基于METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬探讨补肾强督方抑制炎症治疗强直性脊柱炎的机制研究 被引量：1

1

作者 吴琳 李松倍 +2 位作者 苏晓庆 韩天然 李泽光 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第2期94-101,共8页

目的:观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响,从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法:使用Jurkat细胞,采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清... 目的:观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响,从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法:使用Jurkat细胞,采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清和METTL14重组蛋白进行干预。采用ELISA法检测炎症因子(IL-23和IL-17A)和氧化应激指标的水平,流式细胞术检测ROS水平,Western blot法检测自噬相关蛋白、METTL14和FOXO3A的表达,RT-qPCR检测METTL14和FOXO3A的表达,斑点杂交实验检测FOXO3A的m^(6)A甲基化水平。结果:与模型组比较,补肾强督方显著降低Jurkat细胞上清中IL-23、IL-17A和MDA的含量与ROS的水平,增加SOD和GSH-Px的活性,差异均具有统计学意义(P<0.01)。此外,补肾强督方能显著上调Jurkat细胞中Beclin-1、FOXO3A和METTL14蛋白和基因的表达和增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,下调p62蛋白的表达,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。在此基础之上,与模型组比较,补肾强督方能显著上调Jurkat细胞FOXO3A的m^(6)A甲基化水平,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾强督方通过METTL14介导的FOXO3A的m^(6)A甲基化修饰促进T细胞自噬,从而达到治疗强直性脊柱炎的作用。 展开更多

关键词 补肾强督方 T淋巴细胞 mettl14 FOXO3A m^(6)A甲基化修饰

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基于转录组测序分析METTL14对绵羊骨骼肌卫星细胞成肌分化的影响

2

作者 何思琦 陈倩 +3 位作者 蒋琳 马月辉 周胜花 赵倩君 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期4925-4937,共13页

旨在探究甲基转移酶样14(methyltransferase-like 14,METTL14)影响绵羊骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)成肌分化的分子机制,为解析METTL14调控绵羊骨骼肌卫星细胞分化的分子机制提供理论基础。本研究对SMSCs进... 旨在探究甲基转移酶样14(methyltransferase-like 14,METTL14)影响绵羊骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells,SMSCs)成肌分化的分子机制,为解析METTL14调控绵羊骨骼肌卫星细胞分化的分子机制提供理论基础。本研究对SMSCs进行分离并鉴定,将METTL14过表达质粒及对照质粒分别转染进入SMSCs,通过RT-qPCR和Western blot检测其过表达效率及METTL14影响SMSCs分化的功能。对SMSCs过表达METTL14组(OE-14)和对照组(OE-NC)进行转录组测序,以P<0.05且log2|Fold Change|>1为阈值鉴定差异表达基因,进行GO和KEGG富集分析及PPI蛋白质网络互作分析。METTL14过表达能够显著增加SMSCs中METTL14的表达及成肌分化相关基因(MyHC、MyoG)的mRNA和蛋白水平,表明METTL14过表达成功,且METTL14能够促进SMSCs的分化。两组中共鉴定到259个差异表达基因,与OE-NC相比,OE-14共有45个基因表达上调,214个基因表达下调。差异基因主要富集到细胞核通路、Rap1信号通路等。PPI蛋白质网络互作分析筛选出8个枢纽基因(Degree≥15),包括MX1、RSAD2、IFIH1、DDX58、HERC5、ISG15、MX2以及IRF7。本研究表明METTL14通过影响细胞进程和肌肉发育相关的基因和信号通路促进绵羊骨骼肌卫星细胞的分化。 展开更多

关键词 mettl14 转录组测序 骨骼肌卫星细胞 绵羊 细胞分化

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m6A甲基转移酶METTL14在滋养细胞中的表达及对早发型子痫前期发生的影响

3

作者 唐熊 陈繁 +3 位作者 谢丝雨 郭亚飞 何晔 张英 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第10期1887-1895,1907,共10页

目的探究RNA的N6-甲基腺苷(m6A)修饰及甲基转移酶样蛋白14(METTL14)在早发型子痫前期(ePE)发病机制中的作用。方法收集15例早发型子痫前期孕妇和15例正常孕妇的胎盘组织。利用比色法测定m6A水平,利用RT-qPCR、Western blot实验和免疫组... 目的探究RNA的N6-甲基腺苷(m6A)修饰及甲基转移酶样蛋白14(METTL14)在早发型子痫前期(ePE)发病机制中的作用。方法收集15例早发型子痫前期孕妇和15例正常孕妇的胎盘组织。利用比色法测定m6A水平,利用RT-qPCR、Western blot实验和免疫组化(IHC)实验测定METTL14表达情况。通过转染siRNA和质粒,敲低、过表达滋养细胞METTL14水平,开展体外细胞表型实验。通过CCK-8、划痕试验、Transwell实验和侵袭实验探究METTL14对滋养细胞增殖、迁移及侵袭的影响。结果早发型子痫前期孕妇胎盘组织m6A水平较正常孕妇胎盘组织降低,METTL14主要在滋养细胞细胞核中表达,与正常妊娠相比,METTL14在早发型子痫前期胎盘组织中的表达降低,METTL14 mRNA水平与胎盘组织m6A水平成正相关。CCK-8实验结果显示,与对照组相比,敲低METTL14在滋养细胞中的表达,细胞增殖速度显著降低,过表达METTL14滋养细胞增殖能力增强。划痕试验结果显示,与对照组相比,METTL14敲低后划痕的相对愈合率明显减小,过表达METTL14后划痕的相对愈合率增加。Transwell实验和侵袭实验结果显示,与对照组相比,METTL14敲低后,穿过小室的滋养细胞数目明显减少,过表达METTL14滋养细胞穿过小室的数目增多。结论早发型子痫前期胎盘组织总RNA m6A修饰水平低于正常妊娠组,甲基转移酶METTL14的下调参与了总RNA m6A修饰水平的调控,过表达METTL14能够增强滋养细胞的增殖、迁移以及侵袭能力,为探究早发型子痫前期的发病机制提供了新视角。 展开更多

