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高迁移率族蛋白B1(HMGB1)促进髓样树突状细胞成熟增加原发免疫性血小板减少症患者Th17细胞/Treg比例
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作者 李芹芝 段东升 +7 位作者 王秀娟 孙明玲 刘颖 王新有 王蕾 范文霞 宋梦婷 郭新红 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期45-50,共6页
目的研究原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对髓样树突状细胞(mDC)及Th17细胞/调节性T细胞(Treg)平衡的调节作用。方法募集30例初诊ITP患者及30例健康对照,采用流式细胞术检测ITP患者及健康对照组外周血... 目的研究原发免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对髓样树突状细胞(mDC)及Th17细胞/调节性T细胞(Treg)平衡的调节作用。方法募集30例初诊ITP患者及30例健康对照,采用流式细胞术检测ITP患者及健康对照组外周血mDC、Th17细胞、Treg比例,ELISA测定血清中HMGB1、白细胞介素6(IL-6)、IL-23、IL-17、转化生长因子β(TGF-β)的含量,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头盒转录因子P3(FOXP3)的mRNA表达,通过Pearson线性相关分析方法分析上述细胞、细胞因子、转录因子及其与血小板之间的相关关系,探究HMGB1对mDC及Th17细胞/Treg平衡的影响。结果与对照组相比,ITP患者组外周血中Th17细胞比例及HMGB1、IL-6、IL-23、IL-17水平及RORγt mRNA表达明显增高,而Treg比例和TGF-β水平降低。ITP患者组mDC比例和FOXP3 mRNA水平变化不明显。mDC的比例与IL-6、IL-23的表达显著正相关;HMGB1的表达与mDC、IL-6、IL-23、RORγt mRNA、IL-17的表达显著正相关;mDC的比例、HMGB1的表达水平与血小板计数呈显著负相关。结论ITP患者外周血中HMGB1的高表达可能通过促进mDC的成熟并增加相关细胞因子的分泌,诱导Th17细胞/Treg失衡,可能参与ITP发病的免疫学机制。 展开更多
关键词 原发免疫性血小板减少症 高迁移率族蛋白B1(HMGB1) 髓样树突状细胞(mdc) TH17细胞 TREG
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芪三酚与人乳腺癌MDC1基因关系的研究
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作者 马冬梅 余畅 +6 位作者 麦力 吴晓彬 汪长东 高月 李海玉 李韵 宋方洲 《热带医学杂志》 CAS 2013年第11期1319-1323,F0003,共6页
目的探讨芪三酚(Res)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制的相关效应及其与MDC1基因的关系。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞株为研究对象,采用MTS方法测定细胞增殖,应用吖啶橙荧光染色观察Res对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,用RT-PCR与免疫... 目的探讨芪三酚(Res)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖抑制的相关效应及其与MDC1基因的关系。方法以人乳腺癌MDA-MB-231细胞株为研究对象,采用MTS方法测定细胞增殖,应用吖啶橙荧光染色观察Res对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,用RT-PCR与免疫印迹方法测定MDC1基因与蛋白表达水平,用小RNA干扰MDC1基因后,用流式细胞仪检测细胞的凋亡并观察其对Res的敏感性影响。结果 40μmol/L以上的Res可显著抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖(P<0.05),给予0、60、120μmol/L Res能明显降低MDC1基因和蛋白的表达(P<0.05)。用小RNA干扰MDC1基因后,流式细胞术分析显示,实验组(MDC1-siRNA)的细胞凋亡率[(45.13±6.2)%]较阴性对照组[(24.34±2.6)%]和未处理组[(17.69±4.9)%]明显上升(P<0.05),MTS结果显示MDC1基因干扰后细胞对Res的敏感性增加。结论40μmol/L以上的Res可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖,Res可以有效降低MDC基因和蛋白的表达并促进细胞的凋亡。用小RNA干扰MDC1基因(MDC1-siRNA)后,MDA-MB-231细胞对Res的敏感性增加。 展开更多
关键词 芪三酚 乳腺癌 mdc1 mdc1-sirna
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靶向沉默人基因MDC1表达对食管癌细胞放射增敏作用的实验研究 被引量:4
