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氯化钠贮存大鼠皮肤抗原性的表达及活力研究
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作者 刘军 王涛涛 侯明奎 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第20期48-52,共5页
目的观察经液氮贮存、氯化钠处理的新鲜大鼠皮肤抗原性的表达及组织活力。方法选取SD大鼠30只,随机分为3组,每组10只;制备大鼠全层皮肤,分别应用液氮、氯化钠进行贮存,于3个月时与新鲜大鼠皮肤分别通过免疫组织化学染色、SYTO/EB活力测... 目的观察经液氮贮存、氯化钠处理的新鲜大鼠皮肤抗原性的表达及组织活力。方法选取SD大鼠30只,随机分为3组,每组10只;制备大鼠全层皮肤,分别应用液氮、氯化钠进行贮存,于3个月时与新鲜大鼠皮肤分别通过免疫组织化学染色、SYTO/EB活力测定法进行MHC-DR、CD86抗原表达及活力检测。结果新鲜皮肤组MHC-DR、CD86抗原表达水平较液氮冷冻组、氯化钠组高(P<0.05),液氮冷冻组与氯化钠组的MHC-DR、CD86抗原表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);液氮冷冻组与氯化钠组皮肤组织活力均超过半数,但两者之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);新鲜皮肤组皮肤组织活力较液氮冷冻组、氯化钠组高(P<0.05)。结论液氮及氯化钠处理的大鼠皮肤均可减弱皮片的抗原性,氯化钠和液氮贮存大鼠皮肤的组织活力相近。 展开更多
关键词 皮肤抗原 mhc-dr CD86 组织活力 大鼠
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骨髓造血细胞岛在免疫相关性血细胞减少患者中的异质性研究 被引量:6
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作者 孙黎飞 韩冰 +4 位作者 李钢 吴强强 郝红峰 明汇 张金标 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期458-461,464,共5页
目的:观察免疫相关性血细胞减少或免疫相关性全血细胞减少(Immuno-related hematocytopenia/immuno-relat-ed pancytopenia,IRH/IRP)患者骨髓"造血细胞岛"(Hematopoietic islands,HI)的不同性质,分析其与MHCⅠ/Ⅱ类分子和骨... 目的:观察免疫相关性血细胞减少或免疫相关性全血细胞减少(Immuno-related hematocytopenia/immuno-relat-ed pancytopenia,IRH/IRP)患者骨髓"造血细胞岛"(Hematopoietic islands,HI)的不同性质,分析其与MHCⅠ/Ⅱ类分子和骨髓造血细胞抗人球蛋白(IgG)的关联,探讨相关免疫机制及其对临床诊疗的指导意义。方法:①对37例IRH/IRP患者骨髓涂片行常规瑞氏染色,观察HI的细胞成分和岛中免疫细胞性质;②细胞化学染色观察HI中免疫细胞过氧化物酶(POX)活性和铁贮存情况;③HLA-DR抗体免疫化学染色,观察免疫细胞MHCⅡ分子表达情况;④抗人IgG免疫荧光抗体(Immunofluores-cence,IF)染色,观察造血细胞和免疫细胞表面抗人IgG抗体表达;⑤观察不同HI在患者骨髓中出现的情况。结果:①HI中的造血细胞和免疫细胞各异,并与患者血沉和IgG、血清HLA-B27抗体浓度和过氧化物酶(POX)、HLA-DR和IF染色表达情况密切相关。②根据免疫细胞的生物学性质分为抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(Antibody dependent cell cytotoxicity,AD-CC)型HI、巨噬细胞(Mφ)型HI、抗原提呈(Antigen presenting,AP)型HI、浆细胞型HI和幼粒细胞型HI 5种。③HI中幼稚的造血细胞膜上均表达抗人IgG荧光抗体,HI中免疫细胞与造血细胞接触处和抗原提呈细胞(Antigen presenting cells,APC)浆中呈现不同的强阳性IF颗粒。④Mφ型HI数量最多,常与ADCC型HI在血沉升高患者骨髓中同时出现,HLA-B27和血沉均升高的IRP患者骨髓中可同时存在ADCC型、Mφ型和AP型HI。结论:IRH/IRP患者骨髓幼稚造血细胞膜表面抗原改变产生抗人IgG抗体是HI产生的基础;HI异质性及在骨髓中出现的不同形式则为患者体液免疫和细胞免疫不同程度的活化对造血细胞多重性损伤的生物学表现。 展开更多
关键词 免疫相关性血细胞减少 造血细胞岛 MHC分子 HLA-DR
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MHC Ⅱ类基因修饰的小鼠黑色素瘤细胞对肿瘤特异性CTL诱导的实验研究 被引量:1
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作者 隋拥君 唐佩弦 +2 位作者 侯春梅 隋礼丽 毛宁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期124-128,共5页