关键词 早发型子痫前期 RNA 滋养细胞 m6A mettl14

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METTL14介导的m6A甲基化调控SIRT6在心肌缺血再灌注损伤中的作用机制研究

4

作者 何娟 黄敏 +1 位作者 谢爱萍 何秀波 《中西医结合心脑血管病杂志》 2025年第11期1658-1665,共8页

目的:探讨甲基转移酶样蛋白14(METTL14)通过N6-甲基腺苷(m6A)甲基化调控沉默信息调节因子6(SIRT6)干预小鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用机制。方法:选取健康C57BL/6小鼠60只,采用冠状动脉结扎法建立心肌I/R损伤模型,构建METTL14的过... 目的:探讨甲基转移酶样蛋白14(METTL14)通过N6-甲基腺苷(m6A)甲基化调控沉默信息调节因子6(SIRT6)干预小鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的作用机制。方法:选取健康C57BL/6小鼠60只,采用冠状动脉结扎法建立心肌I/R损伤模型,构建METTL14的过表达质粒及阴性对照[磷酸化METTL14(p-METTL14)、p-NC]、SIRT6的si RNA及阴性对照(si-SIRT6、si-NC),以慢病毒包装后采用尾静脉注射的方式于小鼠体内分别过表达或抑制METTL14及SIRT6,随机分为假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、p-METTL14组、p-NC组、p-METTL14+si-SIRT6、p-METTL14+si-NC组,每组10只。采用动物超声心动图系统评估小鼠心功能变化,伊文思蓝/2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定小鼠心肌梗死面积,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡水平,m6A甲基化免疫共沉淀(MeRIP)-聚合酶链式反应(q PCR)法检测小鼠心肌组织中SIRT6mRNA表达水平及其m6A甲基化水平,蛋白免疫印迹法(Western Blot)实验检测心肌组织线粒体中的自噬标志蛋白表达。结果:与Sham组相比,I/R组小鼠左心室射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)和心肌组织中SIRT6 mRNA、心肌组织中肥胖相关蛋白(FTO)、甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、ALKB同系物5(ALKBH5)表达均明显降低,心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率及心肌组织线粒体帕金森病蛋白(Parkin)、PENT诱导激酶1(PINK1)蛋白相对表达量、灰度值均明显升高(P<0.05);与I/R组相比,p-METTL14组、p-METTL14+si-SIRT6组小鼠EF、FS及心肌组织中SIRT6 mRNA表达均明显升高,心肌梗死面积、心肌细胞凋亡率、FTO、METTL3、ALKBH5和心肌组织线粒体中Parkin、PINK1蛋白相对表达量、灰度值均明显降低,且p-METTL14+si-SIRT6组优于p-METTL14组(P<0.05)。结论:METTL14对小鼠I/R损伤具有保护作用,其可能通过增强SIRT6的m6A甲基化修饰改善小鼠心功能,缩小心肌梗死面积、抑制心肌细胞凋亡并促进心肌细胞线粒体自噬,减轻小鼠心肌I/R损伤。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注损伤 甲基转移酶样蛋白14 沉默信息调节因子6 N6-甲基腺苷 RNA甲基化 线粒体自噬 实验研究

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METTL14介导的m^(6)A甲基化修饰Snail-1蛋白对食管癌细胞侵袭和上皮间质转化特性的影响 被引量：2

5

作者 钟守平 李广顺 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第19期3565-3571,共7页