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作者 刘志坤 祝淑钗 +4 位作者 苏景伟 王玉祥 杨洁 李娟 沈文斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1830-1834,共5页
目的利用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109细胞MDC1基因表达,观察其对细胞周期和放射敏感性的影响。方法构建MDC1基因的干扰质粒pMDC1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,采用Real-TimePCR和west... 目的利用RNA干扰技术抑制食管癌细胞ECA109细胞MDC1基因表达,观察其对细胞周期和放射敏感性的影响。方法构建MDC1基因的干扰质粒pMDC1-shRNA,与慢病毒包装质粒混合物共同转染293T细胞,收集病毒液,感染ECA109细胞,采用Real-TimePCR和westernblotting测定MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达。采用流式细胞术和克隆形成实验,检测RNA干扰对ECA109细胞放射敏感性的影响。结果成功构建pMDC1-shRNA质粒,转染ECA109细胞,获得稳定转染细胞株ECA109/MDC1,基因MDC1在mRNA水平和蛋白水平的表达均明显降低;5Gy射线照射后12h、24h、48h,ECA109/MDC1的G2/M期比例明显低于阴性对照组和空白对照组;ECA109、ECA109/NEGATIVE、ECA109/MDC1细胞的D0值分别为3.06Gy、2.90Gy、1.88Gy;SF2值分别为0.91、0.89、0.84;Dq值分别为1.59、1.47、1.20,显示ECA109/MDC1的D0值、SF2值、Dq值均明显降低。结论 RNAi技术可以有效地抑制食管癌细胞ECA109中基因MDC1的表达,从而增强ECA109细胞对放射线的敏感性。 展开更多
关键词 mdc1 细胞周期 放射敏感性 RNA干扰
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MDC1对卵巢癌细胞迁移、侵袭与凋亡的影响 被引量:2
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作者 高翔 肖献花 +3 位作者 刘永军 郑磊 李贵梅 于华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1349-1352,1364,共5页
目的:分析MDC1对卵巢癌细胞迁移、侵袭与凋亡的影响,及其可能的作用机制。方法:采集我院2015年8月~2016年10月收治的80例卵巢癌患者临床标本及细胞系人卵巢HO8910PM标本,采用免疫组化分析MDC1与卵巢癌进展预后关系,MTT试验、细胞划痕法... 目的:分析MDC1对卵巢癌细胞迁移、侵袭与凋亡的影响,及其可能的作用机制。方法:采集我院2015年8月~2016年10月收治的80例卵巢癌患者临床标本及细胞系人卵巢HO8910PM标本,采用免疫组化分析MDC1与卵巢癌进展预后关系,MTT试验、细胞划痕法与MDC1小干扰RNA(siRNA)序列研究MDC1对卵巢癌细胞增殖侵袭的影响,流式细胞仪分析细胞周期与凋亡情况。结果:免疫组化检测结果显示,MDC1主要表达在细胞核中;生存曲线分析表明:与MDC1低表达组比较,MDC1高表达组的预后显著较差(P<0.05)。Transwell实验及划痕实验均表明:对照组相比,低表达MDC1的细胞迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明MDC1可促进卵巢癌细胞的增殖与细胞周期的进展(P<0.05)。结论:MDC1的表达水平可能与卵巢癌预后相关,其高表达提示预后差,同时MDC1具有促进卵巢癌迁移、侵袭的作用,并促进卵巢癌细胞增殖与细胞周期的进展。 展开更多
关键词 mdc1 卵巢癌 迁移侵袭 凋亡
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MDC1和MMR蛋白在子宫内膜癌中的表达及临床意义 被引量:7
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作者 沙仁高娃 王睿 +1 位作者 陈华 郭桂兰 《临床和实验医学杂志》 2022年第20期2201-2204,共4页
目的探讨子宫内膜癌中DNA损伤检查点蛋白调节子1(MDC1)和DNA错配修复(MMR)蛋白表达及其临床意义。方法回顾性选取2020年2月至2021年2月青海大学附属医院妇科收治的子宫内膜癌患者100例,采用免疫组织化学染色法检测MDC1和MMR蛋白表达情况... 目的探讨子宫内膜癌中DNA损伤检查点蛋白调节子1(MDC1)和DNA错配修复(MMR)蛋白表达及其临床意义。方法回顾性选取2020年2月至2021年2月青海大学附属医院妇科收治的子宫内膜癌患者100例,采用免疫组织化学染色法检测MDC1和MMR蛋白表达情况,分析MDC1和MMR蛋白表达与临床病理特征的相关性,并分析MDC1与MMR蛋白表达的相关性。