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MEK5/ERK5在大鼠脊髓损伤修复过程中表达水平动态变化及临床意义 被引量:4
1
作者 谢斌华 王栋 李青 《标记免疫分析与临床》 CAS 2017年第3期317-321,共5页
目的以大鼠为模型观察脊髓损伤修复过程中MEK5/ERK5(mitogen extracellular signal-regulated kinase 5/extracellular signal kinase 5)表达水平变化及临床指导意义。方法将成年健康雄性大鼠随机分为实验组和假手术组,应用western-blot... 目的以大鼠为模型观察脊髓损伤修复过程中MEK5/ERK5(mitogen extracellular signal-regulated kinase 5/extracellular signal kinase 5)表达水平变化及临床指导意义。方法将成年健康雄性大鼠随机分为实验组和假手术组,应用western-blotting蛋白质印迹技术和Real-Time PCR实时荧光定量检测技术分别检测脊髓损伤后1天,3天,7天,14天后MEK5、ERK5两种蛋白及其mRNA表达水平动态变化情况,通过考察P-ERK(phosphorylated extracellular signal kinase 5)表达水平考察ERK5激活情况。结果 RT-PCR显示实验组组MEK5 mRNA和ERK5 mRNA表达水平均随时间呈逐渐增加的动态变化规律,且与假手术组相比表达水平明显增加;Western blotting显示实验组MEK5表达水平随时间先增加后回落,ERK5表达水平随时间逐渐增加,P-ERK表达水平随时间增加。结论 ERK5表达水平与脊髓损伤修复过程呈正相关,ERK5的促组织细胞分裂增殖的功能可能有助于脊髓损伤加速修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 mek5 ERK5 表达水平
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MEK5基因-1118C>T多态性与结直肠癌的关联性研究 被引量:1
2
作者 刁德昌 万进 +5 位作者 王磊 彭俊生 陈志强 王伟 鲜振宇 汪建平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第9期1419-1422,共4页
目的:通过实验探讨MAPK信号通路MEK5基因启动子区多态性与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)易感性的关系。方法:采用病例对照法,收集737例散发性CRC患者(实验组)及703例健康人(对照组)血液DNA,利用TaqMan-MBG荧光探针法检测MEK5基因启... 目的:通过实验探讨MAPK信号通路MEK5基因启动子区多态性与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)易感性的关系。方法:采用病例对照法,收集737例散发性CRC患者(实验组)及703例健康人(对照组)血液DNA,利用TaqMan-MBG荧光探针法检测MEK5基因启动子区多态性并进行流行病学分析。结果:实验组饮酒和吸烟者比例较对照组明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。MEK5基因位点-1118C>T等位基因在CRC患者人群与健康对照中分布无统计学差异(P>0.05)。但在BMI≥24kg/m2的肥胖人群中,-1118C>T突变基因型(CT+TT)较野生型CC有增加CRC风险的趋势(OR=1.42,95%CI=0.97~2.08,P>0.05),-1118C>T突变基因型与饮酒和肥胖存在交互作用,使CRC发病风险增加(OR=1.73和1.19;95%CI=1.24~2.42,1.04~1.37,P<0.01,P<0.05)。结论:饮酒和吸烟是散发性CRC发病的独立危险因素,MEK5基因-1118C>T多态性单独与CRC的发病无显著相关性,但其突变基因型(CT+TT)与饮酒和肥胖两个环境因素在增加CRC风险性上存在交互作用,使CRC发病的风险增加。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 mek5基因 单核苷酸多态性
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三七皂苷Rg1通过调控MEK5/ERK5信号通路改善血管性痴呆大鼠神经损伤及认知功能 被引量:9
3
作者 毛成远 顾应江 +1 位作者 侯小林 钱静 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第4期981-985,共5页