目的:探讨METTL14介导的m^(6)A甲基化修饰Snail-1蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)侵袭和上皮间质转化(EMT)中的影响和作用机制。方法:通过GEPIA分析ESCC患者METTL14的表达情况及对其生存期进行评估;实验分为si-NC组和si-METTL14组;qPCR检测M... 目的:探讨METTL14介导的m^(6)A甲基化修饰Snail-1蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)侵袭和上皮间质转化(EMT)中的影响和作用机制。方法:通过GEPIA分析ESCC患者METTL14的表达情况及对其生存期进行评估;实验分为si-NC组和si-METTL14组;qPCR检测METTL14基因的表达;Western blot检测Snail-1和EMT相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的表达;Transwell实验检测细胞侵袭能力;MeRIP-qPCR检测m^(6)A修饰Snail-1的水平;加入放线菌素D(actinomycin D)检测Snail-1 mRNA稳定性。结果:ESCC患者和细胞系中METTL14的表达显著升高(P<0.01);METTL14高表达患者的生存期明显缩短(P<0.01)。si-METTL14组中METTL14 mRNA和蛋白的表达水平都显著降低(P<0.01);E-cadherin表达显著上升(P<0.01),而N-cadherin和Vimentin的表达显著降低(P<0.01);细胞侵袭个数明显减少(P<0.01)。进一步发现,si-METTL14转染显著下调Snail-1的mRNA和蛋白水平(P<0.01),且显著降低m^(6)A Snail-1水平(P<0.01)以及Snail-1 mRNA的稳定性(P<0.01)。Snail-1拯救实验证明与si-METTL14+OE-NC组相比,si-METTL14+OE-Snail-1组中E-cadherin的表达显著降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin的表达显著升高(P<0.01)。结论:在ESCC细胞中,METTL14和Snail-1的表达均上调;敲低METTL14可显著降低Snail-1 mRNA的稳定性,而减少其表达,从而抑制ESCC细胞侵袭和EMT过程。 展开更多

关键词 mettl14 m^(6)A Snail-1 食管癌 EMT

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单基因METTL14在泛癌中的综合分析 被引量：1

6

作者 赵丽 闫清 +4 位作者 赵晓雯 彭瑞 朱明雪 王晔 牟晓峰 《分子诊断与治疗杂志》 2022年第5期798-801,806,共5页

目的联合多数据库分析METTL14在肿瘤中的表达及其与肿瘤微环境之间的关系。方法从相关数据库中获取各个肿瘤及正常组织中的基因数据,分析METTL14在不同正常组织和不同肿瘤组织中的表达水平;比较METTL14的表达水平高低与肿瘤预后之间的关... 目的联合多数据库分析METTL14在肿瘤中的表达及其与肿瘤微环境之间的关系。方法从相关数据库中获取各个肿瘤及正常组织中的基因数据,分析METTL14在不同正常组织和不同肿瘤组织中的表达水平;比较METTL14的表达水平高低与肿瘤预后之间的关系;分别分析METTL14表达与免疫细胞评分和免疫检查点的相关性;分析METTL14表达与MMRs以及DNMTs的表达关系。结果METTL14在大多数实体肿瘤中表达水平较正常组织低;KIRC、MESO、READ中METTL14的低表达可能与患者的不良预后有关,K⁃M生存曲线显示KICH、LGG中METTL14的高表达;METTL14的表达水平与BLCA、COAD、HNSC中的免疫浸润水平最显著相关;各个肿瘤中METTL14的表达水平与多个检查点呈正相关;泛癌中METTL14的表达水平与MMRs基因及DNMTs的表达水平呈正相关(P<0.05)。结论本研究全面揭示了METTL14在不同肿瘤发生和发展过程中的重要作用,为METTL14作为未来肿瘤预后评估以及免疫治疗的关键靶点提供新的见解。 展开更多

关键词 mettl14 泛癌分析 免疫浸润 肿瘤微环境

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METTL14在头颈鳞癌发生发展中的作用

7

作者 李丹 董凯峰 +3 位作者 苏静 薛海涛 张继华 李天客 《现代口腔医学杂志》 CAS 2022年第2期78-82,130,共6页

目的本研究通过检测METTL14在头颈鳞癌中的表达水平,探究其在头颈鳞癌发生发展中的作用,从而揭示METTL14在头颈鳞癌侵袭、转移中发挥的作用。方法于2015年8月至2020年8月期间,收集在河北医科大学第一医院和河北医科大学第四医院就诊的7... 目的本研究通过检测METTL14在头颈鳞癌中的表达水平,探究其在头颈鳞癌发生发展中的作用,从而揭示METTL14在头颈鳞癌侵袭、转移中发挥的作用。方法于2015年8月至2020年8月期间,收集在河北医科大学第一医院和河北医科大学第四医院就诊的79例头颈鳞癌患者。利用qPCR检测组织中METTL14的mRNA的表达。分别分析临床参数与METTL14基因表达水平之间的相关性,通过计算风险比(HRs)和95%置信区间(95%CI)分析相关参数与METTL14的联系。结果在受试个体中,淋巴转移(P=0.016)和生存时间(P<0.001)与METTL14表达显著相关。斯皮尔曼相关系数显示淋巴转移(ρ=-0.271,P=0.016)、生存时间(ρ=-0.747,P<0.001)与METTL14显著相关。单因素cox回归描述了研究对象在单变量水平上的HRs和95%CI,并得出METTL14表达水平(HR=27.972,95%CI:9.609-81.430,P<0.001)与患者的生存时间有明显相关性。排除混杂因素的影响,多因素回归分析指出METTL14表达水平(HR=30.508,95%CI:10.059-92.531,P<0.001)依然是头颈鳞癌生存的显著危险风险。结论本研究通过检测METTL14在头颈鳞癌中的表达水平,并进一步证实METTL14在头颈鳞癌发生发展中发挥了促进头颈鳞癌细胞增殖的作用,且可能作为预后指标,为头颈鳞癌的早期诊断及治疗提供新靶点。 展开更多