结果100例患者中,MDC1阳性90例,阴性10例,MDC1阳性率为90.00%,MDC1阳性患者的年龄高于阴性患者,子宫内膜样腺癌比率低于阴性患者,组织学分级1~2级比率低于阴性患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。MMR表达完整(MMR-p)80例,MMR表达缺失(MMR-d)20例,分别占总数的80.00%、20.00%,MMR-p患者的年龄高于MMR-d患者,子宫内膜样腺癌比率、组织学分级1~2级比率均低于MMR-d患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。MDC1阳性/MMR-p 78例,MDC1阳性/MMR-d 10例,MDC1阴性/MMR-p 2例,MDC1阴性/MMR-d 10例,分别占总数的78.00%、10.00%、2.00%、10.00%,年龄逐渐降低,组织学类型、组织学分级之间的差异均有统计学意义(P<0.05)。MDC1阳性90例中,强阳性表达65例,弱阳性表达25例,分别占72.22%、27.78%,强阳性表达患者的子宫内膜样腺癌比率低于弱阳性表达患者,非子宫内膜样腺癌比率高于弱阳性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。MMR-d 20例中,PMS2阴性5例,MSH6阴性3例,MLH1和PMS2阴性9例,MSH2和PMS2阴性1例,MSH2和MSH6阴性2例,分别占25.00%、15.00%、45.00%、5.00%、10.00%。MDC1阴性表达和MMR-d呈显著正相关(r=0.562,P<0.05)。结论MDC1和MMR蛋白主要失表达于低级别子宫内膜癌中,这就为临床鉴别诊断与针对性治疗子宫内膜癌提供了有效依据。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 mdc1 MMR 临床病理特征
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^(60)Co照射对食管癌细胞周期相关蛋白MDC1和53BP1表达的影响 被引量:1
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作者 刘志坤 祝淑钗 +4 位作者 杨洁 苏景伟 沈文斌 李娟 王玉祥 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期869-872,共4页
目的观察60Co照射后体外培养的食管癌细胞株TE-13和ECA109细胞中MDC1和53BP1蛋白表达、ECA109细胞核内MDC1和53BP1斑点数量的变化,探讨放射线对食管癌细胞中相关蛋白表达的影响。方法 Western blot检测照射后细胞中MDC1和53BP1蛋白表达... 目的观察60Co照射后体外培养的食管癌细胞株TE-13和ECA109细胞中MDC1和53BP1蛋白表达、ECA109细胞核内MDC1和53BP1斑点数量的变化,探讨放射线对食管癌细胞中相关蛋白表达的影响。方法 Western blot检测照射后细胞中MDC1和53BP1蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察放射线照射后食管癌细胞ECA109中MDC1和53BP1细胞核内斑点数量的变化。结果 0、1、2、5、10Gy照射后1、2、24h,TE-13和ECA109细胞MDC1和53BP1蛋白表达未见明显变化(P>0.05);细胞接受不同剂量放射线照射后1h,MDC1和53BP1核内斑点的数量呈现明显剂量依赖性,与对照组(0Gy组)相比,差异具有统计学意义(P<0.05);同时发现4Gy放射线照射后30min(MDC1)~1h(53BP1)细胞核内斑点的数量最多,分别为26.3和36.7个,其后斑点的数量逐渐下降,与对照组(0Gy组)相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论单纯放射线照射未发现食管癌细胞中MDC1和53BP1蛋白表达发生明显变化,但两种蛋白在细胞核内斑点的数量与剂量和照射后时间存在明显的量效关系。 展开更多
关键词 食管癌 电离辐射 mdc1 53BP1
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沉默H2AX食管癌ECA109中MDC1和53BP1斑点的变化 被引量:2
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作者 史鸿云 祝淑钗 +1 位作者 刘志坤 苏景伟 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第7期808-813,共6页
目的探讨沉默H2AX后在食管高分化鳞状细胞癌ECA109细胞中应答电离辐射时对MDC1和53BP1的影响。方法构建沉默H2AX的慢病毒载体,将慢病毒转染食管癌ECA109细胞并检测转染后的沉默效用;免疫荧光检测r-H2AX、MDC1和53BP1核内斑点的情况以及... 目的探讨沉默H2AX后在食管高分化鳞状细胞癌ECA109细胞中应答电离辐射时对MDC1和53BP1的影响。方法构建沉默H2AX的慢病毒载体,将慢病毒转染食管癌ECA109细胞并检测转染后的沉默效用;免疫荧光检测r-H2AX、MDC1和53BP1核内斑点的情况以及用Western blot检测这几种蛋白的表达。结果 1)成功构建了沉默H2AX的ECA109细胞。2)电离辐射可引起r-H2AX表达量的增加,不引起MDC1和53BP1表达的增加,同时电离辐射诱导产生的r-H2AX、MDC1和53BP1核内斑点变化的规律一致。3)沉默H2AX后的ECA109细胞核内r-H2AX、MDC1和53BP1斑点的数量明显减少,尽管MDC1和53BP1蛋白表达无变化。结论在ECA109细胞中H2AX是电离辐射后比较早的反应蛋白,可以调节下游MDC1和53BP1斑点的位置。 展开更多