目的:探讨三七皂苷Rg1对血管性痴呆(VD)大鼠神经损伤及认知功能的影响及其机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、尼莫地平(15 mg/kg)阳性对照组及三七皂苷Rg1低(25 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,每组10只。除假手术组... 目的:探讨三七皂苷Rg1对血管性痴呆(VD)大鼠神经损伤及认知功能的影响及其机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为:假手术组、模型组、尼莫地平(15 mg/kg)阳性对照组及三七皂苷Rg1低(25 mg/kg)、高(100 mg/kg)剂量组,每组10只。除假手术组外,其余各组均采用双侧颈总动脉缺血-再灌注法建立血管性痴呆大鼠模型,造模结束后第2天灌胃给药,1次/d,共8 w。采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力;取大鼠海马组织,化学比色法检测海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;ELISA法检测海马组织白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;TUNEL染色检测大鼠海马组织神经元凋亡情况;Western blot分析大鼠海马组织中cleaved-Caspase-3、磷酸化丝裂原激活蛋白激酶5(p-MEK5)、MEK5、磷酸化细胞外信号调节激酶5(p-ERK5)和ERK5等蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠认知能力显著降低,海马组织神经元凋亡率显著升高,海马组织SOD活性及p-MEK5/MEK5、p-ERK5/ERK5水平显著降低,海马组织MDA、IL-1β、TNF-α水平及cleaved-Caspase-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,高剂量三七皂苷Rg1能显著改善VD大鼠认知功能,降低海马神经元凋亡率,提高海马组织SOD活性及p-MEK5/MEK5、p-ERK5/ERK5水平,降低海马组织中MDA、IL-1β、TNF-α水平及cleaved-Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论:三七皂苷Rg1能抑制海马神经元凋亡,改善海马组织炎症和氧化损伤,从而提高VD大鼠认知功能,其机制可能与MEK5/ERK5信号通路激活有关。 展开更多
关键词 三七皂苷RG1 血管性痴呆 mek5/ERK5信号通路 神经损伤
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MEK5α和MEK5β调控Beclin 1启动子
4
作者 刘晓芸 王雷斌 +4 位作者 王庆 张沙沙 赵微苗 贺林 朱洪新 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期563-572,共10页
Beclin 1是哺乳动物自噬相关基因,调控自噬起始和自噬体成熟.在肌肉分化过程中,Beclin 1基因表达上调,自噬增加;此外MEK5-ERK5信号活化并调控成肌细胞分化.因此,在肌肉分化过程中,MEK5-ERK5信号通路可能调控Beclin 1基因表达.目的是阐明... Beclin 1是哺乳动物自噬相关基因,调控自噬起始和自噬体成熟.在肌肉分化过程中,Beclin 1基因表达上调,自噬增加;此外MEK5-ERK5信号活化并调控成肌细胞分化.因此,在肌肉分化过程中,MEK5-ERK5信号通路可能调控Beclin 1基因表达.目的是阐明MEK5对成肌细胞Beclin 1基因启动子活性的调控.将不同长度Beclin 1启动子片段克隆至荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic并转染成肌细胞C2C12.双荧光素酶报告基因检测实验结果显示,含Beclin 1基因起始密码子上游586碱基对DNA片段的载体(p-354)具有强荧光素酶活性.MEK5α显著增加p-354荧光素酶活性,并有剂量依赖性;而MEK5β显著降低p-354荧光素酶活性.MEK5β能够拮抗MEK5α对p-354荧光素酶活性的调控.与MEK5对Beclin 1基因启动子调控结果一致,MEK5αCA上调细胞Beclin 1 mRNA表达,MEK5βDD下调Beclin 1mRNA表达,并且MEK5βDD抑制MEK5αCA对Beclin 1 mRNA表达的促进作用.此外,转录因子CREB家族成员CREB3,CREBP和CREBL1能够显著上调p-354荧光素酶活性.CREB3呈剂量依赖性显著上调p-354荧光素酶活性,并与MEK5α具有协同效应.MEK5α和MEK5β对Beclin 1启动子具有不同调控作用,CREB可能是其下游效应因子. 展开更多
关键词 mek5 Beclin 1 启动子 荧光素酶报告基因
