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shRNA干扰Jurkat细胞株MDM2表达对细胞生物特性的影响 被引量：3
1
作者 朱有凯 林汉良 +3 位作者 顾霞 张萌 吴红阳 许湘 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期347-350,共4页
目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平... 目的研究MDM2基因与白血病细胞生物学特性的关系。方法应用pSilencer4.1CMVneo构建MDM2shRNA表达载体pMDM2shRNA,采用脂质体将载体导入Jurkat细胞,利用G418筛选出稳定表达shRNA细胞后,行RTPCR和Westernblot等技术检测细胞MDM2表达水平、基础生长曲线、细胞周期变化以及UV照射后细胞生长变化。结果发现转染pMDM2shRNA的细胞MDM2mRNA及蛋白质的表达均下降>50%,细胞的生长减慢,出现一定程度的G1～S期阻滞,DNA损伤后细胞恢复较慢。结论MDM2基因表达下降后,可导致细胞增殖减慢以及降低损伤修复的能力;细胞内表达shRNA可长期敲低靶基因的表达,可作为较理想的基因功能研究细胞模型。 展开更多
关键词 JURKAT细胞株 RNA干扰 生物特性 mdm2mrna 细胞生物学特性 Western MDM2基因 RT-PCR 基因功能研究 DNA损伤 shRNA 细胞内表达 方法应用 表达载体 稳定表达 技术检测 blot 生长曲线 生长变化 uV照射 周期变化 基因表达 损伤修复
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MDM2蛋白和MDM2 mRNA在尖锐湿疣中的表达 被引量：1
2
作者 涂亚庭 朱里 刘厚君 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期250-252,共3页
目的研究尖锐湿疣中MDM2蛋白及MDM2mRNA的表达情况,探讨MDM2在尖锐湿疣增殖及癌变中的作用。方法分别采用免疫组化染色及原位杂交方法检测外阴尖锐湿疣和正常人皮肤组织中MDM2蛋白及mRNA的表达情况,同时用PCR法检测人乳头瘤病毒(HPV)型... 目的研究尖锐湿疣中MDM2蛋白及MDM2mRNA的表达情况,探讨MDM2在尖锐湿疣增殖及癌变中的作用。方法分别采用免疫组化染色及原位杂交方法检测外阴尖锐湿疣和正常人皮肤组织中MDM2蛋白及mRNA的表达情况,同时用PCR法检测人乳头瘤病毒(HPV)型别。结果32例外阴尖锐湿疣中MDM2蛋白阳性表达18例(56.25%),MDM2mRNA阳性表达22例(68.75%)。MDM2蛋白与mRNA共同阳性表达14例。PCR检测示尖锐湿疣皮损中HPV6/11型28例(87.5%),HPV16/18型4例(12.5%)。在18例MDM2蛋白阳性表达的标本中,HPV6/11型15例,HPV16/18型3例。在22例MDM2mRNA阳性表达的标本中,HPV6/11型18例,HPV16/18型4例。而正常人皮肤中MDM2蛋白及MDM2mRNA均未见表达。结论MDM2的异常表达可能与尖锐湿疣过度增殖及癌变有关。 展开更多
关键词 MDM2蛋白 mdm2mrna 尖锐湿疣 表达 癌基因 免疫组化 原位杂交法
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