关键词 食管癌 r-H2AX mdc1 53BP1 核内斑点
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人MDC1基因shRNA反转录病毒载体的构建及鉴定 被引量:1
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作者 袁成福 黄秀凝 +5 位作者 程莉 卜友泉 刘涛 刘革力 易发平 宋方洲 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期441-444,共4页
目的建立反转录病毒介导的MDC1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌细胞(HeLa)中对MDC1表达的影响。方法将人MDC1基因的RNA干扰双链DNA片段重组到反转录病毒质粒pSilencer5.1-H1Retro中,构建携带人MDC1基因的RNA干扰反转录病毒载体psiR... 目的建立反转录病毒介导的MDC1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌细胞(HeLa)中对MDC1表达的影响。方法将人MDC1基因的RNA干扰双链DNA片段重组到反转录病毒质粒pSilencer5.1-H1Retro中,构建携带人MDC1基因的RNA干扰反转录病毒载体psiRNA-MDC1。经PT67细胞包装后,产生的重组反转录病毒感染宫颈癌细胞株HeLa细胞,并用嘌呤霉素筛选稳定的细胞克隆。采用RT-PCR和Western blotting检测细胞中MDC1mRNA和蛋白表达的变化。结果重组psiRNA-MDC1质粒经测序鉴定正确;重组反转录病毒感染HeLa细胞后用嘌呤霉素筛选出稳定的细胞克隆;RT-PCR和Western blotting检测人MDC1mRNA和蛋白表达水平明显低于阴性对照组和未干扰组。结论携带人MDC1基因RNA干扰双链DNA片段的反转录病毒感染HeLa细胞后能明显抑制MDC1mRNA和蛋白表达,为进一步研究MDC1在宫颈癌中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 psiRNA-mdc1反转录病毒载体 mdc1基因 宫颈癌
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电离辐射对食管癌细胞周期及MDC1、53BP1蛋白表达的影响 被引量:1
9
作者 祝淑钗 刘志坤 +1 位作者 王玉祥 杨洁 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期381-385,共5页
目的观察60Coγ射线照射后食管癌细胞周期、细胞凋亡及其相关蛋白表达的变化,为食管癌放射治疗、靶向治疗提供理论依据。方法食管癌细胞株TE-13进行不同剂量(0、1、2、5、10、15Gy)照射后,应用流式细胞术分别检测照射后1、2、12、24和48... 目的观察60Coγ射线照射后食管癌细胞周期、细胞凋亡及其相关蛋白表达的变化,为食管癌放射治疗、靶向治疗提供理论依据。方法食管癌细胞株TE-13进行不同剂量(0、1、2、5、10、15Gy)照射后,应用流式细胞术分别检测照射后1、2、12、24和48h细胞周期和凋亡指数的变化;同时采用Western blot方法检测MDC1和53BP1蛋白表达情况。结果TE-13细胞照射后12、24、48h,TE-13细胞的G0/G1期、G2/M期和S期的变化呈现明显剂量依赖性,1Gy和2Gy照射后12h,细胞G2/M期阻滞开始出现;5、10、15Gy照射后24h,细胞G2/M期阻滞最为明显,与对照组(0Gy组)相比,差异具有统计学意义(P<0.05);15Gy照射后12h、24、48h,TE-13细胞的凋亡增加非常显著(P<0.01);不同剂量照射后1、2、24h,TE-13细胞MDC1和53BP1蛋白表达未见明显变化(P>0.05)。结论TE-13细胞经不同剂量放射线照射后,细胞周期出现明显的G2/M期阻滞,细胞凋亡指数明显增加,但对MDC1和53BP1蛋白表达未见明显影响。 展开更多
关键词 电离辐射 食管癌 细胞周期 凋亡 mdc1 53BP1
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转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和OPN、TGF-β1、PCNA表达的影响 被引量:2
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作者 徐健 冯丰 +3 位作者 刘闺男 王泰然 张希 都晓沫 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期1107-1112,共6页
