC97H细胞增殖能力的影响,划痕实验和Transwell实验检测AMC对HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响;为了探究AMC对肿瘤生长的影响,用HepG2和BALB/c-nu小鼠建立裸鼠移植瘤模型。结果:与对照组比较,AMC对HepG2细胞、MHCC97H的增殖有不同程度的抑制作用,且呈剂量依赖性,其增殖率差异有统计学意义(P<0.01)。AMC对于HepG2细胞和MHCC97H细胞的半数抑制质量浓度(IC50)分别为1005.0、832.8μg/mL。与对照组比较,AMC组的细胞迁移、侵袭能力均减弱。牛大力总生物碱组小鼠肿瘤体积和质量明显减小。结论:牛大力总生物碱可抑制肝癌细胞的增殖,亦可抑制HepG2细胞的迁移和侵袭;牛大力总生物碱对BALB/c-nu荷瘤小鼠的肿瘤有抑制作用,其作用机制可能与其抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭和迁移有关。 展开更多

关键词 肝癌 牛大力 总生物碱 抗肿瘤活性 侵袭转移 HEPG2细胞 mhcc97h细胞 小鼠

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