关键词 头颈鳞癌 mettl14 预后 生存 基因治疗

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METTL14通过PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路调控巨噬细胞分化对宫颈癌细胞凋亡和增殖的影响 被引量：5

8

作者 孟敬一 王娜 孙晓勤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期45-52,共8页

目的探讨METTL14通过调控巨噬细胞分化抑制宫颈癌病理性发展及相关机制。方法检测宫颈癌病变样本METTL14 m RNA和蛋白,以及IL-6、iNOS、Arg-1和CD206表达变化。PMA诱导THP-1细胞转化为巨噬细胞,慢病毒过表达或抑制METTL14表达,检测IL-6... 目的探讨METTL14通过调控巨噬细胞分化抑制宫颈癌病理性发展及相关机制。方法检测宫颈癌病变样本METTL14 m RNA和蛋白,以及IL-6、iNOS、Arg-1和CD206表达变化。PMA诱导THP-1细胞转化为巨噬细胞,慢病毒过表达或抑制METTL14表达,检测IL-6、iNO、Arg-1和CD206表达变化以及PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路相关蛋白表达情况。随后加入PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路激动剂和抑制剂,检测过表达或抑制METTL14后,巨噬细胞IL-6、iNO、Arg-1和CD206表达变化,并取其上清制成条件培养基,孵育Hela细胞,检测细胞凋亡和增殖情况。结果1)宫颈癌病变组织中METTL14 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),巨噬细胞M1型标志物IL-6和iNOS表达明显降低(P<0.05),而M2型标志物Arg-1和CD206表达明显升高(P<0.05)。2)巨噬细胞过表达METTL14后,IL-6和iNOS表达明显升高(P<0.05),而Arg-1和CD206表达明显降低(P<0.05),M1/M2比例升高;抑制METTL14表达后,M1型标志物降低(P<0.05),M2型标志物升高(P<0.05),M1/M2比例降低。3)巨噬细胞中转染OE-METTL14慢病毒组PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路被抑制(P<0.05);加入PI3K/AKT激动剂后,M1型标志物降低而M2型标记物升高(P<0.05),M1/M2比例降低;OE-METTL14可逆转此趋势。Sh-METTL14慢病毒组PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路被激活(P<0.05),加入PI3K/AKT抑制剂后,M1型标志物升高而M2型标记物降低(P<0.05),M1/M2比例升高;Sh-METTL14可逆转此趋势。4)取转染OE-METTL14慢病毒后的巨噬细胞上清培养Hela细胞,可见细胞凋亡明显增多(P<0.05),增殖明显减少(P<0.05)。Sh-METTL14组的Hela细胞则表现出细胞凋亡减少(P<0.05),增殖增多(P<0.05)。结论METTL14通过PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路调控巨噬细胞分化可能有促进宫颈癌细胞凋亡,抑制增殖的作用。 展开更多

关键词 mettl14 PI3K/AKT/GSK3β/β-catenin信号通路 M1/M2巨噬细胞比例 宫颈癌

原文传递

METTL14在CML细胞中的表达及其与PKM剪接体间的相关性分析 被引量：2

9

作者 廖志华 刘静 +5 位作者 李书琪 姚芳苡 黄波 章海斌 张静 王小中 《实验与检验医学》 CAS 2022年第1期40-43,共4页

目的探讨METTL14在伊马替尼(Imatinib,IM)敏感和耐药慢粒(chronic myeloid leukemia,CML)细胞中的表达差异,并分析其与PKM剪接体间的相关性。方法收集南昌大学第二附属医院门诊的健康对照组、CML慢性期、CML急变期各5例外周血或骨髓,运... 目的探讨METTL14在伊马替尼(Imatinib,IM)敏感和耐药慢粒(chronic myeloid leukemia,CML)细胞中的表达差异,并分析其与PKM剪接体间的相关性。方法收集南昌大学第二附属医院门诊的健康对照组、CML慢性期、CML急变期各5例外周血或骨髓,运用RNA转录组测序(RNA-seq)技术进行测序,筛选差异表达基因;另收集30例IM敏感的慢性期CML患者外周血或骨髓作为IM敏感组,10例IM耐药急变期标本作为耐药组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证40例临床样本中METTL14基因差异表达,并采用Spearman法分析METTL14和PKM剪接体的相关性,同时通过SRAMP网址预测PKM基因是否含有m6A修饰位点。结果RNA测序结果显示,分别与对照组和慢性期比,急变期基因表达谱有很大的差异,且差异基因显著富集的是剪接体功能通路;METTL14 mRNA在IM敏感组和耐药组中相对表达量分别是(13.720±2.512)和(21.450±1.426),差异有统计学意义(P=0.028)。qRT-PCR结果显示METTL14 mRNA在敏感组中的表达较耐药组显著降低(P<0.001);Spearman相关分析表明,METTL14 mRNA表达水平与PKM2/PKM1比值呈正相关(r=0.495,P=0.005);SRAMP网址预测PKM基因9号外显子区域高度富集m6A修饰位点。结论高表达的METTL14介导的m6A修饰PKM基因外显子9使其高度甲基化而不被剪接,PKM1生成减少,PKM2相应增多,从而促进CML耐药,为探讨CML耐药机制和治疗靶点提供新思路。 展开更多