目的观察经动脉外膜转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子β1(TGF-β1)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法通过前期细胞实验筛选出最敏感的OPN-002-siRNA序列作为动物实验转染基因。72只... 目的观察经动脉外膜转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子β1(TGF-β1)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法通过前期细胞实验筛选出最敏感的OPN-002-siRNA序列作为动物实验转染基因。72只Wistar大鼠,随机分为假手术组、球囊损伤组、OPN-SCR-siRNA转染组和OPN-002-siRNA转染组。用免疫荧光、HE染色、real-time RT-PCR和Western blot观察大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生情况和OPN、TGF-β1及PCNA的表达变化,以及OPN-002-siRNA对它们的影响。结果 (1)球囊损伤术后3天未见明显的新生内膜,7天内膜开始增厚,14天时内膜增厚显著。(2)OPN、TGF-β1 mRNA和蛋白水平于术后3、7、14天时持续升高,而PCNA mRNA和蛋白水平均于术后3天开始升高,7天达高峰,14天时下降。(3)与球囊损伤组、OPN-SCR-siRNA转染组比较,OPN-002-siRNA转染组在各个时间点新生内膜厚度明显减轻(P<0.001),OPN、TGF-β1、PCNA mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.001)。结论 OPN-002-siRNA可能通过特异性抑制OPN、TGF-β1、PCNA的表达,从而减轻血管损伤后的内膜增生。 展开更多
关键词 OPN-002-sirna 血管损伤 内膜增生 骨桥蛋白 转化生长因子β1 增殖细胞核抗原 转染 大鼠
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rH2AX与MDC1特异性的结合在DNA损伤应答中的作用
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作者 史鸿云 祝淑钗 +2 位作者 李志刚 张桂萍 张敬欣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1494-1498,共5页
0引言细胞周期检测点非常严格地检测DNA的损伤,并且延迟细胞周期进程而给DNA修复留出时间。如果损伤太剧烈,它们可以触发细胞死亡。越来越多的证据显示DNA检测点内的任何缺陷都可能导致遗传的不稳定性,如肿瘤细胞就是这样产生的。
关键词 DNA损伤应答 DNA双链损伤 H2AX mdc1
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CIB1-siRNA对大鼠脑缺血-再灌注损伤后凋亡相关蛋白Caspase-3表达影响
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作者 殷玉华 贾锋 +3 位作者 王宇 高卫真 熊文浩 江基尧 《昆明医学院学报》 2010年第10期37-40,共4页
目的探讨钙离子结合蛋白(calcium and integrin-binding protein,CIB1)双链RNA(CIB1.siRNA)对大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用.方法 SD大鼠120只,体重290~310 g,随机分成三组:假手术组(S组,n=40)、局灶性脑缺血-再灌注组(A组,n=40)、局灶... 目的探讨钙离子结合蛋白(calcium and integrin-binding protein,CIB1)双链RNA(CIB1.siRNA)对大鼠脑缺血-再灌注损伤的作用.方法 SD大鼠120只,体重290~310 g,随机分成三组:假手术组(S组,n=40)、局灶性脑缺血-再灌注组(A组,n=40)、局灶性脑缺血-再灌注+CIB1-siRNA组(B组,n=40).A组、B组行大脑中动脉阻断,阻断1 h再开放,制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型,B组在缺血前即刻、16、24 h水压法尾静脉注射CIB1-siRNA 2.5 mg/kg(用PBS稀释至10 mL),S组给予等量PBS,S组只作切口,不作缺血再灌注.S组、B组、A组分别于再灌注1、5、11、23、47 h各处死8只大鼠,断头取脑,计算脑梗塞体积比,用RT-PCR法测定脑缺血半影区Caspase-3 mRNA表达水平.结果 B组、A组再灌注23 h时脑梗塞体积比达到高峰,再灌注47 h时B组、A组脑梗塞体积比均高于S组(P<0.01);与A组比较,B组脑梗塞体积比增加(P<0.01).A组和B组再灌注23 h时Caspase-3表达高峰,B组各时间段Caspase-3表达强于A组.结论 CIB1-siRNA预先给药可加重大鼠脑缺血-再灌注损伤. 展开更多
关键词 CIB1-sirna 大鼠 缺血-再灌注损伤
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Rac1-siRNA抑制大鼠视网膜VEGF表达的实验研究