大多数的肿瘤细胞只表达MHCⅠ类抗原,不表达Ⅱ类抗原,而Ⅱ类抗原主要与T辅助细胞作用,激活T辅助细胞,为细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的活化提供必需的辅助信息。如果肿瘤细胞是MHCⅡ类阳性的,就可以直接作为抗原提呈细胞来刺激T辅助细胞的增... 大多数的肿瘤细胞只表达MHCⅠ类抗原,不表达Ⅱ类抗原,而Ⅱ类抗原主要与T辅助细胞作用,激活T辅助细胞,为细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的活化提供必需的辅助信息。如果肿瘤细胞是MHCⅡ类阳性的,就可以直接作为抗原提呈细胞来刺激T辅助细胞的增殖,进而产生有效的免疫反应,因此向肿瘤细胞内转移MHCⅡ类基因是目前正在尝试的一种新的基因治疗方法。为了探讨MHCⅡ类基因修饰的肿瘤细胞其免疫原性的变化,我们利用已经获得的表达MHCⅡ类基因的B16-DR细胞,进行CTL诱导的实验研究。结果表明,经MHCⅡ类基因修饰的B16-DR细胞可以在体内和体外诱导产生针对原始B16细胞的CTL反应,而未经修饰的B16细胞却无此作用。此CTL反应可用抗MHCⅡ的单克隆抗体封闭,并且封闭的程度随着加入的抗体量的增加而增加,说明此CTL反应的诱导与所转入的MHCⅡ类基因密切相关。抗CD4/CD8的单克隆抗体可以阻断CTL的诱导,表明T辅助细胞和杀伤性T细胞也参与了这一CTL诱导过程。总之,我们的实验结果提示所转入的MHCⅡ类基因以及CD4和CD8T细胞在CTL诱导反应中具有重要作用。 展开更多
关键词 MHC Ⅱ类基因 黑色素瘤 细胞毒性T淋巴细胞 B16-DR细胞
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MHC-Ⅱ基因反义RNA导入脐血CD34^+细胞抑制HLA-DR抗原的表达(英文)
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作者 邓宇斌 李树浓 +2 位作者 黄绍良 谢强 黄仁魏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期263-268,共6页
将HLA-DRBI基因cDNA片段反向插入逆转录病毒质粒pZIP-neo SV(x)BamHI位点中,构建了HLA-DRB1基因的逆转录病毒反义RNA重组表达载体,用脂质体法导入PA317细胞。用免疫磁珠法分离、富集脐血CD34^+细胞。将培养的病毒上清感染脐血CD34^+细胞... 将HLA-DRBI基因cDNA片段反向插入逆转录病毒质粒pZIP-neo SV(x)BamHI位点中,构建了HLA-DRB1基因的逆转录病毒反义RNA重组表达载体,用脂质体法导入PA317细胞。用免疫磁珠法分离、富集脐血CD34^+细胞。将培养的病毒上清感染脐血CD34^+细胞,筛选获得抗性克隆和进行CFU-GM的培养。用RT-PCR法从经G418选择产生的抗性克隆已证实有反义RNA目的基因的表达。流式细胞仪(FACS)检测转染的脐血细胞中HLA-DR抗原阳性率为28%(对照组为45%),其抑制率为38.2%。结果表明导入脐血细胞的MHC-Ⅱ类基因反义RNA重组体可降低其HLA-DR抗原的表达。本实验结果为用反义核酸技术在临床脐血移植中防止移植物抗宿主反应提供了新方法。 展开更多
关键词 脐血 CD34^+细胞 HLA-DR抗原 反义RNA MHC-Ⅱ类基因 基因
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HLA-DR_3基因与胰岛素依赖型糖尿病相关性研究 被引量:1
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作者 王军 卢长春 +2 位作者 申秀玲 张春燕 曹峰林 《哈尔滨医药》 2003年第4期4-5,共2页
目的 探讨HLA -DR3 基因与胰岛素依赖型糖尿病相关性。方法 对 10 0例汉族正常无血缘关系的个体和按WHO糖尿病诊断标准确诊的 5 4名汉族胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM )患者 ,采用非放射同位素地高辛标记的DR3 基因碱基序列特异性寡核苷... 目的 探讨HLA -DR3 基因与胰岛素依赖型糖尿病相关性。方法 对 10 0例汉族正常无血缘关系的个体和按WHO糖尿病诊断标准确诊的 5 4名汉族胰岛素依赖型糖尿病 (IDDM )患者 ,采用非放射同位素地高辛标记的DR3 基因碱基序列特异性寡核苷酸探针 (DRB10 30 1,0 30 2 ) ,进行斑点杂交 (Dot,blot)。结果 结果显示正常对照组DR3 基因 (DRB10 30 1)携带者为 6 % ,而IDDM病人高达 5 3 6 % ,RR =18 17(P <0 0 0 1)。结论 通过本研究表明HLA -DR3基因与胰岛素依赖型糖尿病密切相关 ,该基因可能就是我国汉族人群胰岛素依赖型糖尿病的易感基因之一。 展开更多
关键词 胰岛素依赖型糖尿病 HLA—DR3基因 相关性研究 断标 易感基因 多聚酶链反应 SSOPH
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Novel SLA-DR Alleles of Three Chinese Pig Strains and the Related Function in Human T Cell Response 被引量:5
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作者 FuxiangChen JinXie YunZhou NingliLi Kuang-YenChou 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2004年第3期212-218,共7页