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MEK5基因siRNA重组腺病毒表达载体的构建及其对MEK5的表达抑制 被引量:1
5
作者 解燕川 李文生 黄俏佳 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期506-511,共6页
目的 构建人MEK5基因的小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒表达载体,观察其在胃腺癌SGC7901细胞中对MEK5的表达抑制.方法 设计并合成针对人MEK5基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,以MluⅠ及XhoⅠ克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,将得... 目的 构建人MEK5基因的小干扰RNA(siRNA)重组腺病毒表达载体,观察其在胃腺癌SGC7901细胞中对MEK5的表达抑制.方法 设计并合成针对人MEK5基因3个不同部位siRNA靶点的模板DNA序列,以MluⅠ及XhoⅠ克隆入pRNAT-H1.1/Adeno穿梭载体中,将得到的重组穿梭质粒用PmeⅠ线性化后在大肠埃希菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1进行同源重组.将PacⅠ酶切鉴定正确的重组腺病毒质粒经乙醇沉淀后转染293A细胞,包装得到具有感染能力的pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒.病毒体外转导人胃腺癌SGC7901细胞,Western印迹法检测其对MEK5表达的抑制.结果 经酶切和测序鉴定均证实pAd-MEK5-siRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误.Western印迹检测结果显示pAd-MEK5-siRNA2可抑制MEK5基因的表达,其有效抑制率达75.5 %.结论本研究成功地构建了针对人MEK5基因的siRNA重组腺病毒载体,为进一步深入研究MEK5基因在人胃腺癌细胞中的作用和功能奠定了基础. 展开更多
关键词 腺病毒载体 基因表达与调控 mek5基因
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MEK5蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
6
作者 曹传敏 彭慧 +3 位作者 尹少平 苏松盛 何进达 曾成永 《中国肛肠病杂志》 2016年第2期7-13,共7页
为探讨MEK5蛋白在原发性结直肠癌组织中的表达情况及其临床意义,本研究使用组织芯片技术、免疫组化法检测223例原发性结直肠癌患者癌组织和160例癌旁正常组织中MEK5的表达情况,分析MEK5表达水平与结直肠癌患者临床病理参数及预后的相... 为探讨MEK5蛋白在原发性结直肠癌组织中的表达情况及其临床意义,本研究使用组织芯片技术、免疫组化法检测223例原发性结直肠癌患者癌组织和160例癌旁正常组织中MEK5的表达情况,分析MEK5表达水平与结直肠癌患者临床病理参数及预后的相关性。结果显示,223例癌组织中,MEK5高表达124例(55.6%);160例癌旁正常组织中,MEK5高表达13例(8.1%)。与癌旁正常组织相比,癌组织中MEK5表达水平明显升高(P〈0.05)。Chi—square分析结果显示,MEK5表达与T分期、N分期、M分期、TNM分期及术前血CEA水平均相关,P〈0.05;与性别、年龄、肿瘤位置、分化程度及术前血CA19—9水平状况无明显相关性,P〉0.05。Kaplan—Meier生存分析显示,在结直肠癌组织中MEK5高表达的患者术后总体3年生存率明显低于低表达者(Log—rank检验,P〈0.05)。但是,Cox风险回归模型分析结果显示,MEK5表达强弱不是预测结直肠癌患者术后总体3年生存率的独立影响因子。结果表明,MEK5表达与结直肠癌病理分期密切相关,并可能有助于TNM分期系统更加精确的分期。但MEK5不能作为预测结直肠癌预后的独立分子标记物。 展开更多
关键词 结直肠癌 mek5 免疫组化
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Constitutive activation of AtMEK5,a MAPK kinase,induces salicylic acid- independent cell death in Arabidopsis thaliana
7
作者 LIUHongxia WANGYing ZHOUTianhong SUNYujing LIUGuoqin RENDongtao 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第24期2594-2600,共7页