关键词 mettl14 PKM剪接体 慢性粒细胞白血病 相关性

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湖羊m^(6)A甲基转移酶METTL14基因CDS序列克隆及表达谱分析 被引量：1

10

作者 张丹 陈博雯 +2 位作者 杨博辉 刘建斌 卢曾奎 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3047-3055,共9页

【目的】克隆湖羊甲基转移酶样蛋白14基因(METTL14)编码区(CDS)序列,探究其分子特征及组织表达分布规律,为揭示METTL14基因调控湖羊肌肉发育的特异性分子机制打下基础。【方法】提取湖羊肌肉组织RNA并反转录合成cDNA,以cDNA为模板扩增ME... 【目的】克隆湖羊甲基转移酶样蛋白14基因(METTL14)编码区(CDS)序列,探究其分子特征及组织表达分布规律,为揭示METTL14基因调控湖羊肌肉发育的特异性分子机制打下基础。【方法】提取湖羊肌肉组织RNA并反转录合成cDNA,以cDNA为模板扩增METTL14基因CDS序列,通过ProtParam、ProtScale、SignaIP-6.0等在线软件进行生物信息学分析,并利用实时荧光定量PCR进行湖羊METTL14基因组织表达谱分析。【结果】湖羊METTL14基因CDS序列全长1371 bp,共编码456个氨基酸残基;湖羊METTL14基因CDS序列与黄牛、人类、小鼠、大鼠、猕猴、山羊、弯角剑羚、马、双峰驼、野牦牛、野猪和水牛等12个参考物种的METTL14基因核苷酸序列相似性为89.28%~99.78%,对应的METTL14氨基酸序列相似性为98.66%~100.00%;基于METTL14基因核苷酸序列相似性构建的系统发育进化树显示,湖羊与山羊的亲缘关系最近,与双峰驼的亲缘关系较远。湖羊METTL14蛋白分子式为C2277H3575N669O709S16,分子量为52179.45 Da,理论等电点(pI)为5.89,不存在信号肽,无跨膜结构域,具有较强的亲水性,属于不稳定蛋白,主要分布在细胞核(占69.6%);湖羊METTL14蛋白包含12个α-螺旋和10个β-折叠,但以无规则卷曲为主。METTL14基因在湖羊的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大脑、睾丸、肌肉及皮下脂肪中均有表达,以心脏中的相对表达量最高,而肝脏中的相对表达量最低。【结论】METTL14作为m^(6)A甲基化的核心蛋白,在物种进化过程中高度保守;METTL14基因在湖羊肌肉和脂肪等多个组织中均有表达,且表达量与机体的代谢活动相关,可作为调控湖羊肌肉生长发育的候选基因进一步研究。 展开更多

关键词 湖羊 mettl14基因 m6 A甲基化 表达谱分析

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METTL14促进肝纤维化的机制研究 被引量：3

11

作者 张君佩 陈颖 +3 位作者 沈丹杰 刘海玲 田怡 陈世耀 《肝脏》 2021年第2期159-161,166,共4页

目的研究RNA甲基化转移酶METTL14对肝星状细胞系增殖及活化的影响。方法RT-qPCR检测TGF-β1处理后的肝星状细胞系中METTL14的表达量;在肝星状细胞系中过表达METTL14,采用MTT和Transwell的方法检测细胞的增殖及迁移,RT-qPCR和蛋白质印迹... 目的研究RNA甲基化转移酶METTL14对肝星状细胞系增殖及活化的影响。方法RT-qPCR检测TGF-β1处理后的肝星状细胞系中METTL14的表达量;在肝星状细胞系中过表达METTL14,采用MTT和Transwell的方法检测细胞的增殖及迁移,RT-qPCR和蛋白质印迹检测细胞中COL I和α-SMA的蛋白表达。结果TGF-β1与肝星状细胞共培养后,METTL14的表达量上调了2.8倍左右。过表达METTL14后,肝星状细胞培养48 h的吸光度为(0.730±0.047),高于对照组的(0.533±0.022);同时细胞的迁移数目为(186.00±42.75)亦高于对照组(97.00±7.00)差异均有统计学意义(P<0.05)。高表达METTL14细胞中COL I与α-SMA的相对表达水平(2.48±0.31;3.36±0.43)均显著高于对照组(1.00±0.26;1.00±0.24)差异均有统计学意义(P<0.05)。COL I与α-SMA的蛋白表达亦明显高于对照组。结论METTL14促进肝星状细胞增殖、活化是肝纤维化的重要机制。 展开更多

关键词 肝星状细胞活化 肝纤维化 mettl14 m6A修饰

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METTL14上调miR-141的m6A修饰抑制ZEB1促进肺成纤维细胞增殖与炎症 被引量：1