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作者 张美霞 李娟娟 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第8期568-570,共3页
目的观察Rac1-siRNA重组载体对大鼠视网膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的抑制作用。方法将25只成年SD大鼠,采用光动力法诱导双眼视网膜静脉阻塞后,1只眼玻璃体腔转染Rac1-siRNA重组载体作为基因干预组,另1只眼注射空白载体作为空白... 目的观察Rac1-siRNA重组载体对大鼠视网膜血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的抑制作用。方法将25只成年SD大鼠,采用光动力法诱导双眼视网膜静脉阻塞后,1只眼玻璃体腔转染Rac1-siRNA重组载体作为基因干预组,另1只眼注射空白载体作为空白对照组。25只正常SD大鼠单眼玻璃体腔内转染Rac1-siRNA重组载体作为空白干预组。免疫组织化学法和RT-PCR法检测各组大鼠视网膜VEGF的表达情况。结果VEGF在基因干预组和空白对照组中与空白干预组相比表达较强,空白对照组最强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Rac1-siRNA重组载体能有效抑制视网膜内VEGF的表达。 展开更多
关键词 Rac1-sirna 血管内皮细胞生长因子 免疫组织化学 RT-PCR
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抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响 被引量:3
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作者 尤胜 宋歌 +1 位作者 李文瑶 鄂颖 《临床和实验医学杂志》 2019年第6期576-580,共5页
目的分析抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响。方法取54只SPF级BALB/C雄性裸鼠,构建食管癌动物模型。通过MDC1 mRNA序列,对有效的干扰序列与阴性对照序列进行设计并合成,且与载体p SIH1-H1-cop GFP生... 目的分析抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响。方法取54只SPF级BALB/C雄性裸鼠,构建食管癌动物模型。通过MDC1 mRNA序列,对有效的干扰序列与阴性对照序列进行设计并合成,且与载体p SIH1-H1-cop GFP生成重组质粒。裸鼠随机分为6组,分别为空白对照组(Eca109细胞未进行任何处理)、阴性转染组(转染阴性Eca109细胞)、单一照射组(Eca109细胞仅进行放射线照射)、阳性转染组(转染阳性ECA09细胞)、阴性转染+照射组(转染阴性Eca109细胞联合放射线照射)、阳性转染+照射组(转染阳性ECA09细胞联合放射线照射),每组各9只。采用蛋白印迹法与实时荧光定量PCR法对MDC1蛋白及mRNA表达量进行检测,取MDC1阳性转染Eca109细胞、阴性转染的Eca109细胞,分别将其接种于裸鼠。记录各组裸鼠移植瘤照射后1周、2周、3周、4周的体积变化情况,并用流式细胞仪对裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡情况进行检测,且根据蛋白印迹法对各组裸鼠移植瘤组织中CHK2、CHK2-T68、CHK1表达情况进行检测,并将所得数据纳入统计学分析。结果p MDC1-shRNA质粒成功构建,且Eca109细胞得以转染,取得MDC1稳定转染的Eca109细胞。接种的裸鼠均成活,且于接种后7 d左右裸鼠爪下移植瘤形成。经15 Gy照射后,单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较空白对照组明显减缓(P <0. 05),阳性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较其它各组均明显减缓(P <0. 05),生长抑制率明显增高(P <0. 05)。照射前,各组裸鼠移植瘤体积的比较,并无显著差异(P> 0. 05);照射后1周、2周、3周、4周,空白对照组裸鼠移植瘤增长较明显,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤增长较缓慢,与单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤体积明显缩小(P <0. 05)。各组裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡率的比较,并无显著差异(P> 0. 05)。与对照组、单一照射组比较,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤组织中CHK2-T68磷酸化水平显著下降(P <0. 05),而CHK2与CHK1蛋白表达水平较接近(P> 0. 05)。结论 RNA干扰下调MDC1基因蛋白表达具有提高裸鼠食管癌细胞放疗敏感程度的作用,主要体现在阻滞放射线照射后裸鼠移植瘤的肿瘤体积增长方面。 展开更多
关键词 裸鼠 食管癌 移植瘤 mdc1基因 放疗