AtMEK5 DD is an active mutant of AtMEK5, a MAP kinase kinase in Arabidopsis. Induction of AtMEK5 DD expression in transgenic plants leads to activation of 44 and 48 kD MAPKs and causes a rapid cell death. To compare t... AtMEK5 DD is an active mutant of AtMEK5, a MAP kinase kinase in Arabidopsis. Induction of AtMEK5 DD expression in transgenic plants leads to activation of 44 and 48 kD MAPKs and causes a rapid cell death. To compare the cell death induced by the expression of AtMEK5 DD with the HR-cell death induced by avirulence pathogen infection, we analyzed the activation of downstream MAP Kinase and induction of PR genes expression in permanent transgenic Arabidopsis plants. In-gel kinase activity assay revealed that the infection of Pseudomonas syringae DC3000 harboring Avr Rpt2 gene also lead to activation of 44 and 48 kD MAPKs. PAL, PR1 and PR5 were strongly induced in plants undergo- ing HR-cell death caused by the infection of P. syringae DC3000, while only the expression of PR5 was strongly in- duced in transgenic plants expressing AtMEK5 DD protein. NahG protein in AtMEK5 ×NahG plants cannot suppress DD the cell death induced by AtMEK5 . And AtMEK5 DD DD pro- tein expressed AtMEK5 ×NahG plants showed no signifi- DD cant change in salicylic acid (SA) level. All these suggest that the cell death induced by the activation of AtMEK5 is sali- cylic acid-independent. 展开更多
关键词 Atmek5 MAPK致活酶 水杨酸 细胞 病原体 植物 自我保护系统
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不同胎龄胎儿皮肤和增生性瘢痕中细胞外信号调节激酶5及其mapkk基因表达的变化
8
作者 陈伟 付小兵 +5 位作者 葛世丽 周岗 姜笃银 韩冰 孙同柱 盛志勇 《感染.炎症.修复》 2003年第3期149-152,共4页
目的:探讨细胞外信号调节激酶5(extracellular-signal regulated protein kinase 5,erk5)及其上游信号分子 mapkk(mek5)在不同胎龄的胎儿皮肤和不同形成时期的增生性瘢痕中的基因表达变化规律及其可能的生物学意义。方法:用病理学技术... 目的:探讨细胞外信号调节激酶5(extracellular-signal regulated protein kinase 5,erk5)及其上游信号分子 mapkk(mek5)在不同胎龄的胎儿皮肤和不同形成时期的增生性瘢痕中的基因表达变化规律及其可能的生物学意义。方法:用病理学技术检测不同发育时期的皮肤和增生性瘢痕的结构特征后,提取18例不同胎龄(13~32周)的胎儿皮肤、6例少儿皮肤、16例不同发生时期的增生性瘢痕(4个月-11年)和8例正常皮肤组织的总 RNA 后,分离 mRNA,用 RT-PCR 方法检测这2种基因在不同组织中的表达变化特征。结果:erk5和 mek5基因在不同发育阶段的皮肤和增生性瘢痕中都有表达。在早期妊娠胎儿的皮肤中,这2种基因表达较强,随着胎龄的增加,基因表达水平逐渐降低,在少儿皮肤组织中,这两种基因的转录本含量明显减少(P<0.05)。在正常皮肤和不同形成时期的增生性瘢痕中,mek5基因表达水平相近,相互间差异不显著,而 erk5基因在正常皮肤中的表达水平较低,在增殖期和成熟期增生性瘢痕中表达水平明显增强(P<0.01)。结论:erk5与mek5基因在不同发育时期的皮肤组织内都有表达,显示 erk5介导的信号通路可能对皮肤的发生、结构功能的维持以及伤后修复十分重要。在早期妊娠胎儿皮肤中 erk5和 mek5基因的高表达可能是胎儿皮肤组织细胞快速增殖,创面无瘢痕愈合的机制之一,而增生性瘢痕发生和形成也可能与 erks基因表达增强有关。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激酶5 mek5基因 胎儿皮肤 无瘢痕愈合 增生性瘢痕