To elucidate the structures of SLA-DR(swine leukocyte antigen DR)genes of three Chinese pig strains (Gz,Bm and Yn),the SLA-DRA and SLA-DRB cDNA were amplified by RT-PCR and subjected to determine the sequences.The who... To elucidate the structures of SLA-DR(swine leukocyte antigen DR)genes of three Chinese pig strains (Gz,Bm and Yn),the SLA-DRA and SLA-DRB cDNA were amplified by RT-PCR and subjected to determine the sequences.The whole structures of SLA-DRA alleles are identical among three strains,consisting of 759 nucleotides including an open reading frame(ORF),and are shared with those reported from NIH minipigs SLA-DRA^c and SLA-DRA^d.The same length of the ORF-containing SLA-DRB genes of three Chinese pig strains was also identified.They are composed of 801 nucleotides encoding a xenogeneic antigen molecule of 266 amino acid residues.The nucleotide sequences of the SLA-DRB genes,however,are different when compared either among the three strains or with the published data of SLA-DRB sequences,which allowed our novel SLA-DRB alleles receiving their accession numbers AY102479,AY102480 and AY102481 from the GenBank.This study further reveals that the phylogenic homologies of MHC DR or DR-like genes in structures of nucleotides and deduced amino acids between Chinese pigs(SLA)and human(HLA-DRB1*0901)are better than those between pigs and mice (H-2~b Eβ).High similarities were also found for DRα-DRβ heterodimers between Chinese pigs and human in terms of amino acids sequences critical for binding with human CD4 coreceptor molecule,which are better than those between SLA-DR and H-2 I-E molecules.A functional test indicated that,by cotransfection with Bm-DRA and Bm-DRB genes,the Bm-DR molecule-expressed L929 cells could stimulate human T cells quite well in a xenogeneic reaction in presence of human APCs.Cellular & Molecular Immunology.2004;1 (3):212-218. 展开更多
关键词 mhc-dr SLA Chinese pig strain CD4 coreceptor XENOTRANSPLANTATION
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构建MHCⅡ类分子反式激活因子基因突变体抑制转染细胞HLAⅡ类分子的表达 被引量:5
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作者 欧启水 林琳 +2 位作者 黄立东 陆佩华 周光炎 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期312-315,共4页
目的 探讨MHCⅡ类分子反式激活因子 (CⅡTA)突变体抑制HLAⅡ类分子表达的可能性。方法 构建不含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA2、含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA3和含起始密码子及NLS(nuclearlocalizationsignal)的pcDNA3mCⅡTA4突变体。用... 目的 探讨MHCⅡ类分子反式激活因子 (CⅡTA)突变体抑制HLAⅡ类分子表达的可能性。方法 构建不含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA2、含起始密码子的pcDNA3mCⅡTA3和含起始密码子及NLS(nuclearlocalizationsignal)的pcDNA3mCⅡTA4突变体。用脂质体转染法将上述 3种突变体及pcDNA3空载体转入HeLa细胞和Raji细胞。用流式细胞术和RT PCR法观察它们对HeLa/Raji细胞HLA DR/DQ分子的诱导性和组成性表达的影响。结果 在细胞和基因水平证实pcDNA3mCⅡTA3和pcDNA3mCⅡTA4对HeLa/Raji细胞HLA DR/DQ的表达起明显抑制作用 ,而pcDNA3mCⅡTA2和pcDNA3空载体无此作用。 展开更多
关键词 MHCⅡ类分子反式激活因子 突变体构建 HLA-DR/DQ 基因转染 流式细胞术 RT-PCR法
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