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MDC1蛋白在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义 被引量:1
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作者 张晓颖 何园 +1 位作者 王丽珍 刘宏伟 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2008年第3期158-160,共3页
目的:探讨口腔鳞状细胞癌中MDC1(mediator of DNA damage checkpoint protein 1)蛋白的表达水平及意义。方法:采用免疫组织化学Envision法检测10例正常口腔黏膜、60例口腔鳞状细胞癌中MDC1的表达水平,并分析其与临床病理参数之间的关系... 目的:探讨口腔鳞状细胞癌中MDC1(mediator of DNA damage checkpoint protein 1)蛋白的表达水平及意义。方法:采用免疫组织化学Envision法检测10例正常口腔黏膜、60例口腔鳞状细胞癌中MDC1的表达水平,并分析其与临床病理参数之间的关系。结果:MDC1蛋白在口腔鳞状细胞癌中表达高于正常口腔黏膜,两者之间差异有统计学意义(P=0.042),而且MDC1蛋白的表达升高与淋巴结转移有关(P=0.033),但与病理分级(P=0.986)、患者的年龄(P=0.723)、性别(P=0.142)无关。结论:MDC1蛋白在口腔鳞状细胞癌中表达增高,提示它可能在肿瘤的发生和发展中具有一定的作用,为进一步理解细胞DNA损伤与肿瘤发生的关系提供了依据。 展开更多
关键词 mdc1蛋白 口腔鳞状细胞癌 免疫组织化学
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新型电荷反转型阳离子载体与BCSG1-siRNA纳米粒靶向治疗Luminal B型乳腺癌 被引量:1
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作者 杨琛擘 曹明卓 +1 位作者 刘明阁 申培红 《河南医学研究》 CAS 2020年第15期2878-2880,共3页
2020年美国癌症协会发布肿瘤统计报告,女性中最常见的癌症是乳腺癌、肺癌和结直肠癌,占新发病例数过半,其中乳腺癌独占新发病例数的30%[1]。LuminalB型乳腺癌是乳腺癌分子分型中最常见的亚型,占47.7%~52.8%[2-3]。LuminalB型乳腺癌发病... 2020年美国癌症协会发布肿瘤统计报告,女性中最常见的癌症是乳腺癌、肺癌和结直肠癌,占新发病例数过半,其中乳腺癌独占新发病例数的30%[1]。LuminalB型乳腺癌是乳腺癌分子分型中最常见的亚型,占47.7%~52.8%[2-3]。LuminalB型乳腺癌发病率高,激素受体低表达,增殖指数Ki67高表达,与LuminalA型乳腺癌比较,内分泌治疗效果差、往往预后不良[4]。 展开更多
关键词 LUMINAL B型乳腺癌 乳腺癌特异性基因 BCSG1-sirna 新型电荷反转型阳离子聚合物 靶向治疗
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MDC1、53BP1和BRCA1在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
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作者 张娜 李平 喻姗姗 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第8期1275-1277,共3页
目的:探讨喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cellcar cinoma,LSCC)中MDC1、53BP1和BRCA1三种蛋白的表达及临床意义。方法:选取65例LSCC和25例瘤周组织,采用免疫组化S-P法检测MDC1、53BP1和BRCA1的表达并分析与临床病理的关系。结果:MDC1... 目的:探讨喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cellcar cinoma,LSCC)中MDC1、53BP1和BRCA1三种蛋白的表达及临床意义。方法:选取65例LSCC和25例瘤周组织,采用免疫组化S-P法检测MDC1、53BP1和BRCA1的表达并分析与临床病理的关系。结果:MDC1、53BP1和BRCA1的阳性表达率分别为80.0%、50.8%、56.9%,与瘤周组织比较,MDC1表达升高,53BP1和BRCA1表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。三种蛋白的表达与性别、年龄、吸烟、肿瘤分布部位无关,MDC1的表达与淋巴结转移有关,53BP1、BRCA1的表达与T分期,淋巴结转移相关,BRCA1与肿瘤分级程度相关。结论:MDC1、53BP1、BRCA1在LSCC中均有表达,并与肿瘤T分期,分化及淋巴结转移相关,提示三种蛋白在肿瘤的发生发展中有一定作用。 展开更多
关键词 喉肿瘤 mdc1 53BP1 BRCA1 鳞状细胞癌 免疫组织化学
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CD47-siRNA通过调控ROS诱导食管癌细胞SEG-1凋亡 被引量:1