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蜕皮激素对顺铂诱导小鼠肝损伤的保护作用及机制研究 被引量:1
9
作者 尹倩 袁琴 +1 位作者 陈相宇 蔡晓明 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第2期241-248,共8页
目的:探讨蜕皮激素对顺铂导致小鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:采用昆明小鼠和AML12细胞构建顺铂肝损伤体内及体外模型,应用蜕皮激素对顺铂组进行干预,通过HE染色观察肝脏组织病理形态,ELISA和荧光染色观测细胞内ROS的产生及细胞凋亡,... 目的:探讨蜕皮激素对顺铂导致小鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:采用昆明小鼠和AML12细胞构建顺铂肝损伤体内及体外模型,应用蜕皮激素对顺铂组进行干预,通过HE染色观察肝脏组织病理形态,ELISA和荧光染色观测细胞内ROS的产生及细胞凋亡,RT-qPCR检测组织及细胞内氧化应激、炎症和凋亡相关生物标志物的表达。转录组测序测定其作用靶点,RT-qPCR和Western blot验证靶基因mRNA和蛋白表达。结果:与空白组相比,顺铂组小鼠肝细胞排列疏松,部分细胞轻度肿胀,凋亡细胞数量、血清内ALT、AST、肝细胞内ROS、MDA含量明显增多(P<0.01),GSH-PX、SOD含量明显降低(P<0.01),提示顺铂对肝功能造成明显损伤;与顺铂组相比,蜕皮激素组小鼠肝细胞损伤程度明显减轻,上述各项指标均有不同程度改善,表明其对肝功能具有保护作用。RT-qPCR结果显示,蜕皮激素组NF-κB、TNF-α、IL-1β、Caspase-3、Caspase-9、Hmox1、PI3K、Nqo1 mRNA相对表达量均明显降低,Nrf2 mRNA相对表达量明显升高(P<0.01)。转录组测序及验证实验表明,蜕皮激素通过调控PDK1低表达,Dnmt3b、MEK5高表达,进而保护肝功能。结论:蜕皮激素能够通过炎症、氧化应激和凋亡抑制途径共同作用于肝细胞,并直接影响Dnmt3b、MEK5、PDK1的表达从而可能对顺铂导致的肝损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 蜕皮激素 顺铂 氧化应激 PDK1 DNMT3B mek5
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细胞外信号调节激酶激酶5在肝癌细胞株中的异常表达及其临床意义 被引量:1
10
作者 郑高云 张岩 李进军 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2017年第4期389-393,共5页
目的:分析细胞外信号调节激酶激酶5(MEK5)在肝癌细胞株中的表达水平及其临床意义。方法:使用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法等方法,分别检测肝癌细胞株(HepG2、Huh7)和正常肝细胞株(LO2)中的MEK5表达水平;shRNA转染肝癌细胞致MEK5基因沉默... 目的:分析细胞外信号调节激酶激酶5(MEK5)在肝癌细胞株中的表达水平及其临床意义。方法:使用实时荧光定量PCR和蛋白印迹法等方法,分别检测肝癌细胞株(HepG2、Huh7)和正常肝细胞株(LO2)中的MEK5表达水平;shRNA转染肝癌细胞致MEK5基因沉默后,检测其对MEK5蛋白表达和细胞增值率的影响。通过t检验对各组进行评估。结果:与MEK5在正常肝细胞株中的蛋白表达(0.8765±0.0031)相比,MEK5在肝癌细胞株中过度表达(HepG2:1.7206±0.0031;HuH7:1.1676±0.0053,P<0.01);与MEK5在非特异性shRNA转染的细胞株中的蛋白表达(HepG2:1.5508±0.0029;HuH7:1.2167±0.0033)相比,MEK5特异性shRNA转染后细胞株中的蛋白表达(HepG2:0.5339±0.0031;HuH7:0.4639±0.0013)受到显著抑制(P<0.01)。结论:MEK5在肝癌细胞中过度表达;抑制MEK5的表达后,肝癌细胞生长也受到抑制。 展开更多
关键词 细胞外信号调节激酶激酶5 肝癌细胞株 蛋白表达 基因沉默
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