12

作者 杨益秀 陈洁 +2 位作者 李全妮 林梅 丁毅鹏 《海南医学院学报》 CAS 2023年第2期123-128,共6页

目的:探究METTL14是否通过调控pri-miR-141的m6A修饰参与调控成纤维细胞的增殖和炎症因子分泌。方法:使用METTL14过表达慢病毒转染MRC-5细胞,采用qPCR和western blot检测METTL14和ZEB1的表达量;采用CCK-8和流式细胞术检测METTL14对MRC-... 目的:探究METTL14是否通过调控pri-miR-141的m6A修饰参与调控成纤维细胞的增殖和炎症因子分泌。方法:使用METTL14过表达慢病毒转染MRC-5细胞,采用qPCR和western blot检测METTL14和ZEB1的表达量;采用CCK-8和流式细胞术检测METTL14对MRC-5增殖和凋亡的影响;IL-2,IL6和TNF-α的ELISA试剂盒检测METTL14对MRC-5分泌炎症因子的影响;采用meRIP检测pri-miR-141上的m6A修饰位点,RIP检测pri-miR-141与METTL14的结合情况。结果:在MRC-5细胞中成功过表达METTL14基因;METTL14高表达促进MRC-5细胞增殖,抑制其凋亡,并促进MRC-5细胞分泌炎症因子;pri-miR-141上存在m6A修饰位点,且pri-miR-141能够和METTL14直接结合;METTL14高表达增加miR-141的表达量,并抑制ZEB1 mRNA与蛋白表达。结论:METTL14通过增加pri-miR-141的m6A修饰位点促进miR-141的表达,抑制ZEB1从而促进成纤维细胞的增殖和炎症因子的分泌。 展开更多

关键词 成纤维细胞 增殖 炎症因子 mettl14 m6A

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脾脏METTL3、METTL14基因对鸡空肠弯曲菌感染的表达调控 被引量：1

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作者 张彩凤 张洪玮 +1 位作者 任艳茹 李显耀 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期114-117,124,共5页

m6A甲基化修饰(N6-Methyladenosine Modifications)是常见的RNA修饰之一,可以改变多种生理过程,且与免疫功能的调节密切相关。METTL3和METTL14是甲基转移酶的2个重要组成部分。为探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni)感染对鸡... m6A甲基化修饰(N6-Methyladenosine Modifications)是常见的RNA修饰之一,可以改变多种生理过程,且与免疫功能的调节密切相关。METTL3和METTL14是甲基转移酶的2个重要组成部分。为探讨空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni)感染对鸡METTL3、METTL14基因表达的影响,本实验将120只3日龄空肠弯曲菌阴性SPF鸡随机分为2组,对照组60只接种PBS,实验组60只接种空肠弯曲菌菌液。分别在接种后4、8、12、16、20、24 h采集实验组、对照组脾脏组织样品并提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,检测不同时间点METTL3、METTL14基因在实验组、对照组中的表达水平。结果显示,接种后4、8、20 h,实验组METTL3、METTL14基因的表达量均高于对照组,接种后12、16、24 h,实验组METTL3、METTL14基因的表达量均低于对照组。本研究初步揭示了METTL3、METTL14基因在空肠弯曲菌感染中发挥的表达调控作用,这种调控作用可能具有时间特异性,该结果为进一步探讨METTL3和METTL14基因在空肠弯曲菌感染中的分子调控机制提供理论依据。 展开更多

关键词 m6A 空肠弯曲菌 SPF鸡 METTL3 mettl14 基因表达

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脂多糖诱导人和小鼠肠上皮细胞炎症并上调细胞甲基转移酶样蛋白3(METTL3)和METTL14表达 被引量：1

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作者 丁汝昕 李瑞凯 +2 位作者 刘俊丽 张健 韩继明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期308-315,共8页

目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量... 目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α分别刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞(0、3、6、12、24)h。实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达;实时定量PCR和Western blot法分别检测m^(6)A修饰相关分子甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、METTL14、METTL16、Wilms瘤1相关蛋白(WTAP)、烷基化修复同源蛋白5(ALKBH5)、脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)、YTH结构域蛋白1(YTHDC1)、YTHDC2的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,HIEC-6细胞与MODE-K细胞在LPS诱导的时间依赖与剂量依赖模型中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平增高,并同步上调METTL3和METTL14 mRNA与蛋白水平。结论LPS可以诱导肠上皮细胞出现炎症反应,并上调肠上皮细胞中METTL3和METTL14的表达。 展开更多

关键词 炎症性肠病(IBD) N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A) 甲基转移酶样蛋白3(METTL3) mettl14

原文传递

METTL14介导ACSL4的m6A甲基化在髓核细胞铁死亡和细胞衰老中的作用 被引量：1

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作者 陈特 肖权洲 +1 位作者 孙杨 刘向阳 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第20期31-39,共9页