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作者 吴兵 李世升 +2 位作者 肖商荣 马书元 张亚飞 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第11期2061-2065,共5页
目的:探讨CD47-siRNA对食管癌细胞SEG-1凋亡的影响及其机制研究。方法:Western blot法检测食管癌细胞SEG-1中CD47蛋白、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;CCK-8法检测食管癌细胞SEG-1细胞活力;DCFDA细胞ROS检测试剂盒检测食管癌细... 目的:探讨CD47-siRNA对食管癌细胞SEG-1凋亡的影响及其机制研究。方法:Western blot法检测食管癌细胞SEG-1中CD47蛋白、促凋亡蛋白Bax和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;CCK-8法检测食管癌细胞SEG-1细胞活力;DCFDA细胞ROS检测试剂盒检测食管癌细胞SEG-1中ROS水平。结果:CD47-siRNA转染组食管癌细胞SEG-1中CD47蛋白明显低于空载对照组(P<0.05);CD47-siRNA转染组食管癌细胞SEG-1细胞活力显著低于空载对照组(P<0.05);CD47-siRNA转染组食管癌细胞SEG-1中促凋亡蛋白Bax表达显著高于空载对照组(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达低于空载对照组(P<0.05);CD47-siRNA转染食管癌细胞SEG-1组ROS水平明显高于空载对照组(P<0.05);与CD47-siRNA转染组比较,CAT (ROS抑制剂,5 m M/L, 6 h)预处理增加了细胞活力;与CD47-siRNA转染组比较,CAT (ROS抑制剂,5 m M/L, 6 h)预处理显著降低食管癌细胞SEG-1中Bax蛋白表达以及增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达。结论:CD47-siRNA转染通过上调食管癌细胞SEG-1内ROS水平促进食管癌细胞SEG-1凋亡。 展开更多
关键词 CD47-sirna转染 食管癌细胞SEG-1 凋亡 活性氧簇
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利多卡因上调MDC1-AS对膀胱癌细胞T24凋亡、迁移侵袭的影响 被引量:1
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作者 丁志刚 《中国医院用药评价与分析》 2021年第4期395-400,共6页
目的:探讨利多卡因对膀胱癌细胞T24凋亡、迁移侵袭的影响及其机制。方法:分别通过流式细胞术、Transwell实验分析利多卡因(1.25、2.5及5 mg/ml)对T24细胞凋亡、迁移和侵袭的影响,以正常培养的T24细胞作为对照。实时定量聚合酶链反应分析... 目的:探讨利多卡因对膀胱癌细胞T24凋亡、迁移侵袭的影响及其机制。方法:分别通过流式细胞术、Transwell实验分析利多卡因(1.25、2.5及5 mg/ml)对T24细胞凋亡、迁移和侵袭的影响,以正常培养的T24细胞作为对照。实时定量聚合酶链反应分析DNA损伤检测点介质1反义RNA(MDC1-AS)表达量。分析过表达MDC1-AS对T24细胞凋亡、迁移和侵袭的影响,转染MDC1-AS过表达质粒(pcDNA-MDC1-AS)及其对照(pcDNA)、MDC1-AS小干扰RNA(si-MDC1-AS)及其对照(si-NC)至T24细胞,用含5 mg/ml利多卡因的培养液孵育转染si-NC、si-MDC1-AS的T24细胞2 h,分别记为利多卡因5 mg/ml+si-NC组、利多卡因5 mg/ml+si-MDC1-AS组。结果:与对照组比较,2.5、5 mg/ml的利多卡因干预后T24细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达量显著降低,迁移和侵袭细胞数显著减少,MDC1-AS表达量显著升高,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA组比较,pcDNA-MDC1-AS组T24细胞中MDC1-AS表达量显著升高,细胞凋亡率、Bax蛋白表达量显著升高,迁移和侵袭细胞数、Bcl-2蛋白表达量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与利多卡因5 mg/ml+si-NC组比较,利多卡因5 mg/ml+si-MDC1-AS组T24细胞中MDC1-AS表达量显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白表达量显著降低,迁移和侵袭细胞数、Bcl-2蛋白表达量显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:利多卡因通过上调MDC1-AS表达从而抑制膀胱癌细胞T24迁移和侵袭,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 利多卡因 mdc1-AS 膀胱癌 细胞凋亡 迁移 侵袭
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