目的探究METTL14介导ACSL4的m6A甲基化在髓核细胞铁死亡和细胞衰老中的作用。方法采用市售人髓核细胞,利用叔丁基氢过氧化物复制细胞模型,分别复制METTL14过表达和敲除的稳转细胞株。通过分光光度法检测细胞内亚铁离子、MDA、GSH、GPX4... 目的探究METTL14介导ACSL4的m6A甲基化在髓核细胞铁死亡和细胞衰老中的作用。方法采用市售人髓核细胞,利用叔丁基氢过氧化物复制细胞模型,分别复制METTL14过表达和敲除的稳转细胞株。通过分光光度法检测细胞内亚铁离子、MDA、GSH、GPX4水平,流式细胞术检测ROS和细胞线粒体膜电位,采用β-半乳糖苷酶染色评估细胞衰老情况。同时进行了甲基化RNA免疫共沉淀结合实时荧光定量聚合酶链反应(MeRIP-qRT-PCR)和RNA稳定性实验,探究METTL14对ACSL4表达的调控作用。结果METTL14过表达在髓核细胞中导致显著的铁过载(P<0.05)、ROS相对表达量升高(P<0.05)、MDA水平增加(P<0.05),以及GSH与GPX4水平下降(P<0.05),同时降低线粒体膜电位(P<0.05),从而促进了细胞衰老。通过MeRIP-qRT-PCR和RNA稳定性实验发现METTL14调控ACSL4的表达,并影响其mRNA的稳定性。挽救实验进一步证实METTL14通过调控ACSL4促进髓核细胞衰老的机制。结论METTL14通过介导ACSL4的m6A甲基化过程促进髓核细胞的铁死亡和衰老,为深入理解髓核细胞相关疾病的发病机制提供新的视角和治疗靶点。 展开更多

关键词 髓核细胞 铁死亡 细胞衰老 mettl14 ACSL4 m6A甲基化

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METTL14通过促进N^(6)甲基腺嘌呤(m^(6)A)Myc的表达促进宫颈癌细胞的增殖和迁移 被引量：8

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作者 胡尘辰 刘天玥 +3 位作者 徐艺铭 韩晨颖 杨舒雅 杨琨 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期131-137,共7页

目的 探究甲基转移酶样蛋白14(METTL14)基因对宫颈癌细胞增殖和转移能力的影响及其可能的分子机制。方法使用基因表达数据集(GEO)数据库和宫颈癌组织芯片分析宫颈癌组织及癌旁组织的METTL14和Myc表达水平。采用RNA干扰技术(RNAi)沉默HeL... 目的 探究甲基转移酶样蛋白14(METTL14)基因对宫颈癌细胞增殖和转移能力的影响及其可能的分子机制。方法使用基因表达数据集(GEO)数据库和宫颈癌组织芯片分析宫颈癌组织及癌旁组织的METTL14和Myc表达水平。采用RNA干扰技术(RNAi)沉默HeLa和SiHa宫颈癌细胞中METTL14的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)验证沉默效果。敲低METTL14后,CCK-8实验、集落形成实验、 5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验检测细胞增殖和集落形成能力,Transwell^(TM)实验检测细胞迁移能力。Western blot法测定敲低METTL14后METTL14和Myc的蛋白表达水平,甲基化RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(MeRIP-qPCR)检测各组HeLa细胞中N^(6)甲基腺嘌呤(m^(6)A)Myc的表达水平。结果 GEO数据库和宫颈癌组织芯片染色结果显示,METTL14和Myc在宫颈癌组织中的表达显著高于宫颈癌癌旁组织,且METTL14高表达的宫颈癌患者生存期更短。沉默METTL14后能明显抑制宫颈癌HeLa和SiHa细胞的细胞活力、增殖和迁移能力,其作用机制可能与METTL14促进m^(6)A Myc的表达有关。结论 METTL14通过促进m^(6)A Myc的表达促进宫颈癌细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 宫颈癌 甲基转移酶样蛋白14(mettl14) MYC N^(6)甲基腺嘌呤(m^(6)A) 肿瘤细胞增殖 肿瘤细胞迁移

原文传递

METTL14在肝细胞癌中的表达及临床意义 被引量：5

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作者 周腾飞 任子夫 陈超爽 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期567-572,共6页

目的探究RNA甲基转移酶METTL14在肝细胞癌(HCC)中的表达,及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色的方法,检测METTL14在147对肝癌、癌旁肝组织中的表达,根据病理医师的评分,把147例肝癌组织表达分为METTL14高表达组与METTL14低表达组,... 目的探究RNA甲基转移酶METTL14在肝细胞癌(HCC)中的表达,及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色的方法,检测METTL14在147对肝癌、癌旁肝组织中的表达,根据病理医师的评分,把147例肝癌组织表达分为METTL14高表达组与METTL14低表达组,通过卡方检验分析其表达量高低与临床病理指标的相关性;应用Kaplan-Meier方法分析METTL14表达水平与肝癌患者术后预后生存的关系,包括总生存期与无瘤生存期;运用COX回归模型对METTL14表达与肝癌患者术后的总生存期与无瘤生存期进行单因素分析以及多因素分析,以探索METTL14的表达水平是否可作为肝癌患者术后预后的独立预后危险因素。结果与癌旁组织相比,METTL14在HCC组织中表达明显降低(P<0.001);HCC组织中METTL14表达与HCC患者肿瘤大小(P=0.044)及TNM分期(P=0.046)相关;HCC组织中METTL14的低表达与患者的不良预后显著相关,其术后总生存期及无瘤生存期明显缩短(P<0.05),且是影响HCC患者术后总生存期及无瘤生存期的一个独立危险因素。结论 METTL14可能成为一种原发性肝癌切除术后的新的预后指标。 展开更多

关键词 mettl14 肝细胞癌 肝癌切除术 预后

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骨质疏松症大鼠脂肪干细胞成骨能力及Mettl14和Notch1表达的探究 被引量：3

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作者 冯茂耕 杨双林 +3 位作者 罗道文 彭双麟 娄方芝 肖金刚 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期423-429,共7页

目的比较骨质疏松症脂肪干细胞(osteoporosis adipose-derived stem cells,OP-ASCs)和正常脂肪干细胞(control adipose-derived stem cells,Ctrl-ASCs)成骨能力的差异,并探究RNA甲基化转移酶14(methyltransferase-like 14,Mettl14)以及N... 目的比较骨质疏松症脂肪干细胞(osteoporosis adipose-derived stem cells,OP-ASCs)和正常脂肪干细胞(control adipose-derived stem cells,Ctrl-ASCs)成骨能力的差异,并探究RNA甲基化转移酶14(methyltransferase-like 14,Mettl14)以及Notch信号分子1(Notch signaling molecule 1,Notch1)的表达水平。方法去势法(OVX)构建骨质疏松症SD大鼠动物模型(OP组),同时设立对照组(Ctrl组)。Micro-CT、HE和Masson染色鉴定骨质疏松症模型是否构建成功。贴壁法分离培养出OP-ASCs和Ctrl-ASCs。茜素红、阿利辛蓝和油红O染色检测OP-ASCs和Ctrl-ASCs三向分化能力,流式细胞术检测OP-ASCs和Ctrl-ASCs表面抗原CD29、CD44、CD90、CD31、CD34、CD45鉴定脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)。茜素红染色及Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)mRNA和蛋白的表达比较OPASCs和Ctrl-ASCs成骨能力的差异。实时荧光定量PCR、Western blot探究OP-ASCs和Ctrl-ASCs的Mettl14、Notch1在mRNA和蛋白水平上的表达差异。结果Micro-CT、HE和Masson染色显示OP组胫骨较Ctrl组骨小梁数量减少,间距增大,证明OP组建模成功。三向分化及流式细胞检测结果证明成功分离培养ASCs。成骨诱导后,茜素红染色显示OP-ASCs矿化结节较Ctrl-ASCs数量少、分布散在;OP-ASCs中Runx2表达较Ctrl-ASCs低(P<0.05)。OP-ASCs的Mettl14以及Notch1表达较Ctrl-ASCs低(P<0.05)。结论OP-ASCs成骨能力较Ctrl-ASCs低,OP-ASCs的Mettl14表达降低,Notch信号通路受到抑制。为进一步研究OP-ASCs成骨分化过程中Mettl14和Notch1的具体作用机制奠定了基础。 展开更多

关键词 骨质疏松症大鼠 脂肪干细胞 骨向分化 RNA甲基化 mettl14 NOTCH信号通路

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METTL14在非小细胞肺癌中的表达以及预后意义 被引量：5

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作者 徐朝久 赵景胜 +3 位作者 龙剑 丁文信 吴红花 梁静 《临床肺科杂志》 2021年第1期123-127,共5页

目的探讨METTL14在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及与预后之间的相关性。方法收集我院2015年1月-2016年7月收治并行手术切除术的64例NSCLC患者癌变组织(研究组)及相应的癌旁正常组织(对照组),采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测组织中M... 目的探讨METTL14在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达以及与预后之间的相关性。方法收集我院2015年1月-2016年7月收治并行手术切除术的64例NSCLC患者癌变组织(研究组)及相应的癌旁正常组织(对照组),采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测组织中METTL14 mRNA的表达,westernblot检测METTL14蛋白表达。比较两组间METTL14的表达与临床病理特征之间的关系,绘制Kaplan-Meier生存曲线,采用多因素Cox回归模型分析独立预后因素。结果METTL14 mRNA在研究组与对照组中的相对表达量分别为(3.03±1.02)、(1.01±0.04),METTL14蛋白在研究组与对照组中的相对表达量分别为(0.21±0.05)、(0.13±0.03),METTL14 mRNA与蛋白在NSCLC癌变组织中的表达较癌旁正常组织高(P均<0.05);TNMⅢ+Ⅳ级、合并淋巴转移的NSCLC患者METTL14高表达的比例较高(P均<0.05),METTL14高、低表达与患者的年龄、性别、病理类型以及吸烟史无关(P均>0.05),METTL14高、低表达的NSCLC患者中位生存时间分别为23.5、34.5个月,总生存率分别为15.63%、46.88%,METTL14低表达的NSCLC患者预后优于METTL14高表达患者(P均<0.05)。Cox回归模型分析发现METTL14高表达、TNMⅢ+Ⅳ级是影响NSCLC患者生存的独立预后因素(P均<0.05)。结论METTL14在NSCLC组织中高表达,且与患者TNM分级、淋巴转移相关,可能参与了NSCLC的发生发展,提示NSCLC患者预后不良。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 预后 mettl14

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